Circular RNA encoding HGF polypeptides, formulations, and methods of uses

Abstract

Provided herein are immunogenic compositions having circular RNAs encoding HGF polypeptides. Related methods for manufacture and therapeutic uses thereof are also provided herein.

Description

CIRCULAR RNA ENCODING HGF POLYPEPTIDES, FORMULATIONS, AND METHODS OF USES1.Related applicationsThe application claims priority to, and the benefit of PCT Application No. PCT / CN2025 / 071641, filed on January 9, 2025 and PCT Application No. PCT / CN2025 / 119682, filed on September 8, 2025, the contents of which are incorporated herein by reference in their entirety.2. Incorporation by reference of sequence listingThe contents of the electronic sequence listing (TFI01360PCT-Sequence listing. xml; Size: 324, 072  bytes; and Date of Creation: January 8, 2026) are herein incorporated by reference in its entirety.3.FieldThe present invention relates to the field of molecular biology and immunology, in particular to constructs and methods for the manufacture and therapeutic use of circular RNAs encoding HGF polypeptides and formulations comprising the circular RNAs in treating subjects in need of HGF therapy.4.BackgroundCircular RNAs (circRNAs) are a category of RNA molecules formed by head-to-tail ligation, which were demonstrated to have multiple biological functions in recent years. (Yang et al., Cell Research, 27 (5) : 626-641 (2017) ; Abe et al., Scientific Reports, 5: 16435 (2015) ; Gao et al., Nature Cell Biology, 23 (3) : 278-291 (2021) ; Pamudurti et al., Molecular Cell, 66 (1) : 9-21 (2017) ) . Compared with linear RNAs, circRNAs have better stability and therefore provide a promising new platform for RNA drugs.The compositions provided herein, which comprise circular RNAs encoding HGF polypeptides, as well as related methods and systems address the HGF related therapeutic need and provide related advantages.5.SummaryProvided herein are compositions comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence.Provided herein are compositions comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) .In some embodiments, the HF is selected from an amino acid sequence listed in Table 1.In some embodiments, the HF is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to an amino acid sequence listed in Table 1.In some embodiments, the HGF sequence has a nucleotide sequence listed in Table 2.In some embodiments, the HGF sequence has a nucleotide sequence which is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 2.In some embodiments, the circRNA comprises a linker sequence, wherein the linker sequence is a 2A self-cleaving peptide.In some embodiments, the TI sequence comprises: an IRES, an IRES-like nucleotide sequence, or a combination thereof.In some embodiments, the TI sequence is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.In some embodiments, the TI sequence is 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.In some embodiments, the circRNA comprises a nucleotide sequence that is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 3.In some embodiments, the circRNA comprises a modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside.In some embodiments, the circRNA comprises at least 10%modified RNA nucleotides and / or modified nucleosides.In some embodiments, at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is m5C (5-methylcytidine) , m5U (5-methyluridine) , m6A (N6-methyladenosine) , Y (pseudouridine) , or m1A (1-methyladenosine) .In some embodiments, at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is introduced at in vitro transcription (IVT) .In some embodiments, the composition further comprises a buffer, preferably a citrate saline buffer, a phosphate-buffered saline (PBS) buffer, or a tromethamine (THAM) buffer.In some embodiments, the buffer is substantially free of divalent cations.In some embodiments, said buffer substantially free of divalent cations is a citrate saline buffer.In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.In some embodiments, the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.In some embodiments, the pharmaceutically acceptable excipient is chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.Provided herein also methods for treating a subject suffering from a disease responsive to HGF therapy, in a subject comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the composition disclosed herein.In some embodiments, the disease is chosen from heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease (e.g. proliferative diabetic retinopathy and macular edema) , and peripheral arterial disease.In some embodiments, the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction. In some embodiments, the disease is kidney disease. In some embodiments, the disease is a disease involving skin grafting and tissue grafting. In some embodiments, the disease is post-MI cardiac dysfunction. In some embodiments, the disease is ischemic heart disease. In some embodiments, the disease is a vascular injury from trauma or surgery. In some embodiments, the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer. In some embodiments, the disease is diabetic foot. In some embodiments, the disease is critical limb ischemia. In some embodiments, the disease is lower limb ischemia. In some embodiments, the disease is pulmonary hypertension. In some embodiments, the disease is stable severe angina pectoris. In some embodiments, the disease is refractory angina. In some embodiments, the disease is maxillofacial defects. In some embodiments, the disease is congenital or acquired maxillofacial defects. In some embodiments, the disease is alveolar bone atrophy. In some embodiments, the disease is ligament or tendon lesions. In some embodiments, the disease is ocular disease. In some embodiments, the disease is peripheral arterial disease.In some embodiments, the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.In some embodiments, the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays. In some embodiments, the composition comprises a buffer for delivering to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.In some embodiments, the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.In some embodiments, the composition is suitable for a naked formulation. In some embodiments, the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.Provided herein also methods for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject comprising contacting said mammalian cell, tissue, or subject with the composition disclosed herein.In some embodiments, the modulating is chosen from inducing angiogenesis, stimulating vascular cell proliferation, increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells, upregulating endothelialization, inducing cardiac regeneration, increasing revascularization of tissue grafts for wound healing, improving vascular function, increasing tissue perfusion and new vessel formation, reducing scar tissue, promoting stent biofunctionality, inducing lymphangiogenesis, inducing bone repair, and improving cardiac function.Provided herein also methods for expressing HGF in a mammalian cell or tissue, comprising contacting said mammalian cell or tissue with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for producing HGF in a subject, comprising administering to said subject the composition disclosed herein. In some embodiments, the subject is suffering from a disease responsive to HGF therapy. In some embodiments, the disease is chosen from heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, peripheral arterial disease, atherosclerosis obliterans (ASO) , thromboangiitis obliterans (TAO) , chronic limb-threatening ischemia (CLTI) , and leg ulcers in pediatric patients with sickle cell disease.Provided herein also methods for increasing wound healing in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for inducing neovascularization in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for inducing angiogenesis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for inducing vasodilation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for inducing blood flow upregulation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for increasing capillary and / or arteriole density in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.Provided herein also methods for attenuating fibrosis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition disclosed herein.The subjects treated in accordance with the methods described herein can be any mammals such as rodents, domestic animals such as dogs or cats, or primates, e.g. non-human primates. In a preferred embodiment, the subject is a human. In some embodiments, the subject treated in accordance with the methods described herein is female. In some embodiments, the subject treated in accordance with the methods described herein is male. In some embodiments, the subject treated in accordance with the methods described herein can be of any age. In some embodiments, the subject treated in accordance with the methods described herein is less than 18 years old. In a specific embodiment, the subject treated in accordance with the methods described herein is less than 13 years old. In another specific embodiment, the subject treated in accordance with the methods described herein is less than 12, less than 11, less than 10, less than 9, less than 8, less than 7, less than 6, or less than 5 years old. In another specific embodiment, the subject treated in accordance with the methods described herein is 1-3 years old, 3-5 years old, 5-7 years old, 7-9 years old, 9-11 years old, 11-13 years old, 13-15 years old, 15-20 years old, 20-25 years old, 25-30 years old, or greater than 30 years old. In another specific embodiment, the subject treated in accordance with the methods described herein is 30-35 years old, 35-40 years old, 40-45 years old, 45-50 years old, 50-55 years old, 55-60 years old, or greater than 60 years old. In another specific embodiment, the subject treated in accordance with the methods described herein is 18-64 years old, 65-74 years old, or greater than 75 years old.6. Illustrative EmbodimentsSet 1The composition comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence.The composition comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) .The composition of paragraph

[0049] , wherein the HF is selected from an amino acid sequence listed in Table 1.The composition of paragraph

[0049] , wherein the HF is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to an amino acid sequence listed in Table 1.The composition of paragraph

[0049] , wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence listed in Table 2.The composition of paragraph

[0049] , wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence which is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 2.The composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0053] , wherein the circRNA comprises a linker sequence, wherein the linker sequence is a 2A self-cleaving peptide.The composition any one of paragraphs

[0049] to

[0054] , wherein the TI sequence comprises: an IRES, an IRES-like nucleotide sequence, or a combination thereof.The composition of paragraph

[0055] , wherein the TI sequence is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.The composition of paragraph

[0055] , wherein the TI sequence is 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.The composition of paragraph

[0049] , wherein the circRNA comprises a nucleotide sequence that is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 3.The composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0058] , wherein the circRNA comprises a modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside.The composition of paragraph

[0059] , wherein the circRNA comprises at least 10%modified RNA nucleotides and / or modified nucleosides.The composition of paragraph

[0060] , wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is m5C (5-methylcytidine) , m5U (5-methyluridine) , m6A (N6-methyladenosine) , Y (pseudouridine) , or m1A (1-methyladenosine) .The composition of any one of paragraphs

[0059] to

[0061] , wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is introduced at in vitro transcription (IVT) .The composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0062] , the composition further comprise a buffer, preferably a citrate saline buffer, a phosphate-buffered saline (PBS) buffer, or a tromethamine (THAM) buffer.The composition of paragraph

[0063] , wherein the buffer is substantially free of divalent cations.The composition of paragraph

[0064] , wherein said buffer substantially free of divalent cations is a citrate saline buffer.The composition of paragraph

[0065] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The composition of paragraph

[0065] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The composition of paragraph

[0064] , further comprising a pharmaceutically acceptable excipient.The composition of paragraph

[0068] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.A method for treating a subject suffering from a disease responsive to HGF therapy, in a subject comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .The method of paragraph

[0070] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0071] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0071] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.The method of paragraph

[0074] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is chosen from heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, and peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is ischemic heart disease.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is diabetic foot.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is critical limb ischemia.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is lower limb ischemia.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is pulmonary hypertension.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is stable severe angina pectoris.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is refractory angina.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is maxillofacial defects.The method of paragraph

[0088] , wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is alveolar bone atrophy.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is ligament or tendon lesions.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is ocular disease.The method of paragraph

[0070] , wherein the disease is peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject intradermally.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject intracranially.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject intrathecally.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject vitreously.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject subretinally.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject muscularly.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject cardiacly.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0070] , wherein the composition is suitable for naked formulation.The method of paragraph

[0109] , wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.A method for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject comprising contacting said mammalian cell, tissue, or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating is chosen from inducing angiogenesis, stimulating vascular cell proliferation, increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells, upregulating endothelialization, inducing cardiac regeneration, increasing revascularization of tissue grafts for wound healing, improving vascular function, increasing tissue perfusion and new vessel formation, reducing scar tissue, promoting stent biofunctionality, inducing lymphangiogenesis, inducing bone repair, and improving cardiac function.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises inducing angiogenesis.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises stimulating vascular cell proliferation.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises upregulating endothelialization.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises inducing cardiac regeneration.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises increasing revascularization of tissue grafts for wound healing.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises improving vascular function.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises increasing tissue perfusion and new vessel formation.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises reducing scar tissue.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises promoting stent biofunctionality.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises inducing lymphangiogenesis.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises inducing bone repair.The method of paragraph

[0111] , wherein the modulating comprises improving cardiac function.The method of paragraph

[0111] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0126] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0126] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.A method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue, comprising contacting said mammalian cell or tissue with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .The method of paragraph

[0129] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0130] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0130] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.A method of producing HGF in a subject, comprising administering to said subject the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .The method of paragraph

[0133] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0134] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0134] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The method of paragraph

[0133] , wherein the buffer is suitable for naked formulationThe method of paragraph

[0137] , wherein the buffer is a sodium chloride solution or Ringer's solution contains NaCl, KCl, CaCl2, NaHCO3, and / or MgCl2.The method of paragraph

[0138] , wherein the concentration of Ca2+ is in a range of 0.75 mM-1.5 mM.The method of paragraph

[0133] , wherein the buffer is a 10 mM citric acid buffer solution and 130 M sodium chloride solution, with a pH range of 6-7.5.The method of paragraph

[0133] , wherein the buffer is phosphate buffer and / or acetate buffer.The method of paragraph

[0133] , wherein the buffer contains glucose, sucrose, and / or trehalose.The method of paragraphs

[0138] to

[0142] , wherein a naked RNA formulation comprises buffer and one or more circRNA (s) .The method of paragraph

[0143] , wherein the concentration of circRNA (s) is in a range of 500 ng / μL-2000 ng / μL.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.The method of paragraph

[0145] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.The method of paragraph

[0133] , wherein the subject is suffering from a disease responsive to HGF therapy.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is chosen from heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, a diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, peripheral arterial disease, atherosclerosis obliterans (ASO) , thromboangiitis obliterans (TAO) , chronic limb-threatening ischemia (CLTI) , and leg ulcers in pediatric patients with sickle cell disease.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is ischemic heart disease.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is diabetic foot.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is critical limb ischemia.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is lower limb ischemia.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is pulmonary hypertension.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is stable severe angina pectoris.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is refractory angina.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is maxillofacial defects.The method of paragraph

[0160] , wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is alveolar bone atrophy.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is ligament or tendon lesions.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is ocular disease.The method of paragraph

[0147] , wherein the disease is peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject intradermally.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject intracranially.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject intrathecally.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject vitreously.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject subretinally.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject muscularly.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject cardiacly.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0133] , wherein the composition is suitable for a naked formulation.The method of paragraph

[0181] , wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.A method for increasing wound healing in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for inducing neovascularization in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for inducing angiogenesis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for inducing vasodilation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for inducing blood flow upregulation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for increasing capillary and / or arteriole density in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .A method for attenuating fibrosis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0049] to

[0063] .The method of paragraph

[0070] wherein the subject is a human.Set 2A composition comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) .The composition paragraph

[0192] , wherein the HF is selected from the group of amino acid sequences listed in Table 1.The composition of paragraph

[0192] , wherein the HF is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to an amino acid sequence listed in Table 1.The composition of paragraph

[0192] , wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence listed in Table 2.The composition of paragraph

[0192] , wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence which is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 2.The composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0196] , wherein the circRNA comprises a linker sequence, wherein the linker sequence encodes a 2A self-cleaving peptide.The composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0197] , wherein the TI sequence comprises: an IRES, an IRES-like nucleotide sequence, or a combination thereof.The composition of paragraph

[0198] , wherein the IRES is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.The composition of paragraph

[0198] , wherein the IRES-like sequence is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.The composition of paragraph

[0192] , wherein the circRNA comprises a nucleotide sequence that is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 3.The composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0201] , wherein the circRNA comprises a modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside.The composition of paragraph

[0202] , wherein the circRNA comprises at least 10%modified RNA nucleotides and / or modified nucleosides.The composition of paragraph

[0203] , wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is m5C (5-methylcytidine) , m5U (5-methyluridine) , m6A (N6-methyladenosine) , Y (pseudouridine) , or m1A (1-methyladenosine) .The  composition of any one of paragraphs

[0202] to

[0204] , wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is introduced at in vitro transcription (IVT) .The composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0205] , wherein the circRNA is encapsulated in a lipid nanoparticle (LNP) .The composition of paragraph

[0206] , wherein the LNP comprises MC3, ALC-0315 or SM-102.The composition of paragraph

[0206] , wherein the LNP comprises MC3, DSPC, Cholesterol, and PEG-2000 at molar ratio of 50: 10: 38.5: 1.5.The composition of paragraph

[0206] , wherein the LNP comprises SM-102, DSPC, Cholesterol, and PEG-2000 at molar ratio of 50: 10: 38.5: 1.5.The composition of paragraph

[0206] , wherein the LNP comprises ALC-0315, DSPC, Cholesterol, and ALC-0159 .The composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0205] wherein the composition further comprise a buffer, preferably a citrate saline buffer, a phosphate-buffered saline (PBS) buffer, or a tromethamine (THAM) buffer.The composition of paragraph

[0211] , wherein the buffer is substantially free of divalent cations.The composition of paragraph

[0212] , wherein said buffer substantially free of divalent cations is a citrate saline buffer.The composition of paragraph

[0213] wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The composition of paragraph

[0213] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The composition of paragraph

[0212] , further comprising a pharmaceutically acceptable excipient.The composition of paragraph

[0216] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.A method for treating a subject suffering from a disease responsive to HGF therapy, in a subject comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .The method of paragraph

[0218] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0219] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0219] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.The method of paragraph

[0222] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from  the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is selected from the group consisting of heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, and peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is ischemic heart disease.The method of paragraph

[0218] wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is diabetic foot.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is critical limb ischemia.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is lower limb ischemia.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is pulmonary hypertension.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is stable severe angina pectoris.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is refractory angina.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is maxillofacial defects.The method of paragraph

[0236] , wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is alveolar bone atrophy.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is ligament or tendon lesions.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is ocular disease.The method of paragraph

[0218] , wherein the disease is peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject intradermally.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject intracranially.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject intrathecally.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject vitreously.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject subretinally.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject muscularly.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject cardiacly.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0218] , wherein the composition is suitable for a naked formulation .The method of paragraph

[0257] , wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.A method for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject comprising contacting said mammalian cell, tissue, or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises inducing angiogenesis, stimulating vascular cell proliferation, inducing the proliferation and migration of vascular endothelial cells, increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells, upregulating endothelialization, inducing cardiac regeneration, increasing revascularization of tissue grafts for wound healing, improving vascular function, increasing tissue perfusion and new vessel formation, reducing scar tissue, promoting stent biofunctionality, inducing lymphangiogenesis, inducing bone repair, or improving cardiac function, or any combination thereof.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises inducing angiogenesis.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises stimulating vascular cell proliferation.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises upregulating endothelialization.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises inducing cardiac regeneration.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises increasing revascularization of tissue grafts for wound healing.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises improving vascular function.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises increasing tissue perfusion and new vessel formation.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises reducing scar tissue.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises promoting stent biofunctionality.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises inducing lymphangiogenesis.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises inducing bone repair.The method of paragraph

[0259] , wherein the modulating comprises improving cardiac function.The method of paragraph

[0259] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0274] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0274] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.A method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue, comprising contacting said mammalian cell or tissue with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .The method of paragraph

[0277] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0278] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0278] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The method of paragraph

[0278] , wherein the citrate saline buffer has 10 mM citric acid and 130 M sodium chloride, with a pH range 6-7.5.The method of any one of paragraphs

[0277] to

[0281] , wherein the method expresses HGF in heart cell or heart.A method of producing HGF in a subject, comprising administering to said subject the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .The method of paragraph

[0283] , wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.The method of paragraph

[0284] , wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.The method of paragraph

[0284] , wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.The method of paragraph

[0283] , wherein the buffer is suitable for naked formulation.The method of paragraph

[0287] , wherein the buffer is a sodium chloride solution or Ringer's solution containing NaCl, KCl, CaCl2, NaHCO3, and / or MgCl2.The method of paragraph

[0288] , wherein the concentration of Ca2+  is in a range of 0.75 mM-1.5 mM.The method of paragraph

[0287] , wherein the buffer is a 10 mM citric acid buffer solution and 130 M sodium chloride solution, with a pH range of 6-7.5.The method of paragraph

[0287] , wherein the buffer is phosphate buffer and / or acetate buffer.The method of paragraph

[0287] wherein the buffer further comprises glucose, sucrose, and / or trehalose.The method of paragraphs

[0288] to

[0292] , wherein a naked RNA formulation comprises buffer and one or more circRNA (s) .The method of paragraph

[0293] , wherein the concentration of circRNA (s) is in a range of 500 ng / μL-2000 ng / μL.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.The method of paragraph

[0295] , wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.The method of paragraph

[0283] , wherein the subject is suffering from a disease responsive to HGF therapy.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is selected from the group consisting of heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, peripheral arterial disease, atherosclerosis obliterans (ASO) , thromboangiitis obliterans (TAO) , chronic limb-threatening ischemia (CLTI) , and leg ulcers in pediatric patients with sickle cell disease.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is ischemic heart disease.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is diabetic foot.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is critical limb ischemia.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is lower limb ischemia.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is pulmonary hypertension.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is stable severe angina pectoris.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is refractory angina.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is maxillofacial defects.The method of paragraph

[0310] , wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is alveolar bone atrophy.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is ligament or tendon lesions.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is ocular disease.The method of paragraph

[0297] , wherein the disease is peripheral arterial disease.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject intradermally.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject intracranially.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject intrathecally.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject vitreously.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject subretinally.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject muscularly.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject cardiacly.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.The method of paragraph

[0283] , wherein the composition is suitable for a naked formulation.The method of paragraph

[0331] , wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.A method for increasing wound healing in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for inducing neovascularization in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for inducing angiogenesis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for inducing vasodilation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for inducing blood flow upregulation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for increasing capillary and / or arteriole density in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .A method for attenuating fibrosis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of paragraphs

[0192] to

[0211] .The method of paragraph

[0218] wherein the subject is a human.The present disclosure also encompasses the delivery of naked one or more circRNA molecules or one or more circRNA complexes, and / or pharmaceutical, prophylactic, or diagnostic formulations thereof by any appropriate route taking into consideration likely advances in the sciences of drug delivery.As non-limiting examples, in some embodiments, formulations in accordance with the present disclosure are administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracardiac or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intramuscularly. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intradermally. In some embodiments, the formulation is administered to the subject subcutaneously.In some embodiments, the composition is administered to the subject intracardially, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations, In some embodiments, the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. For example, the composition is administered to the subject by direct injection to the damaged area during open heart surgery, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations, In some embodiments, the composition is administered to the subject epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. For example, in patients undergoing coronary artery by-pass grafting (CABG) , the composition is administered to the patient from the external side of heart, preferably at a fixed-dosage in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In each of the embodiments in this paragraph, the "multiple administrations"can be separated from each other by short (l-5 mins) , medium (6-30 minutes) , or long (more than 30 minutes, hours, or even days) intervals of time.In certain embodiments, compositions in accordance with the present disclosure are administered to a subject, wherein the formulations comprise a lipid-based complex (such as liposomes, lipoplexes, and lipid nanoparticles) . In other embodiments, naked one or more circRNA is administered in phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In other embodiments, naked one or more circRNA is administered in the absence of divalent cations, including calcium. In preferred embodiments, compositions for intracardiac or intradermal administration comprising the one or more circRNA are formulated in citrate saline buffer containing no calcium or magnesium. In some embodiments, the composition comprises a concentration of the one or more circRNA formulated in citrate saline buffer of between 0.1 and 1 μg / μL. In some embodiments, the composition comprises a concentration of the one or more circRNA formulated in citrate saline buffer of between l and 10 μg / μL. In some embodiments, the composition comprises a concentration of the one or more circ RNA formulated in citrate saline buffer of between 10 and 50 μg / μL.In certain embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at dosage levels sufficient to deliver from about 0.0001 mg / kg to about 100 mg / kg, from about 0.001 mg / kg to about 0.05 mg / kg, from about 0.005 mg / kg to about 0.05 mg / kg, from about 0.001 mg / kg to about (0.005 mg / kg, from about 0.05 mg / kg to about 0.5 mg / kg, from about 0.01 mg / kg to about 50 mg / kg, from about 0.1 mg / kg to about 40 mg / kg, from about 0.5 mg / kg to about 30 mg / kg, from about 0.01 mg / kg to about 10 mg / kg, from about 0. l mg / kg to about 10 mg / kg, or from about l mg / kg to about 25 mg / kg, of one or more circRNA per subject body weight per day, one or more times a day, to obtain the desired therapeutic or prophylactic effect. The desired dosage may be delivered three times a day, two times a day, once a day, every other day, every third day, every week, every two weeks, every three weeks, every four weeks or once as a single dose, either in a bolus dose or in multiple administrations over a period of second, minutes or hours in a 24 hour period. In certain embodiments, the desired dosage may be delivered using multiple administrations (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more administrations) .In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels. For example, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 0.1 mg to about 1 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 1 mg to about 10 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 10 mg to about 25 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 25 mg to about 50 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 50 mg to about 100 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at fixed-dosage levels from about 0.1 to about 25 mg, either per administration or per total dose. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at a fixed-dosage, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. For example, in some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 0.1 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 1 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple {e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 10 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 25 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations, in some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 50 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations. In some embodiments, compositions in accordance with the present disclosure may be administered at 100 mg fixed-dosage, either per administration or per total dose, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations.7.Brief Description of DrawingsFIG. 1 Schematic representation and timeline of molding and one dose injection of HM2003 or buffer.FIG. 2 Typical image of blood flow analyzed by laser Doppler imager at 24 h after molding. The blood flow in area 4 compared area 3 was the ratio of blood flow in the ischemic (right) limbs to non-ischemic (left) limbs showed in Fig. 3.FIG. 3 Quantitative analysis of blood flow in the ischemic (right) limbs to non-ischemic (left) limbs. PBS, blood flow in ischemic hindlimb transfected with buffer PBS; mRNA-LNP, blood flow in ischemic hindlimb transfected with HGF mRNA (500 ng / body) ; circRNA only, blood flow in ischemic hindlimb transfected with HM2003 circRNA (400 μg  / body) ; circRNA-LPX, blood flow in ischemic hindlimb transfected with HM2003 circRNA (500 ng  / body) . *, #, **, ##, ****, ####, versus control. Each group contains eight or ten animals.FIG. 4 Qualitative analysis of the expression products of F60B.FIG. 5 HGF expression in different cell types transfected by F60B.FIG. 6 Time-course of HGF expression in different cell types transfected by F60B.FIG. 7 Expression products of F60B in cells from different species activated the c-Met signaling pathway in endothelial cells of the corresponding species.FIG. 8 Expression products of F60B in human cell lines promoted HUVEC proliferation.FIG. 9 Pro-proliferative effects of rhHGF on endothelial cells from different species.FIGs. 10A-10B Expression products of F60B in human cells promoted HUVEC migration.FIG. 11 Expression products of F60B in human cells promoted angiogenesis in HUVECs.FIG. 12 Doppler blood-flow imaging results of BKS-db mice with hindlimb ischemia at multiple time points.FIG. 13 Perfusion ratio changes in BKS-db mice with hindlimb ischemia at multiple time points.FIG. 14 Necrosis scores for the ischemic hindlimb of BKS-db mice with hindlimb ischemia 14 days after dosing.FIG. 15 CD31 staining results of gastrocnemius muscle from ischemic hindlimb of BKS-db mice with hindlimb ischemia 14 days after dosing.FIG. 16 Doppler blood-flow imaging results of BKS-db mice with hindlimb ischemia at multiple time points.FIG. 17 Perfusion ratio changes in BKS-db mice with hindlimb ischemia at multiple time points.FIG. 18 Experimental timeline.FIG. 19 Scoring criteria for hindlimb necrosis.FIG. 20 Effects of acticle drug on mouse body weight (Mean ± SD, n = 7-10) .FIG. 21 Fasting blood glucose in mice prior to model establishment and dosing (Mean ±SD, n = 10) .FIG. 22 Effects of test drug on hindlimb blood-flow ratio in mice (Mean ± SD, n = 7-10) .FIG. 23 Effects of test drug on hindlimb necrosis score in mice (Mean ± SD, n = 7-10) .FIG. 24 Effects of test drug on CD31 protein expression in gastrocnemius muscle on the ischemic hindlimb of mice.FIG. 25 Geometric Mean-Time Logarithmic Graph of HM2003 after intramuscular injection of 0.25 mg / animal Dose of HM2003 (F60B-PB) in Mice.FIG. 26 Graph of HGF protein level in gastrocnemius muscle (administration site) after intramuscular injection of 0.25 mg / animal Dose of HM2003 (F60B-PB) in Mice.FIG. 27 Human-derived HGF protein can bind to c-Met receptor proteins from different species.As provided in detail below, in the description of drawings above, TI refers to a translation initiation sequence. HGF refers to a sequence encoding a HGF protein. L refers to a linker sequence; L1 and L2 are each an independent linker sequence.8.Detailed DescriptionProvided herein are immunogenic compositions comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) encoding HGF polypeptides. In some embodiments, the immunogenic compositions provided herein comprise a circRNA comprising a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) . Methods of manufacture and methods of uses thereof are also provided herein.8.1 DefinitionsUnless otherwise defined herein, scientific and technical terms used in the present disclosures shall have meanings that are commonly understood by those of ordinary skill in the art. Further, unless otherwise required by context, singular terms shall include pluralities and plural terms shall include the singular. Generally, nomenclatures used in connection with, and techniques of, cell and tissue culture, molecular biology, immunology, microbiology, genetics and protein and nucleic acid chemistry and hybridization described herein are those well-known and commonly used in the art.As used herein in the specification, “a” or “an” may mean one or more. As used herein in the claim (s) , when used in conjunction with the word “comprising, ” the words “a” or “an” may mean one or more than one.As used herein, the term “or” in the claims is used to mean “and / or” unless explicitly indicated to refer to alternatives only or the alternatives are mutually exclusive, although the disclosure supports a definition that refers to only alternatives and “and / or. ” As used herein “another” or “additional” may mean at least a second or more.As used herein, the term “about” is used to indicate that a value includes the inherent variation of error for the device, the method being employed to determine the value, or the variation that exists among the study subjects. The term “about” encompasses the exact number recited. In some embodiments, “about” means within plus or minus 10%of a given value or range. In certain embodiments, “about” means that the variation is ±5%, ±4%, ±3%, ±2%, ±1%, ±0.5%, ±0.2%, or ±0.1%of the value to which “about” refers. In some embodiments, “about” means that the variation is ±1%, ±0.5%, ±0.2%, or ±0.1%of the value to which “about” refers.As used herein, “essentially free, ” in terms of a specified component, is used herein to mean that none of the specified component has been purposefully formulated into a composition and / or is present only as a contaminant or in trace amounts. The total amount of the specified component resulting from any unintended contamination of a composition is therefore well below 0.1%, preferably below 0.05%, and more preferably below 0.01%. Most preferred is a composition in which no amount of the specified component can be detected with standard analytical methods.The terms “peptide, ” “polypeptide” and “protein” are used interchangeably herein, and refer to a polymeric form of amino acids comprising at least two or more contiguous amino acids chemically or biochemically modified or derivatized amino acids. The term “peptide” as used herein refers to a class of short polypeptides. The term peptide may refer to a polymer of amino acids (natural or non-naturally occurring) having a length of up to about 100 amino acids. For example, peptides may be about 1 to about 10, about 10 to about 25, about 25 to about 50, about 50 to about 75, about 75 to about 100 amino acid residues in length. In some embodiments, the peptides may be about 100, about 200, about 300, about 400, about 500, about 600, about 700, about 800, about 900, about 1000, about 1250, about 1500, about 1750, about 2000, about 2250, about 2500, about 2750, about 3000, about 3250, about 3500, about 3750, about 4000, about 4250, about 4500, about 4750, are about 5000 amino acid residues in length.The terms “nucleic acid, ” “polynucleotide, ” and “oligonucleotide” are used interchangeably herein and refer to a polymer or oligomer of nucleotides of any length. The nucleotides can be deoxyribonucleotides, ribonucleotides, modified nucleotides or bases (such as methylated, hydroxymethylated, or glycosylated) , non-natural nucleotides, non-nucleotide building blocks that exhibit similar structure and / or function as natural nucleotides (i.e., “nucleotide analogs” ) , and / or any substrate that can be incorporated into a polymer by DNA or RNA polymerase. The nucleic acids or polynucleotides can be heterogenous or homogenous in composition, can be isolated from naturally occurring sources, or can be artificially or synthetically produced. In addition, the nucleic acids may be DNA or RNA, or a mixture thereof, and can exist permanently or transitionally in single-stranded or double-stranded form, including homoduplex, heteroduplex, and hybrid states. Nucleic acid structures also include, for instance, a DNA / RNA helix, peptide nucleic acid (PNA) , morpholino nucleic acid (see, e.g., Braasch and Corey, Biochemistry, 4 (14) : 4503-4510 (2002) and U.S. Patent 5, 034, 506) , locked nucleic acid (LNA; see Wahlestedt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. A., 97: 5633-5638 (2000) ) , cyclohexenyl nucleic acids (see Wang, Am. Chem. Soc., 122: 8595-8602 (2000) ) , and / or a ribozyme.As is understood in the art, a nucleic acid strand is inherently directional, as the carbon atoms in the sugar ring are numbered from 1’ to 5’ and the “5’ -end” has a free hydroxyl (or phosphate) on a 5’ carbon and the “3’ prime end” has a free hydroxyl (or phosphate) on a 3’ carbon. As used herein and understood in the art, a nucleic acid having certain sequence elements “from 5’ to 3’” means that these sequence elements are arranged linearly from the 5’ end to the 3’ end of the nucleic acid.When referring to a nucleotide sequence or protein sequence, the term “identity” is used to denote similarity between two sequences. Sequence similarity or identity may be determined using standard techniques known in the art, including, but not limited to, the local sequence identity algorithm of Smith &Waterman, Adv. Appl. Math. 2, 482 (1981) , by the sequence identity alignment algorithm of Needleman &Wunsch, J Mol. Biol. 48, 443 (1970) , by the search for similarity method of Pearson &Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 2444 (1988) , by computerized implementations of these algorithms (GAP, BESTFIT, FASTA, and TFASTA in the Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, WI) , the Best Fit sequence program described by Devereux et al., Nucl. Acid Res. 12, 387-395 (1984) , or by inspection. Another algorithm is the BLAST algorithm, described in Altschul et al., J Mol. Biol. 215, 403-410, (1990) and Karlin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 5873-5787 (1993) . A particularly useful BLAST program is the WU-BLAST-2 program which was obtained from Altschul et al., Methods in Enzymology, 266, 460-480 (1996) ; blast. wustl / edu / blast / README. html. WU-BLAST-2 uses several search parameters, which are optionally set to the default values. The parameters are dynamic values and are established by the program itself depending upon the composition of the particular sequence and composition of the particular database against which the sequence of interest is being searched; however, the values may be adjusted to increase sensitivity. Further, an additional useful algorithm is gapped BLAST as reported by Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25, 3389-3402. Unless otherwise indicated, percent identity is determined herein using the algorithm available at the internet address: blast. ncbi. nlm. nih. gov / Blast. cgi.As used herein, terms “complementary” and “complementarity” refers to the relationship between two nucleic acid molecules having the capacity to form hydrogen bond (s) with one another by either traditional Watson-Crick base-paring or other non-traditional types of pairing. The two DNA / RNA strands with complementary sequences bind to form a duplex that follows the Watson–Crick base-pairing rules: A binds to T (U) with two hydrogen bonds; G binds to C with three hydrogen bonds. The degree of complementarity between two nucleotide sequences can be indicated by the percentage of nucleotides in a nucleotide sequence which can form hydrogen bonds (e.g., Watson-Crick base pairing) with a second nucleotide sequence (e.g., about 50%, about 60%, about 70%, about 80%, about 90%, and 100%complementary) . Two nucleotide sequences are “perfectly complementary” or “100%complementary” if all the contiguous nucleotides of a nucleotide sequence will hydrogen bond with the same number of contiguous nucleotides in a second nucleotide sequence. Two nucleotide sequences are “substantially complementary” if the degree of complementarity between the two nucleotide sequences is at least 60% (e.g., at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 97%, at least 98%, at least 99%, or 100%) over a region of at least 8 nucleotides (e.g., at least 9, at least 10, at least 11, at least 12, at least 13, at least 14, at least 15, at least 16, at least 17, at least 18, at least 19, at least 20, at least 21, at least 22, at least 23, at least 24, at least 25, at least 30, at least 35, at least 40, at least 45, at least 50, or more nucleotides) , or if the two nucleotide sequences hybridize under at least moderate, or, in some embodiments high, stringency conditions. Exemplary moderate stringency conditions include overnight incubation at 37℃ in a solution comprising 20%formamide, 5%SSC (150 mM NaCl, 15 mM trisodium citrate) , 50 mM sodium phosphate (pH 7.6) , 5x Denhardt’s solution, 10%dextran sulfate, and 20 mg / ml denatured sheared salmon sperm DNA, followed by washing the filters in 1*SSC at about 37-50℃, or substantially similar conditions, e.g., the moderately stringent conditions described in Sambrook, J., MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 4th edition (June 15, 2012) . High stringency conditions are conditions that use, for example (1) low ionic strength and high temperature for washing, such as 0.015 M sodium chloride / 0.0015 M sodium citrate / 0.1%sodium dodecyl sulfate (SDS) at 50℃, (2) employ a denaturing agent during hybridization, such as formamide, for example, 50% (v / v) formamide with 0.1%bovine serum albumin (BSA)  / 0.1%Ficoll / 0.1%polyvinylpyrrolidone (PVP)  / 50 mM sodium phosphate buffer at pH 6.5 with 750 mM sodium chloride and 75 mM sodium citrate at 42℃, or (3) employ 50%formamide, 5xSSC (0.75 M NaCl, 0.075 M sodium citrate) , 50 mM sodium phosphate (pH 6.8) , 0.1%sodium pyrophosphate, 5x Denhardt’s solution, sonicated salmon sperm DNA (50 pg / ml) , 0.1%SDS, and 10%dextran sulfate at 42℃, with washes at (i) 42℃ in 0.2*SSC, (ii) 55℃ in 50%formamide, and (iii) 55℃ in 0.1*SSC (optionally in combination with EDTA) . Additional details and an explanation of stringency of hybridization reactions are provided in, e.g., Sambrook, supra, and Ausubel et al., eds., SHORT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, 5th ed., John Wiley &Sons, Inc., Hoboken, N. J. (2002) .The term “operably linked” as used herein and understood in the art with reference to sequence elements in nucleic acid molecules means that these sequence elements (e.g., an intron fragment, a target sequence, a  promoter, and a coding sequence) are functionally related to each other. For example, a promoter is operatively linked to a coding sequence if it controls the transcription of the sequence; or a ribosome binding site is operatively linked to a coding sequence if it is positioned so as to permit translation.The term “hybridization” or “hybridized” when referring to nucleotide sequences is the association formed between and / or among sequences having complementarity.The term “in vitro transcription, ” or “IVT, ” refers to versatile method to produce RNA in vitro that uses an RNA polymerase, ribonucleotides, and appropriate buffer conditions to synthesize RNA from a DNA template.The term “expression construct” or “expression cassette, ” as used herein, means a nucleotide sequence that directs translation.The terms “coding sequence, ” “coding sequence region, ” “coding region, ” and “CDS, ” as used interchangeably here refer to the portion of a nucleic acid (e.g., a DNA or an RNA) that is or can be translated to protein.The terms “reading frame, ” “open reading frame, ” and “ORF” as used interchangeably herein refer to a nucleotide sequence that begins with an initiation codon (e.g., ATG) and, in some embodiments, ends with a termination codon (e.g., TAA, TAG, or TGA) .The term “control elements” as used herein refers collectively to promoter regions, polyadenylation signals, transcription termination sequences, upstream regulatory domains, origins of replication, internal ribosome entry sites (IRES) , enhancers, splice junctions, and the like, which collectively provide for the replication, transcription, post-transcriptional processing, and translation of a coding sequence in a recipient cell.The term “promoter” as used herein refers to a nucleotide region comprising a DNA regulatory sequence, wherein the regulatory sequence is derived from a gene that is capable of binding to an RNA polymerase and allowing for the initiation of transcription of a downstream (3'direction) coding sequence. It may contain genetic elements at which regulatory proteins and molecules may bind, such as RNA polymerase and other transcription factors, to initiate the specific transcription of a nucleic acid sequence. A promoter that is “operatively positioned, ” “operatively linked” mean that a promoter is in a correct functional location and / or orientation in relation to a nucleic acid sequence to control transcriptional initiation and / or expression of that sequence, which is “under control” and “under transcriptional control” of the promoter.The term “enhancer” as used herein means a nucleic acid sequence that, when positioned proximate to a promoter, confers increased transcription activity relative to the transcription activity resulting from the promoter in the absence of the enhancer domain.The terms “internal ribosome entry site” , “internal ribosome entry site sequence” , “IRES” and “IRES sequence region” as used interchangeably herein refer to cis elements of viral or human cellular RNAs (e.g., messenger RNA (mRNA) and / or circRNAs) that bypass the steps of canonical eukaryotic cap-dependent translation initiation. Previous methods for screening IRES and IRES-like sequence are described in PCT Appl. Nos. PCT / CN2020 / 077026, filed February 27, 2020; PCT / CN2022 / 095749, filed May 27, 2022; JP issued patent JP7297331B2.The term “IRES-like sequence” and “Internal Ribosome Entry Site-like sequence, ” as used interchangeably herein refer to non-naturally occurring nucleotide sequences that display a function of a naturally occurring IRES.The term “5’ intron fragment” and “3’ intron fragment” each refers to a fragment of a group II intron, wherein the 5’ intron fragment is located on the 5 ’side of the 3’ intron fragment in the group II intron. The detailed information about group II intron is described in PCT Appl. Nos. PCT / CN2022 / 095749.The term “vector” or “construct” (sometimes referred to as a gene delivery system or gene transfer “vehicle” ) refers to a vehicle that is used to carry genetic material (e.g., a nucleotide sequence) , which can be introduced into a host cell, where it can be replicated and / or expressed.The term “treat” as used herein refers to executing a protocol or plan, which can include administering one or more drugs or active agents to a patient, in an effort to alleviate signs or symptoms of the disease or the recurrence of the disease. Desirable effects of treatment include decreasing the rate of disease progression, ameliorating or palliating the disease state, and remission, increased survival, improved quality of life or improved prognosis. Alleviation or prevention can occur prior to signs or symptoms of the disease or condition appearing, as well as after their appearance. As used herein, a “treatment” does not require complete alleviation of signs or symptoms, and does not require a cure.As used herein, the term “disease responsive to HGF therapy” refers to a disease or disorder that shows improvement of one or more symptoms or clinical markers after administration of a pharmaceutical composition or a pharmaceutical formulation comprising HGF protein or an agent capable of producing HGF protein, such as the circRNA disclosed herein. Alternatively, a disease is "responsive"to HGF therapy if the progression of the disease is reduced or halted with the administration of a pharmaceutical composition or a pharmaceutical formulation comprising HGF protein or an agent capable of producing HGF protein.As used herein, the term “therapeutic beneficial” or “therapeutically effective” when used in connection with a therapeutic refers to the property of the therapeutic that promotes or enhances the well-being of the subject. This includes, but is not limited to, a reduction in the frequency, severity, or rate of progression of the signs or symptoms of a disease. For example, treatment of cancer may involve, for example, a reduction in the size of a tumor, a reduction in the invasiveness of a tumor, reduction in the growth rate of the cancer, or a reduction in the rate of metastasis or recurrence. Treatment of cancer can also refer to prolonging survival of a subject with cancer.The term "effective amount"or "therapeutically effective amount"as used herein refers to the amount of therapeutic agent (for example, a circRNA) , pharmaceutical composition, or pharmaceutical formulation, sufficient to reduce at least one or more symptom (s) of the disease or disorder, or to provide the desired effect.As used herein, the term “pharmaceutical or pharmacologically acceptable” refers to molecular entities and compositions that do not produce an adverse, allergic, or other untoward reaction when administered to an animal, such as a human, as appropriate. For animal (e.g., human) administration, it will be understood that preparations should meet sterility, pyrogenicity, general safety, and purity standards as required, e.g., by the FDA Office of Biological Standards.As used herein, the term “pharmaceutically acceptable carrier” includes any and all aqueous biocompatible solvents (e.g., saline solutions, phosphate buffered saline, parenteral vehicles, such as sodium chloride, Ringer's dextrose, etc. ) , antioxidants, preservatives (e.g., antibacterial or antifungal agents, anti-oxidants, chelating agents, and inert gases) , isotonic agents, such like materials and combinations thereof, as would be known to one of ordinary skill in the art. The pH and exact concentration of the various components in a pharmaceutical composition are adjusted according to well-known parameters.The terms “transfection, ” “transformation, ” and “transduction” are used interchangeably herein and refer to the introduction of one or more exogenous polynucleotides into a host cell by using physical or chemical methods.As used herein, the term “subject” as used herein refers to any animal (e.g., a mammal) , including, but not limited to, humans, non-human primates, canines, felines, rodents, and the like, which is to be the recipient of a particular treatment. A subject can be a human. A subject can have a particular disease or condition.As used herein, the term “Ringer's solution” refers to a solution of several salts dissolved in water for the purpose of creating an isotonic solution relative to the body fluids of an animal. In some embodiments, the Ringer's solution typically contains NaCl, KCl, CaCl2 and NaHCO3, sometimes with other minerals such as MgCl2, dissolved in distilled water.As used herein, the term “naked formulation” refers to a pharmaceutical composition in which the active ingredient, such as a circRNA, is delivered in a simple aqueous buffer solution without the inclusion of additional complex delivery systems or encapsulating or protective agents such as lipid-based complexes (e.g., LNPs) ..As used herein, the term “HGF” refers to vascular endothelial growth factor A.As used herein, the term “G-CSF” refers to granulocyte colony-stimulating factor, a glycoprotein that stimulates the bone marrow to produce granulocytes and stem cells and release them into the bloodstream.As used herein, the term “administer” and its grammatical equivalents refer to the placement of a pharmaceutical composition or formulation comprising, e.g., a circRNA disclosed herein, into a subject by a method or route that results in at least partial localization of the pharmaceutical composition or the pharmaceutical formulation, at a desired site or tissue location. The pharmaceutical composition or the pharmaceutical formulation can be administered by any appropriate route that results in effective treatment in the subject, i.e., administration results in delivery to a desired location or tissue in the subject where at least a portion of the protein expressed by the circRNA is located at a desired target tissue or target cell location.Nomenclature for nucleotides, nucleic acids, nucleosides, and amino acids used herein is consistent with International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC) standards (see, e.g., bioinformatics. org / smsylupac. html) . Exemplary genes and polypeptides are described herein with reference to GenBank numbers, GI numbers and / or SEQ ID NOs. It is understood that one skilled in the art can readily identify homologous sequences by reference to sequence sources, including but not limited to Uniprot (https:  / / www. uniprot. org / ) , GenBank (ncbi. nlm. nih. gov / genbank / ) and EMBL (embl. org / ) .Ranges: throughout this disclosure, various aspects of the invention can be presented in a range format. It should be understood that the description in range format is merely for convenience and brevity and should not be construed as an inflexible limitation on the scope of the invention. Accordingly, the description of a range should be considered to have specifically disclosed all the possible subranges as well as individual numerical values within that range. For example, description of a range such as from 1 to 6 should be considered to have specifically disclosed subranges such as from 1 to 3, from 1 to 4, from 1 to 5, from 2 to 4, from 2 to 6, from 3 to 6 etc., as well as individual numbers within that range, for example, 1, 2, 2.7, 3, 4, 5, 5.3, and 6. This applies regardless of the breadth of the range.Before the present disclosure is further described, it is to be understood that the disclosure is not limited to the particular embodiments set forth herein, and it is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments, and is not intended to be limiting.8.2 Circular RNAs (circRNAs)In some embodiments, provided herein are compositions comprising a circRNA, wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) . Additionally, in some embodiments, the circRNA can have one TI sequence. In some embodiments, the circRNA can have two or more TI sequences. See FIG. 1 to FIG. 4.8.2.1 Structures with one TI sequenceIn some embodiments, circRNAs provided herein comprise a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) .8.2.2 Structures with two TI sequencesIn some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a G-CSF sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF111 sequence, HGF121 sequence, HGF145 sequence, HGF165a sequence, HGF165b sequence, HGF189 sequence, HGF206 sequence, or a HGFx sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a platelet-derived growth factor (PDGF) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a basic fibroblast growth factor (bFGF) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or an insulin-like growth factor 1 (IGF-1) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a transforming growth factor β1 (TGF-β1) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or an epidermal growth factor (EGF) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a growth and differentiation factor (GDF) sequence.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein comprise, in the following order: a first translation initiation (TI1) sequence, a first protein-coding (Z1) sequence, a second translation initiation (TI2) sequence, and a second protein-coding (Z2) sequence, wherein the Z1 and the Z2 sequences each independently comprises a HGF sequence, or a bone morphogenetic protein (BMP) sequence.8.2.3 Fusion ProteinsCircRNAs provided herein comprise a protein-coding (Z) sequence. In other words, the encoded proteins can include two or more proteins joined together.In some embodiments, bacterial protein platforms can be used. Non-limiting examples of these self-assembling proteins include ferritin, lumazine and encapsulin.Ferritin is a protein whose main function is intracellular iron storage. Ferritin is made of 24 subunits, each composed of a four-alpha-helix bundle, that self-assemble in a quaternary structure with octahedral symmetry (Cho K. J. et al. J Mol Biol. 2009; 390: 83-98) . Several high-resolution structures of ferritin have been determined, confirming that Helicobacter pylori ferritin is made of 24 identical protomers, whereas in animals, there are ferritin light and heavy chains that can assemble alone or combine with different ratios into particles of 24 subunits (Granier T. et al. J Biol Inorg Chem. 2003; 8: 105-111; Fawson D. M. et al. Nature. 1991; 349: 541-544) . Ferritin self-assembles into nanoparticles with robust thermal and chemical stability.Fumazine synthase (FS) is also well-suited as a nanoparticle platform. FS, which is responsible for the penultimate catalytic step in the biosynthesis of riboflavin, is an enzyme present in a broad variety of organisms, including archaea, bacteria, fungi, plants, and eubacteria (Weber S. E. Flavins and Flavoproteins. Methods and Protocols, Series: Methods in Molecular Biology. 2014) . The FS monomer is 150 amino acids long and consists of beta-sheets along with tandem alpha-helices flanking its sides. A number of different quaternary structures have been reported for FS, illustrating its morphological versatility: from homopentamers up to symmetrical assemblies of 12 pentamers forming capsids of 150 A diameter. Even FS cages of more than 100 subunits have been described (Zhang X. et al. J Mol Biol. 2006; 362: 753-770) .Encapsulin, a novel protein cage nanoparticle isolated from thermophile Thermotoga maritima. Encapsulin is assembled from 60 copies of identical 31 kDa monomers having a thin and icosahedral T = 1 symmetric cage structure with interior and exterior diameters of 20 and 24 nm, respectively (Sutter M. et al. Nat Struct Mol Biol. 2008, 15: 939-947) . Although the exact function of encapsulin in T. maritima is not clearly understood yet, its crystal structure has been recently solved and its function was postulated as a cellular compartment that encapsulates proteins such as DyP (Dye decolorizing peroxidase) and Flp (Ferritin like protein) , which are involved in oxidative stress responses (Rahmanpour R. et al. FEBS J. 2013, 280: 2097-2104) .CircRNAs provided herein comprise a protein-coding (Z) sequence. In some embodiments, the Z sequence also encodes a signal peptide. Signal peptides, comprising the N-terminal 15-60 amino acids of proteins, are typically needed for the translocation across the membrane on the secretory pathway and, thus, universally control the entry of most proteins both in eukaryotes and prokaryotes to the secretory pathway. In eukaryotes, the signal peptide of a nascent precursor protein (pre-protein) directs the ribosome to the rough endoplasmic reticulum (ER) membrane and initiates the transport of the growing peptide chain across it for processing. ER processing produces mature proteins, wherein the signal peptide is cleaved from precursor proteins, typically by an ER-resident signal peptidase of the host cell, or they remain uncleaved and function as a membrane anchor. A signal peptide can also facilitate the targeting of the protein to the cell membrane.A signal peptide can have a length of 15-60 amino acids. For example, a signal peptide may have a length of 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, or 60 amino acids. In some embodiments, a signal peptide has a length of 20-60, 25-60, 30-60, 35-60, 40-60, 45-60, 50-60, 55-60, 15-55, 20-55, 25-55, 30-55, 35-55, 40-55, 45-55, 50-55, 15-50, 20-50, 25-50, 30-50, 35-50, 40-50, 45-50, 15-45, 20-45, 25-45, 30-45, 35-45, 40-45, 15-40, 20-40, 25-40, 30-40, 35-40, 15-35, 20-35, 25-35, 30-35, 15-30, 20-30, 25-30, 15-25, 20-25, or 15-20 amino acids.Signal peptides from heterologous genes (which regulate expression of genes other than HGF in nature) are known in the art and can be tested for desired properties and then incorporated into a nucleic acid of the disclosure.8.2.4 linkersIn some embodiments, the circRNAs provided herein encode more than one functional domain or peptide linked together as a fusion protein. In some embodiments, the circRNAs provided herein further comprise a linker (L) sequence that encodes a linker (L) located between at least two or each domain of the fusion protein. In some embodiments, circRNAs provided herein comprise more than one HGF-encoding sequences and / or G-CSF-encoding sequences. In some embodiments, adjacent HGF-encoding sequences and / or G-CSF-encoding sequences are linked by a linker sequence (L) .The linker can be, for example, a cleavable linker or protease-sensitive linker. In some embodiments, the linker is selected from the group consisting of F2A linker, P2A linker, T2A linker, E2A linker, and combinations thereof. This family of self-cleaving peptide linkers, referred to as 2A peptides, has been described in the art (see for example, Kim, J. H. et al. (2011) PLoS ONE 6: el8556) . In some embodiments, the linker is an F2A linker. In some embodiments, the linker is a GGGS linker. In some embodiments, the fusion protein contains three domains with intervening linkers, having the structure: domain-linker-domain-linker-domain.Cleavable linkers known in the art can be used in connection with the disclosure. Exemplary linkers include: F2A linkers, T2A linkers, P2A linkers, E2A linkers (See, e.g., WO2017127750) . The skilled artisan will appreciate that other art-recognized linkers may be suitable for use in the constructs of the disclosure (e.g., encoded by the nucleic acids of the disclosure) . The skilled artisan can likewise appreciate that other polycistronic constructs can be suitable for use as provided herein.In some embodiments, the linker sequence comprises a 5’ UTR, 3’ UTR, poly-Asequence, polyA-C sequence, poly-C sequence, poly-U sequence, poly-G sequence, ribosome binding site, aptamer, riboswitch, ribozyme, small RNA binding site, translation regulation elements (e.g., a Kozak sequence) , a protein binding site (e.g., PTBP1 or HUR) a non-natural nucleotide, or a non-nucleotide chemical-linker sequence.In some embodiments, the linker sequence comprises a 3’ UTR. In some embodiments, the 3’ UTR can be the 3’ UTR from human beta globin, human alpha globin xenopus beta globin, xenopus alpha globin, human prolactin, human GAP-43, human eEFlal, human Tau, human TNFa, dengue virus, hantavirus small mRNA, bunyavirus small mRNA, turnip yellow mosaic virus, hepatitis C virus, rubella virus, tobacco mosaic virus, human IL-8, human actin, human GAPDH, human tubulin, hibiscus chlorotic linsgspot virus, woodchuck hepatitis virus post translationally regulated element, sindbis virus, turnip crinkle virus, tobacco etch virus, or Venezuelan equine encephalitis virus.In some embodiments, the linker sequence comprises a 5’ UTR. In some embodiments, the 5’ UTR can be the 5’ UTR from human beta globin, Xenopus laevis beta globin, human alpha globin, Xenopus laevis alpha globin, rubella virus, tobacco mosaic virus, mouse Gtx, dengue virus, heat shock protein 70 kDa protein 1A, tobacco alcohol dehydrogenase, tobacco etch virus, turnip crinkle virus, or the adenovirus tripartite leader.In some embodiments, the linker sequence comprises a polyA region. In some embodiments the polyA region is at least 30 nucleotides or at least 60 nucleotides in length.8.2.5 Sequence optimizationCircRNAs provided herein comprise a protein-coding (Z) sequence. In some embodiments, the Z sequence can be codon optimized. In some embodiments, the HGF sequence is codon optimized. Codon optimization methods are known in the art. Codon optimization, in some embodiments, can be used to match codon frequencies in target and host organisms to ensure proper folding; bias GC content to increase stability or reduce secondary structures; minimize tandem repeat codons or base runs that can impair gene construction or expression; customize transcriptional and translational control regions; insert or remove protein trafficking sequences; remove / add post translation modification sites in encoded protein (e.g., glycosylation sites) ; add, remove or shuffle protein domains; insert or delete restriction sites; modify ribosome binding sites and degradation sites; adjust translational rates to allow the various domains of the protein to fold properly; or reduce or eliminate problem secondary structures within the polynucleotide. Codon optimization tools, algorithms and services are known in the art -non-limiting examples include services from GeneArt (Life Technologies) , DNA2.0 (Menlo Park CA) and / or proprietary methods. In some embodiments, the Z sequence is optimized using optimization algorithms. In some embodiments, the HGF sequence is optimized using optimization algorithms.8.2.6 Modified nucleosidesIn some embodiments, the circRNAs provided herein are not chemically modified and comprise the standard ribonucleotides consisting of adenosine, guanosine, cytosine and uridine. In some embodiments, the circRNAs provided herein comprise nucleotides and / or nucleosides that are modified as is known in the art. In some embodiments, nucleotides and nucleosides of the present disclosure comprise modified nucleotides or nucleosides. Such modified nucleotides and nucleosides can be naturally-occurring modified nucleotides and nucleosides or non-naturally occurring modified nucleotides and nucleosides. Such modifications can include those at the sugar, backbone, or nucleobase portion of the nucleotide and / or nucleoside as are recognized in the art.In some embodiments, a naturally-occurring modified nucleotide or nucleotide of the disclosure is one as is generally known or recognized in the art. Non-limiting examples of such naturally occurring modified nucleotides and nucleotides can be found, inter alia, in the widely recognized MODOMICS database.In some embodiments, a non-naturally occurring modified nucleotide or nucleoside of the disclosure is one as is generally known or recognized in the art. Non-limiting examples of such non-naturally occurring modified nucleotides and nucleosides can be found, inter alia, in published US application Nos. PCT / US2012 / 058519; PCT / US2013 / 075177; PCT / US2014 / 058897; PCT / US2014 / 058891; PCT / US2014 / 070413; PCT / US2015 / 36773; PCT / US2015 / 36759; PCT / US2015 / 36771; or PCT / IB 2017 / 051367 all of which are incorporated by reference herein.As such, circRNAs disclosed herein can comprise standard nucleotides and nucleosides, naturally-occurring nucleotides and nucleosides, non-naturally-occurring nucleotides and nucleosides, or any combination thereof. In some embodiments, circRNAs disclosed herein comprise various (more than one) different types of standard and / or modified nucleotides and nucleosides. In some embodiments, a particular region of a circRNA contains one, two or more (optionally different) types of standard and / or modified nucleotides and nucleosides.In some embodiments, modified circRNAs disclosed herein, introduced to a cell or organism, exhibits reduced degradation in the cell or organism, respectively, relative to an unmodified circRNAs comprising standard nucleosides.In some embodiments, modified circRNAs disclosed herein, introduced into a cell or organism, exhibit reduced immunogenicity in the cell or organism (e.g., a reduced innate response) relative to an unmodified circRNA comprising standard nucleosides.In some embodiments, circRNAs disclosed herein comprise non-natural modified nucleosides that are introduced during synthesis or post-synthesis to achieve desired functions or properties. The modifications can be present on internucleotide linkages, purine or pyrimidine bases, or sugars. The modification can be introduced with chemical synthesis or with a polymerase enzyme at the terminal of a chain or anywhere else in the chain.In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have modified RNA nucleotides and / or modified nucleosides. In some embodiments, the modified nucleoside is m5C (5-methylcytidine) . In another embodiment, the modified nucleoside is m5U (5-methyluridine) . In another embodiment, the modified nucleoside is m6A (N6-methyladenosine) . In another embodiment, the modified nucleoside is s2U (2-thiouridine) . In another embodiment, the modified nucleoside is Y (pseudouridine) . In another embodiment, the modified nucleoside is Um (2 '-O-methyluridine) . In other embodiments, the modified nucleoside is m! A (1-methyladenosine) ; m2A (2-methyladenosine) ; Am (2’ -0-methyladenosine) ; ms2 m6A (2-methylthio-N6-methyladenosine) ; i6A (N6-isopentenyladenosine) ; ms2i6A (2-methylthio-N6 isopentenyladenosine) ; io6A (N6- (cis-hydroxyisopentenyl) adenosine) ; ms2io6A (2-methylthio-N6-(cis-hydroxyisopentenyl) adenosine) ; g6A (N6-glycinylcarbamoyladenosine) ; t6A (N6-threonylcarbamoyladeno sine) ; ms2t6A (2-methylthio-N6-threonyl carbamoyladenosine) ; m6t6A (N6-methyl-N6-threonylcarbamoyladenosine) ; hn6A (N6-hydroxynorvalylcarbamoyladenosine) ; ms2hn6A (2-methylthio-N6-hydroxynorvalyl carbamoyladenosine) ; Ar (p) (2’ -0-ribosyladenosine (phosphate) ) ; I (inosine) ; m1I (1-methylinosine) ; m1hn (1, 2’ -O-dimethylinosine) ; m3C (3-methylcytidine) ; Cm (2’ -0-methylcytidine) ; s2C (2-thiocytidine) ; ac4C (N4-acetylcytidine) ; (5-formylcytidine) ; m5Cm (5 , 2 '-O-dimethylcytidine) ; ac4Cm (N4-acetyl-2’ -O-methylcytidine) ; k2C (lysidine) ; m! G (1-methylguanosine) ; m2G (N2-methylguanosine) ; m7G (7-methylguanosine) ; Gm (2'-0-methylguanosine) ; m2 2G (N2, N2-dimethylguanosine) ; m2Gm (N2, 2’ -O-dimethylguanosine) ; m2 aGm (N2, N2, 2’ -O-trimethylguanosine) ; Gr (p) (2’ -0-ribosylguanosine (phosphate) ) ; yW (wybutosine) ; oayW (peroxywybutosine) ; OHyW (hydroxy wybutosine) ; OHyW* (undermodified hydroxywybutosine) ; imG (wyosine) ; mimG (methylwyosine) ; Q (queuosine) ; oQ (epoxyqueuosine) ; galQ (galactosyl-queuosine) ; manQ (mannosyl-queuosine) ; preQo (7-cyano-7-deazaguanosine) ; preQi (7-aminomethyl-7-deazaguanosine) ; G+ (archaeosine) ; D (dihydrouridine) ; m5Um (5, 2’ -0-dimethyluridine) ; s4U (4-thiouridine) ; m5s2U (5-methyl-2-thiouridine) ; s2Um (2-thio-2’ -0-methyluridine) ; acp3U (3- (3-amino-3-carboxypropyl) uridine) ; ho5U (5-hydroxyuridine) ; mo5U (5-methoxyuridine) ; cmo5U (uridine 5-oxy acetic acid) ; mcmo5U (uridine 5-oxy acetic acid methyl ester) ; chm5U (5- (carboxyhydroxymethyl) uridine) ) ; mchm5U (5-(carboxyhydroxymethyl) uridine methyl ester) ; mcm5U (5-methoxycarbonylmethyluridine) ; mcm5Um (5-methoxycarbonylmethyl-2’ -0-methyluridine) ; mcm5s2U (5-methoxycarbonylmethyl-2-thiouridine) ; nm5S2U (5-aminomethyl-2-thiouridine) ; mnm5U (5-methylaminomethyluridine) ; mnm5s2U (5-methylaminomethyl-2-thiouridine) ; mnm5se2U (5-methylaminomethyl-2-selenouridine) ; ncm5U (5-carbamoylmethyluridine) ; ncm5Um (5-carbamoylmethyl-2 '-O-methyluridine) ; cmnm5U (5-carboxymethylaminomethyluridine) ; cmnm5Um (5-carboxymethylaminomethyl-2'-0-methyluridine) ; cmnm5s2U (5-carboxymethylaminomethyl-2-thiouridine) ; m6 2A (N6, N6-dimethyladenosine) ; Im (2’ -0-methylinosine) ; m4C (N4-methylcytidine) ; m4Cm (N4, 2’ -0-dimethylcytidine) ; hm5C (5-hydraxymethylcytidine) ; m3U (3-methyluridine) ; cm5U (5-carboxymethyluridine) ; m6Am (N6, 2’ -O-dimethyladenosine) ; m6 2Am (N6, N6, 0-2’ -trimethyladenosine) ; m2, 7G (N2, 7-dimethylguanosine) ; m2, 2, 7G (N2, N2, 7-trimethylguanosine) ; m3Um (3, 2’ -0-dimethyluridine) ; m5D (5-methyldihydrouridine) ; f5Cm (5-formyl-2’ -0-methylcytidine) ; m'Gm (l, 2’ -0-dimethylguanosine) ; m'A m (l, 2’ -0-dimethyladenosine) ; rm 5U (5-taurinomethyluridine) ; τm5s2U (5-taurinomethyl-2-thiouridine) ) ; imG-14 (4-demethylwyosine) ; imG2 (isowyosine) ; or ac6A (N6-acetyladenosine) .In some embodiments, the modified nucleoside can include a compound selected from the group of: pyridin-4-one ribonucleoside, 5-aza-uridine, 2-thio-5-aza-uridine, 2-thiouridine, 4-thio-pseudouridine, 2-thio-pseudouridine, 5-hydroxyuridine, 3-methyluridine, 5-carboxymethyl-uridine, 1-carboxymethyl-pseudouridine, 5-propynyl-uridine, 1-propynyl-pseudouridine, 5-taurinomethyluridine, 1-taurinomethyl-pseudouridine, 5-taurinomethyl-2-thio-uridine, l-taurinomethyl-4-thio-uridine, 5-methyl-uridine, 1-methyl-pseudouridine, 4-thio-1-methyl-pseudouridine, 2-thio-1-methyl-pseudouridine, 1-methyl-1-deaza-pseudouridine, 2-thio-1-methyl-1-deaza-pseudouridine, dihydrouridine, dihydropseudouridine, 2-thio-dihydrouridine, 2-thio-dihydropseudouridine, 2-methoxyuridine, 2-methoxy-4-thio-uridine, 4-methoxy-pseudouridine, 4-m ethoxy-2-thio-pseudouridine, 5-aza-cytidine, pseudoisocytidine, 3-methyl-cytidine, N4-acetylcytidine, 5-formylcytidine, N4-methylcytidine, 5-hydroxymethylcytidine, 1-methyl-pseudoisocytidine, pyrrolo-cytidine, pyrrolo-pseudoisocytidine, 2-thio-cytidine, 2-thio-5-methyl-cytidine, 4-thio-pseudoisocytidine, 4-thio-1-methyl-pseudoisocytidine, 4-thio-1-methyl-1-deaza-pseudoisocytidine, 1-methyl-1-deaza-pseudoisocytidine, zebularine, 5-aza-zebularine, 5-methyl-zebularine, 5-aza-2-thio-zebularine, 2-thio-zebularine, 2-methoxy-cytidine, 2-methoxy-5-methyl-cytidine, 4-methoxy-pseudoisocytidine, 4-methoxy-1-methyl-pseudoisocytidine, 2-aminopurine, 2, 6-diaminopurine, 7-deaza-adenine, 7-deaza-8-aza-adenine, 7-deaza-2-aminopurine, 7-deaza-8-aza-2-aminopurine, 7-deaza-2, 6-diaminopurine, 7-deaza-8-aza-2, 6-diaminopurine, 1-methyladenosine, N6-methyladenosine, N6-isopentenyladenosine, N6- (cis-hydroxyisopentenyl) adenosine, 2-methylthio-N6- (cis-hydroxyisopentenyl) adenosine, N6-glycinylcarbamoyladenosine, N6-threonylcarbamoyladenosine, 2-methylthio-N6-threonyl carbamoyladenosine, N6, N6-dimethyladenosine, 7-methyladenine, 2-methylthio-adenine, 2-methoxy-adenine, inosine, 1-methyl-inosine, wyosine, wybutosine, 7-deaza-guanosine, 7-deaza-8-aza-guanosine, 6-thio-guanosine, 6-thio-7-deaza-guanosine, 6-thio-7-deaza-8-aza-guanosine, 7-methyl-guanosine, 6-thio-7-methyl-guanosine, 7-methylinosine, 6-methoxy-guanosine, 1-methylguanosine, N2-methylguanosine, N2, N2-dimethylguanosine, 8-oxo-guanosine, 7-methyl-8-oxo-guanosine, 1-methyl-6-thio-guanosine, N2-methyl-6-thio-guanosine, and N2, N2-dimethyl-6-thio-guanosine. In another embodiment, the modifications are independently selected from the group consisting of 5-methylcytosine, pseudouridine and 1-methylpseudouridine.The circRNAs of the present disclosure can be partially or fully modified along the entire length of the molecule. The circRNAs of the present disclosure can contain from about 1%to about 100%modified nucleotides (either in relation to overall nucleotide content, or in relation to one or more types of nucleotide, i.e., any one or more of A, G, U or C) or any intervening percentage (e.g., from 1%to 20%, from 1%to 25%, from 1%to 50%, from 1%to 60%, from 1%to 70%, from 1%to 80%, from 1%to 90%, from 1%to 95%, from 10%to 20%, from 10%to 25%, from 10%to 50%, from 10%to 60%, from 10%to 70%, from 10%to 80%, from 10%to 90%, from 10%to 95%, from 10%to 100%, from 20%to 25%, from 20%to 50%, from 20%to 60%, from 20%to 70%, from 20%to 80%, from 20%to 90%, from 20%to 95%, from 20%to 100%, from 50%to 60%, from 50%to 70%, from 50%to 80%, from 50%to 90%, from 50%to 95%, from 50%to 100%, from 70%to 80%, from 70%to 90%, from 70%to 95%, from 70%to 100%, from 80%to 90%, from 80%to 95%, from 80%to 100%, from 90%to 95%, from 90%to 100%, and from 95%to 100%) . It will be understood that any remaining percentage is accounted for by the presence of unmodified A, G, U, or C.8.2.7 Preparation of circRNAsProvided herein are immunogenic compositions comprising circRNA. CircRNAs are single-stranded RNAs that are joined head to tail, which can be prepared using methods known in the art. In some embodiments, methods of circRNA synthesis in vitro comprise ligating the ends of linear RNA precursor to produce a covalently closed circle. Linear RNA can be produced by chemical synthesis or enzymatic strategies (Müller S. (2017) , RNA Biol. 14, 1018-1027; Obi P. (2021) . Methods S1046-2023, 00065-00067) . The advantage of chemical synthesis is that the 5’ monophosphate can be directly introduced during the synthesis process for future cyclization. However, limited by the high cost of purification and low yield, chemical synthesis can only produce RNA of less than 50 to 70 nucleotides in length. Therefore, enzymatic strategy is the primary linear RNA synthesis method at present. Enzymatic strategy is usually realized through an in vitro transcription (IVT) reaction (Beckert B. (2011) . Methods Mol. Biol. 703, 29–41) , which includes DNA template, reaction buffer, and phage RNA polymerase. The phage RNA polymerase usually derives from the T7, SP6, or T3 bacteriophages, and T7 RNA polymerase is the most common phage RNA polymerase. IVT reaction allows for longer RNA synthesis at a lower cost. In some embodiments, mutated phage polymerases with improved transcription quality and reduced side reactions are used.Circularization is achieved when the linear RNA precursor is ligated in vitro. The ligation methods include chemical ligation, enzymatic ligation, and ribozyme method. In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by chemical ligation using, for example cyanogen bromide (BrCN) or 1-ethyl-3- (3′-dimethylaminopropyl) carbodiimide to link DNA-RNA hybrids (Sokolova et al., (1988) . FEBS Lett. 232, 153–155) .In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by enzymatic ligations by catalytic reactions of several enzymes from the bacteriophage T4, including T4 DNA ligase (T4 Dnl) , T4 RNA ligase 1 (T4 Rnl 1) , and T4 RNA ligase 2 (T4 Rnl 2) . As a linear RNA precursor needs a 3’ -OH on the acceptor substrate and a 5’ monophosphate on the donor substrate for enzymatic ligation, if the linear RNA precursor is produced by chemical synthesis, a 5’ monophosphate can be incorporated during the synthesis or added after the synthesis using ATP and T4 polynucleotide kinase. If the linear RNA precursor is synthesized by IVT reaction, it usually starts with 5’ -pppG, and the 5’ -terminus needs to be dephosphorylated prior using calf intestinal (CIP) enzyme or other phosphatases. Then, 5’ monophosphate can be added using ATP and T4 polynucleotide kinase. In some embodiments, GMP is added to the IVT reaction mixture for phosphorylating the transcript at its 5’ end. In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by T4 Dnl ligation. T4 Dnl can help ligate double-stranded duplexes, such as DNA / RNA hybrids, and therefore requires a complementary DNA (cDNA) template or bridge to achieve RNA ligation. In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by T4 Rnl 1 ligation. T4 Rnl 1 catalyzes the nucleophilic attack of the 3’ -OH terminus onto the activated 5’ -terminus to form a covalent 5’ , 3’ -phosphodiester bond and produces circRNAs. In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by T4 Rnl 2 ligation. Similar to T4 Rnl 1, T4 Rnl 2 also catalyzes the nucleophilic attack of the 3’ -OH terminus onto the activated 5’ -terminus to form a covalent 5’ , 3’ -phosphodiester bond. However, T4 Rnl 2 is much more active at joining nicks in double-stranded RNA (dsRNA) than at ligating the ends of ssRNA. T4 Rnl 2 is more suitable for linear RNA precursor with the ligation junction in a double-stranded region.In some embodiments, the linear RNA precursors are circularized by enzymatic ligations by ribozyme methods. Modified group I intron self-splicing system can be used, which is also called permuted introns and exons (PIE) method (Wesselhoeft et al. (2018) . Nat. Commun. 9, 2629; Rausch et al. (2021) Nucleic Acids Res. 49, E35) . PIE method requires only the addition of GTP and Mg2+ as cofactors and shows great potential for protein synthesis. This method realized RNA ligation through a regular group I intron self-splicing reaction, including two transesterifications at defined splice sites. PIE method can be used for RNA cyclization in vitro and in vivo. Compared to chemical ligation and enzymatic ligation, PIE method could be applied for the cyclization of larger linear RNA precursor, and the reaction condition and purification method of PIE method is simpler.Group II introns can also be used for circRNA synthesis, which involves an inverse splicing reaction (Mikheeva S. et al., (1997) . Nucleic Acids Res. 25, 5085–94) . This splicing reaction involves the joining of the 5’ splice site at the end of an exon to the 3’ splice site at the beginning of the same exon. Compared to the group I introns, all exon sequences are dispensable for group II intron-catalyzed inverse splicing. Therefore, this method can enable more accurate linear RNA precursor ligation. Methods of preparing circRNAs using Group II introns are described in PCT Application Nos. PCT / CN2022 / 095749, PCT / CN2022 / 095949, PCT / CN2022 / 104527, PCT / CN2022 / 129435, PCT / CN2022 / 134803, PCT / CN2022 / 135585, all hereby incorporated by reference in their entireties.Hairpin ribozyme (HPR) can produce circRNAs through rolling circle reaction and the self-splicing reaction from circular single-strand DNA template (Dallas et al. (2008) . Nucleic Acids Res. 36, 6752-66; Petkovic and Müller (2013) FEBS Lett. 587, 2435-40) . The linear RNA precursor with HPR will fold into two alternative cleavage-active conformations to remove the 3’-end and the 5’ -end. As a result, the intermediate will contain a 5’ -OH and a 2’ , 3’ -cyclic phosphate to produce the target circRNA. In this method, small circRNAs can be produced from long repeating RNAs transcribed by RNA polymerase through a rolling circle mechanism in vitro.For illustrative purposes, in some embodiments, circRNAs provided herein can be prepared using Group II intron self-splicing as follows. First, vectors containing nucleotide sequences encoding the precursor RNA are designed and cloned, which comprise the following operably linked elements from 5’ to 3’ : (1) a 3’ intron fragment; (2) a target sequence consisting of (i) a 3’ target sequence fragment and (ii) a 5’ target sequence fragment, from 5’ to 3’ ; and (3) a 5’ intron fragment; wherein the RNA has group II intron activity and, upon self-splicing, can form a circRNA that comprises both the 5’ and 3’ target sequence fragments with the 3’ -end of the 5’ target sequence fragment linked to the 5’ -end of the 3’ target sequence fragment. In some embodiments, the vectors are DNA vectors.Many vectors can be used, including, for example, expression vectors, plasmids, phage vectors, viral vectors, episomes and artificial chromosomes, which can include selection sequences or markers operable for stable integration into a host cell’s chromosome. Examples of categories of animal viruses useful as vectors include, without limitation, retrovirus (including lentivirus) , adenovirus, adeno-associated virus (AAV) , herpesvirus (e.g., herpes simplex virus) , poxvirus, baculovirus, papillomavirus, and papovavirus (e.g., SV40) . Examples of expression vectors are pClneo vectors (Promega) for expression in mammalian cells; pLenti4 / V5-DESTTM, pLenti6 / V5-DESTTM, and pLenti6.2 / V5-GW / lacZ (Invitrogen) for lentivirus-mediated gene transfer and expression in mammalian cells. Exemplary AAV serotypes include AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV6, AAV9 AAV8, and AAV9. In some embodiments, the vector is an episomal vector or a vector that is maintained extrachromosomally. The vector is engineered to harbor the sequence coding for the origin of DNA replication or “ori” from a lymphotrophic herpes virus or a gamma herpesvirus, an adenovirus, SV40, a bovine papilloma virus, or a yeast, specifically a replication origin of a lymphotrophic herpes virus or a gamma herpesvirus corresponding to oriP of EBV. In some embodiments, the lymphotrophic herpes virus may be Epstein Barr virus (EBV) , Kaposi's sarcoma herpes virus (KSHV) , Herpes virus saimiri (HS) , or Marek's disease virus (MDV) . Epstein Barr virus (EBV) and Kaposi's sarcoma herpes virus (KSHV) are also examples of a gamma herpesvirus.Additionally, vectors can include one or more selectable marker genes and appropriate expression control sequences. Selectable marker genes that can be included, for example, provide resistance to antibiotics or toxins, complement auxotrophic deficiencies, or supply critical nutrients not in the culture media. “Expression control sequences, ” “control elements, ” or “regulatory sequences” present in an expression vector are those non-translated regions of the vector-origin of replication, selection cassettes, promoters, enhancers, translation initiation signals (Shine Dalgarno sequence or Kozak sequence) introns, a polyadenylation sequence, 5'a nd 3'untranslated regions-which interact with host cellular proteins to carry out transcription and translation. Such elements can vary in their strength and specificity. Depending on the vector system and host utilized, any number of suitable transcription and translation elements, including ubiquitous promoters and inducible promoters can be used.Illustrative ubiquitous expression control sequences that can be used in present disclosure include, but are not limited to, a cytomegalovirus (CMV) immediate early promoter, a viral simian virus 40 (SV40) promoter (e.g., early or late) , a Moloney murine leukemia virus (MoMLV) LTR promoter, a Rous sarcoma virus (RSV) LTR, a herpes simplex virus (HSV) (thymidine kinase) promoter, H5, P7.5, and P11 promoters from vaccinia virus, an elongation factor 1-alpha (EF1a) promoter, early growth response 1 (EGR1) , ferritin H (FerH) , ferritin L (FerL) , Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) , eukaryotic translation initiation factor 4A1 (EIF4A1) , heat shock 70kDa protein 5 (HSPA5) , heat shock protein 90kDa beta, member 1 (HSP90B1) , heat shock protein 70kDa (HSP70) , β-kinesin (β-KIN) , the human ROSA 26 locus (Irions et al., Nature Biotechnology 25, 1477 -1482 (2007) ) , a Ubiquitin C promoter (UBC) , a phosphoglycerate kinase-1 (PGK) promoter, a cytomegalovirus enhancer / chicken β-actin (CAG) promoter, and a β-actin promoter.Illustrative examples of inducible promoters / systems include, but are not limited to, steroid-inducible promoters such as promoters for genes encoding glucocorticoid or estrogen receptors (inducible by treatment with the corresponding hormone) , metallothionine promoter (inducible by treatment with various heavy metals) , MX-1 promoter (inducible by interferon) , the “GeneSwitch” mifepristone-regulatable system (Sirin et al., 2003, Gene, 323: 67) , the cumate inducible gene switch (WO 2002 / 088346) , tetracycline-dependent regulatory systems, etc.The vectors provided herein can be made using standard techniques of molecular biology. For example, the various elements of the vectors provided herein can be obtained using recombinant methods, such as by screening cDNA and genomic libraries from cells, or by deriving the polynucleotides from a vector known to include the same. The various elements of the vectors provided herein can also be produced synthetically, rather than cloned, based on the known sequences. The complete sequence can be assembled from overlapping oligonucleotides prepared by standard methods and assembled into the complete sequence. See, e.g., Edge, Nature (1981) 292: 756; Nambair et al., Science (1984) 223 : 1299; and Jay et al., J. Biol. Chem. (1984) 259: 631 1.Thus, particular nucleotide sequences can be obtained from vectors harboring the desired sequences or synthesized completely, or in part, using various oligonucleotide synthesis techniques known in the art, such as site-directed mutagenesis and polymerase chain reaction (PCR) techniques where appropriate. One method of obtaining nucleotide sequences encoding the desired vector elements is by annealing complementary sets of overlapping synthetic oligonucleotides produced in a conventional, automated polynucleotide synthesizer, followed by ligation with an appropriate DNA ligase and amplification of the ligated nucleotide sequence via PCR. See, e.g., Jayaraman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1991) 88: 4084-4088. Additionally, oligonucleotide-directed synthesis (Jones et al., Nature (1986) 54: 75-82) , oligonucleotide directed mutagenesis of preexisting nucleotide regions (Riechmann et al., Nature (1988) 332: 323-327 and Verhoeyen et al., Science (1988) 239: 1534-1536) , and enzymatic filling-in of gapped oligonucleotides using T4 DNA polymerase (Queen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1989) 86: 10029-10033) can be used.Second, the linear RNA precursors can be generated by incubating a vector provided herein under conditions permissive of transcription of the RNAs encoded by the vector. For example, in some embodiments, the linear RNA precursors provided herein can be synthesized by incubating a vector provided herein that comprises an RNA polymerase promoter upstream of its 5’ duplex forming region and / or expression sequence with a compatible RNA polymerase enzyme under conditions permissive of in vitro transcription. In some embodiments, the vector is incubated inside of a cell by a bacteriophage RNA polymerase or in the nucleus of a cell by host RNA polymerase P. In some embodiments, the linear RNA precursors can be generated by performing in vitro transcription using a vector provided herein as a template (e.g., a vector provided herein with an RNA polymerase promoter positioned upstream of the 5’ homology region) .Third, the linear RNA precursors, which have group II intron activity, can be used to generate circular RNA by self-splicing. In some embodiments, the linear RNA precursors are incubated under conditions suitable for circularization (self-splicing) . Self-splicing of group II introns needs to be accomplished under high-salinity conditions, and does not require the introduction of GTP. As such, in some embodiments, the buffer used in the self-splicing reaction comprises 10 mM to 100 mM, such as 10 mM, 20 mM, 30 mM, 40 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 80 mM, 90 mM, and 100 mM divalent magnesium ions, such as MgCl2. The self-splicing buffer can also comprise 10 mM to 100 mM, such as 10 mM, 20 mM, 30 mM, 40 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 80 mM, 90 mM, and 100 mM NaCl.In some embodiments, the self-splicing reaction is performed in vitro for about 5 min to about 1 h, such as about 5 min, about 10 min, about 15 min, about 20 min, about 25 min, about 30 min, about 35 min, about 40 min, about 45 min, about 50 min, about 55 min, and about 1 h.In some embodiments, the self-splicing reaction is performed at a temperature between 20 and 60 ℃, between 20 and 50 ℃, between 20 and 40 ℃, between 20 and 30 ℃, between 30 and 40 ℃, between 40 and 50 ℃, or between 50 and 60 ℃.In some embodiments, the precursor RNAs are capable of achieving a circularization rate of at least 30%, such as a circularization rate of at least 50%, at least 60%, at least 70%, at least 80%, at least 90%, and at least 95%.Fourth, the circRNAs prepared by self-splicing the linear RNA precursors are purified. Purification includes, but is not limited to, the removal of non-circularized linear RNAs, dsRNAs, and other unwanted components. In some embodiments, the circRNAs disclosed herein are purified before being transfected into cells. The phosphate groups at both ends of a linear RNA and some dsRNAs might activate the RIG-1 signaling pathway, and the immune response resulted from RIG-1 signaling can lead to the degradation of exogenous RNAs, thus affecting the function of circular RNAs.For illustrative purposes, the methods of purification can include any of the following: enzymatic treatment; chromatography, including but not limited to affinity column chromatography, reversed-phase silica gel column liquid chromatography, gel filtration chromatography, and gel exclusion liquid chromatography; and electrophoresis, including but not limited to gel electrophoresis such as agarose gel electrophoresis, and capillary electrophoresis; and any combination thereof. Methods for removing linear RNAs, for example, include enzymatic treatment, such as treatment with RNase R; and chromatography, such as high performance liquid chromatography (HPLC) . Methods for removing terminal phosphate groups, for example, include treatment with alkaline phosphatases, such as calf intestinal alkaline phosphatase (CIP) .In some embodiments, purification comprises one or more of the following steps: phosphatase treatment, HPLC size exclusion purification, and RNase R digestion. In some embodiments, purification comprises the following steps in order: RNase R digestion, phosphatase treatment, and HPLC size exclusion purification. In some embodiments, purification comprises reverse phase HPLC. In some embodiments, a purified composition contains less double stranded RNA, DNA splints, triphosphorylated RNA, phosphatase proteins, protein ligases, capping enzymes and / or nicked RNA than unpurified RNA.In some embodiments, the linear RNA precursors provided herein comprise a purification tag that is removed during self-splicing, which can be used for negative selection of the circRNAs. Specifically, a sample containing the circRNAs, such as the product of splicing reaction starting from the tagged linear precursors, can be mixed with a probe that is immobilized on a solid surface, wherein the tag-containing precursors or any other tag-containing impurities can bind to the probe and be removed from the solution, resulting in a circRNA solution substantially free from the precursor, intron and any other tag-containing impurities. In some embodiments, the purification tag is a 15-40 nt polynucleotides. A purification matrix includes, for example, magnetic resin or beads, silicone resin, Sephadex resin, affinity resin, nanoparticles, and nanomaterial surface or coated surfaces.As such, in some embodiments, the circRNAs prepared by methods disclosed herein can have a functional half-life of at least 5 hours, 10 hours, 15 hours, 20 hours. 30 hours, 40 hours, 50 hours, 60 hours, 70 hours or 80 hours. In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have a functional half-life of 5-80, 10-70, 15-60, and / or 20-50 hours. In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have a functional half-life greater than (e.g., at least 1.5-fold greater than, at least 2-fold greater than) that of an equivalent linear RNAs encoding the same protein. In some embodiments, functional half-life can be assessed through the detection of functional protein synthesis.In some embodiments, the circRNAs provided herein comprise one or more expression sequences and are configured for persistent expression in a cell of a subject in vivo. In some embodiments, the circRNAs is configured such that expression of the one or more expression sequences in the cell at a later time point is equal to or higher than an earlier time point. In such embodiments, the expression of the one or more expression sequences can be either maintained at a relatively stable level or can increase over time. The expression of the expression sequences can be relatively stable for an extended period of time. For instance, in some cases, the expression of the one or more expression sequences in the cell over a time period of at least 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 23 or more days does not decrease by 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, or 5%. In some cases, in some cases, the expression of the one or more expression sequences in the cell is maintained at a level that does not vary by more than 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, or 5%for at least 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 23 or more days.In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have a higher magnitude of expression than equivalent linear mRNA, e.g., a higher magnitude of expression 24 hours after administration of RNA to cells. In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have a higher magnitude of expression than mRNA comprising the same expression sequence, 5moU modifications, an optimized UTR, a cap, and / or a polyA tail. In some embodiments, the circRNAs provided herein provided herein have higher stability than an equivalent linear mRNA. In some embodiments, this can be shown by measuring receptor presence and density in vitro or in vivoi post electroporation, with time points measured over 1 week. In some embodiments, this can be shown by measuring RNA presence via qPCR or ISH.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein can be of any length or size. In some embodiments the circRNA is between 300 and 10000, 400 and 9000, 500 and 8000, 600 and 7000, 700 and 6000, 800 and 5000, 900 and 5000, 1000 and 5000, 1100 and 5000, 1200 and 5000, 1300 and 5000, 1400 and 5000, and / or 1500 and 5000 nucleotides in length.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein can be at least 300 nt, 400 nt, 500 nt, 600 nt, 700 nt, 800 nt, 900 nt, 1000 nt, 1100 nt, 1200 nt, 1300 nt, 1400 nt, 1500 nt, 2000 nt, 2500 nt, 3000 nt, 3500 nt, 4000 nt, 4500 nt, or 5000 nt in length. In some embodiments, the circRNA is no more than 3000 nt, 3500 nt, 4000 nt, 4500 nt, 5000 nt, 6000 nt, 7000 nt, 8000 nt, 9000 nt, or 10000 nt in length.In some embodiments, circRNAs disclosed herein can be about 300 nt, 400 nt, 500 nt, 600 nt, 700 nt, 800 nt, 900 nt, 1000 nt, 1100 nt, 1200 nt, 1300 nt, 1400 nt, 1500 nt, 2000 nt, 2500 nt, 3000 nt, 3500 nt, 4000 nt, 4500 nt, 5000 nt, 6000 nt, 7000 nt, 8000 nt, 9000 nt, or 10000 nt in length.In some embodiments, circRNAs disclosed herein can be at least 500 nucleotides in length, at least 1000 nucleotides in length, or at least 1500 nucleotides in length.The practice of the invention employs, unless otherwise indicated, conventional techniques in molecular biology, microbiology, genetic analysis, recombinant DNA, organic chemistry, biochemistry, PCR, oligonucleotide synthesis and modification, nucleic acid hybridization, and related fields within the skill of the art. These techniques are described in the references cited herein and are fully explained in the literature. See, e.g., Maniatis et al. (1982) MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (1989) , MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (2001) MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel et al., CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, John Wiley &Sons (1987 and annual updates) ; CURRENT PROTOCOLS IN IMMUNOLOGY, John Wiley &Sons (1987 and annual updates)  Gait (ed. ) (1984) OLIGONUCLEOTIDE SYNTHESIS: A PRACTICAL APPROACH, IRL Press; Eckstein (ed. ) (1991) OLIGONUCLEOTIDES AND ANALOGUES: A PRACTICAL APPROACH, IRL Press; Birren et al. (eds. ) (1999) GENOME ANALYSIS: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Borrebaeck (ed. ) (1995) ; each of which is incorporated herein by reference in its entirety.8.3 Pharmaceutical FormulationsProvided herein are immunologic compositions for prevention or treatment of diseases in humans and other mammals. In some embodiments, the compositions containing circRNAs as described herein can be administered to a subject (e.g., a mammalian subject, such as a human subject) . In some embodiments, the provided herein are pharmaceutical compositions that can be used as therapeutic or prophylactic agents.The term “pharmaceutical composition” as used herein refers to the combination of an active agent with a carrier, inert or active, making the composition especially suitable for diagnostic or therapeutic use in vivo or ex vivo. A “pharmaceutically acceptable carrier, ” after administered to or upon a subject, does not cause undesirable physiological effects. The carrier in the pharmaceutical composition must be “acceptable” also in the sense that it is compatible with the active ingredient and can be capable of stabilizing it. One or more solubilizing agents can be utilized as pharmaceutical carriers for delivery of an active agent. Examples of a pharmaceutically acceptable carrier include, but are not limited to, biocompatible vehicles, adjuvants, additives, and diluents to achieve a composition usable as a dosage form. Examples of other carriers include colloidal silicon oxide, magnesium stearate, cellulose, and sodium lauryl sulfate. Additional suitable pharmaceutical carriers and diluents, as well as pharmaceutical necessities for their use, are described in REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES. Compositions can be sterile, pyrogen-free or both sterile and pyrogen-free. General considerations in the formulation and / or manufacture of pharmaceutical agents, such as compositions, can be found, for example, in Remington: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY 21st ed., Lippincott Williams &Wilkins, 2005 (incorporated herein by reference in its entirety) .The immunogenic compositions provided herein can further include other prophylactic or therapeutic compounds. As a non-limiting example, a prophylactic or therapeutic compound can be an adjuvant or a booster.The circRNA compositions described herein can be formulated into a dosage form described herein, such as an intranasal, intratracheal, or injectable (e.g., intravenous, intraocular, intravitreal, intramuscular, intradermal, intracardiac, intraperitoneal, and subcutaneous) .Provided herein are pharmaceutical compositions including circRNA described herein in combination with one or more pharmaceutically acceptable excipients. In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein can further comprise other components including, but not limited to, adjuvants. In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein do not include an adjuvant (they are adjuvant free) .In some embodiments, circRNA compositions comprise at least one additional active substance, such as, for example, a therapeutically-active substance, a prophylactically-active substance, or a combination of both.Formulations of the compositions described herein can be prepared by any method known or hereafter developed in the art of pharmacology. In general, such preparatory methods include the step of bringing the active ingredient (e.g., circRNAs) into association with an excipient and / or one or more other accessory ingredients, and then, if necessary and / or desirable, dividing, shaping and / or packaging the product into a desired single-or multi-dose unit. Relative amounts of the active ingredient, the pharmaceutically acceptable excipient, and / or any additional ingredients in a pharmaceutical composition in accordance with the disclosure will vary, depending upon the identity, size, and / or condition of the subject treated and further depending upon the route by which the composition is to be administered. By way of example, the composition can comprise between 0.1%and 100%, e.g., between 0.5 and 50%, between 1-30%, between 5-80%, at least 80% (w / w) active ingredient.In some embodiments, a circRNA composition is formulated using one or more excipients to: (1) increase stability; (2) increase cell transfection; (3) permit the sustained or delayed release (e.g., from a depot formulation) ; (4) alter the biodistribution (e.g., target to specific tissues or cell types) ; (5) increase the translation of encoded protein in vivo; and / or (6) alter the release profile of encoded protein (e.g., HGF) in vivo. In addition to traditional excipients such as any and all solvents, dispersion media, diluents, or other liquid vehicles, dispersion or suspension aids, surface active agents, isotonic agents, thickening or emulsifying agents, preservatives, excipients can include, without limitation, lipidoids, liposomes, lipid nanoparticles, polymers, lipoplexes, core-shell nanoparticles, peptides, proteins, cells transfected with the RNA (e.g., for transplantation into a subject) , hyaluronidase, nanoparticle mimics and combinations thereof.A range of carrier systems have been described which encapsulate or complex RNA in order to facilitate RNA delivery and consequent expression of encoded antigens as compared to RNA which is not encapsulated or complexed. The present compositions can utilize any suitable carrier system. Particular carrier systems of note are further described below.In embodiments, the circRNAs used herein are complexed, encapsulated, partially encapsulated, or associated with one or more lipids (e.g., cationic lipids and / or neutral lipids) , thereby forming lipid-based carriers such as liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes, suitably lipid nanoparticles.In some embodiments, the circRNAs used herein are formulated in a LNP, either separately or together.In some embodiments, the circRNAs used herein are formulated separately (in any formulation or complexation agent defined herein) , suitably wherein circRNAs used herein are formulated in separate liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes.In some embodiments, the circRNAs used herein are co-formulated, i.e., formulated together.The term “lipid nanoparticle” , also referred to as “LNP” , is not restricted to any particular morphology, and include any morphology generated when a cationic lipid and optionally one or more further lipids are combined, e.g. in an aqueous environment and / or in the presence of a nucleic acid, e.g. an RNA. For example, a liposome, a lipid complex, a lipoplex and the like are within the scope of a lipid nanoparticle (LNP) .LNPs are non-virion liposome particles in which RNA can be encapsulated. The incorporation of a nucleic acid into LNPs is also referred to herein as “encapsulation” wherein the nucleic acid, e.g. the RNA is contained within the interior space of the liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes. LNP delivery systems and methods for their preparation are known in the art.In some embodiments, the circRNAs disclosed herein are complexed with one or more lipids thereby forming LNPs, liposomes, nanoliposomes, lipoplexes, suitably LNPs. In some embodiments, LNPs are suitable for intramuscular and / or intradermal administration.In embodiments, at least about 80%, 85%, 90%, 95%of lipid-based carriers, suitably the LNPs, have a spherical morphology, suitably comprising a solid core or partially solid core.LNPs typically comprise a cationic lipid and one or more excipients selected from neutral lipids, charged lipids, steroids and polymer conjugated lipids (e.g. PEGylated lipid) . The circRNAs can be encapsulated in the lipid portion of the LNP or an aqueous space enveloped by some or the entire lipid portion of the LNP. The circRNAs or a portion thereof can also be associated and complexed with the LNP. An LNP can comprise any lipid capable of forming a particle to which the nucleic acids are attached, or in which the one or more nucleic acids are encapsulated. In some embodiments, the LNP comprising circRNAs comprises one or more cationic lipids, and one or more stabilizing lipids. Stabilizing lipids include neutral lipids and PEGylated lipids.In some embodiments, the LNP comprises a PEG-modified lipid, a non-cationic lipid, a sterol, and a cationic lipid.LNP can, for example, be formed of a mixture of (i) a PEG-modified lipid (ii) a noncationic lipid (iii) a sterol (iv) an ionisable cationic lipid. Alternatively, LNP can for example be formed of a mixture of (i) a PEG-modified lipid (ii) a non-cationic lipid (iii) a sterol (iv) a non-ionisable cationic lipid.In some embodiments, the non-cationic lipid is a neutral lipid. In some embodiments, the cationic lipid is ionizable.In vivo characteristics and behavior of LNPs can be modified by addition of a hydrophilic polymer coating, e.g. polyethylene glycol (PEG) , to the LNP surface to confer steric stabilization. Furthermore, LNPs (or liposomes, nanoliposomes, lipoplexes) can be used for specific targeting by attaching ligands (e.g. antibodies, peptides, and carbohydrates) to its surface or to the terminal end of the attached PEG chains (e.g. via PEGylated lipids or PEGylated cholesterol) .In some embodiments, the LNPs comprise a polymer conjugated lipid. The term “polymer conjugated lipid” refers to a molecule comprising both a lipid portion and a polymer portion. An example of a polymer conjugated lipid is a PEGylated lipid. The term “PEGylated lipid” or “PEG-modified lipid” refers to a molecule comprising both a lipid portion and a polyethylene glycol portion. PEGylated lipids are known in the art and include 1-(monomethoxy-polyethyleneglycol) -2, 3-dimyristoylglycerol (PEG-s-DMG) and the like. The terms “PEGylated lipid” and “PEG-modified lipid” are used interchangeably herein.In certain embodiments, the LNP comprises a stabilizing-lipid which is a polyethylene glycol-lipid (PEGylated lipid) . Suitable polyethylene glycol-lipids include PEG-modified phosphatidylethanolamine, PEG-modified phosphatidic acid, PEG-modified ceramides (e.g. PEG-CerC14 or PEG-CerC20) , PEG-modified dialkylamines, PEG-modified diacylglycerols, PEG-modified dialkylglycerols. Representative polyethylene glycol-lipids include PEG-c-DOMG, PEG-c-DMA, and PEG-s-DMG. In one embodiment, the polyethylene glycol-lipid is N-[(methoxy poly (ethylene glycol) 2000) carbamyl] -1 , 2-dimyristyloxlpropyl-3-amine (PEG-c-DMA) . In some embodiments, the polyethylene glycol-lipid is PEG-2000-DMG. In one embodiment, the polyethylene glycol-lipid is PEG-c-DOMG) . In other embodiments, the LNPs comprise a PEGylated diacylglycerol (PEG-DAG) such as 1- (monomethoxy-polyethyleneglycol) -2, 3-dimyristoylglycerol (PEG-DMG) , a PEGylated phosphatidylethanoloamine (PEG-PE) , a PEG succinate diacylglycerol (PEG-S-DAG) such as 4-O-(2’ , 3’ -di (tetradecanoyloxy) propyl-1-O- (w-methoxy (polyethoxy) ethyl) butanedioate (PEG-5-DMG) , a PEGylated ceramide (PEG-cer) , or a PEG dialkoxypropylcarbamate such as w-methoxy (polyethoxy) ethyl-N- (2, 3di (tetradecanoxy) propyl) carbamate or 2, 3-di(tetradecanoxy) propyl-N- (w-methoxy (polyethoxy) ethyl) carbamate.In some embodiments, the PEG-modified lipid comprises PEG-DMG or PEG-cDMA. In embodiments, the PEGylated lipid is suitably derived from formula (IV) of published PCT patent application W02018078053A1. Accordingly, PEGylated lipids derived from formula (IV) of published PCT patent application W02018078053A1, and the respective disclosure relating thereto, are herewith incorporated by reference.Further examples of PEG-lipids suitable in that context are provided in WO2024068545A1, US20150376115A1 and WO2015199952, each of which is incorporated by reference in its entirety.In some embodiments, LNPs include less than about 3, 2, or 1 mole percent of PEG or PEG-modified lipid, based on the total moles of lipid in the LNP.In embodiments, the LNP comprises one or more additional lipids, which stabilize the formation of particles during their formulation or during the manufacturing process (e.g. neutral lipid and / or one or more steroid or steroid analogue) .In embodiments, the circRNA is complexed with one or more lipids thereby forming lipid nanoparticles, wherein the LNP comprises one or more neutral lipid and / or one or more steroid or steroid analogue. Suitable stabilizing lipids include neutral lipids and anionic lipids. The term “neutral lipid” refers to any one of a number of lipid species that exist in either an uncharged or neutral zwitterionic form at physiological pH. Representative neutral lipids include diacylphosphatidylcholines, diacylphosphatidylethanolamines, ceramides, sphingomyelins, dihydro sphingomyelins, cephalins, and cerebrosides.In some embodiments, the non-cationic lipid is a neutral lipid, such as 1, 2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC) , 1 , 2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) , 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (POPC) , 1 , 2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (DOPE) or sphingomyelin (SM) , preferably the neutral lipid is DSPC.In embodiments, the LNP (or liposome, nanoliposome, lipoplex) comprises one or more neutral lipids, wherein the neutral lipid is selected from the group comprising distearoylphosphatidylcholine (DSPC) , dioleoylphosphatidylcholine (DOPC) , dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) , dioleoylphosphatidylglycerol (DOPG) , dipalmitoylphosphatidylglycerol (DPPG) , dioleoyl-phosphatidylethanolamine (DOPE) , palmitoyloleoylphosphatidylcholine (POPC) , palmitoyloleoyl-phosphatidylethanolamine (POPE) and dioleoyl-phosphatidylethanolamine 4- (N-maleimidomethyl) -cyclohexane-1 carboxylate (DOPE-mal) , dipalmitoyl phosphatidyl ethanolamine (DPPE) , dimyristoylphosphoethanolamine (DM PE) , distearoyl-phosphatidylethanolamine (DSPE) , 16-O-monomethyl PE, 16-O-dimethyl PE, 18-1 -trans PE, 1-stearioyl-2-oleoylphosphatidyethanol amine (SOPE) , and 1 , 2-dielaidoyl-sn-glycero-3-phophoethanolamine (transDOPE) , or mixtures thereof.The cationic lipid of an LNP can be ionizable, i.e., it becomes protonated as the pH is lowered below the pK of the ionizable group of the lipid but is progressively more neutral at higher pH values. At pH values below the pK, the lipid is then able to associate with negatively charged nucleic acids. In certain embodiments, the cationic lipid comprises a zwitterionic lipid that assumes a positive charge on pH decrease.Such cationic lipids (for liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes) include, but are not limited to, DSDMA, N, N-dioleyl-N, N-dimethylammonium chloride (DODAC) , N, N-distearyl-N, N-dimethylammonium bromide (DDAB) , 1 , 2-dioleoyltrimethyl ammonium propane chloride (DOTAP) (also known as N- (2, 3-dioleoyloxy) propyl) -N, N, N-trimethylammonium chloride and 1 , 2-Dioleyloxy-3-trimethylaminopropane chloride salt) , N- (1- (2, 3-dioleyloxy) propyl) -N, N, N-trimethylammonium chloride (DOTMA) , N, N-dimethyl-2, 3-dioleyloxy) propylamine (DODMA) , ckk-E12, ckk, 1 , 2-DiLinoleyloxy-N, N-dimethylaminopropane (DLinDMA) , 1 , 2-Dilinolenyloxy-N, N-dimethylaminopropane (DLenDMA) , 1 , 2-di-y-linolenyloxy-N, N-dimethylaminopropane (y-DLenDMA) , 98N12-5, 1 , 2-Dilinoleylcarbamoyloxy-3-dimethylaminopropane (DLin-C-DAP) , 1 , 2-Dilinoleyoxy-3-(dimethylamino) acetoxypropane (DLin-DAC) , 1, 2-Dilinoleyoxy-3-morpholinopropane (DLin-MA), 1 , 2-Dilinoleoyl-3-dimethylaminopropane (DLinDAP) , 1 , 2-Dilinoleylthio-3-dimethylaminopropane (DLin-S-DMA) , 1-Linoleoyl-2-linoleyloxy-3-dimethylaminopropane (DLin-2-DMAP) , 1 , 2-Dilinoleyloxy-3-trimethylaminopropane chloride salt (DLin-TMA. CI) , ICE (Imidazol-based) , HGT5000, HGT5001 , DMDMA, CLinDMA, CpLinDMA, DMOBA, DOcarbDAP, DLincarbDAP, DLinCDAP, KLin-K-DMA, DLin-K-XTC2-DMA, XTC (2, 2-Dilinoleyl-4-dimethylaminoethyl- [1 , 3] -dioxolane) HGT4003, 1 , 2-Dilinoleoyl-3-trimethylaminopropane chloride salt (DLin-TAP. CI) , 1 , 2-Dilinoleyloxy-3- (N-methylpiperazino) propane (DLin-MPZ) , or 3- (N, N-Dilinoleylamino) -1 , 2-propanediol (DLinAP) , 3-(N, N-Dioleylamino) -1 , 2-propanedio (DOAP) , 1 , 2-Dilinoleyloxo-3- (2-N, N-dimethylamino) ethoxypropane (DLin-EG-DM A) , 2, 2-Dilinoleyl-4-dimethylaminomethyl- [1 , 3] -dioxolane (DLin-K-DMA) or analogs thereof, (3aR, 5s, 6aS) -N, N-dimethyl-2, 2-di ( (9Z, 12Z) -octadeca-9, 12-dienyl) tetrahydro-3aH-cyclopenta [d] [1 , 3] dioxol-5-amine, (6Z, 9Z, 28Z, 31Z) -heptatriaconta-6, 9, 28, 31-tetraen-19-yl-4- (dimethylamino) butanoate (MC3) , ALNY-100 ((3aR, 5s, 6aS) -N, N-dimethyl-2, 2-di ( (9Z, 12Z) -octadeca-9, 12-dienyl) tetrahydro-3aH-cyclopenta [d] [1 , 3] dioxol-5-amine) ) , 1 , 1’ - (2- (4- (2- ( (2- (bis (2-hydroxydodecyl) amino) ethyl) (2-hydroxydodecyl) amino) ethyl) piperazin-1-yl) ethylazanediyl) didodecan-2-ol (C12-200) , 2, 2-dili noleyl-4- (2-dimethylaminoethyl) - [1 , 3] -dioxolane (DLin-K-C2-DMA) , 2, 2-dilinoleyl-4-dimethylaminomethyl- [1 , 3] -dioxolane (DLin-K-DMA) , NC98-5 (4, 7, 13-tris (3-oxo-3-(undecylamino) propyl) -N , N 16-diundecyl-4, 7, 10, 13-tetraazahexadecane-l, 16-diamide) , (6Z, 9Z, 28Z, 31Z) -heptatriaconta-6, 9, 28, 31-tetraen-19-yl 4- (dimethylamino) butanoate (DLin-M-C3-DMA) , 3- ( (6Z, 9Z, 28Z, 31Z) -heptatriaconta-6, 9, 28, 31-tetraen-19-yloxy) -N, N-dimethylpropan-1 -amine (MC3 Ether) , 4- ( (6Z, 9Z, 28Z, 31Z) -heptatriaconta-6, 9, 28, 31-tetraen-19-yloxy) -N, N-dimethylbutan-1 -amine (MC4 Ether) ,  (commercially available cationic liposomes comprising DOTMA and 1 , 2-dioleoyl-sn-3phosphoethanolamine (DOPE) , from GIBCO / BRL, Grand Island, N. Y. ) ;  (commercially available cationic liposomes comprising N- (1- (2, 3dioleyloxy) propyl) -N- (2- (sperminecarboxamido) ethyl) -N, N-dimethylammonium trifluoroacetate (DOSPA) and (DOPE) , from GIBCO / BRL) ; and (commercially available cationic lipids comprising dioctadecylamidoglycyl carboxyspermine (DOGS) in ethanol from Promega Corp., Madison, Wis. ) or any combination of any of the foregoing. Further suitable cationic lipids for use in the compositions and methods of the invention include those described in international patent publications WO2010053572 (and particularly, Cl 2-200 described at paragraph

[0225] ) and WO2012170930, both of which are incorporated herein by reference, HGT4003, HGT5000, HGTS001 , HGT5001 , HGT5002 (see US20150140070A1) .In embodiments, the cationic lipid of the liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes can be an amino lipid.Representative amino lipids include, but are not limited to, 1 , 2-dilinoleyoxy-3-(dimethylamino) acetoxypropane (DLin-DAC) , 1 , 2-dilinoleyoxy-3morpholinopropane (DLin-MA), 1 , 2-dilinoleoyl-3-dimethylaminopropane (DLinDAP) , 1 , 2-dilinoleylthio-3-dimethylaminopropane (DLin-S-DMA) , 1-linoleoyl-2-linoleyloxy-3dimethylaminopropane (DLin-2-DMAP) , 1 , 2-dilinoleyloxy-3-trimethylaminopropane chloride salt (DLin-TMA. CI) , 1 ,2-dilinoleoyl-3-trimethylaminopropane chloride salt (DLin-TAP. CI) , 1 , 2-dilinoleyloxy-3- (N-methylpiperazino) propane (DLin-MPZ) , 3- (N, Ndilinoleylamino) -1 , 2-propanediol (DLinAP) , 3-(N,N-dioleylamino) -1 , 2-propanediol (DOAP) , 1 , 2-dilinoleyloxo-3- (2-N, N-dimethylamino) ethoxypropane (DLin-EG-DMA) , and 2, 2-dilinoleyl-4-dimethylaminomethyl-[1 , 3] -dioxolane (DLin-K-DMA) , 2, 2-dilinoleyl-4- (2-dimethylaminoethyl) - [1 , 3] -dioxolane (DLin-KC2-DMA) ; dilinoleyl-methyl-4-dimethylaminobutyrate (DLin-MC3-DMA) ; MC3 (US20100324120) .In embodiments, the cationic lipid of the liposomes, LNPs, lipoplexes, and / or nanoliposomes can be an aminoalcohol lipidoid. Aminoalcohol lipidoids may be prepared by the methods described in U.S. Patent No. 8, 450, 298, herein incorporated by reference in its entirety. Suitable (ionizable) lipids can also be the compounds as disclosed in Tables 1, 2 and 3 and as defined in WO2017075531 A1, hereby incorporated by reference.Other suitable (cationic or ionizable) lipids are disclosed in W02009086558, W02009127060, WO2010048536, WO2010054406, WO2010088537, WO2010129709, WO2011153493, WO 2013063468, US20110256175, US20120128760, US20120027803, US8158601 , WO2016118724, WO2016118725, W02017070613, W02017070620, WO2017099823, W02012040184, WO2011153120, WO2011149733, WO2011090965, WO2011043913, WO2011022460, WO2012061259, WO2012054365, WO2012044638, W02010080724, W0201021865, W02008103276, WO2013086373, WO2013086354, US Patent Nos. 7, 893, 302, 7, 404, 969, 8, 283, 333, 8, 466, 122 and 8, 569, 256 and US Patent Publication No. US20100036115, US20120202871 , US20130064894, US20130129785, US20130150625, US20130178541 , US20130225836, US20140039032 and WO2017112865. In that context, the disclosures of W02009086558, W02009127060, W02010048536, W02010054406, W02010088537, W02010129709, WO2011153493, WO 2013063468, US20110256175, US20120128760, US20120027803, US8158601 , WO2016118724, WO2016118725, W02017070613, W02017070620, WO2017099823, W02012040184, WO2011153120, WO2011149733, WO2011090965, WO2011043913, WO2011022460, WO2012061259, WO2012054365, WO2012044638, W02010080724, W0201021865, W02008103276, WO2013086373, WO2013086354, US Patent Nos. 7, 893, 302, 7, 404, 969, 8, 283, 333, 8, 466, 122 and 8, 569, 256 and US Patent Publication No. US20100036115, US20120202871 , US20130064894, US20130129785, US20130150625, US20130178541 , US20130225836 and US20140039032 and WO2017112865 specifically relating to (cationic) lipids suitable for LNPs (or liposomes, nanoliposomes, lipoplexes) are incorporated herewith by reference.In embodiments, amino or cationic lipids as defined herein have at least one protonatable or deprotonatable group, such that the lipid is positively charged at a pH at or below physiological pH (e.g. pH 7.4) , and neutral at a second pH, suitably at or above physiological pH. It will, of course, be understood that the addition or removal of protons as a function of pH is an equilibrium process, and that the reference to a charged or a neutral lipid refers to the nature of the predominant species and does not require that all of lipids have to be present in the charged or neutral form. Lipids having more than one protonatable or deprotonatable group, or which are zwitterionic, are not excluded and may likewise suitable in the context of the present invention. In some embodiments, the protonatable lipids have a pKa of the protonatable group in the range of about 4 to about 11, e.g., a pKa of about 5 to about 7. LNPs (or liposomes, nanoliposomes, lipoplexes) can comprise two or more (different) cationic lipids as defined herein. Cationic lipids may be selected to contribute to different advantageous properties. For example, cationic lipids that differ in properties such as amine pKa, chemical stability, half-life in circulation, half-life in tissue, net accumulation in tissue, or toxicity can be used in the LNP (or liposomes, nanoliposomes, lipoplexes) . In particular, the cationic lipids can be chosen so that the properties of the mixed-LNP are more desirable than the properties of a single-LNP of individual lipids.In some embodiments, the LNP compositions can comprise an ionizable cationic lipid, a neutral lipid, a cholesterol, and a PEG. In some embodiments, the ionizable cationic lipid can be MC3, SM-102, ALC-0315, or E-1-0635. In some embodiments, the neutral lipid can be DSPC or DOPE. In some embodiments, the PEG can be DMG-PEG2000 or ALC-0159. The different components can be mixed at different ratios. In some embodiments, the ionizable cationic lipid, neutral lipid, cholesterol, and PEG are mixed at molar ratios of about 50: about 10: about 40: about 2. In some embodiments, the ionizable cationic lipid, neutral lipid, cholesterol, and PEG are mixed at molar ratios of 50±10: 10±2: 40±5: 2±1. In some embodiments, the ionizable cationic lipid, neutral lipid, cholesterol, and PEG are mixed at molar ratios of 50: 10: 38.5: 1.5. In some embodiments, the ionizable cationic lipid, neutral lipid, cholesterol, and PEG are mixed at molar ratios of 46.3: 9.4: 42.7: 1.6. In some embodiments, the ionizable cationic lipid, neutral lipid, cholesterol, and PEG are mixed at molar ratios of 46.3: 12: 39.2: 2.5.In some embodiments, the following LNP compositions with specific components and ratios are used for preparation of the immunogenic compositions containing circRNAs provided herein. The ratios are molar ratios.WO2017 / 070620 provides general information on LNP compositions and is incorporated herein by reference. Other useful LNPs are described in the following references: WO2012 / 006376; WO2012 / 030901; WO2012 / 031046; W02012 / 031043; WO2012 / 006378; WO2011 / 076807; WO2013 / 033563; WO2013 / 006825; WO2014 / 136086; WO2015 / 095340; WO2015 / 095346; WO2016 / 037053, which are also incorporated herein by reference.Some embodiments relate to a method for preparing a formulation, comprising combining the circRNA in accordance with this disclosure with a lipid-based complex (such as liposomes, lipoplexes, and lipid nanoparticles) , phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. Some embodiments relate to a method for preparing a formulation, comprising combining the circRNA with citrate saline buffer, wherein the formulation is effective for treating a subject suffering from a disease responsive to HGF therapy; modulating a physiological process in mammalian cell, tissue, or subject; expressing HGF in a mammalian cell or tissue; and / or producing HGF in a subject.In some embodiments, a method for preparing a formulation comprises combining the circRNA in accordance with this disclosure with citrate saline buffer, wherein the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 0, 1 and 10 μg / μL. in some embodiments, the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 1 and 10 μg / μL. In some embodiments, the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 10 and 50 μg / μL.In some embodiments, a method for preparing a formulation comprises combining the circRNA with citrate saline buffer in accordance with this disclosure, wherein the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium,In some embodiments, a method for preparing a formulation comprises combining the circRNA with citrate saline buffer in accordance with this disclosure, wherein the formulation comprises a citrate saline buffer and further comprises a pharmaceutically acceptable excipient. In some embodiments, the pharmaceutically acceptable excipient is chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof. In some embodiments, the solvent is an aqueous solvent. Formulations can be administered to a subject via a number of routes in accordance with this disclosure. Special formulations suitable for intradermal, intracardiac, subcutaneous, and intramuscular injections are known in the art. For example, in order to prolong the effect of an active ingredient, it is often desirable to slow the absorption of the active ingredient from intramuscular injection. Delayed absorption of an intramuscularly administered drug form is accomplished by dissolving or suspending the drug (for example, a circRNA) in an oil vehicle. Injectable depot forms are made by forming microencapsule matrices of the drug (for example, a circRNA) in biodegradable polymers such as polylactide-polyglycolide. Depending upon the ratio of drug to polymer and the nature of the particular polymer employed, the rate of drug release can be controlled. Examples of other biodegradable polymers include poly (orthoesters) and poly (anhydrides) . For intradermal and subcutaneous injections, the formulations are preferably formulated so that they do not induce an immune response when delivered to the intradermal compartment. Additives may be used in the formulations for intradermal injections include for example, wetting agents, emulsifying agents, or pH buffering agents. The formulations for intradermal injections may also contain on or more other excipients such as saccharides and polyols. For intracardiac injections, the formulations are preferably formulated so that they do not cause additional damages to the heart muscle and coronary arteries after the use of an injection needle. Suitable formulations for intracardiac injection are provided herein.8.4 AdministrationProvided herein are immunizing compositions, methods, kits and reagents for prevention and / or treatment of diseases in humans and other mammals. Immunizing compositions can be used as therapeutic or prophylactic agents. In some embodiments, immunizing compositions are used to provide prophylactic protection from diseases. In some embodiments, immunizing compositions are used to treat a disease. In some embodiments, immunizing compositions are used in the priming of immune effector cells, for example, to activate peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) ex vivo, which are then infused (re-infused) into a subject.Thus, an “effective amount” or “therapeutically effective amount” of an immunogenic composition is based, at least in part, on the target tissue, target cell type, means of administration, physical characteristics of the circRNA (e.g., length, nucleotide composition, and / or extent of modified nucleosides) , other components of the composition, and other determinants, such as age, body weight, height, sex and general health of the subject.The effective amount of the circRNA, as provided herein, can be as low as 50 pg (total RNA) , administered for example as a single dose or as two 25 pg doses. A “dose” as used herein, represents the sum total of circRNA in the composition. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 50 pg-300 pg, 100 pg -300 pg, 150 pg -300 pg, 200 pg -300 pg, 250 pg -300 pg, 150 pg -200 pg, 150 pg -250 pg, 150 pg -300 pg, 200 pg -250 pg, or 250 pg -300 pg. For example, the effective amount may be a total dose of 50 pg, 55 pg, 60 pg, 65 pg, 70 pg, 75 pg, 80 pg, 85 pg, 90 pg, 95 pg, 100 pg, 110 pg, 120 pg, 130 pg, 140 pg, 150 pg, 160 pg, 170 pg, 180 pg, 190 pg, 200 pg, 210 pg, 220 pg, 230 pg, 240 pg, 250 pg, 260 pg, 270 pg, 280 pg, 290 pg, or 300 pg.In some embodiments, the effective amount is a total dose of 66 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 67 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 68 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 132 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 133 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 134 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 266 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 267 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 268 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 100 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 200 pg. In some embodiments, the effective amount is a total dose of 300 pg.8.5 Methods of treatmentSubjects with insufficient expression of HGF can suffer from many vascular diseases including, without limitation, heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, and peripheral arterial disease. Provided herein are methods to treat subjects suffering from diseases responsive to HGF therapy by direct administration of a circRNA described herein encoding HGF polypeptides. In some embodiments, circRNA disclosed herein is administered to the subject in a citrate saline buffer without lipids and calcium.In some embodiments, a circRNA described herein can be administered to a subject, wherein the circRNA is translated to produce a therapeutic protein of a HGF polypeptide. Provided are methods for treatment of disease or conditions in humans and other mammals.In some embodiments, compositions and particular formulations comprising a circRNA encoding HGF polypeptides can be used for treatment of a disease such as heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, and peripheral arterial disease.In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat heart failure with reduced or preserved ejection fraction. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat post-MI cardiac dysfunction. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat ischemic heart disease. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat a vascular injury from trauma or surgery. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat a skin ulcer including a diabetic ulcer. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat diabetic foot. In some embodiments, the formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used in wound healing, for example, in healing lacerations. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to critical limb ischemia. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat lower limb ischemia. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat pulmonary hypertension. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat peripheral arterial disease. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat kidney disease. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat a disease involving skin grafting and tissue grafting. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat stable severe angina pectoris. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat refractory angina. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat congenital and acquired maxillofacial defects. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat alveolar bone atrophy. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat ligament or tendon lesions. In some embodiments, formulations comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein can be used to treat ocular disease.Other aspects of the disclosure relate to administration of the formulations comprising circRNA to subjects in need thereof. Administration of the formulation can be intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.However, the present disclosure also encompasses the delivery of naked circRNA molecules or circRNA complexes, and / or pharmaceutical, prophylactic, or diagnostic formulations thereof, by any appropriate route taking into consideration likely advances in the sciences of drug delivery.As non-limiting examples, in some embodiments, formulations in accordance with the present disclosure are administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracardiac or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intramuscularly. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intradermally. In some embodiments, the formulation is administered to the subject subcutaneously. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intracranially. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intrathecally. In some embodiments, the formulation is administered to the subject vitreously. In some embodiments, the formulation is administered to the subject subretinally. In some embodiments, the formulation is administered to the subject muscularly. In some embodiments, the formulation is administered to the subject cardiacly.In some embodiments, the formulation is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.In some embodiments, the composition or formulation is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition or formulation is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition or formulation is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations. In some embodiments, the composition or formulation is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.In some embodiments, the formulation is administered to the subject intracardially. In some embodiments, the formulation is administered to the subject through a portal vein catheter. In some embodiments, the formulation is administered to the subject through a coronary sinus catheter. In some embodiments, the formulation is administered to the subject by direct administration into the area to be treated. For example, the formulation is administered to the subject by direct injection to the damaged area during open heart surgery. In some embodiments, the formulation is administered to the subject pericardially. For example, in patients undergoing coronary artery by-pass grafting (CABG) , the formulation is administered to the patient from the external side of the heart.The formulation can be administered to a subject using any amount of administration effective for treating a disease, disorder, and / or condition. The exact amount required will vary from subject to subject, depending on the species, age, and general condition of the subject, the severity of the disease, the particular formulation, its mode of administration, its mode of activity, and the like. It will be understood, however, that the total daily usage of the formulations may be decided by the attending physician within the scope of sound medical judgment. The specific pharmaceutically effective, dose level for any particular patient will depend upon a variety of factors including the disease being treated and the severity of the disease; the activity of the specific compound employed: the specific formulation employed; the age, body weight, general health, sex and diet of the patient; the time of administration, route of administration, and rale of excretion of the specific compound employed; the duration of the treatment: drugs (for example, a circRNA) used in combination or coincidental with the specific compound employed; and like factors well known in the medical arts,In some embodiments, formulations in accordance with the present disclosure are administered to a subject, wherein the formulations comprise a lipid-based complex (such as liposomes, lipoplexes, and lipid nanoparticles) . In other embodiments, naked circRNA is administered in phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In other embodiments, naked circRNA is administered in the absence of divalent cations, including calcium. In preferred embodiments, formulations for intracardiac or intradermal administration comprising the circRNA are formulated in citrate saline buffer containing no calcium or magnesium.In some embodiments, formulations in accordance with the present disclosure are administered to a subject, wherein the formulation comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein formulated in citrate saline buffer is less toxic to the subject than a lipid-based formulation. The assessments of toxicity due to RNA delivery in formulations in accordance with the present disclosure can be evaluated by methods well-known in the art. For example, cationic lipids are typically included in lipid formulations of RNA therapeutics to improve RNA encapsulation and stability. However, some cationic lipids may disrupt the integrity of a membrane structure, cause cell lysis and necrosis, and / or alter the expression of multiple genes in undesirable manner (Xue FLY, , Curr Pharm Des, , (2015) 21 (22) : 3140-7; its entirety is incorporated herein by reference) , Accordingly, examples of toxicity can be assessed by measuring the degree of cell lysis and necrosis, and / or alteration to the expression of multiple genes due to RNA delivery in formulations in accordance with the present disclosure. At preclinical and clinical levels, systemic dose-dependent toxicities of some lipoplexes have been well-documented. Capture of some lipoplexes by Kupffer cells in the liver can trigger inflammatory responses, which may inflict damages to liver and result in elevated levels in major liver function indicators. Leukopenia and thrombocytopenia may also occur (Zhang J., Adv Drug Deliv Rev., (2005) 57 (5) : 689-698; its entirety is incorporated herein by reference) . Accordingly, examples of toxicity can be assessed by measuring the inflammatory responses due to RNA delivery in formulations in accordance with the present disclosure. In addition, examples of toxicity can be assessed by measuring infusion related reactions such as dyspnea, hypoxia, rigors, back pain, hypotension, and liver injury,A subject suffering from a vascular disease is responsive to the treatment if one or more symptoms or clinical markers are reduced. Alternatively, a treatment is working if the progression of a disease is reduced or halted. For example, heart failure (HF) occurs when the heart is weakened and is not filled with, or cannot pump, enough blood to meet the body's needs for blood and oxygen. Likewise, a patient with ischemic heart disease (IHD) has heart problems caused by narrowed heart arteries. When arteries are narrowed, less blood and oxygen reaches the heart muscle. As a consequence of microvascular dysfunction, loss of functional vessels, and / or loss of cardiac tissue, a patient usually develops cardiac dysfunction post-MI. Furthermore, vascular structures are most commonly injured by penetrating trauma or surgery. Diabetes impairs numerous components of wound healing, and a patient with diabetic wound healing generally has altered blood flow due to vascular dysfunction. Accordingly, a patient with skin ulcer including diabetic ulcers usually has decreased or delayed would healing, Critical limb ischemia (CL1) is a severe obstruction of the arteries which markedly reduces blood flow to the extremities (hands, feet and legs) and has progressed to the point of severe pain and even skin ulcers, sores, or gangrene. Pulmonary hypertension (PH or PHTN) is an increase of blood pressure in the pulmonary artery, pulmonary vein, or pulmonary capillaries, together known as the lung vasculature, leading to shortness of breath, dizziness, fainting, leg swelling and other symptoms. Peripheral artery disease (PAD) is a narrowing of the peripheral arteries to the legs, stomach, arms, and head -most commonly in the arteries of the legs. These conditions are routinely clinically diagnosed based on various physical examinations with confirmation by echocardiography, blood tests, magnetic resonance imaging (MRI) electrocardiography, and other suitable tests, For example, the diagnosis of significant vascular injury rests upon close physical examination and imaging tests. Accordingly, a treatment for any one of these conditions is working if the patient shows less severe symptoms by physical examinations and / or improvements in testing results from echocardiography, blood tests, MRI, electrocardiography, or any other suitable and / or routine tests. In some embodiments, the subject suffering from a vascular disease has suffered a myocardial infarction. Additionally, molecular measurements for vascular functions can be used to assess the improvements of the general pathophysiology. Examples of these measurements include enhanced nitric oxide (NO) availability, increased angiogenesis / arteriogenesis, and recruitment of stem cells to cardiac tissue. A patient suffering from a vascular disease is therefore responsive to the treatment if the patient shows improved molecular functions in these measurements.8.6 Methods of modulating physiological processesAnother aspect of the present disclosure relates to the administration of a composition or a formulation comprising a HGF-encoding circRNA disclosed herein for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject. In some embodiments, a method for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. As non-limiting examples, the modulation of a physiological process can include inducing angiogenesis, stimulating vascular cell proliferation, inducing the proliferation and migration of vascular endothelial cells, increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells, upregulating endothelialization, inducing cardiac regeneration, increasing revascularization of tissue grafts for wound healing, improving vascular function, increasing tissue perfusion and new vessel formation, reducing scar tissue, promoting stent biofunctionality, inducing lymphangiogenesis, inducing bone repair, or improving cardiac function, or any combination thereof.In some embodiments, a method for inducing angiogenesis in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA of present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In some embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on inducing angiogenesis can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Lopez J J. et aL, Cardiovasc Res, (1998) 40, 272-281 ; Gaiiano R. D. et ah, Am J Pathol, (2004) 164, 1935-1947; Lin Y. D. et al., Sci Transl Med, , (2012. ) 4 (146) : 146ral 09;Zangi L, et al., Nat Biotcchnol., (2013) 10, 898-907; all of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for inducing lymphangiogenesis in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA of present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In some embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on inducing lymphangiogenesis can be evaluated by methods well-known in the art.In some embodiments, a method for stimulating vascular cell proliferation in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on stimulating vascular cell proliferation can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Galiano R. D. et al., Am J Pathol, (2004) 164, 1935-1947; its entirety is incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for inducing the proliferation and migration of vascular endothelial cells in a mammalian tissue, or subject comprises contacting the mammalian tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on inducing the proliferation and migration of vascular endothelial cells can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Galiano R. D. et al., Am J Pathol, (2004) 164, 1935-1947; its entirety is incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure, in some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Zangi L. et al., Nat Biotechnol., (2013) 10, 898-907; its entirety is incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for upregulating endothelializaiion in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ′I′HΑΜ buffer, or citrate saline buffer, in preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially tree of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on upregulating endotheliaiization can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Galiano R. D. et a! ., Am J Pathol, (2004) 164, 1935-1947; its entirety is incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for inducing cardiac regeneration in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ′I′HΑΜ buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium, in some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on inducing cardiac regeneration can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Zangi L. et al., Nat Biotechnol., (2013) 10, 898-907; Lin Y. D. et al., Sci Transl Med., (2012) 4 (146) : 146ral09; both of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for increasing revascularization of tissue grafts for wound healing in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer, in some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on increasing revascularization of tissue grafts for wound healing can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Tohyama H. et al., Chang Gung Med J, (2009) 32, 133-139; Chen J. et al, Exp Ther Med, (2012) 4, 430-434; both of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for improving vascular function in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on improving vascular function can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Lopez J. J. et al., Cardiovasc Res, (1998) 40, 272-281 ; Tio R. A, et al., Hum Gene Ther., (1999) 10, 2953-2960; Sato K. et aL J Am Coll Cardiol., (2001 ) 37, 616-23; all of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for increasing tissue perfusion and new vessel formation in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer, in preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on increasing tissue perfusion and new vessel formation can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Chiappini C, et ah, Nat Mater., (2015) 14, 532-539; Lin Y. D, et al,, Sci Transl Med., (2012) 4 (146) : 146ral 09; Zangi L. et al,, Nat. Biotechnol, (2013) 10, 898-907; all of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for reducing scar tissue in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on reducing scar tissue can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Rosano J. M. et al., Cardiovasc Eng Technol., (2012) 3, 237-247; Galiano R. D. et al., Am J Pathol, (2004) 164, 1935-1947; Lin Y. D, et al., Sci Transl Med., (2012) 4 (146) : 146ral09; Zangi L. et al, Nat Biotechnol. (2013) 10, 898-907; all of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for improving cardiac function in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer, in preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. The effects of circRNA on improving cardiac function can be evaluated by methods well-known in the art (see, e.g., Rosano J. M. et al., Cardiovasc Eng Technol., (2012) 3, 237-247; Lin Y. D. et al,, Sci Transl Med., (2012) 4 (146) : 146ral 09; Zangi L. et al,, Nat Biotechnol., (2013) 10, 898-907; all of which are incorporated herein by reference) .In some embodiments, a method for reducing infarct size in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer, in preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. In some embodiments, the infarct size is reduced. In some embodiments, the infarct is eliminated. The effects of circRNA on infarct size can be evaluated by methods well-known in the art, such as left ventriculography, coronary angiography, echocardiography, MRI scans, CT scans, gated myocardial SPEC scans or gated myocardial. PET scans.In some embodiments, a method for reducing fibrosis in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ΤHΑΜ buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. In some embodiments, the fibrosis is reduced. In some embodiments, the fibrosis is eliminated. The effects of circRNA on fibrosis can be evaluated by methods well-known in the art, such as left ventriculography, coronary angiography, echocardiography, MRI scans, CT scans, gated myocardial SPEC scans or gated myocardial PET scans.In some embodiments, a method for reducing scar tissue in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ΤHΑΜ buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. In some embodiments, the scar tissue is reduced. In some embodiments, the scar tissue is eliminated. The effects of circRNA on scar tissue can be evaluated by methods well-known in the art, such as left ventriculography, coronary angiography, echocardiography, MRI scans, CT scans, gated myocardial SPEC scans or gated myocardial PET scans.In some embodiments, a method for inducing bone repair in a mammalian cell, tissue, or subject comprises contacting the mammalian cell, tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ΤHΑΜ buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. In some embodiments, bone repair is induced. The effects of circRNA on fibrosis can induce bone repair can be evaluated by methods well-known in the art.In some embodiments, a method for promoting stent biofunctionality in a mammalian tissue, or subject comprises contacting the mammalian tissue, or subject with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure. In some embodiments, the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, ΤHΑΜ buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium. In some embodiments, the stent biofunctionality is enhanced. The effects of circRNA on stent biofunctionality can be evaluated by methods well-known in the art.8.7 Methods of expressing HGFAnother aspect of the present disclosure relates to the administration of a composition or a formulation comprising a circRNA encoding a HGF polypeptide for in vivo, in vitro, in situ, or ex vivo protein expression in a mammalian cell or tissue.Some embodiments relate to a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue, comprising contacting the mammalian cell or tissue in vivo, in vitro, or ex vivo with a composition comprising the circRNA. In some embodiments, a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue comprises contacting the mammalian cell or tissue with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure.In some embodiments, a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue comprises contacting the mammalian cell or tissue with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure, wherein the composition is formulated in a phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, compositions comprising the circRNA comprise a citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of divalent cations, including calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.In some embodiments, a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue comprises contacting the mammalian cell or tissue with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure.In some embodiments, a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue comprises contacting the mammalian cell or tissue with a composition comprising the circRNA in accordance with the present disclosure, wherein the composition is formulated in a lipid-based complex (such as liposomes, lipoplexes, and lipid nanoparticles) .In some embodiments, a method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue comprises contacting the mammalian cell or tissue with a composition comprising the circRNA formulated in citrate saline buffer, wherein the composition is less toxic to the subject than a lipid-based formulation.Some embodiments relate to a method of producing HGF in a subject, comprising administering to the subject a composition or a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure.As non-limiting examples, in some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure. In some embodiments, formulations are formulated in citrate saline buffer. In some embodiments, the formulation further comprises a pharmaceutically acceptable excipient. In some embodiments, the formulation further comprises a pharmaceutically acceptable excipient chosen from a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof. In some embodiments, the solvent is an aqueous solvent.In some embodiments, the formulation further comprises a pharmaceutically acceptable excipient selected from lipid, lipidoid, liposome, lipid nanoparticle, lipoplex, and mixtures thereof. In some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure, wherein the subject is suffering from a disease responsive to HGF therapy. In some embodiments, the subject is suffering from a disease chosen from reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, critical limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, peripheral arterial disease, atherosclerosis obliterans (ASO) , thromboangiitis obliterans (TAO) , chronic limb-threatening ischemia (CLTI) , and leg ulcers in pediatric patients with sickle cell disease.In some embodiments, the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction. In some embodiments, the disease is post-MI cardiac dysfunction. In some embodiments, the disease is ischemic heart disease. In some embodiments, the disease is a vascular injury from trauma or surgery. In some embodiments, the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer. In some embodiments, the disease is diabetic foot. In some embodiments, the disease is critical limb ischemia. In some embodiments, the disease is lower limb ischemia. In some embodiments, the disease is pulmonary hypertension. In some embodiments, the disease is severe angina pectoris. In some embodiments, the disease is refractory angina. In some embodiments, the disease is maxillofacial defects. In some embodiments, the disease is congenital or acquired maxillofacial defects. In some embodiments, the disease is alveolar bone atrophy. In some embodiments, the disease is ligament or tendon lesions. In some embodiments, the disease is ocular disease. In some embodiments, the disease is peripheral arterial disease. In some embodiments, the disease is kidney disease, in some embodiments, the disease is a disease involving skin grafting and tissue grafting.In some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure, wherein the formulation is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intramuscularly, in some embodiments, the formulation is administered to the subject intradermally. in some embodiments, the formulation is administered to the subject subcutaneously. In some embodiments, the formulation is administered to the subject intracardially, preferably in multiple (e.g., two, three, four, five, six, seven, eight, nine, ten, eleven, twelve, thirteen, fourteen, fifteen, sixteen, seventeen, eighteen, nineteen, twenty, or more) administrations at a fixed-dosage. In some embodiments, the formulation is administered to the subject through a portal vein catheter, in some embodiments, the formulation is administered to the subject through a coronary sinus catheter. In some embodiments, the formulation is administered to the subject by direct administration into the area to be treated.In some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure, wherein the formulation comprises a lipid-based complex (such as liposomes, lipoplexes, and lipid nanoparticles) , phosphate-buffered saline buffer, THAM buffer, or citrate saline buffer. In preferred embodiments, formulations comprising the circRNA are formulated in citrate saline buffer. In some embodiments, the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium. In some embodiments, the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.In some embodiments, the citrate saline buffer has 10 mM citric acid and 130 M sodium chloride, with a pH range 6-7.5.In some embodiments, the method expresses HGF in heart cell or heart.In some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure, wherein the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 0.1 and 1 μg / μL, In some embodiments, the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 1 and 10 μg / μL. In some embodiments, the formulation comprises a concentration of the circRNA formulated in citrate saline buffer of between 10 and 50 μg / μL.In some embodiments, a method of producing HGF in a subject comprises administering to the subject a formulation comprising the circRNA in accordance with this disclosure, wherein the formulation comprises a in citrate saline buffer and is less toxic to the subject than a lipid-based formulation.8.8 ExperimentalThe examples provided below are for purposes of illustration only, which are not intended to be limiting unless otherwise specified. Thus, the invention should in no way be construed as being limited to the following examples, but rather, should be construed to encompass any and all variations which become evident as a result of the teaching provided herein.8.8.1 Example 1. IRES-like sequence-based vectorsCoding sequences of an expression protein with IRES-like sequence were designed and used to construct circRNA vectors. RNAs were in vitro transcribed ( “IVT” ) from the XbaI digested linearized plasmid DNA template using T7 RiboMAXTM Large-Scale RNA Production System (PromegaTM, P1320) in the presence of unmodified NTPs. After DNase I treatment, the RNA products were column purified with RNA Clean and Concentrator Kit (ZYMO research, R1013) to remove excess NTP and other salt in IVT buffer, as well as the possible small RNA fragments generated during IVT. In some experiments, the purified RNA was further circularized in a new circularization buffer. The RNAs were first heated to 75℃ for 5 min and quickly cooled down to 45℃, after which a buffer including indicated magnesium and sodium was added to a final concentration: 50mM Tris-HCl at pH 7.5, 50 / 100mM NaCl, 0-40mM MgCl2, and was then heated at 53℃ for indicated time for circularization. The best optimized reaction condition including concentration of magnesium and sodium, and incubation time at 53℃, was selected for further experiments.8.8.2 Example 2. Expression from the circRNA of the present disclosureThe expression of circular RNA products of different target sequences after transfection of cells was further tested. To minimize immunodegradation caused by linear RNAs, the RNA products were treated in the following three steps prior to transfection.(1) RNase R treatment was performed to digest linear RNAs. The reaction conditions were at 37℃ for 30 min.(2) CIP treatment was performed to remove phosphate groups at both ends of the linear RNAs. The reaction conditions were to add quick CIP (NEB) , and react at 37℃ for 30 min.(3) HPLC purification was performed to remove small linear RNAs. HPLC conditions: gel exclusion chromatographic column: Waters BEH450A, column temperature: 40℃, flow rate: 1 min / ml, and elution conditions: 0 to 30 min, 100%buffer A (prepared with 10 mM Tris, 0.5 mM EDTA, and DEPC-treated water) .The target RNAs were transfected using lipo RNAmax under the transfection conditions according to the supplier’s instructions, for 24 hours.Using the construction methods described in the Examples above, different target sequences were tested. To facilitate detection of protein expression, constructs comprising a fluorescent protein coding sequence together with the IRES sequences disclosed herein were constructed. The addition of IRES may initiate cap-independent non-canonical translation, enabling the translation of coding sequences in circular RNAs into proteins.For different target sequences, different methods were used to detect protein expression.In the case that the translation product was GFP, the fluorescence was observed under a microscope. In addition, the cells were lysed with RIPA lysis solution (Beyotime) , and then the protein expression was detected by Western blotting. In the case that the translation product was luciferase, the cells were first lysed with Passive lysis solution (PromegaTM) and then the protein expression was detected by a microplate reader using a luciferase detection kit (PromegaTM) . It was confirmed that the expression of Gluc protein was obtained by the method of the present disclosure.8.8.3 Example 3. Administration of circRNAs into miceThe circular RNA was encapsulated in a lipid nanoparticle via the NanoAssemblr Ignite system as previously described (Corbett K. S. et al., Nature 586, 567 (2020) , Polack F. P., et al., N .Engl. J. Med. 383, 2063 (2020) . In brief, an aqueous solution of circRNA at pH 4.0 was rapidly mixed with a lipid mixture dissolved in ethanol, which contained different ionizable cationic lipid, distearoylphosphatidylcholine (DSPC) , DMG-PEG2000, and cholesterol. The ratios for the lipid mixture were MC3: DSPC: Cholesterol: PEG-2000=50: 10: 38.5: 1.5 for formulation 1, SM-102: DSPC: Cholesterol: PEG-2000 = 50: 10: 38.5: 1.5 for formulation 2, and ALC-0315: DSPC: Cholesterol: ALC-0159 = 46.3: 9.4: 42.7: 1.6 for formulation 3. The resulting LNP mixture was then dialyzed against PBS and stored at -80 ℃ at a concentration of 0.5 μg / μl for further application.Female BALB / C, C57BL / 6J, and / or B6C3F1 / J mice aged 8 weeks were purchased from Shanghai Model Organisms Center. 20 μg of CircRNA-LNPs in PBS were administrated into mice intramuscularly with 3 / 10 insulin syringes (BD biosciences) . The serum was collected 24 hours after the administration of the LNP, and 50 μl serum was used for Luciferase activity assay in vitro. Bioluminescence imaging was performed with an IVIS Spectrum (Roper Scientific) . 24 hours after Gluc-LNP injection, 2 mg / kg of Coelenterazine (MedChemExpress, MCE) was administrated to mice intraperitoneally. Mice were then anesthetized after receiving the substrate in a chamber with 2.5%isoflurane (RWD Life Science Co. ) and placed on the imaging platform while being maintained on 2%isoflurane via a nose cone. Mice were imaged 5 minutes post substrate injection with 30 seconds exposure time to ensure the signal were effectively and sufficiently acquired.8.8.4 Example 4. circRNAs mediate prolonged protein productionA major advantage of circular mRNAs is their superb stability because of lacking the free ends, therefore the circRNA should have good shelf life for protein expression compared to linear counterparts. To directly test this, both linear and circular mRNA encoding the Gaussia luciferase (Gluc) are synthesized and stored parallelly in pure water at room temperature for different days before being transfecting into 293 T cells and / or A549 cells. The activity of the circRNA to direct protein translation is tested in comparison to that of the linear mRNA. The prolonged protein translation is expected for the circRNA.A major advantage of circular mRNAs is their superb stability because of lacking the free ends, therefore the circRNA should have good shelf life for protein expression compared to linear counterparts. To directly test this, both linear and circular mRNA encoding HGF in Table 2 are synthesized and stored parallelly in pure water at room temperature for different days before being transfecting into 293 T cells and / or A549 cells. The activity of the circRNA to direct protein translation is tested in comparison to that of the linear mRNA. The prolonged protein translation is expected for the circRNA.8.8.5 Example 5. Purified circRNAs direct robust translation of target proteinsThe mRNA purity was found to be a key factor for the protein production and induction of innate immunity, as the removal of dsRNA by HPLC can eliminate immune activation and improves translation of linear nucleoside-modified mRNA (Kariko, K. et al., (2011) . To examine if the circRNAs produced as disclosed herein can induce innate immune response and cell toxicity, the circRNAs are purified with gel purification or HPLC and measured if the circRNAs can induce cellular immune response upon transfection of circRNAs by testing cell survival and cytokine production (e.g., IL-10, IL-6, TNFα, MCP-1, IP-10, RIG-I, IFN-α2 and IFN-B1) . In-life examinations are monitored, such as viability, clinical observations, local tolerance, necropsy observations, cytokine detection. PK serum sample are collected at pre-dose (0 h) , 6 h, 1 day (24 h), 2 day (48 h) , 3 day (72 h) , 5 day (120 h) , 7 day (168 h) , 10 day (240 h) . IVIS are collected at pre-dose (0 h) , 6 h, 1 day (24 h) , 2 day (48 h) , 3 day (72 h) , 5 day (120 h) , 7 day (168 h) , 10 day (240 h) .8.8.6 Example 6. In vitro evaluation of a linear mRNA or circular RNA for protein expressionAn RNA encodes a reporter protein (e.g., a luciferase) is employed to determine the in vitro protein expression efficiency of the RNA encapsulated in an LNP. Exemplary expression RNAs include, but are not limited to, SEQ ID NOs: 86-90 or a nucleic acid sequence encodes an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. Exemplary circular RNAs include those described in PCT Appl. Nos. PCT / CN2020 / 077026, filed February 27, 2020; PCT / CN2022 / 095749, filed May 27, 2022; and PCT / CN2022 / 095949, filed May 30, 2022; the disclosure of each of which is incorporated herein by reference in its entirety.Briefly, a luciferase-coding linear mRNA or circular RNA is encapsulated in an LNP comprising a compound provided herein as described in Example 17. Cells are seeded into a 24-well plate and incubated with the LNP-encapsulated luciferase-coding mRNA or circular RNA at 37 ℃ for 24 h. The cell lysis and supernatant are separately collected and analyzed in a luminescence assay using the Reporter Assay System.8.8.7 Example 7. In vivo evaluation of a linear mRNA or circular RNA for protein expressionAn RNA encodes a reporter protein (e.g., a luciferase) is employed to determine the in vivo protein expression efficiency of the RNA encapsulated in an LNP, according to the procedures as described in WO 2017 / 049245 A2 or WO 2018 / 081480 A1, the disclosure of each of which is incorporated herein by reference in its entirety. Exemplary expression RNAs include, but are not limited to, SEQ ID NOs: 86-90 or a nucleic acid sequence encodes an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. Exemplary circular RNAs include those described in PCT Appl. Nos. PCT / CN2020 / 077026, filed February 27, 2020; PCT / CN2022 / 095749, filed May 27, 2022; and PCT / CN2022 / 095949, filed May 30, 2022; the disclosure of each of which is incorporated herein by reference in its entirety.Briefly, a luciferase-coding mRNA or circular RNA is encapsulated in an LNP comprising a compound provided herein as described in Example 17. The LNP-encapsulated luciferase-coding mRNA or circular RNA is systemically administered to 6-8 week old female C57BL / 6 mice by tail vein injection at predetermined doses. The mice are euthanized at predetermined time points (e.g., 4 h, 6 h, 12 h, …14 days) post-administration. The liver, spleen, brain, lung, heart, kidney, pancreas, and muscle tissues of the mice are collected, immediately snap frozen in liquid nitrogen, and stored at -80 ℃ for analysis. The collected tissues of each type are homogenized. The homogenate is analyzed using the STEADY-GLO luciferase assay system according to the manufacturer’s protocol. The amount of proteins assayed is determined using a BCA protein assay kit. Relative luminescence units (RLU) can be normalized to total μg protein assayed and compared with a standard curve.Briefly, a luciferase-coding mRNA or circular RNA is encapsulated in an LNP comprising a compound provided herein as described in Example 17. The LNP-encapsulated luciferase-coding mRNA or circular RNA is systemically administered to 6-8 week old female C57BL / 6 mice by tail vein injection at predetermined doses. The mice are euthanized at predetermined time points (e.g., 4h, 6h, 12h, …14 days) post-administration and placed on an imaging platform while being maintained on isoflurane via a nose cone. Bioluminescence imaging is performed with an IVIS Spectrum (Roper Scientific) . Mice are imaged 5 minutes post injection with 30 seconds exposure time to ensure the signal is effectively and sufficiently acquired.8.8.8 Example 8. Immunogenicity evaluation of a linear mRNA or circular RNAImmunogenicity is assessed in six-week-old female BALB / cJ, C57BL / 6J, and / or B6C3F1 / J mice by two intramuscular immunizations with a linear mRNA or circular RNA LNP at predetermined doses (e.g., 0.01, 0.1, or 1 μg) , separated by 2-week interval or 3-week interval. Sera are collected 2 weeks post-prime and 2 weeks post-boost and assessed for a target-specific IgG by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) . Mouse spleens are also harvested at the end point (2 weeks after boost or 3 weeks after boost) for immunostaining and flow cytometry. Time points are compared within each dose level by statistical method (e.g., two-sided Wilcoxon signed-rank test) , and doses are compared post-boost (via e.g., Kruskal–Wallis ANOVA with Dunn’s multiple comparisons test) .8.8.9 Example 9. Immunization with a linear mRNA or circular RNAProtective immunity is assessed in young adult BALB / cJ C57BL / 6J, and / or B6C3F1 / J mice challenged with a linear mRNA or circular RNA LNP at predetermined doses. Mononuclear single-cell suspensions from each immunized mouse are generated using RWD tissue dissociator, followed by 70 μM filtration and density gradient centrifugation using the FICO / LITE-LM medium. Spleenocytes are cryopreserved for further analysis. Before a T cell flow cytometry analysis, spleenocytes are cultured in R10 media and incubated for 6 h at 37 ℃ with an mRNA or circular RNA LNP. The cells are then washed before staining with a ZOMBIE NIRTM solution. The cells are washed and permeabilized using a BD CYTOFIX / CYTOPERM fixation / permeabilization solution according to the manufacturer’s instructions. The cells are washed in a permeabilization / wash solution and resuspended in FC BLOCK before staining with an antibody cocktail containing one or more antibodies selected from the following: I-A / I-E PE, CD4 BV421, CD8a BUV510, CD44 PE-Cy7, CD62L BB515, CD3e AF700, IFN-γ PE / Dazzle, TNF BB700, IL-2 BV605, IL-4 BV650, and IL-5 APC and in 1 × permeabilization / wash solution diluted with a brilliant stain buffer. The cells are washed in permeabilization / wash solution and resuspended in the FC buffer (PBS supplemented with 2%heat-inactivated FBS and 0.05%NaN3) before running on a full spectrum flow cytometry system. Analysis is performed using FLOWJO software.8.8.10 Example 10. In vitro detection of HGF expression according to western blotCellular supernatant is centrifugated and concentrated using Ultracel-10 regenerated cellulose membrane (Millipore) . The concentration of the total protein is quantified using BCA method (Beyotime) . Forty micrograms of total protein thermal denaturing with reduced loading buffer are loaded on a 4–20%Bis-Tris precast gel (Genscript) , and electrophoresis is carried out using formulated Tris-MOPS running buffer (Genscript) . Fractionated protein is electroblotted onto a polyvinyl difluoride (PVDF) membrane (Millipore) . Membranes are blocked in block buffer (5%BSA in TBS-Tween (0.1%) ) and incubated with primary HGF antibodies (Rabbit mAb, Cell Signaling Technology) at room temperature for an hour. Subsequently, the membranes are incubated with a HRP (horseradish-peroxidase) labeled secondary antibody (Cell Signaling Technology) . The immunoreactions between HGF circular expressed protein and the antibody in the membranes are detected using the western ECL substrate (Bio-rad) . Chemiluminescent signals were visualized and analyzed using an Ultra-sensitive multi-functional CCD imager (Amersham ImageQuant 800, Cytiva) (Fig. 4) .8.8.11 Example 11. quantification of HGF circular RNA in blood and tissues according to qPCRThe transfection effect of HGF circular RNA in vivo is essential to evaluate the expressional efficiency of HGF circular RNA. Harvest various tissues and blood from the body of mice that received intramuscular injection. Cut the tissue into small pieces and dispense into tubes at 50-60 mg per tube. Add 6× volume of 1× PBS (with RNase inhibitor) and grind the tissue. Transfer 20 mg-equivalent of the homogenate to a new EP tube. Add 500 μL of FastPure Cell / Tissue Total RNA Isolation Kit V2 Buffer RL, vortex, and proceed with RNA extraction as per the kit instructions. RNA Extraction from Blood Samples following the Blood RNA Kit (Yeasen) instructions. The concentration of total RNAs are determined by NanoDrop One micro-UV-VIS spectrophotometer (Thermo Scientific) . For Real Time RT-PCR (qPCR) , The 2 × One Step U+ Mix, One Step U+ Enzyme Mix, F60B-Forward, F60B-Reverse, F60B -Probe, and DNase / RNase-Free water were firstly mixed to prepare a Mix working solution. Then, the Mix working solution and RNA samples were sequentially added to each well of the PCR plate. The qPCR assay was initiated after setting the reaction program, which consisted of the following steps: 55℃ / 15 min; 95℃ / 30 sec; 955℃ate. The qPCR asec, 40 cycles. During the assay the FAM signals were detected. The corresponding standard curve, reference parameter, and sample copies were fitted using CFX Maestro 2.2 / 2.3 software. The LLOQ of the method is 50 copies / reaction. PCR primer sequences are as follows: for HGF circular RNA, forward primer (SEQ ID NO. 103) and reverse primer (SEQ ID NO. 104) ; and F60B Probe ( (Fig. 25) .8.8.12 Example 12. ELISA-based assay to assess the bioactivity of HGFA method similar as ELISA was used, in which human-derived recombinant HGF protein was coated onto high-binding plates. Gradient concentrations of c-Met proteins from different species were then incubated, and the OD450 values were measured to indicate the binding affinity between HGF protein and c-Met proteins from different species. A four-parameter model was applied to determine the EC50 values, which were used to compare with the binding affinity of human c-Met protein (Fig. 27) .8.8.13 Example 13. Cell Function Assay to assess the bioactivity of HGF circular RNAThe interaction between HGF and c-Met is an important mediator of angiogenesis as well as endothelial cell proliferation and migration. To assess proliferation, different species of vascular endothelial cells are cultured in their corresponding culture media. (HUVEC meidum: mix HUVEC complete medium and HUVEC basal medium in a ratio of 1: 30) . Count the cells number / mL and adjust the cell density into 5x103 / well in 50 μL medium. After cells seeded for 16 hours, 50 μL recombinant HGF protein (VE5-H4210, Acrobiosystems, CN) are respectively added into the well at a specific concentration gradient. Incubate the treated cells for 96 h (37 ℃, 5%CO2) and subsequently add 100 μL of CellTiter-Glo 2.0 cell viability assay reagent (Promega) into each well. Mix the contents for 2 minutes on a mini shaker (500 rpm) and then record luminescence by multimode microplate reader (BioTek Synergy H1, Agilent) . The intensity of the luminescence is indicated the vascular endothelial cells proliferation with HGF stimulation. In migration assay, motility of HUVECs is measured using Corning BioCoat multiwell Plate (Corning) with 3-μm pore size polycarbonate filter insert that divides the chamber into upper and lower portions. HUVECs are starved overnight in 2%FBS and subsequently resuspended in 0.1%FBS medium at a density of 4x105 cells / mL. 250 μL of cell suspension (1x105) is then added to the upper chamber of the insert and 750 μL medium with 0.1%FBS is added in the lower chamber. After 20 hours in the absence or presence of 100 ng / mL recombinant HGF protein (Acrobiosystems, CN) and expressed HGF protein translated from HGF circular RNA, cells on the top of the filter are removed by gentle swabbing, the cells on the bottom side of the filter are fixed with anhydrous ethanol and stained using 0.25%cresyl violet. The images in multiple fields are captured using a light microscope (DMi8, Leica) . The number of cells cross the membrane represent motility of HUVECs. (Figs. 8, 9 and 10) . 8.8.14 Example 14 Pro-Angiogenic Bioactivity of F60B Expression Products in Endothelial CellsThe expression products of F60B in A673 cells and human primary skeletal muscle cells were quantified by ELISA and diluted to appropriate concentrations. Serum-starved HUVECs were seeded onto 24-well plates pre-coated with Matrigel (DMEM : Matrigel = 1: 1.8) . The specified concentration of F60B cell expression product was added, and the culture dishes were gently placed in a 37 ℃ CO2 incubator. After 4 h, lumen formation was observed under a microscope, and images were captured. Vascular parameters were analyzed using ImageJ software. All data are presented as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and both graph plotting and statistical analysis were performed using GraphPad Prism 9.0 software (Fig. 11) .8.8.15 Examle 15 Characterization of lipid nanoparticlesA lipid nanoparticle (LNP) comprising a compound provided herein is prepared using a benchtop from PRECISION NANOSYSTEMS Inc., according to the procedures as described in Roces et al., Pharmaceutics 2020, 12, 1095; the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety.The particle size (Z-average diameter) , polydispersity index (PDI) , and zeta potential (ZP) of the LNP are determined by dynamic light scattering (DLS) using a ZETASIZER NANO ZS equipped with a 633 nm laser and a detection angle of 173°, according to the procedures as described in Roces et al., Pharmaceutics 2020, 12, 1095. Briefly, the LNP is diluted in filtered (0.22 μm) ultrapure water down to a LNP concentration of 0.2 mg / mL. The diluted LNP (1 mL) is then loaded into a 4-mL cuvette for measurements.The surface pKa of the compound provided herein in the LNP is determined by measuring the fluorescence of 2- (p-toluidino) -6-napthalene sulfonic acid (TNS) in buffer solutions having pH from 3.5 to 9 with 0.5 pH unit increments (10 mM HEPES, 130 mM NaCl, 10 mM NH4OAc, and 10 mM MES) , according to the procedures as described in Roces et al., Pharmaceutics 2020, 12, 1095. Briefly, the LNP is diluted to 0.78 mM with MILLIQ-water and the diluted LNP (6.4 μL) is added to a black 96-well plate containing a pH buffer (233.6 μL) and a 25 μM TNS solution (10 μL) . Fluorescence was quantified at λem = 445 nm and λex = 321 nm. A pKa value, defined as pH at half-maximal fluorescence intensity, is determined.The nucleic acid encapsulation efficiency (EE%) of the LNP is measured using a QUANT-ITTM RIBOGREENTM RNA assay kit from INVITROGENTM, according to the procedures as described in Roces et al., Pharmaceutics 2020, 12, 1095.An RNA encodes a reporter protein (e.g., a luciferase) is employed to determine the nucleic acid encapsulation efficiency (EE%) of an LNP. Exemplary expression RNAs include, but are not limited to, SEQ ID NOs: 86-90 or a nucleic acid sequence encodes an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. Exemplary circular RNAs include those described in PCT Appl. Nos. PCT / CN2020 / 077026, filed February 27, 2020; PCT / CN2022 / 095749, filed May 27, 2022; and PCT / CN2022 / 095949, filed May 30, 2022; the disclosure of each of which is incorporated herein by reference in its entirety.8.8.16 Example 16. in vitro self-splicing activity of cRANzymesThis example relates to a method for determining the in vitro self-splicing activity of cRANzymes provided herein.A DNA sequence encoding a cRNAzyme provided herein is cloned into an expression vector, e.g., psiCHECK-2 (PromegaTM, C8021) , puc57.The purified template DNAs are transcribed in vitro by T7 RNA polymerase. The transcripts are digested with DNase I at 37℃ for 10～60 min to degrade the PCR templates. The transcripts are then column purified to obtain high-purity RNAs.Table 8 Detailed IVT condition:The column-purified transcript RNAs are added to a self-splicing buffer (10, 20, 50 or 100 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 40 mM Tris-HCl, pH = 7.5) for self-splicing reaction. The reaction conditions are: 95℃ for 1 min, 75℃ to 45℃ (-0.5℃, 15 sec / cycle, for 60 cycles in total) , holding at 45℃ with a buffer added, 45℃ for NMT 60 min, and 53℃ for 15 to 30 min.Table 9 detailed IVC condition:Table 10 Unspliced RNAs and spliced RNAs can be separated by affinity chromatography.8.8.17 Example 17. Dose-Dependent and Time-Dependent Course Expression of HGF in Various Cell Types Across Different Species Following F60B TransfectionUsing MessengerMax (LMRNA015, Invitrogen) for gradient transfection of F60B circRNA into A673 (human rhabdomyosarcoma cell line) , L6 (rat myoblast cell line) , C2C12 (mouse myoblast cell line) , and primary skeletal muscle cells from human, rat, and mouse, the supernatant was collected. Quantitative analysis of human hepatocyte growth factor (HGF) was performed using a Human HGF ELISA Kit (E-EL-H0084c, Elabscience) . All data are expressed as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and graphs were generated using GraphPad Prism 9.0 software (Fig. 5) . Transfection of F60B circRNA into A673 (human rhabdomyosarcoma cell line) , L6 (rat myoblast cell line) , C2C12 (mouse myoblast cell line) , and primary skeletal muscle cells from human, rat, and mouse was performed using MessengerMax (LMRNA015, Invitrogen) . After transfection, supernatants were collected at 24 h, 48 h, 72 h, 96 h, 120 h, 144 h, and 168 h. At each time point, the culture medium was harvested and replaced with fresh medium in the wells. Quantitative analysis of human hepatocyte growth factor (HGF) was carried out using a Human HGF ELISA Kit (E-EL-H0084c, Elabscience) . All data are presented as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and graphs were prepared using GraphPad Prism 9.0 software (Fig. 6) .ExamvExam8.8.18 8.8. HUVECs (primary human umbilical vein endothelial cells) , mouse and rat aortic endothelial cells, and RF / 6A (rhesus monkey choroid-retinal endothelial cells) were subjected to serum starvation for 12 h, followed by treatment with cell culture supernatants expressing F60B circRNA (supernatants derived from the corresponding species-specific cell lines, diluted to a final HGF concentration of 50 ng / mL after quantitative determination by ELISA) for 30 min. After treatment, cells were lysed with RIPA buffer, and protein concentrations were determined by BCA assay prior to Western blot (WB) analysis (Fig 7). doi: 10.3390 / biomedicines2040275) . F60BF60BExample 18. Activation Analysis of F60BF60B Expression Products in Various Cell Types Across Species to Stimulate c-MetHUVECs (primary human umbilical vein endothelial cells) , mouse and rat aortic endothelial cells, and RF / 6A (rhesus monkey choroid-retinal endothelial cells) were subjected to serum starvation for 12 h, followed by treatment with cell culture supernatants expressing F60B circRNA (supernatants derived from the corresponding species-specific cell lines, diluted to a final HGF concentration of 50 ng / mL after quantitative determination by ELISA) for 30 min. After treatment, cells were lysed with RIPA buffer, and protein concentrations were determined by BCA assay prior to Western blot (WB) analysis (Fig 7) . doi: 10.3390 / biomedicines2040275) .8.8.19 Example 19: The biodistribution of HM2003 in Balb / c mice via a single-dose intramuscular injection into the gastrocnemius muscle45 Balb / c mice were divided into two groups. Group 1 (Vehicle Control Group) : Mice received an intramuscular injection of vehicle solution at a dose volume of 50 μL per mouse, delivered at two injection sites (25 μL per site) . This group was sampled at two time points post-administration: 5 minutes and 120 hours. Group 2 (HM2003 Injection Group) : Mice received an intramuscular injection of 0.25 mg HM2003 per mouse, with a dose volume of 50 μL per mouse, administered at two injection sites (25 μL per site) . This group was sampled at eight time points post-administration: 5 minutes, 30 minutes, 2 hours, 6 hours, 24 hours (Day 1) , 72 hours (Day 3) , 120 hours (Day 5) , and 192 hours (Day 8) post-administration. Each time point included 5 mice. At each designated time point, the following samples were collected from all animals: whole blood and serum, gastrocnemius muscle (injected and non-injected sides) , heart, kidneys, liver, lungs, spleen, ovary and uterus. HM2003 levels in whole blood and tissues were quantified using qPCR. HGF protein concentrations in serum and tissues were measured via MSD commercial kit. All data are expressed as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and graphs and statistical analyses were performed using Graphpad Prism 9.0 software (Fig. 25 and Fig. 26) .8.8.20 Example 20. Pharmacodynamic Evaluation of F60B on mouse hindlimb ischemia modelMaterials and methodsmouse hindlimb ischemia modelBKS-db / db mice (38–47 g) were anesthetized with an intraperitoneal injection of sodium pentobarbital (0.1 ml / 100 mg) . A longitudinal incision was then made, extending inferiorly from the inguinal ligament to a point just proximal to the patella. Through this incision, using surgical loops, the operator dissected free the right femoral artery along its entire length; all branches of the femoral artery, including the inferior epigastric, deep femoral, lateral circumflex, and superficial epigastric arteries, were also dissected free. After dissection of the popliteal and saphenous arteries distally, the distal right femoral artery and proximal of popliteal artery were ligated with 6-0 silk. Finally, the right ischemic limb model was created.In vivo gene transfer using direct intramuscular injection approach‘Naked’ HM2003 (400 μg / body) , LPX-HM2003 (500 ng / body) , mRNA-LNP (500 ng / body) or control PBS was carefully injected directly into the right ischemic limb of mice with a 27 G needle immediately after surgery. Injection volume of circRNA was 200 μl / 4 sites, two site in thigh and two sites in calf.Measurement of blood flow by laser Doppler image: Excess hairs were removed by depilatory cream from the limb before imaging, and mice were placed on a heating plate at 37℃to minimize temperature variation. Consecutive measurements were obtained over the same regions of interest (leg and foot) . LDI uses a 12-mW helium–neon laser beam that sequentially scans with extremely high speed to be able to measure the blood flow in the ischemic hindlimb. Upon termination of scanning, a color-coded image representing blood flow distribution is displayed on a monitor. The perfusion signal is subdivided into 14 different intervals, and each interval is displayed in a separate color. Low or no perfusion is displayed as dark blue, whereas the highest perfusion interval is displayed as white. The stored perfusion values behind the color-coded pixels remain available for analysis. Before measuring, mice were anesthetized, intubated and connected to a respirator. Perfusion analyses were performed sequentially. All data are expressed as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and graphs and statistical analyses were performed using Graphpad Prism 9.0 software.Scoring of Lower Limb NecrosisTo further determine the therapeutic effect of HM2003 in the lower limb ischemia mouse model, At the experimental endpoint, after drug administration, the leg conditions of the mice were observed, photographed and recorded. The necrosis severity of the lower limbs was scored according to the criteria in Figure 11A as follows: 0 = lower limb autoamputation; 1 = leg necrosis; 2 = foot necrosis; 3 = discoloration of more than 2 toes; 4 = discoloration of 1 toe; 5 =discoloration of 2 or more nails; 6 = discoloration of 1 nail; 7 = no necrosis. All data are expressed as mean ± standard deviation (Mean ± SD) , and graphs and statistical analyses were performed using Graphpad Prism 9.0 software.8.8.21 Example 21. Animal  experimentation (in vitro)(1) Qualitative assessment of expression products following F60B transfection in human, rodent, and monkey cells.HGF protein expression in different cell types transfected by F60B was investigated. F60B is the principal active ingredient of HM2003 Injection. Using an antibody specifically recognizing the β-chain, the expression products of F60B in different cell lines, respectively human (A673: human rhabdomyosarcoma cell line) , rodent (L6: rat myoblast cell line; C2C12: mouse myoblast cell line) , and monkey (COS-1: SV40-transformed African green monkey kidney cell line) , were detected. As shown in FIG. 4, the bands were of expected size (32-36 kDa) , and exhibited a distribution consistent with recombinant human HGF (rhHGF) (Fig 4) .(2) Dose-dependence and temporal kinetics of HGF expression following F60B transfection in human and rodent cellsHGF expression in different cell types transfected by F60B was investigated. As shown in FIG. 5, HGF expression in human and rodent cell lines and primary cells correlated positively with the amount of F60B transfected. As shown in FIG. 6, HGF protein levels were sustained for at least six days.(3) F60B expression products in cells of different species activated c-Met and downstream pathways in endothelial cells of corresponding speciesEndothelial cells were treated with F60B expression products (HGF) , and c-Met and downstream signaling pathways were measured. As shown in FIG. 7 and Table 7, expression products of F60B in human rhabdomyosarcoma A673 cell line and human primary skeletal muscle cells activated c-Met and the downstream angiogenesis-related protein ERK1 / 2 in HUVECs, comparable to rhHGF (50 ng / mL) . Besides, expression products of F60B in rat myoblast cell line, rat primary skeletal muscle cells, monkey cell line, and mouse primary skeletal muscle cells also activated c-Met signaling pathway of corresponding species.Table 7(4) F60B expression products in human cell lines and primary cells promoted proliferation of primary HUVECsHUVECs were treated with F60B expression products (HGF) , and proliferation of HUVECs was measured. As shown in FIG. 8, expression products of F60B in human rhabdomyosarcoma A673 cell lines promoted HUVEC proliferation, comparable to rhHGF.Furthermore, vascular endothelial cells from different species were treated with rhHGF at different concentrations, and stimulation effects of rhHGF on cells from other species were measured. As shown in FIG. 9, rhHGF promoted proliferation of endothelial cells from rat, monkey, dog, and pig, and the EC50 values in different species were similar to or lower than that in HUVECs.(5) F60B expression products in human cell lines and primary cells promoted primary HUVEC migrationHUVECs were treated with F60B expression products (HGF) , and HUVEC migration was measured. As shown in FIGs. 10A-10B, expression products of F60B in human rhabdomyosarcoma A673 cell lines and human primary skeletal muscle cells promoted HUVEC migration, superior to rhHGF (50 ng / mL) .(6) F60B expression products in human cell lines and primary cells promoted HUVEC angiogenesisHUVECs were treated with F60B expression products (HGF) , and HUVEC angiogenesis was measured. As shown in FIG. 11, expression products of F60B in human rhabdomyosarcoma A673 cell lines and human primary skeletal muscle cells promoted HUVEC angiogenesis, comparable to rhHGF.8.8.22 Example 22. Animal experimentation (in vivo)(1) Pilot pharmacodynamics of HM2003 in BKS-db hindlimb ischemia mouse modelThe hindlimb ischemia model was established by ligating unilateral femoral and popliteal arteries of hindlimb. Mice were randomized into three groups: G1 (model control) , G2 (positive control: mRNA-LNP, 0.5 μg / mouse) , and G3 (HM2003 Injection, 400 μg / mouse) . Each vial of HM2003 Injection (circRNA-only) contains 1.2 mg circRNA as the active ingredient, and the following excipients: sodium chloride 4.56 mg, sodium dihydrogen phosphate monohydrate 0.54 mg and anhydrous disodium hydrogen phosphate 0.27 mg. Dosing was administered by injection at two sites in thigh and two sites in calf on the ischemic hindlimb (50 μL / site; total of 4 injection sites; total injection volume of 0.2 mL) . Therapeutic effects of test drug on hindlimb ischemia mouse model were evaluated by Doppler blood-flow imaging of ischemic hindlimb at multiple time points, terminal hindlimb necrosis scoring, and CD31 vascular staining. As shown in FIG. 12 and FIG. 13, compared to the model control group, the perfusion ratios in ischemic hindlimb of mice in G2 and G3 groups had significant improvement compared to the baseline (Day 0) , and gradually recovered over time. In G3 group, the perfusion ratio recovered to the normal level by Day 14 post-dose.To further evaluate therapeutic effects of HM2003 Injection on hindlimb necrosis in hindlimb ischemia mouse model, leg condition was photographed and hindlimb necrosis was scored at the experimental endpoint (Day 14 post-dose) as shown in FIG. 19. Scoring criteria were as follows: 0 = auto-amputation of hindlimb; 1 = leg necrosis; 2 = foot necrosis; 3 = discoloration of >2 toes; 4 = discoloration of 1 toe; 5 = discoloration of >2 nails; 6 = discoloration of 1 nail; 7 =no necrosis. As shown in FIG. 14, within two weeks post-surgery, mice in the control group displayed overt ischemic necrosis in the hindlimb, whereas mice treated with HM2003 Injection or mRNA-LNP maintained limb integrity, and necrosis scores in the HM2003 Injection group were significantly superior to those in the mRNA -LNP group.CD31 is a key marker of neovascularization. To determine the effects of HM2003 Injection on neovascularization in hindlimb ischemia mouse model, gastrocnemius muscle adjacent to the ischemic tissue was collected on Day 14 post-dose, processed into paraffin sections, and stained for CD31 by immunofluorescence using an anti-CD31 antibody. As shown in FIG. 15, both the positive control group (mRNA -LNP, 0.5 μg / mouse) and the HM2003 Injection group (400 μg / mouse) significantly promoted neovascularization in ischemic hindlimb muscle.(2) Dose de-escalation pharmacodynamics of HM2003 in BKS-db hindlimb ischemia mouse modelBased on in vivo HGF expression, the effective dose of HM2003 Injection could be further reduced in BKS-db hindlimb ischemia mouse model. The hindlimb ischemia model was established as above and mice were randomized into four groups: G1 (model control) , G2 (HM2003 Injection, 1.5 μg / mouse) , G3 (HM2003 Injection, 5 μg / mouse) , and G4 (HM2003 Injection, 15 μg / mouse) . Dosing was administered by injection at two sites in the thigh and two sites in the calf on the ischemic hindlimb (25 μL / site; total of 4 injection sites; total of 0.1 mL) . Doppler blood-flow imaging was used to assess the effects of HM2003 Injection on hindlimb ischemia mouse model. As shown in FIG. 16 and FIG. 17, compared to the model control group, perfusion ratios in ischemic hindlimb significantly improved in all HM2003 Injection-treated groups (G2-G4 groups) compared to the baseline (Day 0) and gradually recovered over time. Due to relatively large variability within G2 group, statistical significance was not observed. There was a dose-dependent trend although without statistical significance among G2, G3 and G4 dosing groups. In G4 group, the perfusion ratio essentially recovered to the normal level by Day 20 post-dose. This dose de-escalation study indicated that the minimum effective dose for HM2003 Injection could be reduced to 5 μg / mouse.8.8.23 Example 23. Study of HM2003 Injection in a db / db hindlimb ischemia mouse model induced by ligation of unilateral hindlimb femoral and popliteal arteriesReagent PreparationThe dosing formulations were prepared immediately before use, and thawed overnight at 2-8 ℃prior to administration (avoid repeated freeze-thaw cycles; store remaining samples at -80 ℃) .Model control group: No preparation required; dispense PBS to the required volume.F60B-6A (HM2003 Injection) : After thawing at 2-8 ℃, invert gently (10 times) to mix.Step 1: 10-fold dilution to 500 ng / μL HM2003 Injection formulation. To prepare 1 mL at 500 ng / μL, transfer 100 μL of F60B-6A (HM2003 Injection, 5000 ng / μL) into an appropriate vessel and add 900 μL diluent (normal saline) . Mix thoroughly.Step 2: Prepare formulations for G2, G3, and G4 groups. To prepare 2 mL of G2 formulation (15 ng / μL) , transfer 60 μL of 500 ng / μL HM2003 Injection formulation into an appropriate vessel, and add 1940 μL diluent (normal saline) to reach 2 mL (33.3-fold dilution) . Mix thoroughly.To prepare 2 mL of G3 formulation (50 ng / μL) , transfer 200 μL of 500 ng / μL HM2003 Injection formulation into an appropriate vessel, and add 1800 μL diluent (normal saline) to reach 2 mL (10-fold dilution) .To prepare 2 mL of G4 formulation (150 ng / μL) , transfer 600 μL of 500 ng / μL HM2003 Injection formulation into an appropriate vessel, and add 1400 μL diluent (normal saline) to reach 2 mL (3.3-fold dilution) .Labeling: Affix labels on prepared dosing formulations, indicating ID, name, concentration, quantity, preparation date, preparer, storage conditions, and expiry date.Storage: Temporary storage at 2-8 ℃; freeze remaining samples at -80 ℃.Table 11 ReagentsNote: Actual preparation steps should follow the preparation records of formulations.Model establishmentFifty-five SPF-grade 8-week-old male db / db mice were acclimatized with ad libitum access to food and water. To establish mouse model, under anesthesia, fur was removed, the mouse was fixed in a supine position and the surgical site was disinfected. An about 1 cm skin incision was made from the knee toward the medial thigh, and subcutaneous fat was dissected to expose the femoral artery. Using a micro serrefine to gently puncture the membranous femoral sheath to expose the neurovascular bundle. The femoral artery was separated from the femoral vein and nerve proximally near the inguinal region, and the proximal femoral artery was ligated with 6-0 suture placed distally to it. Distally near the knee, the femoral artery and femoral vein were separated, and the distal end of the femoral artery was ligated with 6-0 suture just proximal to the popliteal artery (i.e., at the bifurcation of the popliteal and saphenous arteries, where the popliteal artery was ligated) . The incision was closed. Penicillin sodium was administered for infection prophylaxis for seven consecutive days post-operation (animals were processed in two parallel batches) . Mice with a blood-flow ratio less than 0.5 at Day 0 were considered successfully modeled.Grouping and dosingAfter acclimatization, mice were randomized by body weight and fasting blood glucose into four groups: G1 model control; G2 HM2003 Injection 1.5 μg / mouse; G3 HM2003 Injection 5 μg / mouse; and G4 HM2003 Injection 15 μg / mouse. Dosing occurred immediately after model establishment (defined as Day 0) . A single intramuscular dose was administered in a volume of 100 μL / mouse (4 sites, 25 μL / site) for G1-G4 groups. Dosing frequency and route were summarized in Table 12. Individual mice were identified by ear tags. Cages were labeled with hanging cards. The experimental timeline is shown in FIG. 18. Table 12 Grouping informationEndpoints and assessmentsWhen observing dying mouse, promptly notify veterinarian and Study Director. A description of the mouse’s condition should be provided. The mouse should be euthanized as appropriate and records should be updated. Excess mice at the experimental endpoint should be euthanized.Euthanasia method: Anesthesia followed by exsanguination.General observationTime and frequency: Once daily during the experiment.Object: All surviving mice in each group.Content: Cage-side observations including mortality / moribundity, mental state, behavioral activity, fecal characteristics, and food / water availability.Body weightTime and frequency: Pre-model: Days -1 and 0Post-model / dose: Days 7, 10, 14, and 20Object: All surviving mice in each group.Content: Body weight measurement.Fasting blood glucose measurementTime and frequency: Pre-model: Day -1. Object: All surviving mice in each group.Content: Measurement of fasting blood glucose levels of mice starved for 4-6 hours.Inclusion criterion: fasting glucose > 11.1 mmol / L.Laser Doppler for observing blood flowTime and frequency: Post-dose: Days 0, 7, 10, 14, and 20.Object: All surviving mice in each group.Content: Measurement of hindlimb blood flow of mice using Laser Doppler Flowmeter.Inclusion criterion: Blood-flow ratio < 0.5 at Day 0.Hindlimb necrosis scoringTime and frequency: Experimental endpoint.Object: All surviving mice in each group.Content: Scoring mice hindlimb. Hindlimb necrosis scoring criteria is shown in FIG. 19.Gastrocnemius CD31 immunostainingTime and frequency: Experimental endpoint.Object: All surviving mice in each group.Content: At the experimental endpoint, gastrocnemius muscle from the operated (ischemic) hindlimb was collected and fixed in 4%paraformaldehyde and stained for CD31 by immunofluorescence.Data processing and statistical analysisData are presented as Mean ± SD. GraphPad Prism 8.3 was used for data processing. SPSS was used for statistics analysis. LSD test is applied when variances are homogeneous. Dunnett’s T3 test is used when variances are heterogeneous. P < 0.05 is considered statistically significant.ResultsGeneral observationDuring the experiment, two mice in G1 group and three mice in G3 group died due to excessive gnawing of surgical wound. No abnormal clinical observations were noted in other mice.Effects of test drug on mice body weightAs shown in Table 13 and FIG. 20, during the experiment, compared to G1 model control, there were no significant differences in mice body weights among G2, G3, and G4 groups at multiple time points.Table 13 Effects of test drug on mice body weights (Mean ± SD, n = 7-10)Fasting blood glucose prior to mouse modeling and dosingAll enrolled mice met the inclusion criteria (>11.1 mmol / L of fasting blood glucose) on Day -1.As shown in Table 14 and FIG. 21, on Day -1, compared to G1 model control, there were no significant differences in mice fasting glucose among G2, G3, and G4 groups.Table 14 Fasting blood glucose before mouse modeling and dosing (Mean ± SD, n = 10)Effects of test drug on mouse hindlimb blood-flow ratioAs shown in Table 15 and FIG. 22, during the experiment, compared to G1 model control, G2 group exhibited a trend toward increased hindlimb blood-flow ratio on Days 14 and 20 post-dose, G3 group exhibited significant increases of hindlimb blood-flow ratio on Days 10 and 20 (P < 0.05) post-dose and also a trend toward increased hindlimb blood-flow ratio on Day 14 post-dose, and G4 group exhibited significant increases of hindlimb blood-flow ratio on Days 10, 14, and 20 (P < 0.05 or 0.01) post-dose.Table 15 Effects of test drug on mouse hindlimb blood-flow ratio (Mean ± SD, n = 7-10)Compared to G1 model control, *P < 0.05, **P < 0.01.Effects of test drug on mouse hindlimb necrosis scoresAs shown in Table 16 and FIG. 23, at the experimental endpoint, compared to G1 model control, G2, G3, and G4 groups exhibited trends toward higher hindlimb necrosis scores, indicating amelioration of hindlimb necrosis.Table 16 Effects of test drug on mouse hindlimb necrosis scores (Mean ± SD, n = 7-10)Effects of test drug on CD31 protein expression in gastrocnemius muscle on the ischemic hindlimbAs shown in FIG. 24, at the experimental endpoint, compared to G1 model control, CD31 protein expression in the gastrocnemius muscle on the ischemic hindlimb exhibited an increasing trend in G2, G3, and G4 groups.Experimental conclusionsUnder the current experimental conditions, a single intramuscular dose of HM2003 Injection at 1.5 μg / mouse, 5 μg / mouse, or 15 μg / mouse had no effect on mice body weights. HM2003 Injection at 1.5 μg / mouse exhibited a trend toward improved hindlimb blood-flow ratio. HM2003 Injection at 5 μg / mouse and 15 μg / mouse significantly increased hindlimb blood-flow ratios. HM2003 Injection at 1.5 μg / mouse, 5 μg / mouse, and 15 μg / mouse all exhibited trends toward improvement in hindlimb necrosis and increases in neovascularization.In sum, HM2003 Injection at 5 μg / mouse and 15 μg / mouse significantly ameliorated disease progression in the hindlimb ischemia mouse model, indicating its pharmacological efficacy in hindlimb ischemia, with a dose-dependent trend.9.Sequence Listing and TablesTable 1: Exemplary HGF Amino SequenceTable 2: Exemplary HGF RNA SequenceTable 3: Exemplary RNA sequence (precursor sequence, IRES sequence, HGF CDS sequence and pUC57 sequence)*As to the SEQ ID NOs. 86-90, the nucleotides from precursor are represented by UNDERLINED LETTERS. The nucleotides from IRES are represented by underlined lower letters. The nucleotides from CDS are represented by ITALIC BOLD UNDERLINED UPPER LETTERS. The nucleotides from pUC57 are represented by UPPER LETTERS.Table 4: Exemplary IRES sequenceTable 5: Exemplary PCR primerTable 6: Exemplary linker

Claims

1.A composition comprising a circular ribonucleotide acid (circRNA) , wherein the circRNA comprises, a translation initiation (TI) sequence and a protein-coding (Z) sequence, and wherein the Z sequence comprises a HGF sequence encoding a HGF polypeptide sequence (HF) .2.The composition of claim 1, wherein the HF is selected from the group of amino acid sequences listed in Table 1.3.The composition of claim 1, wherein the HF is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to an amino acid sequence listed in Table 1.4.The composition of claim 1, wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence listed in Table 2.5.The composition of claim 1, wherein the HGF sequence has a nucleotide sequence which is at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 2.6.The composition of any one of claims 1 to 5, wherein the circRNA comprises a linker sequence, wherein the linker sequence encodes a 2A self-cleaving peptide.7.The composition of any one of claims 1 to 6, wherein the TI sequence comprises: an IRES, an IRES-like nucleotide sequence, or a combination thereof.8.The composition of claim 7, wherein the IRES is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.9.The composition of claim 7, wherein the IRES-like sequence is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 4.10.The composition of claim 1, wherein the circRNA comprises a nucleotide sequence that is at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%identical to a nucleotide sequence listed in Table 3.11.The composition of any one of claims 1 to 10, wherein the circRNA comprises a modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside.12.The composition of claim 11, wherein the circRNA comprises at least 10%modified RNA nucleotides and / or modified nucleosides.13.The composition of claim 12, wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is m5C (5-methylcytidine) , m5U (5-methyluridine) , m6A (N6-methyladenosine) , Y (pseudouridine) , or m1A (1-methyladenosine) .14.The composition of any one of claims 11 to 13, wherein at least one of the modified RNA nucleotide and / or modified nucleoside is introduced at in vitro transcription (IVT) .15.The composition of any one of claims 1 to 14, wherein the circRNA is encapsulated in a lipid nanoparticle (LNP) .16.The composition of claim 15, wherein the LNP comprises MC3, ALC-0315 or SM-102.17.The composition of claim 15, wherein the LNP comprises MC3: DSPC: Cholesterol: PEG-2000 at molar ratio of 50: 10: 38.5: 1.5.18.The composition of claim 15, wherein the LNP comprises SM-102, DSPC, Cholesterol, and PEG-2000 at molar ratio of 50: 10: 38.5: 1.5.19.The composition of claim 15, wherein the LNP comprises ALC-0315, DSPC, Cholesterol, and ALC-0159 at molar ratio of 46.3: 9.4: 42.7: 1.6.20.The composition of any one of claims 1 to 14, wherein the composition further comprises a buffer, preferably a citrate saline buffer, a phosphate-buffered saline (PBS) buffer, or a tromethamine (THAM) buffer.21.The composition of claim 20, wherein the buffer is substantially free of divalent cations.22.The composition of claim 21, wherein said buffer substantially free of divalent cations is a citrate saline buffer.23.The composition of claim 22, wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.24.The composition of claim 22, wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.25.The composition of claim 21, further comprising a pharmaceutically acceptable excipient.26.The composition of claim 25, wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.27.A method for treating a subject suffering from a disease responsive to HGF therapy, in a subject comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the composition of any one of claims 1 to 20.28.The method of claim 27, wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.29.The method of claim 28, wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.30.The method of claim 28, wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.31.The method of claim 27, wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.32.The method of claim 31, wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.33.The method of claim 27, wherein the disease is selected from the group consisting of heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting, post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, and peripheral arterial disease.34.The method of claim 27, wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.35.The method of claim 27, wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.36.The method of claim 27, wherein the disease is ischemic heart disease.37.The method of claim 27, wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.38.The method of claim 27, wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.39.The method of claim 27, wherein the disease is diabetic foot.40.The method of claim 27, wherein the disease is critical limb ischemia.41.The method of claim 27, wherein the disease is lower limb ischemia.42.The method of claim 27, wherein the disease is pulmonary hypertension.43.The method of claim 27, wherein the disease is stable severe angina pectoris.44.The method of claim 27, wherein the disease is refractory angina.45.The method of claim 27, wherein the disease is maxillofacial defects.46.The method of claim 45, wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.47.The method of claim 27, wherein the disease is alveolar bone atrophy.48.The method of claim 27, wherein the disease is ligament or tendon lesions.49.The method of claim 27, wherein the disease is ocular disease.50.The method of claim 27, wherein the disease is peripheral arterial disease.51.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.52.The method of claim 27, wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.53.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.54.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject intradermally.55.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.56.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject intracranially.57.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject intrathecally.58.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject vitreously.59.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject subretinally.60.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject muscularly.61.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject cardiacly.62.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.63.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.64.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.65.The method of claim 27, wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.66.The method of claim 27, wherein the composition is suitable for a naked formulation.67.The method of claim 66, wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.68.A method for modulating a physiological process in a mammalian cell, tissue, or subject comprising contacting said mammalian cell, tissue, or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.69.The method of claim 68, wherein the modulating comprises inducing angiogenesis, stimulating vascular cell proliferation, inducing the proliferation and migration of vascular endothelial cells, increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells, upregulating endothelialization, inducing cardiac regeneration, increasing revascularization of tissue grafts for wound healing, improving vascular function, increasing tissue perfusion and new vessel formation, reducing scar tissue, promoting stent biofunctionality, inducing lymphangiogenesis, inducing bone repair, or improving cardiac function, or any combination thereof.70.The method of claim 68, wherein the modulating comprises inducing angiogenesis.71.The method of claim 68, wherein the modulating comprises stimulating vascular cell proliferation.72.The method of claim 68, wherein the modulating comprises increasing proliferation and / or altering the fate of epicardial derived progenitor cells.73.The method of claim 68, wherein the modulating comprises upregulating endothelialization.74.The method of claim 68, wherein the modulating comprises inducing cardiac regeneration.75.The method of claim 68, wherein the modulating comprises increasing revascularization of tissue grafts for wound healing.76.The method of claim 68, wherein the modulating comprises improving vascular function.77.The method of claim 68, wherein the modulating comprises increasing tissue perfusion and new vessel formation.78.The method of claim 68, wherein the modulating comprises reducing scar tissue.79.The method of claim 68, wherein the modulating comprises promoting stent biofunctionality.80.The method of claim 68, wherein the modulating comprises inducing lymphangiogenesis.81.The method of claim 68, wherein the modulating comprises inducing bone repair.82.The method of claim 68, wherein the modulating comprises improving cardiac function.83.The method of claim 68, wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.84.The method of claim 83, wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.85.The method of claim 83, wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.86.A method for expressing HGF in a mammalian cell or tissue, comprising contacting said mammalian cell or tissue with the composition of any one of claims 1 to 20.87.The method of claim 86, wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition or formulation is a citrate saline buffer.88.The method of claim 87, wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.89.The method of claim 87, wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.90.The method of claim 87, wherein the citrate saline buffer has 10 mM citric acid and 130 M sodium chloride, with a pH range 6-7.5.91.Themethod of any one of claims 86 to 90, wherein the method expresses HGF in heart cell or heart.92.A method of producing HGF in a subject, comprising administering to said subject the composition of any one of claims 1 to 20.93.The method of claim 92, wherein the buffer that is substantially free of divalent cations in said composition is a citrate saline buffer.94.The method of claim 93, wherein the citrate saline buffer is substantially free of calcium and magnesium.95.The method of claim 93, wherein the citrate saline buffer contains no calcium or magnesium.96.The method of claim 92, wherein the buffer is suitable for naked formulation.97.The method of claim 96, wherein the buffer is a sodium chloride solution or Ringer's solution containing NaCl, KCl, CaCl2, NaHCO3, and / or MgCl2.98.The method of claim 97, wherein the concentration of Ca2+ is in a range of 0.75 mM-1.5 mM.99.The method of claim 96, wherein the buffer is a 10 mM citric acid buffer solution and 130 M sodium chloride solution, with a pH range of 6-7.5.100.The method of claim 96, wherein the buffer is phosphate buffer and / or acetate buffer.101.The method of claim 96, wherein the buffer further comprises glucose, sucrose, and / or trehalose.102.The method of claims 97 to 101, wherein a naked RNA formulation comprises buffer and one or more circRNA (s) .103.The method of claim 102, wherein the concentration of circRNA (s) is in a range of 500 ng / μL-2000 ng / μL.104.The method of claim 92, wherein the composition further comprises a pharmaceutically acceptable excipient.105.The method of claim 104, wherein the pharmaceutically acceptable excipient is selected from the group consisting of a solvent, dispersion media, diluent, dispersion, suspension aid, surface active agent, isotonic agent, thickening or emulsifying agent, preservative, core-shell nanoparticles, polymer, peptide, protein, cell, hyaluronidase, and mixtures thereof.106.The method of claim 92, wherein the subject is suffering from a disease responsive to HGF therapy.107.The method of claim 106, wherein the disease is selected from the group consisting of heart failure with reduced or preserved ejection fraction, kidney disease, a disease involving skin grafting and tissue grafting post-MI cardiac dysfunction, ischemic heart disease, a vascular injury from trauma or surgery, a skin ulcer including a diabetic ulcer, diabetic foot, critical limb ischemia, lower limb ischemia, pulmonary hypertension, stable severe angina pectoris, refractory angina, congenital and acquired maxillofacial defects, alveolar bone atrophy, ligament or tendon lesions, ocular disease, peripheral arterial disease, atherosclerosis obliterans (ASO) , thromboangiitis obliterans (TAO) , chronic limb-threatening ischemia (CLTI) , and leg ulcers in pediatric patients with sickle cell disease.108.The method of claim 106, wherein the disease is heart failure with reduced or preserved ejection fraction.109.The method of claim 106, wherein the disease is post-MI cardiac dysfunction.110.The method of claim 106, wherein the disease is ischemic heart disease.111.The method of claim 106, wherein the disease is a vascular injury from trauma or surgery.112.The method of claim 106, wherein the disease is a skin ulcer including a diabetic ulcer.113.The method of claim 106, wherein the disease is diabetic foot.114.The method of claim 106, wherein the disease is critical limb ischemia.115.The method of claim 106, wherein the disease is lower limb ischemia.116.The method of claim 106, wherein the disease is pulmonary hypertension.117.The method of claim 106, wherein the disease is stable severe angina pectoris.118.The method of claim 106, wherein the disease is refractory angina.119.The method of claim 106, wherein the disease is maxillofacial defects.120.The method of claim 119, wherein the disease is congenital or acquired maxillofacial defects.121.The method of claim 106, wherein the disease is alveolar bone atrophy.122.The method of claim 106, wherein the disease is ligament or tendon lesions.123.The method of claim 106, wherein the disease is ocular disease.124.The method of claim 106, wherein the disease is peripheral arterial disease.125.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject via intramuscular, intradermal, subcutaneous, intracranial, intrathecal, vitreous, and subretinal, muscular, cardiac, intracardiac, or epicardiac route, through a portal vein catheter, through a coronary sinus catheter, and / or by direct administration into the area to be treated.126.The method of claim 92, wherein the composition is delivered to the subject via microneedles, hydrogels, or sprays.127.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject intramuscularly.128.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject intradermally.129.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject subcutaneously.130.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject intracranially.131.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject intrathecally.132.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject vitreously.133.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject subretinally.134.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject muscularly.135.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject cardiacly.136.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject intracardially or epicardially, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.137.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject through a portal vein catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.138.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject through a coronary sinus catheter, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.139.The method of claim 92, wherein the composition is administered to the subject by direct administration into the area to be treated, preferably at a fixed-dosage in multiple administrations.140.The method of claim 92, wherein the composition is suitable for a naked formulation.141.The method of claim 140, wherein the naked formulation is administered to the subject via intradermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intrathecal, vitreous, muscular, cardiac, and subretinal.142.A method for increasing wound healing in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.143.A method for inducing neovascularization in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.144.A method for inducing angiogenesis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.145.A method for inducing vasodilation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.146.A method for inducing blood flow upregulation in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.147.A method for increasing capillary and / or arteriole density in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.148.A method for attenuating fibrosis in a mammalian tissue or a subject comprising contacting said mammalian tissue or subject with the composition of any one of claims 1 to 20.149.The method of claim 27 wherein the subject is a human.

Images