Dosing regimens for HBV treatment

Abstract

Provided herein are methods, kits, and articles of manufacture useful for treating a hepatitis B virus (HBV) infection. In some embodiments the methods comprise administering to a subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, the methods comprise administering an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and a siRNA specific for an HBV target. In some embodiments the methods comprise administering to a subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, a siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. The methods and kits described herein may be useful for treating chronic HBV infection.

Description

DOSING REGIMENS FOR HBV TREATMENTRELATED APPLICATIONS

[0001] This application claims the priority and benefit of PCT Application No. PCT / CN2025 / 084766, filed on March 25, 2025, PCT Application No. PCT / CN2025 / 095120, filed on May 15, 2025, and PCT Application No. PCT / CN2025 / 112687, filed on August 5, 2025, the contents of each of which are incorporated herein in their entirety. REFERENCE TO AN ELECTRONIC SEQUENCE LISTING

[0002] The contents of the electronic sequence listing (AUSB_011_03WO_SeqList_ST26. xml; Size: 6, 720, 035 bytes; and Date of Creation: March 24, 2026) are herein incorporated by reference in its entirety.BACKGROUND

[0003] Hepatitis B is a viral disease transmitted parenterally by contaminated material such as blood and blood products, contaminated needles, sexually and vertically from infected or carrier mothers to their offspring. The World Health Organization (WHO) estimates that 254 million people were living with chronic hepatitis B infection in 2022, with 1.2 million new infections each year. In 2022, hepatitis B resulted in an estimated 1.1 million deaths, mostly from cirrhosis and hepatocellular carcinoma (primary liver cancer) (world wide web: who. int / news-room / fact-sheets / detail / hepatitis-b) . Thus new anti-HBV therapies, including therapies capable of treating chronic HBV, are needed to reduce the risk of HBV-related conditions including liver fibrosis, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma (HCC) , as well as to reduce the risk of vertical and horizontal transmission, improve quality of life, and reduce healthcare costs.

[0004] Without being held to theory or mechanism, chronic HBV infection involves a complex interplay between viral persistence and host immune responses. During chronic HBV infection, HBV antigens, including the HBV surface antigen (HBsAg) , are produced in large quantities (Kim, J. H., et al. Sci Rep 10, 1835 (2020) ) . Because they are produced in such large quantities, HBV antigens are believed to act as decoys to the immune system, leading to the exhaustion of B cells and T cells, and diverting the immune system away from effective antiviral responses that could otherwise neutralize the virus (Rydell, Gustaf E et al. Virology vol. 509 (2017) : 67-70) . In this way, chronic exposure to high levels of HBV antigens is believed to contribute to the exhaustion of HBV-specific immune responses, which makes treating chronic HBV infection particularly challenging. The efficacy of existing therapies can be transient and insufficient to treat chronic HBV. Accordingly, there exists a need for methods and dosing regimens useful for addressing the problem of transient efficacy and treating chronic HBV infections. Provided herein are dosing regimens and methods that address this need.SUMMARY

[0005] In one aspect, provided herein is a method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, the HBV infection is a chronic HBV infection.

[0006] In some embodiments, the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of those Exemplary Regimens 41-46 as depicted in Table 3. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage.

[0007] In another aspect, provided herein is a method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide specific for an HBV target; a siRNA specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, the HBV infection is a chronic HBV infection.

[0008] In some embodiments, the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of those Exemplary Regimens 1-7 and 11-40 as depicted in Table 3. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage.

[0009] In another aspect, provided herein is method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising (i) assessing HBV infection levels in the subject and (ii) administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target; an HBV vaccine; and / or an immunomodulator. In some embodiments, the antisense oligonucleotide and the siRNA, HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, the antisense oligonucleotide and the siRNA, HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages. In some embodiments the stages are selected from any of Exemplary Regimens 1-47, as depicted in Table 3. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the immunomodulator is administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA is administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine is administered in a second stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the siRNA is administered in a first stage and the antisense oligonucleotide is administered in a second stage.

[0010] In another aspect, provided herein is a method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: a nucleic acid polymer (NAP) ; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator.

[0011] In another aspect, provided herein is a method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: a nucleic acid polymer (NAP) ; a siRNA specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator.

[0012] In some embodiments, the siRNA is selected from the group consisting of JNJ-3989 (ARO-HBV, Daplusiran / Tomligisiran) , Vir-2218 (BRII-835, Elebsiran) , AB-729 (Imdusiran) , Xalnesiran (RG6346, DCR HBVS, RO7445482) , RBD1016 (SR016) , ALG-125755, HT-101, TQA3038, HRS-5635, BB-103, OLX703A, STP155G, KW-040, ALG-072571, STSG-0002, HECN30227, SA1211, BW-20507, and YKYY013.

[0013] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is a modified antisense oligonucleotide. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is selected from the group consisting of GSK3228836, GSK3389404, ALG-020572, ALG-020576, ALG-021682, ALG-021639, ALG-021618, or an antisense oligonucleotide comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0014] In some embodiments, the HBV vaccine is selected from the group consisting of Engerix-B, Jintan HBV vaccine, HEPLISAV-B, BRII-179 (VBI-2601) , VTP-300, VRON-0200, HB-400, JNJ-64300535, PreHevbrio, Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula polymorpha) , Recombinant Hepatitis B Vaccine (CHO Cell) , VTP300, TVAX-008, VRON-0200, NASVAC, VBI-2601 (BRIl-179) , WVX001, CVI-HBV-002, GS-2829, GS-6779, HB-400 (GS2829 / GS6779) , ISA104, CLB-3000, TherVacB, AVX70371, CARG-201, AHB-201, AHB-837, and WGc-0201. In some embodiments, the HBV vaccine comprises an HBV antigen. In some embodiments, the HBV antigen is a human HBV antigen. In some embodiments, the HBV antigen is an HBV surface antigen (HBsAg) , HBV e antigen (HBeAg) , HBV core antigen (HBcAg) , HBV polymerase, or any fragment or combination thereof. In some embodiments, the HBsAg is a pre-S1 domain, a pre-S2 domain, a Small-HBsAg, a Medium-HBsAg, a Large-HBsAg, or any fragment or combination thereof.

[0015] In another aspect, also provided herein is a kit comprising an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an siRNA specific for an HBV target, an HBV vaccine, and / or an immunomodulator.

[0016] In another aspect, also provided herein is a kit comprising a nucleic acid polymer and an siRNA specific for an HBV target, an HBV vaccine, and / or an immunomodulator.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0017] FIG. 1 and FIGS. 2A-2AI provide exemplary antisense oligonucleotide sequences for use in the methods of the disclosure.

[0018] FIG. 1 provides a legend for the nucleoside modifications at each position of the antisense oligonucleotide sequences shown in FIGS. 2A-2AI. The column “Examples” describes each type of nucleoside modification.

[0019] FIGS. 2A-2AI show a table of exemplary modified oligonucleotides of the disclosure. The modifications at each position of the modified oligonucleotide sequences are read using the legend in FIG. 1. AUS1010 to AUS1714 (SEQ ID NO: 11 to SEQ ID NO: 666) represent the modified oligonucleotide sequences. AUS1233 (SEQ ID NO: 10) , also referred to as AUS1138, is a reference modified oligonucleotide sequence. FIG. 2A shows SEQ ID NOS: 10-19. FIG. 2B shows SEQ ID NOS: 20-36. FIG. 2C shows SEQ ID NOS: 37-54. FIG. 2D shows SEQ ID NOS: 55-72. FIG. 2E shows SEQ ID NOS: 73-95. FIG. 2F shows SEQ ID NOS: 96-117. FIG. 2G shows SEQ ID NOS: 118-138. FIG. 2H shows SEQ ID NOS: 139-162. FIG. 2I shows SEQ ID NOS: 163-179. FIG. 2J shows SEQ ID NOS: 180-185. FIG. 2K shows SEQ ID NOS: 189-204. FIG. 2L shows SEQ ID NOS: 205-217. FIG. 2M shows SEQ ID NOS: 218-237. FIG. 2N shows SEQ ID NOS: 238-257. FIG. 2O shows SEQ ID NOS: 258-280. FIG. 2P shows SEQ ID NOS: 281-301. FIG. 2Q shows SEQ ID NOS: 302-315. FIG. 2R shows SEQ ID NOS: 316-331. FIG. 2S shows SEQ ID NOS: 332-345. FIG. 2T shows SEQ ID NOS: 346-367. FIG. 2U shows SEQ ID NOS: 368-385. FIG. 2V shows SEQ ID NOS: 386-407. FIG. 2W shows SEQ ID NOS: 408-425. FIG. 2X shows SEQ ID NOS: 426-447. FIG. 2Y shows SEQ ID NOS: 448-465. FIG. 2Z shows SEQ ID NOS: 466-491. FIG. 2AA shows SEQ ID NOS: 492-512. FIG. 2AB shows SEQ ID NOS: 513-542. FIG. 2AC shows SEQ ID NOS: 543-559. FIG. 2AD shows SEQ ID NOS: 560-585. FIG. 2AE shows SEQ ID NOS: 586-609. FIG. 2AF shows SEQ ID NOS: 610-616. FIG. 2AG shows SEQ ID NOS: 621-634. FIG. 2AH shows SEQ ID NOS: 635-656. FIG. 2AI shows SEQ ID NOS: 657-666.DETAILED DESCRIPTION

[0020] Provided herein are methods that may be used to treat HBV infections. In some embodiments, the methods may be used to treat chronic HBV infections. Without being held to theory or mechanism, in some embodiments, the methods described herein are capable of suppressing HBV viral replication, reducing HBV antigen levels, and restoring immune control of HBV-including HBV-specific T cell responses.

[0021] Antisense oligonucleotides (ASOs) targeting HBV can be efficacious in reducing HBV antigen levels. They can also effectively lower HBV DNA levels and suppress viral replication. Moreover, they have been shown to enhance the immune response to HBV, as evidenced by the production of HBsAb, the antibody against the HBV surface antigen HBsAg. These capabilities are believed to position antisense oligonucleotides as a leading choice in the treatment of HBV infection. In some cases, however, the antiviral effect of antisense oligonucleotide treatment can be transient (see, e.g., Yuen, MF., et al. Nat Med 27, 1725–1734 (2021) ) .

[0022] As described herein, the inventors of the present disclosure have recognized that antisense oligonucleotides may be combined with other, complementary therapies that are expected to collectively achieve favorable long-term therapeutic outcomes for treating HBV infections. Specifically, as described herein, HBV-targeting siRNAs may be used in combination with antisense oligonucleotides to maintain low or undetectable levels of HBV DNA, mRNA, and proteins levels over an extended period of time. As further described herein, HBV vaccines or other immunomodulators may be used to enhance immunity against HBV when used in combination with antisense oligonucleotides and / or siRNAs. These components may be combined, in some embodiments, to form a combination therapy comprising administration of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine, an immunomodulator, and / or an siRNA specific for an HBV target to a subject in need thereof. Without wishing to be bound by mechanism or theory, such a combination therapy may achieve one or more of the following goals: (1) reduction / suppression of HBV DNA levels, e.g., to below the limit of detection, (2) reduction / suppression of HBV mRNA levels, e.g., to below the limit of detection, (3) reduction / suppression of HBV protein levels, e.g., to below the limit of detection, and / or (4) enhancement of immunity against HBV. Without being held to theory or mechanism, maintaining reduced or undetectable levels of HBV DNA, HBV mRNA, and HBV proteins over an extended period is expected to promote the re-establishment of a supportive immune microenvironment in the liver, thereby restoring effective immune function against HBV, particularly HBV-specific T-cell immunity, and allow for the treatment of chronic HBV (Zheng J. R.; Wang Z. L.; Feng B. Front. Immunol. 2022, 13, 1075916.10.3389 / fimmu. 2022.1075916) . It is contemplated that a nucleic acid polymer may be used in place of the antisense oligonucleotide and achieve similar results.

[0023] It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not restrictive of the invention, as claimed. Herein, the use of the singular includes the plural unless specifically stated otherwise. As used herein, the use of “or” means “and / or” unless stated otherwise. Furthermore, the use of the term “including” as well as other forms, such as “includes” and “included” , is not limiting. Also, terms such as “element” or “component” encompass both elements and components comprising one unit and elements and components that comprise more than one subunit, unless specifically stated otherwise.

[0024] The section headings used herein are for organizational purposes only and are not to be construed as limiting the subject matter described. All documents, or portions of documents, cited in this application, including, but not limited to, patents, patent applications, articles, books, and treatises, are hereby expressly incorporated by reference for the portions of the document discussed herein, as well as in their entirety.Definitions

[0025] Unless specific definitions are provided, the nomenclature utilized in connection with, and the procedures and techniques of, analytical chemistry, synthetic organic chemistry, and medicinal and pharmaceutical chemistry described herein are those well-known and commonly used in the art. Standard techniques may be used for chemical synthesis, and chemical analysis. Where permitted, all patents, applications, published applications and other publications, GENBANK Accession Numbers and associated sequence information obtainable through databases such as National Center for Biotechnology Information (NCBI) and other data referred to throughout in the disclosure herein are incorporated by reference for the portions of the document discussed herein, as well as in their entirety.

[0026] Unless otherwise indicated, the following terms have the following meanings:

[0027] “2’-O-methoxyethyl” (also 2’-MOE and 2’-O (CH2) 2-OCH3) refers to an O-methoxy-ethyl modification at the 2’ position of a furanose ring. A 2’-O-methoxyethyl modified sugar is a modified sugar.

[0028] “2’-MOE nucleoside” (also 2’-O-methoxyethyl nucleoside) means a nucleoside comprising a 2’-MOE modified sugar moiety.

[0029] “5-methylcytosine” means a cytosine modified with a methyl group attached to the 5 position. A 5-methylcytosine is a modified nucleobase.

[0030] “About” means within ±10%of a value. For example, if it is stated, “the oligonucleotides affected at least about 70%inhibition of target” , it is implied that the target levels are inhibited within a range of 63%and 77%.

[0031] “Antisense oligonucleotide” or “ASO” means an oligonucleotide that is capable of undergoing hybridization to a target nucleic acid through hydrogen bonding. Examples of antisense oligonucleotides include single-stranded oligonucleotides having a nucleobase sequence that permits hybridization to a corresponding region or segment of a target nucleic acid.

[0032] “Base complementarity” refers to the capacity for the precise base pairing of nucleobases of an antisense oligonucleotide with corresponding nucleobases in a target nucleic acid (i.e., hybridization) , and is mediated by Watson-Crick, Hoogsteen or reversed Hoogsteen hydrogen binding between corresponding nucleobases.

[0033] “Bicyclic sugar” means a furanose ring modified by the bridging of two non-geminal carbon atoms. A bicyclic sugar is a modified sugar.

[0034] “cEt” or “constrained ethyl” means a bicyclic sugar moiety comprising a bridge connecting the 4’-carbon and the 2’-carbon, wherein the bridge has the formula: 4’-CH (CH3) -O-2’.

[0035] “Constrained ethyl nucleoside” (also cEt nucleoside) means a nucleoside comprising a bicyclic sugar moiety comprising a 4’-CH (CH3) -O-2’ bridge.

[0036] “Complementarity” means the capacity for pairing between nucleobases of a first nucleic acid and a second nucleic acid.

[0037] “Dose” means a specified quantity of a pharmaceutical agent provided in a single administration, or in a specified time period. In some embodiments, a dose may be administered in two or more boluses, tablets, or injections. For example, in some embodiments, where subcutaneous administration is desired, the desired dose requires a volume not easily accommodated by a single injection. In such embodiments, two or more injections may be used to achieve the desired dose. In some embodiments, a dose may be administered in two or more injections to minimize injection site reaction in an individual. In other embodiments, the pharmaceutical agent is administered by infusion over an extended period of time or continuously. Doses may be stated as the amount of pharmaceutical agent per hour, day, week or month.

[0038] “Hybridization” means the annealing of complementary nucleic acid molecules. In some embodiments, complementary nucleic acid molecules include, but are not limited to, an antisense oligonucleotide and a nucleic acid target. In some embodiments, complementary nucleic acid molecules include, but are not limited to, an antisense oligonucleotide and a nucleic acid target.

[0039] “Locked nucleic acid” or “LNA” or “LNA nucleosides” means nucleic acid monomers having a bridge connecting two carbon atoms between the 4’ and 2’ position of the nucleoside sugar unit, thereby forming a bicyclic sugar. Examples of such bicyclic sugar include, but are not limited to A) α-L-Methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) LNA; (B) β-D-Methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) -LNA; (C) Ethyleneoxy (4’- (CH2) 2-O-2’) LNA; (D) Aminooxy (4’-CH2-O-NI-2’) LNA; and (E) Oxyamino (4’-CH2-NI-O-2’) LNA; as depicted below.

[0040] As used herein, LNA oligonucleotides include, but are not limited to, oligonucleotides having at least one bridge between the 4’ and the 2’ position of the sugar wherein each of the bridges independently comprises 1 or from 2 to 4 linked groups independently selected from – [C (R1) (R2) ] n-, -C (R1) =C (R2) -, -C (R1) =N-, -C (=NR1) -, -C (=O) -, -C (=S) -, -O-, -Si (R1) 2-, -S (=O) x-and -N (R1) -; wherein: x is 0, 1, or 2; n is 1, 2, 3, or 4; each R1 and R2 is, independently, H, a protecting group, hydroxyl, C1-C12 alkyl, substituted C1-C12 alkyl, C2-C12 alkenyl, substituted C2-C12 alkenyl, C2-C12 alkynyl, substituted C2-C12 alkynyl, C5-C20 aryl, substituted C5-C20 aryl, a heterocycle radical, a substituted heterocycle radical, heteroaryl, substituted heteroaryl, C5-C7 alicyclic radical, substituted C5-C7 alicyclic radical, halogen, OJ1, NJIJ2, SJ1, N3, COOJ1, acyl (C (=O) -H) , substituted acyl, CN, sulfonyl (S (=O) 2-J1) , or sulfoxyl (S (=O) -J1) ; and each J1 and J2 is, independently, H, C1-C12 alkyl, substituted C1-C12 alkyl, C2-C12 alkenyl, substituted C2-C12 alkenyl, C2-C12 alkynyl, substituted C2-C12 alkynyl, C5-C20 aryl, substituted C5-C20 aryl, acyl (C (=O) -H) , substituted acyl, a heterocycle radical, a substituted heterocycle radical, C1-C12 aminoalkyl, substituted C1-C12 aminoalkyl or a protecting group.

[0041] Examples of 4’-2’ bridging groups encompassed within the definition of LNA include, but are not limited to one of formulae: -- [C (R1) (R2) ] n-, - [C (R1) (R2) ] n-O-, -C (R1) (R2) -N (R1) -O-or -C (R1) (R2) -O-N (R1) -. Furthermore, other bridging groups encompassed with the definition of LNA are 4’-CH2-2’, 4’- (CH2) 2-2’, 4’- (CH2) 3-2’, 4’-CH2-O-2’, 4’- (CH2) 2-O-2’, 4’-CH2-O-N (R1) -2’ and 4’-CH2-N (R1) -O-2’-bridges, wherein each R1 and R2 is, independently, H, a protecting group or C1-C12 alkyl.

[0042] Also included within the definition of LNA according to the invention are LNAs in which the 2’-hydroxyl group of the ribosyl sugar ring is connected to the 4’ carbon atom of the sugar ring, thereby forming a methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) bridge to form the bicyclic sugar moiety. The bridge can also be a methylene (-CH2-) group connecting the 2’ oxygen atom and the 4’ carbon atom, for which the term methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) LNA is used. Furthermore, in the case of the bicyclic sugar moiety having an ethylene bridging group in this position, the term ethyleneoxy (4’-CH2CH2-O-2’) LNA is used. Α-L-methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) , an isomer of methyleneoxy (4’-CH2-O-2’) LNA is also encompassed within the definition of LNA, as used herein.

[0043] “Mismatch” or “non-complementary nucleobase” refers to the case when a nucleobase of a first nucleic acid is not capable of pairing with the corresponding nucleobase of a second or target nucleic acid.

[0044] “Modified internucleoside linkage” refers to a substitution or any change from a naturally occurring internucleoside bond (i.e. a phosphodiester internucleoside bond) .

[0045] “Modified nucleobase” means any nucleobase other than adenine, cytosine, guanine, thymidine, or uracil. An “unmodified nucleobase” means the purine bases adenine (A) and guanine (G) , and the pyrimidine bases thymine (T) , cytosine (C) and uracil (U) .

[0046] “Modified nucleoside” means a nucleoside having, independently, a modified sugar moiety and / or modified nucleobase.

[0047] “Modified nucleotide” means a nucleotide having, independently, a modified sugar moiety, modified internucleoside linkage, or modified nucleobase.

[0048] “Modified antisense oligonucleotide” means an oligonucleotide comprising at least one modified internucleoside linkage, a modified sugar, and / or a modified nucleobase.

[0049] “Modified sugar” means substitution and / or any change from a natural sugar moiety (i.e., a sugar moiety found in DNA (2’-H) or RNA (2’-OH) . )

[0050] “Non-complementary nucleobase” refers to a pair of nucleobases that do not form hydrogen bonds with one another or otherwise support hybridization.

[0051] “Nucleic acid” refers to molecules composed of monomeric nucleotides. A nucleic acid includes, but is not limited to, ribonucleic acids (RNA) , deoxyribonucleic acids (DNA) , single-stranded nucleic acids, double-stranded nucleic acids, small interfering ribonucleic acids (siRNA) , and microRNAs (miRNA) .

[0052] “Nucleobase” means a nitrogenous heterocyclic base moiety capable of pairing with a base of another nucleic acid.

[0053] “Nucleobase sequence” means the order of contiguous nucleobases independent of any sugar, linkage, and / or nucleobase modification.

[0054] “Phosphorothioate linkage” means a linkage between nucleosides where the phosphodiester bond is modified by replacing one of the non-bridging oxygen atoms with a sulfur atom. A phosphorothioate linkage is a modified internucleoside linkage.

[0055] “Small-interfering RNA” or “siRNA” as used herein refers to double stranded RNA (i.e., duplex RNA) that is capable of reducing or inhibiting the expression of a target gene or sequence (e.g., by mediating the degradation or inhibiting the translation of mRNAs which are complementary to the siRNA sequence) when the siRNA is in the same cell as the target gene or sequence. The siRNA may have substantial or complete identity to the HBV target, or may comprise a region of mismatch (i.e., a mismatch motif) . In some embodiments, the siRNAs may be about 19-25 (duplex) nucleotides in length. siRNA duplexes may comprise 3' overhangs of about 1 to about 4 nucleotides or about 2 to about 3 nucleotides and 5' phosphate termini. Examples of siRNA include, without limitation, a double-stranded polynucleotide molecule assembled from two separate stranded molecules, wherein one strand is the sense strand and the other is the complementary antisense strand.

[0056] “Therapeutically effective amount” means an amount of a pharmaceutical agent that provides a therapeutic benefit to an individual.

[0057] “Unmodified” nucleobases mean the purine bases adenine (A) and guanine (G) , and the pyrimidine bases thymine (T) , cytosine (C) and uracil (U) .

[0058] “Unmodified nucleotide” means a nucleotide composed of naturally occurring nucleobases, sugar moieties, and internucleoside linkages. In some embodiments, an unmodified nucleotide is an RNA nucleotide (i.e. (3-D-ribonucleosides) or a DNA nucleotide (i.e. (3-D-deoxyribonucleoside) .

[0059] The term “functional cure” or a related term is used to describe, in a patient, where after stopping all chronic hepatitis B treatment for 24 weeks, sustained suppression of serum HBsAg below the limit of detection (LOD, 0.05 IU / mL) and HBV DNA load below the lower limit of quantification (LLOQ) is maintained, with or without the appearance of hepatitis B surface antibody (HBsAb) .Methods of treating HBV infection

[0060] In one aspect, the disclosure provides methods of treating an HBV infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide (ASO) specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, the method comprises administering an ASO and an HBV vaccine. In some embodiments, the method comprises administering an ASO and an immunomodulator. In some embodiments, the method comprises administering an ASO, an HBV vaccine, and an immunomodulator. The order of administration of the individual components can be varied. Exemplary dosing regimens are provided herein, for example, in Table 3.

[0061] In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of the antisense oligonucleotide specific for an HBV target. Accordingly, exemplary dosing regimens provided in Table 3 could replace an ASO with a NAP.

[0062] In some embodiments, administering the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator inhibits HBV DNA levels in the subject. In some embodiments, HBV DNA is reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV DNA is reduced, for example, to below the level of detection in the subject following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV DNA is reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .

[0063] In some embodiments, administering an antisense oligonucleotide and an HBV vaccine and / or immunomodulator inhibits HBV mRNA expression in the subject. In some embodiments, HBV mRNA expression is reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, mRNA expression is reduced, for example, to below the level of detection in the subject following treatment with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, mRNA expression is reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following treatment with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .

[0064] In some embodiments, administering the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator inhibits HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in the subject. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced, for example, to below the level of detection in the subject following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following administration with the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .

[0065] In another aspect, the disclosure provides methods of treating an HBV infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide (ASO) specific for an HBV target; a siRNA specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, the method comprises administering an ASO, an siRNA, and an HBV vaccine. In some embodiments, the method comprises administering an ASO, an siRNA, and an immunomodulator. In some embodiments, the method comprises administering an ASO, an siRNA, an HBV vaccine, and an immunomodulator. The order of administration of the individual components can be varied. Exemplary dosing regimens are provided herein, for example, in Table 3.

[0066] In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of the antisense oligonucleotide specific for an HBV target. Accordingly, exemplary dosing regimens provided in Table 3 could replace an ASO with a NAP.

[0067] In some embodiments, administering the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator inhibits HBV DNA levels in the subject. In some embodiments, HBV DNA is reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV DNA is reduced, for example, to below the level of detection in the subject following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV DNA is reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .

[0068] In some embodiments, administering an antisense oligonucleotide, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator inhibits HBV mRNA expression in the subject. In some embodiments, HBV mRNA expression is reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, mRNA expression is reduced, for example, to below the level of detection in the subject following treatment with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, mRNA expression is reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following treatment with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .

[0069] In some embodiments, administering the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator inhibits HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in the subject. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced to below an acceptable threshold in the subject following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced, for example, to below the level of detection in the subject following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced, for example, to below the level of detection in the subject for a period of time following administration with the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or the immunomodulator (e.g., at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment) .HBV Nucleic Acid Sequences

[0070] The methods of the disclosure comprise administering an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and, in some embodiments, an siRNA specific for an HBV target. In general, an HBV nucleic acid sequence comprises one or more HBV targets, so that an “HBV target” comprises a portion of an HBV nucleic acid sequence; the antisense oligonucleotides and siRNAs described herein are complementary to HBV targets, and thus are capable of binding to an HBV target within an HBV nucleic acid sequence through Watson-Crick base pairing.

[0071] In some embodiments, the HBV nucleic acid sequence comprises a GT-A, GT-B, GT-C, GT-D, GT-E, GT-F, GT-G, GT-H, GT-I, or GT-J genotype.

[0072] Exemplary HBV nucleic acid sequences include but are not limited to those shown in Table 1. In some embodiments, the HBV nucleic acid sequence comprises the nucleic acid sequence of any one of SEQ ID NOS: 3 and 667-674, or a nucleic acid sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto, or a fragment thereof. Table 1. Exemplary HBV Nucleic Acid Sequences HBV Target Sequences

[0073] In some embodiments, the HBV target comprises a portion of an HBV nucleic acid sequence that is 11-50 nucleobases in length. In some embodiments, the HBV target comprises a portion of an HBV nucleic acid sequence that is 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 nucleobases in length. In some embodiments, the HBV target comprises a portion of an HBV nucleic acid sequence that is 20 nucleobases in length.

[0074] In some embodiments, the HBV target comprises a portion of the HBV nucleic acid sequence (i.e. the HBV target is within the sequence) of any one of SEQ ID NOS: 3 and 667-674, or a nucleic acid sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the portion of the of the nucleic acid sequence of any one of SEQ ID NOS: 3 and 667-674, or a nucleic acid sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto, is 11-50 nucleobases in length. In some embodiments, the portion of the of the HBV nucleic acid sequence of any one of SEQ ID NOS: 3 and 667-674, or a nucleic acid sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto, is 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 nucleobases in length.

[0075] In some embodiments, the HBV target comprises a nucleic acid sequence of any one of SEQ ID NOS: 1, 4, and 675-838, or a nucleic acid sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the HBV target comprises a nucleic acid sequence of any one of SEQ ID NOS: 1, 4, and 675-838, or a nucleic acid sequence comprising at least 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches thereto.

[0076] Exemplary HBV target sequences include but are not limited to those shown in Table 2. Table 2. Exemplary HBV Target Sequences Exemplary Antisense Oligonucleotides Specific for an HBV Target

[0077] In some embodiments, the methods of the disclosure comprise administering an antisense oligonucleotide specific for an HBV target.

[0078] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 or 50 linked nucleosides that bind to an HBV target sequence. In some exemplary embodiments, the antisense oligonucleotide comprises 20 linked nucleosides that bind to an HBV target sequence. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence that is complementary to an HBV target (e.g., any one of the HBV targets described herein) . In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence that is complementary to any one of SEQ ID NO: 1, 4, 675-838, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence that is complementary to any one of SEQ ID NO: 1, 4, 675-838, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches thereto.

[0079] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches thereto.

[0080] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 2, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 2, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises 20 linked nucleosides, and comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 2. A chart showing the positions of the nucleobases in SEQ ID NO: 2 (from 5’ to 3’) is shown below:

[0081] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 5, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 5, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises 20 linked nucleosides, and comprises the nucleobase sequence of SEQ ID NO: 5. A chart showing the positions of the nucleobases in SEQ ID NO: 5 (from 5’ to 3’) is shown below:

[0082] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is a modified antisense oligonucleotide described herein. In some embodiments, the modified antisense oligonucleotide comprises a modified sugar (e.g., any one of the modified sugars described herein) . In some embodiments, the modified antisense oligonucleotide comprises a modified nucleobase (e.g., any one of the modified nucleobases described herein) .

[0083] In some embodiments, the modified antisense oligonucleotide comprises a modified internucleoside linkage (other than a phosphodiester linkage) . In some embodiments, each internucleoside linkage in the antisense oligonucleotide is a modified internucleoside linkage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises one or more phosphorothioate linkages. In some embodiments, each internucleoside linkage in the antisense oligonucleotide is a phosphorothioate linkage.

[0084] Exemplary modified antisense oligonucleotides include, but are not limited to those shown in FIGS. 1-2. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of any one of AUS1233 to AUS1714 as provided in FIGS. 2A-2AI.

[0085] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of any one of SEQ ID NOS: 10-666 (inclusive of the nucleic acid modifications included in the sequence listing and depicted in FIGS. 2A-2AI) , or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of any one of SEQ ID NOS: 10-666 (inclusive of the nucleic acid modifications included in the sequence listing and depicted in FIGS. 2A-2AI) , or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0086] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 10, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 10, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0087] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 330, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 330, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0088] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 331, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 331, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0089] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 385, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 385, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0090] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 456, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 456, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0091] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 457, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 457, or a sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0092] In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 458, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the antisense oligonucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 458, or a sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0093] Exemplary antisense oligonucleotides specific for HBV targets are also described in International Publication Nos. WO2023131926A2, WO2023131098A2, and WO2024149282A1, hereby incorporated by reference in their entirety.

[0094] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is selected from any one of the antisense oligonucleotides specific to an HBV target described in the art, including but not limited to: GSK3228836 (Bepirovirsen) , GSK3389404 (GSK) ; ALG-020572, ALG-020576, ALG-021682, ALG-021639, and ALG-021618 (Aligos Therapeutics, Inc. ) ; or an antisense oligonucleotide comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0095] In some embodiments the antisense oligonucleotide is linked to a conjugate group. In some embodiments, the conjugate group is N-acetylgalactosamine (GalNAc) .

[0096] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is a pharmaceutically acceptable derivative.Exemplary Nucleic Acid Polymers

[0097] In some embodiments, the methods of the disclosure comprise administering a nucleic acid polymer ( “NAP” ) . In some embodiments, a NAP is administered instead of the antisense oligonucleotide in any one of the methods described herein.

[0098] Nucleic acid polymers are broad-spectrum antiviral compounds active against diverse enveloped viruses and other infectious agents. Without wishing to be bound by theory or mechanism, nucleic acid polymer activity is target sequence independent, and is believed to be driven by a length-dependent interaction with exposed hydrophobic surfaces of amphipathic alpha helices found in HBV and other viruses.

[0099] Exemplary nucleic acid polymers suitable for treating an HBV infection are described in Vaillant, Andrew. Viruses vol. 14, 9 2052.16 Sep. 2022, doi: 10.3390 / v14092052. In some embodiments, the nucleic acid polymer is REP 2139. In some embodiments, the nucleic acid polymer is REP 2165.Exemplary siRNAs Specific for HBV Targets

[0100] Some embodiments of the methods of the disclosure comprise administering an siRNA specific for an HBV target. Any siRNA specific for an HBV target known in the art may be used in the methods described herein.

[0101] In some embodiments, the siRNA is selected from the group consisting of JNJ-3989 (also referred to as JNJ-73763989, ARO-HBV, Daplusiran, and Tomligisiran) , Vir-2218 (also referred to as BRII-835 and Elebsiran) , AB-729 (also referred to as Imdusiran) , Xalnesiran (also referred to as RG6346, DCR HBVS, and RO7445482) , RBD1016 (also referred to as SR016) , ALG-125755, HT-101, TQA3038, HRS-5635, BB-103, OLX703A, STP155G, KW-040, ALG-072571, STSG-0002, HECN30227, SA1211, BW-20507, and YKYY013. In some embodiments, the siRNA is TQA3038. TQA3038 (Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. (CTTQ) , a subsidiary of Sino Biopharmaceutical Ltd. ) is a siRNA drug that targets HBV.

[0102] Exemplary siRNAs are provided, for example, in PCT Publication No. WO2023246750. In some embodiments, the siRNA specific for an HBV target is selected from any one of the siRNAs disclosed in PCT Publication No. WO2023246750.

[0103] In some embodiments, the siRNA comprises a sense strand comprising the nucleobase sequence of 5'-CUGGCUCAGUUUACUAGUA-3' (SEQ ID NO: 1100) and an antisense strand comprising the nucleobase sequence of 5'-UACUAGUAAACUGAGCCAGGA-3' (SEQ ID NO: 1101) .

[0104] In some embodiments, the sense strand or antisense strand is modified. In some embodiments, one or more nucleotides of the sense or antisense strand are modified. In some embodiments, the modification is selected from the group consisting of sugar modification of the nucleotide, modification of the linkage between nucleotides, terminal modification, and any combination thereof.

[0105] In some embodiments, the sugar modification is a glycosyl modification of the nucleotide selected from dehydroxylation, fluorination, amination, alkylation, hydroxyalkylation or hydroxyalkenylation. In some embodiments, the sugar modification of the nucleotide occurs at the 2' position of the sugar group. In some embodiments, the sugar modification is a glycosyl modification of the nucleotide selected from 2'-dehydroxylation, 2'-fluoro, 2'-amino, 2'-alkyl, 2'-O-alkyl, 2'-O-Ether group, 2'-O-alkenyl group. In some embodiments, the glycosyl modification is selected from 2'-dehydroxylation, 2'-fluoro, 2'-amino, 2'-methyl, 2'-ethyl, 2'-methyl-O -Methyl, 2'-ethyl-O-methyl, 2'-O-methyl, 2'-O-ethyl, 2'-O-ethyl-O-methyl or 2'-O-ene propyl.

[0106] In some embodiments, the linkage modification between nucleotides is selected from phosphorothioate (PS) , phosphorodithioate (PS2) , methylphosphonate (MP) , methoxypropylphosphine acid ester (MOP) , and aminophosphonate. In some embodiments, the inter-nucleotide linkage modification is selected from phosphorothioate (PS) .

[0107] In some embodiments, the terminal modification is selected from 5'-terminal modification and 3'-terminal modification. In some embodiments, the terminal modification is selected from 5'-phosphate, 5'-methylphosphonate (5'-MP) , 5'-phosphorothioate (5'-PS) and 5'- (E) -Vinylphosphonate (5'- (E) -VP) .

[0108] In some embodiments, the modification is selected from 2'-dehydroxylation, 2'-fluoro, 2'-amino, 2'-methyl, 2'-ethyl, 2'-methyl-O-methyl group, 2'-ethyl-O-methyl, 2'-O-methyl, 2'-O-ethyl, 2'-O-allyl, phosphorothioate group, methylphosphonate group , aminophosphonate group, 5'-phosphate group, 3'-phosphate group, 5'- (E) -vinyl phosphate or 3'- (E) -vinyl phosphate. In some embodiments, the modification is selected from 2'-dehydroxylation, 2'-fluoro, 2'-O-methyl, 2'-O-ethyl, 2'-O-ethyl-O-Methyl, 2'-O-allyl, phosphorothioate or 5'- (E) -vinyl phosphate. In some embodiments, the modification is selected from 2'-fluoro, 2'-O-methyl, phosphorothioate, or 5'- (E) -vinyl phosphate.

[0109] In some embodiments, the siRNA is linked to a conjugate group. In some embodiments, the conjugate group is N-acetylgalactosamine (GalNAc) .

[0110] In some embodiments, the siRNA comprises a 5’-stablized cap.Exemplary HBV Vaccines

[0111] Some embodiments of the methods of the disclosure comprise administering an HBV vaccine. Any HBV vaccine known in the art may be used in the methods of the present disclosure. In some embodiments, one or more of the following exemplary HBV vaccines are administered.

[0112] In some embodiments, the HBV vaccine comprises an HBV antigen. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a mixture of different HBV antigens, e.g. at least 2, 3, 4, or 5 different HBV antigens.

[0113] In some embodiments, the HBV vaccine comprises one or more of an HBV surface antigen (HBsAg) , an HBV e antigen (HBeAg) , and / or an HBV core antigen (HBcAg) , an HBV polymerase antigen, or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a human HBV antigen. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a Hepatitis B small surface antigen (Small-HBs (S-HBs) ) or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a Hepatitis B medium surface antigen (Middle-HBs (M-HBs) ) or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a Hepatitis B large surface antigen (Large-HBs (L-HBs) ) or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a mixture of Hepatitis B small and medium surface antigen. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a mixture of Hepatitis B small and large surface antigen. In some embodiments, the HBV antigen comprises a mixture of Hepatitis B medium and large surface antigen. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a mixture of Hepatitis B small, medium and large surface antigens, or fragments thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a pre-S1 protein, or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises a pre-S2 protein, or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises an HBV polymerase, or a fragment thereof. In some embodiments, the HBV vaccine comprises an HBV antigen from a GT-A, GT-B, GT-C, GT-D, GT-E, GT-F, GT-G, GT-H, GT-I, or GT-J genotype, or a combination thereof.

[0114] The HBV antigen can be isolated from patients, can be recombinantly produced (e.g. in mammalian cells, yeast cells, bacterial cells, insect cells) , or alternatively, can be synthesized. In some embodiments, the HBV antigen is recombinantly produced in a CHO cell. In some embodiments, the HBV antigen is recombinantly produced in a yeast cell, e.g., a Hansenula polymorpha cell.

[0115] In some embodiments, the HBV vaccine further comprises an adjuvant. Any suitable adjuvant known in the art may be used with the HBV vaccines used in the methods of the disclosure. Exemplary adjuvants include, but are not limited to, an aluminum hydroxide, a toll-like receptor 9 (TLR9) agonist adjuvant, or an oligonucleotide.

[0116] In some embodiments, the adjuvant is a CpG oligonucleotide (ODN) . In some embodiments, the adjuvant comprises CpG1018, a 22-mer CpG oligodeoxynucleotide comprising a nucleotide sequence with a modified phosphorothioate backbone of 5’-tgactgtgaacgttcgagatga-3’ (SEQ ID NO: 839) (wherein each lower case represents a 2’-deoxy nucleoside, as presented in Table 1.1 of FIG. 1) .

[0117] In some embodiments, the HBV vaccine is a therapeutic vaccine. In some embodiments, the HBV vaccine is a prophylactic vaccine.

[0118] In some embodiments, the HBV vaccine is an HBV mRNA vaccine, e.g., WGc-0201.

[0119] In some embodiments, the HBV vaccine is selected from the group consisting of Engerix-B, Jintan HBV vaccine, HEPLISAV-B, BRII-179 (also referred to as VBI-2601) , VTP-300, VRON-0200, HB-400, JNJ-64300535, PreHevbrio, Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula polymorpha) , Recombinant Hepatitis B Vaccine (CHO Cell) , VTP300, TVAX-008, VRON-0200, NASVAC, VBI-2601 (also referred to as BRIl-179) , WVX001, CVI-HBV-002, GS-2829, GS-6779, HB-400 (also referred to as GS2829 and GS6779) , ISA104, CLB-3000, TherVacB, AVX70371, CARG-201, AHB-201, AHB-837, and WGc-0201.Exemplary Immunomodulators

[0120] In some embodiments, the methods of the disclosure comprise administering an immunomodulator. Immunomodulators for use in treating HBV have been described, for example, in Gehring AJ. Gastroenterol Hepatol (N Y) . 2022; 18 (3) : 162-165.

[0121] In some embodiments, the immunomodulator is an interferon. In some embodiments, the interferon is Interferon-α (IFN-α) . In some embodiments, the interferon is pegylated Interferon-α (Peg-IFN-α) .

[0122] In some embodiments, the immunomodulator is an immune checkpoint inhibitor. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is a PD-1 inhibitor, a PD-L1 inhibitor, a CTLA-4 inhibitor, a TIM-3 inhibitor, or a LAG-3 inhibitor.

[0123] In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is an antibody, e.g., an anti-PD-1 antibody, an anti-PD-L1 antibody, an anti-CTLA-4 antibody, an anti-TIM-3 antibody, or an anti-LAG-3 antibody. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is the anti-PD-L1 antibody ASC22. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is the anti-PD antibody LOQTORZ1.

[0124] In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is an antisense oligonucleotide (ASO) that targets an immune checkpoint inhibitor mRNA, e.g., an anti-PD-1 ASO, an anti-PD-L1 ASO, an anti-CTLA-4 ASO, an anti-TIM-3 ASO, or an anti-LAG-3 ASO. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is a gapmer antisense oligonucleotide. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is a modified multi-segmented antisense oligonucleotide as described in International Publication No. WO2024149282A1, hereby incorporated by reference in its entirety. As described in detail in International Publication No. WO2024149282A1, antisense oligonucleotides comprising discontinuous gap segment flanked between a 5’ wing segment and a 3’ wing segment may provide improved activity over conventional gapmers (antisense oligonucleotides composed of a central DNA segment flanked by wing segments) . Accordingly, in some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is a modified multi-segmented antisense oligonucleotide comprising from 5’ to 3’ : 5’ W1-G1-S1-G2-W2 3’ (Formula I) , wherein: W1 is a 5’ wing segment; W2 is a 3’ wing segment; G1 is a first gap segment; S1 is a first separator segment; and G2 is a second gap segment, wherein each segment is joined by an internucleoside linkage, and wherein at least one nucleoside of each of W1, W2, and S1 is a modified nucleoside.

[0125] In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is an siRNA that targets an immune checkpoint inhibitor mRNA, e.g., an anti-PD-1 siRNA, an anti-PD-L1 siRNA, an anti-CTLA-4 siRNA, an anti-TIM-3 siRNA, or an anti-LAG-3 siRNA.

[0126] In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is a small molecule, e.g., a small molecule that is a PD-1 inhibitor, a PD-L1 inhibitor, a CTLA-4 inhibitor, a TIM-3 inhibitor, or a LAG-3 inhibitor. In some embodiments, the immune checkpoint inhibitor is AB-101, a small molecule that inhibits PD-L1.

[0127] In some embodiments, the immunomodulator is an innate immune system agonist. In some embodiments, the immunomodulator is a toll-like receptor (TLR) agonist. In some embodiments, the TLR agonist is a TLR7 agonist, a TLR8 agonist, or a TLR9 agonist. In some embodiments, the TLR7 agonist is Vesatolimod (GS-9620) , or T7-EA. In some embodiments, the TLR8 agonist is Selgantolimod (GS-9688) . In some embodiments, the immunomodulator is a stimulator of interferon gene (STING) agonist. In some embodiments, the immunomodulator is a retinoic acid–inducible gene I (RIG-I) agonist.

[0128] In some embodiments, the immunomodulator is capable of enhancing the T-Helper 1 (Thl) immune response. In some embodiments, the immunomodulator is thymalfasin (thymosin-alpha 1) .

[0129] In some embodiments, the immunomodulator is an antibody, e.g., an antibody that targets an HBV protein. In some embodiments, antibody binds HBsAg (an “HBs antibody” ) . In some embodiments, the immunomodulator is a monoclonal HBs antibody.Dosing Regimens

[0130] Several dosing regimens for treating an HBV infection are provided herein.

[0131] In some embodiments, the dosing regimens described herein use an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, although not necessarily in that order. In some embodiments, the dosing regimens described herein use an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an siRNA specific for an HBV target, although not necessarily in that order. In some embodiments, the dosing regimens described herein use an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, although not necessarily in that order. Exemplary dosing regimens are depicted in Table 3 and / or described in Table 4 of Example 1 and Table 5 of Example 2, below.

[0132] Exemplary dosing regimens depicted in Table 3 are broken into stages. As used herein, a “stage” refers to period of time during which the listed components are administered to a subject. A “stage” can occur over the course of a day, multiple days, multiple weeks, multiple months, or multiple years. The exemplary dosing regimens shown in Table 3 are to be read as follows: Stage A begins before Stage B, Stage B begins before Stage C, and Stage C begins before Stage D. Stages however do not necessarily have to follow each other immediately in time, as there may be gaps in time between stages. In some embodiments, there is at least a day, at least multiple days, at least multiple weeks, or at least multiple months between stages.

[0133] Stages may overlap in time. In some embodiments, a stage overlaps with another stage for about 1, 2, 3, 4, 5, or 6 weeks. In an exemplary embodiment, a stage in which an antisense oligonucleotide is administered is followed by a stage in which siRNA, HBV vaccine, and / or immunomodulator are administered, and the two stages overlap for 1, 2, 3, 4, 5, or 6 weeks. For example, in a certain embodiment comprising a stage in which an antisense oligonucleotide is administered for about 16 weeks, siRNA, HBV vaccine, and / or immunomodulator are administered beginning on about week 12 of the ASO stage, so that the two stages overlap for about 4 weeks.

[0134] Blank cells in Table 3 indicate that no treatment is administered in the indicated stage. For example, in embodiments in which Stage A is left blank, this means that the exemplary dosing regimen begins with Stage B. Likewise, in embodiments in which Stage D is left blank, this means that the exemplary dosing regimen ends with Stage C.

[0135] In some embodiments, two or more components are administered within a single stage; in such embodiments, the components indicated for the stage in Table 3 may be administered in any order within the stage. For example, in Exemplary Regimen 1, an antisense oligonucleotide is administered during a first stage (Stage B) , which is followed by Stage C in which an siRNA and HBV vaccine are both administered. In Exemplary Regimen 1 Stage C, the siRNA and HBV vaccine are administered during the same stage, in any order or simultaneously.

[0136] In any one of the dosing regimens provided in Table 3, a nucleic acid polymer may be used instead of an antisense oligonucleotide at the indicated stage.

[0137] Within a stage, a variety of dosing regimens are contemplated for each individual component administered in the methods described herein. In some embodiments, an individual component is administered once within a stage. In other embodiments, an individual component is administered more than once within a stage. In some embodiments, an individual component is administered 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 times or more within a stage. Exemplary dosing regimens for individual components within a stage are described in further detail below. Table 3. Exemplary Dosing Regimens

[0138] In some embodiments, an antisense oligonucleotide (ASO) and an siRNA are administered over two or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide and an siRNA are administered over three or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide and an siRNA are administered over four or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of Exemplary Regimens 1-6, 9, 11-36, 39 and 47 as depicted in Table 3.

[0139] In some embodiments, a siRNA is administered in a first stage and an ASO is administered in a second stage.

[0140] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and a siRNA is administered in a second stage.

[0141] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and second siRNA are the same. In some embodiments, the first siRNA and second siRNA are different siRNAs.

[0142] In some embodiments, an antisense oligonucleotide (ASO) and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of Exemplary Regimens 1-8, 10-18, and 20-46 as depicted in Table 3.

[0143] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an HBV vaccine is administered in a second stage.

[0144] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an HBV vaccine and immunomodulator is administered in a second stage.

[0145] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an immunomodulator is administered in a second stage.

[0146] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and second HBV vaccine are the same. In some embodiments, the first HBV vaccine and second HBV vaccine are different HBV vaccines.

[0147] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and second HBV vaccine are the same. In some embodiments, the first HBV vaccine and second HBV vaccine are different HBV vaccines.

[0148] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0149] In some embodiments, an antisense oligonucleotide (ASO) , an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages. In some embodiments, an antisense oligonucleotide, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of Exemplary Regimens 1-7 and 11-40 as depicted in Table 3.

[0150] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, and an siRNA and an HBV vaccine are administered in a second stage.

[0151] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, an siRNA is administered in a second stage, and an HBV vaccine is administered in a third stage.

[0152] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, and an siRNA, vaccine, and immunomodulator are administered in a second stage.

[0153] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, an siRNA is administered in a second stage, and an HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage.

[0154] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, and an siRNA and immunomodulator are administered in a second stage.

[0155] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, an siRNA is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0156] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage, and an HBV vaccine and immunomodulator are administered in a second stage.

[0157] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA and an HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0158] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and an HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0159] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA, an HBV vaccine, and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0160] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and an HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0161] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0162] In some embodiments, an siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, an siRNA is administered in a third stage, and an immunomodulator is administered in a fourth stage.

[0163] In some embodiments, an siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage.

[0164] In some embodiments, an siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0165] In some embodiments, a first siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0166] In some embodiments, an siRNA is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an HBV vaccine is administered in a third stage.

[0167] In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0168] In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0169] In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0170] In some embodiments, a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0171] In some embodiments, a first siRNA and an HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, a second siRNA and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0172] In some embodiments, a first siRNA and an HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, an siRNA is administered in a third stage, and an immunomodulator is administered in a fourth stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0173] In some embodiments, an siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0174] In some embodiments, an siRNA and an HBV Vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0175] In some embodiments, a first siRNA and an HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are the same siRNA. In some embodiments, the first siRNA and the second siRNA are different siRNAs.

[0176] In some embodiments, an siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0177] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0178] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, an siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0179] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an siRNA, a second HBV vaccine, and an immunomodulator is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0180] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, an siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a fourth stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0181] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an siRNA and an immunomodulator are administered in a third stage.

[0182] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, an siRNA administered in a third stage, and an immunomodulator is administered in a fourth stage.

[0183] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0184] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0185] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an siRNA is administered in a third stage.

[0186] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second siRNA are different HBV vaccines.

[0187] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an HBV vaccine is administered in a second stage.

[0188] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an immunomodulator is administered in a second stage.

[0189] In some embodiments, an ASO is administered in a first stage and an HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a second stage.

[0190] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage and an ASO is administered in a second stage.

[0191] In some embodiments, an immunomodulator is administered in a first stage and an ASO is administered in a second stage.

[0192] In some embodiments, an HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a first stage and an ASO is administered in a second stage.

[0193] In some embodiments, an HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and an immunomodulator is administered in a third stage.

[0194] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine.

[0195] In some embodiments, a first HBV vaccine is administered in a first stage, an ASO is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and an immunomodulator are administered in a third stage. In some embodiments, the first HBV vaccine and the second HBV vaccine are the same HBV vaccine.

[0196] In some embodiments, a nucleic acid polymer may be used in place of an ASO in any one of the methods and dosing regimens described herein. In some embodiments, a nucleic acid polymer, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, a nucleic acid polymer, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages. In some embodiments, a nucleic acid polymer, an siRNA, and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of Exemplary Regimens 1-7 and 11-40 as depicted in Table 3 (where a nucleic acid polymer replaces the antisense oligonucleotide) .

[0197] In some embodiments, a nucleic acid polymer and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages. In some embodiments, a nucleic acid polymer and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages. In some embodiments, a nucleic acid polymer and an HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages. In some embodiments, the stages are selected from any of the dosing regimens described in Table 4. In some embodiments, the stages are selected from any of Exemplary Regimens 41-46, as depicted in Table 3 (where a nucleic acid polymer replaces the antisense oligonucleotide) .

[0198] In some embodiments, a particular dosing regimen is selected for administration to a subject based on a measurable parameter, e.g., the level of HBV DNA, HBV mRNA, or HBV protein in a biological sample from the subject. A biological sample may be taken from the subject before a dosing regimen has begun, or before, during, after or between stages of a dosing regimen as described herein. In some embodiments, the biological sample is a blood sample. In some embodiments, the biological sample is a serum sample. In some embodiments, the level of HBV DNA, HBV mRNA, and / or HBV protein (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg) in the biological sample is determined.

[0199] In some embodiments, a dosing regimen is selected for administration to a subject based on the subject’s baseline level of HBsAg. In certain exemplary embodiments in which the subject has or is suspected to have a baseline level of HBsAg that is not relatively high (e.g., equal to or less than about 3000 IU / mL prior to treatment) , an antisense oligonucleotide is administered in a first stage to reduce the level of HBsAg. In some embodiments in which the subject has or is suspected to have a baseline level of HBsAg that is equal to or less than about 2500, IU / mL, about 3000 IU / mL, or about 3500 IU / mL prior to treatment) , an antisense oligonucleotide is administered in a first stage to reduce the level of HBsAg. Without wishing to be bound by theory or mechanism, in some embodiments, this first stage of antisense oligonucleotide administration reduces HBsAg, e.g., to near undetectable levels. In some embodiments, an siRNA is then administered in the second stage. Without wishing to be bound by theory or mechanism, the siRNA administered in a second stage can further reduce the level of HBsAg and helps maintain the reduced level of HBsAg over a relatively long period of time (e.g., for at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months) . In some embodiments, an HBV vaccine or an immunomodulator is then administered in a third stage. Without wishing to be bound by theory or mechanism, in some embodiments, the third stage boosts the subject’s anti-HBV immune activity during the period of time in which the siRNA maintains reduced HBsAg levels, thus facilitating restoration of HBV-specific immunity.

[0200] In some embodiments, in which the subject has or is suspected to have a relatively high baseline level of HBsAg, e.g., greater than about 3000 IU / mL, an siRNA is administered in a first stage to achieve an initial reduction of HBsAg levels. In some embodiments, in which the subject has or is suspected to have a baseline level of HBsAg greater than about 2500 IU / mL, about 3000 IU / mL, about 3500 IU / mL, about 4000 IU / mL, or about 4500 IU / mL, an siRNA is administered in a first stage. In some embodiments, an ASO is administered in a second stage. In some embodiments, an HBV vaccine or an immunomodulators is administered in a third stage.

[0201] In some embodiments, the methods described herein further comprise a pretreatment stage that occurs before the antisense oligonucleotide (or nucleic acid polymer) , siRNA, and HBV vaccine and / or immunomodulator are administered.

[0202] In some embodiments, the pretreatment comprises administering a nucleoside or nucleotide analog. Any nucleoside or nucleotide analog for inhibiting HBV known in the art may be used. In some embodiments, the nucleoside or nucleotide analog is selected from the group consisting of tenofovir disoproxil fumarate, tenofovir alafenamide, tenofovir amibufenamide, pradefovir mesylate, entecavir, lamivudine, adefovir dipivoxil, and telbivudine. In some embodiments, the nucleoside or nucleotide analog is a commercially available nucleoside or nucleotide analog, for example, any one of or

[0203] In some embodiments, the pretreatment comprises administering a capsid assembly inhibitor. Any capsid assembly inhibitor for inhibiting HBV that is known in the art may be used. In some embodiments, the capsid assembly inhibitor is selected from the group consisting of JNJ-632, ALG-001075, ALG-000184, RG7907, GS-SBA-1, AB-836, JNJ-6379, ABI-H0731, ABI-H2158, Linvencorvir, and JNJ-0440.

[0204] In some embodiments, a dosing regimen is selected for administration to a subject based on the subject’s status as  A  subject has not previously been treated with a nucleoside or nucleotide analog. In some embodiments, a  subject is first administered a nucleoside or nucleotide analog as a pretreatment. In some embodiments, the nucleoside or nucleotide analog pretreatment is followed by any one of the dosing regimens described herein, e.g., any one of the dosing regimens depicted in Table 3.

[0205] In some embodiments, the subject does not respond to pretreatment with the nucleoside or nucleotide analog (e.g., the subject does not exhibit significant reduction in HBV DNA, HBV mRNA, or HBV protein levels following treatment with the nucleoside or nucleotide analog) . In some embodiments, a subject who does not respond to pretreatment with the nucleoside or nucleotide analog is administered a capsid assembly inhibitor. In some embodiments, the capsid assembly inhibitor pretreatment is followed by any one of the dosing regimens described herein, e.g., any one of the dosing regimens depicted in Table 3.

[0206] As discussed herein, a variety of dosing regimens are contemplated within stages in which antisense oligonucleotides (or nucleic acid polymers) are administered. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 1 dose within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as multiple doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, or 38 doses on separate days within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 2 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 3 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 4 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 2-3 or 3-4 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 4-6 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 6-8 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 8-10 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 10-12 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 12-16 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 17-20 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 21-26 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 27-30 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 31-34 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 35-38 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 39-42 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 43-45 doses within a stage. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered as 46-50 doses within a stage.

[0207] In some embodiments, a dose of antisense oligonucleotide is administered every 1 day, 2 days, 3 days, 4 days, 5 days, 6 days, 7 days, 8 days, 9 days, 10 days, 11 days, 12 days, 13 days, 14 days, 15 days, 16, days, 17 days, 18 days, 19 days, 20 days, 21 days, 22 days, 23 days, 24 days, 25 days, 26 days, 27 days, 28 days, 29 days, 30 days, 31 days, or 32 days or some combination thereof within a stage. In some embodiments, a dose of the antisense oligonucleotide is administered about every 1 week, 2 weeks, 3 weeks, 4 weeks, 5 weeks, 6 weeks, 7 weeks, 8 weeks, 9 weeks, 10 weeks, 11 weeks, 12 weeks, 13 weeks within a stage. In some embodiments, a dose of the antisense oligonucleotide is administered 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8 times during about 1 month within a stage. It is noted that the intervals between doses within a stage may not be equal, and that the disclosure contemplates varying intervals between dosing.

[0208] In some embodiments, a subsequent dose of the antisense oligonucleotide is administered within a stage. In some embodiments, a subsequent dose of the antisense oligonucleotide is administered at least 1 day, 2 days, 3 days, 4 days, 5 days, 6 days, 7 days, 8 days, 9 days, 10 days, 11 days, 12 days, 13 days, 14 days, 15 days, 16, days, 17 days, 18 days, 19 days, 20 days, 21 days, 22 days, 23 days, 24 days, 25 days, 26 days, 27 days, 28 days, 29 days, 30 days, 31 days, or 32 days after a previous dose of the one antisense oligonucleotide within a stage. In some embodiments, a subsequent dose of the one antisense oligonucleotide is administered at least 1 week, 2 weeks, 3 weeks, 4 weeks, 5 weeks, 6 weeks, 7 weeks, 8 weeks, 9 weeks, 10 weeks, 11 weeks, 12 weeks, or 13 weeks after a previous dose of the antisense oligonucleotide within a stage.

[0209] In some embodiments, a stage in which an antisense oligonucleotide is administered is about 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, or 22 weeks in length. In some embodiments, a stage in which an antisense oligonucleotide is administered is 16 weeks in length.

[0210] In some embodiments, a stage in which an antisense oligonucleotide is administered is followed by a period in time in which the subject does not receive treatment. In some embodiments, a stage in which an antisense oligonucleotide is administered is followed by about 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8 weeks before the next stage begins.

[0211] In some embodiments, a therapeutically effective amount of the antisense oligonucleotide is administered.

[0212] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered to a subject in a dose ranging from about 1 mg to about 1000 mg, about 1 mg to about 500 mg, about 1 mg to about 250 mg, about 1 mg to about 150 mg, about 1 mg to about 100 mg, about 1 mg to about 50 mg, about 1 mg to about 25 mg, about 10 mg to about 1000 mg, about 10 mg to about 500 mg, about 10 mg to about 250 mg, about 10 mg to about 150 mg, about 10 mg to about 100 mg, about 10 mg to about 50 mg, about 10 mg to about 50 mg, about 10 mg to about 25 mg, about 25 mg to about 450 mg, about 25 mg to about 500 mg, about 50 mg to about 1000 mg, about 50 mg to about 500 mg, about 50 mg to about 250 mg, about 50 mg to about 150 mg, about 50 mg to about 100 mg, about 50 mg to about 75 mg, about 100 mg to about 1000 mg, about 100 mg to about 500 mg, about 100 mg to about 400 mg, about 100 mg to about 300 mg, about 100 mg to about 250 mg, about 100 mg to about 200 mg, about 100 mg to about 150 mg, about 200 mg to about 500 mg, about 200 mg to about 250 mg, about 300 mg to about 1000 mg, or about 300 mg to 500 mg.

[0213] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 25 mg to 450 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 30 mg to 500 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 100 mg to 300 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 100 mg to 350 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 90 mg to 300 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 30 mg to 510 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 25 mg to 500 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 100 mg to 500 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 30 mg to 300 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 300 mg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 20 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 220 mg, about 230 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, or about 500 mg.

[0214] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose greater than about 20 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 225 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 600 mg.

[0215] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose greater than about 20 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 220 mg, about 230 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 550 mg.

[0216] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose less than about 20 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 220 mg, about 230 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 550 mg.

[0217] In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 0.5 mg / kg, about 1 mg / kg, about 2 mg / kg, about 2.5 mg / kg, about 3 mg / kg, about 3.5 mg / kg, about 4 mg / kg, about 4.5 mg / kg, about 5 mg / kg, about 5.5 mg / kg, about 6 mg / kg, about 7 mg / kg, about 8 mg / kg, about 9 mg / kg, or about 10 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 2.5 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 3.3 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 5 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 6.7 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 7.5 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 10 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 1 mg / kg to about 3 mg / kg, about 2 mg / kg to about 4 mg / kg, about 3 mg / kg to about 4 mg / kg, about 3 mg / kg to about 5 mg / kg, about 3.75 mg / kg to about 6 mg / kg, about 5.5 mg / kg to about 7.5 mg / kg, about 6.5 mg / kg to about 8.5 mg / kg, or about 8 mg / kg to about 10 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered subcutaneously. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered intramuscularly.

[0218] In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide in any one of the embodiments of antisense oligonucleotide dosing regimens described herein.

[0219] A variety of dosing regimens are also contemplated within stages in which siRNAs are administered. In some embodiments, the siRNA is administered as 1 dose within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as multiple doses within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, or 38 doses on separate days within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as 2 doses within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as 3 doses within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as 4 doses within a stage. In some embodiments, the siRNA is administered as 2-3 or 3-4 doses within a stage.

[0220] In some embodiments, two or more doses of siRNA are administered 1, 2, 3, 4, 5, 6, or 7 months apart within a stage. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered one month after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered two months after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered three months after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered four months after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered five months after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, a second dose of siRNA is administered six months after a first dose of siRNA is administered. In some embodiments, three doses of siRNA are administered over the course of 1, 2, 3, 4, 5, 6, or 7 months within a stage. In some embodiments, fo doses of siRNA are administered over the course of 1, 2, 3, 4, 5, 6, or 7 months within a stage.

[0221] In some embodiments, a therapeutically effective amount of the siRNA is administered.

[0222] In some embodiments, the siRNA is administered to a subject in a dose ranging from about 1 mg to about 1000 mg, about 1 mg to about 500 mg, about 1 mg to about 300 mg, about 1 mg to about 200 mg, about 1 mg to about 100 mg, about 1 mg to about 50 mg, about 1 mg to about 25 mg, about 10 mg to about 1000 mg, about 10 mg to about 500 mg, about 10 mg to about 250 mg, about 10 mg to about 150 mg, about 10 mg to about 100 mg, about 10 mg to about 50 mg, about 10 mg to about 50 mg, about 10 mg to about 25 mg, about 50 mg to about 1000 mg, about 50 mg to about 500 mg, about 50 mg to about 250 mg, about 50 mg to about 150 mg, about 50 mg to about 100 mg, about 50 mg to about 75 mg, about 50 mg to about 200 mg, about 60 mg to about 1000 mg, about 60 mg to about 500 mg, about 60 mg to about 250 mg, about 60 mg to about 150 mg, about 60 mg to about 100 mg, about 60 mg to about 75 mg, about 100 mg to about 1000 mg, about 100 mg to about 500 mg, about 100 mg to about 400 mg, about 100 mg to about 300 mg, about 100 mg to about 250 mg, about 100 mg to about 200 mg, about 100 mg to about 150 mg, about 200 mg to about 500 mg, about 200 mg to about 250 mg, about 300 mg to about 1000 mg, or about 300 mg to 500 mg.

[0223] In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 10 mg to about 500 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 5 mg to about 500 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 10 mg to about 550 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 20 mg to about 500 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 50 mg to about 500 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 60 mg to about 500 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 60 mg to 200 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 50 mg to 200 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 60 mg to 210 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 60 mg to 220 mg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 50 mg to 220 mg.

[0224] In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 1 mg, about 5 mg, about 10 mg, about 15 mg, about 20 mg, about 25 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 125 mg, about 150 mg, about 175 mg, about 200 mg, about 250 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 600 mg.

[0225] In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of greater than about 1 mg, about 5 mg, about 10 mg, about 15 mg, about 20 mg, about 25 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 220 mg, about 230 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 600 mg.

[0226] In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of less than about 1 mg, about 5 mg, about 10 mg, about 15 mg, about 20 mg, about 25 mg, about 30 mg, about 40 mg, about 50 mg, about 60 mg, about 70 mg, about 80 mg, about 90 mg, about 100 mg, about 110 mg, about 120 mg, about 130 mg, about 140 mg, about 150 mg, about 160 mg, about 170 mg, about 180 mg, about 190 mg, about 200 mg, about 210 mg, about 220 mg, about 230 mg, about 240 mg, about 250 mg, about 260 mg, about 270 mg, about 280 mg, about 290 mg, about 300 mg, about 350 mg, about 400 mg, about 450 mg, about 500 mg, or about 600 mg.

[0227] In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 0.5 mg / kg, about 0.83 mg / kg, about 1.67 mg / kg, about 2.5 mg / kg, about 3.33 mg / kg, about 5 mg / kg, about 7.5 mg / kg, or about 10 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 0.25 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the siRNA is administered at a dose of about 0.1 mg / kg to about 0.5 mg / kg, about 0.4 mg / kg to about 1 mg / kg, about 0.8 mg / kg to about 2 mg / kg, about 1.5 mg / kg to about 3 mg / kg, about 2.5 mg / kg to about 5 mg / kg, or about 4 mg / kg to about 12 mg / kg, where kg is the body weight of the subject in kg. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered subcutaneously. In some embodiments, the siRNA is administered intramuscularly.

[0228] A variety of dosing regimens are also contemplated within stages in which HBV vaccines and / or immunomodulators are administered. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 1 dose within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as multiple doses within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, or 38 doses on separate days within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 2 doses within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 3 doses within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 4 doses within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 2-3, 3-4, 4-5, or 5-6 doses within a stage. In some embodiments, the HBV vaccine and / or immunomodulator is administered as 5 doses within a stage.

[0229] In some embodiments, a therapeutically effective amount of the HBV vaccine is administered. In some embodiments, the HBV antigen in the HBV vaccine is administered to a subject in a dose ranging from about 1μg to about 500μg, per dose, about 3μg to about 200μg, about 3μg to about 100μg, about 3μg to about 50μg, about 3μg to about 30μg, about 3μg to about 20μg, about 3μg to about 10μg, about 5μg to about 100μg, about 5μg to about 75μg, about 5μg to about 50μg, about 5μg to about 40μg, about 5μg to about 30μg, about 5μg to about 20μg, about 5μg to about 10μg, about 10 μg to about 100μg, about 10 μg to about 75μg, about 10 μg to about 50μg, about 10 μg to about 40μg, about 10 μg to about 30μg, about 10 μg to about 20μg, about 20 μg to about 100 μg, about 50 μg to about 200 μg, or about 100 μg to about 500 μg. In some embodiments, the HBV antigen in the HBV vaccine is administered to a subject in a dose ranging from about 1μg to about 50μg per dose. In some embodiments, the HBV antigen in the HBV vaccine is administered to a subject in a dose ranging from about 10μg to about 50μg per dose. In some embodiments, the HBV antigen in the HBV vaccine is administered to a subject in a dose of about 20μg per dose.

[0230] In some embodiments, a therapeutically effective amount of the immunomodulator is administered. In exemplary embodiments, the immunomodulator is pegylated Interferon-α(Peg-IFN-α) . In some embodiments, the immunomodulator is administered to a subject in a dose ranging from about 1μg to about 500μg, per dose, about 3μg to about 200μg, about 3μg to about 100μg, about 3μg to about 50μg, about 3μg to about 30μg, about 3μg to about 20μg, about 3μg to about 10μg, about 5μg to about 100μg, about 5μg to about 75μg, about 5μg to about 50μg, about 5μg to about 40μg, about 5μg to about 30μg, about 5μg to about 20μg, about 5μg to about 10μg, about 10 μg to about 100μg, about 10 μg to about 75μg, about 10 μg to about 50μg, about 10 μg to about 40μg, about 10 μg to about 30μg, about 10 μg to about 20μg, about 20 μg to about 100 μg, about 50 μg to about 200 μg, or about 100 μg to about 500 μg, per dose. In some embodiments, the immunomodulator is administered to a subject in a dose ranging from about 50 μg to about 200 μg per dose. In some embodiments, the immunomodulator is administered to a subject in a dose of about 200 μg per dose. In some embodiments, the immunomodulator is administered to a subject in a dose of about 180 μg per dose.

[0231] In some embodiments, a therapeutically effective amount Peg-IFN-α is administered. In some embodiments, the Peg-IFN-α is administered to a subject in a dose ranging from about 1μg to about 500μg, per dose, about 3μg to about 200μg, about 3μg to about 100μg, about 3μg to about 50μg, about 3μg to about 30μg, about 3μg to about 20μg, about 3μg to about 10μg, about 5μg to about 100μg, about 5μg to about 75μg, about 5μg to about 50μg, about 5μg to about 40μg, about 5μg to about 30μg, about 5μg to about 20μg, about 5μg to about 10μg, about 10 μg to about 100μg, about 10 μg to about 75μg, about 10 μg to about 50μg, about 10 μg to about 40μg, about 10 μg to about 30μg, about 10 μg to about 20μg, about 20 μg to about 100 μg, about 50 μg to about 200 μg, or about 100 μg to about 500 μg, per dose. In some embodiments, the Peg-IFN-α is administered to a subject in a dose ranging from about 50 μg to about 200 μg per dose. In some embodiments, the Peg-IFN-α is administered to a subject in a dose of about 200 μg per dose. In some embodiments, the Peg-IFN-α is administered to a subject in a dose of about 180 μg per dose.

[0232] In certain exemplary embodiments, an ASO is administered in a first stage in once weekly doses, e.g., as one dose of ASO per week for 16 weeks, and an siRNA and an HBV vaccine or immunomodulator are administered in a second stage. In some embodiments, 4 doses of the siRNA are administered, (e.g., on weeks 17, 21, 25, and 29) . In some embodiments, 5 doses of HBV vaccine or immunomodulator are administered (e.g., on weeks 17, 19, 21, 25, and 29) .

[0233] In certain exemplary embodiments (e.g., where the subject has baseline HBsAg levels greater than about 3000 IU / mL prior to treatment) , an siRNA is administered in a first stage. The siRNA may be administered for 3 doses each about 1 month apart (e.g., on weeks 1, 5, and 9) . In some embodiments, an ASO is administered in a second stage, e.g., as one dose of ASO per week for 16 weeks (e.g., on weeks 12-27) . In some embodiments, siRNA is administered in a third stage as 4 doses each about 1 month apart (e.g., on weeks 28, 32, 36, and 40) . In some embodiments, an HBV vaccine and / or immunomodulator is also administered in the third stage as 5 doses (e.g., on weeks 28, 30, 32, 36, and 40) .

[0234] Changes to the dosing regimens described herein are also contemplated. In some embodiments, the dose amount or frequency of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is reduced following an indication that administration of the composition is not tolerated. In some embodiments, the dose amount or frequency of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is maintained or reduced following an indication that administration of the composition is effective. In some embodiments, the dose of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is increased following an indication that administration of the composition is not effective. In some embodiments, frequency of administration of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is reduced following an indication that administration of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is effective. In some embodiments, frequency of administration of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is increased following an indication that administration of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator is not effective.Reducing HBV Infection and Treating HBV-Related Conditions in a Subject

[0235] The disclosure provides methods for reducing HBV infection, the methods comprising administering an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator as described above, or comprising administering an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator as described above, to a subject in need thereof, so as to reduce the HBV infection. In some embodiments, the HBV infection is a chronic HBV infection. In some embodiments, the methods described herein are used to treat HBV-related conditions in a subject. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used in place of the antisense oligonucleotide.

[0236] Examples of HBV-related conditions include, but are not limited to, chronic HBV infection, jaundice, liver cancer, liver inflammation, liver fibrosis, liver cirrhosis, liver failure, diffuse hepatocellular inflammatory disease, hemophagocytic syndrome, serum hepatitis, and HBV viremia. HBV-related conditions can have symptoms which may include any or all of the following: flu-like illness, weakness, aches, headache, fever, loss of appetite, diarrhea, nausea and vomiting, pain over the liver area of the body, clay-or grey-colored stool, itching all over, and dark-colored urine, which when coupled with a positive test for presence of a hepatitis B virus, a hepatitis B viral antigen, or a positive test for the presence of an antibody specific for a hepatitis B viral antigen indicate an HBV-related condition. In some embodiments, the HBV-related condition is a liver condition. In some embodiments, the HBV-related condition is jaundice, liver inflammation, liver fibrosis, inflammation, liver cirrhosis, liver failure, diffuse hepatocellular inflammatory disease, hemophagocytic syndrome, serum hepatitis, HBV infection, HBV viremia, liver cancer or liver disease-related transplantation.

[0237] In some embodiments, the subject is an animal. In some embodiments, the subject is a mammal. In some embodiments, the subject is a monkey, for example a cynomolgus monkey. In some embodiments, the subject is a rodent, such as a mouse or rat. In some embodiments, the subject is a human. In some embodiments, the subject is an adult.

[0238] In some embodiments, the subject is between the ages of 18 to 65 years old. In some embodiments, the subject has a body mass index (BMI) within the range of 18-30 kg / m2 (inclusive) , where BMI = weight (kg)  / height2 (m2) . In some embodiments, the subject is HBeAg-negative. In some embodiments, the subject has a chronic hepatitis B infection, e.g., has been HBsAg or HBV DNA positive for at least 6 months. In some embodiments, the subject has been continuously taking a single nucleos (t) ide analogue including, but not limited to, entecavir tablets (ETV) , tenofovir disoproxil fumarate tablets (TDF) , tenofovir alafenamide fumarate tablets (TAF) , or tenofovir methoxydiphosphate tablets (TMF) for antiviral treatment for more than 6 months. In some embodiments, the subject has HBsAg levels between 100 IU / mL and 3000 IU / mL, and HBV DNA levels less than 100 IU / mL. In some embodiments, the subject has an alanine aminotransferase (ALT) level less than or equal to 2 times the upper limit of normal (ULN) .

[0239] In some embodiments, the subject has not been deemed unsuitable for Peg-IFN / recombinant hepatitis B vaccine treatment. In some embodiments, the subject does not have uncontrolled and clinically significant abnormalities other than chronic HBV infection history, such as acute coronary syndrome or acute cerebrovascular disease within 6 months before screening, unstable heart disease, bleeding tendency, or significant coagulation disorders within 3 months before treatment. In some embodiments, the subject does not have clinically significant other liver diseases, including but not limited to hemochromatosis, Wilson's disease, primary biliary cholangitis, autoimmune hepatitis, or drug-induced liver injury. In some embodiments, the subject does not have imaging results indicating severe fatty liver. In some embodiments, the subject does not have past or current signs of liver function decompensation, including but not limited to hepatic encephalopathy, hepatorenal syndrome, esophageal variceal bleeding, or ascites. In some embodiments, the subject does not have any severe infection requiring intravenous anti-infective treatment within 1 month before screening, excluding chronic hepatitis B infection. In some embodiments, the subject does not have HCV infection or less than 12 months since cure (HCV RNA positive within 12 months) , HIV positive, or syphilis positive (Treponema pallidum antibody positive) . In some embodiments, the subject does not have significant liver fibrosis or cirrhosis indicated by pathology / abdominal ultrasound imaging at screening, or liver stiffness value > 9.0 kPa. In some embodiments, the subject has not been diagnosed or suspected of having liver cancer, or with alpha-fetoprotein concentration ≥ 20 ng / mL. In some embodiments, the subject does not have a laboratory test results meeting any one of, or all of, the following criteria: a) Serum albumin < 35 g / L; b) Glomerular filtration rate (GFR) ≤ 60 mL / min / 1.73 m2 calculated using the 2021 CKD-EPI formula for adults with chronic kidney disease; c) International normalized ratio (INR) > 1.25; d) Platelet count < 125×109 / L; e) Absolute neutrophil count (ANC) < 1.5 × 109 / L; f) Hemoglobin < 100 g / L; g) Total bilirubin > 1.25 × ULN, except for participants with benign unconjugated hyperbilirubinemia deemed suitable for enrollment by the investigator, with total bilirubin < 1.5 × ULN and direct bilirubin < ULN; h) Random urine albumin-creatinine ratio (uACR) > 0.3 mg / mg (300 mg / g) , confirmed by a second test; or i) Fasting blood glucose ≥ 7 mmol / L. In some embodiments, the subject does not have a history of vasculitis or signs, symptoms, or laboratory tests indicating potential vasculitis (e.g., vascular inflammation, skin ulcers, unexplained recurrent hematuria, ANCA positive) ; past or current other diseases possibly related to vasculitis (e.g., systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, relapsing polychondritis, multiple mononeuropathy, etc. ) . In some embodiments, the subject does not have QTcF ≥ 450 msec (for male subjects) or QTcF ≥ 470 msec (for female subjects) , corrected by Fridericia's formula. In some embodiments, the subject does not have a history of extrahepatic diseases possibly related to HBV immune status (e.g., nephrotic syndrome, any type of glomerulonephritis, cryoglobulinemia, uncontrolled hypertension) . In some embodiments, the subject does not have a history of malignancy within the past 5 years or is not currently undergoing evaluation for possible malignancy. In some embodiments, the subject does not have a history of clinically significant allergies (e.g., allergy to two or more drugs and / or foods) . In some embodiments, the subject does not have severe mental illness or a history of severe mental illness, including severe depression, suicidal ideation, and suicide attempts before screening. In some embodiments, the subject is not suspected of being allergic to any component of the investigational drugs (including drugs used during the combined treatment period) or having a history of multiple drug and food allergies deemed clinically significant by the investigator. In some embodiments, the subject has not had major trauma or major surgery within 3 months before treatment, or is not planning to undergo surgery during the treatment. In some embodiments, the subject is not currently using or having used any immunosuppressive drugs (e.g., prednisone) within 3 months before treatment, except for short-term use (≤2 weeks) or local / inhaled steroids. In some embodiments, the subject has not used immunomodulators (e.g., thymosin) and / or cytotoxic drugs within 6 months before the first stage. In some embodiments, the subject does not have a history of vaccination within 6 months before screening or plan to receive live vaccines during treatment. In some embodiments, the subject does not require long-term regular use of anticoagulants (e.g., warfarin, factor Xa inhibitors) or antiplatelet drugs (e.g., clopidogrel, aspirin) . In some embodiments, the subject does not have thyroid function abnormalities deemed unsuitable for enrollment by the investigator. In some embodiments, the subject does not have uncontrolled epilepsy or other progressive neurological diseases. In some embodiments, the subject has not received any antisense oligonucleotide drugs, siRNA drugs, or interferon treatment.

[0240] In some embodiments, the subject has chronic hepatitis B infection. In some embodiments, the subject is HBeAg-negative. In some embodiments, a biological sample (e.g. a serum or plasma sample) collected from the subject has HBsAg levels between 100 IU / mL and 3000 IU / mL. In some embodiments, a biological sample (e.g. a serum or plasma sample) collected from the subject has HBV DNA levels less than 100 IU / mL. In some embodiments, the subject has been treated with nucleos (t) ide analogues (NA) prior to being treated with a method described herein. In some embodiments, the subject has been treated with NA prior to being administered an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator as described above. In some embodiments, the subject has been treated with NA prior to being administered an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator as described above.

[0241] In some embodiments, the hepatitis B virus is a human hepatitis B virus. More particularly, the human hepatitis B virus may be any of the human geographical genotypes: A (Northwest Europe, North America, Central America) ; B (Indonesia, China, Vietnam) ; C (East Asia, Korea, China, Japan, Polynesia, Vietnam) ; D (Mediterranean area, Middle East, India) ; E (Africa) ; F (Native Americans, Polynesia) ; G (United States, France) ; or H (Central America) .

[0242] In some embodiments, the method comprises a step of assessing HBV infection levels in a subject. In some embodiments, a biological sample is taken from the subject. In some embodiments, the biological sample is a blood sample. In some embodiments, the biological sample is a serum sample. In some embodiments, the level of HBV DNA, HBV mRNA, and / or HBV protein (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg) in the biological sample is determined. In some embodiments, this step is performed before administering an ASO and HBV vaccine and / or immunomodulator as described herein. In some embodiments, this step is performed before administering an ASO, siRNA, HBV vaccine and / or immunomodulator as described herein. In some embodiments, this step is performed before treatment by a dosing regimen described herein commences. In some embodiments, this step is performed during treatment by a method described herein (e.g., before, after, during, or between one of the stages described herein) .

[0243] In some embodiments, a serum sample is collected from the subject and the level of HBeAg in the serum sample is determined. In some embodiments, the level of HBeAg is undetectable in the serum sample, indicating that the subject from which the serum sample was collected is most likely HBeAg-negative.

[0244] In some embodiments, a serum sample is collected from the subject and the level of HBsAg in the serum sample is determined. In some embodiments, if it is determined that the subject has a baseline level of HBsAg equal to or less than a predetermined level before treatment, then a dosing regimen in which an ASO is administered in a first stage is selected. In some embodiments, if it is determined that the subject has a baseline level of HBsAg greater than a predetermined level before treatment, then a dosing regimen in which an siRNA is administered in a first stage is selected. In certain embodiments, the predetermined level of HBsAg is about 3000 IU / mL. In some embodiments, if it is determined that the subject has a baseline level of HBsAg equal to or less than about 3000 IU / mL before treatment, then a dosing regimen in which an ASO is administered in a first stage is selected. In some embodiments, if it is determined that the subject has a baseline level of HBsAg greater than about 3000 IU / mL before treatment, then a dosing regimen in which an siRNA is administered in a first stage is selected.

[0245] Any method known in the art can be used for measuring HBsAg levels in a blood sample (e.g., serum or plasma) , including, but not limited to, a radioimmunoassay (RIA) , an electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA) , a chemiluminescent microparticle immunoassay (CMIA) , and an immunoradiometric assay (IRMA) .

[0246] Some embodiments of the disclosure provide a method of reducing HBV infection in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. Certain embodiments provide a method of reducing HBV infection in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, reduction of HBV infection in the subject ameliorates or treats an HBV-related condition. In some embodiments, reduction of HBV infection in the subject ameliorates or treats HBV infection. In some embodiments, reduction of HBV infection in the subject ameliorates or treats liver disease. In some embodiments, the HBV infection is reduced by at least 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99%, 99.7%, 99.9%, 99.97%, 99.99%, or 100%. In some embodiments, reduction of the HBV infection is maintained in the subject for at least two months, at least three months, at least four months, at least five months, at least six months, at least seven months, or at least eight months following treatment (e.g., following the final dose of the final stage of treatment) . In some embodiments, reduction of the HBV infection is maintained in the subject for at least six months following treatment (e.g., following the final dose of the final stage of treatment) .

[0247] Certain embodiments of the disclosure provide a method of reducing HBV DNA levels in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. Certain other embodiments provide a method of reducing HBV DNA levels in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, reduction of HBV DNA levels in the subject ameliorates or treats an HBV-related condition. In some embodiments, reduction of HBV DNA levels in a subject ameliorates or treats HBV infection. In some embodiments, reduction of HBV DNA levels in a subject ameliorates or treats liver disease. In some embodiments, the HBV DNA level is reduced by at least 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99%, 99.7%, 99.9%, 99.97%, 99.99%, or 100%. In some embodiments, HBV DNA is reduced, e.g., below the limit of detection, in the subject at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment (e.g., following the final dose of the final stage of treatment) .

[0248] Some embodiments of the disclosure provide a method of reducing HBV mRNA expression in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. Certain embodiments provide a method of reducing HBV mRNA expression in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, reduction of HBV mRNA expression in the subject ameliorates or treats an HBV-related condition. In some embodiments, reduction of HBV mRNA expression in the subject ameliorates or treats HBV infection. In some embodiments, reduction of HBV mRNA expression in the subject ameliorates or treats liver disease. In some embodiments, the HBV mRNA expression is reduced by at least 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99%, 99.7%, 99.9%, 99.97%, 99.99%, or 100%. In some embodiments, HBV mRNA expression is reduced, e.g., below the limit of detection, in the subject at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment (e.g., following the final dose of the final stage of treatment) .

[0249] Certain embodiments of the disclosure provide a method of reducing HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. Certain other embodiments provide a method of reducing HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in a subject comprising administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator. In some embodiments, reduction of HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in the subject ameliorates or treats an HBV-related condition. In some embodiments, reduction of HBV protein levels in a subject ameliorates or treats HBV infection. In some embodiments, reduction of HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) in the subject ameliorates or treats liver disease. In some embodiments, the HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced by at least 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99%, 99.7%, 99.9%, 99.97%, 99.99%, or 100%. In some embodiments, HBV protein levels (e.g., HBsAg, HBeAg, and / or HBcAg levels) are reduced, e.g., below the limit of detection in the subject at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, or 12 months following treatment (e.g., following the final dose of the final stage of treatment) .

[0250] In some embodiments, the methods described herein further comprise administering one or more additional HBV treatment agents. Additional HBV treatment agents may be administered during or before or after any stage described herein. In some embodiments, the additional HBV treatment agent is administered as a pretreatment, before the beginning of a stage as described herein. In some embodiments, the additional HBV treatment agent is a compound or composition described herein. In some embodiments, the additional HBV treatment agent is a nucleoside or nucleotide analog. In some embodiments, the additional HBV treatment agent is a capsid assembly inhibitor. In some embodiments, the one or more additional HBV treatment agents are different from a compound or composition described herein. Examples of one or more additional HBV treatment agents include, but are not limited to, an anti-inflammatory agent, chemotherapeutic agent or anti-infection agent. In specific embodiments, the disease comprises liver cancer, and the one or more additional agents comprises a chemotherapeutic agent, such as Gemcitabine (Gemzar) , Oxaliplatin (Eloxatin) , Cisplatin, Doxorubicin, 5-Fluorouracil, Capecitabine (Xeloda) , or Mitoxantrone (Novantrone) . In specific embodiments, the disease comprises liver disease, and the one or more additional agents comprise corticosteroids, diuretics, beta-blockers, or a combination thereof.

[0251] In some embodiments, the additional HBV treatment agent is selected from the group consisting of ALG-010133, HBV CAM ALG-000184, recombinant interferon alpha 2b, IFN-a, PEG-IFN-a-2a, tenofovir disoproxil fumarate, tenofovir alafenamide, tenofovir amibufenamide, pradefovir mesylate, entecavir, lamivudine, adefovir dipivoxil, telbivudine, clevudine, NVR3-778, BAY41-4109, JNJ-632, ALG-001075, GS-SBA-1, AB-836, ABI-H0731, Linvencorvir, JNJ-0440, RG6004, GSK3228836, REP-2139, REP-2165, JNJ-6379, GLS4, ABI-HO731, JNJ-440, NZ-4, RG7907, EDP-514, AB-423, AB-506, ABI-H03733 and ABI-H2158, peroxisome proliferator-activator receptor (PPAR) agonist, farnesoid X receptor (FXR) agonist, lipid-altering agent, and amibufenamide.

[0252] Antisense oligonucleotides (or nucleic acid polymers) , siRNAs, HBV vaccines, and immunomodulators of the disclosure can be administered to the subject by any suitable route of administration. Examples of routes of administration include oral, pulmonary, rectal, parenteral, transdermal, subcutaneous, intravenous, intraarterial, intramuscular, intraperitoneal, inhalational, buccal, sublingual, intrapleural, and intranasal administration. In some embodiments, administration comprises parenteral administration. In some embodiments, administration comprises subcutaneous administration. In some embodiments, administration comprises intravenous injection or infusion. In some embodiments, administration comprises intradermal administration. In some embodiments, administration comprises intramuscular administration. In some embodiments, the antisense oligonucleotide is administered subcutaneously. In some embodiments, the siRNA is administered subcutaneously. In some embodiments, the HBV vaccine is administered intramuscularly. In some embodiments, the immunomodulator is administered intramuscularly, subcutaneously, or orally.

[0253] Certain embodiments provide the use of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, or a pharmaceutical composition as described herein for treating an HBV infection in a subject. In some embodiments, the HBV infection is a chronic HBV infection. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.

[0254] Certain embodiments provide the use of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, or a pharmaceutical composition as described herein for ameliorating or treating liver disease, or symptom thereof, in a subject. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.

[0255] Certain embodiments provide the use of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, or a pharmaceutical composition as described herein for the manufacture of a medicament for treating an HBV infection in a subject. In some embodiments, the HBV infection is a chronic HBV infection. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.

[0256] Certain embodiments provide the use of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, or a pharmaceutical composition as described herein for the manufacture of a medicament for treating or ameliorating an HBV-related condition in an animal. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.

[0257] Certain embodiments provide the use of an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine and / or an immunomodulator, or a pharmaceutical composition as described herein for the manufacture of a medicament for treating or ameliorating liver disease in an animal. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.

[0258] In some embodiments, any one of the antisense oligonucleotides specific for an HBV target, siRNAs specific for an HBV target, HBV vaccines, or immunomodulators as described herein are administered as pharmaceutical composition. In some embodiments, the pharmaceutical composition further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient. In some embodiments, a nucleic acid polymer is used instead of an antisense oligonucleotide.Kits and Articles of Manufacture

[0259] The disclosure provides kits and articles of manufacture for use with the methods described herein. In some embodiments, provided herein is a kit or an article of manufacture comprising an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine, and / or immunomodulator as described herein, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an HBV vaccine, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an HBV vaccine, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same.

[0260] In some embodiments, provided herein is a kit or an article of manufacture comprising an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine, and / or immunomodulator as described herein, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide specific for an HBV target, an siRNA specific for an HBV target, an EBV vaccine, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same.

[0261] In some embodiments, provided herein is a kit or an article of manufacture comprising a nucleic acid polymer and an HBV vaccine and / or immunomodulator as described herein, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer and an HBV vaccine, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer, an EBV vaccine, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same.

[0262] In some embodiments, provided herein is a kit or an article of manufacture comprising a nucleic acid polymer, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine, and / or immunomodulator as described herein, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer, an siRNA specific for an HBV target, and an HBV vaccine, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer, an siRNA specific for an HBV target, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a nucleic acid polymer, an siRNA specific for an HBV target, an EBV vaccine, and an immunomodulator, or a pharmaceutical composition comprising the same.

[0263] In some embodiments, the kit or article of manufacture further comprises a container, a pack, or a dispenser. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises multiple vials, each comprising a dose of antisense oligonucleotide (or nucleic acid polymer) , siRNA, HBV vaccine, and / or immunomodulator.

[0264] In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises a dosage unit form of an antisense oligonucleotide (or nucleic acid polymer) , siRNA, HBV vaccine, and / or immunomodulator as described herein. Dosage unit form as used herein refers to physically discrete units suited as unitary dosages for the subject to be treated; each unit containing a predetermined quantity of the antisense oligonucleotide (or nucleic acid polymer) , siRNA, HBV vaccine, or immunomodulator calculated to produce the desired therapeutic effect in association with the required pharmaceutical carrier. In some embodiments, the dosage unit form is a solution, pill, tablet, powder, spray, ointment, paste, cream, lotion, gel, patch, or inhalant.

[0265] The kit or article of manufacture can further include instructions or a label for using the kit to treat or ameliorate the HBV infection. In some embodiments, the instructions or label includes instructions for a dosing regimen as described herein. In some embodiments, the instructions or label includes a description of a dosing regimen described in Table 4 or Table 5. In some embodiments, the instructions or label includes a description of a dosing regimen provided in any one of Exemplary Regimens 1-47, as depicted in Table 3.

[0266] Any one of the antisense oligonucleotides (or nucleic acid polymers) , siRNAs, HBV vaccines, and / or immunomodulators described herein may be used in the kits and articles of manufacture described herein. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide comprising a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide comprising the nucleobase sequence of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide comprising the nucleotide sequence of any one of SEQ ID NOS: 10-666, or an antisense oligonucleotide comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto. In some embodiments, the kit or article of manufacture comprises an antisense oligonucleotide comprising the nucleotide sequence of any one of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising at least 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%sequence identity thereto.

[0267] In some embodiments, the kit or article of manufacture further comprises a nucleoside or nucleotide analog, and / or a capsid assembly inhibitor. In some embodiments, the kit or article of manufacture further comprises instructions for a pretreatment using the nucleotide analog and / or the capsid assembly inhibitor.

[0268] In some embodiments, the kit or article of manufacture further comprises at least one additional HBV treatment agent for the treatment of an HBV infection.

[0269] Although the disclosed teachings have been described with reference to various applications, methods, kits, articles of manufacture, and compositions, it should be understood that various changes and modifications can be made without departing from the teachings herein and the scope of the following patent applications.

[0270] The disclosure is further illustrated by the following examples that should not be construed as limiting. The contents of all references, patents and published patent applications cited throughout this application, as well as the Figures and the Sequence Listing, are incorporated herein by reference for all purposes. EXEMPLARY EMBODIMENTS

[0271] While various specific embodiments have been illustrated and described, it will be ap preciated that various changes can be made without departing from the spirit and scope of the disclosure (s) . The present disclosure is exemplified by the numbered embodiments set forth below.

[0272] Embodiment 1. A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide specific for an HBV target; a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator.

[0273] Embodiment 2. The method of embodiment 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages.

[0274] Embodiment 3. The method of embodiment 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages.

[0275] Embodiment 4. The method of embodiment 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages.

[0276] Embodiment 5. The method of any one of embodiments 2-4, wherein: the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage; the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage; or a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage.

[0277] Embodiment 6. A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject: an antisense oligonucleotide specific for an HBV target; and an HBV vaccine and / or an immunomodulator.

[0278] Embodiment 7. The method of embodiment 6, wherein the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages.

[0279] Embodiment 8. The method of embodiment 6, wherein the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages.

[0280] Embodiment 9. The method of embodiment 7 or embodiment 8, wherein: the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; or the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage.

[0281] Embodiment 10. The method of any one of embodiments 1-9, wherein the method further comprises a step of assessing HBV infection levels in the subject.

[0282] Embodiment 11. A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising (i) assessing HBV infection levels in the subject and (ii) administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target; an HBV vaccine; and / or an immunomodulator.

[0283] Embodiment 12. The method of embodiment 11, wherein the antisense oligonucleotide and the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator are administered over two or more stages.

[0284] Embodiment 13. The method of embodiment 11, wherein the antisense oligonucleotide and the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator are administered over three or more stages.

[0285] Embodiment 14. The method of embodiment 12 or embodiment 13, wherein: the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the immunomodulator is administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA is administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine is administered in a second stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage; the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage; the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage; the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage; a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; or the siRNA is administered in a first stage and the antisense oligonucleotide is administered in a second stage.

[0286] Embodiment 15. The method of any one of embodiments 10-14, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBV DNA, HBV mRNA, and / or a HBV protein in a biological sample of the subject.

[0287] Embodiment 16. The method of embodiment 15, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of a HBV protein in the biological sample.

[0288] Embodiment 17. The method of embodiment 16, wherein the HBV protein is HBsAg, HBeAg, or HBcAg.

[0289] Embodiment 18. The method of embodiment 17, wherein the HBV protein is HBsAg.

[0290] Embodiment 19. The method of any one of embodiments 15-18, wherein the biological sample is a blood sample.

[0291] Embodiment 20. The method of any one of embodiments 15-18, wherein the biological sample is serum or plasma.

[0292] Embodiment 21. The method of embodiment 20, wherein the biological sample is serum.

[0293] Embodiment 22. The method of any one of embodiments 10-21, wherein assessing HBV infection levels in the subject occurs prior to administration.

[0294] Embodiment 23. The method of embodiment 22, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBsAg in a serum sample of the subject, wherein the subject is first administered with the antisense oligonucleotide if the level of HBsAg is equal to or less than a predetermined level.

[0295] Embodiment 24. The method of embodiment 22, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBsAg in a serum sample of the subject, wherein the subject is first administered with the siRNA if the level of HBsAg is greater than the predetermined level.

[0296] Embodiment 25. The method of embodiment 23 or embodiment 24, wherein the predetermined level of HBsAg is about 3000 IU / mL.

[0297] Embodiment 26. The method of any one of embodiments 1-25, wherein the method reduces HBV DNA levels in the subject.

[0298] Embodiment 27. The method of any one of embodiments 1-26, wherein the method reduces HBV mRNA levels in the subject.

[0299] Embodiment 28. The method of any one of embodiments 1-27, wherein the method reduces HBV protein levels in the subject.

[0300] Embodiment 29. The method of embodiment 28, wherein the HBV protein is HBV surface antigen (HBsAg) .

[0301] Embodiment 30. The method of embodiment 28, wherein the HBV protein is HBV e antigen (HBeAg) .

[0302] Embodiment 31. The method of any one of embodiments 1-5 and 10-30, wherein the siRNA is selected from the group consisting of JNJ-3989 (ARO-HBV, Daplusiran, Tomligisiran) , Vir-2218 (BRII-835, Elebsiran) , AB-729 (Imdusiran) , Xalnesiran (RG6346, DCR HBVS, RO7445482) , RBD1016 (SR016) , ALG-125755, HT-101, TQA3038, HRS-5635, BB-103, OLX703A, STP155G, KW-040, ALG-072571, STSG-0002, HECN30227, SA1211, BW-20507, and YKYY013.

[0303] Embodiment 32. The method of any one of embodiments 1-31, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0304] Embodiment 33. The method of any one of embodiments 1-31, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising at least 70%sequence identity thereto.

[0305] Embodiment 34. The method of any one of embodiments 1-33, wherein the antisense oligonucleotide is a modified antisense oligonucleotide.

[0306] Embodiment 35. The method of any one of embodiments 1-34, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0307] Embodiment 36. The method of any one of embodiments 1-34, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising at least 70%sequence identity thereto.

[0308] Embodiment 37. The method of any one of embodiments 1-31, wherein the antisense oligonucleotide is selected from the group consisting of GSK3228836, GSK3389404, ALG-020572, ALG-020576, ALG-021682, ALG-021639, ALG-021618, or an antisense oligonucleotide comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.

[0309] Embodiment 38. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-37, wherein the HBV vaccine is selected from the group consisting of Engerix-B, Jintan HBV vaccine, HEPLISAV-B, BRII-179 (VBI-2601) , VTP-300, VRON-0200, HB-400, JNJ-64300535, PreHevbrio, Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula polymorpha) , Recombinant Hepatitis B Vaccine (CHO Cell) , VTP300, TVAX-008, VRON-0200, NASVAC, VBI-2601 (BRIl-179) , WVX001, CVI-HBV-002, GS-2829, GS-6779, HB-400 (GS2829 / GS6779) , ISA104, CLB-3000, TherVacB, AVX70371, CARG-201, AHB-201, AHB-837, and WGc-0201.

[0310] Embodiment 39. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-37, wherein the HBV vaccine comprises an HBV antigen.

[0311] Embodiment 40. The method of embodiment 39, wherein the HBV antigen is a human HBV antigen.

[0312] Embodiment 41. The method of embodiment 39 or embodiment 40, wherein the HBV antigen is an HBV surface antigen (HBsAg) , an HBV e antigen (HBeAg) , an HBV core antigen (HBcAg) , an HBV polymerase antigen, or any fragment or combination thereof.

[0313] Embodiment 42. The method of embodiment 41, wherein the HBsAg is a pre-S1 domain, a pre-S2 domain, a Small-HBsAg, a Medium-HBsAg, a Large-HBsAg, or any fragment or combination thereof.

[0314] Embodiment 43. The method of any one of embodiments 39-42, wherein the HBV antigen is from an HBV GT-A, GT-B, GT-C, GT-D, GT-E, GT-F, GT-G, GT-H, GT-I, or GT-J genotype.

[0315] Embodiment 44. The method of any one of embodiments 39-43, wherein the HBV antigen is isolated from patients, recombinantly produced, or synthesized.

[0316] Embodiment 45. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-44, wherein the HBV vaccine comprises at least two different HBV antigens.

[0317] Embodiment 46. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-45, wherein the HBV vaccine comprises an adjuvant.

[0318] Embodiment 47. The method of embodiment 46, wherein the adjuvant is an aluminum hydroxide.

[0319] Embodiment 48. The method of embodiment 46, wherein the adjuvant is a toll-like receptor 9 (TLR9) agonist.

[0320] Embodiment 49. The method of embodiment 46, wherein the adjuvant is an oligonucleotide.

[0321] Embodiment 50. The method of embodiment 49, wherein the adjuvant is a CpG oligonucleotide, optionally wherein the CpG oligonucleotide is CpG1018.

[0322] Embodiment 51. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an interferon.

[0323] Embodiment 52. The method of embodiment 51, wherein the interferon is Interferon-α (IFN-α) or pegylated Interferon-α (Peg-IFN-α) .

[0324] Embodiment 53. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an immune checkpoint inhibitor.

[0325] Embodiment 54. The method of embodiment 53, wherein the immune checkpoint inhibitor a PD-1 inhibitor, a PD-L1 inhibitor, a CTLA-4 inhibitor, a TIM-3 inhibitor, or a LAG-3 inhibitor.

[0326] Embodiment 55. The method of any one of embodiments 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an innate immune system agonist.

[0327] Embodiment 56. The method of embodiment 55, wherein the innate immune system agonist is a TLR agonist, a STING agonist, or a RIG-I agonist.

[0328] Embodiment 57. The method of embodiment 56, wherein the TLR agonist is a TLR7 agonist, a TLR8 agonist, or a TLR9 agonist.

[0329] Embodiment 58. The method of any one of embodiments 1-5 and 10-57, wherein the siRNA is administered at a dose of about 10 mg to 500 mg.

[0330] Embodiment 59. The method of embodiment 58, wherein the siRNA is administered at a dose of about 50 mg to 200 mg.

[0331] Embodiment 60. The method of any one of embodiments 1-59, wherein the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 25 mg to 450 mg.

[0332] Embodiment 61. The method of embodiment 60, wherein the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 150 mg to 300 mg.

[0333] Embodiment 62. The method of any of embodiments 1-61, wherein the method further comprises administering to the subject a pretreatment or an additional HBV treatment.

[0334] Embodiment 63. The method of embodiment 62, wherein the pretreatment comprises a nucleoside or nucleotide analog.

[0335] Embodiment 64. The method of embodiment 62 or embodiment 63, wherein the pretreatment comprises a capsid assembly inhibitor.

[0336] Embodiment 65. The method of any one of embodiments 62-64, wherein the subject is a subject.

[0337] Embodiment 66. The method of embodiment 62, wherein the additional HBV treatment agent is selected from the group consisting of ALG-010133, HBV CAM ALG-000184, recombinant interferon alpha 2b, IFN-a, PEG-IFN-a-2a, tenofovir disoproxil fumarate, tenofovir alafenamide, tenofovir amibufenamide, pradefovir mesylate, entecavir, lamivudine, adefovir dipivoxil, telbivudine, clevudine, NVR3-778, BAY41-4109, JNJ-632, ALG-001075, GS-SBA-1, AB-836, ABI-H0731, Linvencorvir, JNJ-0440, RG6004, GSK3228836, REP-2139, REP-2165, JNJ-6379, GLS4, ABI-HO731, JNJ-440, NZ-4, RG7907, EDP-514, AB-423, AB-506, ABI-H03733 and ABI-H2158, peroxisome proliferator-activator receptor (PPAR) agonist, farnesoid X receptor (FXR) agonist, lipid-altering agent, and amibufenamide.

[0338] Embodiment 67. The method of any one of embodiments 1-66, wherein the route of administration of any one of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, the immunomodulator, and the additional HBV treatment agent to the subject is parenteral, subcutaneous, transdermal, intramuscular or intravenous.

[0339] Embodiment 68. The method of any one of embodiments 1-67, wherein the subject is a human.

[0340] Embodiment 69. The method of any one of embodiments 1-68, wherein the subject suffers from an HBV-related condition.

[0341] Embodiment 70. The method of embodiment 69, wherein the HBV-related condition is a liver condition.

[0342] Embodiment 71. The method of embodiment 70, wherein the HBV-related condition is jaundice, liver inflammation, liver fibrosis, inflammation, liver cirrhosis, liver failure, diffuse hepatocellular inflammatory disease, hemophagocytic syndrome, serum hepatitis, HBV infection, HBV viremia, liver cancer, or liver disease-related transplantation.

[0343] Embodiment 72. The method of any one of embodiments 1-71, wherein the HBV infection is a chronic HBV infection.

[0344] Embodiment 73. A kit comprising an antisense oligonucleotide specific for an HBV target and an siRNA specific for an HBV target; an HBV vaccine; and / or an immunomodulator.

[0345] Embodiment 74. The kit of embodiment 73, further comprising instructions, optionally wherein the instructions describe administering the antisense oligonucleotide, the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator over two or more stages.

[0346] Embodiment 75. The kit of embodiment 74, wherein the instructions describe assessing HBV infection levels in a subject.

[0347] Embodiment 76. A kit comprising a nucleic acid polymer and an siRNA specific for an HBV target; an HBV vaccine; and / or an immunomodulator.

[0348] Embodiment 77. A method of treating an HBV infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject a nucleic acid polymer and a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target; an HBV vaccine; and / or an immunomodulator. EXAMPLESExample 1: Efficacy and safety of ASO combined with a hepatitis B vaccine or an immunomodulator pegylated interferon α (Peg-IFN)

[0349] A clinical study is conducted to determine the efficacy and safety of an injection of an antisense oligonucleotide (ASO) of the disclosure (designated as ASO-456, having the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO: 456, also referred to as AHB-137) , which is specific for HBV, in combination with a recombinant hepatitis B vaccine or pegylated interferon α (Peg-IFN) , an immunomodulator. Details of the study are provided in Table 4 below. Table 4: Clinical study protocol 1 Example 2: Efficacy and safety of ASO combined with a siRNA

[0350] A clinical study is conducted to determine the efficacy and safety of an injection of an antisense oligonucleotide (ASO) of the disclosure (designated as ASO-456, having the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO: 456) , which is specific for HBV, in combination with TQA3038, a HBV siRNA drug. Details of the study are provided in Table 5 below. Table 5: Clinical study protocol 2 Table 6: Concomitant Events and Management Strategies

Claims

1.A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject:a. an antisense oligonucleotide specific for an HBV target;b. a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target; andc. an HBV vaccine and / or an immunomodulator.2.The method of claim 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages.3.The method of claim 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages.4.The method of claim 1, wherein the antisense oligonucleotide, the siRNA, and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over four or more stages.5.The method of any one of claims 2-4, wherein:a. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage;b. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage;c. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage;d. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage;e. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage;f. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;g. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage;h. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage;i. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage;j. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage;k. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;l. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;m. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;n. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage;o. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;p. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage;q. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage;r. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage;s. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage;t. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage;u. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;v. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;w. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;x. the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage;y. the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;z. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage;aa. the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage;bb. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage;cc. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage;dd. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage;ee. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;ff. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;gg. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;hh. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage;ii. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;jj. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage; orkk. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage.6.A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject:a. an antisense oligonucleotide specific for an HBV target; andb. an HBV vaccine and / or an immunomodulator.7.The method of claim 6, wherein the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over two or more stages.8.The method of claim 6, wherein the antisense oligonucleotide and the HBV vaccine and / or immunomodulator are administered over three or more stages.9.The method of claim 7 or claim 8, wherein:a. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage;b. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage;c. the antisense olfigonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage;d. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage;e. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage; orf. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage.10.The method of any one of claims 1-9, wherein the method further comprises a step of assessing HBV infection levels in the subject.11.A method of treating a hepatitis B virus (HBV) infection in a subject in need thereof comprising (i) assessing HBV infection levels in the subject and (ii) administering to the subject an antisense oligonucleotide specific for an HBV target anda. a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target;b. an HBV vaccine; and / orc. an immunomodulator.12.The method of claim 11, wherein the antisense oligonucleotide and the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator are administered over two or more stages.13.The method of claim 11, wherein the antisense oligonucleotide and the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator are administered over three or more stages.14.The method of claim 12 or claim 13, wherein:a. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and the HBV vaccine are administered in a second stage;b. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage;c. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a second stage;d. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage;e. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA and immunomodulator are administered in a second stage;f. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, the siRNA is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;g. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage;h. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the immunomodulator is administered in a second stage;i. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the siRNA is administered in a second stage;j. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage, and the HBV vaccine is administered in a second stage;k. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the HBV vaccine are administered in a third stage;l. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine is administered in a fourth stage;m. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, the HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage;n. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;o. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;p. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;q. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine and immunomodulator are administered in a third stage;r. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;s. a first siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA is administered in a third stage;t. the siRNA is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the HBV vaccine is administered in a third stage;u. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage;v. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage;w. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator are administered in a third stage;x. a first siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA are administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;y. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, a second siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;z. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;aa. the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage;bb. the siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;cc. a first siRNA and the HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second siRNA administered in a third stage;dd. the siRNA and a first HBV vaccine are administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage;ee. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and a second HBV vaccine are administered in a third stage;ff. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine is administered in a fourth stage;gg. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA, a second HBV vaccine, and the immunomodulator is administered in a third stage;hh. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA is administered in a third stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a fourth stage;ii. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA and the immunomodulator are administered in a third stage;jj. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, the siRNA administered in a third stage, and the immunomodulator is administered in a fourth stage;kk. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage;ll. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage;mm. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the siRNA is administered in a third stage;nn. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage;oo. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine is administered in a second stage;pp. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a second stage;qq. the antisense oligonucleotide is administered in a first stage and the immunomodulator is administered in a second stage;rr. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine is administered in a third stage;ss. a first HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and a second HBV vaccine and the immunomodulator are administered in a third stage;tt. the HBV vaccine is administered in a first stage, the antisense oligonucleotide is administered in a second stage, and the immunomodulator is administered in a third stage; oruu. the siRNA is administered in a first stage and the antisense oligonucleotide is administered in a second stage.15.The method of any one of claims 10-14, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBV DNA, HBV mRNA, and / or a HBV protein in a biological sample of the subject.16.The method of claim 15, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of a HBV protein in the biological sample.17.The method of claim 16, wherein the HBV protein is HBsAg, HBeAg, or HBcAg.18.The method of claim 17, wherein the HBV protein is HBsAg.19.The method of any one of claims 15-18, wherein the biological sample is a blood sample.20.The method of any one of claims 15-18, wherein the biological sample is serum or plasma.21.The method of claim 20, wherein the biological sample is serum.22.The method of any one of claims 10-21, wherein assessing HBV infection levels in the subject occurs prior to administration.23.The method of claim 22, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBsAg in a serum sample of the subject, wherein the subject is first administered with the antisense oligonucleotide if the level of HBsAg is equal to or less than a predetermined level.24.The method of claim 22, wherein assessing HBV infection levels in the subject comprises determining the level of HBsAg in a serum sample of the subject, wherein the subject is first administered with the siRNA if the level of HBsAg is greater than the predetermined level.25.The method of claim 23 or claim 24, wherein the predetermined level of HBsAg is about 3000 IU / mL.26.The method of any one of claims 1-25, wherein the method reduces HBV DNA levels in the subject.27.The method of any one of claims 1-26, wherein the method reduces HBV mRNA levels in the subject.28.The method of any one of claims 1-27, wherein the method reduces HBV protein levels in the subject.29.The method of claim 28, wherein the HBV protein is HBV surface antigen (HBsAg) .30.The method of claim 28, wherein the HBV protein is HBV e antigen (HBeAg) .31.The method of any one of claims 1-5 and 10-30, wherein the siRNA is selected from the group consisting of JNJ-3989 (ARO-HBV, Daplusiran, Tomligisiran) , Vir-2218 (BRII-835, Elebsiran) , AB-729 (Imdusiran) , Xalnesiran (RG6346, DCR HBVS, RO7445482) , RBD1016 (SR016) , ALG-125755, HT-101, TQA3038, HRS-5635, BB-103, OLX703A, STP155G, KW-040, ALG-072571, STSG-0002, HECN30227, SA1211, BW-20507, and YKYY013.32.The method of any one of claims 1-31, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.33.The method of any one of claims 1-31, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleobase sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 2, 5, and 840-1036, or a nucleobase sequence comprising at least 70%sequence identity thereto.34.The method of any one of claims 1-33, wherein the antisense oligonucleotide is a modified antisense oligonucleotide.35.The method of any one of claims 1-34, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.36.The method of any one of claims 1-34, wherein the antisense oligonucleotide comprises a nucleotide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOS: 10-666, or a nucleotide sequence comprising at least 70%sequence identity thereto.37.The method of any one of claims 1-31, wherein the antisense oligonucleotide is selected from the group consisting of GSK3228836, GSK3389404, ALG-020572, ALG-020576, ALG-021682, ALG-021639, ALG-021618, or an antisense oligonucleotide comprising 1, 2, 3, 4, or 5 mismatches or modifications thereto.38.The method of any one of claims 1-10 and 15-37, wherein the HBV vaccine is selected from the group consisting of Engerix-B, Jintan HBV vaccine, HEPLISAV-B, BRII-179 (VBI-2601) , VTP-300, VRON-0200, HB-400, JNJ-64300535, PreHevbrio, Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula polymorpha) , Recombinant Hepatitis B Vaccine (CHO Cell) , VTP300, TVAX-008, VRON-0200, NASVAC, VBI-2601 (BRIl-179) , WVX001, CVI-HBV-002, GS-2829, GS-6779, HB-400 (GS2829 / GS6779) , ISA104, CLB-3000, TherVacB, AVX70371, CARG-201, AHB-201, AHB-837, and WGc-0201.39.The method of any one of claims 1-10 and 15-37, wherein the HBV vaccine comprises an HBV antigen.40.The method of claim 39, wherein the HBV antigen is a human HBV antigen.41.The method of claim 39 or 40, wherein the HBV antigen is an HBV surface antigen (HBsAg) , an HBV e antigen (HBeAg) , an HBV core antigen (HBcAg) , an HBV polymerase antigen, or any fragment or combination thereof.42.The method of claim 41, wherein the HBsAg is a pre-S1 domain, a pre-S2 domain, a Small-HBsAg, a Medium-HBsAg, a Large-HBsAg, or any fragment or combination thereof.43.The method of any one of claims 39-42, wherein the HBV antigen is from an HBV GT-A, GT-B, GT-C, GT-D, GT-E, GT-F, GT-G, GT-H, GT-I, or GT-J genotype.44.The method of any one of claims 39-43, wherein the HBV antigen is isolated from patients, recombinantly produced, or synthesized.45.The method of any one of claims 1-10 and 15-44, wherein the HBV vaccine comprises at least two different HBV antigens.46.The method of any one of claims 1-10 and 15-45, wherein the HBV vaccine comprises an adjuvant.47.The method of claim 46, wherein the adjuvant is an aluminum hydroxide.48.The method of claim 46, wherein the adjuvant is a toll-like receptor 9 (TLR9) agonist.49.The method of claim 46, wherein the adjuvant is an oligonucleotide.50.The method of claim 49, wherein the adjuvant is a CpG oligonucleotide, optionally wherein the CpG oligonucleotide is CpG1018.51.The method of any one of claims 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an interferon.52.The method of claim 51, wherein the interferon is Interferon-α (IFN-α) or pegylated Interferon-α (Peg-IFN-α) .53.The method of any one of claims 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an immune checkpoint inhibitor.54.The method of claim 53, wherein the immune checkpoint inhibitor a PD-1 inhibitor, a PD-L1 inhibitor, a CTLA-4 inhibitor, a TIM-3 inhibitor, or a LAG-3 inhibitor.55.The method of any one of claims 1-10 and 15-50, wherein the immunomodulator is an innate immune system agonist.56.The method of claim 55, wherein the innate immune system agonist is a TLR agonist, a STING agonist, or a RIG-I agonist.57.The method of claim 56, wherein the TLR agonist is a TLR7 agonist, a TLR8 agonist, or a TLR9 agonist.58.The method of any one of claims 1-5 and 10-57, wherein the siRNA is administered at a dose of about 10 mg to 500 mg.59.The method of claim 58, wherein the siRNA is administered at a dose of about 50 mg to 200 mg.60.The method of any one of claims 1-59, wherein the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 25 mg to 450 mg.61.The method of claim 60, wherein the antisense oligonucleotide is administered at a dose of about 150 mg to 300 mg.62.The method of any of claims 1-61, wherein the method further comprises administering to the subject a pretreatment or an additional HBV treatment.63.The method of claim 62, wherein the pretreatment comprises a nucleoside or nucleotide analog.64.The method of claim 62 or claim 63, wherein the pretreatment comprises a capsid assembly inhibitor.65.The method of any one of claims 62-64, wherein the subject is a NUC- subject.66.The method of claim 62, wherein the additional HBV treatment agent is selected from the group consisting of ALG-010133, HBV CAM ALG-000184, recombinant interferon alpha 2b, IFN-a, PEG-IFN-a-2a, tenofovir disoproxil fumarate, tenofovir alafenamide, tenofovir amibufenamide, pradefovir mesylate, entecavir, lamivudine, adefovir dipivoxil, telbivudine, clevudine, NVR3-778, BAY41-4109, JNJ-632, ALG-001075, GS-SBA-1, AB-836, ABI-H0731, Linvencorvir, JNJ-0440, RG6004, GSK3228836, REP-2139, REP-2165, JNJ-6379, GLS4, ABI-HO731, JNJ-440, NZ-4, RG7907, EDP-514, AB-423, AB-506, ABI-H03733 and ABI-H2158, peroxisome proliferator-activator receptor (PPAR) agonist, farnesoid X receptor (FXR) agonist, lipid-altering agent, and amibufenamide.67.The method of any one of claims 1-66, wherein the route of administration of any one of the siRNA, the antisense oligonucleotide, the HBV vaccine, the immunomodulator, and the additional HBV treatment agent to the subject is parenteral, subcutaneous, transdermal, intramuscular or intravenous.68.The method of any one of claims 1-67, wherein the subject is a human.69.The method of any one of claims 1-68, wherein the subject suffers from an HBV-related condition.70.The method of claim 69, wherein the HBV-related condition is a liver condition.71.The method of claim 70, wherein the HBV-related condition is jaundice, liver inflammation, liver fibrosis, inflammation, liver cirrhosis, liver failure, diffuse hepatocellular inflammatory disease, hemophagocytic syndrome, serum hepatitis, HBV infection, HBV viremia, liver cancer, or liver disease-related transplantation.72.The method of any one of claims 1-71, wherein the HBV infection is a chronic HBV infection.73.A kit comprising an antisense oligonucleotide specific for an HBV target anda. an siRNA specific for an HBV target;b. an HBV vaccine; and / orc. an immunomodulator.74.The kit of claim 73, further comprising instructions, optionally wherein the instructions describe administering the antisense oligonucleotide, the siRNA, the HBV vaccine, and / or the immunomodulator over two or more stages.75.The kit of claim 74, wherein the instructions describe assessing HBV infection levels in a subject.76.A kit comprising a nucleic acid polymer anda. an siRNA specific for an HBV target;b. an HBV vaccine; and / orc. an immunomodulator.77.A method of treating an HBV infection in a subject in need thereof comprising administering to the subject a nucleic acid polymer anda. a small-interfering RNA (siRNA) specific for an HBV target;b. an HBV vaccine; and / orc. an immunomodulator.

Images