Cosmetic composition comprising 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol

Abstract

Provided is a cosmetic composition comprising combination of N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid, and 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one, which may inhibit the melanin production in the human skin.

Description

Cosmetic composition comprising 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Isobutylamido Thiazolyl ResorcinolTechnical field

[0001] The present invention relates to a cosmetic composition comprising 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol.

[0002] Technical background

[0003] A beautiful and attractive appearance is a desire for many people. Therefore, in order to take care on the skin, consumers often prefer to apply cosmetic products containing active ingredients delivering a skin benefit. Various literatures have been disclosed describing cosmetic active ingredients.

[0004] 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one has the following structure:

[0005] The properties of the substance are described on the website https:  / / www. chemicalbook. com / ChemicalProductProperty_EN_CB8927406. htm.

[0006] A further well-known cosmetic ingredient in the art is Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol. It is known under the chemical name N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid.

[0007] WO 2013041526 A1 discloses the use of Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol for the treatment and prophylaxis of unwanted pigmentation of the skin.

[0008] Melanocytes are responsible for the pigmenting of the skin; these are found in the lowest layer of the epidermis, the Stratum basale, alongside the basal cells as pigment-forming cells which, depending on the skin type, occur either individually or in clusters of varying size.

[0009] Melanocytes contain, as characteristic cell organelles, melanosomes, in which the melanin is formed. Inter alia, upon stimulation by UV radiation, melanin is formed to a greater extent. This is transported via the living layers of the epidermis (keratinocytes) ultimately into the horny layer (corneocytes) and brings about a more or less pronounced brownish to brown-black skin color.

[0010] Melanin is formed as the end stage of an oxidative process in which tyrosine is converted, under the co-action of the enzyme tyrosinase, via several intermediates, to the brown to brown-black eumelanins (DHICA and DHI melanin) , or, with the participation of sulfur-containing compounds, to the reddish pheomelanin. DHICA and DHI melanin are formed via the common intermediates dopaquinone and dopachrome. The latter, sometimes with the participation of further enzymes, is converted either to indol-5, 6-quinonecarboxylic acid or into indol-5, 6-quinone, from which the two specified eumelanins are formed.

[0011] The formation of pheomelanin proceeds inter alia via the intermediates dopaquinone and cysteinyldopa. The expression of the melanin-synthesizing enzymes is controlled by a specific transcription factor (microphthalmia-associated transcription factor, MITF) . Besides the described enzymatic processes of the melanin synthesis, further proteins are also of importance for the melanogenesis in the melanosomes. An important role here appears to be attributed to the so-called p-protein, although the exact function is still unclear.

[0012] As well as the above-described process of the melanin synthesis in the melanocytes, the transfer of the melanosomes, their stay in the epidermis and also their degradation and the degradation of the melanin are also of decisive importance for the pigmenting of the skin. It was shown that the PAR-2 receptor is important for the transport of the melanosomes from the melanocytes into the keratinocytes (M. Seiberg et al., 2000, J. Cell. Sci., 113: 3093-101) .

[0013] Problems with hyperpigmentation of the skin have a wide variety of causes and / or are accompanied phenomena of many biological processes, e.g. UV radiation (e.g. freckles, Ephelides) , genetic disposition, incorrect pigmentation of the skin during wound healing or scarring (post-inflammatory hyperpigmentation) or skin aging (e.g. Lentigines seniles) .

[0014] After inflammatory reactions, the pigmentation system of the skin reacts with sometimes opposite reactions. This can lead either to post-inflammatory hyperpigmentations or hypopigmentations. Post-inflammatory hypomelanoses often arise inter alia in conjunction with atopy, Lupus erythematosus and psoriasis. The different reaction forms of the pigmentation system of the human skin as a result of inflammatory phenomena are understood only very incompletely.

[0015] Problems with post-inflammatory hyperpigmentation often occur in darker skin types. Particularly in colored males, the problem of Pseudofollikulitis barbae is known, which is associated with cosmetically undesired incorrect pigmentation and / or leads to this. Forms of melasma, which occur in particular in women of Asiatic origin on the face and on the décolletage area, and also various forms of irregular pigmentation of the skin are also types of post-inflammatory hyperpigmentations. In addition, dark circles around the eyes are also considered to be a form of post-inflammatory hyperpigmentations, the underlying inflammation in most cases proceeding without clinical manifestations.

[0016] Hyperpigmentation (melasma) , i.e. the excessive presence of melanin in the skin, is caused by an increased production of melanin in the melanocytes. In many cases, post-inflammatory incorrect pigmentation of this type is increased further by the action of sunlight (UV light) without resulting in a UV-induced inflammation (sunburn) .

[0017] It was found that in melanocyte cultures, Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol strongly but reversibly inhibited melanin production, whereas hydroquinone, which also caused skin lightening, irreversibly inhibited melanogenesis.

[0018] However, the pure fact that Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol allows for an inhibition of the melanin production should not obscure that it is still desirable to further increase the inhibition efficiency.Summary of invention

[0019] It was now surprisingly found by the applicant that the present invention leads to an improved melanin production inhibition.

[0020] The present invention is a combination of

[0021] a) N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid, and

[0022] b) 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one.

[0023] A further object of the invention is the use of the combination of the present invention in a cosmetic composition.

[0024] A further object is a cosmetic composition comprising the combination of the invention.

[0025] A further object of the invention is the use of the combination of the invention to inhibit the melanin production in the human skin.

[0026] A further object is the combination of the invention for use as a medicament. A further object is the combination of the invention for use in the treatment of hyperpigmentation.

[0027] A further object of the invention is the cosmetic use of the combination of the invention for application to the human skin.

[0028] All the weight percentages (%by weight) given below relate, unless otherwise stated, to the total weight of the cosmetic composition. If ratios of certain components are disclosed in the following description, these ratios refer, unless otherwise stated, to weight ratios of the components.

[0029] Unless otherwise stated, all tests and measurements were performed under “normal conditions” . The term "normal conditions" refers to 20℃, 1013 hPa and a relative humidity of 50%.

[0030] In the following description the terms “according to the invention” , “preferred according to the invention” and so on are always directed to the use according to the invention, to the composition and to the method according to the invention.

[0031] For the purposes of the present disclosure, the term "free from" means that the proportion of the respective substance is less than 0.05%by weight. This ensures that entrainments or impurities with these substances are not included as "free from" according to the invention.

[0032] The term “skin” refers solely to the human skin. The term “hair” refers solely to the human head hair.

[0033] If viscosity values are given in this disclosure, then all values relate to a measurement at 25℃. in a 150 ml wide-mouth bottle (VWR No.: 807-001) using Rheomat R 123 from the company proRheo. The Rheomat R 123 from proRheo GmbH is a rotational viscometer, i.e. a measuring body rotates in the substance to be measured. The force required to rotate the measuring body in the sample at a specified speed is measured. The viscosity is calculated from this torque, the speed of the measuring body and the geometric dimensions of the measuring system used. Measuring body No. 1 (Article No. 200 0191) , suitable for a viscosity range of up to 10,000 [mPa s] , speed range 62.5 min-1, is used as the measuring body.

[0034] Emulsifiers are understood to be all substances which are listed in the International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, Thirteenth Edition 2010, (ISBN 1-882621-47-6) under the name "emulsifying agent" . Surfactants are understood to be all substances which are listed in the International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, Thirteenth Edition 2010, (ISBN 1-882621-47-6) under the name "surfactant" .

[0035] According to the invention it is preferred if the ratio by weight between N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid and 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one is in the range from 10: 1 to 1: 10, more preferably 5: 1 to 1: 5 and most preferably 1.5: 1 to 1: 1.5.

[0036] If present in a cosmetic composition it is preferred if the total quantity of N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid is in the range from 0.01 to 2.0%by weight, more preferably 0.05 to 1.5%by weight and most preferably 0.1 to 1.1%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0037] If present in a cosmetic composition it is preferred if 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one is contained in a total quantity ranging from 0.001 to 2.0%by weight, more preferably from 0.005 to 1.0%by weight and most preferably from 0.01 to 0.4%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0038] It is further preferred if Caprylic / Capric Triglyceride is contained. It is preferred if the ratio by weight between 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Caprylic / Capric Triglyceride is in the range from 1: 200 to 1: 1, more preferably 1: 150 to 1: 50 and most preferably 1: 110 to 1: 80.

[0039] According to the invention it is preferred if Sodium Metabisulfite is contained in a total quantity ranging from 0.01 to 1.0%by weight, more preferably from 0.03 to 0.4%by weight and most preferably from 0.08 to 0.3%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0040] According to the invention it is preferred if the ratio by weight between 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Sodium Metabisulfite is in the range from 10: 1 to 1: 5, more preferably 2: 1 to 1: 2 and most preferably 1.5: 1 to 1.1: 1.

[0041] Further it is preferred if the composition according to the invention is an emulsion. It is preferred if it is an oil in water emulsion.

[0042] The emulsion comprises by definition an oil phase. It is preferred if the total quantity of the oil phase is in the range from 12 to 35%by weight, more preferably from 13 to 30%by weight and most preferably from 14 to 25%by weight, calculated to the total weight of the composition. By definition emulsifier and surfactants are not part of the oil phase. Nevertheless, fatty alcohols count as part of the oil phase.

[0043] Preferred oil which can be contained in the composition according to the invention are selected from the esters of the linear or branched saturated or unsaturated fatty alcohols having 2-30 carbon atoms with linear or branched saturated or unsaturated fatty acids having 2-30 carbon atoms, which may be hydroxylated.

[0044] Preferred esters of the linear or branched saturated or unsaturated fatty alcohols having 2-30 carbon atoms with linear or branched saturated or unsaturated fatty acids having 2-30 carbon atoms, which may be hydroxylated, are selected from the group consisting of hexyldecyl stearate, hexyldecyl laurate, isodecyl neopentanoate, isononyl isononanoate, 2-ethylhexyl palmitate, 2-ethylhexyl stearate, isopropyl myristate, isopropyl palmitate, isopropyl stearate, isopropyl isostearate, isopropyl oleate, isooctyl stearate, isononyl stearate, isocetyl stearate, isononyl isononanoate, isotridecyl isononanoate, cetearyl isononanoate, 2-ethylhexyl laurate, 2-ethylhexyl isostearate, 2-ethylhexyl cocoate, 2-octyldodecyl palmitate, butyloctanoic acid-2-butyl octanoate, diisotridecyl acetate, ethyl stearate, methyl stearate, , propyl stearate, butyl stearate, ethyl myristate, ethyl palmitate, butyl palmitate, propyl stearate, propyl palmitate, stearyl benzoate, benzyl palmitate, benzyl stearate, palmityl benzoate, C12-15 alkyl benzoate, palmityl acetate, n-butyl stearate, n-hexyl laurate, n-decyl oleate, oleyl oleate, oleyl erucate, erucyl oleate, erucyl erucate, ethylene glycol dioleate and ethylene glycol dipalmitate. Among those isopropyl myristate and / or isopropyl palmitate are particular preferred.

[0045] Further it is preferred, if the composition comprises at least one triglyceride. Preferred triglycerides are selected from Cocos Nucifera Oil (Triglyceride (Fractionated Coconut Oil) ) , Astrocaryum Murumuru Seed Butter (Astrocaryum sp Triglycerides) , C10-18 Triglycerides, C10-40 Isoalkyl Acid Triglyceride, C12-18 Acid Triglyceride, C18-36 Acid Triglyceride, C8-12 Acid Triglyceride, Caprylic / capric / myristic / stearic Triglyceride, Caprylic / Capric Triglyceride, Capric / Lauric / Myristic / Oleic Triglyceride, Caprylic / Capric / Linoleic Triglyceride, Caprylic / Capric / Stearic Triglyceride, Castoryl Maleate (Ceraphyl RMT (Ricinoleyl Monomaleate Triglyceride) ) , Hydrogenated C12-18 Triglycerides, Lauric / palmitic / oleic Triglyceride, Mustelic / palmitic Triglyceride, Oleic / linoleic Triglyceride, Oleic / Palmitic / Lauric / Myristic / Linoleic Triglyceride, Ricinoleic / caproic / caprylic / capric Triglyceride, Caprylic / Capric / Succinic Triglyceride and / or Jojoba Oil / Caprylic / Capric Triglyceride Esters.

[0046] Further preferred triglycerides, which can be contained according to the invention, are natural oils. Preferred natural oils, which can preferably be contained, are coconut oil, (sweet) almond oil, walnut oil, peach kernel oil, apricot kernel oil, avocado oil, tea tree oil, soybean oil, glycine soja oil, sesame oil, sunflower oil, tsubaki oil, evening primrose oil, rice bran oil, palm kernel oil, mango kernel oil, cuckoo flower oil, thistle oil, macadamia nut oil, grape seed oil, amaranth seed oil, argan oil, bamboo oil, olive oil, wheat germ oil, pumpkin seed oil, mallow oil, hazelnut oil, safflower oil, canola oil, sasanqua oil, jojoba oil, rambutan oil, cocoa butter, and shea butter.

[0047] It is preferred according to the invention if the composition comprises dicaprylyl carbonate. For the case that dicaprylyl carbonate is contained it is preferred if the total quantity of dicaprylyl carbonate is in the range from 0.1 to 10%by weight, more preferably from 2 to 8%by weight and most preferably 3 to 6%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0048] It is preferred according to the invention if the composition comprises caprylic / capric triglyceride. For the case that caprylic / capric triglyceride is contained it is preferred if the total quantity of caprylic / capric triglyceride is in the range from 0.1 to 10%by weight, more preferably from 2 to 8%by weight and most preferably 3 to 6%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0049] It is preferred according to the invention if the composition comprises Butyrospermum Parkii (Shea) Butter. For the case that Butyrospermum Parkii (Shea) Butter is contained it is preferred if the total quantity of Butyrospermum Parkii (Shea) Butter is in the range from 0.1 to 10%by weight, more preferably from 2 to 8%by weight and most preferably 3 to 6%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0050] Further it is preferred if the composition comprises one or more alkanes having 10 to 26 carbon atoms. It is particular preferred if the one or more alkanes having 10 to 26 carbon atoms are selected from the group consisting of C10-13 Alkane, C12-17 Alkane, C13-14 Alkane, C13-15 Alkane, C14-17 Alkane, C14-19 Alkane, C14-20 Alkane, C14-22 Alkane, C15-19 Alkane, C15-23 Alkane, C16-23 Alkane and C18-21 Alkane. Most preferred is C15-19 Alkane.

[0051] It is preferred according to the invention if the total quantity of the alkanes having 10 to 26 carbon atoms is in the range from 0.1 to 13%by weight, more preferably from 2.0 to 11%by weight and most preferably from 3.0 to 10%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0052] Further it is preferred if the composition comprises one or more alkanes having 28 or more carbon atoms. Among those alkanes having 28 or more carbon atoms squalene is preferably contained in the composition according to the invention. It is preferred according to the invention if the total quantity of the alkanes having 28 or more carbon atoms is in the range from 0.1 to 5%by weight, more preferably from 1.0 to 4.0%by weight and most preferably from 1.5 to 3.0%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0053] Further compounds which can be contained in the oil phase are for example chosen from further branched saturated or unsaturated fatty alcohols having 6-30 carbon atoms. These alcohols are also often referred to as Guerbet alcohols since they are obtainable according to the Guerbet reaction. Preferred alcohol oils are hexyldecanol ( G 16,  T 16) , octyldodecanol ( G,  20) and 2-ethylhexyl alcohol.

[0054] Further compounds preferably contained are chosen from the addition products of from 1 to 5 propylene oxide units onto mono-or polyhydric C8-22-alkanols, such as octanol, decanol, decanediol, lauryl alcohol, myristyl alcohol and stearyl alcohol, e.g., PPG-2 myristyl ether and PPG-3 myristyl ether ( APM) .

[0055] Further compounds, which can be contained in the composition according to the invention, are chosen from the addition products of at least 6 ethylene oxide and / or propylene oxide units onto mono-or polyhydric C3-22-alkanols, such as butanol, butanediol, myristyl alcohol and stearyl alcohol, e.g., PPG-14 butyl ether (Ucon AP) , PPG-9 butyl ether ( B25) , PPG-10 butanediol ( 57) and PPG-15 stearyl ether ( E) .

[0056] Further compounds preferably contained are chosen from the C8-C22-fatty alcohol esters of monobasic or polybasic C2-C7-hydroxycarboxylic acids, in particular, the esters of glycolic acid, lactic acid, malic acid, tartaric acid, citric acid and salicylic acid. Such esters based on linear C14 / 15-alkanols, e.g., C12-C15-alkyl lactate, and on C12 / 13-alkanols branched in the 2 position are available under the trade name from Nordmann, Rassmann GmbH &Co., Hamburg, in particular the commercial products  ESI,  EMI and  ETI.

[0057] The composition according to the invention may further comprise one or more fatty alcohols having 14 to 20 carbon atoms. Among those fatty alcohols cetyl alcohol, stearyl alcohol and the corresponding mixture cetearyl alcohol are most preferred. For the case that one or more fatty alcohols having 14 to 20 carbon atoms are contained in the composition it is preferred if the total quantity of the fatty alcohols having 14 to 20 carbon atoms is in the range from 0.1 to 6%by weight, more preferably 0.5 to 5.0 %by weight and most preferably 1.5 to 4.0 %by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0058] According to the invention the composition comprises 0.05 to 1%by weight of at least one polymer selected from the group of xanthan gum, gellan gum, sclerotium gum and dehydroxanthan gum, calculated to the total weight of the composition.

[0059] It is particular preferred if at least xanthan gum is contained. Further it is particular preferred if at least gellan gum is contained. Further it is particular preferred if at least sclerotium gum is contained. Further it is particular preferred if at least dehydroxanthan gum is contained.

[0060] It is advantageous if the composition comprises 0.01 to 0.8%by weight, more preferably 0.05 to 0.3%by weight and most preferably 0.1 to 0.2%by weight of at least one polymer selected from the group of xanthan gum, gellan gum, sclerotium gum and dehydroxanthan gum, calculated to the total weight of the composition.

[0061] For the case that xanthan gum is contained, it is preferred if the total quantity of xanthan gum is in the range from 0.01 to 0.8%by weight, more preferably 0.05 to 0.5%by weight and most preferably 0.1 to 0.4%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0062] Further it is preferred if the composition according to the invention comprises further short chain polyols comprising 2 to 8 carbon atoms. Preferred polyols of that type are butylene glycol, glycerol, propylene glycol, pentylene glycol, butylene glycol, 1, 2 hexanediol, 1, 2 heptanediol, 1, 2 propanediol, methylpropanediol and caprylyl glycol.

[0063] It is preferred if those preferred polyols are contained in quantities ranging from 0.5 to 10%by weight, more preferably 1 to 9%by weight and most preferably from 1.5 to 8%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0064] Further it is preferred if the composition comprises phenoxyethanol and / or ethylhexylglycerin.

[0065] For the case that phenoxyethanol is contained it is preferred if the total quantity of phenoxyethanol is in the range from 0.1 to 0.8%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0066] For the case that ethylhexylglycerin is contained it is preferred if the total quantity of ethylhexylglycerin is in the range from 0.1 to 1.2%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0067] Further it is preferred if the composition comprises hydoxyacetophenone. For the case that hydoxyacetophenone is contained it is preferred if the total quantity of hydoxyacetophenone is in the range from 0.1 to 0.8%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0068] Further it is preferred according to the invention if at least one nonionic emulsifier is contained. Preferred nonionic emulsifiers are selected from oleth-20, glyceryl stearate, glyceryl stearate SE, glyceryl stearate citrate and PEG-40 hydrogenated castor oil. For the case that at least one nonionic emulsifier is contained, it is preferred if the total quantity of the nonionic emulsifier is in the range from 0.2 to 4.0%by weight, more preferably from 0.5 to 3.0%by weight and most preferably 1.3 to 2.8%by weight, calculated to the total weight of the emulsion.

[0069] Further it is preferred if the composition comprises at least one anionic emulsifier. Among the well-known anionic emulsifiers (See the International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook) the emulsifier sodium stearoyl glutamate is preferably contained in the composition according to the invention. For the case that at least one anionic emulsifier is contained, it is preferred if the total quantity of the anionic emulsifier is in the range from 0.1 to 4.0%by weight, more preferably from 0.2 to 3.0%by weight and most preferably 0.3 to 2.8%by weight, calculated to the total weight of the composition. For the case that sodium stearoyl glutamate is contained, it is preferred if the total quantity of sodium stearoyl glutamate is in the range from 0.1 to 4.0%by weight, more preferably from 0.2 to 3.0%by weight and most preferably 0.3 to 2.8%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0070] For the preferred case that glyceryl stearate citrate is contained, it is preferred if the total quantity of glyceryl stearate citrate is in the range from 0.1 to 4.0%by weight, more preferably from 0.2 to 3.0%by weight and most preferably 0.3 to 2.8%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0071] It is further preferred according to the invention if the composition comprises citric acid and / or sodium citrate.

[0072] Further it is preferred according to the invention if the composition comprises complex formers selected from ethylenediaminetetraacetic acid and / or trisodium ethylenediamine disuccinate.

[0073] Further it is preferred if the composition comprises water. For the case that water is contained it is preferred if the total quantity of water is in the range from 50.0 to 80.0%by weight, more preferably 55.0 to 78.0%by weight and most preferably 60.0 to 75.0%by weight, calculated to the total weight of the composition.

[0074] The compositions of the invention may further comprise active ingredients which can have a beneficial aspect for the human skin. Preferred examples of such active ingredients are glycyrrhetinic acid, arctiin, folic acid, coenzyme Q10 (ubiquinone) , alpha-glucosylrutin, carnitine, carnosine, caffeine, natural and  / or synthetic isoflavonoids, glycerylglucose, creatine, creatinine, taurine, tocopherol, tocopherol acetate, vitamin C, vitamin C phosphate, vitamin C palmitate, niacinamides, vitamin A palmitate, retinol, panthenol, glycyrrhiza inflata root extract, licochalcon A, honociol and magnolol (also as a component of Magnolia-Extracts) , hyaluronic acid and  / or silymarin.Examples

[0075] The following examples should illustrate the composition of this invention, without, however, intending to limit the invention to these examples. The numerical values in the examples are percentages by weight, based on the total weight of the compositions.

[0076] In a first aspect the samples Ex. 1 to Ex. 3 were analyzed in a screening as outlined below.

[0077] Melanin Content Measurement

[0078] 1. Source of Cells: Human Primary Melanocyte (Asian Skin) (Melanocyte extracted from human tissue, Fitzpatrick phototype IV, 5th Cell Passage) .

[0079] 3. Cell seeding: After reviving the cells, the cells were seeded into a 6-well plate when the plating efficiency reaches about 60%, and incubate overnight in a CO2 incubator at 37℃ with 5%CO2.

[0080] 4. Solution Preparation: Prepare the test substance working solutions according to the test groups including:

[0081] 1. Blank Control Group (culture medium M-254 culture medium from BioCell Biotechnology Co. Ltd

[0082] 2. Test Sample Group (see table below)

[0083] 5. Administration: According to the test groups, when the plating rate in the 6-well plate reaches 50%to 60%, administer the samples in groups, with 3 replicate wells for each group. For the blank control group, add 2mL of culture medium to each well, and for the sample group, add 2mL of culture medium containing the test sample at the corresponding concentration to each well. After administration, place the 6-well plate in a CO2 incubator (37℃, 5%CO2) and culture for 72 hours, then discard the liquid and wash with PBS.

[0084] 6. Cell digestion: Digest the melanocytes with trypsin, after terminating the reaction, collect the cells into a centrifuge tube, centrifuge at 10000r / min for 10 minutes, and discard the supernatant.

[0085] 7. Add 200μL of water, 500μL of anhydrous ethanol, and 500μL of diethyl ether to the centrifuge tube in sequence, mix well, let stand at room temperature, and centrifuge at 10000r / min for 10 minutes, discard the supernatant.

[0086] 8. Add 1mL of 1mol / L NaOH aqueous solution containing 10%DMSO, and heat in a water bath at 80℃ for 40 minutes.

[0087] 9. After the incubation is complete, take 200μL of the supernatant and place it into the corresponding well of a 96-well plate, and read the OD value at 405nm.

[0088] 10. Inhibition rate calculation: Inhibition rate (%) = (Blank Control Group -Sample Group)  / Blank Control Group × 100%.

[0089] The obtained results are shown below.

[0090] *The quantity of DMSO was 1%by weight of the total test sample. The culture medium M-254 culture medium was the remaining part of the test sample. Isobutylamido Thiazolyl Resorcinol and / or the second compound were first dissolved in DMSO and then the mixture was added to the culture medium. Caprylic / Capric Triglyceride has no effect on the melanine inhibition.

[0091] Ex. 3 showed a synergistic increase in the inhibition of the melanin content as measured above.

[0092] Further examples:

Claims

1.Combination ofa) N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid, andb) 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one.2.Cosmetic composition comprising the combination according to claim 1.3.Composition according to claim 2 characterized in that the ratio by weight between N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid and 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one is in the range from 10: 1 to 1: 10, preferably 5: 1 to 1: 5 and more preferably 1.5: 1 to 1: 1.5.4.Composition according to any of the claims 2 to 3 characterized in that the total quantity of N- [4- (2, 4-Dihydroxyphenyl) -1, 3-thiazol-2-yl] -2-methylpropanamid is in the range from 0.01 to 2.0%by weight, preferably 0.05 to 1.5%by weight and more preferably 0.1 to 1.1%by weight, calculated to the total weight of the composition.5.Composition according to any of the claims 2 to 4 characterized in that 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one is contained in a total quantity ranging from 0.001 to 2.0%by weight, preferably from 0.005 to 1.0%by weight and more preferably from 0.01 to 0.4%by weight, calculated to the total weight of the composition.6.Composition according to any of the claims 2 to 5 characterized in that Sodium Metabisulfite is contained.7.Composition according to claim 6 characterized in that Sodium Metabisulfite is contained in a total quantity ranging from 0.01 to 1.0%by weight, preferably from 0.03 to 0.4%by weight and more preferably from 0.08 to 0.3%by weight, calculated to the total weight of the composition.8.Composition according to claim 6 characterized in that the ratio by weight between 1- (4-Hydroxy-3-methoxyphenyl) -decan-3-one and Sodium Metabisulfite is in the range from 10: 1 to 1: 5, preferably 2: 1 to 1: 2 and more preferably 1.5: 1 to 1.1: 1.9.Composition according to any of the claims 2 to 8 characterized in that the composition is an emulsion containing an oil phase.10.Composition according to claim 9 characterized in that the total quantity of the oil phase is in the range from 12 to 35%by weight, preferably from 13 to 30%by weight and more preferably from 14 to 25%by weight, calculated to the total weight of the composition.11.Composition according to any of the claims 2 to 10 characterized in that the composition comprises 0.05 to 1%by weight of at least one polymer selected from the group of xanthan gum, gellan gum, sclerotium gum and dehydroxanthan gum, calculated to the total weight of the composition.12.Use of the combination according to claim 1 or the composition according to any of the claims 2 to 11 to inhibit the melanin production in the human skin.13.Use of the combination according to claim 1 or the composition according to any of the claims 2 to 11 for application to the human skin.

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