Macrocyclic compound, preparation methods and medicinal uses thereof

Abstract

Compounds of formula (I' ) useful as specific target inhibitor, the preparation method thereof, pharmaceutical compositions comprising the compounds, and the pharmaceutical uses for the treatment of specific target-mediated diseases or disorders are disclosed.

Description

MACROCYCLIC COMPOUND, PREPARATION METHODS AND MEDICINAL USES THEREOFFIELD OF THE INVENTION

[0001] The present invention belongs to the field of medicine, and relates to macrocyclic compounds, preparation methods thereof, pharmaceutical compositions comprising the compounds, and medical uses thereof.

[0002] BACKGROUD OF THE INVENTION

[0003] Kirsten Rat Sarcoma 2 Viral Oncogene Homolog ( “KRas” ) is a small GTPase and a member of the Ras family of oncogenes. KRas serves as a molecular switch cycling between inactive (GDP-bound) and active (GTP-bound) states to transduce upstream cellular signals received from multiple tyrosine kinases to downstream effectors to regulate a wide variety of processes, including cellular proliferation (e.g., see Alamgeer et al., (2013) Current Opin Pharmcol. 13: 394-401) .

[0004] The role of activated KRas in malignancy was observed over thirty years ago. Aberrant expression of KRas accounts for up to 20%of all cancers and oncogenic KRas mutations that stabilize GTP binding and lead to constitutive activation of KRas and downstream signaling have been reported in 25 -30%of lung adenocarcinomas, (e.g., see Samatar and Poulikakos (2014) Nat Rev Drug Disc 13 (12) : 928-942) . Single nucleotide substitutions that result in missense mutations at codons 12 and 13 of the KRas primary amino acid sequence comprise approximately 40%of these KRas driver mutations in lung adenocarcinoma. KRAS G12C mutation is present in 25.0%of all pancreatic ductal adenocarcinoma patients, 13.3%of all colorectal carcinoma patients, 10.1%of all rectal carcinoma patients, 4.1%of all non-small cell lung carcinoma patients and 1.7%of all small cell lung carcinoma patients (e.g., see The AACRProject GENIE Consortium, (2017) Cancer Discovery; 7 (8) : 818-831. Dataset Version 4) .

[0005] The well-known role of KRas in malignancy and the discovery of these frequent mutations in KRas in various tumor types made KRas a highly attractive target of the pharmaceutical industry for cancer therapy. Notwithstanding thirty years of large-scale discovery efforts to patent of WO 2021 / 041671 develop inhibitors of KRas for treating cancer, no KRas inhibitor has yet demonstrated sufficient safety and / or efficacy to obtain regulatory approval.

[0006] Compounds that inhibit KRas activity are still highly desirable and under investigation, including those that disrupt effectors such as guanine nucleotide exchange factors (e.g., see Sun etal., (2012) Agnew Chem IntEd Engl. 51 (25) : 6140-6143) as well recent advances in the covalent targeting of an allosteric pocket ofKRas G12C (e.g., see Ostrem et ah, (2013) Nature 503: 548-551 and Fell et ah, (2018) ACS Med. Chem. Lett. 9: 1230-1234) . Clearly there remains a continued interest and effort to develop inhibitors of KRas, particularly inhibitors of activating KRas mutants, especially KRas Gl2D. Thus, there is a need to develop new KRas G12C inhibitors that demonstrate sufficient efficacy for treating KRas G12C-mediated cancer.SUMMARY OF THE INVENTION

[0007] The invention disclosed in this document presents a new scaffold that inhibits KRAS G12C selectively. The compounds offer an advantage of a distinct chemotype, which has the potential to deliver a KRAS G12C inhibitor with improved physiochemical properties.

[0008] The present invention, in one aspect, provides a compound of formula of formula (I’) , (I’ -A) or (I’ -B) , or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof,

[0009] or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein,

[0010] X is N or CH;

[0011] represents a double or single bond;

[0012] R3 is -CH3 or -CD3;

[0013] R0 is C3-6cycloalkyl or -OCHF2;

[0014] each R1, R7 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, SF5 and the following groups unsubstituted or optionally substituted with 1, 2, 3 or more Rp: hydroxyl, cyanoalkyl, C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C2-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, C1-C6 haloalkoxy, C1-C6 halo-alkylthio, -O-C3-C8 cylcoalkyl, -S-C3-C8 cylcoalkyl, C3-C8 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing on or two heteroatoms selected from N, O and S;

[0015] each Rp is identical or different, and is independently selected from H, deuterium, halogen, OH, deuterated hydroxy, CN, NO2, oxo (═O) , thio (═S) , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy;

[0016] each R2 is independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, cyano, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, -S (O) 2H, -S (O) 2-alkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl and hydroxyalkyl; preferably, selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl;

[0017] Ring A is selected from the group consisting of cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, optionally substituted with 1, 2, 3 or 4 R6, wherein

[0018] R6 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, alkyl, deuterated alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl; wherein the cycloalkyl and the heterocyclyl are saturated or partially unsaturated; wherein the alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, amino, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl in R6 are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 R6a, wherein R6a is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, oxo (=O) ; preferably, R6 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl, SF5;

[0019] L2 is selected from the group consisting of bond, C (O) , CR3aR3b, *C=R3d, *C=NR3e, O, S, NR3f; *represents the attachment point to the parental structure;

[0020] R3a and R3b are each independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, cyano, amino, C3-C6 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing 1, 2, 3, 4 or 5 heteroatoms selected from N, O and S, aryl, heteroaryl;

[0021] or R3a and R3b together with the atom to which they are attached form a cycloalkyl, heterocyclyl, optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 substituents selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino;

[0022] R3d is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl;

[0023] R3e is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino;

[0024] R3f is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl;

[0025] L4 is selected from the group consisting of C (O) , CH2;

[0026] J is selected from CH2, CH, C (O) ;

[0027] L5 is selected from the group consisting of CH2, C (O) ;

[0028] R4 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, and C1-C3 hydroxyalkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino, SF5;

[0029] R5 is selected from the group consisting of (i) hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, SF5; (ii) cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, -alkyl-heterocyclyl, wherein the alkyl, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, -alkyl-heterocyclyl are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq;

[0030] or R4 and R5 together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered heterocyclyl containing 1, 2, 3, 4 or 5 of heteroatoms selected from N, O or S, or 3-6 membered cycloalkyl, wherein the cycloalkyl, heterocyclyl is optionally substituted with 1, 2, 3.4, or 5 Rq;

[0031] each Rq is independently selected from the group consisting of absent, hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, -C0-6alkylene-S (O) 2H, -C0-6alkylene-S (O) 2-alkyl, amino, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, alkyl-C (O) -, alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, alkylcarbonyl, SF5, cycloalkyl, heterocyclyl, cycloalkyloxy, aryl, heteroaryl, methylene (=CH2) , oxo (=O) , wherein the alkyl, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, amino, HC (O) -, alkyl-C (O) -, alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, alkylcarbonyl, cycloalkyl, heterocyclyl, cycloalkyloxy, aryl, heteroaryl, methylene (=CH2) are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rr; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;

[0032] each Rr is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, cyano, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, -S (O) 2H, -S (O) 2-alkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl and hydroxyalkyl; preferably, selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl;

[0033] each n1, n2, n3, n4 is independently selected from 0, 1, 2, 3 or 4;

[0034] provided that the compound is not:

[0035] In some embodiment, the compound is of formula (II’ ) , (II’ -A) or (II’ -B) :

[0036] In some embodiment, the compound as described above, wherein, Ring A is selected from the group consisting of phenyl, C3-C8 cycloalkyl or 5-8 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N or O, 5-8 membered heteroaryl, optionally substituted with 1, 2, 3 or 4 substituents selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 al koxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 alkylamino, C1-C3 alkylcyano and C1-C3 hydroxyalkyl, wherein, the cycloalkyl and the heterocyclyl are saturated or partially unsaturated; preferably,

[0037] Ring A is selected from the group consisting of optionally substituted with 1, 2, 3 or 4 substituents selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 alkylamino, C1-C3 alkylcyano and C1-C3 hydroxyalkyl; more preferably, ring A is selected from the group consisting of

[0038] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R2 is H.

[0039] In some embodiment, the compound as described above, wherein, L2 is selected from the group consisting of bond, C=O, CF2, C-OH, *C (F) CH3, *C (OH) CH3, *C=CH2, *C=NH, *C=N-OH, *C-O-CH3, *O, *S,  *NCH3; preferably, L2 is C=O.

[0040] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R7 is H.

[0041] In some embodiment, the compound of formula (III’ ) , (III’ -A) or (III’ -B) :

[0042] In some embodiment, the compound of formula (IV’ ) , (IV’ -A) or (IV’ -B) :

[0043] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R6 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, F, Cl, Br, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl, SF5; preferably R6 is F, Cl, or Br.

[0044] In some embodiment, the compound as described above, wherein, each R1 is independently selected from the group consisting of (i) hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, cyanoalkyl, C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C2-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, C1-C6 haloalkoxy, C1-C6 halo-alkylthio; (ii) -O-C3-C8 cylcoalkyl, -S-C3-C8 cylcoalkyl, C3-C8 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing on or two heteroatoms selected from N, O and S; preferably,

[0045] each R1 is independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 cyanoalkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy; more preferably,

[0046] R1 is methyl or -CH2OCH3.

[0047] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R5 is selected from the group consisting of branched or linear C1-C3 alkyl, C3-C8 cycloalkyl or 4-10 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N, O or S; 5-8 membered heteroaryl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N or O; optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq; wherein

[0048] each Rq is independently selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, oxo (=O) , C1-C3 alkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 cyanoalkyl, C1-C3 aminoalkyl, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C10 heterocyclyl; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl; preferably Rq is independently selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 cyanoalkyl, C1-C3 aminoalkyl, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C10 heterocyclyl; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;

[0049] wherein, the cycloalkyl or the heterocyclyl is saturated or partially unsaturated.

[0050] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R4 and R5 together with the atom to which they are attached form 3-7 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N, O or S; where the heterocyclyl is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq;

[0051] each Rq is independently selected from the group of deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 cyanoalkyl, C1-C3 aminoalkyl, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C10 heterocyclyl; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;

[0052] wherein, the cycloalkyl or the heterocyclyl is saturated or partially unsaturated;

[0053] preferably, R4 and R5 together with the atom to which they are attached form a 3-6 membered heterocyclyl, the heterocyclyl is selected from the group consisting of  optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq, Rq is selected from the group consisting of -CH3, -CN,  -OCH3, -CH2OCH3,

[0054] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R5 is selected from the group consisting of -C (CH3) 2,  or C1-3 alkyl; preferably, R5 is selected from the group consisting of -C (CH3) 2,

[0055] optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq; wherein Rq is selected from the group consisting of -CH3, -CN,  -OCH3, -CH2OCH3,  C (=O) , or preferably Rq is selected from the group consisting of -CH3, -CN,  -OCH3, -CH2OCH3,

[0056] In some embodiment, the compound as described above, wherein, R5 is selected from the group consisting of C1-3 alkyl  -C (CH3) 2,

[0057] In some embodiment, the compound as described above, wherein, the compound is selected from table A.

[0058] The present invention also provides a pharmaceutical composition, comprising a compound of any formula or embodiment in the present invenion, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, the amount of the compound is about 0.1%～95%by weight of free base; preferably, is about 0.5%～85%by weight of free base; more preferably, is about 1%～70%by weight of free base; preferably, is about 1%～60%by weight of free base; more preferably, is about 1-15%by weight of free base; or is about 15-30%by weight of free base; or is abou 30-45%by weight of free base; or is about 15-30%by weight of free base; or is abou 45-60%by weight of free base.

[0059] The present invention also provides a pharmaceutical composition, comprising a therapeutically effective amount of a compound of any of formula above, or a tautomer, cis-or trans isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, together with one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients.

[0060] In some embodiments, in above stated pharmaceutical composition, the amount of the compound, tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or pharmaceutically acceptable salts thereof is about 0.1-95%by weight of free base; preferably, is about 5-70%, e.g. 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%.

[0061] In some embodiment, above stated pharmaceutical composition is formulated as a tablet, capsule, liquid form or injection form.

[0062] In some embodiment, in above stated pharmaceutical composition, the amount of the compound, tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or pharmaceutically acceptable salts thereof is about 1-1000mg; preferably, is about 1-500mg, more preferably, is about 1mg, 2mg, 3mg, 5mg, 10mg, 20mg, 40mg, 50mg, 60mg, 80mg, 100mg, 200mg, 300mg, 400m or 500mg.

[0063] In some embodiment, the compound, tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or pharmaceutically acceptable salts thereof is can be administered by any suitable route of administration, e.g. oral, parenteral, buccal, sublingual, nasal, rectal, intrathecal or transdermal administration, and the pharmaceutical compositions adapted accordingly.

[0064] In some embodiment, the compound, tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or pharmaceutically acceptable salts is formulated as a soild or liquid form, e.g. syrups, suspension, emulsion, tablets, capsules, powders, granules or lozenges.

[0065] In another aspect, the present invention relates to a method for treatment of disease mediated by KRAS mutation, comprising administering to a subject in need thereof an effective amount of a compound as described above, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, or the pharmaceutical composition comprising the same.

[0066] In another aspect, the present invention relates to a method for treating cancer comprising administering to a subject in need thereof an effective amount of a compound as described above, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, or the pharmaceutical composition comprising the same.

[0067] In an embodiment, the cancer is associated with KRAS G12C (ON) mutation.

[0068] In a preferred embodiment, the cancer is selected from the group consisting of Cardiac: sarcoma (angiosarcoma, fibrosarcoma, rhabdomyosarcoma, liposarcoma) , myxoma, rhabdomyoma, fibroma, lipoma and teratoma; Lung: bronchogenic carcinoma (squamous cell, undifferentiated small cell, undifferentiated large cell, adenocarcinoma) , alveolar (bronchiolar) carcinoma, bronchial adenoma, sarcoma, lymphoma, chondromatous hamartoma, mesothelioma; Gastrointestinal: esophagus (squamous cell carcinoma, adenocarcinoma, leiomyosarcoma, lymphoma) , stomach (carcinoma, lymphoma, leiomyosarcoma) , pancreas (ductal adenocarcinoma, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, carcinoid tumors, vipoma) , small bowel (adenocarcinoma, lymphoma, carcinoid tumors, Kaposi's sarcoma, leiomyoma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma) , large bowel (adenocarcinoma, tubular adenoma, villous adenoma, hamartoma, leiomyoma) ; Genitourinary tract: kidney (adenocarcinoma, Wilm's tumor (nephroblastoma) , lymphoma, leukemia) , bladder and urethra (squamous cell carcinoma, transitional cell carcinoma, adenocarcinoma) , prostate (adenocarcinoma, sarcoma) , testis (seminoma, teratoma, embryonal carcinoma, teratocarcinoma, choriocarcinoma, sarcoma, interstitial cell carcinoma, fibroma, fibroadenoma, adenomatoid tumors, lipoma) ; Liver: hepatoma (hepatocellular carcinoma) , cholangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiosarcoma, hepatocellular adenoma, hemangioma; Biliary tract: gall bladder carcinoma, ampullary carcinoma, cholangiocarcinoma; Bone: osteogenic sarcoma (osteosarcoma) , fibrosarcoma, malignant fibrous histiocytoma, chondrosarcoma, Ewing's sarcoma, malignant lymphoma (reticulum cell sarcoma) , multiple myeloma, malignant giant cell tumor chordoma, osteochronfroma (osteocartilaginous exostoses) , benign chondroma, chondroblastoma, chondromyxofibroma, osteoid osteoma and giant cell tumors; Nervous system: skull (osteoma, hemangioma, granuloma, xanthoma, osteitis deformans) , meninges (meningioma, meningiosarcoma, gliomatosis) , brain (astrocytoma, medulloblastoma, glioma, ependymoma, germinoma (pinealoma) , glioblastoma multiform, oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, congenital tumors) , spinal cord neurofibroma, meningioma, glioma, sarcoma) ; Gynecological: uterus (endometrial 'carcinoma (serous cystadenocarcinoma, mucinous cystadenocarcinoma, unclassified carcinoma) , granulosa-thecal cell tumors, Sertoli-Leydig cell tumors, dysgerminoma, malignant teratoma) , vulva (squamous cell carcinoma, intraepithelial carcinoma, adenocarcinoma, fibrosarcoma, melanoma) , vagina (clear cell carcinoma, squamous cell carcinoma, botryoid sarcoma (embryonal rhabdomyosarcoma) , fallopian tubes (carcinoma) ; Hematologic: blood (myeloid leukemia (acute and chronic) , acute lymphoblastic leukemia, chronic lymphocytic leukemia, myeloproliferative diseases, multiple myeloma, myelodysplastic syndrome) , Hodgkin's disease, non-Hodgkin's lymphoma (malignant lymphoma) ; Skin: malignant melanoma, basal cell carcinoma, squamous cell carcinoma, Kaposi's sarcoma, moles dysplastic nevi, lipoma, angioma, dermatofibroma, keloids, psoriasis; and Adrenal glands: neuroblastoma.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0069] Given below are definitions of terms used in this application. Any term not defined herein takes the normal meaning as the skilled person would understand the term.

[0070] “Alkyl” refers to a saturated aliphatic hydrocarbon group including C1-C20 straight chain and branched chain groups. Preferably an alkyl group is an alkyl having 1 to 12, sometimes preferably 1 to 6, sometimes more preferably 1 to 4, carbon atoms. Representative examples include, but are not limited to methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl, 1, 1-dimethyl propyl, 1, 2-dimethyl propyl, 2, 2-dimethyl propyl, 1-ethyl propyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2-methylpropyl, 1, 1, 2-trimethylpropyl, 1, 1-dimethylbutyl, 1, 2-dimethylbutyl, 2, 2-dimethylbutyl, 1, 3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl, 2, 3-dimethylbutyl, n-heptyl, 2-methylhexyl, 3-methylhexyl, 4-methylhexyl, 5-methylhexyl, 2, 3-dimethylpentyl, 2, 4-dimethylpentyl, 2, 2-dimethylpentyl, 3, 3-dimethylpentyl, 2-ethylpentyl, 3-ethylpentyl, n-octyl, 2, 3-dimethylhexyl, 2, 4-dimethylhexyl, 2, 5-dimethylhexyl, 2, 2-dimethylhexyl, 3, 3-dimethylhexyl, 4, 4-dimethylhexyl, 2-ethylhexyl, 3-ethylhexyl, 4-ethylhexyl, 2-methyl-2-ethylpentyl, 2-methyl-3-ethylpentyl, n-nonyl, 2-methyl-2-ethylhexyl, 2-methyl-3-ethylhexyl, 2, 2-diethylpentyl, n-decyl, 3, 3-diethylhexyl, 2, 2-diethylhexyl, and the isomers of branched chain thereof. More preferably an alkyl group is a lower alkyl having 1 to 6 carbon atoms. Representative examples include, but are not limited to, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl, 1, 1-dimethylpropyl, 1, 2-dimethylpropyl, 2, 2-dimethylpropyl, 1-ethylpropyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2-methylpropyl, 1, 1, 2-trimethylpropyl, 1, 1-dimethylbutyl, 1, 2-dimethylbutyl, 2, 2-dimethylbutyl, 1, 3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl, 2, 3-dimethylbutyl, etc. The alkyl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) can be substituted at any available connection point, preferably the substituent group (s) is 1, 2, 3, 4 or 5 substituents independently selected from the group consisting of alkyl, halogen, alkoxy, alkenyl, alkynyl, alkylsulfo, alkylamino, thiol, hydroxy, nitro, cyano, amino, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic, cycloalkylthio, heterocylic alkylthio and oxo group.

[0071] “Alkenyl” refers to an alkyl defined as above that has at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond, for example, vinyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-, 2-, or 3-butenyl, etc., preferably C2-20 alkenyl, more preferably C2-12 alkenyl, and most preferably C2-6 alkenyl. The alkenyl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of alkyl, halogen, alkoxy, alkenyl, alkynyl, alkylsulfo, alkylamino, thiol, hydroxy, nitro, cyano, amino, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic, cycloalkylthio, heterocylic alkylthio and oxo group.

[0072] “Alkynyl” refers to an alkyl defined as above that has at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon triple bond, for example, ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 1-, 2-, or 3-butynyl etc., preferably C2-20 alkynyl, more preferably C2-12 alkynyl, and most preferably C2-6 alkynyl. The alkynyl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0073] “Alkylene” refers to a saturated linear or branched aliphatic hydrocarbon group, wherein having 2 residues derived by removing two hydrogen atoms from the same carbon atom of the parent alkane or two different carbon atoms. The straight or branched chain group containing 1 to 20 carbon atoms, preferably has 1 to 12 carbon atoms, more preferably 1 to 6 carbon atoms. Non-limiting examples of alkylene groups include, but are not limited to, methylene (-CH2-) , 1, 1-ethylene (-CH (CH3) -) , 1, 2-ethylene (-CH2CH2) -, 1, 1-propylene (-CH (CH2CH3) -) , 1, 2-propylene (-CH2CH (CH3) -) , 1, 3-propylene (-CH2CH2CH2-) , 1, 4-butylidene (-CH2CH2CH2CH2-) etc. The alkylene group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of selected from alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0074] “Alkenylene” refers to an alkylene defined as above that has at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond, preferably C2-20 alkenylene, more preferably C2-12 alkenylene, and most preferably C2-6 alkenylene. Non-limiting examples of alkenylene groups include, but are not limited to, -CH=CH-, -CH=CHCH2-, -CH=CHCH2CH2-, -CH2CH=CHCH2-etc. The alkenylene group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of selected from alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0075] “Alkynylene” refers to an alkynyl defined as above that has at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon triple bond, preferably C2-20 alkynylene, more preferably C2-12 alkynylene, and most preferably C2-6 alkynylene. Non-limiting examples of alkenylene groups include, but are not limited to, -CH≡CH-, -CH≡CHCH2-, -CH≡CHCH2CH2-, -CH2CH≡CHCH2-etc. The alkynylene group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of selected from alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0076] The term "alkoxyalkyl, " as used herein, refers to an alkoxy group attached through its oxygen atom to an alkyl group, which is attached to the parent molecular moiety through a carbon atom, for example, methoxymethyl group (-CH2OCH3) . For example, C2-4 alkoxyalkyl" denotes alkoxyalkyl groups with two to four carbon atoms, such as -CH2OCH3, -CH2CH2OCH3, -CH2OCH2CH3, and -CH2CH2OCH2CH3.

[0077] “Cycloalkyl” refers to a saturated and / or partially unsaturated monocyclic or polycyclic hydrocarbon group having 3 to 20 carbon atoms, preferably 3 to 12 carbon atoms, more preferably 3 to 10 carbon atoms, and most preferably 3 to 8 carbon atoms or 3 to 6 carbon atoms. Representative examples of monocyclic cycloalkyls include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl, cyclohexenyl, cyclohexadienyl, cycloheptyl, cycloheptatrienyl, cyclooctyl, etc. Polycyclic cycloalkyl includes a cycloalkyl having a spiro ring, fused ring or bridged ring.

[0078] “Spiro Cycloalkyl” refers to a 5 to 20 membered polycyclic group with rings connected through one common carbon atom (called a spiro atom) , wherein one or more rings can contain 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but none of the rings has a completely conjugated pi-electron system. Preferably a spiro cycloalkyl is 6 to 14 membered, and more preferably 7 to 10 membered. According to the number of common spiro atoms, a spiro cycloalkyl is divided into mono-spiro cycloalkyl, di-spiro cycloalkyl, or poly-spiro cycloalkyl, and preferably refers to a mono-spiro cycloalkyl or di-spiro cycloalkyl, more preferably 4-membered / 4-membered, 4-membered / 5-membered, 4-membered / 6-membered, 5-membered / 5-membered, or 5-membered / 6-membered mono-spiro cycloalkyl. Representative examples of spiro cycloalkyl include, but are not limited to the following substituents:

[0079] “Fused Cycloalkyl” refers to a 5 to 20 membered polycyclic hydrocarbon group, wherein each ring in the system shares an adjacent pair of carbon atoms with another ring, wherein one or more rings can contain 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but none of the rings has a completely conjugated pi-electron system. Preferably, a fused cycloalkyl group is 6 to 14 membered, more preferably 7 to 10 membered. According to the number of membered rings, fused cycloalkyl is divided into bicyclic, tricyclic, tetracyclic or polycyclic fused cycloalkyl, and preferably refers to a bicyclic or tricyclic fused cycloalkyl, more preferably 5-membered / 5-membered, or 5-membered / 6-membered bicyclic fused cycloalkyl. Representative examples of fused cycloalkyls include, but are not limited to, the following substituents:

[0080] “Bridged Cycloalkyl” refers to a 5 to 20 membered polycyclic hydrocarbon group, wherein every two rings in the system share two disconnected carbon atoms. The rings can have 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but have no completely conjugated pi-electron system. Preferably, a bridged cycloalkyl is 6 to 14 membered, and more preferably 7 to 10 membered. According to the number of membered rings, bridged cycloalkyl is divided into bicyclic, tricyclic, tetracyclic or polycyclic bridged cycloalkyl, and preferably refers to a bicyclic, tricyclic or tetracyclic bridged cycloalkyl, more preferably a bicyclic or tricyclic bridged cycloalkyl. Representative examples of bridged cycloalkyls include, but are not limited to, the following substituents:

[0081] The cycloalkyl can be fused to the ring of an aryl, heteroaryl or heterocyclic alkyl, wherein the ring bound to the parent structure is cycloalkyl. Representative examples include, but are not limited to indanylacetic, tetrahydronaphthalene, benzocycloheptyl and so on. The cycloalkyl is optionally substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, substituents independently selected from the group consisting of alkyl, halogen, alkoxy, alkenyl, alkynyl, alkylsulfo, alkylamino, thiol, hydroxy, nitro, cyano, amino, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic, cycloalkylthio, heterocylic alkylthio and oxo group.

[0082] “Heterocyclyl” refers to a 3 to 20 membered saturated and / or partially unsaturated monocyclic or polycyclic hydrocarbon group having one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, heteroatoms selected from the group consisting of N, O, and S (O) m (wherein m is 0, 1, or 2) as ring atoms, but excluding -O-O-, -O-S-or -S-S-in the ring, the remaining ring atoms being C. Preferably, heterocyclyl is a 3 to 12 membered having 1 to 4 heteroatoms; more preferably a 3 to 10 membered having 1 to 3 heteroatoms; more preferably a 4 to 8 membered having 1 to 3 heteroatoms; most preferably a 5 to 6 membered having 1 to 2 heteroatoms. Representative examples of monocyclic heterocyclyls include, but are not limited to, oxetanyl, azabutyl, pyrrolidyl, piperidyl, piperazinyl, morpholinyl, sulfo-morpholinyl, homopiperazinyl, and so on. Polycyclic heterocyclyl includes the heterocyclyl having a spiro ring, fused ring or bridged ring.

[0083] “Spiro heterocyclyl” refers to a 5 to 20 membered polycyclic heterocyclyl with rings connected through one common carbon atom (called a spiro atom) , wherein said rings have one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, heteroatoms selected from the group consisting of N, O, and S (O) m (wherein m is 0, 1 or 2) as ring atoms, the remaining ring atoms being C, wherein one or more rings can contain 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but none of the rings has a completely conjugated pi-electron system. Preferably a spiro heterocyclyl is 6 to 14 membered, and more preferably 7 to 10 membered. According to the number of common spiro atoms, spiro heterocyclyl is divided into mono-spiro heterocyclyl, di-spiro heterocyclyl, or poly-spiro heterocyclyl, and preferably refers to mono-spiro heterocyclyl or di-spiro heterocyclyl, more preferably 4-membered / 4-membered, 4-membered / 5-membered, 4-membered / 6-membered, 5-membered / 5-membered, or 5-membered / 6-membered mono-spiro heterocyclyl. Representative examples of spiro heterocyclyl include, but are not limited to the following substituents:

[0084] “Fused Heterocyclyl” refers to a 5 to 20 membered polycyclic heterocyclyl group, wherein each ring in the system shares an adjacent pair of carbon atoms with the other ring, wherein one or more rings can contain 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but none of the rings has a completely conjugated pi-electron system, and wherein said rings have one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, heteroatoms selected from the group consisting of N, O, and S (O) p (wherein p is 0, 1, or 2) as ring atoms, the remaining ring atoms being C. Preferably a fused heterocyclyl is 6 to 14 membered, and more preferably 7 to 10 membered. According to the number of membered rings, fused heterocyclyl is divided into bicyclic, tricyclic, tetracyclic or polycyclic fused heterocyclyl, preferably refers to bicyclic or tricyclic fused heterocyclyl, more preferably 5-membered / 5-membered, or 5-membered / 6-membered bicyclic fused heterocyclyl. Representative examples of fused heterocyclyl include, but are not limited to, the following substituents:

[0085] “Bridged Heterocyclyl” refers to a 5 to 14 membered polycyclic heterocyclic alkyl group, wherein every two rings in the system share two disconnected atoms, the rings can have 1, 2, 3, 4 or 5 double bonds, but have no completely conjugated pi-electron system, and the rings have 1, 2, 3, 4 or 5 heteroatoms selected from the group consisting of N, O, and S (O) m (wherein m is 0, 1, or 2) as ring atoms, the remaining ring atoms being C. Preferably a bridged heterocyclyl is 6 to 14 membered, and more preferably 7 to 10 membered. According to the number of membered rings, bridged heterocyclyl is divided into bicyclic, tricyclic, tetracyclic or polycyclic bridged heterocyclyl, and preferably refers to bicyclic, tricyclic or tetracyclic bridged heterocyclyl, more preferably bicyclic or tricyclic bridged heterocyclyl. Representative examples of bridged heterocyclyl include, but are not limited to, the following substituents:

[0086] The ring of said heterocyclyl can be fused to the ring of an aryl, heteroaryl or cycloalkyl, wherein the ring bound to the parent structure is heterocyclyl. Representative examples include, but are not limited to the following substituents:

[0087] etc.

[0088] The heterocyclyl is optionally substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, group (s) independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio, heterocylic alkylthio.

[0089] “Aryl” refers to a 6 to 14 membered all-carbon monocyclic ring or a polycyclic fused ring (a "fused" ring system means that each ring in the system shares an adjacent pair of carbon atoms with another ring in the system) group, and has a completely conjugated pi-electron system. Preferably aryl is 6 to 10 membered, such as phenyl and naphthyl, most preferably phenyl. The aryl can be fused to the ring of heteroaryl, heterocyclyl or cycloalkyl, wherein the ring bound to parent structure is aryl.

[0090] Representative examples include, but are not limited to, the following substituents:

[0091] The aryl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, substituents independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0092] “Heteroaryl” refers to an aryl system having 1 to 4 heteroatoms selected from the group consisting of O, S and N as ring atoms and having 5 to 14 annular atoms. Preferably a heteroaryl is 5-to 10-membered, more preferably 5-or 6-membered, for example, thiadiazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, imidazolyl, triazolyl, thiazolyl, furyl, thienyl, pyridyl, pyrrolyl, N-alkyl pyrrolyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, imidazolyl, tetrazolyl, and the like. The heteroaryl can be fused with the ring of an aryl, heterocyclyl or cycloalkyl, wherein the ring bound to parent structure is heteroaryl. Representative examples include, but are not limited to, the following substituents:

[0093] The heteroaryl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent group (s) is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, substituents independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio, heterocylic alkylthio and -NR9R10.

[0094] “Alkoxy” refers to both an -O- (alkyl) and an -O- (unsubstituted cycloalkyl) group, wherein the alkyl is defined as above. Representative examples include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, cyclopropyloxy, cyclobutyloxy, cyclopentyloxy, cyclohexyloxy, and the like. The alkoxyl can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent is preferably one or more, sometimes preferably one to five, sometimes more preferably one to three, substituents independently selected from the group consisting of alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylsulfo, alkylamino, halogen, thiol, hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclic alkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxyl, heterocylic alkoxyl, cycloalkylthio and heterocylic alkylthio.

[0095] “Bond” refers to a covalent bond using a sign of “-” .

[0096] "Hydroxyalkyl" refers to an alkyl group substituted by a hydroxy group, wherein alkyl is as defined above.

[0097] “Hydroxy” refers to an -OH group.

[0098] “Halogen” refers to fluoro, chloro, bromo or iodo atoms.

[0099] “Amino” refers to a -NH2 group.

[0100] “Cyano” refers to a -CN group.

[0101] “Nitro” refers to a -NO2 group.

[0102] “Oxo group” refers to a =O group.

[0103] “Carboxyl” refers to a -C (O) OH group.

[0104] “Alkoxycarbonyl” refers to a -C (O) O (alkyl) or (cycloalkyl) group, wherein the alkyl and cycloalkyl are defined as above.

[0105] “Optional” or “optionally” means that the event or circumstance described subsequently can, but need not, occur, and the description includes the instances in which the event or circumstance may or may not occur. For example, “the heterocyclic group optionally substituted by an alkyl” means that an alkyl group can be, but need not be, present, and the description includes the case of the heterocyclic group being substituted with an alkyl and the heterocyclic group being not substituted with an alkyl.

[0106] “Substituted” refers to one or more hydrogen atoms in the group, preferably up to 5, more preferably 1 to 3 hydrogen atoms, independently substituted with a corresponding number of substituents. It goes without saying that the substituents exist in their only possible chemical position. The person skilled in the art is able to determine if the substitution is possible or impossible without paying excessive efforts by experiment or theory. For example, the combination of amino or hydroxyl group having free hydrogen and carbon atoms having unsaturated bonds (such as olefinic) may be unstable.

[0107] A “pharmaceutical composition” refers to a mixture of one or more of the compounds described in the present invention or physiologically / pharmaceutically acceptable salts or prodrugs thereof and other chemical components such as physiologically / pharmaceutically acceptable carriers and excipients. The purpose of a pharmaceutical composition is to facilitate administration of a compound to an organism, which is conducive to the absorption of the active ingredient and thus displaying biological activity.

[0108] “Pharmaceutically acceptable salts” refer to salts of the compounds of the invention, such salts being safe and effective when used in a mammal and have corresponding biological activity.

[0109] SYNTHESIS PROCEDURES

[0110] Synthesis of (8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone, 375-Bii (INT-10)

[0111] Step 1: (8-bromoindolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone, 375-Bi 3-bromo-2-methylpyridine (91.8 g, 534 mmol) was added to a solution 2-bromo-1- (3, 4, 5-trifluorophenyl) ethan-1-one (45.0 g, 178 mmol) in THF (250 mL) and the reaction heated to 80 ℃ for 16 h under N2 atmosphere. After cooling, heptane (500 mL) was added and the resultant precipitate collected via filtration, washing with further heptane and dried in vacuum to give the pyridinium intermediate (57 g, 75.58 %yield) . 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.02-9.00 (m, 1H) , 8.97-8.96 (m, 1H) , 8.12-8.09 (m, 2H) , 8.06-8.03 (m, 1H) , 6.45 (s, 2H) , 2.80 (s, 3H) .

[0112] A mixture of DMF (78.4 g, 1.07 mol) and dimethyl sulfate (135 g, 1.07 mol) was heated to 80 ℃ for 2 h. After cooling, this solution was added to a separate solution of the pyridinium intermediate (57.0 g, 134 mmol) in DMF and the reaction stirred at room temperature for 30 min. Then diisopropylethyl amine (139 g, 1.07 mol) was added and the resulting suspension was stirred for 30 min. Water (2.42 g, 134 mmol) was added and the precipitate was collected via filtration, and washed with water. This solid was re-crystallized from boiling ethyl acetate (200 mL) to give 375-Bi (30.5 g, 64.2%yield) as a yellow solid. Mass calc C15H7BrF3NO for 352.97, 354.96 found: 354.0, 356.0 (M+H) + ESI. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.77-9.75 (m, 1H) , 7.75-7.71 (m, 3H) , 7.56-7.55 (m, 1H) , 7.11-7.09 (m, 1H) , 6.78-6.77 (m, 1H) .

[0113] Step 2: (8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone, 375-Bii

[0114] A solution of 375-Bi (10 g, 28 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (8.61 g, 33.9 mmol) , potassium acetate (5.54 g, 56.5 mmol) and 1, 1'-Bis(diphenylphosphino) ferrocene-palladium (II) dichloride dichloromethane complex (2.29 g, 2.82 mmol) in THF (10 mL) was evacuated and N2 back-filled before heating to reflux for 4 h. The mixture was diluted with ethyl acetate and water, extracted once with ethyl acetate and the organic layer was washed with brine, dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to give a residue. The residue was purified by column chromatography to give 375-Bii (7.1 g, 65 %yield) .

[0115] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.75-7.73 (m, 1H) , 7.70-7.66 (m, 2H) , 7.46-7.44 (m, 1H) , 7.19-7.15 (m, 1H) , 7.03-7.02 (m, 1H) , 3.84 (s, 4H) , 1.00 (s, 6H) .

[0116] Synthesis of Example 1A

[0117] Step 1: 5-bromo-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (1-01)

[0118] To a solution of 5-bromo-1, 3-difluoro-2-nitrobenzene (CAS: 147808-42-2, 30.0 g, 126 mmol) in tetrahydrofuran (150 mL) was added 30%methylamine in methanol (13.7 g, 132 mmol) at 0℃. The solution was then stirred at 0 ℃ for 1 h and at room temperature for 16 h. The reaction was concentrated under reduced pressure and purified by silica gel column chromatography with a 0-30%ethyl acetate in petroleum ether gradient to afford 5-bromo-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (29.3 g, 118 mmol, 93 %yield) as a brown solid.

[0119] Mass calcd for C7H6BrFN2O2 247.96. Found 249.01 [M+H] + ESI.

[0120] Step 2: 5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (1-02)

[0121] To a solution of 5-bromo-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (2.70 g, 10.9 mmol) and cyclopropylboronic acid (1.40 g, 16.4 mmol) in 1, 4-dioxane (50 mL) and water (5 mL) was added Pd (dppf) Cl2 (900 mg, 1.09 mmol) and potassium phosphate (6.90 g, 32.8 mmol) . The reaction was then stirred at 100 ℃ under a nitrogen atmosphere for 5 h. The reaction was treated with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (50 mL) . The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to afford 5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (2.65 g, 12.6 mmol, 115 %yield) as a brown oil.

[0122] Mass calcd for C10H11FN2O2 210.08. Found 211.13 [M+H] + ESI.

[0123] Step 3: 4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (1-03)

[0124] To a solution of 5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (34.0 g, 111 mmol) in N, N-dimethylformamide (170 mL) was added N-bromosuccinimide (23.7 g, 133 mmol) at 0 ℃ and then stirred at room temperature for 16 h. The reaction was diluted with ethyl acetate (500 mL) and was washed with brine (250 mL×3) . The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to afford 4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (32.3 g, 111 mmol, 100 %yield) as a brown solid.

[0125] Mass calcd for C10H10BrFN2O2 287.99. Found 289.03 [M+H] + ESI.

[0126] Step 4: N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (1-04)

[0127] To a solution of 4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (20.0 g, 69.2 mmol) in toluene (400 mL) was added 2-methoxyacetyl chloride (37.5 g, 346 mmol) and stirred at 80 ℃ for 5 h. The reaction was diluted with ethyl acetate (500 mL) and washed with brine (300 mL) . The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to afford N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (19.7 g, 54.7 mmol, 79 %yield) as a brown solid.

[0128] Mass calcd for C13H14BrFN2O4 360.01. Found 362.90 [M+H] + ESI.

[0129] Step 5: N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (1-05)

[0130] To a solution of N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (5.00 g, 13.8 mmol) in N, N-dimethylformamide (15.0 mL) was added ammonia in methanol (7 M, 15.0 mL) . The mixture was stirred at 60 ℃ in a sealed tube for 5 h. After cooling to room temperature, the reaction was diluted with ethyl acetate (100 mL) and washed with brine (50 mL×3) . The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to afford N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (4.40 g, 12.2 mmol, 88 %yield) as a yellow solid.

[0131] Mass calcd for C13H16BrN3O4 357.03. Found 359.95 [M+H] + ESI.

[0132] Step 6: 5-bromo-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine (1-06)

[0133] To a solution of N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -2-methoxy-N-methylacetamide (3.00 g, 8.37 mmol) in acetic acid (15.0 mL) was added iron powder (2.30 g, 41.9 mmol) and stirred at 60 ℃ for 5 h. The reaction was treated with water (50 mL) and ethyl acetate (50 mL) , and adjusted to pH 8-9 with saturated aqueous sodium carbonate. After filtration, the organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to afford 5-bromo-6-cyclopropyl-2-(methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine (2.10 g, 6.77 mmol, 81 %yield) as a yellow solid.

[0134] Mass calcd for C13H16BrN3O 309.05. Found 310.01 [M+H] + ESI.

[0135] Step 7: (8- (4-amino-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (1-07)

[0136] To a solution of 5-bromo-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine (9.00 g, 29.1 mmol) and [8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) indolizin-3-yl] - (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (14.0 g, 34.9 mmol) in tetrahydrofuran (180 mL) and water (36 mL) was added Sphos Pd G3 [CAS: 1445085-82-4] (2.30 g, 2.91 mmol) and potassium phosphate (9.90 g, 46.7 mmol) . The reaction mixture was stirred at 70 ℃ overnight under a nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was diluted with brine (100 mL) and extracted with ethyl acetate (200 mL×3) . The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography with a 0 to 6%methanol in dichloromethane gradient to give compound (8- (4-amino-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (19.1 g, 37.9 mmol, 130%yield) as a yellow solid.

[0137] Mass calcd for C28H23F3N4O2 504.18 found 505.51 [M+H] + ESI

[0138] Step 8: (8- (4-bromo-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (1-08)

[0139] To a solution of compound (8- (4-amino-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (9.00 g, 17.8 mmol) in N, N-dimethylformamide (90.0 mL) was added copper (II) bromide (1.99 g, 8.92 mmol) and tert-butyl nitrite (2.76 g, 26.8 mmol) at 0 ℃. The mixture was warmed to room temperature and stirred overnight until completion. The reaction mixture was them diluted with ethyl acetate (500 mL) and washed with brine (200 mL×3) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and then concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography 1 to 2%methanol in dichloromethane gradient to afford (8- (4-bromo-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (4.00 g, 7.04 mmol, 39%yield) as a yellow solid.

[0140] Mass calcd for C28H21BrF3N3O2 567.08. Found 568.21 [M+H] + ESI.

[0141] Step 9: tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-5- (3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1-09)

[0142] To a solution of (8- (4-bromo-6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (5.50 g, 9.80 mmol) and tert-butyl (2- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) allyl) carbamate (CAS: 1202794-01-1, 3.30 g, 11.8 mmol) in 1, 4-dioxane (80 mL) and water (27 mL) was added Pd (dppf) Cl2 (800 mg, 0.98 mmol) and sodium carbonate (2.1 g, 19.60 mmol) . The mixture was stirred at 100 ℃ for 16 h under a nitrogen atmosphere. Upon completion, the reaction was treated with water (200 mL) and extracted with dichloromethane (200 mL) . The organic layer was concentrated under reduced pressure to afford tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-5- (3-(3,4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (7.70 g, 11.94 mmol, 122 %yield) as a brown solid.

[0143] Mass calcd for C36H35F3N4O4 644.26. Found 645.16 [M+H] + ESI.

[0144] Step 10: tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1-10)

[0145] To a solution of tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-5- (3-(3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (3.00 g, 4.65 mmol) in N, N-dimethylformamide (60.0 mL) was added N-bromosuccinimide (828 mg, 4.65 mmol) , and the mixture was stirred at room temperature for 1 h. The reaction was diluted with ethyl acetate (300 mL) and washed with brine (100 mL×3) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressire to afford tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (3.16 g, 4.37 mmol, 93%yield) as a brown solid. Mass calcd for C36H34BrF3N4O4 722.17. Found 723.20 [M+H] + ESI.

[0146] Step 11: tert-butyl (2- (5- (3- (4-amino-3, 5-difluorobenzoyl) -1-bromoindolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1-11)

[0147] To a solution of tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1.54 g, 2.13 mmol) in 1, 4-dioxane (30.0 mL) was added 25%ammonia hyrdoxide (60 mL) , and the mixture was stirred at 120℃ in a sealed tube for 2 days. The reaction mixture was diluted with water (200 mL) and brine (100 mL) , and extracted with dichloromethane  / methanol (20: 1, 200 mL) . The organic layer was washed by brine (50 mL) and dried over sodium sulfate. After filtration, the filtrate was concentrated under reduced pressire to afford tert-butyl (2- (5- (3- (4-amino-3, 5-difluorobenzoyl) -1-bromoindolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1.34 g, 1.86 mmol, 87%yield) as a brown solid.

[0148] Mass calcd for C36H36BrF2N5O4 719.19. Found 720.22 [M+H] + ESI.

[0149] Step 12: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone (1-12)

[0150] To a solution of compound tert-butyl (2- (5- (3- (4-amino-3, 5-difluorobenzoyl) -1-bromoindolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1.34 g, 1.86 mmol) in dichloromethane (24.0 mL) was added 4M hydrochloric acid in ethyl acetate (16 mL) , and the mixture was stirred at room temperature for 16 h. The reaction was concentrated after completions. The residue was diluted with dichloromethane  / methanol (20: 1, 100 mL) and washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50 mL) and brine (50 mL) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and then concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography with a 1 to 5%methanol in dichloromethane gradient to afford compound (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone (738 mg, 1.19 mmol, 64%yield) as a brown solid.

[0151] Mass calcd for C31H28BrF2N5O2 619.14. Found 620.12 [M+H] + ESI.

[0152] Step 13: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9-methyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (1-13)

[0153] To a solution of (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-2- (methoxymethyl) -1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone (738 mg, 1.19 mmol) in N, N-dimethylformamide (15.0 mL) was added copper (I) iodide (113 mg, 595 μmol) , diethylsalicylamide (138 mg, 714 μmol) and cesium carbonate (775 mg, 2.38 mmol) in a glove-box. The mixture was stirred in a sealed tube at 120℃ for 16 h. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (100 mL) and washed with brine (50 mL×3) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and then concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography with a 5%methanol in dichloromethane gradient to afford (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9-methyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (340 mg, 630 μmol, 53%yield) as a brown solid.

[0154] Mass calcd for C31H27F2N5O2 539.21. Found 540.15 [M+H] + ESI.

[0155] Step 14: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (1-14)

[0156] To a solution of (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9-methyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (3.50 g, 6.48 mmol) in N, N-dimethylformamide (35.0 mL) was added cesium carbonate (4.22 g, 13.0 mmol) and iodomethane (1.84 g, 13.0 mmol) . The mixture was stirred at room temperature for 16 h. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (500 mL) and washed with brine (250 mL×3) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography with a 3%methanol in dichloromethane to afford the racemic (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (1.00 g, 1.81 mmol, 27%yield) as an orange solid.

[0157] Mass calcd for C32H29F2N5O2 553.23.554.25 [M+H] + ESI.

[0158] Step 8: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone, 1-INT-ISO-1 and 1-INT-ISO-2

[0159] Analytical Separation Method

[0160] The racemate was separated using a Waters UPC2 analytical SFC (SFC-H) ; Column: ChiralPak AD, 50×4.6 mm I. D., 3 μm; Mobile phase: A for CO2 and B for isopropanol (0.05%diethylamine) ; Gradient: B 5-40%; flow rate: 3.0 ml / min; Back pressure: 100 bar; Column temperature: 35℃; wavelength: 220 nm.

[0161] Analytical separation by SFC afforded 1-INT-ISO-1 (RT=3.157 min) and 1-INT-ISO-2 (RT=3.556 min) .

[0162] Preparative Separation Method

[0163] The racemate was separated using a Waters 150 preparative SFC (SFC-26) ; Column: ChiralPak AD, 250×30mm I. D., 10μm; Mobile phase: A for CO2 and B for isopropanol; Gradient: B 35%; flow rate: 120 ml / min; Back pressure: 100 bar; Column temperature: 38℃; wavelength: 340 nm; Cycle time: 4 min; Sample preparation; compound was dissolved in 20 ml methanol / dichloromethane; Injection: 2 ml per injection; Work-up: after separation, the fractions were dried using rotary evaporator to afford the desired isomers.

[0164] (1.00 g) was separated by preparative SFC to afford 1-INT-ISO-1 (236 mg, 24%yield, yellow solid) and 1-INT-ISO-2 (300 mg, 30%yield, yellow solid) .

[0165] 1-INT-ISO-1

[0166] Mass calcd for C32H29F2N5O2 553.23.554.25 [M+H] + ESI.

[0167] 1-INT-ISO-2

[0168] Mass calcd for C32H29F2N5O2 553.23.554.25 [M+H] + ESI.

[0169] Step 9: (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (1-15)

[0170] To a solution of (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone, 1-INT-ISO-1 (200 mg, 0.360 mmol) and (E) -4-chlorobut-2-enoic acid (87.0 mg, 0.720 mmol) in pyridine (2.00 mL) was added phosphoryl chloride (277 mg, 1.81 mmol) at 0 ℃. Then the mixture was stirred at 0 ℃ for 0.5 h. The reaction was treated with saturated aqueous sodium bicarbonate (20 mL) and extracted with dichloromethane (20 mL) . The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and then concentrated under reduced pressure to afford (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2,6-difluorophenyl) but-2-enamide (350 mg, 0.53 mmol, 148 %yield) as a black solid.

[0171] Mass calcd for C36H32ClF2N5O3 655.22. Found 656.15 [M+H] + ESI.

[0172] Step 9: (R, E) -N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (tetrahydrofuran-2-yl) methyl) amino) but-2-enamide (Example 1A)

[0173] A mixture of (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (315 mg, 0.48 mmol) , (R) - (tetrahydrofuran-2-yl) methanamine (cas: 7202-43-9, 111 mg, 1.10 mmol) , potassium phosphate (509 mg, 2.40 mmol) and potassium iodide (239 mg, 1.44 mmol) in N, N-dimethylformamide (3.00 mL) was stirred at 50 ℃ for 4 h. The mixture was purified by preparative HPLC (Morphling Triart-C18, 10 μm, 30*250 mm, eluent A: 0.1%TFA in H2O, eluent B: MeCN, gradient: 10 to 25%B in 3 min, 25 to 90%B in 35 min, 25 ℃, flow rate: 30 mL / min) to afford (R, E) -N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (tetrahydrofuran-2-yl) methyl) amino) but-2-enamide (78.6 mg, 0.11 mmol, 23%yield) as a yellow solid.

[0174] Mass calcd for C41H42F2N6O4 720.32. Found 721.31 [M+H] + ESI.

[0175] 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 10.02 (d, J = 6.9 Hz, 1H) , 7.60 (s, 1H) , 7.51 (d, J = 7.9 Hz, 2H) , 7.38 (d, J = 7.1 Hz, 1H) , 7.24 (s, 1H) , 7.19-7.15 (m, 1H) , 6.99-6.95 (m, 1H) , 6.61 (d, J = 15.4 Hz, 1H) , 5.40 (s, 1H) , 5.06 (s, 1H) , 4.99 (s, 2H) , 4.21-4.19 (m, 1H) , 4.09 (s, 3H) , 3.97-3.80 (m, 5H) , 3.58 (s, 3H) , 3.40 (d, J = 12.3 Hz, 1H) , 3.24-3.06 (m, 2H) , 2.69 (s, 3H) , 2.16-2.00 (m, 4H) , 1.70-1.66 (m, 1H) , 1.18-1.10 (m, 1H) , 0.92-0.83 (m, 3H) .

[0176] Synthesis of Example 8A

[0177] A mixture of (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-

[0178] tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (1-15) (136 mg, 207 μmol) , N-tert-butylmethylamine (54.0 mg, 623 μmol) , potassium iodide (103 mg, 623 μmol) , and potassium phosphate (220 mg, 1.04 mmol) in N, N-dimethylformamide (10.0 mL) was stirred at 50 ℃ for 2.5 h. Upon completion of the reaction, the crude mixture was purified using preparative HPLC (Morphling Triart-C18, 10μm, 30*250 mm, eluent A: 0.1%TFA in H2O, eluent: B: MeCN, gradient: 10%to 98%B in 35 min, 25℃, flow rate: 30 mL / min) to afford compound (E) -4- (Tert-butyl (methyl) amino) -N- (4- (7-cyclopropyl-10- (methoxymethyl) -9, 14-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (58.0 mg, 82 μmol, 39.5%) as a brown solid.

[0179] Mass calcd for C41H44F2N6O3 706.34. Found 707.37 [M+H] + ESI.

[0180] 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 10.02 (dd, J = 7.0, 0.9 Hz, 1H) , 7.58 (s, 1H) , 7.55-7.48 (m, 2H) , 7.42-7.35 (m, 1H) , 7.24 (s, 1H) , 7.17 (t, J = 7.1 Hz, 1H) , 7.04-6.94 (m, 1H) , 6.70 (d, J = 15.3 Hz, 1H) , 5.39 (s, 1H) , 5.05 (s, 1H) , 4.98 (s, 2H) , 4.37 (dd, J =14.1, 5.1 Hz, 1H) , 4.08 (s, 3H) , 3.86-3.81 (m , 2H) , 3.58 (s, 3H) , 3.39 (d, J = 12.4 Hz, 1H) , 2.86 (s, 3H) , 2.68 (s, 3H) , 2.09-2.02 (m, 1H) , 1.51 (s, 9H) , 1.17-1.11 (m, 1H) , 0.94-0.81 (m, 3H) .

[0181] Synthesis of Example 32A

[0182] Step 1: N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide, 5-1

[0183] 4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-N-methyl-2-nitroaniline (1600 g, 5.53 mol) and acetyl chloride (2172 g, 27.67 mol) were mixed in Toluene (8 L) . The reaction mixture was heated to 80 ℃ for 2 h till the reaction completed. The mixture was cooled to RT and charge ethyl acetate, and quenched with saturated Na2CO3 solution. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude. The crude was triturated with a mixture solvent of ethyl acetate (320 mL) and petroleum ether (3200 mL) at RT for 16 h. The precipitate was filtered, and the filtered cake was dried to give N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide (1719 g, purity: 99.7%, 93.8%yield) .

[0184] Mass calcd for C12H12BrFN2O3 330.00. Found 331.00 [M+H] + ESI.

[0185] 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 6.70 (d, J = 1.8 Hz, 1H) , 3.13 (s, 3H) , 2.20 (s, 1H) , 1.84 (s, 3H) , 1.30-1.12 (m, 2H) , 0.85-0.71 (m, 2H) .

[0186] Step 2: N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide, 6-1

[0187] To a solution of N- (4-bromo-5-cyclopropyl-3-fluoro-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide (250 g, 755 mmol) in THF (1250 mL) was added 7M NH3 in MeOH (750 mL, 5.25 mol) . The reaction mixture was then heated to 60 ℃ with over night and was monitored for completion using HPLC. The mixture was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude product N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide (235.4 g, 94.5%purity, 95%yield) .

[0188] Mass calcd for C12H14BrN3O3 327.02. Found 328.11 [M+H] + ESI.

[0189] Step 3: 5-bromo-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine, Bz-4

[0190] To a solution of N- (3-amino-4-bromo-5-cyclopropyl-2-nitrophenyl) -N-methylacetamide (1567 g, 4.77 mol) , 4, 4'-Bipyridine (219.4 g, 1.40 mol) in DMF (9.4 L) .The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. Adjust to 0℃, B2(OH) 4 (1708 g, 19.05 mol) was added portion-wise below 10℃. The reaction mixture was heated to RT for 16 h. HPLC showed full consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The mixture was partitioned between ethyl acetate and brine and separated. The organic layer was washed once more with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude product 5-bromo-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine (1130 g, 96.5%purity, 84.5%yield) .

[0191] Mass calcd for C12H14BrN3 279.04. Found 280.09 [M+H] + ESI.

[0192] 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 6.35 (s, 1H) , 4.75 (s, 2H) , 3.63 (s, 3H) , 2.58 (s, 3H) , 2.23-2.15 (m, 1H) , 1.10 -0.95 (m, 2H) , 0.73-0.69 (m, 2H) .

[0193] Step 4: (8- (4-amino-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone, A

[0194] 5-bromo-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-amine (540 g, 1.93 mol) , (8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (INT10, 811.8g, 2.02 mol) , K3PO4 (653.7g, 3.08mol) , and Sphos Pd G3 (52.6g, 67 mmol) were dissolved in THF (10.8 L) and H2O (3.24 L) . The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. The reaction mixture was heated to 70℃ and stirred for 5 h. The reaction was monitored for completion using HPLC analysis. The mixture was cooled to RT and partitioned between ethyl acetate and brine. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude. The crude was triturated with a mixture solvent of ethyl acetate (1.3L) and petroleum ether (1.3L) at RT for 3 h. The precipitate was filtered, and the filtered cake was dried to give (8- (4-amino-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (2200g, 86.4%purity, 92.1%yield) .

[0195] Mass calcd for C27H21F3N4O 474.17. Found 475.20 [M+H] + ESI.

[0196] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.89 (ddd, J = 5.7, 2.3, 0.8 Hz, 1H) , 7.74 (dd, J = 8.2, 6.7 Hz, 2H) , 7.41 (d, J = 4.8 Hz, 1H) , 7.39 –7.29 (m, 3H) , 6.07 (dd, J = 4.8, 0.8 Hz, 1H) , 4.74 (d, J = 1.3 Hz, 2H) , 3.87 (s, 3H) , 3.35 (s, 3H) , 1.56 –1.44 (m, 1H) , 0.82 –0.54 (m, 4H) .

[0197] Step 5: (8- (6-cyclopropyl-4-iodo-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone, B

[0198] (8- (4-amino-6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (500 g, 1.05 mol) and diiodomethane (1410g, 5.27mol) were mixed in acetonitrile (10 L) . The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. Tert-Butyl nitrite (163g, 1.55 mol) was added below 30℃. The reaction mixture was then heated to 65 ℃ with 1 h and was monitored for completion using HPLC. The mixture was concentrated under reduced pressure to give a crude residue. The crude was purified by silica gel column chromatography to give (8- (6-cyclopropyl-4-iodo-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (832.4g, 97.2%purity, 38.5%yield) .

[0199] Mass calcd for C27H19F3IN3O 585.05. Found 586.17 [M+H] + ESI.

[0200] 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 10.01 (dd, J = 6.6, 1.5 Hz, 1H) , 7.52 (t, J =7.0 Hz, 2H) , 7.29 (d, J = 4.0 Hz, 1H) , 7.25 –7.12 (m, 2H) , 6.97 (s, 1H) , 6.08 (d, J = 4.8 Hz, 1H) , 3.77 (s, 3H) , 2.69 (s, 3H) , 1.64 (ddd, J = 13.6, 8.4, 5.5 Hz, 1H) , 0.82 –0.51 (m, 4H) .

[0201] Step 6: tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-5- (3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate, C

[0202] (8- (6-cyclopropyl-4-iodo-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) indolizin-3-yl) (3, 4, 5-trifluorophenyl) methanone (600 g, 1.02mol) , tert-butyl-N- [2- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) allyl] carbamate (738 g, 2.05mol) , LiOH (85.8g, 2.05mol) , Pd (DCyPF) Cl2 (38.64g, 51.6mmol) were dissolved in 1, 4-dioxane (6 L) and H2O (1.2 L) . The reaction mixture was heated to 70℃ and stirred for 13 h. The reaction was monitored for completion using HPLC analysis. The mixture was cooled to RT and partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude product tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-5- (3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1262 g, purity: 87.9%, assay: 50.4%, 80.1%yield) .

[0203] Mass calcd for C35H33F3N4O3 614.25. Found 615.32 [M+H] + ESI.

[0204] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.84 –9.77 (m, 1H) , 7.75 –7.64 (m, 2H) , 7.36 (d, J = 4.8 Hz, 1H) , 7.21 (d, J = 3.2 Hz, 2H) , 7.15 (s, 1H) , 6.91 (t, J = 5.9 Hz, 1H) , 6.08 (d, J = 4.8 Hz, 1H) , 4.94 (s, 1H) , 4.61 (s, 1H) , 3.89 –3.86 (m, 2H) , 3.76 (s, 3H) , 3.33 (s, 3H) , 1.45 –1.42 (m, J = 7.0 Hz, 1H) , 1.31 (s, 9H) , 0.78 –0.67 (m, 1H) , 0.59 –0.56 (m, 3H) .

[0205] Step 7: tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate, D

[0206] Tert-butyl (2- (6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-5- (3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (630 g, 1.025 mol) , NBS (497 g, 2.77 mol) were dissolved in DMF (3.9 L) . The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. The reaction mixture was stirred at RT for 1 h. HPLC showed full consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The mixture was diluted with ethyl acetate and washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude product tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1328 g, purity: 89.7%, assay: 49.1%, 91.7%yield) .

[0207] Mass calcd for C35H32BrF3N4O3 692.16. Found 693.22 [M+H] + ESI.

[0208] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.89 (d, J = 6.8 Hz, 1H) , 7.71 (t, J = 7.3 Hz, 2H) , 7.52 (s, 1H) , 7.23 (dt, J = 13.9, 6.9 Hz, 2H) , 7.12 (s, 1H) , 6.96 (t, J = 5.9 Hz, 1H) , 4.97 (s, 1H) , 4.70 (s, 1H) , 3.86 (t, J = 8.0 Hz, 2H) , 3.76 (s, 3H) , 3.33 (s, 3H) , 1.47 –1.37 (m, 1H) , 1.31 (s, 9H) , 0.89 –0.77 (m, 1H) , 0.65 –0.46 (m, 3H) .

[0209] Step 8: tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (4- ( (2, 4-dimethoxybenzyl) amino) -3, 5-difluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate, E

[0210] (2- (5- (1-bromo-3- (3, 4, 5-trifluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1320 g, 934 mmol) , 2, 4-dimethoxybenzylamine (568.8g, 3.4 mol) and DIPEA (442.4g, 3.4 mol) were mixed in NMP (6.5 L) . The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. The reaction mixture was stirred at 120℃ for 5 h. After completion, the mixture was cooled to RT partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (4- ( (2, 4-dimethoxybenzyl) amino) -3, 5-difluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1300 g, purity: 85.1%, assay: 57.8%, 95.7%yield) .

[0211] Mass calcd for C44H44BrF2N5O5 839.20. Found 840.22 [M+H] + ESI.

[0212] Step 9: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone, F

[0213] To a solution of tert-butyl (2- (5- (1-bromo-3- (4- ( (2, 4-dimethoxybenzyl) amino) -3, 5-difluorobenzoyl) indolizin-8-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) allyl) carbamate (1290 g, 210 mmol) in dichloromethane (15 L) was added TFA (5.16 L) under 0℃. The reaction mixture was stirred at 0℃ for 5 h. HPLC showed full consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The mixture was partitioned between ethyl acetate and saturated sodium carbonate aqueous solution. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give a crude. The crude was purified by silica gel column chromatography to give a product (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone (403 g, purity: 96.5%, assay: 97.9%, 75.3%yield) .

[0214] Mass calcd C30H26BrF2N5O for 589.13 found: 590.32 (M+H) + ESI.

[0215] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.76 (dd, J = 6.7, 1.4 Hz, 1H) , 7.51 (s, 1H) , 7.40 (dd, J = 7.2, 2.5 Hz, 2H) , 7.14 (dt, J = 7.0, 5.3 Hz, 3H) , 6.07 (s, 2H) , 5.17 (d, J = 1.7 Hz, 1H) , 4.88 (d, J = 1.5 Hz, 1H) , 3.77 (s, 3H) , 3.56 (d, J = 2.8 Hz, 2H) , 3.08 (s, 2H) , 2.54 (s, 3H) , 1.45 –1.42 (m, 1H) , 0.89 –0.79 (m, 1H) , 0.57 –0.55 (m, 3H) .

[0216] Step 10: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone, G

[0217] (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (8- (4- (3-aminoprop-1-en-2-yl) -6-cyclopropyl-1, 2-dimethyl-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -1-bromoindolizin-3-yl) methanone (396 g, 671 mmol) , CuI (63.9 g, 335 mmol) , Cs2CO3 (437.3 g, 1342 mmol) and N, N-diethylsalicylamide (77.8 g, 403 mmol) were dissolved in DMF (4 L) . The mixture was degassed and back filled with nitrogen 3 times. The reaction mixture was heated to 120℃ and stirred for 6 h. The reaction was monitored for completion using HPLC analysis. The mixture was cooled to RT and partitioned between ethyl acetate and ammonium hydroxide. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give a crude product. The crude was triturated with a mixture solvent of dichloromethane (400 mL) and petroleum ether (400 mL) at RT for 2 h. The precipitate was filtered, and the filtered cake was dried to give (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (225 g, purity: 96.2%, assay: 96.4%, 65%yield) .

[0218] Mass calcd for C30H25F2N5O 509.2. Found 510.21 [M+H] + ESI.

[0219] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (dd, J = 7.0, 1.0 Hz, 1H) , 7.36 (dd, J = 7.3, 2.4 Hz, 2H) , 7.16 –7.10 (m, 2H) , 7.07 (s, 1H) , 7.00 (t, J = 7.0 Hz, 1H) , 5.92 (s, 2H) , 5.12 (s, 1H) , 4.73 (s1H) , 4.15 (s, 1H) , 3.77 –3.73 (m, 4H) , 3.57 –3.47 (m, 1H) , 3.33 (s, 3H) , 1.92 –1.81 (m, 1H) , 0.98 –0.87 (m, 1H) , 0.83 –0.61 (m, 3H) .

[0220] Step 11: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone, G’

[0221] To a solution of (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (424 g, 612 mmol) in THF (4.2 L) and anisole (2L) was added (-) -Di-p-toluoyl-L-tartaric acid (710 g, 1.84 mol) . The reaction mixture mixture was stirred at RT for 16 h. The chiral purity was monitored for completion using HPLC analysis . The precipitate was filtered, and the filtered cake was dried to give crude product. The crude was added to saturated sodium carbonate aqueous solution (3.2L) and dichloromethane (6.3L) . The reaction mixture mixture was stirred at RT for 1 h. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give. (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (162 g, purity: 95.2%, chiral purity: 99.1%, assay: 75.1%, 39%yield) .

[0222] Mass calcd for C30H25F2N5O 509.2. Found 510.4 [M+H] + ESI.

[0223] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (dd, J = 7.0, 1.0 Hz, 1H) , 7.36 (dd, J = 7.2, 2.4 Hz, 2H) , 7.17 –7.10 (m, 2H) , 7.07 (s, 1H) , 7.04 –7.01 (m, 1H) , 5.91 (s, 2H) , 5.12 (s, 1H) , 4.74 (s1H) , 4.15 (s, 1H) , 3.74 –3.71 (m, 4H) , 3.57 –3.46 (m, 1H) , 3.32 (s, 3H) , 1.92 –1.80 (m, 1H) , 0.98 –0.88 (m, 1H) , 0.84 –0.62 (m, 3H) .

[0224] Step 12: (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone, H

[0225] (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10-dimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (218 g, 428 mmol) and 36%formaldehyde (107.1 g, 1.28 mol) were dissolved in tetrahydrofuran (2.2 L) . After 10 min, another solution of sodium cyanoborohydride (53.8g, 856 mmol) and zinc chloride (58.3g, 428 mmol) in methanol (480 mL) was added portionwise. The reaction mixture was stirred at RT for 1 h. HPLC showed full consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The reaction mixture was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined and concentrated under reduced pressure to give the crude product. The crude was triturated with MTBE (1 L) at RT for 2 h. The precipitate was filtered, and the filtered cake was dried to give (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (227.6 g, purity: 94.3%, assay: 90%, 94.9%yield) .

[0226] Mass calc for C31H27F2N5O 523.22 found: 524.25 (M+H) + ESI.

[0227] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.77 (dd, J = 7.1, 1.0 Hz, 1H) , 7.38 (dd, J = 7.3, 2.4 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 6.1 Hz, 2H) , 7.10 (s, 1H) , 7.03 (t, J = 7.0 Hz, 1H) , 5.93 (s, 2H) , 5.76 (s, 1H) , 5.09 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 4.69 (d, J = 1.8 Hz, 1H) , 3.74 (s, 3H) , 3.34 (s, 3H) , 3.17 (d, J = 11.5 Hz, 1H) , 2.56 (s, 3H) , 1.93 –1.81 (m, 1H) , 1.01 –0.89 (m, 1H) , 0.87 –0.65 (m, 3H) .

[0228] Step 13: (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide, I

[0229] To a solution of (4-amino-3, 5-difluorophenyl) (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizin-2-yl) methanone (95g, 181.4 mmol) and (E) -4-chlorobut-2-enoic acid (78.7 g, 653.2 mmol) in acetonitrile (1 L) were added T4P (392.2g, 544.3 mmol, 50%weight purity in ethyl acetate) below 5℃. The reaction mixture was stirred at 5℃ for 0.5 h. The base of 4-Methylmorpholine (154.2 g, 1.52 mol) was added. HPLC showed full consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The reaction mixture was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure to give the crude product. The crude product was purified by silica gel column chromatography to give (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2,6-difluorophenyl) but-2-enamide (96.3 g, purity: 98.6%, assay: 97.6%, 89%yield) .

[0230] Mass calc for C35H30N5F2O2Cl for 625.21 found: 626.2 (M+H) + ESI.

[0231] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.07 (s, 1H) , 9.91 (dd, J = 6.9, 1.1 Hz, 1H) , 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.27 (dd, J = 7.2, 1.1 Hz, 1H) , 7.21 –7.07 (m, 3H) , 6.49 (dt, J = 7.0, 1.8 Hz, 1H) , 6.16 (q, J = 6.8 Hz, 1H) , 5.10 (s, 1H) , 4.69 (s, 1H) , 3.74 (s, 4H) , 3.48 –3.40 (m, 2H) , 3.17 (d, J = 11.5 Hz, 1H) , 3.08 (s, 1H) , 2.55 (s, 3H) , 1.85 (ddd, J = 14.0, 8.2, 5.4 Hz, 1H) , 1.24 (s, 1H) , 1.02 –0.91 (m, 1H) , 0.86 –0.66 (m, 3 H) .

[0232] Step 14: (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (1r, 4r) -4-methoxycyclohexyl) amino) but-2-enamide, Example 32A

[0233] To a solution of (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (90.0 g, 143.7 mmol) and trans-4-Methoxycyclo-hexanaMine (56.7 g, 431.2 mmol) in N-Methyl-2-pyrrolidone (900 mL) were added potassium iodide (23.9g, 143.7 mmol) and N, N-Diisopropylethylamine (111.5 g, 862.5 mmol) , and the reaction mixture was stirred for 2 h at 50 ℃. HPLC showed partial consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The mixture was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give the crude product. The crude product was purified by silica gel column chromatography to give the title compound (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (1r, 4r) -4-methoxycyclohexyl) amino) but-2-enamide as a orange solid (72.8 g, purity: 98.2%, assay: 98.8%, 68.9%yield) .

[0234] Mass calc for C42H44N6F2O3 718.54 found: 719.43 (M+H) + ESI.

[0235] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (s, 1H) , 9.91 (d, J = 6.9 Hz, 1H) , 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.27 (d, J = 7.0 Hz, 1H) , 7.19 –7.08 (m, 3H) , 6.88 (dt, J = 15.5, 5.4 Hz, 1H) , 6.40 (d, J = 15.4 Hz, 1H) , 5.10 (s, 1H) , 4.70 (s, 1H) , 3.74 (s, 4H) , 3.49 (d, J =5.3 Hz, 2H) , 3.23 (s, 3H) , 3.18 (d, J = 5.6 Hz, 3H) , 3.14 –3.02 (m, 1H) , 2.55 (s, 3H) , 2.05 –1.79 (m, 6H) , 1.14 (q, J = 9.4, 8.2 Hz, 4H) , 0.96 (dt, J = 8.2, 5.6 Hz, 1H) , 0.86 –0.65 (m, 3H) .

[0236] Synthesis of Example 53A:

[0237] Steps 1～13 are similar to Example 32A.

[0238] Step 14: (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( (3-methyloxetan-3-yl) amino) but-2-enamide, Example 53A

[0239] To a solution of (E) -4-chloro-N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) but-2-enamide (133.6 g, 213.4 mmol) and 3-methyloxetan-3-amine (55.8g, 640.1 mmol) in N-Methyl-2-pyrrolidone (1400 mL) were added potassium iodide (35.4g, 213.4 mmol) and N, N-Diisopropylethylamine (165.5g, 1.28 mol) , and the reaction mixture was stirred for 8 h at 50 ℃. HPLC showed partial consumption of the starting materials and formation of the titled compound. The mixture was partitioned between ethyl acetate and water. The organic layers were combined, washed with brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give the crude product. The crude product was purified by silica gel column chromatography to give the title compound (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( (3-methyloxetan-3-yl) amino) but-2-enamide as a orange red solid (93 g, purity: 98.0%, assay: 93.8%, 64.4%yield) .

[0240] Mass calc for C39H38N6F2O3 676.30 found: 677.33 (M+H) + ESI.

[0241] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (s, 1H) , 9.90 (dd, J = 7.0, 1.2 Hz, 1H) , 7.53 (d, J = 7.9 Hz, 2H) , 7.26 (dd, J = 7.1, 1.2 Hz, 1H) , 7.19 –7.07 (m, 3H) , 6.90 (dt, J = 15.5, 5.0 Hz, 1H) , 6.42 –6.33 (m, 1H) , 5.09 (s, 1H) , 4.69 (d, J = 1.9 Hz, 1H) , 4.47 (d, J = 5.8 Hz, 2H) , 4.20 (d, J = 5.7 Hz, 2H) , 3.73 (d, J = 1.3 Hz, 4H) , 3.38 (t, J = 5.8 Hz, 2H) , 3.17 (d, J = 11.5 Hz, 1H) , 2.64 (t, J = 7.6 Hz, 1H) , 2.54 (s, 3H) , 1.84 (td, J = 8.2, 4.2 Hz, 1H) , 1.39 (s, 3H) , 1.23 (s, 1H) , 0.96 (q, J = 7.9 Hz, 1H) , 0.74 (ddt, J = 22.5, 13.9, 5.4 Hz, 3H) .

[0242] Synthesis of Example 61A&62A:

[0243] General Procedure:

[0244] Step 1: ethyl (1r, 4r) -4-methoxy-1-methylcyclohexane-1-carboxylate (compound 2) ðyl (1s, 4s) -4-methoxy-1-methylcyclohexane-1-carboxylate (compound 2’ )

[0245] To a solution of compound 1 (2.70 g, 14.67 mmol) , tert-butyl (methoxy) dimethylsilane (2.57 g, 17.61 mmol) and FeCl3 (0.24 g, 1.47 mmol) in acetonitrile (30 mL) was stirred at 0 ℃ for 10 min. Then Et3SiH (2.55 g, 22.01 mmol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 1 h. Then the reaction was quenched with NaHCO3 aq (50 mL) and extracted with DCM (200 mL×3) . The combined organic phase was dried over Na2SO4, filtrated and concentrated. The residue was purified with column chromategraphy (SiO2, eluent: EtOAc / petroleum ether =1: 100 to 1: 5) to give the mixture of compound 2 (670 mg, 3.35 mmol, 23%yield) and compound 2’ (1.3 g, 6.50 mmol, 44%yield) as a yellow oil. LCMS: m / z 201.28 [M+H] +.

[0246] Step 2: (1r, 4r) -4-methoxy-1-methylcyclohexane-1-carboxylic acid (compound 3)

[0247] A mixture of compound 2 (0.67 g, 3.35 mmol) and NaOH (0.54 g, 13.40 mmol) in EtOH (7 mL) and water (7 mL) were stirred at 60 ℃ overnight. After cooling to room temperature, the mixture was adjusted pH to 4 and concentrated. The residue was treated with EtOAc (5 mL) and filtrated. The filtrate was concentrated directly to give compound 3 (580 mg, 3.35 mmol, 100%yield) as a yellow oil. LCMS: m / z 173.22 [M+H] +.

[0248] Step 3: (1s, 4s) -4-methoxy-1-methylcyclohexane-1-carboxylic acid (compound 3’)

[0249] A mixture of compound 2’ (1.30 g, 6.50 mmol) and NaOH (1.00 g, 26.00 mmol) in EtOH (13 mL) and water (13 mL) were stirred at 60 ℃ overnight. After cooling to room temperature, the mixture was adjusted pH to 4 and concentrated. The residue was treated with EtOAc (20 mL) and filtrated. The filtrate was concentrated directly to give compound 3’ (1.12 g, 6.50 mmol, 100%yield) as a yellow oil. LCMS: m / z 173.22 [M+H] +.

[0250] Step 4: (1r, 4r) -1-isocyanato-4-methoxy-1-methylcyclohexane (compound 4)

[0251] A mixture of compound 3 (0.58 g, 3.37 mmol) , DPPA (1.00 g, 3.71 mmol) and Et3N (0.44 g, 4.38 mmol) in toluene (10 mL) was stirred at 80 ℃ for 2 h under N2 atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was quenched with NaOH aq (1 M, 10 mL) and extracted with EtOAc (100 mL×3) . The combined organic phase was dried over Na2SO4, filtrated and concentrated. The residue was purified with column chromategraphy (SiO2, eluent: EtOAc / petroleum ether = 1: 100 to 1: 5) to give compound 4 (200 mg, 1.18 mmol, 35%yield) as a yellow oil.

[0252] Step 5: (1s, 4s) -1-isocyanato-4-methoxy-1-methylcyclohexane (compound 4’ )

[0253] A mixture of compound 3’ (0.62 g, 3.60 mmol) , DPPA (1.10 g, 3.97 mmol) and Et3N (0.47 g, 4.68 mmol) in toluene (10 mL) was stirred at 80 ℃ for 2 h under N2 atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was quenched with NaOH aq (1 M, 10 mL) and extracted with EtOAc (100 mL×3) . The combined organic phase was dried over Na2SO4, filtrated and concentrated. The residue was purified with column chromategraphy (SiO2, eluent: EtOAc / petroleum ether = 1: 100 to 1: 5) to give compound 4’ (250 mg, 1.48 mmol, 41%yield) as a yellow oil.

[0254] Step 6: (1r, 4r) -4-methoxy-1-methylcyclohexan-1-amine (compound 5)

[0255] A mixture of compound 4 (0.20 g, 1.18 mmol) and concentrated HCl (0.8 mL) in THF (4 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was concentrated and the residue was treated with Et2O / petroleum ester (1 / 1) . The mixture was filtrated and dried to give compound 5 (140 mg, 0.78 mmol, 66%yield) as a grey solid. LCMS: m / z 144.23 [M+H] +.

[0256] Step 7 (1r, 4r) -4-methoxy-1-methylcyclohexan-1-amine (compound 5’ )

[0257] A mixture of compound 4’ (0.25 g, 1.48 mmol) and Con·HCl (1.1 mL) in THF (5 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was concentrated and the residue was treated with Et2O / petroleum ester (1 / 1) . The mixture was filtrated and dried to give compound 5’ (270 mg, 1.48 mmol, 100%yield) as a white solid. LCMS: m / z 144.23 [M+H] +.

[0258] Step 8 (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (1r, 4r) -4-methoxy-1-methylcyclohexyl) amino) but-2-enamide (compound 61A)

[0259] A mixture of compound 5 (0.13 g, 0.72 mmol) , compound 6 (0.38 g, 0.60 mmol) , KI (0.20 g, 1.20 mmol) and K3PO4 (0.38 g, 1.80 mmol) in DMF (4 mL) was stirred at 60 ℃ for 1 h under N2 atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was purified by prep-HPLC (column: Morphling Triart-C18 250*30mm*10 um; mobile phase: [H2O (0.1%TFA) -ACN] ; gradient: 10%-98%B over 22.1 min; flow rate: 40 mL / min) to give compound 61A (65.9 mg, 0.090 mmol, 15%yield) as a yellow solid. LCMS: m / z 733.46 [M+H] +. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 10.00 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.56 (s, 1H) , 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.38 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.25 (s, 1H) , 7.17 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.01-6.93 (m, 1H) , 6.65 (d, J = 15.6 Hz, 1H) , 5.41 (s, 1H) , 5.06 (s, 1H) , 4.02 (s, 3H) , 3.95 (d, J = 6.4 Hz, 2H) , 3.82 (d, J = 12.4 Hz, 1H) , 3.43-3.40 (m, 1H) , 3.38 (s, 3H) , 3.30-3.25 (m, 1H) , 2.87 (s, 3H) , 2.69 (s, 3H) , 2.11-1.95 (m, 5H) , 1.77-1.70 (m, 2H) , 1.53-1.44 (m, 5H) , 1.18-1.10 (m, 1H) , 0.91-0.81 (m, 3H) .

[0260] Step 9 (E) -N- (4- (7-cyclopropyl-9, 10, 14-trimethyl-12-methylene-9, 12, 13, 14-tetrahydroimidazo [4” , 5” : 3', 4'] benzo [1', 2': 5, 6] azocino [4, 3, 2-hi] indolizine-2-carbonyl) -2, 6-difluorophenyl) -4- ( ( (1s, 4s) -4-methoxy-1-methylcyclohexyl) amino) but-2-enamide (compound 62A)

[0261] A mixture of compound 5 (0.20 g, 1.11 mmol) , compound 6 (0.23 g, 0.37 mmol) , KI (61 mg, 0.37 mmol) and DIEA (0.29 g, 2.22 mmol) in NMP (2.5 mL) was stirred at 60 ℃ for 5 h under N2 atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was purified by prep-HPLC (column: Morphling Triart-C18 250*30mm*10 um; mobile phase: [H2O (0.1%TFA) -ACN] ; gradient: 10%-98%B over 22.1 min; flow rate: 40 mL / min) to give compound 62A (122 mg, 0.17 mmol, 45%yield) as a yellow solid. LCMS: m / z 733.30 [M+H] +. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 10.01 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 7.56 (s, 1H) , 7.51 (d, J = 7.6 Hz, 2H) , 7.38 (d, J = 6.8 Hz, 1H) , 7.24 (s, 1H) , 7.17 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 6.99-6.92 (m, 1H) , 6.64 (d, J = 15.2 Hz, 1H) , 5.41 (s, 1H) , 5.06 (s, 1H) , 4.03 (s, 3H) , 3.94 (d, J = 6.8 Hz, 2H) , 3.80 (d, J = 12.0 Hz, 1H) , 3.50 (s, 1H) , 3.40 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 3.35 (s, 3H) , 2.87 (s, 3H) , 2.68 (s, 3H) , 2.09-1.93 (m, 5H) , 1.73-1.67 (m, 4H) , 1.47 (s, 3H) , 1.16-1.10 (m, 1H) , 0.92-0.81 (m, 3H) .

[0262] The compounds in the table below were synthesized with a similar route as above Examples.

[0263] Table A

[0264] The characterization data of representative compounds are shown below.

[0265] BIOLOGICAL ASSAYS

[0266] Biological Experiment 1 KRas G12C or WT Isothermal Titration Calorimetry (ITC) Binding Assay

[0267] Experimental procedure

[0268] 1 L of ITC buffer (50 mM Hepes pH 7.4, 100 mM NaCl, 1 mM TCEP, 5 mM MgCl2, 0.05 %Tween 20) was prepared and filter sterilized using a 0.22μm bottle top filter. The purified KRas G12C or WT was concentrated to 1 mM using centrifugal concentrator and extensively dialyzed against ITC buffer overnight at room temperature. After dialysis, a 100 mL of ITC buffer was taken, degassed, and saved for compound dilutions, baselines of ITC and rinsing the cell of ITC. All ITC experiments were performed using MicroCal PEAQ-ITC instrument (Malvern Panalytical Inc. ) with the ITC buffer containing 4%DMSO at 20 ℃.

[0269] All compounds were prepared as stock solution of 10 mM in DMSO and thereafter diluted 100X in ITC buffer. 1 mM of KRas G12C or WT in the syringe was titrated into 50-100 uM of compounds in the measurement cell. Generally, after a preliminary 0.4 μL injection, 19 injections of 2 μL each were carried out with a 150 s interval between injections in a single titration. During equilibration and experiment the syringe was stirred at a constant speed of 750 rpm. MicroCal PEAQ-ITC analysis software V. 1.40 was used to analyze the resultant thermograms. Binding isotherms were fitted to the standard one-set-of-sites model.

[0270] Conclusion: The compounds of the present invention showed potent binding affinity to human KRas G12C protein.

[0271] Biological Example 2: TR-FRET Assay for Disruption of Raf1 Ras-Binding Domain (RBD) Interaction with KRas by Compounds of the Invention (Raf1 disruption TR-FRET)

[0272] Material and Reagents

[0273] 1. His-tagged recombinant human KRAS G12C / G12C (a. a. 1-164, N-terminal His-tagged, GppNHp-loaded, produced in-house)

[0274] 2. FLAG-tagged recombinant human Raf1 Ras-binding domain (a. a. 54-131, C-terminal FLAG-tagged, produced in-house)

[0275] 3. LANCE Detection Buffer (10x) (PerkinElmer, CAT#CR97-100)

[0276] 4. Eu-W1024-labeled Anti-6xHis Antibody (PerkinElmer, CAT#AD0401)

[0277] 5. Anti-FLAG IgG conjugated to SureLight-Allophycocyanin (PerkinElmer, CAT#AD0059F)

[0278] 6. GppNHP (Non-hydrolyzable GTP analog) (Abcam, CAT#ab146659)

[0279] 7. Bovine Serum Albumin heat shock fraction (Sigma-Aldrich, CAT#A9647-100G)

[0280] 8. DMSO (Thermo Fisher Scientific)

[0281] 9. Compounds -10 mM stock in DMSO

[0282] 10. Victor Nivo multimode plate reader (PerkinElmer)

[0283] 11. OptiPlate-384, white opaque 384-well microplate (PerkinElmer)

[0284] Experimental procedure

[0285] Disruption of Raf1-KRAS protein-protein binding of tested compound was determined using a time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) techonology. The assay buffer contains 1X LANCE Detection buffer supplemented with 5 mM MgCl2, 10 μM GppNHp and 2.5 μg / mL BSA. His-KRas (GppNHp-loaded) was pre-incubated with compound in an 8-point 4-fold dilution series starting at a final concentration of 10 μM. After incubation at RT for 1 hour, a mixture of FLAG-RAF1 RBD, anti-His Eu-W1024 and anti-FLAG allophycocyanin was then added to assay sample wells at final concentrations of 50 nM, 2nM and 100 nM, respectively. The reaction was incubated for an additional 20 hours (for covalent compounds) at RT. The TR-FRET signal was read on a plate reader with an excitation wavelength of 340 nm and detection wavelengths of 615 and 665 nm. The binding disruption curve was fitting using the sigmoidal dose-response curve with a variable slope model in GraphPad Prism. Compounds that facilitate disruption of a Raf1-KRas complex were identified as those eliciting a decrease in the TR-FRET ratio relative to DMSO control wells and IC50 values (nM) are shown in the following Table 1.

[0286] For IC50, A represents a IC50 value of <10 nM; B represents a IC50 value of≥10 nM and <100 nM; C represents a IC50 value of ≥100 nM and <1000 nM; D represents a IC50 value of ≥1000 nM.

[0287] Table 1

[0288] Conclusion: The compounds of the present invention disrupted the protein-protein binding between Raf1 RBD and KRAS.

[0289] Biological Example 3: Growth inhibition activity on KRAS-G12C mutant cell line (H358) (in vitro)

[0290] H358 cell which are a KRAS-G12C mutant human cancer cell line, were suspended in a 10%fetal bovine serum-containing RPMI1640 medium (manufactured by Gibco. ) . 103 cells were seeded into each well of PerkinElmer ViewPlate-384 microplate and cultured in an incubator containing 5%CO2 gas at 37℃ for 1 day. The compounds obtained in the “Preparation of Compounds” section were used as test compounds and were dissolved in DMSO, respectively. 1mM and 10uM of compound DMSO stocks were used with Tecan D300 digital dispenser to dispense compounds directly into each well of the 384 plates. Compounds were tested ranging from 3 uM to 3 pM. The cells were cultured in an incubator containing 5%CO2 gas at 37℃ for another 3 days. The cell count after 3-day culture in the presence of the test compound was measured using CellTiter-Glo 2.0 Reagent (manufactured by Promega Corporation) . All wells were added with CellTiter-Glo 2.0 Reagent and mixed for 2 minutes. After mixing, luminescence was measured by a plate reader. The dose response curves and the concentration of the test compound at which 50%inhibition was achieved (IC50 (nM) ) were calculated with Prism 10.

[0291] For IC50, A represents a IC50 value of <10 nM; B represents a IC50 value of≥10 nM and <100 nM; C represents a IC50 value of ≥100 nM and <1000 nM; D represents a IC50 value of ≥1000 nM.

[0292] Table 2

[0293] Biological Example 4. hERG Patch Clamp

[0294] Manual patch clamp method was adopted to detect the inhibitory effect of compounds on hERG potassium ion channels

[0295] Table 3 below shows a concentration-effect relation curve of the tested compounds to the hERG channel current, which is recorded from the HEK293-hERG stable cell strain using a manual patch clamp technology. According to a Hill equation, the ratio of the hERG current peak value under each concentration to its blank control current peak value and the corresponding concentration were curve-fitted. The result showed that the compounds had no obvious inhibitory effect on the hERG potassium channel current stably expressed in HEK293 cells within the detection concentration range.

[0296] Table 3: The results of hERG Patch-Clamp, and ratio of H358 cell-growth inhibition and hERG Patch-Clamp IC50

[0297] Conclusion: The compounds of the present invention show much weaker hERG inhibition. As a result, it leads to a wider therapeutic window and a lower potential for cardiotoxicity.

[0298] Biological Example 5. Pharmacokinetic Studies in Mice

[0299] Balb / c Mice, SPF grade were administered the Example compound via IV (IV in DMAC) and oral gavage as a clear solution in 0.5%DMSO+40%PEG400+59.5% (20%HP-β-CD) . Plasma was collected from mice per time point at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, and 24 h after administration. The concentrations of the test article were measured in plasma by HPLC–MS / MS. Chromatographic separation was carried out on Waters BEH C18 Column (2.1×50 mm, 1.7 μm) column (MAC-MOD Analytical, Chadds Ford, PA) , using a gradient elution method with water and acetonitrile, both containing 0.025%formic acid –1mM NH4OAc. Mass spectrometric measurements in positive electrospray ionization were directed at quantifying the mass transition with [M + H] + as the precursor ion on API6500, triple quadruple mass spectrometer (Sciex, Framingham, MA) . The relevant pharmacokinetic parameters were estimated using noncompartmental methods using WinNonlin (Enterprise, version 8.2) .

[0300] The compounds of the present invention showed good pharmacokinetic properties in mice.

[0301] Biological Example 6. Pharmacokinetic Studies in Pre-Clinical Species

[0302] Balb / c Mice, and SD rats were administered the Example compound via IV (IV in DMAC) and oral gavage as a clear solution in 10%DMSO+40%PEG400+50% (20%HP-β-CD) . Plasma was collected from mice per time point at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, and 24 h after administration. The concentrations of the test article were measured in plasma by HPLC–MS / MS. Chromatographic separation was carried out on Waters BEH C18 Column (2.1×50 mm, 1.7 μm) column (MAC-MOD Analytical, Chadds Ford, PA) , using a gradient elution method with water and acetonitrile, both containing 0.025%formic acid –1mM NH4OAc. Mass spectrometric measurements in positive electrospray ionization were directed at quantifying the mass transition with [M + H] + as the precursor ion on API6500, triple quadruple mass spectrometer (Sciex, Framingham, MA) . The relevant pharmacokinetic parameters were estimated using noncompartmental methods using WinNonlin (Enterprise, version 8.2) .

[0303] The compounds of the present invention showed good pharmacokinetic properties in pre-clinical species.

Claims

A compound of formula (I’) , (I’-A) or (I’-B) :or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein,X is N or CH;represents a double or single bond;R3 is -CH3 or -CD3;R0 is C3-6cycloalkyl or -OCHF2;each R1, R7 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, SF5 and the following groups unsubstituted or optionally substituted with 1, 2, 3 or more Rp: hydroxyl, cyanoalkyl, C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C2-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, C1-C6 haloalkoxy, C1-C6 halo-alkylthio, -O-C3-C8 cylcoalkyl, -S-C3-C8 cylcoalkyl, C3-C8 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing one or two heteroatoms selected from N, O and S;each Rp is identical or different, and is independently selected from H, deuterium, halogen, OH, deuterated hydroxy, CN, NO2, oxo (═O) , thio (═S) , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy;each R2 is independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, cyano, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, -S (O) 2H, -S (O) 2-alkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl and hydroxyalkyl; preferably, selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl;Ring A is selected from the group consisting of cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, optionally substituted with 1, 2, 3 or 4 R6, whereinR6 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, alkyl, deuterated alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl; wherein the cycloalkyl and the heterocyclyl are saturated or partially unsaturated; wherein the alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, amino, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl in R6 are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 R6a, wherein R6a is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, oxo (=O) ; preferably, R6 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl, SF5;L2 is selected from the group consisting of bond, C (O) , CR3aR3b, *C=R3d, *C=NR3e, O, S, NR3f; *represents the attachment point to the parental structure;R3a and R3b are each independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, cyano, amino, C3-C6 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing 1, 2, 3, 4 or 5 heteroatoms selected from N, O and S, aryl, heteroaryl;or R3a and R3b together with the atom to which they are attached form a cycloalkyl, heterocyclyl, optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 substituents selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino;R3d is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl;R3e is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, C1-C3 alkyl, halogen, hydroxyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino;R3f is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl;L4 is selected from the group consisting of C (O) , CH2;J is selected from CH2, CH, C (O) ;L5 is selected from the group consisting of CH2, C (O) ;R4 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, and C1-C3 hydroxyalkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, cyano, amino, SF5;R5 is selected from the group consisting of (i) hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, SF5; (ii) cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, -alkyl-heterocyclyl, wherein the alkyl, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, amino, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, -alkyl-heterocyclyl are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq;or R4 and R5 together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered heterocyclyl containing 1, 2, 3, 4 or 5 of heteroatoms selected from N, O or S, or 3-6 membered cycloalkyl, wherein the cycloalkyl, heterocyclyl is optionally substituted with 1, 2, 3.4, or 5 Rq;each Rq is independently selected from the group consisting of absent, hydrogen, deuterium, alkyl, halogen, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, cyano, -C0-6alkylene-S (O) 2H, -C0-6alkylene-S (O) 2-alkyl, amino, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, alkyl-C (O) -, alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, alkylcarbonyl, SF5, cycloalkyl, heterocyclyl, cycloalkyloxy, aryl, heteroaryl, methylene (=CH2) , oxo (=O) , wherein the alkyl, hydroxyl, alkenyl, alkynyl, amino, HC (O) -, alkyl-C (O) -, alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, cyanoalkyl, alkylcarbonyl, cycloalkyl, heterocyclyl, cycloalkyloxy, aryl, heteroaryl, methylene (=CH2) are optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rr; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;each Rr is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, alkyl, deuterated alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, deuterated alkoxy, alkoxyalkyl, deuterated alkoxyalkyl, alkylthio, haloalkyl, cyano, -NH-C (O) -C0-6alkyl, HC (O) -, -S (O) 2H, -S (O) 2-alkyl, oxo (=O) , SF5, cycloalkyl, cycloalkyloxy, heterocyclyl, aryl, heteroaryl and hydroxyalkyl; preferably, selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl;each n1, n2, n3, n4 is independently selected from 0, 1, 2, 3 or 4;provided that the compound is not:The compound of claim 1, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein the compound is of formula (II’ ) , (II’ -A) or (II’ -B) :The compound of anyone of claim 1 or 2, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein:Ring A is selected from the group consisting of phenyl, C3-C8 cycloalkyl or 5-8 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N or O, 5-8 membered heteroaryl, optionally substituted with 1, 2, 3 or 4 substituents selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 al koxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 alkylamino, C1-C3 alkylcyano and C1-C3 hydroxyalkyl, wherein, the cycloalkyl and the heterocyclyl are saturated or partially unsaturated; preferably,Ring A is selected from the group consisting ofoptionally substituted with 1, 2, 3 or 4 substituents selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 alkylamino, C1-C3 alkylcyano and C1-C3 hydroxyalkyl; more preferably, ring A is selected from the group consisting ofThe compound of anyone of claims 1-3, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein R2 is H.The compound of anyone of claims 1-4, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein L2 is selected from the group consisting of bond, C=O, CF2, C-OH, *C (F) CH3, *C (OH) CH3, *C=CH2, *C=NH, *C=N-OH, *C-O-CH3, *O, *S, *NCH3; preferably, L2 is C=O.The compound of anyone of claims 1-5, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein R7 is H.The compound of anyone of claims 1-6, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein the compound is of formula (III’) , (III’-A) or (III’-B) :The compound of anyone of claims 1-7, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein: the compound is of formula (IV’) , (IV’-A) or (IV’-B) :The compound of anyone of claims 1-8, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein R6 is selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, F, Cl, Br, C1-C6 alkyl, C1-C6 deuterated alkyl, C1-C6 alkoxy, C1-C6 deuterated alkoxy, C1-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 deuterated alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, cyano, and C1-C6 hydroxyalkyl, SF5; preferably R6 is F, Cl, or Br.The compound of anyone of claims 1-9, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, whereineach R1 is independently selected from the group consisting of (i) hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, cyanoalkyl, C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C1-C6 alkoxy, C2-C6 alkoxyalkyl, C1-C6 alkylthio, C1-C6 haloalkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, C1-C6 haloalkoxy, C1-C6 halo-alkylthio; (ii) -O-C3-C8 cylcoalkyl, -S-C3-C8 cylcoalkyl, C3-C8 cycloalkyl, 5-8 membered heterocyclyl containing on or two heteroatoms selected from N, O and S; preferably,each R1 is independently selected from the group consisting of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C4 cyanoalkyl, C2-C4 alkenyl, C2-C4 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy; more preferably,R1 is methyl or -CH2OCH3.The compound of anyone of claims 1-10, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein: R4 is selected from the group consisting of hydrogen or -CH3.The compound of anyone of claims 1-11, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein: R5 is selected from the group consisting of branched or linear C1-C3 alkyl, C3-C8 cycloalkyl or 4-10 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N, O or S; 5-8 membered heteroaryl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N or O; optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq; whereineach Rq is independently selected from the group of hydrogen, deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 cyanoalkyl, C1-C3 aminoalkyl, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C10 heterocyclyl; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;wherein, the cycloalkyl or the heterocyclyl is saturated or partially unsaturated.The compound of anyone of claims 1-10, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein: R4 and R5 together with the atom to which they are attached form 3-7 membered heterocyclyl containing 1 or 2 of heteroatoms selected from N, O or S; where the heterocyclyl is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq;each Rq is independently selected from the group of deuterium, halogen, amino, cyano, hydroxyl, C1-C3 alkyl, C2-C3 alkenyl, C2-C3 alkynyl, C1-C3 alkoxy, C1-C3 alkylthio, C1-C3 haloalkyl, C1-C3 hydroxyalkyl, C1-C3 cyanoalkyl, C1-C3 aminoalkyl, C2-C4 alkoxyalkyl, C1-C3 alkyl-C1-C3 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C10 heterocyclyl; or two Rq together with the atom to which they are attached form a 3-12 membered cycloalkyl or heterocyclyl;wherein, the cycloalkyl or the heterocyclyl is saturated or partially unsaturated;preferably, R4 and R5 together with the atom to which they are attached form a 3-6 membered heterocyclyl, the heterocyclyl is selected from the group consisting of optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq, Rq is selected from the group consisting of -CH3, -CN, -OCH3, -CH2OCH3, The compound of claim 12, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein: R5 is selected from the group consisting of -C (CH3) 2, optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rq; wherein Rq is selected from the group consisting of -CH3, -CN, -OCH3, -CH2OCH3, The compound of anyone of claims 1-14, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, or prodrug thereof, wherein the compound is selected from Table A.A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of the compound of claims 1 to 15, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.A method for treating disease mediated by KRAS mutation, comprising administering to a subject in need thereof an effective amount of a compound of any one of claims 1 to 15, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, or the pharmaceutical composition of claim 16; preferably,The method of claim 17, wherein the KRAS mutation contain KRAS G12C, KRAS G12V or KRAS G13D mutation.A method for treating cancer comprising administering to a subject in need thereof an effective amount of a compound of any one of claims 1 to 15, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, or the pharmaceutical composition of claim 16.A use of the compound of any one of claims 1 to 15, or a tautomer, cis-or trans-isomer, mesomer, racemate, enantiomer, diastereomer, or mixture thereof, or a pharmaceutically acceptable salt solvate, or prodrug thereof, or the pharmaceutical composition of claim 16, in the manufacture of a medicament for treating cancer.The method of anyone of claims 17 to 19, or the use of claim 20, wherein the cancer is selected from the group consisting of Cardiac sarcoma (angiosarcoma, fibrosarcoma, rhabdomyosarcoma, liposarcoma) , myxoma, rhabdomyoma, fibroma, lipoma and teratoma; Lung: bronchogenic carcinoma (squamous cell, undifferentiated small cell, undifferentiated large cell, adenocarcinoma) , alveolar (bronchiolar) carcinoma, bronchial adenoma, sarcoma, lymphoma, chondromatous hamartoma, mesothelioma; Gastrointestinal: esophagus (squamous cell carcinoma, adenocarcinoma, leiomyosarcoma, lymphoma) , stomach (carcinoma, lymphoma, leiomyosarcoma) , pancreas (ductal adenocarcinoma, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, carcinoid tumors, vipoma) , small bowel (adenocarcinoma, lymphoma, carcinoid tumors, Kaposi's sarcoma, leiomyoma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma) , large bowel (adenocarcinoma, tubular adenoma, villous adenoma, hamartoma, leiomyoma) ; Genitourinary tract: kidney (adenocarcinoma, Wilm's tumor (nephroblastoma) , lymphoma, leukemia) , bladder and urethra (squamous cell carcinoma, transitional cell carcinoma, adenocarcinoma) , prostate (adenocarcinoma, sarcoma) , testis (seminoma, teratoma, embryonal carcinoma, teratocarcinoma, choriocarcinoma, sarcoma, interstitial cell carcinoma, fibroma, fibroadenoma, adenomatoid tumors, lipoma) ; Liver: hepatoma (hepatocellular carcinoma) , cholangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiosarcoma, hepatocellular adenoma, hemangioma; Biliary tract: gall bladder carcinoma, ampullary carcinoma, cholangiocarcinoma; Bone: osteogenic sarcoma (osteosarcoma) , fibrosarcoma, malignant fibrous histiocytoma, chondrosarcoma, Ewing's sarcoma, malignant lymphoma (reticulum cell sarcoma) , multiple myeloma, malignant giant cell tumor chordoma, osteochronfroma (osteocartilaginous exostoses) , benign chondroma, chondroblastoma, chondromyxofibroma, osteoid osteoma and giant cell tumors; Nervous system: skull (osteoma, hemangioma, granuloma, xanthoma, osteitis deformans) , meninges (meningioma, meningiosarcoma, gliomatosis) , brain (astrocytoma, medulloblastoma, glioma, ependymoma, germinoma (pinealoma) , glioblastoma multiform, oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, congenital tumors) , spinal cord neurofibroma, meningioma, glioma, sarcoma) ; Gynecological: uterus (endometrial 'carcinoma (serous cystadenocarcinoma, mucinous cystadenocarcinoma, unclassified carcinoma) , granulosa-thecal cell tumors, Sertoli-Leydig cell tumors, dysgerminoma, malignant teratoma) , vulva (squamous cell carcinoma, intraepithelial carcinoma, adenocarcinoma, fibrosarcoma, melanoma) , vagina (clear cell carcinoma, squamous cell carcinoma, botryoid sarcoma (embryonal rhabdomyosarcoma) , fallopian tubes (carcinoma) ; Hematologic: blood (myeloid leukemia (acute and chronic) , acute lymphoblastic leukemia, chronic lymphocytic leukemia, myeloproliferative diseases, multiple myeloma, myelodysplastic syndrome) , Hodgkin's disease, non-Hodgkin's lymphoma (malignant lymphoma) ; Skin: malignant melanoma, basal cell carcinoma, squamous cell carcinoma, Kaposi's sarcoma, moles dysplastic nevi, lipoma, angioma, dermatofibroma, keloids, psoriasis; and Adrenal glands:neuroblastoma.

Images