Treatment method with focal adhesion kinase inhibitor

Abstract

A method for treating cancer, especially small-cell lung cancer with a compound of formula I, e.g. compound A, the pharmaceutically acceptable salt or the solvate thereof, as a focal adhesion kinase inhibitor. A pharmaceutical combination or a kit comprising the compound and a chemotherapy agent, e.g. topotecan, etoposide, or carboplatin.

Description

Treatment method with focal adhesion kinase inhibitor

[0001] The present invention claims the priority of the PCT / CN2024 / 091286, filed on May 6, 2024 , the contents of which are incorporated herein by its entirety.Field of invention

[0002] The present invention relates to a method of treating cancer, especially small-cell lung cancer. The method further involves the administration of a focal adhesion kinase inhibitor (e.g. compound A disclosed herein) . The method further involves the co-administration of a focal adhesion kinase inhibitor and a chemotherapy agent (e.g. topotecan, etoposide, and carboplatin. )

[0003] Prior arts

[0004] Lung cancer is one of the most common malignant tumors in the world, and it is the cancer with the highest incidence and mortality in China. In the past thirty years, the growth rat of lung cancer in China has reached as high as 465%, and the mortality rate is close to the incidence rate, accounting for about 40%of the global total. Small-cell lung cancer (SCLC) is a genetically heterogeneous disease with no standardized targeted therapy options. Despite the recent advancement of immune checkpoint inhibitors, improvements in overall survival have been modest, and platinum-based chemotherapy combined with topoisomerase inhibitors remains the standard of care in SCLC. However, patients have a limited benefit in overall survival from these treatment regimens. SCLC remains a difficult-to-treat disease and is associated with a dismal prognosis in most patients. Discovering biomarkers and developing corresponding targeted treatment have been challenging.

[0005] FAK, a non-receptor tyrosine kinase, has been reported to regulate cellular proliferation, migration, invasion, and DNA-damage repair. Previous studies have shown that FAK is amplified and overexpressed in SCLC tumors. FAK6, 7, a splice isoform of FAK that increases the phosphorylation (activation) of FAK (pFAK) , has been reported to cause chemoresistance and poor outcomes in patients with non-small-cell lung cancer (NSCLC) . Tumor cells harboring FAK6, 7 (relative to FAKWT) are more sensitive to FAK inhibition. However, the effect of FAK6, 7 expression and its implication in SCLC remain unknown.

[0006] Content of the present invention

[0007] The present invention is related to an improved treatment method of cancer, especially small-cell lung cancer with compound of formula I e.g. compound A. The disclosure further provides combinations of compound of formula I, e.g. compound A and first-or second-line chemotherapy agents, e.g. topotecan, etoposide, or carboplatin. For in vitro and in vivo studies, it is found that the compound of formula I and the combination have obvious synergistic anti-tumor effect.

[0008] In one aspect, the present disclosure provides a method for the treatment of cancer in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound represented by formula I, a pharmaceutically acceptable salt or a solvate thereof;

[0009] wherein,

[0010] R1a and R1b are independently hydrogen, C1-6 alkyl, or C3-8 cycloalkyl;

[0011] R2a and R2b are independently hydrogen, C1-6 alkyl, or C3-8 cycloalkyl;

[0012] R3 is hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, or 4-8 membered heterocyclyl, wherein the heteroatom is independently N, O or S, and the number of heteroatom is 1, 2, 3 or 4;

[0013] R4 is C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl;

[0014] R5 is halo;

[0015] R6 is C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl; and

[0016] R7 is hydrogen, C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl,

[0017] with proviso that when R1a, R1b, R2a, and R2b are each hydrogen, then R3 is C3-6 cycloalkyl, or 4-8 membered heterocyclyl.

[0018] In some embodiments, R1a and R1b are H.

[0019] In some embodiments, R2a and R2b are H.

[0020] In some embodiments, R3 is 4-8 membered heterocyclyl, preferably, R3 is

[0021] In some embodiments, R4 is C1-4 alkyl, preferably, R4 is isopropyl.

[0022] In some embodiments, R5 is Cl.

[0023] In some embodiments, R6 is C1-4 alkyl, preferably, R6 is isopropyl.

[0024] In some embodiments, R7 is C1-4 alkyl, preferably, R7 is methyl.

[0025] In some embodiments, the compound represented by formula I is a compound represented by formula I-1:

[0026] wherein, R1a, R1b, R2a, R2b, and R3 are as defined in any of the embodiments.

[0027] In some embodiments, the compound represented by formula I is a compound A:

[0028] In some embodiments, the compound represented by formula I is 5-chloro-N2- (2-isopropoxy-5-methyl-4- (1- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) -1, 2, 3, 6-tetrahydropyridin-4-yl) phenyl) -N4- (2- (isopropylsulfonyl) phenyl) pyrimidine-2, 4-diamine.

[0029] In some embodiments, the cancer is small-cell lung cancer.

[0030] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered in an amount of 10mg / day-4000 mg / day, e.g. 10 mg / day, 20 mg / day, 30 mg / day, 40 mg / day, 50 mg / day, 100 mg / day, 150 mg / day, 200 mg / day, 250 mg / day, 300 mg / day, 350 mg / day, 400 mg / day, 450 mg / day, 500 mg / day, 550 mg / day, 600 mg / day, 650 mg / day, 700 mg / day, 750 mg / day, 800 mg / day, 850 mg / day, 900 mg / day, 950 mg / day, 1000 mg / day, 1200 mg / day, 1500 mg / day, 2000 mg / day, 2500 mg / day, 3000 mg / day, 3500 mg / day or 4000mg / day.

[0031] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered orally.

[0032] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered once a day, twice a day, or three times a day, e.g. once a day.

[0033] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered continuously until disease progression or intolerable toxicity occurs.

[0034] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered singly.

[0035] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered in combination with a chemotherapy agent.

[0036] In some embodiments, the chemotherapy agent is first-or second-line chemotherapy agent, e.g. the chemotherapy agent is DNA synthesis inhibitor, DNA topoisomerase I inhibitor, or DNA topoisomerase II inhibitor, e.g. the chemotherapy agent is topotecan, etoposide, or carboplatin.

[0037] In some embodiments, the chemotherapy agent is administered in an amount of 0.1mg / m2 -1000mg / m2, or AUC 1mg / ml / min-100mg / ml / min, e.g. 1mg / m2, 2mg / m2, 100mg / m2 or 5mg / ml / min.

[0038] In some embodiments, the chemotherapy agent is topotecan, and is administered in an amount of 1 mg / m2, 1.25 mg / m2, 1.5 mg / m2 or 2mg / m2.

[0039] In some embodiments, the chemotherapy agent is etoposide, and is administered in an amount of 60–120 mg / m2, e.g. 60 mg / m2, 80 mg / m2, 100mg / m2 or 120mg / m2.

[0040] In some embodiments, the chemotherapy agent is carboplatin, and is administered in an amount of AUC 3-10 mg / ml / min, e.g. 5mg / ml / min.

[0041] In some embodiments, the chemotherapy agent is topotecan, and is administered on days 1 to 5 of every 21-day cycle.

[0042] In some embodiments, the chemotherapy agent is etoposide, and is administered on days 1 to 3 of every 21-day cycle.

[0043] In some embodiments, the chemotherapy agent is carboplatin, and is administered on the 1st day of every 21-day cycle.

[0044] In some embodiments, the chemotherapy agent is topotecan, and is administered on days 1 to 5 of every 21-day cycle, and is administered in an amount of 1.25 mg / m2.

[0045] In some embodiments, the chemotherapy agent is etoposide, and is administered on days 1 to 3 of every 21-day cycle, and is administered in an amount of 100mg / m2.

[0046] In some embodiments, the chemotherapy agent is carboplatin, and is administered on the 1st day of every 21-day cycle, and is administered in an amount of AUC 5mg / ml / min.

[0047] In some embodiments, the chemotherapy agent is administered intravenously.

[0048] In some embodiments, the chemotherapy agent is administered once a day, twice a day, or three times a day, e.g. once a day.

[0049] In some embodiments, the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof, and the chemotherapy agent are administered together, simultaneously, sequentially or alternately.

[0050] In some embodiments, the weight ration between the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof and the chemotherapy agent is (0.1-1000) : (0.1-1000) , e.g. 1: (30-3000) , e.g. 1: (2122-2520) or 1: (44-53) .

[0051] Disclosed herein is an improved treatment method for treating cancer, especially small-cell lung cancer with compound A.

[0052] In another aspect, the disclosure provides a pharmaceutical combination comprising the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof as defined in any of the embodiments, and a chemotherapy agent.

[0053] In some embodiments, the chemotherapy agent is as defined in any of the embodiments.

[0054] In some embodiments, the pharmaceutical combination is used for treating cancer, e.g. small-cell lung cancer.

[0055] In another aspect, the disclosure provides a pharmaceutical combination of compound A with a chemotherapy agent, e.g. topotecan, etoposide, and / or carboplatin, and further comprising a pharmaceutically acceptable carrier.

[0056] In another aspect, the disclosure provides a kit, comprising:

[0057] (a) a first component in a first container, the first component comprising the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt or the solvate thereof as defined in any one of the above embodiments, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier;

[0058] (b) a second component in a second container, the second component comprising a chemotherapy agent, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier;

[0059] (c) an optional specification.

[0060] In some embodiments, the chemotherapy agent is as defined in any of the embodiments.

[0061] In another aspect, the present disclosure provides a use of the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof as defined in any of the embodiments in the manufacture of a medicament for the treatment of cancer.

[0062] In some embodiments, the cancer is small-cell lung cancer.

[0063] In another aspect, the disclosure provides use of compound A with a chemotherapy agent, e.g. topotecan, etoposide, and / or carboplatin for treating cancer, especially small-cell lung cancer.

[0064] The term "comprises" refers to “includes, but is not limited to" .

[0065] Unless otherwise stated, the description "... independently" used in the present disclosure should be understood in a broad sense, meaning that each described individual is independent of each other and can be the same or different specific groups independently. In more detail, the description "... independently" can mean either that the specific options expressed by the same symbols in different groups do not affect each other; or that the specific options expressed by the same symbols in the same group do not affect each other.

[0066] The term “halogen” refers to F, Cl, Br, or I.

[0067] The term “alkyl” refers to linear or branched, saturated monovalent hydrocarbon group having a specified number of carbon atoms (e.g. C1-C4) . For example, “C1-4 alkyl” refers to a linear saturated monovalent hydrocarbon radical of 1 to 4 carbon atoms or a branched saturated monovalent hydrocarbon radical of 3 to 6 carbon atoms. Examples of C1-6 alkyl include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl (including all isomeric forms, e.g. n-propyl and isopropyl) , butyl (including all isomeric forms, e.g., n-butyl, isobutyl, sec-butyl, and t-butyl) .

[0068] The term "cycloalkyl" refers to a cyclic, saturated monovalent hydrocarbon group having a specified number of carbon atoms (e.g. C3-C8) , which is monocyclic or bicyclic. For example, the term “C3-8 cycloalkyl” refers to a C3-8 cyclic hydrocarbon radical. Examples of C3-8 cycloalkyl include, but are not limited to C3-6 cycloalkyl, such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, or cyclohexyl.

[0069] The term "heterocyclyl" refers to saturated or un saturated monovalent group having a specified number of heteroatoms (e.g. 1, 2, 3, or 4) , a specified number of ring atoms (e.g. 4-8 membered) , and a specified heteroatom species (one or more independently selected from the group consisting of N, O, and S) , which is monocyclic or polycyclic. Heterocyclyl is attached to the rest of the molecule through a carbon atom or a heteroatom.

[0070] As used herein, the term “treating” , "treatment" refers to therapeutic therapy. When referring to a particular condition, the treatment refers to: (1) alleviating one or more of the biological manifestations of a disease or a condition, (2) interfering with (a) one or more points in the biological cascade that leads to a condition or (b) one or more of the biological manifestations of a condition, (3) improving one or more of the symptoms, effects or side effects associated with a condition or one or more of the symptoms, effects or side effects associated with a condition or treatment thereof, or (4) slowing the progression of one or more of the biological manifestations of a disorder or a condition.

[0071] As used herein, the term "therapeutically effective amount" refers to an amount that is effective to elicit the desired biological or medical response, including the amount of a compound that, when administered to a subject for treating a disorder, is sufficient to effect such a treatment of the disorder. The therapeutically effective amount will vary depending on the disorder, and its severity, and the age, weight, etc. of the subject to be treated. The therapeutically effective amount may be in one or more doses (for example, a single dose or multiple doses may be required to achieve the desired treatment endpoint) . A therapeutically effective amount may be given in an effective amount if, in conjunction with one or more other agents, a desirable or beneficial result is achieved. Suitable doses of any co-administered compounds may optionally be lowered due to a combined effect, additive or synergistic, of the compound.

[0072] As used herein, the term "subject" to which administration is contemplated includes any animal (e.g. humans) .

[0073] As used herein, the term "pharmaceutically acceptable" refer to compounds, salts, compositions, dosage forms and other materials which are used in preparing a pharmaceutical composition that is suitable for veterinary or human pharmaceutical use.

[0074] As used herein, the term "pharmaceutically acceptable salt" refers to those salts which are, within the scope of sound medical judgment, suitable for use in contact with the tissues of humans and lower animals without undue toxicity, irritation, allergic response and the like, and are commensurate with a reasonable benefit / risk ratio. Pharmaceutically acceptable salts are well known in the art. For example, S. M. Berge et al., describe pharmaceutically acceptable salts in detail in J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1–19. Pharmaceutically acceptable salts of compound 1 include those derived from suitable inorganic and organic acids and bases.

[0075] As used herein, the use of the terms "a" , "an" , "the" , and similar referents in the context of describing the present disclosure (especially in the context of the claims) are to be construed to cover both the singular and the plural, unless otherwise indicated. The use of any and all examples, or exemplary language (including “e.g. ” , "such as" and “for example” ) provided herein, is intended to better illustrate the present disclosure and is not a limitation on the scope of the present disclosure, unless otherwise claimed. No language in the specification should be construed as indicating any non-claimed element as essential to the practice of the present disclosure.

[0076] As used herein, the term "dose" is an amount of the certain substance to be taken at one time.Brief description of the drawings

[0077] Figure 1 shows that treatment of a range of SCLC cell lines with Compound A identifies a spectrum of responses.

[0078] Figure 2 shows that IC50 for Compound A in SCLC cell lines, and SCLC cell lines harboring FAK6, 7 are more sensitive to Compound A.

[0079] Figures 3-4 shows that Compound A inhibits FAK activity in a dose dependent manner.

[0080] Figure 5 shows that Compound A in SCLC expressing FAK slicing variants; specifically, antiproliferation effect of the combination of Compound A and topotecan in H526 cells.

[0081] Figure 6 shows that Compound A in SCLC expressing FAK slicing variants; specifically, synergy score of the combination of Compound A and topotecan in H526 cells.

[0082] Figure 7 shows that Compound A in SCLC expressing FAK slicing variants; specifically, antiproliferation effect of the combination of Compound A and topotecan in H69 cells.

[0083] Figure 8 shows that Compound A in SCLC expressing FAK slicing variants; specifically, synergy score of the combination of Compound A and topotecan in H69 cells.

[0084] Figure 9 shows that antiproliferation effect of the combination of Compound A and topotecan in H209 cells.

[0085] Figure 10 shows that synergy score of the combination of Compound A and topotecan in H209 cells.

[0086] Figure 11 shows that antiproliferation effect of the combination of Compound A and topotecan in H446 cells.

[0087] Figure 12 shows that synergy score of the combination of Compound A and topotecan in H446 cells.

[0088] Figures 13-16shows that antiproliferation effect of the combination of Compound A and carboplatin plus etoposide in H446 cells.

[0089] Figures 17-24 shows that Compound A in combination with etoposide and carboplatin has synergy effect in inhibiting cell growth on H526 cell line, synergy score is calculated by SynergyFinder 3.0 Heatmaps indicating BLlSS synergy scores.

[0090] Figure 25 shows that Compound A enhances the antitumor effect of Topotecan; specifically, Compound A enhanced the topotecan-induced apoptosis in H446 cells.

[0091] Figure 26 shows that total apoptosis rate of each group, n=3, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0092] Figure 27 shows that total apoptosis rate of each group, n=3, **p < 0.01, ***p < 0.001.

[0093] Figure 28 shows that H446 cells were treated with 2μM Compound A combined with 0.3 μM topotecan, and western blot assay was used to measure the pFAK and γH2AX expression level.

[0094] Figure 29shows that H446 cells were treated with 2, 4μM Compound A combined with 50 μM carboplatin plus 2.5μM etoposide, and western blot assay was used to measure the pFAK and γH2AX expression level.

[0095] Figure 30 shows that Tumor growth of H446 xenograft mice after administration of different compounds.

[0096] Figure 31 shows that Response on day 22 of H446 xenograft mice after administration of different compounds.

[0097] Figure 32 shows that Relative tumor volume, T / C and synergy ratio of each group on day 22 after treatment, wherein ***p < 0.001, vs. Vehicle;  p < 0.001, vs. APG-2449 100mg / kg;  p < 0.01, vs. Topotecan 1 mg / kg; §§§p < 0.001, vs. Carboplatin 30 mg / kg + Etoposide 15 mg / kg.

[0098] Detailed description of the preferred embodiment

[0099] The following examples further illustrate the present invention, but the present invention is not limited thereto.

[0100] Below presents preferred embodiments of the present invention based on the drawings in order to illustrate the technical schemes of the present invention in detail.

[0101] Example 1 SCLC cell lines harboring FAK6, 7 are more sensitive to Compound A compared to cell line expressing FAKWT

[0102] Materials and methods:

[0103] DMS-114, H446, H209, H146, H889, H69 and H526 cell lines are purchased from Cobioer company or SIBCB. H446, H209, H146, H889 and H526 cells are cultured in RPMI 1640 (gibco, Cat. C11875500BT) with 10%FBS (SIGMA, Cat. F8318) , 1%penicillin  / streptomycin (gibco, Cat. 15140-122) . DMS-114 is cultured in Waymouth’s medium (gibco, Cat. 11220035) with 10%FBS (SIGMA, Cat. F8318) , 1%penicillin  / streptomycin (gibco, Cat. 15140-122) . All cells are cultured in incubator (CLM-170B-8-CF, ESCO) with 37℃, 5%CO2. Compound A is provided by Jiangsu Ascentage Pharma Group Corp. Ltd. Compound A was dissolved in DMSO with the concentration of 10 mM and diluted to the final concentration according to the experimental scheme, and the final solution was a clarified solution. Preparation and use are carried out under sterile conditions.

[0104] Cell viability was assessed using the Luminescent Cell Viability Assay. In this assay, the in vitro proliferation inhibitory effect of Compound A was evaluated on the DMS-114, H446, H209, H146, H889, H69 and H526 cell lines. All cells were treated with Compound A at indicated concentrations for 72 hours. The inhibitory effects on cell growth were assessed using the Cell titer-Glo (CTG) assay, with cell viability data presented as Mean±SD based on n=3 replicates.

[0105] Results and conclusion:

[0106] In in vitro experiments, the results (Fig. 1-2) have shown that The SCLC cell lines (including H446, H69, and H526) harboring FAK6, 7 displayed increased sensitivity to Compound A.

[0107] This suggests that FAK6, 7 was associated with increased pFAK and kinase activity in SCLC. Compared with FAKWT cells, FAK6, 7-expressing SCLC cells were more vulnerable to FAK inhibition.

[0108] Above all, the antiproliferative effects of Compound A on SCLC cell lines are illustrated in Figures 1-2. The results showed that Compound A, as a single agent, demonstrated significant antiproliferative activity against all FAK6, 7 positive cell lines but displayed modest antiproliferative activity against FAKWT cell lines. These results show that SCLC cells with FAK constitutive activation are more sensitive to Compound A than the cell line expressing wild type FAK.

[0109] Example 2 Compound A inhibits FAK activity in a dose dependent manner

[0110] The result (Figures 3-4) has shown that FAK activity was inhibited by Compound A (0.03 , 0.1, 0.3, 1, 3μM) in a dose-dependent manner.

[0111] Conclusion: The SCLC cell lines (including H446) harboring FAK6, 7 displayed increased sensitivity to Compound A in a dose-dependent manner compared with the FAKWT cell line (DMS-114) .

[0112] Example 3: Compound A synergistically decreased cell viability when combined with chemotherapy in SCLC cell lines.

[0113] Materials and methods:

[0114] H446, H209, H69 and H526 cell lines as described in example 1 were used for drug combination study. CTG assay was used to assess cell viability. Compound A is from Ascentage as described in example 1. Topotecan (S9321) , carboplatin (S1215) and etoposide (S1225) are purchased from Selleckchem. For 2 drugs combination study, H526, H69, H446 and H 209 cells were treated with topotecan alone or in combination with Compound A for 72 hours. For 3 drugs combination study, H446 and H526 cells were treated with etoposide plus carboplatin alone or in combination with Compound A for 72 hours. The inhibitory effects on cell growth were assessed using CTG assay, with cell viability data presented as Mean±SD based on n=3 replicates. Results and conclusion:

[0115] The antiproliferative effects of Compound A combined with topotecan are illustrated in Figures 5-12. The results showed that Compound A can enhance the antiproliferative effect of topotecan on H526, H69, H446 and H209 cells. Likewise, Compound A can also augment the antiproliferative effect of carboplatin plus etoposide on H446 and H526 cells, which is shown in Figures 13-16 and Figures 17-24. The synergy effect is evaluated by SynergyFinder software. These results disclose that Compound A can enhance the antiproliferative effects of both the first line (carboplatin plus etoposide) and second line (topotecan) chemotherapeutic agents.

[0116] The results (Figures 5-8) have shown that APG-2429 combined with topotecan inhibited cell viability in a synergistic way in SCLC cells (H69, H526) .

[0117] The results (Figures 17-24) have shown that APG-2429 combined with etoposide &carboplatin inhibited cell viability in a synergistic way in SCLC cells (H526) .

[0118] Example 4: Compound A combined with topotecan or etoposide plus carboplatin enhanced DNA damage and apoptosis in SCLC cell lines

[0119] Materials and methods:

[0120] H446 and H69 cell lines as described in example 1 were used for apoptosis assay and western blot assay. For the apoptosis assay, H446 cells were treated with Compound A or topotecan alone or in combination for 48 hours. Then annexin v / PI staining was performed to assess the cell apoptosis by flow cytometry. For western blot assay, H446 or H69 cells were treated with Compound A or chemotherapeutic agents alone or in combination for 48 hours. Then western blot assay was used to detect the expression of pFAK (CST#3283) , FAK (CST#3285) , γH2AX (CST#2577) , cleaved-caspase 3 (CST#9664) , cleaved-PARP (CST#5625) and β-actin (CST#4967) .

[0121] Results and conclusion:

[0122] Total cell apoptosis rate of H446 is shown in Figures 25-27. Compound A in combination of topotecan (total apoptosis rate %=88.65±2.19) can significantly increase the apoptosis on H446 cells compared with Compound A (total apoptosis rate %=51.6±3.82) or topotecan (total apoptosis rate %=64.2±0.42) alone. Mechanistically, inhibition of FAK by Compound A can enhance the DAN damage react induced by chemotherapeutic agents. The results are illustrated in Figures 28-29. The results showed that Compound A can increase the expression of γH2AX, cleaved caspase 3 or cleaved PARP when combined with topotecan or carboplatin plus etoposide, indicating that inhibition of FAK activity by Compound A enhance the DNA damage react and cell apoptosis induced by chemotherapeutic agents.

[0123] Example 5: Compound A synergistically enhanced the antitumor effects of chemotherapeutic agents in the H446 xenograft model.

[0124] Materials and methods:

[0125] All animal studies were conducted in accordance with the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals and were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of Ascentage. Female Balb / c nude mice aged 6 to 8 weeks were obtained from Gempharmatech. Mice were maintained in laminar flow units in sterile filter-top cages with Alpha-Dri bedding in a 12 / 12 dark / light cycle, at controlled temperature (20–26℃) and humidity conditions (30–70%) . 5x106 / mouse H446 cells in 0.2 mL 30%Matrigel in PBS were implanted subcutaneously into the flank of mice. 5x106 / mouse. Mice were randomized into groups once the tumors had attained a volume of 120 mm3. Tumor-bearing mice were treated with Compound A (PO, QD × 21D) , topotecan (PO, QD*5 x 3W) , etoposide + carboplatin (IP, QW × 3W) , Compound A + topotecan, Compound A + etoposide + carboplatin or vehicle. Tumor volumes were measured twice weekly and calculated using the formula: mm3 = 0.52 × L × W2.

[0126] Results and conclusion:

[0127] Results are shown in Figures 30-32. In Balb / c mice bearing H446 CDX tumors with FAK6, 7, Compound A 100 mg / kg demonstrated antitumor effect, with T / C (%) values of 92.1. Treatment with topotecan, and carboplatin plus etoposide resulted in a T / C (%) of 11.69 and 21.03 respectively. When topotecan or carboplatin plus etoposide combined with Compound A, the response of tumor bearing mice in combination regiment treating group (T / C of Compound A+topotecan is 0.49%, T / C of Compound A+carboplatin+etoposide is 5.09) were better than single agent treating group.

[0128] In summary, Compound A synergistically enhanced the antitumor effects of topotecan (synergy ratio: 22.08) and etoposide plus carboplatin (synergy ratio: 3.81) in the H446 xenograft model.

[0129] In summary, Compound A synergistically enhanced antitumor effects of both first-and second-line chemotherapy commonly used in SCLC. Compound A might sensitize SCLC cells to chemotherapy by increasing DNA damage and apoptosis. These encouraging results support further in vivo study (ongoing) and clinical development of Compound A for SCLC treatment.

[0130] Compound A sensitized FAK6, 7-expressing SCLC cells to chemotherapy, such as topotecan or etoposide and carboplatin, in a synergistic manner. This effect was not observed in FAKWT cells. Mechanistically, Compound A combined with topotecan led to elevated DNA damage and increased apoptosis compared with either Compound A or topotecan alone.

[0131] It is to be understood that the foregoing description of two preferred embodiments is intended to be purely illustrative of the principles of the invention, rather than exhaustive thereof, and that changes and variations will be apparent to those skilled in the art, and that the present invention is not intended to be limited other than expressly set forth in the following claims.

Claims

1.A method for the treatment of cancer in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound represented by formula I, a pharmaceutically acceptable salt or a solvate thereof; wherein,R1a and R1b are independently hydrogen, C1-6 alkyl, or C3-8 cycloalkyl;R2a and R2b are independently hydrogen, C1-6 alkyl, or C3-8 cycloalkyl;R3 is hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, or 4-8 membered heterocyclyl, wherein the heteroatom is independently N, O or S, and the number of heteroatom is 1, 2, 3 or 4;R4 is C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl;R5 is halo;R6 is C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl; andR7 is hydrogen, C1-4 alkyl, or C3-6 cycloalkyl,with proviso that when R1a, R1b, R2a, and R2b are each hydrogen, then R3 is C3-6 cycloalkyl, or 4-8 membered heterocyclyl.2.The method of claim 1, wherein the cancer is small-cell lung cancer.3.The method of claim 1, wherein the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered in an amount of 10mg / day-4000 mg / day, e.g. 10 mg / day, 20 mg / day, 30 mg / day, 40 mg / day, 50 mg / day, 100 mg / day, 150 mg / day, 200 mg / day, 250 mg / day, 300 mg / day, 350 mg / day, 400 mg / day, 450 mg / day, 500 mg / day, 550 mg / day, 600 mg / day, 650 mg / day, 700 mg / day, 750 mg / day, 800 mg / day, 850 mg / day, 900 mg / day, 950 mg / day, 1000 mg / day, 1200 mg / day, 1500 mg / day, 2000 mg / day, 2500 mg / day, 3000 mg / day, 3500 mg / day or 4000 mg / day.4.The method of claim 1, which satisfies any one or more of the conditions (1) - (4) :1) the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered orally;2) the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered once a day, twice a day, or three times a day, e.g. once a day;3) the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered continuously until disease progression or intolerable toxicity occurs;4) the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered singly.5.The method of claim 1, wherein the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof is administered in combination with a chemotherapy agent.6.The method of claim 5, wherein the chemotherapy agent is first-or second-line chemotherapy agent, e.g. the chemotherapy agent is DNA synthesis inhibitor, DNA topoisomerase I inhibitor, or DNA topoisomerase II inhibitor, e.g. the chemotherapy agent is topotecan, etoposide, or carboplatin.7.The method of claims 5 or 6, which satisfies any one or more of the conditions (1) - (4) :1) the chemotherapy agent is administered in an amount of 0.1mg / m2 -1000mg / m2, or AUC 1mg / ml / min-100mg / ml / min, e.g. 1mg / m2, 2mg / m2, 100mg / m2 or 5mg / ml / min;2) the chemotherapy agent is administered intravenously;3) the chemotherapy agent is administered once a day, twice a day, or three times a day, e.g. once a day;4) the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof, and the chemotherapy agent are administered together, simultaneously, sequentially or alternately.8.The method of claim 6, which satisfies any one or more of the conditions (1) - (6) :1) the chemotherapy agent is topotecan, and is administered in an amount of 1 mg / m2, 1.25 mg / m2, 1.5 mg / m2 or 2mg / m2;2) the chemotherapy agent is etoposide, and is administered in an amount of 60–120 mg / m2, e.g. 60 mg / m2, 80 mg / m2, 100mg / m2 or 120mg / m2;3) the chemotherapy agent is carboplatin, and is administered in an amount of AUC 3-10 mg / ml / min, e.g. 5mg / ml / min;4) the chemotherapy agent is topotecan, and is administered on days 1 to 5 of every 21-day cycle;5) the chemotherapy agent is etoposide, and is administered on days 1 to 3 of every 21-day cycle;6) the chemotherapy agent is carboplatin, and is administered on the 1st day of every 21-day cycle.9.The method of claim 1, which satisfies any one or more of the conditions (1) - (7) :1) R1a and R1b are H;2) R2a and R2b are H;3) R3 is 4-8 membered heterocyclyl, preferably, R3 is4) R4 is C1-4 alkyl, preferably, R4 is isopropyl;5) R5 is Cl;6) R6 is C1-4 alkyl, preferably, R6 is isopropyl;7) R7 is C1-4 alkyl, preferably, R7 is methyl.10.The method of claim 1, the compound represented by formula I is a compound represented by formula I-1: wherein, R1a, R1b, R2a, R2b, and R3 are as defined in claims 1 or 9.11.The method of claim 1, the compound represented by formula I is a compound A; 12.A pharmaceutical combination comprising the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt thereof or the solvate thereof as defined in any of claims 1, 9, 10 and 11, and a chemotherapy agent.13.The pharmaceutical combination of claim 12, wherein the chemotherapy agent is as defined in any one of claims 6-8.14.The pharmaceutical combination of claim 12, wherein the pharmaceutical combination is used for treating cancer, e.g. small-cell lung cancer.15.The pharmaceutical combination of claim 12, comprising compound A, and a chemotherapy agent, e.g. topotecan, etoposide, and / or carboplatin, and further comprising a pharmaceutically acceptable carrier; 16.A kit, comprising:(a) a first component in a first container, the first component comprising the compound represented by formula I, the pharmaceutically acceptable salt or the solvate thereof as defined in any one of claims 1, 9, 10 and 11, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier;(b) a second component in a second container, the second component comprising a chemotherapy agent, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier; preferably, the chemotherapy agent is as defined in any one of claims 6-8, and(c) an optional specification.

Images