Veterinary compositions for the prevention and / or treatment of cryptosporidiosis

Abstract

The invention relates to a veterinary composition comprising paromomycin or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the prevention and / or treatment of cryptosporidiosis in a non-human mammal, wherein the composition is administered to said non-human mammal at a paromomycin dose of 80 to 140 mg / kg / day for 3 to 6 days.

Description

5 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 1 COMPOSITIONS VETERINAIRES POUR PREVENIR ET / OU TRAITER LA CRYPTOSPORIDIOSE OBJET DE L'INVENTION La presente invention concerne le domaine veterinaire et, plus particulierement, !'utilisation de compositions antibiotiques pour traiter la cryptosporidiose chez les mammiferes non-humains, de preference chez les jeunes bovins. 10 ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIOUE DE L'INVENTION La cryptosporidiose est une affection zoonotique, cosmopolite due a un protozoaire du genre Cryptosporidium, dont !'importance medicale et economique est majeure. En effet, Cryptosporidium est un parasite a tres large distribution, avec de grandes capacites de 15 multiplication et de dissemination. 11 contamine les mammiferes, les reptiles, les oiseaux, et les poissons essentiellement via un contact direct avec de l'eau, des animaux ou des aliments infectes. Cryptosporidium parvum est 1' espece zoonotique la plus repandue et est responsable d'infections chez la plupart des mammiferes dont les ruminants, ainsi que de la majorite des contaminations par l'eau. Les ruminants sont la principale source de 20 contamination pour l'Homme. La cryptosporidiose presente done un enjeu majeur de sante publique mondiale. Estimee responsable de 30-50% des deces des enfants de moins de cinq ans, la cryptosporidiose est consideree comme la seconde cause majeure de diarrhee et de mort chez les enfants, 25 apres le rotavirus. Des etudes rapportent des sequelles du developpement cognitif et physique chez des enfants de cinq ans apres avoir eu la cryptosporidiose. Chez les animaux de rente, le parasite intestinal Cryptosporidium et la maladie qui en est associee, a savoir la cryptosporidiose, sont responsables de severes troubles digestifs et 30 sont a 1' origine de pertes economiques importantes (morbidite elevee, retards de croissance, frais veterinaires, temps de travail supplementaire ). 11 est estime en Europe CA 3148720 Date reçue / Received date 2024-07-02 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 2 que la cryptosporidiose touche 20 a 40 % des jeunes veaux dans Jes 2-3 premieres semaines de vie. L'expression clinique de la cryptosporidiose est non specifique, mais se developpe avant 5 21 jours d'age. Elle se caracterise par une diarrhee aigue plus ou moins intense, une deshydratation, une lethargie, une anorexie et une douleur abdominale. Une perte de poids, un retard de croissance et de la fievre sont egalement observes. L' excretion des oocystes debute vers le 4eme jour de vie, puis presente un pie entre le 7eme et le 18eme jour avant de diminuer ensuite. Plus la dose infectante d'oocystes est importante et precoce, 10 plus l'excretion des oocystes et la diarrhee seront importantes et tongues. Une correlation est demontree entre, d'une part ]' excretion d'oocystes et la diarrhee, et d'autre part entre le taux de mortalite a 90 jours et une diarrhee severe associee a une forte excretion. La transmission et ]'extension rapide de la maladie sont assurees par les oocystes, tres resistants dans leur environnement. 15 Devant ce fleau, divers traitements impliquant de nombreuses molecules ont ete testees pour leur efficacite contre la cryptosporidiose. Par exemple, plusieurs etudes ont demontre l'efficacite du lasalocide contre la cryptosporidiose chez le veau. Cependant, la dose minimale efficace (3 mg / kg / jour) est tres proche de la dose toxique (5 mg / kg / jour). 20 Son indice therapeutique est tres mediocre et son utilisation est a l' origine d'effets secondaires frequents et severes (anorexie, tachycardie, tachypnee, anorexie, paralysie et mort). Cette toxicite et cette dangerosite, plus marquees encore chez les veaux de moins de 7 jours, reduisent done !'utilisation pratique de cette molecule. Le nitazoxanide, molecule de la famille des thiazolides, a aussi a temoigne de son efficacite contre Jes 25 cryptosporidies du veau. En revanche, ii a aussi ete observe une persistance de la diarrhee frequente, et de nombreux effets secondaires et parfois meme une forte mortalite associee aux traitements a base de nitazoxanide. II est suppose que ces effets secondaires seraient dus a l'action de la molecule sur la flore bacterienne commensale. Au vu de ces effets, !'utilisation de cette molecule n' est pas recommandee chez les animaux de rente. 30 Certains se sont egalement interesse a deux autres molecules, le lactate d' halofuginone, derive de la famille des quinazolinones, et la paromomycine, en CA 3148720 Date reçue / Received date 2024-07-02 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 3 comparant leur efficacite dans le traitement de veaux naturellement infectes avec C,yptosporidium parvum. Plus particulierement, il a ete montre une efficacite therapeutique d'une dose de lactate d'halofuginone a l 00 μg / kg / jour pendant 7 jours et d'une dose de sulfate de paromomycine a 100 mg / kg / jour, correspondant a une dose de 5 paromomycine a 70 mg / kg / jour (Gabbrocol®), pendant 7 jours. Toutefois, ces molecules aux doses testees ne sont pas en mesure d'eliminer completement !'infection et seraient done plut6t adaptees a des visees prophylactiques. En outre, ces traitements continus d'une periode longue d'au minimum 7 jours sont relativement contraignants dans leur application pour le veterinaire ou I' eleveur, et peuvent aussi laisser apparaitre des 10 problemes de resistance. Malgre certains resultats prometteurs, il n' existe ace jour aucun traitement capable de contr6ler durablement les signes cliniques et ]'infection parasitaire. L'utilisation de certaines drogues peut permettre la diminution de I' excretion des oocystes et des signes 15 cliniques sans pour autant eradiquer totalement le parasite. En outre, I 'infection parasitaire est tres souvent correlee d'une perte de poids significative dommageable sur ]'impact nutritionnel et la croissance des animaux de rente. Ainsi, ii persiste aujourd'hui un besoin de developper de nouveaux traitement efficaces 20 et non resistants permettant a la fois de traiter la cryptosporidiose et d'ameliorer les signes cliniques lies a cette maladie parasitaire. RESUME DE L'INVENTION 25 Dans ce contexte, les inventeurs ont propose un nouveau traitement plus efficace pour prevenir et / ou traiter la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain. Plus precisement, Jes inventeurs ont demontre qu'une utilisation de sulfate de paromomycine a des doses plus elevees, c' est-a-dire superieures a 100 mg / kg / jour ( correspondant a des doses superieures a 70 mg / kg / jour de paromomycine), permettaient d'eradiquer 30 efficacement et plus rapidement 1 'infection parasitaire, et par la meme occasion d' ameliorer rapidement Jes signes cliniques du mammifere non-hurnain souffrant de cryptosporidiose. Ces traitements efficaces de duree plus courte, en plus d'etre mains 5 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 4 contraignants pour l'utilisateur, ont pour avantage de diminuer les nsques de contamination et de propagation entre mammiferes non-humains, en particulier issus d'un meme elevage. Ces traitements efficaces de duree plus courte peuvent aussi limiter !'apparition de parasites resistants a la paromomycine. La presente invention concerne done une composition veterinaire comprenant de la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un mammifere nonhumain, clans laquelle la composition est administree audit mammifere non-humain a une 10 dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours. Selon un mode particulier de !'invention, la dose de paromomycine est comprise entre 84 et 126 mg / kg / jour, entre 91 et 119 mg / kg / jour, de preference entre 98 et 112 mg / kg / jour. Selon un mode prefere de !'invention, la dose de paromomycine est d'environ 105 15 mg / kg / jour. Selon un autre mode particulier de !'invention, le sel pharmaceutiquement acceptable de la paromomycine est un sulfate. 20 Un autre obj et de !'invention concerne done une composition veterinaire comprenant du sulfate de paromomycine destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain, clans laquelle la composition est administree audit mammifere non-humain a une dose de sulfate de paromomycine comprise entre 114,3 et 200 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours. Selon un mode prefere, la 25 dose de sulfate de paromomycine est d'environ 150 mg / kg / jour. 30 Selon un autre mode particulier, la composition utilisee selon la presente invention est administree pendant 3 a 5 jours, de preference pendant 5 jours. De preference, la composition est administree en une seule prise par jour. Selon un autre mode particulier, la composition utilisee selon la presente invention est administree par voie orale. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 5 Selon un mode prefere de !'invention, le mammifere non-humain est un bovin, un porcin, un caprin, ou un ovin, de preference un bovin. Selon un mode encore plus prefere, le mammifere non-humain est un nouveau-ne ou ayant un age allant jusqu'a 21 jours, de preference jusqu' a 14 j ours, de maniere encore plus preferee ayant un age de 2 ou 3 j ours 5 ou un age compris entre 6 et 13 jours, de preference entre 7 et 10 jours. Avantageusement, le mammifere non-humain est un veau. Selon un autre mode particulier, la composition utilisee selon la presente invention comprend en outre au moins un excipient. Selon un autre mode particulier de !'invention, 10 la composition est une solution. Un autre objet de !'invention concerne !'utilisation d'une composition telle que definie clans la presente demande pour reduire et / ou supprimer !'excretion des oocystes. Un autre objet de !'invention concerne !'utilisation d'une composition telle que definie clans la 15 presente demande pour reduire et / ou supprimer l'etat de deshydratation. Un objet supplementaire de !'invention concerne !'utilisation d'une composition telle que definie clans la presente demande pour traiter et / ou prevenir la diarrhee. Un autre objet supplementaire de !'invention concerne !'utilisation d'une composition telle que definie clans la presente demande pour augmenter le gain en poids journalier. 20 LEGENDE DES FIGURES Figure 1 : Evolution du score fecal de Dt0 a Dt5 pour les groupes contr61e, 75, 100, et 150. 25 Figure 2 : Evolution du score d'hydratation de Dt0 a Dt5 pour les groupes contr61e, 75, 100, et 150. 30 Figure 3 : Evolution du nombre d' oocystes moyen de Dt0 a Dtl 0 pour les groupes contr61e, 75, 100, et 150. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 6 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION L' invention tell e que decri te clans la presente demande concerne 1' utilisation j ournali ere, d'une composition veterinaire comprenant de la paromomycine ou un de sels 5 pharmaceutiquement acceptables a des doses plus elevees en paromomycine que celles couramment utilisees clans l'art anterieur, c'est-a-dire superieures a 70 mg / kg / jour, de preference entre 80 et 140 mg / kg / jour pour prevenir et / ou traiter la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain. L'invention concerne aussi une composition veterinaire telle que decrite clans la presente demande pour son utilisation pour eradiquer ou eliminer 10 Cryptosporidium parvum chez un mammifere non-humain, de preference souffrant de cryptosporidiose. L'invention concerne aussi une methode pour eradiquer ou eliminer Cryptosporidium parvum, comprenant !'administration d'une composition veterinaire telle que decrite clans la presente demande chez un mammifere non-humain, de preference souffrant de cryptosporidiose. 15 La presente invention porte done sur une composition veterinaire comprenant de la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un mammifere nonhumain, clans laquelle la composition est administree audit mammifere non-humain a une 20 dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours. La presente invention concerne egalement la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain, clans laquelle la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables est administree audit 25 mammifere non-humain a une dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours. L'invention porte aussi sur une methode pour traiter la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain, comprenant !'administration d'une dose de paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour de paromomycine ou d'une composition veterinaire comprenant 30 ladite dose, pendant 3 a 6 jours chez ce mammifere non-humain. L'invention porte egalement sur une utilisation d'une dose de paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour de paromomycine CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 7 pour la fabrication d'une composition veterinaire pour traiter la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain clans laquelle la composition est administree audit mammifere non-humain pendant 3 a 6 jours. 5 Selon un mode particulier de !'invention, la dose de paromomycine est comprise entre 84 et 126 mg / kg / jour, entre 91 et 119 mg / kg / jour, de preference entre 98 et 112 mg / kg / jour. Selon un mode prefere, la dose de paromomycine est d'environ 105 mg / kg / jour. Dans le contexte de la presente invention, les termes « traitement » et« traiter » designent 10 au sens large une amelioration, une prophylaxie, une guerison d'une maladie ou d'un trouble ou signe clinique associe a la maladie, en !'occurrence la cryptosporidiose, tels que la diarrhee, la deshydratation, l'etat general sur la sante, le gain en poids joumalier, et le comportement. Par « traitement de cryptosporidiose », on entend egalement le contr61e, c' est-a-dire 1' eradication, 1' elimination, ou la reduction du ou des parasites 15 responsable(s) de la cryptosporidiose, tels que Cryptosporidium parvum, chez un mammifere non-humain. On entend aussi le contr61e de !'excretion des oocystes, c'est-adire la reduction voire la suppression de !'excretion des oocystes du ou des parasites responsable(s) de la cryptosporidiose, tels que Cryptosporidium parvum, chez un mammifere non-humain. 20 Selon un mode particulier, ces expressions incluent le traitement curatif du mammifere non-humain contre la cryptosporidiose. Par« traitement curatif », on entend un traitement permettant la guerison du mammifere non-humain contre la cryptosporidiose. De maniere particuliere, le mammifere non-humain traite presente un score fecal et / ou un score sur 25 l'etat general sur la sante et / ou un score d'hydratation, et / ou un score de guerison clinique minimale, de preference egal a 0. Selon un autre mode particulier, ces expressions incluent le traitement preventif du mammifere non-humain contre la cryptosporidiose. Selon un premier aspect, un 30 traitement preventif designe un traitement realise avant que le mammifere non-humain ait ete expose OU ait ete en contact avec l'agent causant OU a l'origine de la cryptosporidiose. Un traitement preventifreduit done les risques pour le mammifere nonCA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 8 humain de developper la cryptosporidiose. Les termes « traitement » et / ou «prevention» peuvent ainsi aussi designer la protection d'un mammifere non-humain contre la cryptosporidiose ou d' au moins un de ses troubles. Selon un second aspect, un traitement preventif designe aussi un traitement realise chez un mammifere non-humain souffrant 5 de cryptosporidiose. Le traitement realise chez un sujet malade peut permettre de contr61er le ou les parasite(s) a l'origine de la cryptosporidiose clans son environnement et de reduire les risques d'infection et de contamination chez les sujets sains environnants, contribuant ainsi a limiter 1' expansion de la cryptosporidiose. IO La paromomycme est un compose antibiotique appartenant au groupe des aminoglycosides. Elle agit sur la traduction des ARNs messagers en interrompant ainsi la synthese proteique. Son activite antibacterienne est principalement attribuee a son interaction irreversible avec les ribosomes. La paromomycine presente un large spectre d'activite contre les bacteries Gram-positif et Gram-negatifs. Elle est ainsi notamment 15 utilisee clans des traitements contre les infections gastro-intestinales causees par E. coli et Salmonella chez des cochons et des pre-ruminants a des doses de 25-50 mg / kg / jour pendant 3-5 jours sous la forme de son sel sulfate de paromomycine (Gabbrovet®, Parofor®). Comme indique clans !'introduction, elle est aussi utilisee contre la cryptosporidiose chez le veau mais clans des traitements utilisant des doses plus faibles 20 que cell es utilisees clans la presente invention et d'une duree plus longue, allant jusqu' a 7 JOUfS. Par« sels pharmaceutiquement acceptables », on entend a la fois les sels organiques et inorganiques. Des exemples representatifs de sels inorganiques comprennent les 25 chlorhydrates, les bromhydrates, les iodates, les sulfonates, les sulfates, et les phosphates. Des exemples representatifs de sels organiques comprennent les formates, les acetates, les trichloroacetates, les propionates, les benzoates, les cinnamates, les fumarates, les maleates, et les methanesulfonates. De preference, le sel pharmaceutiquement acceptable est un sulfate. Selon un mode prefere, la paromomycine utilisee selon la presente 30 invention est sous la forme de sulfate de paromomycine. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 9 Selon !'invention, la paromomycine est administree a un mammifere non-humain a une dose comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour. Telles que decrites clans la presente demande, les doses de paromomycine correspondent a une quantite en poids de paromomycine administree par kilogramme de poids corporel de mammifere non-humain par jour. La 5 quantite en poids de paromomycine correspond a la quantite en poids de paromomycine en tant que telle, c' est-a-dire sans tenir compte de la forme paromomycine ( comme sous forme de sel) par laquelle elle est administree. 11 est bien entendu que l'homme du metier saura adapter les quantites en fonction de la forme de paromomycine utilisee. Par exemple, une dose comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour de paromomycine correspond a 10 une dose de sulfate de paromomycine comprise entre 114,3 mg / kg / jour et 200 mg / kg / jour. Des doses de 80, 84, 91, 98, 105, 112, 119, 126, et 140 mg / kg / jour de paromomycine correspondent respectivement a des doses de sulfate de paromomycine de 114,3, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, et 200 mg / kg / jour. 15 La presente invention porte done aussi sur une composition veterinaire comprenant du sulfate de paromomycine destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un mammifere non-humain, clans laquelle la composition est administree audit mammifere non-humain a une dose de sulfate de paromomycine comprise entre 114,3 et 200 mg / kg / jour, de preference entre 120 et 200 mg / kg / jour, entre 20 120 et 180 mg / kg / jour, entre 130 et 170 mg / kg / jour, entre 140 et 160 mg / kg / jour, pendant 3 a 6 jours. De maniere preferee, la dose de sulfate de paromomycine est d'environ 150 mg / kg / jour. Le terme environ sera compris par l'homme du metier et peut varier clans une certaine 25 mesure selon le contexte clans lequel il est utilise. Si certaines utilisations de ce terme ne sont pas claires pour l'homme du metier en fonction du contexte, «environ» signifie plus ou moins 20 %, de preference plus ou moins 10 % du terme particulier. La paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou les compositions 30 les comprenant peuvent etre administres a un mammifere non-humain aux doses specifiees clans la presente demande pendant 1 a 6 jours, 1 a 5 jours, pendant 2 a 6 jours, pendant 2 a 5 jours, pendant 3 a 6 jours, et pendant 3 a 5 jours. Dans le contexte de la CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 presente invention, une administration pendant X a Y jours telle que definie ci-dessus signifie une administration pendant un minimum de Xjours et un maximum de Y jours. En d'autres termes, le traitement est applique pendant au moins Xjours et au plus Y jours. Une administration pendant I a 6 jours signifie done une administration pendant au moins 5 I jour et au plus 6 jours, c'est a dire 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 jours. Le traitement est ensuite stoppe apres !'administration effectuee au 6eme jour. Plus particulierement, la paromomycme ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou les compositions les comprenant sont administres a un mammifere non- IO humain aux doses specifiees clans la presente demande pendant 3 a 6 jours. Ainsi, la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables sont administres chez le mammifere non-humain a un temps TO (DtO) puis sont de nouveau administres a un temps TI (Dtl) un j our ou 24 heures apres. Le traitement est ainsi repete tous les j ours a partir de TO et ce pendant 3 a 6 j ours, c' est-a-dire pendant 3, 4, 5, ou 6 j ours, de preference 15 pendant 3 a 5 jours. Selon un mode prefere de !'invention, la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou la composition les comprenant sont administres pendant 3 jours, pendant 4 jours, et de preference pendant 5 jours. La paromomycine ou ses sels pharmaceutiquement acceptables peuvent etre administrees 20 en une ou plusieurs fois par jour, de preference en une seule prise par jour. Selon un mode prefere de !'invention, la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou la composition les comprenant sont administres en une seule prise par jour pendant 3 a 6 j ours, pendant 3 a 5 j ours, pendant 3 j ours, pendant 4 j ours, et de preference pendant 5 jours. 25 Les compositions veterinaires utilisees clans la presente invention peuvent etre administrees par toutes les routes ou voies d'administration connues de l'homme du metier, telles que la voie orale ou la voie parenterale, incluant une injection par intraveineuse, intramusculaire, et sous-cutanee. Selon un mode prefere de !'invention, la 30 composition est administree par voie orale. Dans le cadre d'une administration orale, la composition peut etre administree directement au mammifere non-humain ou etre administree en melange avec de la nourriture. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 11 Selon un mode particulier, les compositions telles que decrites clans la presente demande comprennent en outre un excipient. Par« excipient » on entend tout ingredient present clans la composition qui n' est pas actif en tant que tel contre la cryptosporidiose, et qui est bien tolere par le mammifere non-humain, c' est-a-dire qui n' engendre pas d' effets 5 secondaires. Comme exemples d' excipients, on peut citer, sans limitation, tous les excipients veterinaires connus de l'homme du metier, en particulier ceux appartenant a la classe des solvants, des solubilisants, des tensioactifs, des antioxydants, des epaississants, des conservateurs, et des antimoussants. 10 Selon un mode prefere de !'invention, le au moins un excipient est choisi parmi la silice colloi:dale anhydre, le glucose monohydrate, l'alcool benzylique, le metabisulfite de sodium, et l'edeate disodique. Les compositions veterinaires utilisees clans la presente invention peuvent etre formulees 15 sous n'importe quelle forme connue de l'homme du metier. Par exemple, les compositions peuvent etre sous forme liquide, de preference sous la forme d'une solution ou d'une emulsion. Les compositions peuvent aussi se presenter sous forme solide, de preference sous forme d'un gel, d'une pate, d'une poudre, d'un comprime, d'une capsule, de granules, de gelules, ou de pilules. Bien entendu, l'homme du metier saura ajuster la 20 proportion et la nature des excipients en fonction de la formulation et de la voie d'administration envisagees. Selon un mode particulier de !'invention, la composition est une poudre ou une solution. Selon un mode prefere de !'invention, la composition est une solution. 25 L'invention est adaptee au traitement de tout animal, et plus precisement de tout mammifere non-humain. Selon un mode particulier de !'invention, le mammifere nonhumain est un bovin, un porcin, un caprin, ou un ovin, de preference un bovin, avantageusement un veau. Selon un mode encore plus particulier de !'invention, le mammifere non-humain est un nouveau-ne ou ayant un age allant jusqu'a 21 jours, de 30 preference jusqu'a 14 jours. Selon un mode prefere, le mammifere non-humain a un age de 2 ou 3 jours. Selon un autre mode prefere, le mammifere non-humain a un age compris entre 6 et 13 jours, de preference entre 7 et 10 jours. Selon un mode encore plus prefere CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 12 de !'invention, le mammifere non-humain est un bovin ou un veau, nouveau-ne ou ayant un age allantjusqu'a 4 jours, de preference de 2 ou 3 jours. Selon un autre mode encore plus prefere de !'invention, le mammifere non-humain est un bovin ou un veau ayant un age allantjusqu'a 14 jours, de preference compris entre 6 et 13 jours, et de maniere encore 5 plus preferee compris entre 7 et 10 jours. Un obj et prefere de !'invention est une composition veterinaire comprenant du sulfate de paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables destinee a etre utilisee clans la prevention et / ou le traitement de la cryptosporidiose chez un bovin, clans laquelle 10 la composition est administree oralement audit bovin a une dose de sulfate de paromomycine comprise entre 114,3 et 200 mg / kg / jour, de preference entre 120 et 200 mg / kg / jour, entre 120 et 180 mg / kg / jour, entre 130 et 170 mg / kg / jour, entre 140 et 160 mg / kg / j our, et d'une maniere encore plus preferee d' environ 150 mg / kg / j our, pendant 3 a 6 jours, de preference pendant 3 a 5 jours, et d'une maniere encore plus preferee pendant 15 5 jours. Un objet supplementaire de !'invention concerne une composition veterinaire pour son utilisation telle que decrite clans la presente demande, pour reduire et / ou supprimer !'excretion des oocystes. L'invention concerne aussi une composition veterinaire pour 20 son utilisation telle que decrite clans la presente demande, pour reduire et / ou supprimer 1' etat de deshydratation. L'invention concerne egalement une composition veterinaire pour son utilisation telle que decrite clans la presente demande, pour traiter et / ou prevenir la diarrhee. L'invention concerne encore une composition veterinaire pour son utilisation telle que decrite clans la presente demande, pour augmenter le gain en poids journalier. 25 Un autre objet supplementaire concerne une methode pour reduire et / ou suppnmer !'excretion des oocystes comprenant !'administration d'une composition veterinaire comprenant de la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables a une dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours chez un 30 mammifere non-humain souffrant de cryptosporidiose. Un autre objet concerne aussi une methode pour reduire et / ou supprimer l'etat de deshydratation comprenant !'administration d'une composition veterinaire comprenant de la paromomycine ou un de CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 13 ses sels pharmaceutiquement acceptables a une dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours chez un mammifere non-humain souffrant de cryptosporidiose. Un autre objet concerne egalement une methode pour traiter et / ou prevenir la diarrhee comprenant !'administration d'une composition veterinaire 5 comprenant de la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables a une dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours chez un mammifere non-humain souffrant de cryptosporidiose. Un autre objet concerne encore une methode pour augmenter le gain en poids journalier d'un mammifere non-humain souffrant de cryptosporidiose, comprenant 1' administration d'une composition veterinaire 10 comprenant de la paromomycine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables a une dose de paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours chez ledit mammifere non-humain. D'autres aspects et avantages de !'invention apparaitront a la lecture des exemples qui 15 suivent, et qui doivent etre consideres comme illustratifs et non limitatifs. 20 EXEMPLES Materiel et methodes Composition La composition utilisee clans cette etude etait une solution orale contenant 200 mg / mL de sulfate de paromomycine ( correspondant a 140 mg / mL de paromomycine ). Les differentes doses de 75, 100, et 150 mg / kg de sulfate de paromomycine ont ete obtenues 25 a partir de cette solution orale a 200 mg / mL de sulfate de paromomycine. Traitement 35 veaux ages de 2 a 4 jours ont ete inocules par environ 106 d'oocystes sporules de Cryptosporidium parvum. Les veaux ont ensuite ete repartis clans les 4 groupes suivants 30 et traites clans les conditions suivantes a Dt0 (Jour 0) : 9 veaux non traites (groupe contr61e) ; 5 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 14 9 veaux traites avec 75 mg / kg / jour de sulfate de paromomycine pendant 5 jours (groupe 75); 9 veaux traites avec 100 mg / kg / jour de sulfate de paromomycine pendant 5 jours (groupe 100); et 9 veaux traites avec 150 mg / kg / jour de sulfate de paromomycine pendant 5 jours (groupe 150). Resultats 10 1. Signes cliniques Diarrhee (score fecal) La consistance des feces a ete analysee a Dt0, puis deux fois par jours jusqu'a Dt5 (avant 15 le repas du matin et clans l'apres-midi). Un score de 0 a 2 a ete attribue selon les 20 observations suivantes : Score 0 : normal feces Score 1 : diarrhee Score 2 : diarrhee aqueuse (sans feces) Les resultats de la figure 1 montrent un score fecal inferieur pour le groupe 150 par rapport aux groupes contr6le, 75 et 100, et cedes le premier jour apres le demarrage du traitement. 25 Les resultats du tableau 1 ci-dessous decrivent le score fecal pour chaque groupe au cours du traitement. Un meilleur score fecal ( c' est-a-dire plus faible) est obtenu pour le groupe 150 apres 5 jours de traitement. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 15 Tableau 1: Score fecal Groupes Controle 75 100 150 Jour Statistiques (N=9) (N=9) (N=8) (N=9) DtO,O Moy. (+ / -SD) 1,78 (+ / -0,44) 1,89 (+ / -0,33) 1,88 (+ / -0,35) 1,78 (+ / -0,44) Min;Max 1,00; 2,00 1,00; 2,00 1,00; 2,00 1,00; 2,00 Dt0,5 Moy. (+ / -SD) 2,00 (+ / -0,00) 1,44 (+ / -0,73) 1,75 (+ / -0,46) 1,78 (+ / -0,44) Min;Max 2,00; 2,00 0,00; 2,00 1,00; 2,00 1,00; 2,00 Dtl Moy. (+ / -SD) 1,56 (+ / -0,73) 1,11 (+ / -0,60) 1,13 (+ / -0,83) 1,00 (+ / -0,71) Min;Max 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 Dtl,5 Moy. (+ / -SD) 1,56 (+ / -0.53) 1,44 (+ / -0.88) 1,00 (+ / -0,76) 0,78 (+ / -0,97) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 Dt2 Moy. (+ / -SD) 1,78 (+ / -0,44) 1,44 (+ / -0,73) 0,88 (+ / -0,83) 0,67 (+ / -0,87) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 Dt2,5 Moy. (+ / -SD) 1,67 (+ / -0,50) 0,89 (+ / -0,78) 1,00 (+ / -0,93) 0,67 (+ / -0,87) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 Dt3 Moy. (+ / -SD) 1,44 (+ / -0.53) 0,67 (+ / -0.71) 1,25 (+ / -0.71) 0,00 (+ / -0.00) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 0,00 Dt3,5 Moy. (+ / -SD) 1,22 (+ / -0,44) 0,44 (+ / -0,53) 0,75 (+ / -0,46) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dt4 Moy. (+ / -SD) 1,44 (+ / -0,73) 0,78 (+ / -0,67) 0,50 (+ / -0,53) 0,44 (+ / -0,53) Min;Max 0,00; 2,00 0,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 Dt4,5 Moy. (+ / -SD) 1,00 (+ / -0,71) 0,67 (+ / -0,50) 0,75 (+ / -0,89) 0,22 (+ / -0,44) Min;Max 0,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 2,00 0,00; 1,00 Dt5 Moy. (+ / -SD) 1,33 (+ / -0,50) 0,33 (+ / -0,50) 0,25 (+ / -0,46) 0,11 (+ / -0,33) Min;Max 1,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 Moy. : Moyenne Score sur l'etat general sur la sante 5 L' etat general sur la sante des veaux a ete ob serve a DtO pui s deux foi s par j our j usqu' a Dt5 (avant le repas du matin et clans l'apres-midi). Un score de O a 3 a ete attribue selon les observations suivantes : Score O : veau alerte et actif 5 10 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 16 Score 1 : veau moyennement depressif ( oreilles tombantes et legerement insensible aux stimuli Score 2: veau depressif (oreilles et tete tombantes et pas d'interet a se tenir debout) Score 3 : veau couche (incapable de se tenir debout) Les resultats du tableau 2 ci-dessous decrivent !'evolution de l'etat general sur la sante des veaux pour chaque groupe au cours du traitement. Un meilleur score de l'etat general sur la sante est obtenu pour le groupe 150, et ce des les premieres 12 heures apres le demarrage du traitement. Tableau 2: Etat general sur la sante Groupes Controle 75 100 150 Jour Statistiques (N=9) (N=9) (N=8) (N=9) DtO Moy. (+ / -SD) 0,44 (+ / -0,53) 0,56 (+ / -0,73) 0,75 (+ / -0,46) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1.00 0,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dt0,5 Moy. (+ / -SD) 0,44 (+ / -0,53) 0,89 (+ / -1,05) 0,50 (+ / -0,53) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 3,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dtl Moy. (+ / -SD) 0,33 (+ / -0,50) 0,44 (+ / -0,53) 0,38 (+ / -0,52) 0,22 (+ / -0,44) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 Dtl,5 Moy. (+ / -SD) 0,56 (+ / -0,53) 0,22 (+ / -0,44) 0,25 (+ / -0,46) 0,33 (+ / -0,50) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 Dt2 Moy. (+ / -SD) 0,78 (+ / -0,44) 0,22 (+ / -0,44) 0,50 (+ / -0,53) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dt2,5 Moy. (+ / -SD) 0,56 (+ / -0,53) 0,22 (+ / -0,44) 0,50 (+ / -0,53) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dt3 Moy. (+ / -SD) 0,67 (+ / -0,50) 0,11 (+ / -0,33) 0,00 (+ / -0,00) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 0,00; 0,00 Dt3,5 Moy. (+ / -SD) 0,56 (+ / -0,73) 0,00 (+ / -0,00) 0,13 (+ / -0,35) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 2.00 0,00; 0.00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 Dt4 Moy. (+ / -SD) 0,67 (+ / -0.71) 0,11 (+ / -0.33) 0,00 (+ / -0.00) 0,00 (+ / -0.00) Min;Max 0,00; 2,00 0,00; 1,00 0,00; 0,00 0,00; 0,00 Dt4,5 Moy. (+ / -SD) 0,56 (+ / -0,53) 0,00 (+ / -0,00) 0,00 (+ / -0,00) 0,00 (+ / -0,00) Min;Max 0,00; 1,00 0,00; 0,00 0,00; 0,00 0,00; 0,00 CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 Etat general sur la sante Jour Statistiques Dt5 Moy. (+ / -SD) Min;Max Moy. : Moyenne Score d'hydratation 17 Controle (N=9) 0,44 (+ / -0,53) 0,00; 1,00 Groupes 75 100 150 (N=9) (N=8) (N=9) 0,22 (+ / -0,44) 0,00 (+ / -0,00) 0,00 (+ / -0,00) 0,00; 1,00 0,00; 0,00 0,00; 0,00 5 Le score d'hydratation a ete mesure une fois par jour avant le repas du matin a partir de Dt0 jusqu'a Dt5. Un score de 0 a 3 a ete attribue selon les observations suivantes: Score 0 : statut normal d'hydratation, plis de peau < 1 seconde Score 1 : legere deshydratation, yeux legerement deprimes, et plis de peau :S 2 secondes Score 2 : deshydratation moderee, yeux deprimes, museau sec, plis de peau > 2 secondes et < 5 secondes Score 3 : deshydratation severe, severe enophtalmie, plis de peau > 5 secondes Les resultats de la figure 2 montrent un score d'hydratation inferieur ( c' est-a-dire une 15 meilleure hydratation) pour le groupe 150 par rapport aux groupes contr61e, 75 et 100. Guerison clinique La guerison clinique a ete calculee a partir des donnees cliniques presentees ci-dessus 20 pour permettre de statuer sur 1' efficacite des doses testees. Un veau est considere comme etant gueri lorsqu'il a un score fecal egal a 0, un score sur l'etat general sur la sante egal a 0 et un score d'hydratation egal a 0. Les resultats du tableau 3 ci-dessous decrivent !'evolution de la guerison clinique des veaux pour chaque groupe au cours du traitement. Une meilleure guerison clinique est 25 observee pour le groupe 150 au cours du traitement. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 18 Tableau 3: Guerison clinique Groupes Controle 75 100 150 Jour Statistiques (N=9) (N=9) (N=8) (N=9) Dt0 n(%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) Dt0,5 n(%) 0 (0,0%) 1 (11,1%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) Dtl n(%) 0 (0,0%) 1 (11,1%) 1 (12,5%) 1 (11,1%) Dtl,5 n(%) 0 (0,0%) 1 (11,1%) 0 (0,0%) 1 (11,1%) Dt2 n(%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) 2 (22,2%) Dt2,5 n(%) 0 (0,0%) 1 (11,1%) 0 (0,0%) 2 (22,2%) Dt3 n(%) 0 (0,0%) 2 (22,2%) 0 (0,0%) 2 (22,2%) Dt3,5 n(%) 0 (0,0%) 5 (55,6%) 1 (12,5%) 9 (100,0%) Dt4 n(%) 1 (11,1%) 3 (33,3%) 4 (50,0%) 5 (55,6%) Dt4,5 n(%) 2 (22,2%) 3 (33,3%) 3 (37,5%) 7 (77,8%) Dt5 n(%) 0 (0,0%) 4 (44,4%) 5 (62,5%) 8 (88,9%) 5 2. Nombre d'oocystes 15 Des echantillons de feces ont ete preleves tous lesjours le matin a partir de Dt0 jusqu'a Dtl0. L'analyse quantitative des oocystes de Cryptosporidium parvum a ete realisee avec le test utilisant le reactif Merifluor® de chez Meridian Diagnostics. Les resultats de la figure 3 montrent un nombre d' oocystes presents clans les echantillons tres inferieur pour le groupe 150 par rapport aux groupes contr6le, 75 et 100. Ceci demontre que le groupe 150 excrete done moins d' oocystes que les groupes contr6le, 75 et 100. CA 03148720 2022-01-25 WO 2021 / 019067 PCT / EP2020 / 071631 19 3. Poids corporel La moyenne du gain de poids j oumalier des veaux a egalement ete calculee de Dt0 jusqu' a Dt2 l pour chaque groupe. La moyenne de ce gain de poids j oumalier est representee clans 5 le tableau 4 ci-dessous. Un meilleur gain en poids joumalier est observe pour le groupe 150 au cours du traitement. Tableau 4: Controle Parametre Statistiques (N=9) Gain en poids Moy. (+ / -SD) 0,53 (+ / -0.16) journalier (kg) Min;Max 0,18; 0,77 Conclusions Groupes 75 100 (N=9) (N=8) 0,56 (+ / -0.19) 0,56 (+ / -0.13) 0,15 ; 0.81 0,35; 0.69 150 (N=9) 0,67 (+ / -0.06) 0,58; 0,77 Les exemples presentes ci-dessus montrent qu'un traitement comprenant !'administration d'une dose de sulfate de paromomycine a 150 mg / kg / jour (ou 105 mg / kg / jour de 15 paromomycine) permet d' ameliorer les signes cliniques ( diarrhee, etat general sur la sante, hydratation), de reduire !'excretion des oocystes, et d'augmenter le gain en poids joumalier chez un veau inocule par des oocystes de Cryptosporidium parvum. Les inventeurs ont done demontre de maniere surprenante que !'utilisation de la paromomycme ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables a une dose en 20 paromomycine comprise entre 80 et 140 mg / kg / jour pendant 3 a 6 jours permettait de traiter integralement et de maniere plus efficace et plus rapide la cryptosporidiose ainsi que les signes cliniques associees a cette maladie

Claims

20 REVENDICATIONS 1. Composition vétérinaire comprenant 5 du sulfate de paromomycine et au moins un excipient, destinée à être utilisée dans la prévention ou le traitement de la cryptosporidiose chez un veau, dans laquelle la composition est destinée à l’administration audit veau à une dose de sulfate de paromomycine comprise entre 120 et 180 mg / kg / jour pendant un minimum de 3 jours et un maximum de 6 jours. 10 2. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon la revendication 1, dans laquelle la dose de sulfate de paromomycine est d’environ 150 mg / kg / jour.

3. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon la revendication 1 ou 2, dans 15 laquelle la composition est destinée à l’administration pendant un minimum de 3 jours et un maximum de 5 jours.

4. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle la composition est destinée à l’administration pendant 20 5 jours.

5. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle la composition est destinée à l’administration en une seule prise par jour. 25 6. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle la composition est destinée à l’administration par voie orale. 30 7. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle le veau est un nouveau-né ou ayant un âge allant jusqu’à 21 jours. CA 3148720 Date reçue / Received date 2024-07-02 21 8. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle la composition est une solution.

9. Composition vétérinaire destinée à 5 être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, pour réduire ou supprimer l’excrétion des oocystes.

10. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, pour réduire ou supprimer l’état de déshydratation. 10 11. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, pour traiter ou prévenir la diarrhée.

12. Composition vétérinaire destinée à être utilisée selon l’une quelconque des 15 revendications 1 à 8, pour augmenter le gain en poids journalier. CA 3148720 Date reçue / Received date 2024-07-02