Antibacterial compounds and methods of use thereof

Abstract

Provided herein are synthesized compounds useful as antibacterial agents, pharmaceutical compositions including the same, and methods of use thereof. Specifically, the synthesized compounds target bacterial RNA polymerase and NusG.

Description

ANTIBACTERIAL COMPOUNDS AND METHODS OF USE THEREOFCROSS-REFERENCE TO RELATED APPLICATIONS

[0001] This application claims the benefit of priority of United States Provisional Patent Application Number 63 / 745,362, filed on January 15, 2025, the contents of which being hereby incorporated by reference in their entirety for all purposes. INCORPORATION BY REFERENCE OF SEQUENCE LISTING

[0002] The sequence listing of the present application is incorporated by reference with a file name “P26160PCT. xml” in ST. 26 XML format, with a creation date of November 19, 2025, and a size of 4 KB.TECHNICAL FIELD

[0003] The present disclosure generally relates to compounds useful as antibacterial agents, pharmaceutical compositions comprising the same, and methods of use thereof.BACKGROUND

[0004] Precise transcriptional control is essential for bacterial survival and proper functioning. In bacteria, transcription can be divided into three stages: initiation, elongation, and termination, which collectively facilitate the synthesis of RNA molecules for protein production. This process is regulated by transcription factors, including σ, NusA, NusB, NusE, and NusG. Among them, NusG plays a key role in modulating various stages of transcription. It is a highly conserved protein found across all three domains of life, with functionally similar counterparts known as Spt5 in archaea and eukaryotes.

[0005] In bacteria, NusG functions as a monomeric transcription factor that directly interacts with the elongating RNA polymerase (RNAP) and downstream regulatory elements to enhance transcriptional efficiency. Through its N-terminal domain, NusG binds to the clamp-helix (CH)region of the β’ subunit of RNAP (FIG. 1) , inducing conformational changes that stabilize thetranscription bubble and facilitate the elongation of the RNA transcript. Moreover, the C-terminalKyrpides-Ouzounis-Woese (KOW) domain of NusG has been implicated in promoting Rho-dependent transcription termination by interacting with the Rho factor.

[0006] Apart from its involvement in transcription elongation and termination, NusG also plays acritical role in coordinating the coupling of transcription and translation via the interaction withNusE, thereby ensuring the integrity of the mRNA molecule. This multifaceted functionality ofNusG underscores its importance as a key regulator of gene expression in bacterial systems.

[0007] Given the central role of NusG in bacterial transcription, this protein emerges as an attractivetarget for developing novel antimicrobial agents. Its conservation across bacterial species, and itsdivergence from eukaryotic homologs (FIG. 2) in terms of binding sites and amino acid sequencessuggests that NusG is a promising candidate for selective inhibition without adversely affectinghuman cells. This divergence from eukaryotic counterparts highlights the potential for developingcompounds that can selectively target the bacterial version of NusG, thereby offering a pathwayto new antimicrobial therapies. The present disclosure addresses this gap by providing novel agentswith antimicrobial activities that specifically target this interaction.

[0008] Furthermore, other desirable features and characteristics will become apparent from thesubsequent detailed description and the appended claims, taken in conjunction with theaccompanying drawings and this background of the disclosure.SUMMARY

[0009] In a first aspect, provided herein is a compound of Formula 1: Ar1-X1-Ar2- (CROR1) -C(R)2-X2-Ar3 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: m is a whole number selected from 1-4; n is a whole number selected from 1-2; p is a whole number selected from 1-4; X1 is -O-, -S-, or - (NR2) -; X2 is -O-, -S-, or -OCH2-; R for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl; R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2; R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2; Ar1 is selected from the group consisting of: Ar2 is Ar3 is selected from the group consisting of: R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; and R6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl.

[0010] In certain embodiments, m is a whole number selected from 1-2; n is 1; and p is a whole number selected from 1-2.

[0011] In certain embodiments, X1 is - (NR2) -.

[0012] In certain embodiments, Ar1 is: and Ar3 is:

[0013] In certain embodiments, Ar2 is:

[0014] In certain embodiments, at least one R3 is CF3; and at least one R4 is CF3 or fluorine.

[0015] In certain embodiments, the compound has Formula 2: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: m is a whole number selected from 1-4; n is a whole number selected from 1-2; p is a whole number selected from 1-4; X1 is - (NR2) -; X2 is -O-, -S-, or -OCH2-; R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2; R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2; Ar1 is: Ar2 is: Ar3 is: R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; and R6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl.

[0016] In certain embodiments, at least one R3 is CF3 and at least one R5 is fluoro, CF3, or nitro.

[0017] In certain embodiments, R1 is hydrogen and R2 is hydrogen.

[0018] In certain embodiments, the compound has Formula 3: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: m is a whole number selected from 1-2; n is a whole number selected from 1-2; p is a whole number selected from 1-2; A is C, C-H, or N; R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2; R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2; R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; and R6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl, wherein at least one R3 is CF3 and at least one R5 is fluoro, CF3, or nitro.

[0019] In certain embodiments, R1 is hydrogen.

[0020] In certain embodiments, R2 is hydrogen.

[0021] In certain embodiments, the compound is selected from the group consisting of: and pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein each of m, n, and p is independently a whole number selected from 1-2.

[0022] In certain embodiments, R4 is hydrogen.

[0023] In certain embodiments, the compound is selected from the group consisting of: and pharmaceutically acceptable salts thereof.

[0024] In certain embodiments, the compound comprises and pharmaceutically acceptable salts thereof.

[0025] In a second aspect, provided herein is a method of treating a bacterial infection in a subject in need thereof, the method comprising administering a therapeutically effective amount of a compound described herein to the subject.

[0026] In certain embodiments, the bacterial infection results from a Gram-positive bacterium.

[0027] In certain embodiments, the bacterial infection results from a bacterium selected from the group consisting of Enterococcus spp., Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, and Streptococcus agalactiae, Mycobacterium spp.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0028] The foregoing aspects and many of the attendant advantages of this invention will become more readily appreciated and understood by reference to the following detailed description, when taken in conjunction with the accompanying drawings.

[0029] FIG. 1 depicts the crystal structure of E. coli RNA polymerase core enzyme (subunits ααββ’ ) bound to NusG (PDB 5TBZ) . Left: the overall structure of the bacterial transcription complex (yellow: RNAP β’ subunit; blue: NusG) . Right: the key hydrogen bond interactions between NusG and the β’ CH region.

[0030] FIG. 2 depicts a multiple sequence alignment of selected clamp coiled-coil or clamp helices regions in the RpoC (RNAP β’ subunit) homologs and the N-Terminal Domain of NusG homologs from Bacteria, Archaea, and Eukarya. The alignment was generated using MAFFT, and the amino acids responsible for hydrogen bond formation were marked with p symbols. Arginine residues in the β’ CH domain are conserved within the Bacteria domain but not in the Archaea and Eukarya domains. The predicted secondary structure elements by JPred are depicted as green arrows for beta-strands and blue-grey rods for alpha-helices. ECOL in FIG. 2 corresponds to Escherichia coli; PAER in FIG. 2 corresponds to Pseudomonas aeruginosa; BSUB in FIG. 2 corresponds to Bacillus subtilis; SAUR in FIG. 2 corresponds to Staphylococcus aureus; MTUB in FIG. 2 corresponds to Mycobacterium tuberculosis; SSOL in FIG. 2 corresponds to Saccharolobus solfataricus; MJAN in FIG. 2 corresponds to Methanocaldococcus jannaschii; HSAP in FIG. 2 corresponds to Homo sapiens ; SCER in FIG. 2 corresponds to Saccharomyces cerevisiae.

[0031] FIG. 3A depicts Docking model of hit compound AW000783 with E. coli RNAP CH. The distance between 6 middle atoms is

[0032] FIG. 3B depicts Scaffold hoppling from the general structure of the linear hit compound AW000783 to a new triaryl structure with a phenyl linker.

[0033] FIG. 4 depicts SAR of the synthesized inhibitor compounds as antimicrobials.

[0034] FIG. 5 depicts the effect of compound 7 on the time-kill kinetics of (A) S. aureus ATCC 25923 over 6 hours, (B) CA-MRSA strain USA300 over 6 hours, (C) S. aureus ATCC 25923 over 2 hours, and (D) CA-MRSA strain USA300 over 2 hours in cation-adjusted Muller-Hinton broth (CA-MHB) . Experiments were performed in triplicates.

[0035] FIG. 6 depicts inhibition of the interaction between RNAP β’ CH and NusG by compound 7 measured by the protein complementation assay. The results are presented as n = 3, with variability shown as ±SE. Technical repeats were conducted at least twice with similar results.

[0036] FIG. 7A depicts fluorescent microscopy images of B. subtilis cells expressing NusG-GFP in the presence of no treatment (untreated) , chloramphenicol (CHL) , rifampicin (RIF) , and compound 7. The images show GFP fluorescence (green) , nucleoids stained with DAPI (red) , and overlays of the GFP and DAPI signals. Scale bar: 4 μm.

[0037] FIG. 7B depicts fluorescent microscopy images of B. subtilis cells expressing RpoC-GFP in the presence of no treatment (untreated) , chloramphenicol (CHL) , rifampicin (RIF) , and compound 7. The images show GFP fluorescence (green) , nucleoids stained with DAPI (red) , and overlays of the GFP and DAPI signals. Scale bar: 4 μm.

[0038] FIG. 7C depicts fluorescent microscopy images of B. subtilis cells expressing RpsB-GFP in the presence of no treatment (untreated) , chloramphenicol (CHL) , rifampicin (RIF) , and compound 7. The images show GFP fluorescence (green) , nucleoids stained with DAPI (red) , and overlays of the GFP and DAPI signals. Scale bar: 4 μm.

[0039] FIG. 7D depicts fluorescent microscopy images of B. subtilis cells expressing AtpA-GFP in the presence of no treatment (untreated) , colistin (COL) , rifampicin (RIF) , and compound 7. The images show GFP fluorescence (green) , nucleoids stained with DAPI (red) , and overlays of the GFP and DAPI signals. Scale bar: 4 μm.

[0040] FIG. 8 depicts the effect of compound 7 on Nluc expression by luciferase-based bacterial reporter system. The results are presented as n = 3, with variability shown as ±SE. Technical repeats were conducted at least twice with similar results. Statistical significance between treatment group and untreated control was assessed using the unpaired t-test, with p < 0.05 denoted by *, p < 0.01 denoted by **, and p < 0.001 denoted by ***.

[0041] FIG. 9A depicts Docking models of compound 7 with β ‘CH of RNAP. The ligand was colored in magenta and the key residues (Arg270, Arg278, and Arg281) were colored in salmon.

[0042] FIG. 9B depicts 2D docking model of compound 7 with β ‘CH of RNAP by Discovery Studio.

[0043] FIG. 10 depicts Scheme 1. Synthetic Route to Compounds 1-20a. aReagents and conditions: (a) for C1-C7: aminoacetophenone, Pd (OAc) 2, X-Phos, Cs2CO3, toluene, 120 ℃, 8h; for C8: bromoacetophenone, Pd2 (dba) 3, Cs2CO3, X-Phos, toluene, 80 ℃, 24h; (b) CuBr2, CHCl3 : EA = 1 : 1, 60 ℃, overnight; (c) phenols, K2CO3, acetone, reflux, 6h; (d) NaBH4, MeOH, rt, 8h.

[0044] FIG. 11 depicts Scheme 2. Synthetic Route to Compounds 21-24a. aReagents and conditions: (a) for C9-C10: fluoroacetophenone, Cs2CO3, NMP, 120℃, overnight; (b) NBS, TsOH, MeCN, 90 ℃, 8h; (c) for E21-E22: p-CF3 phenol, K2CO3, acetone, reflux, 6h; for E23: p-CF3 benzyl alcohol, K2CO3, acetone, reflux, 6h; for E24: p-CF3 thiophenol, K2CO3, acetone, reflux, 6h; (d) NaBH4, MeOH, rt, 8h.

[0045] FIG. 12 depicts Scheme 3. Synthetic Route to Compounds 25, 27-28a. aReagents and conditions: (a) p-CF3 phenol, PPh3, DEAD, THF, rt, overnight; (b) p-CF3 iodobenzene, TFA, DCM, reflux, 8h; (c) iodobenzene, Pd (OAc) 2, Cs2CO3, X-Phos, toluene, 120 ℃, 8h; (d) bromobenzoate, Pd (OAc) 2, K2CO3, BINAP, toluene, 80 ℃, 24h; (e) NaOH, EtOH, reflux, 4h; (f) p-CF3 phenylmethanamine, EDCI, 4-DMAP, DCM, rt, 24h; (g) p-CF3 phenylmethanamine, Et3N, DCM, rt, 12h; (h) HCl, EtOH, 70 ℃, 4h; (i) p-CF3 iodobenzene, Pd2 (dba) 3, Xantphos, NaOtBu, toluene, 110 ℃, 24h.

[0046] FIG. 13 depicts Scheme 4. Synthetic Route to Compounds 29-31a. aReagents and conditions: (a) aromatic amines, Pd2 (dba) 3, Cs2CO3, X-Phos, toluene, 80 ℃, 24h; (b) CuBr2, CHCl3 : EA = 1 : 1, 60 ℃, overnight; (c) p-CF3 phenols, K2CO3, acetone, reflux, 6h; (d) NaBH4, MeOH, rt, 8h.

[0047] FIG. 14 depicts Scheme 5. Synthetic Route to Compounds 32-33a. aReagents and conditions: (a) 2-amino-4-nitrophenol, tetrabutylammonium hydrogen sulfate, K2CO3, DCM, reflux, 6h; (b) NaBH4, MeOH, rt, 8h.

[0048] FIG. 15 depicts the fold changes in MICs for compound 7-treated and rifampicin-treated (A) S. aureus ATCC 29213 and (B) MRSA USA300 over a span of 15 days.DETAILED DESCRIPTION

[0049] Definitions

[0050] The following terms shall be used to describe the present invention. In the absence of a specific definition set forth herein, the terms used to describe the present invention shall be given their common meaning as understood by those of ordinary skill in the art.

[0051] Throughout the present disclosure, unless the context requires otherwise, the word "comprise" or variations such as "comprises" or "comprising" , will be understood to imply the inclusion of a stated integer or group of integers but not the exclusion of any other integer or group of integers. It is also noted that in this disclosure and particularly in the claims and / or paragraphs, terms such as “comprises” , “comprised” , “comprising” and the like can have the meaning attributed to it in U.S. Patent law; e.g., they can mean “includes” , “included” , “including” , and the like; and that terms such as “consisting essentially of” and “consists essentially of” have the meaning ascribed to them in U.S. Patent law, e.g., they allow for elements not explicitly recited, but exclude elements that are found in the prior art or that affect a basic or novel characteristic of the present invention.

[0052] Furthermore, throughout the present disclosure and claims, unless the context requires otherwise, the word “include” or variations such as “includes” or “including” , will be understood to imply the inclusion of a stated integer or group of integers, but not the exclusion of any other integer or group of integers.

[0053] The use of the singular herein includes the plural (and vice versa) unless specifically stated otherwise. In addition, where the use of the term "about" is before a quantitative value, the present teachings also include the specific quantitative value itself, unless specifically stated otherwise. As used herein, the term "about" refers to a ±10%, ±7%, ±5%, ±3%, ±1%, or ±0%variation from the nominal value unless otherwise indicated or inferred.

[0054] As used herein, the terms “treat” , "treating" , "treatment" , and the like refer to reducing or ameliorating a disorder / disease and / or symptoms associated therewith. It will be appreciated, although not precluded, treating a disorder or condition does not require that the disorder, condition, or symptoms associated therewith be completely eliminated. In certain embodiments, treatment includes prevention of a disorder or condition, and / or symptoms associated therewith. The term “prevention” or “prevent” as used herein refers to any action that inhibits or at least delays the development of a disorder, condition, or symptoms associated therewith. Prevention can include primary, secondary and tertiary prevention levels, wherein: a) primary prevention avoids the development of a disease; b) secondary prevention activities are aimed at early disease treatment, thereby increasing opportunities for interventions to prevent progression of the disease and emergence of symptoms; and c) tertiary prevention reduces the negative impact of an already established disease by restoring function and reducing disease-related complications.

[0055] The term "subject" as used herein, refers to an animal, typically a mammal or a human, that will be or has been the object of treatment, observation, and / or experiment. When the term is used in conjunction with administration of a compound described herein, then the subject has been the object of treatment, observation, and / or administration of the compound described herein.

[0056] The term "therapeutically effective amount" as used herein, means that amount of the compound or pharmaceutical agent that elicits a biological and / or medicinal response in a cell culture, tissue system, subject, animal, or human that is being sought by a researcher, veterinarian, clinician, or physician, which includes alleviation of the symptoms of the disease, condition, or disorder being treated.

[0057] The term "composition" is intended to encompass a product comprising the specified ingredients in the specified amounts, as well as any product that results, directly or indirectly, from combinations of the specified ingredients in the specified amounts.

[0058] The term "pharmaceutically acceptable carrier" refers to a medium that is used to prepare a desired dosage form of a compound. A pharmaceutically acceptable carrier can include one or more solvents, diluents, or other liquid vehicles; dispersion or suspension aids; surface active agents; isotonic agents; thickening or emulsifying agents; preservatives; solid binders; lubricants; and the like. Remington's Pharmaceutical Sciences, Fifteenth Edition, E.W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1975) and Handbook of Pharmaceutical Excipients, Third Edition, A. H. Kibbe ed. (American Pharmaceutical Assoc. 2000) , disclose various carriers used in formulating pharmaceutical compositions and known techniques for the preparation thereof.

[0059] As used herein, unless otherwise indicated, the term “halo” or “halide” includes fluoro, chloro, bromo or iodo.

[0060] As used herein, "alkyl" refers to a straight-chain or branched saturated hydrocarbon group. Examples of alkyl groups include methyl-, ethyl-, propyl (e.g., n-propyl and isopropyl) , butyl (e.g., n-butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl) , pentyl groups (e.g., 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, iso-pentyl, tert-pentyl, 1, 2-dimethylpropyl, neopentyl, and 1-ethylpropyl) , hexyl groups, and the like. In various embodiments, an alkyl group can have 1 to 40 carbon atoms (i.e., C1-40 alkyl group) , for example, 1-30 carbon atoms (i.e., C1-30 alkyl group) . In certain embodiments, an alkyl group can have 1 to 6 carbon atoms, and can be referred to as a "lower alkyl group. " Examples of lower alkyl groups include methyl, ethyl, propyl (e.g., n-propyl and isopropyl) , and butyl groups (e.g., n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl) . In certain embodiments, alkyl groups can be optionally substituted as described herein. An alkyl group is generally not substituted with another alkyl group, an alkenyl group, or an alkynyl group.

[0061] As used herein, "alkenyl" refers to a straight-chain or branched alkyl group having one or more carbon-carbon double bonds. Examples of alkenyl groups include ethenyl, propenyl, butenyl, pentenyl, hexenyl, butadienyl, pentadienyl, hexadienyl groups, and the like. The one or more carbon-carbon double bonds can be internal (such as in 2-butene) or terminal (such as in 1-butene) . In various embodiments, an alkenyl group can have 2 to 40 carbon atoms (i.e., C2-40 alkenyl group) , for example, 2 to 20 carbon atoms (i.e., C2-20 alkenyl group) . In certain embodiments, alkenyl groups can be substituted as described herein. An alkenyl group is generally not substituted with another alkenyl group, an alkyl group, or an alkynyl group.

[0062] As used herein, "cycloalkyl" by itself or as part of another substituent means, unless otherwise stated, a monocyclic hydrocarbon having between 3-12 carbon atoms in the ring system and includes hydrogen, straight chain, branched chain, and / or cyclic substituents. Exemplary cycloalkyls include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, and the like.

[0063] As used herein, "heteroatom" refers to an atom of any element other than carbon or hydrogen and includes, for example, nitrogen, oxygen, silicon, sulfur, phosphorus, and selenium.

[0064] The term "heterocycloalkyl” as used herein includes reference to a saturated heterocyclic moiety having 3, 4, 5, 6 or 7 ring carbon atoms and 1, 2, 3, 4 or 5 ring heteroatoms selected from nitrogen, oxygen, phosphorus and sulfur. The group may be a polycyclic ring system but more often is monocyclic. This term includes reference to groups such as azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, piperidinyl, oxiranyl, pyrazolidinyl, imidazolyl, indolizidinyl, piperazinyl, thiazolidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, quinolizidinyl and the like.

[0065] As used herein, "aryl" refers to an aromatic monocyclic hydrocarbon ring system or a polycyclic ring system in which two or more aromatic hydrocarbon rings are fused (i.e., having a bond in common with) together or at least one aromatic monocyclic hydrocarbon ring is fused to one or more cycloalkyl and / or heterocycloalkyl rings. An aryl group can have 6 to 24 carbon atoms in its ring system (e.g., C6-24 aryl group) , which can include multiple fused rings. In certain embodiments, a polycyclic aryl group can have 8 to 24 carbon atoms. Any suitable ring position of the aryl group can be covalently linked to the defined chemical structure. Examples of aryl groups having only aromatic carbocyclic ring (s) include phenyl, 1-naphthyl (bicyclic) , 2-naphthyl (bicyclic) , anthracenyl (tricyclic) , phenanthrenyl (tricyclic) , pentacenyl (pentacyclic) , and like groups. Examples of polycyclic ring systems in which at least one aromatic carbocyclic ring is fused to one or more cycloalkyl and / or cycloheteroalkyl rings include, among others, benzo derivatives of cyclopentane (i.e., an indanyl group, which is a 5, 6-bicyclic cycloalkyl / aromatic ring system) , cyclohexane (i.e., a tetrahydronaphthyl group, which is a 6, 6-bicyclic cycloalkyl / aromatic ring system) , imidazoline (i.e., a benzimidazolinyl group, which is a 5, 6-bicyclic cycloheteroalkyl / aromatic ring system) , and pyran (i.e., a chromenyl group, which is a 6, 6-bicyclic cycloheteroalkyl / aromatic ring system) . Other examples of aryl groups include benzodioxanyl, benzodioxolyl, chromanyl, indolinyl groups, and the like. In certain embodiments, aryl groups can be optionally substituted.

[0066] The term "aralkyl" refers to an alkyl group substituted with an aryl group.

[0067] As used herein, "heteroaryl" refers to an aromatic monocyclic ring system containing at least one ring heteroatom selected from oxygen (O) , nitrogen (N) , sulfur (S) , silicon (Si) , and selenium (Se) or a polycyclic ring system where at least one of the rings present in the ring system is aromatic and contains at least one ring heteroatom. Polycyclic heteroaryl groups include those having two or more heteroaryl rings fused together, as well as those having at least one monocyclic heteroaryl ring fused to one or more aromatic carbocyclic rings, non-aromatic carbocyclic rings, and / or non-aromatic cycloheteroalkyl rings. A heteroaryl group, as a whole, can have, for example, 5 to 24 ring atoms and contain 1-5 ring heteroatoms (i.e., 5-20 membered heteroaryl group) . The heteroaryl group can be attached to the defined chemical structure at any heteroatom or carbon atom that results in a stable structure. Generally, heteroaryl rings do not contain O-O, S-S, or S-O bonds. However, one or more N or S atoms in a heteroaryl group can be oxidized (e.g., pyridine N-oxide thiophene S-oxide, thiophene S, S-dioxide) . Examples of heteroaryl groups include, for example, the 5-or 6-membered monocyclic and 5-6 bicyclic ring systems shown below: wherein T is O, S, NH, N-alkyl, N-aryl, N- (arylalkyl) (e.g., N-benzyl) , SiH2, SiH (alkyl) , Si (alkyl) 2, SiH (arylalkyl) , Si (arylalkyl) 2, or Si (alkyl) (arylalkyl) . Examples of such heteroaryl rings include pyrrolyl, furyl, thienyl, pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinyl, triazolyl, tetrazolyl, pyrazolyl, imidazolyl, isothiazolyl, thiazolyl, thiadiazolyl, isoxazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, indolyl, isoindolyl, benzofuryl, benzothienyl, quinolyl, 2-methylquinolyl, isoquinolyl, quinoxalyl, quinazolyl, benzotriazolyl, benzimidazolyl, benzothiazolyl, benzisothiazolyl, benzisoxazolyl, benzoxadiazolyl, benzoxazolyl, cinnolinyl, lH-indazolyl, 2H-indazolyl, indolizinyl, isobenzofuyl, naphthyridinyl, phthalazinyl, pteridinyl, purinyl, oxazolopyridinyl, thiazolopyridinyl, imidazopyridinyl, furopyridinyl, thienopyridinyl, pyridopyrimidinyl, pyridopyrazinyl, pyridopyridazinyl, thienothiazolyl, thienoxazolyl, thienoimidazolyl groups, and the like. Further examples of heteroaryl groups include 4, 5, 6, 7-tetrahydroindolyl, tetrahydroquinolinyl, benzothienopyridinyl, benzofuropyridinyl groups, and the like. In certain embodiments, heteroaryl groups can be substituted as described herein. In certain embodiments, heteroaryl groups can be optionally substituted.

[0068] The term "optionally substituted" refers to a chemical group, such as alkyl, cycloalkyl aryl, and the like, wherein one or more hydrogen may be replaced with a substituent as described herein, for example, halogen, azide, alkyl, aralkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, hydroxyl, alkoxyl, amino, nitro, sulfhydryl, imino, amido, phosphonate, phosphinate, carbonyl, carboxyl, silyl, ether, alkylthio, sulfonyl, sulfonamido, ketone, aldehyde, ester, heterocyclyl, aromatic or heteroaromatic moieties, -CF3, -CN, or the like

[0069] The term "nitro" is art-recognized and refers to -NO2; the term "halogen" is art-recognized and refers to -F, -Cl, -Br or -I; the term "sulfhydryl" is art-recognized and refers to -SH; the term "hydroxyl" means -OH; and the term "sulfonyl" and “sulfone” is art-recognized and refers to -SO2-. "Halide" designates the corresponding anion of the halogens.

[0070] The symbol or or or in a chemical structure represents a position from where the specified chemical structure is bonded to another chemical structure.

[0071] As used herein, the term "pharmaceutically acceptable salt" refers to those salts which are, within the scope of sound medical judgment, suitable for use in contact with the tissues of subjects without undue toxicity, irritation, allergic response and the like, and are commensurate with a reasonable benefit / risk ratio. Pharmaceutically acceptable salts are well known in the art. For example, Berge et al. describes pharmaceutically acceptable salts in detail in J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66: 1-19. Pharmaceutically acceptable salts of the compounds provided herein include those derived from suitable inorganic and organic acids and bases. Examples of pharmaceutically acceptable, nontoxic acid addition salts are salts of an amino group formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, sulfuric acid and perchloric acid or with organic acids such as acetic acid, oxalic acid, maleic acid, tartaric acid, citric acid, succinic acid or malonic acid or by using other methods used in the art such as ion exchange. Other pharmaceutically acceptable salts include adipate, alginate, ascorbate, aspartate, benzenesulfonate, besylate, benzoate, bisulfate, borate, butyrate, camphorate, camphorsulfonate, citrate, cyclopentanepropionate, digluconate, dodecylsulfate, ethanesulfonate, formate, fumarate, glucoheptonate, glycerophosphate, gluconate, hemisulfate, heptanoate, hexanoate, hydroiodide, 2-hydroxy-ethanesulfonate, lactobionate, lactate, laurate, lauryl sulfate, malate, maleate, malonate, methanesulfonate, 2-naphthalenesulfonate, nicotinate, nitrate, oleate, oxalate, palmitate, pamoate, pectinate, persulfate, 3-phenylpropionate, phosphate, picrate, pivalate, propionate, stearate, succinate, sulfate, tartrate, thiocyanate, p-toluenesulfonate, undecanoate, valerate salts, and the like. In certain embodiments, organic acids from which salts can be derived include, for example, acetic acid, propionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, oxalic acid, maleic acid, malonic acid, succinic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, salicylic acid, and the like.

[0072] Pharmaceutically acceptable salts derived from appropriate bases include alkali metal, alkaline earth metal, ammonium and N+ (C1-4alkyl) 4 salts. Representative alkali or alkaline earth metal salts include sodium, lithium, potassium, calcium, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, aluminum, and the like. Further pharmaceutically acceptable salts include, when appropriate, non-toxic ammonium, quaternary ammonium, and amine cations formed using counterions, such as halide, hydroxide, carboxylate, sulfate, phosphate, nitrate, lower alkyl sulfonate, and aryl sulfonate. Organic bases from which salts can be derived include, for example,primary, secondary, and tertiary amines, substituted amines including naturally occurringsubstituted amines, cyclic amines, basic ion exchange resins, and the like, such as isopropylamine,trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, and ethanolamine. In certainembodiments, the pharmaceutically acceptable base addition salt is chosen from ammonium,potassium, sodium, calcium, and magnesium salts.

[0073] The present disclosure provides a compound of Formula 1: Ar1-X1-Ar2- (CROR1) -C(R)2-X2-Ar3 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: m is a whole number selected from 1-4; n is a whole number selected from 1-2; p is a whole number selected from 1-4; X1 is -O-, -S-, or - (NR2) -; X2 is -O-, -S-, or -OCH2-; R for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl,haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, andaralkyl; or two instances of R together with the atom they are covalently bonded form a 3-6membered cycloalkyl or heterocyloalkyl; R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl,heteroaryl, aralkyl, -C(O)R6, -C(O)OR6, -C(O)N (R6)2, -S (O)2R6, -S (O)2N (R6)2, or -P(O)(OR6)2; R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl,heteroaryl, aralkyl, -C(O)R6, -C(O)OR6, -C(O)N (R6)2, -S (O)2R6, or -S (O)2N (R6)2; Ar1 is selected from the group consisting of: Ar2 is Ar3 is selected from the group consisting of: R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; and R6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl.

[0074] The compounds described herein can encompass different positional isomers indicated by a bond that is not attached to the vertex of a chemical structure, such as illustrated using the model structure below:

[0075] In this model structure, the group R can be connected to any atom on the ring structure, valency permitting, i.e., carbons 2, 3, 4, 5, or 6 in the structure above.

[0076] R for each instance can be independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, and heteroaryl; or two instances of R together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl. In certain embodiments, R for each instance is independently hydrogen, alkyl, cycloalkyl, aryl, or heteroaryl. In certain embodiments, R for each instance is independently hydrogen or alkyl. In certain embodiments, R is hydrogen.

[0077] In certain embodiments, m is a whole number selected from 1-4, 1-3, 2-3, 3-4, and 1-2. In certain embodiments, m is 1, 2, 3, or 4.

[0078] In certain embodiments, n is 1 or 2.

[0079] In certain embodiments, p is a whole number selected from 1-4, 1-3, 2-3, 3-4, and 1-2. In certain embodiments, p is 1, 2, 3, or 4.

[0080] In certain embodiments, X1 is - (NR2) -, wherein R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, or aralkyl. In certain embodiments, X1 is - (NH) -.

[0081] In certain embodiments, X2 is -O-or -OCH2-. In certain embodiments, X2 is -O-.

[0082] In certain embodiments, Ar1 is:

[0083] In certain embodiments, Ar1 is:

[0084] In certain embodiments, Ar2 is:

[0085] In certain embodiments, Ar2 is:

[0086] In certain embodiments, Ar3 is:

[0087] R3 for each instance can independently be selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC(O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6. In certain embodiments, R3 for each instance is independently hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C(O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, or -OC (O) N (R6) -. In certain embodiments, at least one instance of R3 is -CF3.

[0088] R4 for each instance can independently be selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC(O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6. In certain embodiments, at least one instance of R4 is -CF3; or R4 is hydrogen.

[0089] R5 for each instance can independently be selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC(O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6. In certain embodiments, R5 for each instance is independently hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C(O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, or -OC (O) N (R6) -. In certain embodiments, at least one instance of R5 is -CF3, nitro, or fluorine.

[0090] R6 for each instance can independently be selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6, 4-6, or 5-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl. In certain embodiments, R6 for each instance is independently hydrogen, alkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, or aralkyl.

[0091] In certain embodiments, the compound has Formula 2:

[0092] or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein X1, X2, Ar1, Ar2, Ar3, and R1 are each independently as defined in any embodiment described herein.

[0093] In certain embodiments, the compound has Formula 3: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein: wherein: A is C, C-H, or N and m, n, p, R1, R2, R3, R4 and R5 are each independently as defined in any embodiment described herein. In instances in which A in the compound of Formula 3 is C, when C is bonded to R3, it will exist as C-R3, whereas when C is not bonded to either R3, it will exist as C-H.

[0094] In certain embodiments, the compound is selected from the group consisting of: and pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein each of m, n, and p is independently a whole number selected from 1-2 and m, n, p, R1, R2, R3, R4 and R5 are each independently as defined in any embodiment described herein. In certain embodiments, each of R1 and R2 is hydrogen.

[0095] In certain embodiments, the compound is selected from the group consisting of:

[0096] and pharmaceutically acceptable salts thereof.

[0097] In certain embodiments, the compound comprises and pharmaceutically acceptable salts thereof.

[0098] Scheme 1 (FIG. 10) depicts the general synthetic procedure for the preparation of target compounds 1-20 with focus on the modifications of the two terminal aromatic rings. The synthesis of substituted secondary amines C1-C7 was performed by a palladium-catalyzed coupling reaction between substituted chloropyridine or iodobenzene and aminoacetophenone. Substituted amine thiazole reacted with bromoacetophenone under the same coupling reaction conditions to provide amine C8. Subsequently, bromination led to the formation of bromides D1-D8, followed by substitution reaction with substituted phenols to give ethers E1-E20. The ketone group was then reduced by sodium borohydride to furnish the desired target compounds 1-20.

[0099] The synthetic routes for aromatic derivatives featuring alternative X1 and X2 linkers are illustrated in Schemes 2-1 and 2-2 (FIG. 11) , respectively. For the X1 derivatives, a nucleophilic aromatic substitution reaction was employed, utilizing either oxygen or sulfur nucleophiles for substitution at the X1 position. The subsequent bromination step was conducted using NBS. Following the formation of intermediates C9-C10, the subsequent steps adhered to the general synthetic route. In parallel, the synthetic route for derivatives with the alternative X2 moiety is depicted in Scheme 2-2 (FIG. 11) . Intermediate D2 reacted with the substituted phenol or benzyl alcohol reactants to yield intermediates E23-E24, which were then subjected to the final reduction step to afford the desired products 23 and 24.

[0100] Modifications on the central hydroxy group of the scaffold were conducted via three distinct synthetic routes, as illustrated in Scheme 3 (FIG. 12) . These routes were designed for derivatives that either delete the hydroxy group or feature substitution by an amido or sulfonamino group. In Schemes 3-1 and 3-3 (FIG. 12) , the synthesis of compounds 25 and 28 began with substitution and sulfonamidation reactions, respectively, followed by hydrolysis of the protecting groups, resulting in substituted aniline intermediates G1 and G3. These intermediates served as substrates for the final step: a palladium-catalyzed coupling reaction, yielding the target compounds 25 and 28. In parallel, a palladium-catalyzed coupling reaction provided amine F2, which, after hydrolysis of the methyl ester and subsequent amide synthesis, yielded compound 27, as depicted in Scheme 3-2 (FIG. 12) . Additionally, the corresponding β-oxy ketone analog was synthesized as intermediate E6 in Scheme 1 (FIG. 10) , which the inventors have renamed as 26 to facilitate structure-activity relationship (SAR) analysis.

[0101] The synthetic route for aromatic derivatives with an alternative central Ar3 group is depicted in Scheme 4 (FIG. 13) . In this route, p-bromo arylethanone was utilized in a palladium-catalyzed coupling reaction to give intermediates C11-C13, the subsequent steps followed a pattern similar to that of the general synthetic route described in Scheme 1 (FIG. 10) , leading to the formation of intermediates D11-D13, E25-E27, and the final compounds 29-31.

[0102] Scheme 5 (FIG. 14) illustrates the synthetic route for aromatic derivatives with a fused bicyclic aryl group. The reaction involved the utilization of intermediates D1 or D2, which underwent a cyclization reaction with 2-amino-4-nitrophenol to generate Schiff base intermediates H1 and H2. Following the reduction of the imine to an amine, the final products, 32 and 33, were obtained.

[0103] The present disclosure also provides a pharmaceutical composition comprising a compound described herein and at least one pharmaceutically acceptable excipient and / or pharmaceutically acceptable carrier.

[0104] The compounds described herein and their pharmaceutically acceptable salts can be administered to a subject either alone or in combination with pharmaceutically acceptable carriers or diluents in a pharmaceutical composition according to standard pharmaceutical practice. The compound can be administered parenterally. Parenteral administration includes intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous and topical.

[0105] Accordingly, the present disclosure provides pharmaceutically acceptable compositions, which comprise a therapeutically-effective amount of the compound described herein, formulated together with one or more pharmaceutically acceptable carriers (additives) and / or diluents. The pharmaceutical compositions of the present disclosure may be specially formulated for administration in liquid form, including those adapted for the following: (1) parenteral administration, for example, by intravenous as, for example, a sterile solution or suspension.

[0106] As set out herein, certain embodiments of the compound described herein may contain a basic functional group, such as amino, and are, thus, capable of forming pharmaceutically-acceptable salts with pharmaceutically-acceptable acids. The term "pharmaceutically-acceptable salts" in this respect, refers to the relatively non-toxic, inorganic and organic acid addition salts of the compound of the present disclosure. These salts can be prepared in situ in the administration vehicle or the dosage form manufacturing process, or by separately reacting a purified compound of the invention in its free base form with a suitable organic or inorganic acid, and isolating the salt thus formed during subsequent purification. Representative salts include the bromide, chloride, sulfate, bisulfate, carbonate, bicarbonate, nitrate, acetate, valerate, oleate, palmitate, stearate, laurate, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maleate, fumarate, succinate, tartrate, napthylate, mesylate, glucoheptonate, lactobionate, and laurylsulphonate salts and the like.

[0107] The pharmaceutically acceptable salts of the compounds of the present disclosure include the conventional nontoxic salts or quaternary ammonium salts of the compounds, e.g., from nontoxic organic or inorganic acids. For example, such conventional nontoxic salts include those derived from inorganic acids such as hydrochloride, hydrobromic, sulfuric, sulfamic, phosphoric, nitric, and the like; and the salts prepared from organic acids such as acetic, propionic, succinic, glycolic, stearic, lactic, malic, tartaric, citric, ascorbic, palmitic, maleic, hydroxymaleic, phenylacetic, glutamic, benzoic, salicyclic, sulfanilic, 2-acetoxybenzoic, fumaric, toluenesulfonic, methanesulfonic, ethane disulfonic, oxalic, isothionic, and the like.

[0108] In other cases, the compound described herein may contain one or more acidic functional groups and, thus, are capable of forming pharmaceutically-acceptable salts with pharmaceutically-acceptable bases. The term "pharmaceutically-acceptable salts" in these instances refers to the relatively non-toxic, inorganic and organic base addition salts of the compound of the present invention. These salts can likewise be prepared in situ in the administration vehicle or the dosage form manufacturing process, or by separately reacting the purified compound in its free acid form with a suitable base, such as the hydroxide, carbonate or bicarbonate of a pharmaceutically-acceptable metal cation, with ammonia, or with a pharmaceutically-acceptable organic primary, secondary or tertiary amine. Representative alkali or alkaline earth salts include the lithium, sodium, potassium, calcium, magnesium, and aluminum salts and the like. Representative organic amines useful for the formation of base addition salts include ethylamine, diethylamine, ethylenediamine, ethanolamine, diethanolamine, piperazine and the like.

[0109] Wetting agents, emulsifiers and lubricants, such as sodium lauryl sulfate and magnesium stearate, as well as coloring agents, release agents, coating agents, sweetening, flavoring and perfuming agents, preservatives, solubilizing agents, buffers and antioxidants can also be present in the compositions.

[0110] Methods of preparing the pharmaceutical comprising the compound include the step of bringing into association a compound described herein with the carrier and, optionally, one or more accessory ingredients. In general, the formulations are prepared by uniformly and intimately bringing into association a compound described herein with liquid carriers (liquid formulation) , liquid carriers followed by lyophilization (powder formulation for reconstitution with sterile water or the like) , or finely divided solid carriers, or both, and then, if necessary, shaping or packaging the product.

[0111] Pharmaceutical compositions of the present disclosure suitable for parenteral administration comprise one or more compounds described herein in combination with one or more pharmaceutically-acceptable sterile isotonic aqueous or non-aqueous solutions, dispersions, suspensions or emulsions, or sterile powders which may be reconstituted into sterile injectable solutions or dispersions just prior to use, which may contain sugars (such as sucrose) , alcohols, non-ionic surfactants (such as 20) , antioxidants, buffers, bacteriostats, chelating agents, solutes which render the formulation isotonic with the blood of the intended recipient or suspending or thickening agents.

[0112] Examples of suitable aqueous and non-aqueous carriers which may be employed in the pharmaceutical compositions of the disclosure include water, ethanol, polyols (such as glycerol, propylene glycol, polyethylene glycol, and the like) , and suitable mixtures thereof, vegetable oils, such as olive oil, and injectable organic esters, such as ethyl oleate. Proper fluidity can be maintained, for example, by the use of coating materials, such as lecithin, by the maintenance of the required particle size in the case of dispersions, and by the use of surfactants.

[0113] These compositions may also contain adjuvants, such as preservatives, wetting agents, emulsifying agents and dispersing agents. Prevention of the action of microorganisms upon the compounds of the present disclosure may be ensured by the inclusion of various antibacterial and antifungal agents, for example, paraben, chlorobutanol, phenol sorbic acid, and the like. It may also be desirable to include isotonic agents, such as sugars, sodium chloride, and the like into the compositions. In addition, prolonged absorption of the injectable pharmaceutical form may be brought about by the inclusion of agents which delay absorption such as aluminum monostearate and gelatin.

[0114] In another aspect, provided herein is a method of treating a bacterial infection in a subject in need thereof, the method comprising the step of administering a therapeutically effective amount of a compound described herein to the subject.

[0115] A panel of bacteria was used to evaluate the antimicrobial activity of compounds 1-33, which included eight pathogens from the “WHO priority pathogens list for guiding R&D of new antibiotics” . The panel consisted of four Gram-positive strains: Enterococcus faecalis ATCC 19433 (EFAE) , Staphylococcus aureus ATCC 25923 (SAURa) and 29213 (SAURb) , Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 (SPNE) ; and five Gram-negative ones: Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 (KPNE) , Acinetobacter baumannii ATCC 19606 (ABAU) , Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (PAER) , Enterobacter cloacae ATCC 13047 (ECLO) , and Escherichia coli ATCC 25922 (ECOL) . To determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the tested compounds, a broth microdilution assay was conducted following the guidelines established by the Clinical &Laboratory Standards Institute (CLSI) .

[0116] Exemplary bacterial infections include, but are not limited to, pneumonia, otitis media, sinusitus, bronchitis, tonsillitis, and mastoiditis related to infection by Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, E. faecium, E. casselflavus, S. epidermidis, S. haemolyticus, or Peptostreptococcus spp. ; pharyngitis, rheumatic fever, and glomerulonephritis related to infection by Streptococcus pyogenes, Groups C and G streptococci, Corynebacterium diphtheriae, or Actinobacillus haemolyticum; respiratory tract infections related to infection by Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, or Chlamydia pneumoniae; blood and tissue infections, including endocarditis and osteomyelitis, caused by S. aureus, S. haemolyticus, E. faecalis, E. faecium, E. durans, including strains resistant to known antibacterials such as, but not limited to, beta-lactams, vancomycin, aminoglycosides, quinolones, chloramphenicol, tetracylines and macrolides; uncomplicated skin and soft tissue infections and abscesses, and puerperal fever related to infection by Staphylococcus aureus, coagulase-negative staphylococci (i.e., S. epidermidis, S. hemolyticus, etc. ) , Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Streptococcal groups C-F (minute-colony streptococci) , viridans streptococci, Corynebacterium minutissimum, Clostridium spp., or Bartonella henselae; uncomplicated acute urinary tract infections related to infection by Staphylococcus aureus, coagulase-negative staphylococcal species, or Enterococcus spp. ; urethritis and cervicitis; sexually transmitted diseases related to infection by Chlamydia trachomatis, Haemophilus ducreyi, Treponema pallidum, Ureaplasma urealyticum, or Neiserria gonorrheae; toxin diseases related to infection by S. aureus (food poisoning and toxic shock syndrome) , or Groups A, B, and C streptococci; ulcers related to infection by Helicobacter pylori; systemic febrile syndromes related to infection by Borrelia recurrentis; Lyme disease related to infection by Borrelia burgdorferi; conjunctivitis, keratitis, and dacrocystitis related to infection by Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, S. aureus, S. pneumoniae, S. pyogenes, H. influenzae, or Listeria spp. ; disseminated Mycobacterium avium complex (MAC) disease related to infection by Mycobacterium avium, or Mycobacterium intracellulare; infections caused by Mycobacterium tuberculosis, M. abscessus, M. leprae, M. paratuberculosis, M. kansasii, or M. chelonei; gastroenteritis related to infection by Campylobacter jejuni; intestinal protozoa related to infection by Cryptosporidium spp. ; odontogenic infection related to infection by viridans streptococci; persistent cough related to infection by Bordetella pertussis; gas gangrene related to infection by Clostridium perfringens or Bacteroides spp. ; and atherosclerosis or cardiovascular disease related to infection by Helicobacter pylori or Chlamydia pneumoniae. Bacterial infections and disorders related to such infections, which may be treated or prevented in animals include the following: bovine respiratory disease related to infection by P. haemolytica, P. multocida, Mycoplasma bovis, or Bordetella spp. ; cow enteric disease related to infection by E. coli or protozoa (i.e., coccidia, cryptosporidia, etc. ) ; dairy cow mastitis related to infection by S. aureus, Strep. uberis, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Klebsiella spp., Corynebacterium, or Enterococcus spp. ; swine respiratory disease related to infection by A. pleuro., P. multocida, or Mycoplasma spp. ; swine enteric disease related to infection by E. coli, Lawsonia intracellularis, Salmonella, or Serpulina hyodysinteriae; cow footrot related to infection by Fusobacterium spp. ; cow metritis related to infection by E coli; cow hairy warts related to infection by Fusobacterium necrophorum or Bacteroides nodosus; cow pink-eye related to infection by Moraxella bovis; cow premature abortion related to infection by protozoa (i.e. neosporium) ; urinary tract infection in dogs and cats related to infection by E. coli; skin and soft tissue infections in dogs and cats related to infection by S. epidermidis, S. intermedius, coagulase neg. Staphylococcus or P. multocida; and dental or mouth infections in dogs and cats related to infection by Alcaligenes spp., Bacteroides spp., Clostridium spp., Enterobacter spp., Eubacterium, Peptostreptococcus, Porphyromonas, or Prevotella.

[0117] In certain embodiments, the bacteria is Gram-positive bacteria.

[0118] In certain embodiments, the bacteria strains areEnterococcus spp., Staphylococcus aureus, including both methicillin-resistant S. aureus (MRSA) and vancomycin-resistant S. aureus (VRSA) , Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Mycobacterium spp. In certain embodiments, the bacteria strains are Enterococcus faecalis ATCC 19433, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Streptococcus pneumoniae ATCC 49619, K. pneumoniae ATCC 700603, A. baumannii ATCC 19606, P. aeruginosa ATCC 27853, E. cloacae ATCC 13047, E. coli ATCC 25922, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus agalactiae ATCC 12386, Streptococcus pneumoniae strain TCH8431 (HM-145) , Streptococcus pneumoniae strain NP112 (NR-19213) , HA-MRSA ST239, ATCC BAA-43, ATCC BAA-44, and 231ST45. The CA-MRSA strains encompassed 43ST30, 45ST59, USA300, and ST-22. The VRSA strains included VRS1 (NR-46410 / S. aureus strain HIP11714) , VRS3b (NR-46413 / S. aureus strain HIP13419) , VRS9 (NR-46419 / S. aureus strain AIS 080003) , and VRS12 (NR-46423 / S. aureus strain 1002434) , Mycobacterium tuberculosis H37Ra, and Mycobacterium abscessus ATCC 19977.

[0119] The subject can be a canine, feline, bovine, equine, non-human primate, or human. In certain embodiments, the subject is a human.

[0120] In certain embodiments, the compounds described herein are bactericidal or bacteriostatic.

[0121] In another aspect, provided herein is the use of a compound described herein for the preparation of a medicament for the treatment of a bacterial infection.

[0122] In another aspect, provided herein is a method of treating a bacterial infection in a subject in need thereof, the method comprising the step of co-administering a therapeutically effective amount of a compound described herein and an antibacterial agent to the subject. The antibacterial agent can be any antibacterial agent known in the art.

[0123] AW000783 analogues demonstrated the ability to bind to the RNAP β'CH, effectively inhibiting bacterial transcription and exhibiting notable antimicrobial activity. According to the docking model, AW000783 binds to the target protein in a bent conformation, despite its inherently linear structure (FIG. 3A) . The measured distance between the two carbons across six atoms in the central linker, which connects the two aromatic rings of AW000783, is  Based on this observation, the inventors replace the linear linker with a ring structure to minimize molecular energy, thereby maintaining the active conformation. An aryl ring is proposed for this modification due to its ease of substitution during synthesis (FIG. 3B) . Consequently, a new triaryl scaffold has been designed through scaffold hopping from the original bent linear compound.

[0124] A panel of bacteria was used for the antimicrobial activity evaluation on compounds 1-39, including eight pathogens from the “WHO priority pathogens list, 2024” . The panel consisted of four Gram-positive strains: Enterococcus faecalis ATCC 19433, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and 29213, Streptococcus pneumoniae ATCC 49619; and five Gram-negative ones: Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Acinetobacter baumannii ATCC 19606, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterobacter cloacae ATCC 13047, and Escherichia coli ATCC 25922. Antibiotic susceptibility testing was performed using standard strains based on the Clinical &Laboratory Standards Institute (CLSI) guideline.

[0125] In comparison to other hydrogen-bond acceptors such as nitro, cyano, fluoride, and methoxy groups, compounds featuring trifluoromethyl (CF3) -substituted aromatic rings exhibited significant activity against Gram-positive bacterial strains, as detailed in Table 1. Notably, compounds 7 and 9 demonstrated the most potent antimicrobial effects across all tested Gram-positive bacteria, with minimum inhibitory concentration (MIC) values ranging from 2 to 8 μg / mL. Compounds 3, 6, and 15 showed comparable antimicrobial activity against S. aureus ATCC 25923 and S. aureus ATCC 29213, with slightly reduced efficacy against Enterococcus faecalis (3 and 6) and Streptococcus pneumoniae (15) . SAR analysis revealed a preference for a benzene ring as the left aromatic group over heteroaryl groups such as pyridine (compounds 1-3 vs. 4-6) . The CF3 substituent at para-and meta-positions was found to significantly enhance antimicrobial activity (compounds 5, 15 vs. 16-19) . Examination of the substituent position on the right aryl group indicated that CF3 at meta-position provided the greatest antimicrobial activity (compounds 3 and 6) , with compound 7 outperforming compound 8. Only the nitro group at para-position showed comparable activity (9) , while other substituents (10 and 11) and heteroaryl groups (compounds 12-14) resulted in decreased activity. Furthermore, the use of a thiazole as the left aryl group (compound 20) suggested that a six-membered aromatic ring is essential for antimicrobial efficacy. Interestingly, the triaryl derivatives of hit compound AW000783 exhibited activity exclusively against Gram-positive bacteria, likely due to the presence of an additional central aryl group, which may increase lipophilicity and reduce membrane permeability in Gram-negative bacteria.

[0126] Table 1. Antimicrobial activity of the Compounds 1-20 (MIC μg / mL) . EFAE: E. faecalis ATCC 19433, SAURa: S. aureus ATCC 25923, SAURb: S. aureus ATCC 29213, SPNE: S. pneumoniae ATCC 49619, KPNE: K. pneumoniae ATCC 700603, ABAU: A. baumannii ATCC 19606, PAER: P. aeruginosa ATCC 27853, ECLO: E. cloacae ATCC 13047, ECOL: E. coli ATCC 25922.

[0127] The inventors selected compound 6 as the model compound to explore the effects of varying heteroatom linkers between aryl groups, as detailed in Table 2. The inventors employed nitrogen, oxygen, sulfur, and oxymethylene as isosteres to replace the heteroatoms in compound 6. Surprisingly, most derivatives exhibited reduced antimicrobial activity. This suggests that the triaryl derivatives possess a relatively rigid structure, which may not accommodate isosteric modifications effectively. Notably, compound 23, which features an additional carbon in the right linker, demonstrated the highest activity, with an MIC at 4 μg / ml against S. pneumoniae.

[0128] Table 2. Antimicrobial activity of the Compounds 21-24 (MIC μg / mL) . EFAE: E. faecalis ATCC 19433, SAURa: S. aureus ATCC 25923, SAURb: S. aureus ATCC 29213, SPNE: S. pneumoniae ATCC 49619, KPNE: K. pneumoniae ATCC 700603, ABAU: A. baumannii ATCC 19606, PAER: P. aeruginosa ATCC 27853, ECLO: E. cloacae ATCC 13047, ECOL: E. coli ATCC 25922.

[0129] Modifications were made to the hydroxy group of the right linker in compound 6 to investigate its role in the binding of triaryl derivatives with β’ CH, as shown in Table 3. In the docking model of the hit compound, the hydroxy group was observed to fit into the pharmacophore model, although its precise binding function remains unclear. Compounds 25 and 26 exhibited almost no activity, suggesting that the hydroxy group is essential in the right linker for maintaining antimicrobial efficacy. In contrast, when the linking moiety Y was modified to amido and sulfonamino groups, which can function as both hydrogen bond acceptors and donors, compounds 27 and 28 displayed antimicrobial activity. This result supports the docking model, suggesting that the hydroxy group primarily acts as a hydrogen-bond donor, interacting with key residues on the target protein. However, compounds 27 and 28 showed reduced activity compared to compound 6, likely due to the altered position of the amino group in these compounds, which may lead to suboptimal binding.

[0130] Table 3. Antimicrobial activity of the Compounds 25-28 (MIC μg / mL) . EFAE: E. faecalis ATCC 19433, SAURa: S. aureus ATCC 25923, SAURb: S. aureus ATCC 29213, SPNE: S. pneumoniae ATCC 49619, KPNE: K. pneumoniae ATCC 700603, ABAU: A. baumannii ATCC 19606, PAER: P. aeruginosa ATCC 27853, ECLO: E. cloacae ATCC 13047, ECOL: E. coli ATCC 25922.

[0131] Modifications were made on the central aryl group, including replacement with a heteroaromatic ring, addition of substitution groups, and alteration of the bonding position, as shown in Table 4. Among these compounds, compound 29, which features a central pyridine, exhibited slightly decreased activity compared to compound 6. However, a significant decline in activity was observed when Ar3 was substituted with a CF3 group (compound 30) or when the bonding position was changed from para to meta (compound 31) . These results suggest that the addition of substituents or changes in bonding position on Ar3 may alter the compound's conformation, leading to a complete loss of activity.

[0132] Table 4. Antimicrobial activity of the Compounds 29-31 (MIC μg / mL) EFAE: E. faecalis ATCC 19433, SAURa: S. aureus ATCC 25923, SAURb: S. aureus ATCC 29213, SPNE: S. pneumoniae ATCC 49619, KPNE: K. pneumoniae ATCC 700603, ABAU: A. baumannii ATCC 19606, PAER: P. aeruginosa ATCC 27853, ECLO: E. cloacae ATCC 13047, ECOL: E. coli ATCC 25922.

[0133] The inventors also synthesized and evaluated derivatives in which the right linker was fused into a bicyclic structure with the right aryl group. This further rigidified structure demonstrated selective antimicrobial activity against S. pneumoniae with an MIC at 4 μg / mL (compound 33, Table 5) .

[0134] Table 5. Antimicrobial activity of the Compounds 32-33 (MICμg / mL) . EFAE: E. faecalis ATCC 19433, SAURa: S. aureus ATCC 25923, SAURb: S. aureus ATCC 29213, SPNE: S. pneumoniae ATCC 49619, KPNE: K. pneumoniae ATCC 700603, ABAU: A. baumannii ATCC 19606, PAER: P. aeruginosa ATCC 27853, ECLO: E. cloacae ATCC 13047, ECOL: E. coli ATCC 25922.

[0135] The SAR is summarized in FIG. 4: Both the left and right aryl groups can be heteroaryl rings, such as pyridine (A and / or B and / or Z = N) , although a benzene ring is generally more favorable. Substitutions on Ar1 show a preference for electron-withdrawing groups, such as CF3, particularly at para-position. The left linker X1 demonstrates improved antimicrobial activity when NH replaces O or S. Conversely, substitutions on Ar3 favor electron-withdrawing groups at meta-position. For the right linker X2, O is preferred over S and OCH2. For Ar2, it is optimal to have no substitution and para-bonding.

[0136] Following the preliminary assessment of the antimicrobial potential of the synthesized compounds, the inventors proceeded to an extensive screening process against a panel of clinically significant pathogens. Remarkably, the compound series exhibited notable antimicrobial activity against S. pneumoniae, hence the evaluation was expanded to include Streptococcus pyogenes (Group A Streptococcus) , which is known to cause strep throat, localized skin infections, and necrotizing fasciitis, and Streptococcus agalactiae (Group B Streptococcus) , the causative agent of neonatal infections. Furthermore, the inventors assessed the antimicrobial activity of the synthesized compounds on clinically relevant Gram-positive pathogens, including Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus saprophyticus.

[0137] Table 6 shows the antimicrobial efficacy of the synthesized compounds against clinically demanding pathogens, as evidenced by MICs ranging from 2 μg / mL to 16 μg / mL. Particularly noteworthy is the potent antimicrobial activity of compound 7 against S. agalactiae, with an MIC comparable to that of vancomycin (2 μg / mL) . In addition, all other compounds exhibited antimicrobial effects against the specified pathogens, with MIC values on par with those observed for other Gram-positive bacteria shown in Tables 1-5.

[0138] Table 6. Antimicrobial activity (MIC μg / mL) evaluation of synthesized compounds and commercially available antibacterial compounds against representative pathogenic Gram-positive bacteria. SEPI: S. epidermidis ATCC 12228, SSAP: S. saprophyticus ATCC 15305, SPYO: S. pyogenes (group A Streptococcus) ATCC 19615, SAGA: S. agalactiae (group B Streptococcus) ATCC 12386. Van: Vancomycin, Cip: Ciprofloxacin, Oxa: Oxacillin, Gen: Gentamicin.

[0139] To further validate the antimicrobial activity against S. pneumoniae, the inventors included a selection of clinical isolates of this bacterium, identified as CUHK-X01-04. The identities of these isolates have been confirmed using Bruker MALDI  shown in Table 7.

[0140] Table 7. Clinical isolates of S. pneumoniae

[0141] Table 8 presents additional observations regarding the inhibitory capabilities of the synthesized compounds against various S. pneumoniae strains, with MICs as low as 1 μg / mL. Notably, compounds 6 and 9 displayed a broad spectrum of antimicrobial activity against all strains tested. In summary, these results indicate that the compound series possesses promising antimicrobial potential against Gram-positive bacteria, particularly S. pneumoniae.

[0142] Table 8. Antimicrobial activity (MIC μg / mL) evaluation of the synthesized compounds and commercially available antibacterial compounds against an array of S. pneumoniae strains, including clinical isolates. SPNEa: S. pneumoniae ATCC 49619, SPNEb: S. pneumoniae strain TCH8431 (HM-145) , SPNEc: S. pneumoniae strain NP112 (NR-19213) . Van: Vancomycin, Cip: Ciprofloxacin, Oxa: Oxacillin, Gen: Gentamicin.

[0143] Table 9 presents the inhibitory capabilities of some synthesized compounds against Mycobacterium spp. Notably, compounds 6 and 7 displayed inhibitory effects against both M. abscessus and M. tuberculosis, with MICs against M. abscessus as low as 8 μg / mL. These results suggest that the synthesized compounds have a broad-spectrum antibacterial activity, including Mycobacteria.

[0144] Table 9. Antimicrobial activity (MIC μg / mL) evaluation of the synthesized compounds against an array of Mycobacterium spp. strains. MIC results were determined after incubation at 37 ℃ for 21 days. Mabs 19977: Mycobacterium abscessus ATCC 19977, Mtb H37Ra: Mycobacterium tuberculosis strain H37Ra.

[0145] Table 10 presents the antimicrobial ability of the synthesized compounds against drug-resistant S. aureus strains, including MRSA and VRSA. The tested MRSA strains included: HA-MRSA ST239, which is prevalent in Asia; the epidemic Brazilian / Portuguese strain ATCC BAA-43; the epidemic Iberian lineage ATCC BAA-44; and the 231ST45 strains common in Germany, the Netherlands, and Canada. The CA-MRSA strains encompassed 43ST30, and 45ST59, which are prevalent in Asia, including Hong Kong; USA300, found in North America and Europe; and ST-22, which are prevalent in India. All VRSA strains used in this study were provided by the Network on Antimicrobial Resistance in S. aureus (NARSA) for distribution by BEI Resources, NIAID, NIH, and administered by ATCC (Manassas, Virginia, United States) . The VRSA strains included VRS1 (NR-46410 / S. aureus strain HIP11714) , VRS3b (NR-46413 / S. aureus strain HIP13419) , VRS9 (NR-46419 / S. aureus strain AIS 080003) , and VRS12 (NR-46423 / S. aureus strain 1002434) . Their minimum inhibitory concentrations (MICs) have been determined in CA-MHB. Vancomycin, oxacillin and cefoxitin were used as positive controls.

[0146] Table 10. Antimicrobial activity of the synthesized compounds and commercially available antibacterial compounds against hospital-acquired methicillin-resistant S. aureus (HA-MRSA) strains, community-acquired methicillin-resistant S. aureus (CA-MRSA) strains, and vancomycin-resistant S. aureus (VRSA) .

[0147] Van: Vancomycin; Oxa: Oxacillin; Cef: Cefoxitin. The synthesized compounds showed inhibitory effects against all tested strains, which were resistant to at least one of the commercially available antibiotics. Notably, the MIC values of the compounds against drug-resistant S. aureus strains were comparable to those observed for non-resistant reference strains (ATCC 25923 and ATCC 29213) . These findings suggest that the synthesized compounds possess antimicrobial activity against drug-resistant S. aureus strains.

[0148] Under the guidelines set by CLSI, the inventors conducted a time-kill kinetic assay to evaluate the in vitro activity of the antimicrobial agent against a specific bacterial strain within a defined time frame. In this study, the inventors aimed to assess the time-kill kinetics of compound 7 against two subtypes of S. aureus, ATCC 25923 and community-acquired methicillin resistant S. aureus (CA-MRSA) strain USA300, in liquid culture (FIG. 5) . After a 2-hour treatment with compound 7, both subtypes of S. aureus exhibited an inability to grow at or above 1× MIC (FIG. 5A and FIG. 5B) .

[0149] Following the potent antimicrobial effects demonstrated by compound 7 within 2 hours, a subsequent time-kill kinetic experiment was conducted with a shorter time interval. In this follow-up study, cells were collected every 30 minutes over a 2-hour time course. Notably, as depicted in FIGs. 5C and 5D, a 30-minute treatment with compound 7 completely eradicated the bacterial population below the theoretical detection level, 200 colony forming unit (CFU)  / mL, at or above 1× MIC. Moreover, when the treatment period was extended to 120 minutes at 1 / 4× MIC concentration, the CFU / mL count remained sustained, suggesting that the growth of bacteria was inhibited by compound 7 even at sub-MIC concentrations. These results suggest that compound 7 could inhibit bacterial growth at sub-MIC concentrations and eradicate bacteria below the detectable threshold at 1× MIC or above concentrations.

[0150] The minimum bactericidal concentration (MBC) of compound 7 was determined in accordance with CLSI guidelines. Briefly, 2 × 10 μL droplets of bacterial cultures, prepared at concentrations ranging from 1× MIC to 16× MIC, were plated on agar and incubated overnight at 37 ℃. Colonies were subsequently counted, and the MBC was defined as the lowest concentration at which the colony count dropped below the rejection threshold.

[0151] As summarized in Table 10, compound 7 exhibited bactericidal activity against S. aureus strains, including both ATCC 25923 and CA-MRSA USA300. The MBC values were within two-fold of the MIC values, indicating strong bactericidal activities. In comparison, control antibiotics showed variable activity: vancomycin demonstrated bactericidal effects, whereas linezolid was bacteriostatic. This result highlights the potential of compound 7 as a bactericidal agent, particularly against drug-resistant S. aureus strains.

[0152] Table 10. MICs and MBCs (μg / mL) of compound 7, vancomycin, and linezolid against S. aureus strains ATCC 25923 and CR-MRSA USA300.

[0153] To confirm the impact of compound 7 on the interaction between the CH domain in the β’ subunit and NusG from the Bacillus subtilis strain 168, the inventors utilized an internally developed competitive protein complementation assay to establish the 50%inhibition concentration (IC50) of the compound. In this assay, NusG and β’ CH were combined with two complementary fragments of the Nano-Luc luciferase enzyme. Introducing a specific inhibitor that targets the NusG-β’ CH PPI impaired the efficient reformation of the natural luciferase complex. Consequently, the catalytic reaction of the reconstituted luciferase was impeded, leading to alterations in luminescence levels. These changes in luminescence were then used to observe the inhibitory activity induced by the compound. As depicted in FIG. 6, compound 7 exhibited inhibitory activity against the NusG-β’ CH protein-protein interaction, despite the challenge of obtaining a IC50 value due to the compound’s low aqueous solubility. According to the predicted dose-response curve, the IC50 of compound 7 in inhibiting the interaction between NusG and β’ CH was 547 μM. The IC50 value may be affected by the solubility of the compound with a triaryl structure.

[0154] To further confirm that compound 7 was a transcription inhibitor through targeting the NusG-CH interaction, the inventors conducted fluorescence microscopy assay on a panel of reporter strains of B. subtilis, including BS23 (AtpA-GFP) , BS128 (NusG-GFP) , BS1048 (RpoC-GFP) , and BS1049 (RpsB-GFP) . Cells were untreated or treated with either selected antibiotics or compound 7 at 1× MIC and observed using fluorescent light microscopy after a 30-minute incubation period. To visualize the nucleoid, 4’ , 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) was also added to a final concentration of 1 μg / mL.

[0155] Analysis of the green fluorescent protein (GFP) revealed that compound 7 disrupts bacterial transcription, as indicated by the delocalization of NusG (FIG. 7A) and RpoC (FIG. 7B) . These observed effects were in line with those observed using rifampicin, a known transcription inhibitor. The delocalization of the fluorescence suggested that compound 7 interfered with transcription processes.

[0156] Interestingly, however, the inventors observed distinct differences between rifampicin and compound 7 treatments in terms of nucleoid and ribosomal protein (RpsB) localization (FIG. 7C) . Rifampicin treatment resulted in complete nucleoid expansion, causing extensive delocalization of RpsB, and disrupted the normal mutual exclusivity between the nucleoid and RpsB localization. In comparison, chloramphenicol (atranslation inhibitor) treatment induced nucleoid condensation, causing RpsB-GFP fluorescence to extend from polar regions toward the mid-cell region (FIG. 7C) . This highlights the distinct effects of transcription versus translation inhibitors on nucleoid architecture and ribosomal protein localization. Compound 7 caused only mild nucleoid expansion accompanied by irregular nucleoid morphology in some cells. Large degree of delocalization or redistribution toward cell midpoints was not observed for RpsB upon the treatment of compound 7 (FIG. 7C) .

[0157] To assess the impact of compound 7 on membrane morphology, ATP synthase was used as a reporter, which is localize in the membrane region. Neither rifampicin nor compound 7 induced clear membrane invaginations (FIG. 7D) , indicating no direct membrane disruption. However, treatment with compound 7 resulted in mild membrane patches or clustering of AtpA-GFP fluorescence, a pattern not observed with rifampicin treatment. This was likely to be resulted indirectly from transcription inhibition: disruption of transcription elongation could lead to imbalanced expression or mislocalization of membrane-associated proteins, or the disruption could alter the local membrane microenvironment and causing AtpA clustering. In contrast, colistin, a known membrane-targeting antibiotic, caused complete delocalization of AtpA-GFP, consistent with direct membrane disruption.

[0158] Collectively, the microscopy analyses clearly showed that transcription inhibitors (such as rifampicin and compound 7) induced nucleoid expansion, whereas translation inhibitors (such as chloramphenicol) caused nucleoid condensation (FIGs. 7A-7D) . Compound 7 exhibited a mild nucleoid expansion and irregular nucleoid morphology, distinct from rifampicin-induced complete expansion. Furthermore, the unique nucleoid morphology, uneven RpsB distribution, and AtpA membrane patchiness caused by compound 7 suggested a different transcription inhibition mechanism than rifampicin, likely through specific interference with the NusG-RNAP interaction as designed.

[0159] To evaluate the impact of compound 7 on transcriptional process, B. subtilis strain BS2019 carrying the Nluc gene under the control of the Pxyl promoter was utilized. Inhibition of bacterial transcription by compound 7 would result in reduced Nluc expression. When the bacteria were exposed to compound 7 at 1 / 2× MIC, a concentration shown to cause no bacterial stress in a time-kill kinetic assay. The inventors observed a significant reduction in Nluc mRNA levels relative to the untreated control over 10 minutes (FIG. 8) . These results show compound targeting the RNAP-σ factor interaction, confirming that compound 7 inhibits bacterial transcription.

[0160] In silico docking studies were performed using Autodock Vina to simulate the docking model of compound 7 with RNAP β ‘CH (FIGs. 9A and 9B) . The binding site was defined based on key residues, specifically ARG-270, ARG-278, and ARG-281, which are known to establish essential interactions with NusG (FIG. 9A) . As indicated from FIG. 9B, the trifluoromethyl groups on the terminal aromatic rings of compound 7 form hydrogen bond with ARG-278, ARG-270 and ARG-280 respectively.

[0161] Resistance generation is a critical concern in the development of novel antimicrobial agents. To evaluate whether compound 7 induces bacterial resistance, a 15-day serial passage experiment was conducted using the methicillin-susceptible S. aureus type strain ATCC 29213 and the CA-MRSA strain USA300. These strains were continuously exposed to sub-inhibitory concentrations of either compound 7 or rifampicin over the 15-day period. Rifampicin demonstrated a dramatic increase in MIC values, rising as early as day 6 and exceeding a 30,000-fold increase by the end of the experiment. In contrast, compound 7 exhibited only minor MIC fluctuations, remaining well below the 4-fold threshold indicative of resistance emergence (FIGs. 15A and 15B) . These results suggest that compound 7 has a low propensity to induce bacterial resistance.

[0162] In summary, the present invention addresses the urgent need for novel antimicrobials with unique mechanisms of action to combat emerging antimicrobial resistance. In addition to PPI inhibitors of bacteria transcription, particularly targeting RNAP-σ and NusB-NusE, the inventors have now identified the interaction between the bacterial transcription factor NusG and RNAP β’ CH as a viable target for antimicrobial development. Through scaffold hopping, the inventors developed a novel series of triaryl compounds capable of disrupting the RNAP-NusG PPI, effectively inhibiting bacterial growth. Using a rational design approach guided by a pharmacophore model, the inventors synthesized and tested a panel of compounds against Gram-positive bacteria. Notably, compounds 7 and 9 demonstrated significant antimicrobial activity, with MIC values as low as 1 μg / mL. Compound 7, in particular, showed rapid bacteria-killing effects, reducing bacterial counts to undetectable levels within 30 minutes at concentrations of 1×MIC or higher. Fluorescent microscopy and cell-based transcription assays confirmed that these compounds share a similar mechanism of action with the established transcription inhibitor rifampicin, disrupting bacterial transcription by targeting the β’ CH-NusG interaction. These results highlight the potential of these triaryl antimicrobials for further drug development, offering a promising avenue for addressing the challenge of antimicrobial resistance. In addition, these results suggest that other PPIs essential for bacterial transcription could also be explored as potential targets for novel antimicrobial drug discovery. This approach not only broadens the landscape of possible interventions but also reinforces the potential of targeting transcriptional machinery as a viable strategy in the fight against resistant bacterial pathogens.

[0163] Experimental Section

[0164] General

[0165] Chemicals and reagents utilized in synthesis, unless otherwise stated, were in commercial grade and required no purification. All reactions were monitored by thin-layer chromatography (TLC) on glass sheets (Silica gel F254) which were visualized under UV light. And flash chromatography purification was conducted by using silica gel (200-300 mesh) column. 1H-NMR (400 MHz or 600 MHz) , 13C-NMR (100 MHz or 150 MHz) , and 19F (565 MHz) spectra were measured on Bruker Advance-III spectrometer with TMS as an internal standard. Chemical shifts were presented in δ (ppm) and coupling constants (J) in Hz. High resolution mass spectrometry (HRMS) spectra were measured by Agilent 6540 liquid chromatography-electrospray ionization (LC-EI) QTOF Mass spectrometer. The purity of all product compounds tested for biological activities was ＞95%, determined by analytical HPLC being performed on Waters HPLC system including 2535 quaternary gradient module, 2707 autosampler and 2998 photodiode array (PDA) detector with a XBridge C18, 4.6×100 mm, 5 μM particle size.

[0166] General procedure for the synthesis of compound C1-C7, C13. To a solution of 2-chloropyridine or iodobenzene (1 equiv) , 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (1.2 equiv) in toluene, Pd (OAc) 2 (0.2 equiv) , X-Phos (0.2 equiv) and Cs2CO3 (1.5 equiv) was added. The mixture was stirred under nitrogen at 120 ℃ for 8 hours. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0167] 1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (C1) . The titled compound was prepared from 2-chloro-5- (trifluoromethyl) pyridine (1 g, 5.51 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (893.5 mg, 6.61 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Pale yellow solid, 1.35 g, 88%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 8.44 (d, J = 2.7 Hz, 1H) , 8.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.60 (d, J =8.4 Hz, 2H) , 7.53 (dd, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H) , 7.25 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.64-6.53 (m, 1H) , 2.70 (s, 3H) .

[0168] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C2) . The titled compound was prepared from 1-iodo-4- (trifluoromethyl) benzene (1 g, 3.68 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (596.3 mg, 4.41 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 867.3 mg, 84%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.96-7.92 (m, 2H) , 7.58 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.24 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.15-7.11 (m, 2H) , 6.47 (s, 1H) , 2.58 (s, 3H) .

[0169] 1- (4- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C3) . The titled compound was prepared from 1-iodo-3- (trifluoromethyl) benzene (1 g, 3.68 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (596.3 mg, 4.41 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 889.9 mg, 86%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.96-7.91 (m, 2H) , 7.49-7.42 (m, 2H) , 7.38-7.30 (m, 2H) , 7.10-7.04 (m, 2H) , 6.21 (s, 1H) , 2.58 (s, 3H) .

[0170] 1- (4- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C4) . The titled compound was prepared from 1-iodo-2- (trifluoromethyl) benzene (1 g, 3.68 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (596.3 mg, 4.41 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 869.3 mg, 84%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.77 (dd, J = 8.6, 1.3 Hz, 2H) , 7.55 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.42-7.37 (m, 2H) , 7.07 (dt, J = 8.4, 4.1 Hz, 1H) , 6.90 (dd, J = 8.6, 1.3 Hz, 2H) , 6.56 (s, 1H) , 2.43 (d, J = 1.2 Hz, 3H) .

[0171] 1- (4- ( (4-methoxyphenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C5) . The titled compound was prepared from 1-iodo-4-methoxybenzene (1 g, 4.27 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (693.1 mg, 5.13 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 787.9 mg, 77%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.89-7.81 (m, 2H) , 7.19-7.14 (m, 2H) , 6.96-6.91 (m, 2H) , 6.86-6.81 (m, 2H) , 6.05-5.97 (m, 1H) , 3.85 (s, 3H) , 2.53 (s, 3H) .

[0172] 1- (4- ( (4- (methylthio) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C6) . The titled compound was prepared from (4-iodophenyl) (methyl) sulfane (1 g, 4 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (648.5 mg, 4.8 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 748.8 mg, 73%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.88-7.83 (m, 2H) , 7.29-7.24 (m, 2H) , 7.14-7.10 (m, 2H) , 7.01 (s, 1H) , 6.98-6.94 (m, 2H) , 6.73 (s, 1H) , 2.54 (s, 3H) , 2.49 (s, 3H) .

[0173] 2- ( (4-acetylphenyl) amino) benzonitrile (C7) . The titled compound was prepared from 2-iodobenzonitrile (1 g, 4.37 mmol) and 1- (4-aminophenyl) ethan-1-one (708.2 mg, 5.24 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Pale yellow solid, 672.6 mg, 65%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.00-7.96 (m, 2H) , 7.61 (dd, J = 7.7, 1.5 Hz, 1H) , 7.54-7.44 (m, 2H) , 7.20 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.07-7.02 (m, 1H) , 6.55 (s, 1H) , 2.60 (s, 3H) .

[0174] 1- (3- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C13) . The titled compound was prepared from 1-iodo-2- (trifluoromethyl) benzene (1 g, 3.68 mmol) and 1- (3-aminophenyl) ethan-1-one (596.3 mg, 4.41 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 855.9 mg, 83%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.69 (t, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.61 (m, J = 6.3, 4.4, 3.1 Hz, 2H) , 7.46-7.39 (m, 2H) , 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.31 (m, J = 8.0, 2.4, 1.1 Hz, 1H) , 7.04 (t, J = 7.6 Hz, 1H) , 6.15 (s, 1H) , 2.62 (s, 3H) .

[0175] General procedure for the synthesis of compound D1-D7, D13. To a solution of selected compound C1-C7, C13 (1 equiv) in a mixture of CHCl3 and EA (1: 1) , CuBr2 (1.1 equiv) was added. The mixture was stirred at 60 ℃ and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, the filtrate was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0176] 2-bromo-1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (D1) . The titled compound was prepared from C1 (500 mg, 1.78 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Yellow solid, 316.5 mg, 49%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 8.57 (s, 1H) , 8.04-8.01 (m, 2H) , 7.80 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H) , 7.65-7.62 (m, 2H) , 7.16 (s, 1H) , 6.97 (dd, J = 8.9, 4.3 Hz, 1H) , 4.45 (s, 2H) .

[0177] 2-bromo-1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D2) . The titled compound was prepared from C2 (500 mg, 1.79 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 284.1 mg, 44%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.97 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.34 (s, 1H) , 4.41 (s, 2H) .

[0178] 2-bromo-1- (4- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D3) . The titled compound was prepared from C3 (500 mg, 1.79 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 262.3 mg, 41%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.95 (d, J = 2.1 Hz, 1H) , 7.52-7.44 (m, 2H) , 7.41-7.34 (m, 2H) , 7.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 6.27 (s, 1H) , 4.41 (s, 2H) .

[0179] 2-bromo-1- (4- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D4) . The titled compound was prepared from C4 (500 mg, 1.79 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 278.9 mg, 44%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H) , 7.81 (dt, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H) , 7.75 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H) , 7.63-7.57 (m, 1H) , 7.54 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.35-7.30 (m, 1H) , 7.07 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H) , 6.89 (s, 1H) , 4.36 (d, J = 2.0 Hz, 2H) .

[0180] 2-bromo-1- (4- ( (4-methoxyphenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D5) . The titled compound was prepared from C5 (500 mg, 2.07 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 244.2 mg, 37%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.78 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.10-7.06 (m, 2H) , 6.87-6.83 (m, 2H) , 6.76-6.72 (m, 2H) , 4.28 (s, 2H) , 3.76 (s, 3H) .

[0181] 2-bromo-1- (4- ( (4- (methylthio) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D6) . The titled compound was prepared from C6 (500 mg, 1.94 mmol) , and it was directly used in the next step without further purification.

[0182] 2- ( (4- (2-bromoacetyl) phenyl) amino) benzonitrile (D7) . The titled compound was prepared from C7 (500 mg, 2.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Yellow solid, 259.4 mg, 39%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.99-7.94 (m, 2H) , 7.78-7.75 (m, 1H) , 7.67-7.64 (m, 1H) , 7.47 (td, J = 7.7, 1.2 Hz, 1H) , 7.39-7.35 (m, 3H) , 4.43 (s, 2H) .

[0183] 2-bromo-1- (3- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D13) . The titled compound was prepared from C13 (500 mg, 1.79 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 283.4 mg, 44%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.71 (t, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.65-7.60 (m, 2H) , 7.45 (q, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.39 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.33 (dd, J = 8.1, 2.4 Hz, 1H) , 7.07 (t, J = 7.6 Hz, 1H) , 6.16 (s, 1H) , 4.45 (s, 2H) .

[0184] General procedure for the synthesis of compound E1-E19, E23-E24, E27. To a solution of phenol or pyridinol (1.5 equiv) in acetone, K2CO3 (2 equiv) was added. The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. With the following adding of selected compound D1-D7, D13 (1 equiv) , it was stirred at reflux for 6 hours and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration, the filtrate was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0185] 2- (4-bromo-2, 6-difluorophenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (E1) . The titled compound was prepared from D1 (100 mg, 0.28 mmol) and 4-bromo-2, 6-difluorophenol (87.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 122.4 mg, 90%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (s, 1H) , 8.62-8.58 (m, 1H) , 7.97 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H) , 7.91 (q, J = 9.0 Hz, 4H) , 7.50 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 2H) , 7.07 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 5.64 (s, 2H) .

[0186] 2- (3, 4-difluorophenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (E2) . The titled compound was prepared from D1 (100 mg, 0.28 mmol) and 3, 4-difluorophenol (54.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 103.8 mg, 91%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (s, 1H) , 8.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H) , 8.01-7.96 (m, 3H) , 7.91 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.35 (q, J =9.6 Hz, 1H) , 7.15 (m, J = 12.7, 6.7, 3.0 Hz, 1H) , 7.07 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 6.82 (dd, J = 8.6, 4.2 Hz, 1H) , 5.54 (s, 2H) .

[0187] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (E3) . The titled compound was prepared from D1 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.7 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 111.1 mg, 91%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (s, 1H) , 8.60 (d, J = 2.5 Hz, 1H) , 8.02-7.95 (m, 3H) , 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H) , 7.64 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.08 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 5.65 (s, 2H) .

[0188] 2- (4-bromo-2, 6-difluorophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E4) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4-bromo-2, 6-difluorophenol (87.5 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 123.3 mg, 91%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.94-7.89 (m, 2H) , 7.60 (d, J =8.5 Hz, 2H) , 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.16-7.08 (m, 4H) , 6.37 (s, 1H) , 5.40 (s, 2H) .

[0189] 2- (3, 4-difluorophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E5) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 3, 4-difluorophenol (54.5 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 100.8 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.96 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.08 (q, J = 9.4 Hz, 1H) , 6.79 (m, J = 11.8, 6.4, 3.0 Hz, 1H) , 6.68-6.63 (m, 1H) , 6.42 (s, 1H) , 5.21 (s, 2H) .

[0190] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E6 / 26) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 111.6 mg, 91%yield, mp 126-127℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.99 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.59 (dd, J = 17.4, 8.4 Hz, 4H) , 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.18-7.12 (m, 2H) , 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.35 (s, 1H) , 5.30 (s, 2H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 191.72 160.5, 147.5, 143.7, 130.5, 127.2, 127.0, 127.0, 127.0, 126.9, 126.9, 125.2, 123.8, 123.6, 123.4, 118.9, 118.8, 116.0, 116.0, 114.8, 114.7, 70.5, 29.7. HRMS (ESI) : calcd for C22H15F6NO, [M -H] -438.0929; found, 438.0938. HPLC purity: 99.06%.

[0191] 2- (3- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E7) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 3- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 110 mg, 90%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.04-7.96 (m, 2H) , 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.42 (t, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.27 (d, J = 8.3 Hz, 3H) , 7.24-7.10 (m, 4H) , 6.36 (s, 1H) , 5.28 (s, 2H) .

[0192] 2- (2- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E8) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 2- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 109.4 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.05-7.99 (m, 2H) , 7.63-7.57 (m, 3H) , 7.49-7.43 (m, 1H) , 7.25 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.15-7.09 (m, 2H) , 7.05 (t, J = 7.6 Hz, 1H) , 6.94 (d, J = 8.4 Hz, 1H) , 6.40 (d, J =5.0 Hz, 1H) , 5.29 (s, 2H) .

[0193] 2- (4-nitrophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E9) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4-nitrophenol (58.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Yellow solid, 108.6 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.27-8.18 (m, 2H) , 7.97 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.26 (s, 2H) , 7.20-7.11 (m, 2H) , 7.08-6.96 (m, 2H) , 6.36 (s, 1H) , 5.38 (s, 2H) .

[0194] 4- (2-oxo-2- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethoxy) benzonitrile (E10) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4-hydroxybenzonitrile (49.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 104.3 mg, 94%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.96 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.61 (dd, J = 8.3, 5.2 Hz, 4H) , 7.27 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.15 (d, J =8.4 Hz, 2H) , 7.00 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.45 (s, 1H) , 5.33 (s, 2H) .

[0195] 2- (4- (methylthio) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E11) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (methylthio) phenol (58.7 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 104.1 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.02-7.97 (m, 2H) , 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.28-7.23 (m, 4H) , 7.16-7.12 (m, 2H) , 6.94-6.89 (m, 2H) , 6.33 (s, 1H) , 5.21 (s, 2H) , 2.46 (s, 3H) .

[0196] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) oxy) ethan-1-one (E12) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 5- (trifluoromethyl) pyridin-2-ol (68.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 112.5 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H) , 8.38 (s, 1H) , 7.99 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.76 (d, J =7.7 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.27 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.60 (d, J = 9.7 Hz, 1H) , 5.50 (s, 2H) .

[0197] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (4- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) oxy) ethan-1-one (E13) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) pyridin-2-ol (68.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 114.7 mg, 93%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H) , 8.01-7.98 (m, 2H) , 7.93 (d, J = 7.0 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.29-7.26 (m, 2H) , 6.85 (d, J = 2.1 Hz, 1H) , 6.58 (dd, J = 7.1, 2.0 Hz, 1H) , 5.51 (s, 2H) .

[0198] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-3-yl) oxy) ethan-1-one (E14) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 5- (trifluoromethyl) pyridin-3-ol (68.3 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 110.5 mg, 90%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.54 (d, J = 2.3 Hz, 2H) , 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.45-7.41 (m, 1H) , 7.26 (s, 2H) , 7.16 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.61 (t, J = 8.3 Hz, 1H) , 5.39 (s, 2H) .

[0199] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E15) . The titled compound was prepared from D3 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 110.5 mg, 90%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.94 (dd, J = 14.8, 8.6 Hz, 2H) , 7.54 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.45 (dd, J = 15.2, 7.5 Hz, 2H) , 7.40-7.28 (m, 2H) , 7.11-6.98 (m, 3H) , 5.31 (s, 1H) , 2.58 (s, 2H) .

[0200] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E16) . The titled compound was prepared from D4 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 113.6 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.99-7.93 (m, 2H) , 7.70 (d, J = 7.8 Hz, 1H) , 7.59-7.52 (m, 4H) , 7.23 (m, J = 8.3, 4.4 Hz, 1H) , 7.03 (dd, J = 11.1, 8.5 Hz, 4H) , 6.34 (s, 1H) , 5.29 (s, 2H) .

[0201] 1- (4- ( (4-methoxyphenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-one (E17) . The titled compound was prepared from D5 (100 mg, 0.31 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (75.9 mg, 0.47 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 111 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.90-7.83 (m, 2H) , 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.18-7.12 (m, 2H) , 6.99 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.95-6.90 (m, 2H) , 6.85-6.79 (m, 2H) , 6.01 (s, 1H) , 5.24 (s, 2H) , 3.83 (s, 3H) .

[0202] 1- (4- ( (4- (methylthio) phenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-one (E18) . The titled compound was prepared from D6 (100 mg, 0.3 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (72.3 mg, 0.45 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Yellow solid, 115.1 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.95-7.90 (m, 2H) , 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.00 (dd, J = 13.8, 8.6 Hz, 4H) , 6.13 (s, 1H) , 5.28 (s, 2H) , 2.52 (s, 3H) .

[0203] 2- ( (4- (2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) acetyl) phenyl) amino) benzonitrile (E19) . The titled compound was prepared from D7 (100 mg, 0.32 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (77.2 mg, 0.47 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 116.1 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.04-7.98 (m, 2H) , 7.64 (dd, J = 7.9, 1.5 Hz, 1H) , 7.59-7.48 (m, 4H) , 7.23-7.19 (m, 2H) , 7.13-7.07 (m, 1H) , 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.66 (s, 1H) , 5.31 (s, 2H) .

[0204] 2- ( (4- (trifluoromethyl) benzyl) oxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E23) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and (4- (trifluoromethyl) phenyl) methanol (73.8 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 114.8 mg, 91%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.85-7.81 (m, 2H) , 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.04-7.02 (m, 2H) , 6.22 (s, 1H) , 4.68 (d, J = 2.5 Hz, 4H) .

[0205] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) ethan-1-one (E24) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) benzenethiol (74.6 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 103.2 mg, 81%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.98-7.93 (m, 2H) , 7.61 (d, J =8.4 Hz, 2H) , 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.27-7.24 (m, 2H) , 7.15-7.12 (m, 2H) , 6.32 (s, 1H) , 4.33 (s, 2H) .

[0206] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (3- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (E27) . The titled compound was prepared from D13 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.9 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 113.1 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.70 (t, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.66-7.55 (m, 4H) , 7.45 (td, J = 7.8, 2.9 Hz, 2H) , 7.40-7.34 (m, 2H) , 7.08 (t, J = 7.5 Hz, 1H) , 7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.16 (s, 1H) , 5.34 (s, 2H) .

[0207] General procedure for the synthesis of compound 1 to 19, 23, 24, 31: To a solution of selected compounds E1-E19, E23-E24, E27 (1 equiv) in MeOH, NaBH4 (3 equiv) was added in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred for 8 hours and monitored to react completely. It was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0208] 2- (4-bromo-2, 6-difluorophenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 1) . The titled compound was prepared from E1 (50 mg, 0.1 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 38.3 mg, 76%yield, mp 90-92℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.46 (s, 1H) , 7.69 (dd, J = 9.0, 2.5 Hz, 1H) , 7.47-7.36 (m, 4H) , 7.15 (t, J = 6.1 Hz, 2H) , 6.94 (s, 1H) , 6.85 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 5.14-5.05 (m, 1H) , 4.30 (dd, J = 10.3, 3.2 Hz, 1H) , 4.13 (t, J = 9.5 Hz, 1H) , 3.04 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 158.0, 157.0, 154.5, 154.5, 139.0, 134.9, 134.6, 127.5, 121.4, 116.3, 116.3, 116.2, 116.1, 114.7, 114.6, 114.5, 107.4, 79.5, 72.4.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.41, -125.96. HRMS (ESI) : calcd for C20H14BrF5N2O2, [M + H] + 489.0237; found, 489.0235. HPLC purity: 99.72%.

[0209] 2- (3, 4-difluorophenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 2) . The titled compound was prepared from E2 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 39 mg, 78%yield, mp 107-108℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.47 (s, 1H) , 7.70 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H) , 7.50-7.39 (m, 4H) , 7.09 (q, J = 9.3 Hz, 1H) , 6.97 (s, 1H) , 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 6.77 (m, J = 11.8, 6.5, 3.0 Hz, 1H) , 6.69-6.61 (m, 1H) , 5.13 (dd, J = 8.4, 3.4 Hz, 1H) , 4.09-3.98 (m, 2H) , 2.88 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 158.0, 154.7, 154.6, 151.8, 151.6, 149.2, 146.6, 146.5, 144.2, 144.1, 139.1, 135.1, 134.9, 134.9, 127.4, 125.5, 122.8, 121.4, 117.4, 117.2, 109.9, 109.9, 109.9, 109.9, 104.5, 104.3, 73.9, 72.1. HRMS (ESI) : calcd for C20H15F5N2O2, [M + H] + 411.1132; found, 411.1131. HPLC purity: 99.85%.

[0210] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 3) . The titled compound was prepared from E3 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 37.6 mg, 75%yield, mp 129-131℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.45 (s, 1H) , 7.69 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H) , 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.48 (d, J =8.2 Hz, 2H) , 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.00 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 5.17 (dd, J = 8.2, 3.6 Hz, 1H) , 4.19-4.08 (m, 2H) , 3.22 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.8, 158.1, 139.2, 135.3, 135.0, 135.0, 134.9, 134.9, 128.2, 127.5, 127.1, 127.0, 127.0, 127.0, 125.7, 125.5, 123.7, 123.4, 123.0, 122.8, 121.5, 117.9, 117.5, 114.6, 107.5, 73.3, 72.0. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M + H] + 443.1194; found, 443.1187. HPLC purity: 99.59%.

[0211] 2- (4-bromo-2, 6-difluorophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 4) . The titled compound was prepared from E4 (50 mg, 0.1 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.8 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.42-7.35 (m, 2H) , 7.20-7.10 (m, 4H) , 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 5.99 (s, 1H) , 5.10-5.03 (m, 1H) , 4.30 (dd, J = 10.2, 3.1 Hz, 1H) , 4.13 (t, J = 9.6 Hz, 1H) , 2.95 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 157.1, 157.0, 154.6, 154.5, 146.4, 141.3, 135.0, 134.9, 134.8, 133.0, 127.6, 126.8, 126.7, 126.7, 126.7, 125.9, 123.2, 122.1, 121.8, 121.5, 119.7, 116.3, 116.3, 116.2, 116.1, 115.6, 114.7, 114.6, 114.5, 79.6, 72.4.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.49, -125.93. HRMS (ESI) : calcd for C21H15BrF5NO2, [M + H] + 488.0285; found, 488.0273. HPLC purity: 99.19%.

[0212] 2- (3, 4-difluorophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 5) . The titled compound was prepared from E5 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 45.4 mg, 90%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.44-7.40 (m, 2H) , 7.21-7.17 (m, 2H) , 7.12-7.07 (m, 3H) , 6.78 (m, J = 11.8, 6.5, 3.0 Hz, 1H) , 6.65 (m, J =8.6, 3.2, 1.7 Hz, 1H) , 6.04-5.99 (m, 1H) , 5.11 (dd, J = 8.7, 3.2 Hz, 1H) , 4.08-3.98 (m, 2H) , 2.76-2.69 (m, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 154.7, 154.7, 154.7, 154.6, 151.3, 151.3, 149.7, 149.6, 146.4, 146.2, 146.1, 144.6, 144.5, 141.4, 133.5, 127.6, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.4, 123.6, 122.1, 121.9, 119.7, 117.4, 117.3, 115.6, 110.0, 109.9, 109.9, 109.9, 104.5, 104.3, 74.0, 72.1.19F NMR (565 MHz, CDCl3) δ -61.49, -135.10 (d, J = 21.5 Hz) , -147.44 (d, J = 21.5 Hz) . HRMS (ESI) : calcd for C21H16F5NO2, [M + H] + 410.1179; found, 410.1178. HPLC purity: 98.75%.

[0213] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 6) . The titled compound was prepared from E6 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.6 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.22-7.16 (m, 2H) , 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.06 (s, 1H) , 5.15 (dd, J = 8.5, 3.4 Hz, 1H) , 4.19-4.08 (m, 2H) , 2.88 (d, J = 7.0 Hz, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.8, 146.4, 141.5, 133.5, 127.6, 127.1, 127.0, 127.0, 127.0, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.9, 125.7, 123.7, 123.3, 123.2, 123.0, 122.2, 121.9, 121.5, 119.7, 115.7, 114.6, 73.3, 72.1.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.49, -61.54. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NO2, [M -H] -440.1085; found, 440.1080. HPLC purity: 98.04%.

[0214] 2- (3- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 7) . The titled compound was prepared from E7 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.3 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 3H) , 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.19 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 3H) , 7.13 (dd, J = 8.3, 2.5 Hz, 1H) , 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.03 (s, 1H) , 5.14 (dd, J = 8.6, 3.3 Hz, 1H) , 4.18-4.07 (m, 2H) , 2.81 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 158.5, 146.4, 141.4, 133.6, 132.4, 132.1, 131.8, 131.5, 130.1, 127.6, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.9, 125.2, 123.2, 122.5, 122.2, 121.8, 121.5, 119.7, 118.2, 118.1, 118.0, 115.6, 111.4, 111.3, 73.4, 72.2.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.48, -62.70. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NO2, [M -H] -440.1085; found, 440.1093. HPLC purity: 99.44%.

[0215] 2- (2- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 8) . The titled compound was prepared from E8 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 46.4 mg, 92%yield, mp 152-154℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.63 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H) , 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 3H) , 7.46-7.43 (m, 2H) , 7.20-7.17 (m, 2H) , 7.08 (dd, J = 8.0, 4.9 Hz, 3H) , 7.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 6.01 (s, 1H) , 5.17 (dd, J = 8.6, 3.3 Hz, 1H) , 4.25 (dd, J = 9.1, 3.3 Hz, 1H) , 4.09 (t, J = 8.9 Hz, 1H) , 2.93 (s, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 156.2, 146.5, 141.3, 133.4, 127.7, 127.3, 127.2, 127.2, 127.2, 126.8, 126.7, 126.7, 126.7, 125.5, 124.7, 123.7, 122.9, 122.0, 121.8, 120.8, 119.8, 119.0, 118.8, 115.6, 113.1, 74.0, 71.9.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.48, -62.07. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NO2, [M -H] -440.1085; found, 440.1092. HPLC purity: 99.58%.

[0216] 2- (4-nitrophenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 9) . The titled compound was prepared from E9 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Yellow solid, 37.4 mg, 75%yield, mp 151-153℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 8.24 (d, J = 9.0 Hz, 2H) , 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.20 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.10 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.02 (d, J = 8.9 Hz, 2H) , 6.03 (s, 1H) , 5.17 (dd, J = 8.4, 3.4 Hz, 1H) , 4.22-4.13 (m, 2H) , 2.68 (s, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 163.4, 146.2, 141.9, 141.6, 133.2, 127.6, 127.2, 126.8, 126.8, 126.8, 126.7, 126.0, 125.4, 123.6, 122.5, 122.3, 122.1, 119.6, 115.8, 114.6, 73.7, 72.1. HRMS (ESI) : calcd for C21H17F3N2O4, [M -H] -417.1062; found, 417.1067. HPLC purity: 100%.

[0217] 4- (2-hydroxy-2- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethoxy) benzonitrile (compound 10) . The titled compound was prepared from E10 (50 mg, 0.13 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . White solid, 42.1 mg, 84%yield, mp 151-153℃. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H) , 7.77-7.73 (m, 2H) , 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.42-7.38 (m, 2H) , 7.18-7.15 (m, 2H) , 7.14-7.10 (m, 4H) , 5.66 (d, J = 4.6 Hz, 1H) , 4.91 (dt, J = 7.3, 4.6 Hz, 1H) , 4.15-4.09 (m, 2H) . 13C NMR (151 MHz, DMSO-d6) δ 162.5, 148.1, 141.1, 135.8, 134.6, 128.0, 127.0, 127.0, 127.0, 126.9, 126.3, 124.5, 119.6, 119.3, 119.1, 118.9, 118.7, 118.4, 116.2, 114.9, 103.2, 73.7, 70.8.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ-61.51. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F3N2O2, [M -H] -397.1164; found, 397.1173. HPLC purity: 97.74%.

[0218] 2- (4- (methylthio) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 11) . The titled compound was prepared from E11 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 45.3 mg, 90%yield, mp 43-45℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.44-7.40 (m, 2H) , 7.30-7.27 (m, 2H) , 7.19-7.16 (m, 2H) , 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.92-6.89 (m, 2H) , 6.06 (s, 1H) , 5.11 (dd, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H) , 4.10 (dd, J = 9.5, 3.3 Hz, 1H) , 4.03 (t, J = 9.1 Hz, 1H) , 2.95 (s, 1H) , 2.47 (s, 3H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 156.9, 146.5, 141.3, 133.8, 129.9, 129.7, 127.6, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.5, 123.7, 122.0, 121.7, 119.7, 115.6, 115.4, 73.4, 72.2, 17.8.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.49. HRMS (ESI) : calcd for C22H20F3NO2S, [M -H] -418.1089; found, 418.1097. HPLC purity: 96.22%.

[0219] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) oxy) ethan-1-ol (compound 12) . The titled compound was prepared from E12 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 46.4 mg, 92%yield, mp 148-149℃. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H) , 8.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H) , 7.67 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H) , 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.33 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.15 (dd, J = 18.0, 8.3 Hz, 4H) , 6.57 (d, J = 9.5 Hz, 1H) , 5.68 (d, J = 4.9 Hz, 1H) , 4.80 (dt, J = 8.9, 4.2 Hz, 1H) , 4.24 (dd, J = 12.9, 3.6 Hz, 1H) , 3.90 (dd, J = 12.9, 9.2 Hz, 1H) . 13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ 161.6, 148.0, 141.3, 136.0, 135.7, 127.4, 126.9, 126.9, 126.7, 125.7, 124.0, 123.0, 120.4, 119.4, 119.1, 118.7, 115.0, 107.0, 106.7, 79.7, 79.4, 79.1, 69.7, 56.7.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.52, -62.32. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M -H] -441.1038; found, 441.1047. HPLC purity: 99.56%.

[0220] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (4- (trifluoromethyl) pyridin-2-yl) oxy) ethan-1-ol (compound 13) . The titled compound was prepared from E13 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 46 mg, 92%yield, mp 157-159℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.39 (dd, J = 10.2, 7.7 Hz, 3H) , 7.17 (s, 2H) , 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.88 (s, 1H) , 6.31 (dd, J = 7.1, 1.9 Hz, 1H) , 6.06 (s, 1H) , 5.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 4.49 (dd, J =13.4, 3.0 Hz, 1H) , 3.88 (dd, J = 13.4, 8.4 Hz, 1H) , 3.40 (d, J = 3.6 Hz, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 162.5, 146.3, 141.9, 141.6, 141.4, 140.6, 134.9, 127.0, 126.8, 126.7, 123.4, 123.2, 122.2, 121.9, 119.7, 118.1, 115.6, 101.1, 101.1, 72.1, 58.0.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ-61.53, -66.63. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M -H] -441.1038; found, 441.1050. HPLC purity: 99.45%.

[0221] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (5- (trifluoromethyl) pyridin-3-yl) oxy) ethan-1-ol (compound 14) . The titled compound was prepared from E14 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 46.7 mg, 93%yield, mp 147-148℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 8.51 (q, J = 3.0 Hz, 2H) , 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.45-7.41 (m, 3H) , 7.19 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.09 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.11 (q, J = 4.3, 3.8 Hz, 1H) , 5.16 (dd, J = 7.6, 4.2 Hz, 1H) , 4.21-4.16 (m, 2H) , 3.20-3.02 (m, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 154.5, 146.2, 141.7, 139.0, 138.9, 138.9, 138.9, 133.3, 127.6, 127.3, 127.1, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.4, 124.1, 123.6, 122.3, 122.2, 122.0, 121.8, 119.6, 117.9, 117.9, 117.8, 117.8, 115.8, 73.7, 72.1.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.54, -62.34. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M + H] + 443.1194; found, 443.1191. HPLC purity: 99.11%.

[0222] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 15) . The titled compound was prepared from E15 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.1 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.39 (dd, J = 18.9, 8.1 Hz, 3H) , 7.30 (d, J = 10.9 Hz, 1H) , 7.24-7.12 (m, 4H) , 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 5.99 (s, 1H) , 5.13 (dd, J = 8.4, 3.5 Hz, 1H) , 4.17-4.10 (m, 2H) , 2.91 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 171.4, 160.9, 143.7, 142.1, 132.9, 132.3, 131.9, 131.6, 131.3, 129.9, 128.4, 127.7, 127.1, 127.0, 127.0, 126.9, 125.7, 125.4, 123.9, 123.6, 123.3, 123.0, 122.7, 120.3, 120.1, 118.7, 117.3, 117.3, 117.3, 117.2, 114.6, 113.5, 113.5, 113.5, 113.4, 73.3, 72.2.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.49, -62.80. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M -H] -440.1085; found, 440.1095. HPLC purity: 96.82%.

[0223] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 16) . The titled compound was prepared from E16 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 45.4 mg, 91%yield, mp 88-89℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.60 (dd, J = 10.4, 8.1 Hz, 3H) , 7.45-7.36 (m, 4H) , 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.04-6.98 (m, 3H) , 6.12 (s, 1H) , 5.14 (dd, J = 8.5, 3.4 Hz, 1H) , 4.18-4.07 (m, 2H) , 2.75 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.8, 142.0, 141.7, 133.3, 132.7, 127.6, 127.1, 127.0, 127.0, 127.0, 126.0, 125.7, 123.6, 123.3, 123.0, 120.3, 119.8, 118.3, 118.2, 117.9, 114.6, 73.3, 72.1. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M -H]-440.1085; found, 440.1097. HPLC purity: 98.82%.

[0224] 1- (4- ( (4-methoxyphenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-ol (compound 17) . The titled compound was prepared from E17 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 44.1 mg, 88%yield, mp 121-122℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.57 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.31 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.15-6.98 (m, 4H) , 6.92 (dd, J = 13.0, 8.9 Hz, 4H) , 5.08 (d, J =6.4 Hz, 1H) , 4.14-4.07 (m, 2H) , 3.83 (s, 3H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.9, 155.6, 145.6, 135.3, 130.1, 127.5, 127.0, 127.0, 127.0, 126.9, 125.7, 123.5, 123.2, 123.0, 122.9, 122.6, 115.4, 114.7, 114.6, 73.4, 72.2, 55.6. HRMS (ESI) : calcd for C22H20F3NO3, [M + H] + 404.1474; found, 404.1466. HPLC purity: 98.89%.

[0225] 1- (4- ( (4- (methylthio) phenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-ol (compound 18) . The titled compound was prepared from E18 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 44.8 mg, 89%yield, mp 95-97℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.36 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.28-7.25 (m, 2H) , 7.09-6.99 (m, 6H) , 5.77 (s, 1H) , 5.11 (dd, J =8.6, 3.3 Hz, 1H) , 4.16-4.07 (m, 2H) , 2.69 (s, 1H) , 2.49 (s, 3H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 160.9, 143.4, 140.8, 131.6, 129.7, 129.7, 127.5, 127.0, 127.0, 127.0, 127.0, 126.4, 125.2, 123.5, 123.4, 123.3, 120.1, 119.0, 117.4, 114.6, 73.4, 72.2, 17.7.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.52. HRMS (ESI) : calcd for C22H20F3NO2S, [M -H] -418.1089; found, 418.1094. HPLC purity: 95.01%.

[0226] 2- ( (4- (1-hydroxy-2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethyl) phenyl) amino) benzonitrile (compound 19) . The titled compound was prepared from E19 (50 mg, 0.12 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . White solid, 47.5 mg, 95%yield, mp 158-160℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 9.61 (s, 1H) , 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.50 (dd, J = 7.9, 1.4 Hz, 1H) , 7.42 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.33 (dd, J = 8.3, 6.7 Hz, 1H) , 7.27 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 6.81 (t, J = 7.5 Hz, 1H) , 5.14 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 4.17-4.09 (m, 2H) , 2.74 (d, J = 2.5 Hz, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 171.6, 160.9, 146.1, 141.5, 133.4, 133.0, 129.9, 129.9, 128.3, 127.4, 127.0, 127.0, 127.0, 127.0, 126.5, 125.2, 123.7, 123.5, 123.4, 123.3, 121.2, 117.9, 116.1, 115.4, 114.6, 73.4, 72.2. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F3N2O2, [M + H] + 399.1320; found, 399.1320. HPLC purity: 96.16%.

[0227] 2- ( (4- (trifluoromethyl) benzyl) oxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 23) . The titled compound was prepared from E20 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 43.7 mg, 87%yield, mp 89-91℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.51-7.47 (m, 4H) , 7.38-7.35 (m, 2H) , 7.17-7.13 (m, 2H) , 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 5.96 (s, 1H) , 4.95 (dd, J = 8.8, 3.2 Hz, 1H) , 4.73-4.66 (m, 2H) , 3.68 (dd, J = 9.7, 3.3 Hz, 1H) , 3.58 (t, J = 9.3 Hz, 1H) , 2.77 (s, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 146.5, 141.8, 141.0, 134.4, 129.9, 127.7, 127.5, 126.7, 126.7, 125.5, 119.8, 115.4, 76.0, 72.6. HRMS (ESI) : calcd for C23H19F6NO2, [M -H] -454.1242; found, 454.1248. HPLC purity: 99.03%.

[0228] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) ethan-1-ol (compound 24) . The titled compound was prepared from E21 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.7 mg, 93%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.49 (dd, J = 15.5, 8.3 Hz, 4H) , 7.35 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.07 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.00 (s, 1H) , 4.82 (dd, J = 8.8, 4.0 Hz, 1H) , 3.40 (dd, J = 13.7, 4.1 Hz, 1H) , 3.27 (dd, J = 13.7, 8.7 Hz, 1H) , 2.71 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 146.3, 141.3, 140.8, 136.1, 128.6, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.7, 127.2, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 125.9, 125.9, 125.8, 125.8, 125.4, 123.2, 122.7, 122.5, 122.2, 121.9, 121.5, 119.7, 115.6, 71.8, 42.3.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.47, -62.45. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NOS, [M -H] -456.0857; found, 456.0862. HPLC purity: 98.74%.

[0229] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (3- ( (2- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 31) . The titled compound was prepared from E27 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Dark yellow oil, 46.4 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.59 (dd, J = 11.5, 8.2 Hz, 3H) , 7.44-7.32 (m, 3H) , 7.24 (t, J = 1.9 Hz, 1H) , 7.14-7.09 (m, 2H) , 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 3H) , 6.13 (s, 1H) , 5.14 (dd, J = 8.6, 3.2 Hz, 1H) , 4.20-4.07 (m, 2H) , 2.77 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.8, 142.3, 141.6, 141.0, 132.7, 129.8, 127.1, 127.0, 127.0, 127.0, 126.0, 125.7, 123.7, 123.4, 123.3, 123.0, 120.3, 120.3, 119.5, 118.3, 118.2, 117.9, 117.5, 114.6, 73.4, 72.3. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NO2, [M -H] -440.1085; found, 440.1093. HPLC purity: 98.59%.

[0230] General procedure for the synthesis of compound C9 and C10: To a solution of phenol or benzenethiol (1 equiv) in NMP, 1- (4-fluorophenyl) ethan-1-one (1 equiv) and Cs2CO3 (2 equiv) was added. The mixture was stirred at 120 ℃ under nitrogen for overnight and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0231] 1- (4- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) phenyl) ethan-1-one (C9) . The titled compound was prepared from 4- (trifluoromethyl) phenol (1 g, 6.17 mmol) and 1- (4-fluorophenyl) ethan-1-one (852.1 mg, 6.17 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Pale yellow solid, 1.54 g, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.03-7.99 (m, 2H) , 7.66 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.11-7.07 (m, 2H) , 2.62 (s, 3H) .

[0232] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) phenyl) ethan-1-one (C10) . The titled compound was prepared from 4- (trifluoromethyl) benzenethiol (1 g, 5.61 mmol) and 1- (4-fluorophenyl) ethan-1-one (775.3 mg, 5.61 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . Yellow solid, 1.03 g, 62%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.94-7.90 (m, 2H) , 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.42-7.38 (m, 2H) , 2.61 (s, 3H) .

[0233] General procedure for the synthesis of compound D9 and D10. To a solution of compound C9 or C10 (1 equiv) and TsOH (1 equiv) in acetonitrile, NBS (1.1 equiv) was added in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred at 90 ℃ for 8 hours and monitored to react completely. After cooling to room temperature, the solution was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0234] 2-bromo-1- (4- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) phenyl) ethan-1-one (D9) . The titled compound was prepared from C9 (100 mg, 0.28 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 437.6 mg, 68%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.08-8.02 (m, 2H) , 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.12-7.08 (m, 2H) , 4.44 (s, 2H) .

[0235] 2-bromo-1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) phenyl) ethan-1-one (D10) . The titled compound was prepared from C10 (500 mg, 1.69 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 410.3 mg, 65%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.43-7.40 (m, 2H) , 7.32 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 2H) , 4.14 (s, 2H) .

[0236] General procedure for the synthesis of compound E21 and E22: To a solution of 4- (trifluoromethyl) phenol (1.5 equiv) in acetone, K2CO3 (2 equiv) was added. The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. With the following adding of selected compound D9 or D10 (1 equiv) , it was stirred at reflux for overnight and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration, the filtrate was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0237] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) phenyl) ethan-1-one (E21) . The titled compound was prepared from D9 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.7 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 106.3 mg, 87%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.99 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.42 (t, J = 7.8 Hz, 2H) , 7.11-6.97 (m, 6H) , 5.29 (s, 2H) .

[0238] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) phenyl) ethan-1-one (E22) . The titled compound was prepared from D10 (100 mg, 0.26 mmol) and 4-(trifluoromethyl) phenol (64.8 mg, 0.39 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 111.4 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.97-7.93 (m, 2H) , 7.65 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.56 (dd, J = 8.4, 5.8 Hz, 4H) , 7.41-7.37 (m, 2H) , 7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 5.30 (s, 2H) .

[0239] General procedure for the synthesis of compound C8, C11-C12: To a solution of aniline (1 equiv) and phenylethanone (1 equiv) in toluene, Pd2 (dba) 3 (0.2 equiv) , X-Phos (0.4 equiv) and Cs2CO3 (1.5 equiv) was added. The mixture was stirred under nitrogen at 80 ℃ for 24 hours. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0240] 1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) thiazol-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (C8) . The titled compound was prepared from 4- (trifluoromethyl) thiazol-2-amine (1 g, 5.95 mmol) and 1- (4-bromophenyl) ethan-1-one (1.18 g, 5.95 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Pale yellow solid, 999.6 mg, 59%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.05-8.01 (m, 2H) , 7.55 (s, 1H) , 7.50-7.46 (m, 2H) , 7.21 (s, 1H) , 2.61 (s, 3H) .

[0241] 1- (6- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) pyridin-3-yl) ethan-1-one (C11) . The titled compound was prepared from 4- (trifluoromethyl) aniline (1 g, 6.21 mmol) and 1- (6-bromopyridin-3-yl) ethan-1-one (1.24 g, 6.21 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Pale yellow solid, 1.48 g, 86%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.88 (s, 1H) , 8.15 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H) , 7.63 (s, 4H) , 7.18 (s, 1H) , 6.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 2.59 (s, 3H) .

[0242] 1- (2- (trifluoromethyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (C12) . The titled compound was prepared from 4- (trifluoromethyl) aniline (1 g, 6.21 mmol) and 1- (4-bromo-2- (trifluoromethyl) phenyl) ethan-1-one (1.66 g, 6.21 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) . White solid, 1.98 g, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H) , 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.47 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H) .

[0243] General procedure for the synthesis of compound D8, D11-D12: To a solution of selected compound C10-C12 (1 equiv) in a mixture of CHCl3 and EA (1: 1) , CuBr2 (1.1 equiv) was added. The mixture was stirred at 60 ℃ and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, the filtrate was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0244] 2-bromo-1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) thiazol-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (D8) . The titled compound was prepared from C8 (500 mg, 1.44 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Yellow solid, 190.1 mg, 30%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.11 (d, J = 2.1 Hz, 1H) , 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.81 (d, J = 4.6 Hz, 1H) , 7.74 (dd, J = 8.7, 1.5 Hz, 2H) , 4.84 (d, J = 1.6 Hz, 2H) .

[0245] 2-bromo-1- (6- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) pyridin-3-yl) ethan-1-one (D11) . The titled compound was prepared from C11 (500 mg, 1.78 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (100: 1-50: 1) . Pale yellow solid, 228.1 mg, 36%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 8.87 (d, J = 2.3 Hz, 1H) , 8.14 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H) , 7.65-7.59 (m, 4H) , 7.19 (s, 1H) , 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 4.61 (s, 2H) .

[0246] 2-bromo-1- (2- (trifluoromethyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) ethan-1-one (D12) . The titled compound was prepared from C12 (500 mg, 1.44 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-150: 1) . Pale yellow solid, 279.2 mg, 46%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.62 (dd, J = 13.1, 8.4 Hz, 3H) , 7.42 (d, J = 2.3 Hz, 1H) , 7.31-7.28 (m, 1H) , 7.25 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.47 (s, 1H) , 4.39 (s, 2H) .

[0247] General procedure for the synthesis of compound E20, E25-E26. To a solution of 4- (trifluoromethyl) phenol (1.5 equiv) in acetone, K2CO3 (2 equiv) was added. The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. With the following adding of selected compound D8, D11-D12 (1 equiv) , it was stirred at reflux for overnight and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration, the filtrate was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0248] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) thiazol-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-one (E20) . The titled compound was prepared from D8 (100 mg, 0.27 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (66.6 mg, 0.41 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . Pale yellow solid, 108.4 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.68 (s, 1H) , 7.57 (dd, J =8.8, 5.2 Hz, 4H) , 7.24 (s, 1H) , 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 5.33 (s, 2H) .

[0249] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (6- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) pyridin-3-yl) ethan-1-one (E25) . The titled compound was prepared from D11 (100 mg, 0.28 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (67.7 mg, 0.42 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) . Pale yellow solid, 96.4 mg, 79%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.95 (s, 1H) , 8.20 (dd, J = 8.9, 2.0 Hz, 1H) , 7.69-7.55 (m, 7H) , 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.93 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 5.24 (s, 2H) .

[0250] 1- (2- (trifluoromethyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-one (E26) . The titled compound was prepared from D12 (100 mg, 0.23 mmol) and 4- (trifluoromethyl) phenol (57.1 mg, 0.35 mmol) , purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) . White solid, 96.8 mg, 81%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.61 (dd, J = 8.4, 6.1 Hz, 3H) , 7.55 (d, J =8.6 Hz, 2H) , 7.42 (d, J = 2.3 Hz, 1H) , 7.29 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H) , 7.24 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.51 (s, 1H) , 5.12 (s, 2H) .

[0251] General procedure for the synthesis of compound 20 to 22, 29 and 30: To a solution of selected compounds E20-E22, E25-E26 (1 equiv) in MeOH, NaBH4 (3 equiv) was added in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred for 8 hours and monitored to react completely. It was concentrated and purified by column chromatography on silica gel to provide the titled compounds.

[0252] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) thiazol-2-yl) amino) phenyl) ethan-1-ol (compound 20) . The titled compound was prepared from E20 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . White solid, 45.3 mg, 90%yield, mp 168-169℃. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.59 (s, 1H) , 7.66-7.60 (m, 3H) , 7.59-7.54 (m, 2H) , 7.44 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.13 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 5.67 (d, J = 4.5 Hz, 1H) , 4.91 (q, J = 5.5 Hz, 1H) , 4.09 (d, J = 5.8 Hz, 2H) . 13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ 165.8, 161.9, 140.1, 136.3, 127.7, 127.4, 117.5, 115.5, 73.6, 70.8. 19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.57, -65.08. HRMS (ESI) : calcd for C19H14F6N2O2S, [M -H] -447.0602; found, 447.0611. HPLC purity: 99.27%.

[0253] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) phenyl) ethan-1-ol (compound 21) . The titled compound was prepared from E21 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow oil, 46 mg, 92%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.64-7.46 (m, 6H) , 7.14-6.98 (m, 6H) , 5.19 (dd, J = 8.5, 3.3 Hz, 1H) , 4.20-4.07 (m, 2H) , 2.81 (s, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 160.7, 160.2, 155.8, 135.4, 128.1, 127.2, 127.2, 127.2, 127.1, 127.1, 127.1, 127.0, 125.6, 125.5, 125.3, 125.0, 123.8, 123.4, 122.9, 122.8, 120.0, 118.0, 114.6, 73.3, 72.0.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.56, -61.77. HRMS (ESI) : calcd for C22H16F6O3, [M -H] -441.0925; found, 441.0926. HPLC purity: 95.68%.

[0254] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) thio) phenyl) ethan-1-ol (compound 22) . The titled compound was prepared from E22 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . Pale yellow solid, 45 mg, 90%yield, mp 79-80℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.58 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.52 (d, J = 9.1 Hz, 6H) , 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 2H) , 7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 5.20 (dt, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H) , 4.18 (dd, J = 9.4, 3.3 Hz, 1H) , 4.09 (t, J = 9.0 Hz, 1H) , 2.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 160.7, 142.3, 139.8, 133.4, 132.9, 128.7, 128.4, 128.2, 127.6, 127.1, 127.1, 127.1, 127.0, 127.0, 125.9, 125.9, 125.9, 125.9, 125.2, 124.9, 123.8, 123.6, 123.4, 123.1, 114.6, 73.2, 72.0.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.59, -62.50. HRMS (ESI) : calcd for C22H16F6O2S, [M -H] -457.0697; found, 457.0707. HPLC purity: 98.94%.

[0255] 2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) -1- (6- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) pyridin-3-yl) ethan-1-ol (compound 29) . The titled compound was prepared from E25 (50 mg, 0.11 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (2: 1-1: 1) . Pale yellow solid, 27.8 mg, 55%yield, mp 46-48℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ8.33 (s, 1H) , 7.72 (dd, J = 8.6, 2.2 Hz, 1H) , 7.61-7.55 (m, 4H) , 7.52-7.48 (m, 2H) , 6.98 (dd, J =27.0, 8.5 Hz, 4H) , 5.13 (dd, J = 8.0, 3.8 Hz, 1H) , 4.16-4.10 (m, 2H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 160.6, 154.8, 146.5, 143.5, 136.3, 127.2, 127.1, 127.1, 127.1, 127.0, 127.0, 126.6, 126.6, 126.5, 126.5, 125.2, 125.2, 124.0, 123.8, 123.6, 123.4, 123.4, 118.4, 114.6, 109.8, 72.9, 70.2.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.58, -61.77. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2, [M + H] + 443.1194; found, 473.1198. HPLC purity: 97.69%.

[0256] 1- (2- (trifluoromethyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) phenyl) -2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethan-1-ol (compound 30) . The titled compound was prepared from E26 (50 mg, 0.09 mmol) and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1) . White solid, 38.2 mg, 76%yield, mp 121-122℃. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.58 (t, J = 9.2 Hz, 4H) , 7.43-7.38 (m, 2H) , 7.14 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.02 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.13 (s, 1H) , 5.53 (d, J = 8.7 Hz, 1H) , 4.18 (dd, J =9.6, 2.7 Hz, 1H) , 4.03 (t, J = 9.2 Hz, 1H) , 2.85 (s, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ160.7, 145.0, 141.9, 130.8, 130.0, 129.9, 129.0, 128.8, 128.6, 127.1, 127.1, 127.0, 127.0, 127.0, 127.0, 126.9, 125.2, 125.2, 124.8, 123.9, 123.7, 123.5, 123.5, 123.4, 123.4, 123.3, 123.0, 121.6, 116.7, 115.6, 115.6, 115.5, 115.5, 114.6, 72.9, 67.9.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -58.78, -61.58, -61.73. HRMS (ESI) : calcd for C23H16F9NO2, [M -H] -508.0959; found, 508.0975. HPLC purity: 99.25%.

[0257] Synthetic procedures for Scheme 3.

[0258] tert-butyl (4- (2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethyl) phenyl) carbamate (F1) . To a solution of tert-butyl (4- (2-hydroxyethyl) phenyl) carbamate (1 g, 4.21 mmol) , 4- (trifluoromethyl) phenol (683.2 mg, 4.21 mmol) and triphenylphosphine (1.33 g, 5.06 mmol) in anhydrous THF, DEAD (880.7 mg, 5.06 mmol) was added in ice bath. The mixture was stirred in ice bath for 1 hour and warmed to room temperature for overnight. When being monitored to react completely, it was concentrated and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) to provide the titled compound. White solid, 1.11 g, 69%yield. 1H NMR (600 MHz, Chloroform-d) δ 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.31 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 4.16 (t, J = 7.0 Hz, 2H) , 3.05 (t, J = 7.0 Hz, 2H) , 1.52 (s, 9H) .

[0259] 4- (2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethyl) aniline (G1) . To a solution of F1 (500 mg, 1.31 mmol) in DCM, TFA (1 mL, 13.11 mmol) was added. The mixture was stirred at reflux for overnight and monitored to react completely. After cooling to room temperature, 1M NaOH aqueous solution was added in ice bath to regulate the pH value ranging from 8 to 10. The mixture was extracted with DCM for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1, with additional drops of aqueous ammonia) to provide the titled compound. Pale yellow oil, 352.9 mg, 96%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ7.56 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.14-7.07 (m, 2H) , 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 6.71-6.66 (m, 2H) , 4.17 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 3.66 (s, 2H) , 3.04 (t, J = 7.2 Hz, 2H) .

[0260] 4- (trifluoromethyl) -N- (4- (2- (4- (trifluoromethyl) phenoxy) ethyl) phenyl) aniline (25) . To a solution of 1-iodo-4- (trifluoromethyl) benzene (48.3 mg, 0.18 mmol) and G1 (50 mg, 0.18 mmol) in toluene, Pd (OAc) 2 (7.9 mg, 0.04 mmol) , X-Phos (16.9 mg, 0.04 mmol) and Cs2CO3 (86.9 mg, 0.27 mmol) was added. The mixture was stirred under nitrogen at 120 ℃ for 8 hours. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) to provide the titled compound. Pale yellow oil, 67.4 mg, 89%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.57 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.29 (d, J = 4.8 Hz, 2H) , 7.15 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.00 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 5.92 (s, 1H) , 4.24 (t, J = 6.9 Hz, 2H) , 3.13 (t, J = 6.9 Hz, 2H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 161.3, 146.9, 139.7, 132.6, 130.1, 128.5, 127.0, 126.9, 126.9, 126.8, 126.8, 126.7, 126.7, 126.6, 126.0, 125.8, 123.4, 123.3, 123.1, 123.1, 122.8, 122.0, 121.7, 121.4, 120.5, 115.1, 114.5, 68.9, 35.0.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.41, -61.45. HRMS (ESI) : calcd for C22H17F6NO, [M -H] -424.1136; found, 424.1144. HPLC purity: 100%.

[0261] methyl 4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) benzoate (F2) . To a solution of 4- (trifluoromethyl) aniline (1 g, 6.21 mmol) and methyl 4-bromobenzoate (1.6 g, 7.45 mmol) in toluene, Pd (OAc) 2 (83.6 mg, 0.37 mmol) , BINAP (772.9 mg, 1.24 mmol) and K2CO3 (2.57 g, 18.62 mmol) was added. The mixture was stirred under nitrogen at 80 ℃ for 24 hours. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (200: 1-100: 1) to provide the titled compound. White solid, 1.38 mg, 76%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.01-7.97 (m, 2H) , 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.15-7.10 (m, 2H) , 6.31 (s, 1H) , 3.92 (s, 3H) .

[0262] 4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) benzoic acid (G2) . To a solution of F2 (500 mg, 1.69 mmol) in EtOH, NaOH (338.6 mg, 8.47 mmol) was added. The mixture was stirred at reflux for 4 hours and monitored to react completely. After cooling to room temperature and being concentrated under vacuum, dilute hydrochloric acid (～10%) was added in ice bath to regulate the pH value ranging from 3 to 5. The mixture was extracted with DCM for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (10: 1-5: 1, with additional drops of acetic acid) to provide the titled compound. Pale yellow solid, 465.3 mg, 98%yield. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.48 (s, 1H) , 9.13 (s, 1H) , 7.85 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.19 (d, J = 8.6 Hz, 2H) .

[0263] N- (4- (trifluoromethyl) benzyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) benzamide (27) . To a solution of G2 (50 mg, 0.18 mmol) , EDCI (82.8 mg, 0.53 mmol) and 4-DMAP (2.2 mg, 0.02 mmol) in DCM, (4- (trifluoromethyl) phenyl) methanamine (31.1 mg, 0.18 mmol) was added dropwise in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred for 24 hours and monitored to react completely. It was concentrated and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) to provide the titled compound. Pale yellow solid, 69.1 mg, 89%yield, mp 51-52℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.80-7.74 (m, 2H) , 7.56 (dd, J = 22.6, 8.2 Hz, 4H) , 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.19-7.10 (m, 4H) , 6.70 (t, J =5.9 Hz, 1H) , 6.43 (s, 1H) , 4.69 (d, J = 5.9 Hz, 2H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 167.0, 145.2, 144.8, 142.5, 129.9, 129.6, 129.3, 128.8, 127.9, 126.8, 126.8, 126.8, 126.7, 126.6, 125.7, 125.7, 125.6, 125.6, 125.4, 123.6, 123.2, 123.0, 122.7, 117.4, 117.1, 43.5.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.75, -62.51. HRMS (ESI) : calcd for C22H16F6N2O, [M + H] + 439.1245; found, 439.1245. HPLC purity: 99.26%.

[0264] N- (4- (N- (4- (trifluoromethyl) benzyl) sulfamoyl) phenyl) acetamide (F3) . To a solution of (4- (trifluoromethyl) phenyl) methanamine (749.6 mg, 4.28 mmol) and TEA (1.78 mL, 12.84 mmol) in anhydrous DCM, 4-acetamidobenzenesulfonyl chloride (1 g, 4.28 mmol) was added in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred for 12 hours and monitored to react completely. It was concentrated and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (10: 1-5: 1) to provide the titled compound. Pale yellow solid, 1.31 g, 83%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H) , 7.67 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.56 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.36 (d, J = 8.2 Hz, 3H) , 4.75 (t, J = 6.5 Hz, 1H) , 4.24 (d, J = 6.4 Hz, 2H) , 2.26 (s, 3H) .

[0265] 4-amino-N- (4- (trifluoromethyl) benzyl) benzenesulfonamide (G3) . To a solution of F3 (500 mg, 1.34 mmol) in EtOH, dilute hydrochloric acid (～10%, 170 mL) was added in ice bath. After warming to the room temperature, the mixture was stirred at 70 ℃ for 4 hours and monitored to react completely. After cooling to room temperature and being concentrated under vacuum, 1M NaOH aqueous solution was added in ice bath to regulate the pH value ranging from 8 to 10. The mixture was extracted with DCM for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (5: 1-2: 1, with additional drops of aqueous ammonia) to provide the titled compound. Pale yellow solid, 421.8 mg, 95%yield. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.68-7.62 (m, 2H) , 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.37 (d, J = 7.9 Hz, 2H) , 6.72-6.66 (m, 2H) , 4.67 (d, J = 6.4 Hz, 1H) , 4.20 (d, J = 6.5 Hz, 2H) .

[0266] N- (4- (trifluoromethyl) benzyl) -4- ( (4- (trifluoromethyl) phenyl) amino) benzenesulfonamide (compound 28) . To a solution of G3 (50 mg, 0.15 mmol) and 1-iodo-4- (trifluoromethyl) benzene (41.2 mg, 0.15 mmol) in toluene, Pd2(dba) 3 (13.9 mg, 0.02 mmol) , XantPhos (17.5 mg, 0.03 mmol) and NaOtBu (29.1 mg, 0.3 mmol) was added. The mixture was stirred under nitrogen at 110 ℃ for 24 hours. After cooling to room temperature and filtration with diatomite, water was added and the filtrate was extracted with ethyl acetate for three times and washed with saturated brine. The combined organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) to provide the titled compound. White solid, 49.8 mg, 69%yield, mp 163-164℃. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.21 (s, 1H) , 8.11 (t, J = 6.4 Hz, 1H) , 7.69-7.59 (m, 6H) , 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H) , 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.25-7.20 (m, 2H) , 4.10-4.05 (m, 2H) . 13C NMR (151 MHz, DMSO-d6) δ 146.2, 145.7, 142.9, 131.4, 128.9, 128.7, 128.3, 128.1, 127.3, 127.01, 127.0, 127.0, 125.9, 125.5, 125.5, 125.5, 125.4, 125.4, 124.1, 123.7, 121.4, 121.2, 117.6, 116.6, 45.9.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.91, -62.58. HRMS (ESI) : calcd for C21H16F6N2O2S, [M -H] -473.0758; found, 473.0762. HPLC purity: 97.15%.

[0267] Synthetic procedures for Scheme 4.

[0268] N- (4- (6-nitro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-3-yl) phenyl) -5- (trifluoromethyl) pyridin-2-amine (H1) . To a solution of 2-amino-4-nitrophenol (64.4 mg, 0.42 mmol) in DCM, tetrabutylammonium hydrogen sulfate (18.9 mg, 0.06 mmol) and K2CO3 (76.9 mg, 0.56 mmol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. With the following adding of D1 (100 mg, 0.28 mmol) , the solution was stirred at reflux for 6 hours and monitored to react completely. After cooling to room temperature and filtration, it was concentrated and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) to provide H1. Orange solid, 90.2 mg, 78%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (s, 1H) , 8.59 (d, J = 3.0 Hz, 1H) , 8.08 (t, J = 2.5 Hz, 1H) , 8.06-8.00 (m, 3H) , 7.96-7.91 (m, 3H) , 7.14 (dd, J = 9.0, 3.2 Hz, 1H) , 7.07 (t, J = 7.7 Hz, 1H) , 5.41 (d, J = 3.2 Hz, 2H) .

[0269] 4- (6-nitro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-3-yl) -N- (4- (trifluoromethyl) phenyl) aniline (H2) . The titled compound was prepared from D2 (100 mg, 0.28 mmol) and 2-amino-4-nitrophenol (64.6 mg, 0.42 mmol) in a similar manner as described for compound H1. The elution fluid of Hexane / EA (50: 1-20: 1) was used for chromatography. Orange solid, 89.8 mg, 78%yield. 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 9.27 (s, 1H) , 8.08-7.98 (m, 4H) , 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.28 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.14 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 5.39 (s, 2H) .

[0270] N- (4- (6-nitro-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-3-yl) phenyl) -5- (trifluoromethyl) pyridin-2-amine (compound 32) . To a solution of H1 (50 mg, 0.12 mmol) in MeOH, NaBH4 (9.13 mg, 0.24 mmol) was added in ice bath. After warming to room temperature, the mixture was stirred for overnight and monitored to react completely. It was concentrated and purified by column chromatography on silica gel with the elution fluid of Hexane / EA (10: 1-5: 1) to provide the titled compound. Yellow solid, 32.5 mg, 65%yield, mp 173-174℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.49 (s, 1H) , 7.72 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 1H) , 7.66 (dt, J = 8.5, 2.5 Hz, 1H) , 7.60 (d, J = 2.6 Hz, 1H) , 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.41 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.94-6.81 (m, 3H) , 4.58-4.52 (m, 1H) , 4.41 (dt, J = 10.7, 2.5 Hz, 1H) , 4.33 (s, 1H) , 4.08 (dd, J = 10.8, 8.5 Hz, 1H) . 13C NMR (151 MHz, Chloroform-d) δ 157.7, 148.8, 146.1, 146.1, 142.1, 139.7, 134.9, 134.9, 133.9, 133.0, 129.9, 129.9, 128.2, 125.0, 121.3, 118.1, 117.9, 116.5, 115.2, 110.2, 107.9, 71.1, 53.1.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.45. HRMS (ESI) : calcd for C20H15F3N4O3, [M + H] +417.1175; found, 417.1164. HPLC purity: 98.17%.

[0271] 4- (6-nitro-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-3-yl) -N- (4- (trifluoromethyl) phenyl) aniline (compound 33) . The titled compound was prepared from H2 (50 mg, 0.12 mmol) in a similar manner as described for compound 32. The elution fluid of Hexane / EA (20: 1-10: 1) was used for chromatography. Yellow solid, 31.8 mg, 63%yield, mp 152-154℃. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.65 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H) , 7.59 (d, J = 2.6 Hz, 1H) , 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.35 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.22-7.18 (m, 2H) , 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 6.92 (d, J =8.8 Hz, 1H) , 6.02 (s, 1H) , 4.52 (dd, J = 8.6, 3.0 Hz, 1H) , 4.40 (dt, J = 10.8, 2.4 Hz, 1H) , 4.32 (s, 1H) , 4.08 (dd, J = 10.8, 8.6 Hz, 1H) . 13C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 148.8, 146.0, 142.1, 141.9, 134.0, 131.6, 128.3, 126.8, 126.8, 119.6, 116.4, 116.0, 115.2, 110.2, 71.2, 53.1.19F NMR (565 MHz, Chloroform-d) δ -61.57. HRMS (ESI) : calcd for C21H17F3N3O3, [M + H] + 416.1222; found, 416.1218. HPLC purity: 100%.

[0272] Determination of MIC

[0273] The antimicrobial activity of the compounds was assessed using the broth microdilution method, following the guidelines established by the CLSI. The test medium was cation-adjusted Mueller-Hinton broth (CA-MHB) , or brain heart infusion (BHI) broth for Streptococci. For Mycobacterium, Middlebrook 7H9 broth was used. Serial two-fold dilutions of the compounds were performed, ranging from 256 μg / mL to 0.25 μg / mL. The bacterial cell inoculum was adjusted to approximately 5 × 105 CFU per mL. After 20 hours of incubation at 37 ℃, the results were recorded. For M. tuberculosis, MIC was taken 21 days following inoculation. The MIC was defined as the lowest antibiotic concentration without visible growth. Experiments were performed in duplicates.

[0274] Binding Inhibition Assay

[0275] The inventors employed the protein overproduction, purification, and inhibitor testing. In brief, C-SmBiT-CH (250 nM in PBS) was added to 96-well plates and mixed with 20 μL of the compound at various concentrations. The mixture was then incubated for 10 minutes at 37 ℃. Subsequently, C-LgBiT-NusG (250 nM in PBS) was added to each well and incubated for another 10 minutes at 37 ℃. Following the final incubation step, an equal volume of Promega Luciferase Assay Substrate (Promega) was added to the reaction mixture. The luminescence emitted was measured using a Synergy H1 plate reader (Agilent) . The experiment was performed in triplicates with technical repeats for consistent results.

[0276] Time-Kill Kinetics

[0277] The inventors evaluated the compound’s dose-and time-dependent antimicrobial effects of on S. aureus strains under aerobic conditions, adapting from relevant CLSI guidelines. S. aureus cells at the logarithmic growth phase were adjusted to approximately 1.5 × 106 CFU / mL (colony forming unit per mL) in CA-MHB broth supplemented with varying concentrations of the compound. As a control, bacteria were incubated in CA-MHB broth without the compound. The cultures were grown at 37 ℃ with agitation at 180 rpm. At specific time intervals, 20 μL samples were collected from each treatment group and subjected to a 10-fold serial dilution in sterile phosphate-buffered saline (PBS) . From each dilution, 5 μL samples were spotted on Columbia blood agar plates. The plates were then incubated overnight at 37 ℃, following which the number of viable bacteria in each sample was counted and expressed as CFU / mL. The entire experiment was performed in triplicate.

[0278] Determination of MBC

[0279] The MBCs of the compounds and antibiotics were evaluated following CLSI guidelines. After determining the MIC values, bacterial suspensions were prepared at concentrations ranging from 1× MIC to 16× MIC. Two 10 μL droplets from each concentration were plated onto Columbia blood agar. The plates were then incubated at 37 ℃ for 24 hours. Following incubation, bacterial colonies were counted to estimate viable cell numbers, expressed as CFU / mL. The MBC was defined as the lowest concentration at which the CFU / mL count was reduced to below detectable levels compared to the untreated control. All experiments were performed in duplicate.

[0280] Resistance Generation by Serial Passage

[0281] The emergence of resistance in S. aureus ATCC 29213 and MRSA USA300 through repeated exposure to sub-inhibitory concentrations of the tested compounds and the control drug, rifampicin, was detected through sub-culturing the staphylococci consecutively for 15 days. Fresh colonies of S. aureus cells were obtained by streaking from glycerol stocks onto TSB agar and incubated overnight at 37 ℃. On Day 0, colonies were then resuspended in CA-MHB and used to inoculate a broth microdilution plate set up to determine the MICs of the tested compounds and rifampicin in triplicates. From Day 1 onwards, the latest MICs of the tested compounds and rifampicin were recorded upon each passage, and the wells containing cells cultured under 1 / 4× MIC of the tested compounds and rifampicin in each replicate lane were homogenised and used to prepare inocula for the corresponding replicate lanes on the fresh plate. Throughout the assay, each plate was covered with sterile, breathable seals to prevent evaporation and incubated overnight at 37 ℃ with constant agitation at 350 rpm on an orbital plate shaker. Each inoculum was then suspended in fresh CA-MHB and incubated overnight to confluence. The process was repeated until its conclusion on Day 15, and the experiment was performed in triplicates.

[0282] Live-Cell Fluorescence Imaging

[0283] Various B. subtilis strains were cultivated overnight on selective LB (Lennox formulation) agar plate at 37 ℃. Single colony was picked and allowed to grow in LB medium (Lennox formulation) with selective antibiotic at 37 ℃ with shaking at 180 rpm overnight. The culture was then diluted to OD600 = 0.05 and allowed to grow until OD600 = 0.50 at 37 ℃ with agitation. Control antibiotics and compound 7 at 1× MIC were then added to the culture with xylose, followed by further incubation at 37 ℃ with shaking for 30 minutes. To visualize the nucleoid, DAPI was added to a final concentration of 1 μg / mL. For microscopic analysis, 2.5 μL of cell culture was placed onto 1.2%a thin freshly prepared agarose gel and covered with a coverslip prior to imaging. Fluorescence images were captured using a Nikon Eclipse Ti2-E Live-cell Fluorescence Imaging System equipped with a 100× / 1.45 oil objective, and the GFP signal was visualized using a FITC (fluorescein isothiocyanate) (525 / 50 emission) filter, whereas the DAPI signal was visualized using a DAPI (460 / 50 emission) filter. The digital images were analysed using ImageJ version 1.53k software.

[0284] Cell-Based Transcription Assay

[0285] An overnight culture of the bacterial strain BS2019 was diluted to an OD600 = 0.05 and grown at 37 ℃ with shaking at 180 rpm until OD600 = 0.40. Cells were then treated with 1.0%(w / v) xylose and compound 7 at 1 / 2× MIC. After treatment, the cells were incubated at 37 ℃ with shaking at 180 rpm. At 2-minute intervals, three 1 mL aliquots were collected for transcription analysis, with the aliquots immediately mixed with 400 μL of stop buffer (2%phenol, 60%ethanol, 10 mM EDTA) to arrest transcription. The aliquots were then centrifuged at 5,000 × g at 4 ℃ for 5 minutes to harvest cell pellets, which were stored at -80 ℃ until further usage.

[0286] The transcription analysis was performed as follows. Total RNA was extracted using  Total RNA Miniprep Kit (New England Biolabs) , followed by reverse transcription using the High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems) . Before qPCR analysis, cDNA samples were diluted to 2.5 ng / μL, as determined by using the QubitTM ssDNA Assay Kit (Invitrogen) with the Qubit 4 Fluorometer. qPCR analysis was conducted using the forward primer (5’ -TCCTTGAACAGGGAGGTGTGT-3’ , SEQ ID NO. 1) and reverse primer (5’ -CGATCTTCAGCCCATTTTCAC-3’ , SEQ ID NO. 2) , along with PowerUpTM SYBRTM Green Master Mix (Applied Biosystems) . Gene expression levels were quantified using the method, and statistical significance between the treated and the untreated groups was assessed using an unpaired t-test, with significance indicated by *(p < 0.05) , **(p < 0.01) , and ***(p < 0.001) .

Claims

1.A compound of Formula 1:Ar1-X1-Ar2- (CROR1) -C (R) 2-X2-Ar31or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein:m is a whole number selected from 1-4;n is a whole number selected from 1-2;p is a whole number selected from 1-4;X1 is -O-, -S-, or - (NR2) -;X2 is -O-, -S-, or -OCH2-;R for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl;R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2;R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2;Ar1 is selected from the group consisting of:Ar2 isAr3 is selected from the group consisting of:R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; andR6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl.2.The compound of claim 1, wherein m is a whole number selected from 1-2; n is 1; and p is a whole number selected from 1-2.3.The compound of claim 1 or 2, wherein X1 is - (NR2) -.4.The compound of claim 1 or 2, wherein Ar1 is:andAr3 is:5.The compound of claim 1 or 2, wherein Ar2 is: 6.The compound of claim 1 or 2, wherein at least one R3 is CF3; and at least one R4 is CF3 or fluorine.7.The compound of claim 1, wherein the compound has Formula 2: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein:m is a whole number selected from 1-4;n is a whole number selected from 1-2;p is a whole number selected from 1-4;X1 is - (NR2) -;X2 is -O-, -S-, or -OCH2-;Ar1 is:Ar2 is:Ar3 is:R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2;R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2;R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; andR6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl.8.The compound of claim 7, wherein at least one R3 is CF3 and at least one R5 is fluoro, CF3, or nitro.9.The compound of claim 7 or 8, wherein R1 is hydrogen and R2 is hydrogen.10.The compound of claim 1, wherein the compound has Formula 3: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein:m is a whole number selected from 1-2;n is a whole number selected from 1-2;p is a whole number selected from 1-2;A is C, C-H, or N;R1 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, -S (O) 2N (R6) 2, or -P (O) (OR6) 2;R2 is hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, -C (O) R6, -C (O) OR6, -C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R6, or -S (O) 2N (R6) 2;R3 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R4 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6;R5 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, perhaloalkoxyl, halogen, nitrile, nitro, azido, -OR6, -SR6, -N (R6) 2, -C (O) R6, -C (O) OR6, -OC (O) R6, -N (R6) C (O) R6, -C (O) N (R6) 2, -N (R6) C (O) OR6, -OC (O) N (R6) -, -OC (O) OR6, -N (R6) C (O) N (R6) 2, -S (O) 2R56 -S (O) 2N (R6) 2, and -N (R6) S (O) 2R6; andR6 for each instance is independently selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, haloalkyl, perhaloalkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, and aralkyl; or two instances of R6 together with the atom they are covalently bonded form a 3-6 membered cycloalkyl or heterocyloalkyl,wherein at least one R3 is CF3 and at least one R5 is fluoro, CF3, or nitro.11.The compound of claim 10, wherein R1 is hydrogen.12.The compound of claim 10 or 11, wherein R2 is hydrogen.13.The compound of claim 1, wherein the compound is selected from the group consisting of: and pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein each of m, n, and p is independently a whole number selected from 1-2.14.The compound of claim 13, wherein R4 is hydrogen.15.The compound of claim 1, wherein the compound is selected from the group consisting of: and pharmaceutically acceptable salts thereof.16.The compound of claim 1, wherein the compound comprisesand pharmaceutically acceptable salts thereof.17.A pharmaceutical composition comprising the compound of claim 1.18.A method of treating a bacterial infection in a subject in need thereof, the method comprising administering a therapeutically effective amount of a compound of any one of claims 1-16 to the subject.19.The method of claim 18, wherein the bacterial infection results from a Gram-positive bacterium.20.The method of claim 18, wherein the bacterial infection results from a bacterium selected from the group consisting of Enterococcus spp., Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, and Mycobacterium spp.

Images