A product containing bioactive collagen and vitamin C, and a kit containing this product.

Abstract

The invention relates to a composition containing a bioactive collagen peptide and vitamin C, in which the bioactive collagen peptide and vitamin C are present in amounts sufficient to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. The composition may also contain calcium, vitamin D, and / or vitamin K. The composition is useful for treating, reducing, and / or preventing osteoporosis. In addition, the composition is useful for preventing osteopenia. The invention relates to a kit containing the composition.

Description

BIOACTIVE COLLAGEN PEPTIDES AND VITAMIN C FORMULATIONSFIELD OF THE INVENTION

[0001] This disclosure relates to formulations containing bioactive collagen peptides and vitamin C as well as their use in treating osteoporosis.BACKGROUND OF THE INVENTION

[0002] According to the Mayo Clinic, “osteoporosis causes bones to become weak and brittle -so brittle that a fall or even mild stresses such as bending over or coughing can cause a fracture. Osteoporosis-related fractures most commonly occur in the hip, wrist or spine. ” The National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Disease states that, “osteoporosis is a bone disease that develops when bone mineral density and bone mass decreases, or when the structure and strength of bone changes. This can lead to a decrease in bone strength that can increase the risk of fractures (broken bones) . ” The National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Disease also calls osteoporosis a silent disease that does not have any symptoms and patients suffering from the disease may not be even aware of the disease until a bone fracture, such as e.g., most commonly hip bones, vertebrates in the spine, and wrist; while osteoporosis can occur at any age, the risk increases with age.

[0003] Currently available treatments for osteoporosis include the drug alendronate. In addition, supplements including vitamins and collagen peptides are used to promote healthy bones and reduce calcium loss. According to WebMD, “ [c] ollagen peptides are used for aging skin and osteoarthritis. They are also used for osteoporosis, brittle nails, muscle strength, and many other purposes, but there is no good scientific evidence to support most of these uses. ”

[0004] Alendronate has side effects including an increased risk of breaking a thigh bone. While supplements may provide some benefit, they are unable to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. What is needed is a more effective treatment for osteoporosis.SUMMARY OF THE INVENTION

[0005] The disclosure provides formulations containing bioactive collagen peptides and vitamin C as well as use of these formulation to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. The disclosure  is based on the discovery that the combination of bioactive collagen peptides and vitamin C act in synergy when treating osteoporosis. This disclosure is also based on the discovery that for the treatment of osteoporosis the combination of the bioactive collagen peptides and vitamin C are nearly as effective as alendronate.

[0006] One embodiment of the disclosure is a formulation containing bioactive collagen peptides and vitamin C. In certain embodiments of the formulation, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to effective treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. In alternate embodiments, the formulation contains from about 1 g to about 10 g of bioactive collagen peptides and from about 20 to about 200 mg of vitamin C. In other embodiments, the formulation comprises a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C.

[0007] A variety of bioactive collagen peptides can be used in the formulations. In certain embodiments, the bioactive collagen peptides have an average molecular weight of 500 to 20,000 Daltons. In other embodiments, the bioactive collagen peptides are derived from bone, such as e.g., cattle bone.

[0008] In certain embodiments of the disclosure, the vitamin C is naturally derived. In one embodiment, the vitamin C is extracted from some fruit. In a particular embodiment, the vitamin C is extracted from a cherry.

[0009] The formulations of the disclosure can also contain additional vitamins and / or a mineral. For example, in one embodiment, the formulations also contain calcium, magnesium, vitamin D, and / or vitamin K (e.g., vitamin K2) . In certain embodiment, the formulations contain from about 10 mg to about 600 mg of calcium, from about 10 mg to about 400 mg of magnesium, from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D, and / or from about 10 mcg to about 200 mcg of vitamin K (e.g., vitamin K2) . In another embodiment, the formulations contain calcium and vitamin D. For example, the formulations can contain from about 10 mg to about 600 mg of calcium and from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D. In further embodiments, the formulations contain probiotics (e.g., 106 ～ 1011 cfu of probiotics) and botanicals. In some embodiments, the formulations contain from about 1 g to about 20 g of botanicals, such as e.g., Rhizoma drynariae.

[0010] In addition, the formulations of the disclosure can include an acidity regulator (e.g., citric acid) , natural flavoring and / or a sweetener.

[0011] The formulations can be gluten-free and / or sugar free.

[0012] In certain embodiments, the formulations are liquid formulations. Alternatively, the formulations are solid formulations.

[0013] The formulations can contain a 50: 1 ratio or higher of bioactive collagen peptides to vitamin C. In certain embodiments, the formulations contain from about 1 g to about 10 g of the  bioactive collagen peptides and from about 20 mg to about 200 mg of vitamin C.

[0014] The disclosure also includes kits containing the formulations. The kits can also include instructions for use. In one embodiment, the kit include a liquid formulation of the disclosure filled in a bottle and optionally instructions for use.

[0015] In addition, the disclosure includes use of the formulations in the manufacture of a medicament for treating osteoporosis. The disclosure further includes use of the formulations to treat osteoporosis.

[0016] Furthermore, the disclosure includes methods of treating, preventing, or reducing osteoporosis. The methods include administering a formulation of disclosure to a subject, such as e.g., an adult. In certain embodiments, the formulation is administered daily. In other embodiments, the formulations contain at least bioactive collagen peptides and vitamin C in an amount effective for treating, preventing, or reducing osteoporosis.

[0017] Yet another aspect of the disclosure is methods of preventing osteoporotic bone formation by administering a formulation of the disclosure to a subject. The subject can be an adult and the administering can include daily administration of the formulation. The subject can be an adult.

[0018] Other features and advantages of the invention will be apparent from the detailed description and examples that follow.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0019] The foregoing summary, as well as the following detailed description of the invention, will be better understood when read in conjunction with the appended figures. For the purpose of illustrating the invention, the figures demonstrate embodiments of the present invention. It should be understood, however, that the invention is not limited to the precise arrangements, examples, and instrumentalities shown.

[0020] FIG. 1A shows a chart measuring the effectiveness of various treatments (based on fluorescence) on dexamethasone-induced osteoporosis (OP) in zebrafish. Specifically, FIG. 1A shows the effects of treatment of various amounts of vitamin C ( “VC” ) , bioactive collagen peptides (BCPs) , or combination of vitamin C and bioactive collagen peptides (BCPs + VC) . Compared with model, *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001. Compared with BCPs + VC 52.0 μg / mL, ###p < 0.001. Compared with BCPs +VC 104 μg / mL, $$$p < 0.001. Compared with BCPs + VC 208 μg / mL, Δp < 0.05, ΔΔΔp < 0.001.

[0021] FIG. 1B shows photographs of alizarin red stained samples zebrafish with dexamethasone-induced osteoporosis (OP) that were treated with various amounts of vitamin C ( “VC” ) , bioactive  collagen peptides (BCPs) , or combination of vitamin C and bioactive collagen peptides (BCPs +VC) .

[0022] FIG. 2A shows a chart measuring the effectiveness of various treatments (based on fluorescence) on dexamethasone-induced osteoporosis (OP) in zebrafish. Specifically, FIG. 2A shows the effects of treating dexamethasone-induced osteoporosis (OP) in zebrafish with alendronate sodium (5 μg / mL) , bioactive collagen peptides (BCPs) (208 μg / mL) , or a combination of bioactive collagen peptides (208 μg / mL) and vitamin C (13.8 μg / mL) (BCPs +VC) for 12 hours, 24 hours, 36 hours, and 48 hours. Compared with dexamethasone treated group, **p<0.01, ***p<0.001. Compared with BCPs, 12 hours, ##p<0.01, ###p<0.001. Compared with BCPs + VC, 12 hours, $ p<0.05, $$$ p<0.001. Compared with BCPs + VC, 24 hours, ΔΔ p<0.01, ΔΔΔ p<0.001. Compared with BCPs + VC, 36h, ★ p<0.05, ★★★ p<0.001. Compared with BCPs + VC, 48 hours, □ p<0.05, □ p <0.001.

[0023] FIG. 2B shows photographs of alizarin red stained samples zebrafish with dexamethasone-induced osteoporosis (OP) that were treated with alendronate sodium (5 μg / mL) , bioactive collagen peptides (BCPs) (208 μg / mL) , or a combination of bioactive collagen peptides (208 μg / mL) and vitamin C (13.8 μg / mL) (BCPs + VC) for 12 hours, 24 hours, 36 hours, and 48 hours.

[0024] FIG. 3A shows a chart measuring the effectiveness of various pre-treatments (based on fluorescence) before dexamethasone-induced osteoporosis (OP) in zebrafish. Specifically, FIG. 3A shows the effects of pre-treating (OP) in zebrafish with alendronate sodium (5 μg / mL) , bioactive collagen peptides (BCPs) (208 μg / mL) , or a combination of bioactive collagen peptides (208 μg / mL) and vitamin C (13.8 μg / mL) (BCPs + VC) for 0 hours, 24 hours, and 48 hours prior to dexamethasone-induced osteoporosis. Compared with BCPs + VC, pre-treatment 48 hours, **p<0.01, ***p<0.001. Compared with BCPs + VC, pre-treatment 24 hours, #p<0.05, ###p<0.001. Compared with BCPs + VC, pre-treatment 0 hours, $ p<0.05, $$$ p<0.001.

[0025] FIG. 3B shows photographs of alizarin red stained samples zebrafish with dexamethasone-induced osteoporosis (OP) that were pre-treated with alendronate sodium (5 μg / mL) , bioactive collagen peptides (BCPs) (208 μg / mL) , or a combination of bioactive collagen peptides (208 μg / mL) and vitamin C (13.8 μg / mL) (BCPs + VC) for 0 hours, 24 hours, and 48 hours prior to dexamethasone-induced osteoporosis.DETAILED DESCRIPTION

[0026] The general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not restrictive of the invention, as defined in the appended claims.

[0027] This is disclosure is based on the discovery that the combination of bioactive collagen peptides and vitamin C (ascorbic acid) have a synergistic effect on the treatment of osteoporosis. Specifically, it has been discovered that a combination of bioactive collagen peptide and vitamin C is effective in restoring osteoporosis and / or preventing formation of osteoporotic bones. In particular (as shown in Example 1 below) , collagen peptide combined with vitamin C, can provide better efficacy than collagen peptide and vitamin C alone. Specifically, the combination showed on par efficacy with a drug (alendronate sodium) but in dietary solution.

[0028] Accordingly, the disclosure provides for formulations containing bioactive collagen peptides and vitamin C. These formulations support bone growth, restore osteoporosis, and prevent osteoporotic bone formation. These formulations can treat osteoporosis and showed on par efficacy with drug (alendronate sodium) , but in a dietary supplement, such as e.g., a solution.

[0029] Other aspects of the present invention will be apparent to those skilled in the art in view of the detailed description of the invention as provided herein.

[0030] For clarity of disclosure, and not by way of limitation, the detailed description of the invention is divided into subsections that describe or illustrate certain features, embodiments, or applications of the present invention.

[0031] Definitions

[0032] Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Although any methods and materials similar or equivalent to those described herein can also be used in the practice or testing of the present invention, representative illustrative methods, and materials are now described.

[0033] All publications and patents cited in this specification are herein incorporated by reference as if each individual publication or patent were specifically and individually indicated to be incorporated by reference and are incorporated herein by reference to disclose and describe the methods and / or materials in connection with which the publications are cited. The citation of any publication is for its disclosure prior to the filing date and should not be construed as an admission that the present invention is not entitled to antedate such publication by virtue of prior invention. Further, the dates of publication provided may be different from the actual publication dates, which may need to be independently confirmed.

[0034] It is noted that, as used herein and in the appended claims, the singular forms “a, ” “an, ” and “the” include plural referents unless the context clearly dictates otherwise. It is further noted that the claims may be drafted to exclude any optional element. As such, this statement is intended to serve as antecedent basis for use of such exclusive terminology as “solely, ” “only” and the like in  connection with the recitation of claim elements, or use of a “negative” limitation.

[0035] Each of the individual embodiments described and illustrated herein has discrete components and features which may be readily separated from or combined with the features of any of the other several embodiments without departing from the scope or spirit of the present invention. Any recited method can be conducted in the order of events recited or in any other order which is logically possible. As used herein, the term “about” when referring to a measurable value such as an amount, a temporal duration, and the like, is meant to encompass variations of ±. 20%or ±10%, more preferably ± 5%, even more preferably ± 1%, and still more preferably ± 0.1%from the specified value, as such variations are appropriate to perform the disclosed methods.

[0036] It is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to be limiting.

[0037] As used herein, the terms “comprising, ” “including, ” “containing” and “characterized by” are exchangeable, inclusive, open-ended and do not exclude additional, unrecited elements or method steps. Any recitation herein of the term “comprising, ” particularly in a description of components of a composition or in a description of elements of a device, is understood to encompass those compositions and methods consisting essentially of and consisting of the recited components or elements.

[0038] As used herein, the term “consisting of” excludes any element, step, or ingredient not specified in the claim element.

[0039] As used herein, the term “about” when referring to a measurable value such as an amount, a temporal duration, and the like, is meant to encompass variations of ±. 20%or ± 10%, more preferably ± 5%, even more preferably ± 1%, and still more preferably ± 0.1%from the specified value, as such variations are appropriate to perform the disclosed methods.

[0040] Before certain embodiments are described in greater detail, it is to be understood that this invention is not limited to certain embodiments described, as such may, of course, vary. It is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing certain embodiments only, and is not intended to be limiting, since the scope of the present invention will be limited only by the appended claims.

[0041] Where a range of values is provided, it is understood that each intervening value, to the tenth of the unit of the lower limit unless the context clearly dictates otherwise, between the upper and lower limit of that range and any other stated or intervening value in that stated range, is encompassed within the invention. The upper and lower limits of these smaller ranges may independently be included in the smaller ranges and are also encompassed within the invention, subject to any specifically excluded limit in the stated range. Where the stated range includes  one or both of the limits, ranges excluding either or both of those included limits are also included in the invention.

[0042] It is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to be limiting.

[0043] As used herein, the terms “comprising, ” “including, ” “containing” and “characterized by” are exchangeable, inclusive, open-ended and do not exclude additional, unrecited elements or method steps. Any recitation herein of the term “comprising, ” particularly in a description of components of a composition or in a description of elements of a device, is understood to encompass those compositions and methods consisting essentially of and consisting of the recited components or elements.

[0044] The terms “patient” or “subject” as used herein are interchangeable and refer to a mammalian animal. In some embodiments, the patient or subject is a human. In other embodiments, the patient or subject is a veterinary or farm animal, a domestic animal or pet, or animal normally used for clinical research. In some embodiments, the patient is an adult, i.e., 18 years of age or older. In other embodiments, the patient is a child, i.e., under the age of 18.

[0045] Ranges: throughout this disclosure, various aspects of the invention can be presented in a range format. It should be understood that the description in range format is merely for convenience and brevity and should not be construed as an inflexible limitation on the scope of the invention. Accordingly, the description of a range should be considered to have specifically disclosed all the possible subranges as well as individual numerical values within that range. For example, description of a range such as from 1 to 6 should be considered to have specifically disclosed subranges such as from 1 to 3, from 1 to 4, from 1 to 5, from 2 to 4, from 2 to 6, from 3 to 6 etc., as well as individual numbers within that range, for example, 1, 2, 2.7, 3, 4, 5, 5.3, and 6. This applies regardless of the breadth of the range.

[0046] As used herein, and as well-understood in the art, “treatment” is an approach for obtaining beneficial or desired results, including clinical results. For purposes of this invention, beneficial or desired clinical results include, but are not limited to, alleviation or amelioration of one or more symptoms, diminishment of extent of disease, stabilized (i.e., not worsening) state of disease, preventing spread of disease, delay or slowing of disease progression, amelioration or palliation of the disease state, and remission (whether partial or total) , whether detectable or undetectable. “Treatment” can also mean prolonging survival as compared to expected survival if not receiving treatment.

[0047] It is to be appreciated that certain features of the invention which are, for clarity, described herein in the context of separate embodiments, may also be provided in combination in a single  embodiment. That is, unless obviously incompatible or excluded, each individual embodiment is deemed to be combinable with any other embodiment (s) and such a combination is considered to be another embodiment. Conversely, various features of the invention that are, for brevity, described in the context of a single embodiment, may also be provided separately or in any sub-combination. It is further noted that the claims may be drafted to exclude any optional element. As such, this statement is intended to serve as antecedent basis for use of such exclusive terminology as “solely, ” “only” and the like in connection with the recitation of claim elements, or use of a “negative” limitation.

[0048] While an embodiment may be described as part of a series of steps or part of a more general structure, each said step may also be considered an independent embodiment in itself. Before certain embodiments are described in greater detail, it is to be understood that this invention is not limited to certain embodiments described, and as such may, of course, vary. It is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing certain embodiments only, and is not intended to be limiting, since the scope of the present invention will be limited only by the appended claims.

[0049] Formulations

[0050] The disclosure provides for formulations containing bioactive collagen peptides and vitamin C.The formulations can be liquid formulations, solid formulations, or gels. In other embodiments, the formulations can be chewable. One embodiment of the disclosure is a liquid formulation containing bioactive collagen peptides and vitamin C. Another embodiment of the disclosure is a solid formulation containing bioactive collagen peptides and vitamin C

[0051] In further embodiments, the disclosure provides for formulations contain an active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis. In certain embodiments of these formulations, the active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis is bioactive collagen peptides and vitamin C. In further embodiments, the active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis is bioactive collagen peptides and vitamin C and the formulation does not contain any additional active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis.

[0052] In certain embodiments, the bioactive collagen peptides have an average molecular weight of from about 500 Daltons to about 20,000 Daltons, alternatively from about 1000 Daltons to about 10,000 Daltons, alternatively from about 500 Daltons to about 15,000 Daltons, alternatively from about 1000 Daltons to about 8000 Daltons, alternatively from about 5000 Daltons, alternatively from about 3000 Daltons to about 6000 Daltons, alternatively from about 4500 Daltons to 5500 Daltons. In certain embodiments, the bioactive collagen peptides are fragments  of animal collagen. In certain embodiments, the bioactive collagen peptides are derived from bones. In one embodiment, the bioactive collagen peptides are cattle bone-derived bioactive collagen peptides.

[0053] In certain embodiments, the vitamin C is provided in form of a fruit powder containing the vitamin C. In other embodiments, the vitamin C is extracted from a fruit, such as a cherry. In certain embodiments, the vitamin C is extracted from acerola cherry. In other embodiments, the vitamin C is obtained by chemical synthesis.

[0054] In certain embodiments, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to effective treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. In one embodiment, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to effective treat osteoporosis. In another embodiment, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to reduce osteoporosis. In an alternate embodiment, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to prevent osteoporosis. In yet another embodiment, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to prevent formation of osteoporotic bones.

[0055] In some embodiments, the formulations contain a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis. In one embodiment, the formulations contain a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C to treat osteoporosis. In another embodiment, the formulations contain a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C to reduce osteoporosis. In an alter embodiment, the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to prevent osteoporosis.

[0056] The formulations of the disclosure can contain additional vitamins and / or a mineral. In certain embodiments, the formulations also contain calcium, magnesium, vitamin D, and / or vitamin K. In certain embodiments, the vitamin K is vitamin K2. In alternate embodiments, the formulations also contain calcium and vitamin D. In some embodiments, the formulations also contain probiotics and botanicals. In certain embodiments, the formulations contain 106 ～1011 cfu, alternatively 107 ～ 1010 cfu, alternatively 108 ～ 1010 cfu of probiotics. In certain embodiments, the formulations contain from about 1 g to about 20 g, alternatively from about 1 g to about 15 g, alternatively from about 2 g to about 10 g of botanicals such as e.g., Rhizoma drynariae.

[0057] In addition, the formulations of the disclosure can contain additives commonly used for generating formulations. In certain embodiments, the formulations also contain a sweetener, a colorant, natural flavoring, an acidity regulator, and a combination thereof. In embodiment, the  acidity regulator is citric acid.

[0058] In certain embodiments, the formulations of the disclosure are gluten-free (i.e., do not contain gluten) . In other embodiments, the formulations are sugar-free (i.e., do not contain any added sugar) . In additional embodiments, the formulations are gluten-free and sugar free.

[0059] In certain embodiments, the formulations contain from about 1 g to about 10 g, alternatively from about 2 g to about 11 g, alternatively from about 2 g to about 8 g, alternatively from about 1 g to about 5 g, alternatively from about 1.25 g to about 5 g, alternatively from about 1 g to about 6 g, alternatively from about 1 to about 7 g of bioactive collagen peptides. In other embodiments, the formulations contain from about 20 mg to about 200 mg, alternatively from about 10 mg to about 150 mg, alternatively from about 50 to about 150 mg, alternatively from about 10 mg to about 90 mg, alternatively from about 20 mg to about 85 mg, alternatively from about 20 mg to about 120 mg of vitamin C. In further embodiments, the formulations contain from about 10 mg to about 600 mg, alternatively from about 10 mg to about 400 mg, alternatively from about 10 mg to about 150 mg, alternatively from about 50 mg to 400 mg, alternatively from about 100 mg to about 600 mg of calcium. In alternate embodiments, the formulation contain from about 10 mg to about 400 mg, alternatively from about 10 mg to about 200 mg, alternatively from about 10 mg to about 150 mg, alternatively from about 50 mg to 400 mg, alternatively from about 100 mg to about 400 mg of magnesium. In additional embodiments, the formulations contain from about 5 IU to about 600 IU, alternatively from about 10 IU to about 600 IU, alternatively from about 10 IU to about 500 IU, alternatively from about 50 IU to about 450 IU of vitamin D. In further embodiments, the formulations contain from about 10 mcg to about 200 mcg, alternatively from about 20 mcg to about 180 mcg, alternatively from about 30 mcg to about 150 mcg, alternatively from about 50 mcg to about 125 mcg of vitamin K. In certain embodiments, the formulations contain bioactive peptides, vitamin C and one or more of calcium, magnesium, vitamin D, and vitamin K each in the one of the suitable amounts listed. In certain embodiments, the formulations are formulated to deliver the dosages above as a single daily dose either a solid or a liquid. Alternatively, the dosages above maybe provided in the forms of multiple daily doses.

[0060] In certain embodiments, the formulations contain at least the components of formulations A-G shown in the Table below in the amounts listed in the Table. In certain embodiments, the formulations contain at least the components of formulations A-G shown in the Table below and the formulations are formulated to provide a daily dose in the amounts listed in the Table below. Formulations A-G may also include 106 ～ 1011 cfu of probiotics and / or from about 1 g to about 20 g of botanicals, such as e.g., Rhizoma drynariae.

[0061] In some embodiments, the formulations are liquid. The liquid formulations are formulated to provide bioactive collage peptides, vitamin C, and the other components of the formulations in the amounts described above.

[0062] In certain embodiments, the formulations contain bioactive collagen peptides and vitamin C and the ratio of bioactive collagen peptides to vitamin C is at least about 50: 1, alternatively at least 60: 1, alternatively 40-65: 1, alternatively 45-65: 1, alternatively 15: 1, alternatively, 14-15: 1, alternatively about 14-50: 1, alternatively about 13-52: 1, alternatively at least 14-15: 1, alternatively 10-1: 0.2-0.02, alternatively about 500: 1.

[0063] In certain embodiments, the formulations contain bioactive collagen peptides and vitamin C and formulation contain from about 1 g to about 10 g, alternatively from about 0.5 to about 11 g, alternatively from about 2 g to about 8 g, alternatively from about 3 g to about 7 g, alternatively from about 1 g to about 5 g of bioactive collagen peptides and from about 20 mg to about 200 mg, alternatively from about 10 mg to about 100 mg, alternatively from about 50 mg to 150 mg, alternatively from about 20 mg to about 125 mg of vitamin C. The formulations can be solid or liquid.

[0064] In other embodiments, the formulation is a dietary supplement.

[0065] In additional embodiments, the formulations comprises an active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis, calcium and / or vitamin D. In one embodiment, the active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis  is bioactive collagen peptides and vitamin C and the formulation does not contain any additional active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis. In one further embodiment, the formulations comprises: an active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis, wherein the active ingredient is bioactive collagen peptides and vitamin C; calcium; and vitamin D. In one further embodiment, the formulations comprises: an active ingredient capable of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis, wherein the active ingredient consists of bioactive collagen peptides and vitamin C; calcium; and vitamin D.

[0066] Uses of the formulations

[0067] The formulations of the disclosure containing bioactive collagen peptides and vitamin C can support bone growth, restore osteoporosis, and prevent osteoporotic bone formation. The testing shown in Example 1 below establishes that the formulations can treat, reduce, and / or prevent osteoporosis and also prevent osteoporotic bone formation. In addition, formulations of the disclosure provide better efficacy than using bioactive collagen peptides or vitamin C alone.

[0068] Accordingly, another aspect of the disclosure is use of the formulations containing bioactive collagen peptides and vitamin C prevent osteoporotic bone formation, treat, reduce, and / or prevent osteoporosis.

[0069] One embodiment of the disclosure is a method of treating, reducing, and / or preventing osteoporosis in a subject. The method comprises administering a formulation of the disclosure. In certain embodiments, the method includes administering the formulation in an amount effective to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis in a subject. In one embodiment, the method treats osteoporosis. In another embodiment, the method reduces osteoporosis. In another embodiment, the method prevents osteoporosis. As used herein, “preventing osteoporosis” includes prophylactic administration of the formulation. In certain embodiments of the disclosure, the methods include screening for osteoporosis. In other embodiments, the administering includes providing a liquid formulation of the disclosure which is then consumed by the subject. In certain embodiments, the subject is an adult, e.g., thirty years old or older. In further embodiments, the methods include daily administration of the formulation.

[0070] Another embodiment of the disclosure is a method of preventing osteoporotic bone formation. The method includes administering a formulation of the disclosure, e.g., in an amount effective to prevent osteoporotic bone formation. In certain embodiments of the methods, the administering includes providing a liquid formulation of the disclosure which is then consumed by the subject. The subject may be an adult. In one embodiment, the subject is thirty-years or older.

[0071] Another embodiment is use of a formulation of the disclosure in the manufacture of a  medicament to treat to osteoporosis. Yet another embodiment is use of a formulation of the disclosure to treat osteoporosis.

[0072] In certain embodiments, the methods of using and the uses of the formulations of the disclosure are as effective as alendronate sodium. In other embodiments, the combination of bioactive peptide and vitamin C act in synergy to treat, reduce, and / or prevent osteoporosis and / or prevent osteoporotic bone formation.

[0073] Kits

[0074] In another embodiment, the disclosure is directed to a kit containing a formulation as disclosed herein. The kit may optionally include instructions for use.

[0075] In certain embodiments of the disclosure, the kit contains a liquid formulation disclosed herein filled in a bottle and optionally instructions for use. In other embodiments, the formulations of the disclosure are in the form of a pill, tablet, or capsule and the kits includes a bottle containing the pill, tablet, or capsule. In other embodiments, the formulations of the disclosure are in the form of a pill, tablet, or capsule and the kits includes a blister package containing the pill, tablet, or capsule.

[0076] Without further description, it is believed that one of ordinary skill in the art can, using the preceding description and the following illustrative examples, make and utilize the present invention and practice the claimed methods. The following working examples, therefore, specifically point out the preferred embodiments of the present invention, and are not to be construed as limiting in any way the remainder of the disclosure.

[0077] Examples

[0078] Example 1: Impact of bioactive collagen peptides and vitamin C on osteoporosis

[0079] Existing dietary ingredients (vitamin C and collagen peptide) are believed to have some health benefits on collagen formation in our body, which can link to bone health. However, the direct health benefit on osteoporosis of the ingredient combination is unknown. Accordingly, the study in this Example investigated the protective effects of cattle bone-derived bioactive collagen peptides (BCPs) combined with vitamin C (VC) on dexamethasone-induced osteoporosis (OP) in zebrafish.

[0080] Methods

[0081] Anti-osteoporosis: dexamethasone-induced osteoporotic zebrafish (wildtype, AB line, 72 hours post-fertilization) were treated with different concentration of BCPs and / or vitamin C for forty-eight hours. BCPs were derived from cattle bone under a specific hydrolysis process with  a signatured peptide pattern and average molecular weight of 5kDa. Vitamin C was extracted from acerola cherry. Alizarin red stained was performed at different time points within 48 hours. The fluorescence intensity of vertebrae was analyzed.

[0082] Prevention of osteoporosis: 24 hours post-fertilization or 48 hours post-fertilization zebrafish (wildtype, AB line) was pre-treated with BCPs and / or vitamin C for 48 hours or 24 hours respectively, followed by a co-treatment of dexamethasone. Alizarin red stained was performed 48 hours after co-treatment. Fluorescence intensity of vertebrae was analyzed. A control group (wildtype, AB line, without any treatment) , a model group (wildtype, AB line, treated with dexamethasone) and a group with alendronate sodium (5 μg / mL) as positive control were set up in both sets.

[0083] Results

[0084] Dexamethasone treatment significantly reduced the fluorescence intensity of zebrafish vertebrae, while alendronate sodium effectively restored dexamethasone-induced bone loss.

[0085] Anti-osteoporosis: compared with the control group, both BCPs and vitamin C treatment significantly increased the fluorescence intensity of vertebrae (p<0.05) . The protective effects were observed to be dose-dependent and better achieved when BCPs combined with vitamin C, suggesting a synergized effect of BCPs and vitamin C.

[0086] Prevention of osteoporosis: compared to unpretreated groups, pre-treatment of BCPs and vitamin C showed a trend (p=0.16) of recovering the fluorescence intensity of vertebrae in zebrafish treated with dexamethasone.

[0087] Specifically, it was observed that BCPs synergized with vitamin C to improve dexamethasone-induced osteoporosis in zebrafish (see FIG. 1A and FIG. 1B) . Compared with the control group, both BCPs and vitamin C treatment significantly increased the fluorescence intensity of vertebrae (p<0.05) . Furthermore, the protective effects were dose-dependent and better achieved when BCPs combined with vitamin C, suggesting a synergized effect of BCPs and vitamin C.

[0088] In addition, vitamin C accelerated BCPs’ protective effect on dexamethasone-induced bone loss in zebrafish (see FIG. 2A and FIG. 2B) . Protective effect on bone loss was observed in both BCPs &BCPs +VC group as early as 48 hours after dexamethasone treatment. Better protective effect on dexamethasone-induced bone loss was achieved in BCPs + VC group than in BCPs group at every timepoint. The BCPs +VC group recovered same content of boss loss earlier than BCPs group during treatment (BCPs + VC 12 hours vs. BCPs 24 hours; BCPs + VC 24 hours vs. BCPs 36 hours) .

[0089] Additionally, BCPs + vitamin C pre-treatment showed a trend to prevent bone loss in  dexamethasone-treated zebrafish (see FIG. 3A and FIG. 3B) . Pre-treatment of BCPs and vitamin C showed a trend (p=0.16) of recovering the fluorescence intensity of vertebrae in zebrafish treated with dexamethasone. Furthermore, the treatment with the combination of BPCs and vitamin C was almost as effective as treatment with alendronate sodium.

[0090] The testing in this example demonstrated that bioactive collagen peptides synergized with vitamin C to improve dexamethasone-induced osteoporosis in zebrafish. Specifically, the combination of bioactive collagen peptides and vitamin C was verified to have superior efficacy that the single ingredients in dexamethasone-induced osteoporotic zebrafish. The observed effects were on par with the osteoporosis treatment drug alendronate, in restoring from osteoporosis and preventing formation of osteoporotic bones.

[0091] Example 2: Conversion of Tested Dosage to Dosage in Humans

[0092] In Example 1, various combinations of bioactive collagen peptides and vitamin C were evaluated in a zebrafish model. These dosages equate to the following dosages in a human.

[0093] While the invention has been described and illustrated herein by references to various specific materials, procedures, and examples, it is understood that the invention is not restricted to the particular combinations of material and procedures selected for that purpose. Numerous variations of such details can be implied as will be appreciated by those skilled in the art. It is intended that the specification and examples be considered as exemplary, only, with the true scope and spirit of the invention being indicated by the following claims. All references, patents, and patent applications referred to in this application are herein incorporated by reference in their entirety.

[0094] EMBODIMENTS

[0095] The invention provides also the following non-limiting embodiments.

[0096] Embodiment 1. A formulation comprising bioactive collagen peptides and vitamin C, wherein the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to effective treat, reduce, and / or prevent osteoporosis.

[0097] Embodiment 2. The formulation of embodiment 1, wherein the formulation comprises a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C.

[0098] Embodiment 3. The formulation of embodiments 1 or 2, wherein the bioactive collagen peptides have an average molecular weight of 500 to 20,000 Daltons.

[0099] Embodiment 4. The formulation of any one of embodiments 1 to 3, wherein the bioactive collagen peptides are derived from bone.

[0100] Embodiment 5. The formulation of any one of embodiments 1 to 4, wherein the vitamin C is extracted from a fruit.

[0101] Embodiment 6. The formulation of embodiment 5, wherein the vitamin C is extracted from a cherry.

[0102] Embodiment 7. The formulation of any one of embodiments 1 to 6, further comprising calcium, magnesium, vitamin D, and / or vitamin K.

[0103] Embodiment 8. The formulation of embodiment 7, wherein the formulation comprises from about 10 mg to about 600 mg of calcium, from about 10 mg to about 400 mg of magnesium, from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D, and / or from about 10 mcg to about 200 mcg of vitamin K.

[0104] Embodiment 9. The formulation of embodiment 8, wherein the formulation comprises calcium and vitamin D.

[0105] Embodiment 10. The formulation of embodiment 9, wherein the formulation comprises from about 10 mg to about 600 mg of calcium and from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D.

[0106] Embodiment 11. The formulation of any one of embodiments 1 to 10, wherein the formulation is gluten-free.

[0107] Embodiment 12. The formulation of any one of embodiments 1 to 11, further comprising an acidity regulator.

[0108] Embodiment 13. The formulation of embodiment 12, wherein the acidity regulator is citric acid.

[0109] Embodiment 14. The formulation of any one of embodiments 1 to 13, further comprising a natural flavoring.

[0110] Embodiment 15. The formulation of any one of embodiments 1 to 14, further comprising a sweetener.

[0111] Embodiment 16. The formulation of any one of embodiments 1 to 15, wherein the formulation is sugar-free.

[0112] Embodiment 17. The formulation of any one of embodiments 1 to 16, wherein the formulation comprises a 50: 1 ratio of bioactive collagen peptides to vitamin C.

[0113] Embodiment 18. The formulation of any one of embodiments 1 to 17, wherein the formulation comprises from about 1 g to about 10 g of bioactive collagen peptides and from about 20 to about 200 mg of vitamin C.

[0114] Embodiment 19. The formulation of embodiment 18, wherein the formulation further comprises 106 ～ 1011 cfu of probiotics and / or from about 1 to about 20 g of botanicals.

[0115] Embodiment 20. The formulation of embodiment 19, wherein the formulation comprises Rhizoma drynariae.

[0116] Embodiment 21. The formulation of any one of embodiments 1 to 20, wherein the formulation is liquid formulation.

[0117] Embodiment 22. The formulation of any one of embodiments 1 to 20, wherein the formulation is a solid formulation.

[0118] Embodiment 23. A kit comprising the formulation of any one of embodiments 1 to 20 and optionally instructions for use.

[0119] Embodiment 24. A kit comprising the liquid formulation of embodiment 21 filled in a bottle and optionally instructions for use.

[0120] Embodiment 25. Use of a formulation of any one of embodiments 1 to22 in the manufacture of a medicament for treating osteoporosis.

[0121] Embodiment 26. Use of a formulation of any one of embodiments 1 to 22 to treat osteoporosis.

[0122] Embodiment 27. A method of treating, preventing, or reducing osteoporosis comprising administering a formulation of any one of embodiments 1 to 22 to a subject.

[0123] Embodiment 28. The method of embodiment 27, wherein the subject is an adult.

[0124] Embodiment 29. The method of embodiments 27 or 28, wherein the method includes daily administering of the formulation.

[0125] Embodiment 30. A method of preventing osteoporotic bone formation comprising administering a formulation of any one of embodiments 1 to 22 to a subject.

[0126] Embodiment 31. The method of embodiment 30, wherein the subject is an adult.

[0127] Embodiment 32. The method of embodiments 30 or 31, wherein the method includes daily administering of the formulation.

Claims

1.A formulation comprising bioactive collagen peptides and vitamin C, wherein the bioactive collagen peptides and vitamin C are present in an amount to effective treat, reduce, and / or prevent osteoporosis.2.The formulation of claim 1, wherein the formulation comprises a synergistic amount of the bioactive collagen peptides and vitamin C.3.The formulation of claims 1 or 2, wherein the bioactive collagen peptides have an average molecular weight of 500 to 20,000 Daltons.4.The formulation of any one of claims 1 to 3, wherein the bioactive collagen peptides are derived from bone.5.The formulation of any one of claims 1 to 4, wherein the vitamin C is extracted from a fruit.6.The formulation of claim 5, wherein the vitamin C is extracted from a cherry.7.The formulation of any one of claims 1 to 6, further comprising calcium, magnesium, vitamin D, and / or vitamin K.8.The formulation of claim 7, wherein the formulation comprises from about 10 mg to about 600 mg of calcium, from about 10 mg to about 400 mg of magnesium, from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D, and / or from about 10 mcg to about 200 mcg of vitamin K.9.The formulation of claim 8, wherein the formulation comprises calcium and vitamin D.10.The formulation of claim 9, wherein the formulation comprises from about 10 mg to about 600 mg of calcium and from about 5 IU to about 600 IU of vitamin D.11.The formulation of any one of claims 1 to 10, wherein the formulation is gluten-free.12.The formulation of any one of claims 1 to 11, further comprising an acidity regulator.13.The formulation of claim 12, wherein the acidity regulator is citric acid.14.The formulation of any one of claims 1 to 13, further comprising a natural flavoring.15.The formulation of any one of claims 1 to 14, further comprising a sweetener.16.The formulation of any one of claims 1 to 15, wherein the formulation is sugar-free.17.The formulation of any one of claims 1 to 16, wherein the formulation comprises a 50: 1  ratio of bioactive collagen peptides to vitamin C.18.The formulation of any one of claims 1 to 17, wherein the formulation comprises from about 1 g to about 10 g of bioactive collagen peptides and from about 20 to about 200 mg of vitamin C.19.The formulation of claim 18, wherein the formulation further comprises 106 ～ 1011 cfu of probiotics and / or from about 1 to about 20 g of botanicals.20.The formulation of claim 19, wherein the formulation comprises Rhizoma drynariae.21.The formulation of any one of claims 1 to 20, wherein the formulation is liquid formulation.22.The formulation of any one of claims 1 to 20, wherein the formulation is a solid formulation.23.A kit comprising the formulation of any one of claims 1 to 20 and optionally instructions for use.24.A kit comprising the liquid formulation of claim 21 filled in a bottle and optionally instructions for use.25.Use of a formulation of any one of claims 1 to 22 in the manufacture of a medicament for treating osteoporosis.26.Use of a formulation of any one of claims 1 to 22 to treat osteoporosis.27.A method of treating, preventing, or reducing osteoporosis comprising administering a formulation of any one of claims 1 to 22 to a subject.28.The method of claim 27, wherein the subject is an adult.29.The method of claims 27 or 28, wherein the method includes daily administering of the formulation.30.A method of preventing osteoporotic bone formation comprising administering a formulation of any one of claims 1 to 22 to a subject.31.The method of claim 30, wherein the subject is an adult.32.The method of claims 30 or 31, wherein the method includes daily administering of the formulation.

Images