Methods of treating breast cancer using Anti-her2 antibody-drug conjugates and other therapeutic agents

Abstract

Provided herein are methods for treating or preventing progression of cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-PD-1 antibody, e.g., toripalimab, and an anti-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule. Compositions, uses, and kits related thereto are also provided.

Description

METHODS OF TREATING BREAST CANCER USING ANTI-HER2 ANTIBODY-DRUG CONJUGATES AND OTHER THERAPEUTIC AGENTSCROSS-REFERENCE TO RELATED APPLICATIONS

[0001] This application claims the benefit of priority of International Patent Application No. PCT / CN2023 / 138811, filed December 14, 2023, the content of which is hereby incorporated by reference in its entirety. SEQUENCE LISTING

[0002] The present application contains a sequence listing, which has been submitted electronically in XML format and is hereby incorporated by reference in its entirety. Said XML copy, created on December 6, 2024, is named “01218-0048-00PCT. xml” and is 17,527 bytes in size.FIELD

[0003] The present disclosure relates to methods for treating or preventing progression of breast cancer in an individual, as well as compositions, uses, and kits related thereto. In some embodiments, the methods comprise administering to the individual an effective amount of an anti-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule as a monotherapy or a combination therapy.BACKGROUND

[0004] ErbB2, also known as HER2 / neu, is a member of a family of tyrosine kinases that regulate cell growth and survival (Lengyel, C.G. et al. (2021) Gastrointest Disord 3 (1) : 1-22) . Overexpression and / or amplification of HER2 is seen in many malignancies including breast, gastric, ovarian, pancreatic, colorectal, and endometrial cancer (Neve, R.M. et al. (2001) Ann Oncol 12 (Suppl1) : S9-S13; Menard, S. et al. (2003) Oncogene 22 (42) : 6570-6578; Moasser, M.M. (2007) Oncogene 26 (45) : 6469-6487; Iqbal, N. et al. (2014) Mol Biol Int 2014: 852748) . Tumors that overexpress HER2 are thought to be more aggressive and associated with poorer overall survival (OS) compared to HER2-negative cancers. Cancers characterized by overexpression of HER2 (e.g., HER2-positive cancers) are often correlated with poor prognosis and / or are resistant to many standard therapies. The introduction of HER2-targeted therapy using either antibody-based therapies has led to significant and ongoing improvements in disease-free survival (DFS) , progression-free survival (PFS) , and OS in both the neoadjuvant / adjuvant and metastatic settings (Slamon, D.J. et al. (2001) N Engl J Med 344 (11) : 783-792; Geyer, C.E. et al. (2006) N Engl J Med 355 (26) : 2733-2743; Baselga 2012; Verma 2012) . HER2 is an effective therapeutic target in multiple solid tumors with anti-HER2 biologic agents, antibody-drug conjugates (ADC) , and small molecule drugs approved for patients with HER2 overexpressing / amplified (hereafter HER2+) breast and gastric cancers. As such, a handful of therapies targeting HER2 have been approved for treatment of HER2-positive cancer, including antibodies such as trastuzumab and pertuzumab, antibody-drug conjugates (ADCs) such as trastuzumab maytansine (T-DM1) .

[0005] Among the multiplicity of anticancer agents that have been developed in the last few decades, antibody-drug conjugates (ADCs) stand out in their ability to selectively deliver highly potent cytotoxic agents to target cancer cells, thus improving efficacy and limiting toxicities. ADCs are composed of three main components: an antibody, a linker, and a payload. Their mechanism of action can be summarized as follows: upon the binding of the antibody (Ab) to the antigen expressed on the surface of target cell, the ADC is internalized and processed to release the payload, which exerts its effects leading to cell death. Simultaneously with the development of this drug class, a paradigm shift occurred in a wide variety of cancer types with the evaluation and implementation of immunotherapy drugs becoming increasingly prominent. Immune checkpoint inhibitors (ICIs) targeting the PD-1 / PD-L1 axis have shown unprecedented clinical activity in multiple cancer types. These agents, reversing the tumor-mediated immune-cell suppression, have the potential to achieve durable responses. Unfortunately, only a limited fraction of patients experiences long-term benefit when treated with single-agent immunotherapies due to development of resistance to ICIs and / or limited clinical utility of ICIs. Combination treatments with other immunotherapies or different treatment modalities are needed to overcome these issues. Evidence in phase III clinical trials already supports combinations of immunotherapy with standard-of-care chemotherapy for a number of cancers. However, concerns related to possible increased toxicity or impaired efficacy, arise with combination treatments. In this regard, ADCs have the potential to induce less off-target toxicities and appear as a promising companion for combination strategies with ICIs. Available clinical evidence for combination treatment with ADCs and immunotherapy is reviewed in Nicolò, E. et al. (2022) , Cancer Treat Rev. 106: 102395.

[0006] Breast cancer is a common malignant tumor in women. Due to changes in people’s lifestyle concepts and ecological environment, the incidence of breast cancer is also increasing significantly. According to current treatment guidelines, breast cancer is generally classified as HER2-positive or HER2-negative. HER2-positive generally refers to IHC 3+ or IHC 2+ / FISH+ (IHC: immunohistochemistry detection; FISH: fluorescence in situ hybridization detection) . In addition, there are HER2-low expressing patients (IHC 2+ / FISH negative or IHC1+) (metastatictrialtalk. org / research-news / HER2-low-expressing-a-new-subcategory-of-HER2-negative-breast-cancer / ) . According to clinical statistics, more than 50%of breast cancer may be breast cancer with low HER2 expression level (Tarantino P et al. HER2-low breast cancer: pathological and clinical landscape. J Clin Oncol. 2020; 38 (17) : 1951-1962. doi: 10.1200 / JCO. 19.02488; Wolff A.C. et al. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Testing in Breast Cancer: American Society of Clinical Oncology / College of American Pathologists Clinical Practice Guideline Focused Update. J. Clin. Oncol. 2018; 36: 2105–2122. doi: 10.1200 / JCO. 2018.77.8738) . Despite recent advancements in the field, prognosis and treatment options remain poor for many patients with solid tumors, e.g., breast cancer. As such, there remains a need for safe and effective HER2-targeted monotherapy or combination therapies, particularly for treatment of breast cancer.

[0007] All references cited herein, including patent applications, patent publications, and UniProtKB / Swiss-Prot Accession numbers are herein incorporated by reference in their entirety, as if each individual reference were specifically and individually indicated to be incorporated by reference.SUMMARY

[0008] In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0009] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0010] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: In some embodiments according to any of the embodiments described herein, wherein the  antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0011] In some embodiments, disitamab vedotin is administered as a monotherapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered three doses of disitamab vedotin over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0012] In some embodiments, disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody such as toripalimab are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0013] In some embodiments, disitamab vedotin, an anti-PD-1 antibody such as toripalimab and carboplatin are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin, toripalimab and carboplatin are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein carboplatin is administered at a dose of AUC3, according to the Calvert method once every 2 weeks or 14 days, or at a dose of AUC1.5, according to the Calvert method, once a week or 7 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin, toripalimab and carboplatin over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0014] In some embodiments, disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody such as toripalimab are administered as a combination therapy, followed sequentially by administration of the combination of epirubicin, cyclophosphamide and toripalimab. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days, cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days, and toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days. In some embodiments, epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab are administered to the individual over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin intravenously at a dose of 2.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days; wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days in combination with cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days and in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days; and wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days. In some embodiments, the combination of DV and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days; and wherein the combination of epirubicin, cyclophosphamide and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.

[0015] In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0016] In some embodiments, the breast cancer is breast cancer with clinical stage T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition. In some embodiments, the method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer is a neoadjuvant treatment. In some embodiments, the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) . In some embodiments, the individual does not have bilateral invasive breast cancer. In some embodiments, the individual does not have previous history of invasive breast cancer. In some embodiments, the individual has not previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy within 5 years of surgery. In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin, and wherein the individual has not received disitamab vedotin or major surgery within 4 weeks prior to start of administration of disitamab vedotin as a monotherapy or combination therapy. In some embodiments, the individual has not received allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ transplantation. In some embodiments, the individual has not been previously treated with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other Antibody-Drug Conjugates.

[0017] In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0018] In some embodiments, the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0019] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: In  some embodiments according to any of the embodiments described herein, the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0020] In some embodiments, disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody such as toripalimab are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously at a dose of 3.0 mg / kg every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0021] In some embodiments, disitamab vedotin and letrozole are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein letrozole is administered orally at a dose of 2.5 mg once daily. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and letrozole over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0022] In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0023] In some embodiments, the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. In some embodiments, the individual comprises tumor IHC Ki67 ≥ 20%. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) . In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a breast pathological complete response (bpCR) rate in the population of individuals. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in PEPI score. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in one or more of preoperative endocrine prognostic index, including Ki67 expression in surgical specimens, pathological tumor size, lymph node status, and estrogen receptor (ER) levels. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole to a population of individuals results in an increased proportion of patients with PEPI score of 0.

[0024] In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided herein are methods for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0025] In some embodiments, the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.

[0026] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0027] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: In  some embodiments according to any of the embodiments described herein, the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0028] In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein the initial dose of pertuzumab is 840 mg intravenously the first week, and wherein any subsequent dose of pertuzumab is 420 mg intravenously; wherein pertuzumab is administered to the individual once every 3 weeks or 21 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and pertuzumab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0029] In some embodiments, the method further comprises administering an anti-PD-1 antibody such as toripalimab. In some embodiments, toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin, pertuzumab, and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0030] In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0031] In some embodiments, the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC3+, as measured by IHC assay. In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that exhibit HER2 gene amplification, as measured by ISH assay (ISH-positive) . In some embodiments according to any of the embodiments described herein, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a total pathological complete response (tpCR) rate in the population of individuals. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to the individual results in a complete response (CR) , partial response (PR) , or stable disease (SD) in the individual. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, results in an improvement from baseline in in the European Organization for Research and Treatment of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and / or emotional function scores. In some embodiments according to any of the embodiments described herein, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or as a combination therapy, results in improved levels of tumor-infiltrating lymphocytes, PD-L1 expression, and / or CD8.

[0032] In some embodiments according to any of the embodiments described herein, the individual is a human.

[0033] Also provided herein are compositions comprising the anti-HER2 antibody-drug conjugate described herein for use alone or in combination for treating breast cancer according to any of the methods described herein.

[0034] It is to be understood that one, some, or all of the properties of the various embodiments described herein may be combined to form other embodiments of the present invention. These and other aspects of the invention will become apparent to one of skill in the art. These and other embodiments of the invention are further described by the detailed description that follows.

[0035] Embodiment 1 is a method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0036] Embodiment 2 is a method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0037] Embodiment 3 is the method of embodiment 1 or 2, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.

[0038] Embodiment 4 is the method of any one of embodiments 1-3, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.

[0039] Embodiment 5 is the method of any one of embodiments 1-4, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0040] Embodiment 6 is the method of any one of embodiments 1-5, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises:

[0041] Embodiment 7 is the method of any one of embodiments 1-6, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0042] Embodiment 8 is the method of embodiment 7, wherein disitamab vedotin is administered as a monotherapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.

[0043] Embodiment 9 is the method of embodiment 7 or 8, wherein the individual is administered three doses of disitamab vedotin over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0044] Embodiment 10 is the method of embodiment 7, wherein disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody are administered as a combination therapy, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.

[0045] Embodiment 11 is the method of embodiment 7 or 10, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy.

[0046] Embodiment 12 is the method of embodiment 7, 10, or 11, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.

[0047] Embodiment 13 is the method of any one of embodiments 7 and 10-12, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0048] Embodiment 14 is the method of embodiment 7, 10, or 11, wherein disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin are administered as a combination therapy.

[0049] Embodiment 15 is the method of any one of embodiments 7, 10, 11, and 14, wherein disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein carboplatin is administered at a dose of AUC3, according to the Calvert method once every 2 weeks or 14 days, or at a dose of AUC1.5, according to the Calvert method, once a week or 7 days.

[0050] Embodiment 16 is the method of any one of embodiments 7, 10, 11, 14, and 15, wherein the individual is administered disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0051] Embodiment 17 is the method of any one of embodiments 7 and 10-12, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.

[0052] Embodiment 18 is the method of embodiment 17, wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days, cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days, and toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days.

[0053] Embodiment 19 is the method of embodiment 18, wherein epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab are administered to the individual over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.

[0054] Embodiment 20 is the method of embodiments 18 or 19, wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.

[0055] Embodiment 21 is the method of any one of embodiments 7 and 10-12, where disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy, followed sequentially by administration of the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab.

[0056] Embodiment 22 is the method of any one of embodiments 7, 10-12, and 17-21, wherein the individual is administered disitamab vedotin intravenously at a dose of 2.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days; wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days in combination with cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days and in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days; and wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days.

[0057] Embodiment 23 is the method of any one of embodiments 7, 10-12, and 17-22, wherein the combination of disitamab vedotin (DV) and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days; and wherein the combination of epirubicin, cyclophosphamide and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.

[0058] Embodiment 24 is the method of any one of embodiments 8-23, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0059] Embodiment 25 is the method of any one of embodiments 1-24, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.

[0060] Embodiment 26 is the method of any one of embodiments 1-25, wherein the method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer is a neoadjuvant treatment.

[0061] Embodiment 27 is the method of any one of embodiments 1-26, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.

[0062] Embodiment 28 is the method of any one of embodiments 1-27, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay.

[0063] Embodiment 29 is the method of any one of embodiments 1-27, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) .

[0064] Embodiment 30 is the method of any one of embodiments 1-29, wherein the individual does not have bilateral invasive breast cancer.

[0065] Embodiment 31 is the method of any one of embodiments 1-30, wherein the individual does not have previous history of invasive breast cancer.

[0066] Embodiment 32 is the method of any one of embodiments 1-31, wherein the individual has not previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy within 5 years of surgery.

[0067] Embodiment 33 is the method of any one of embodiments 1-32, wherein the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin, and wherein the individual has not received disitamab vedotin or major surgery within 4 weeks prior to start of administration of disitamab vedotin as a monotherapy or combination therapy.

[0068] Embodiment 34 is the method of any one of embodiments 1-33, wherein the individual has not received allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ transplantation.

[0069] Embodiment 35 is the method of any one of embodiments 1-34, wherein the individual has not been previously treated with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other antibody-drug conjugates.

[0070] Embodiment 36 is a method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0071] Embodiment 37 is a method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0072] Embodiment 38 is the method of embodiment 36 or 37, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.

[0073] Embodiment 39 is the method of any one of embodiments 36-38, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.

[0074] Embodiment 40 is the method of any one of embodiments 36-39, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.

[0075] Embodiment 41 is the method of any one of embodiments 36-40, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0076] Embodiment 42 is the method of any one of embodiments 36-41, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises:

[0077] Embodiment 43 is the method of any one of embodiments 36-42, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0078] Embodiment 44 is the method of embodiment 43, wherein disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody are administered as a combination therapy, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.

[0079] Embodiment 45 is the method of embodiment 43 or 44, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy.

[0080] Embodiment 46 is the method of embodiment 44 or 45, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously at a dose of 3.0 mg / kg every two weeks or every 14 days.

[0081] Embodiment 47 is the method of any one of embodiments 44-46, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0082] Embodiment 48 is the method of embodiment 43, wherein disitamab vedotin and letrozole are administered as a combination therapy.

[0083] Embodiment 49 is the method of embodiment 48, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein letrozole is administered orally at a dose of 2.5 mg once daily.

[0084] Embodiment 50 is the method of embodiment 49, wherein the individual is administered disitamab vedotin and letrozole over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0085] Embodiment 51 is the method of any one of embodiments 46-50, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0086] Embodiment 52 is the method of any one of embodiments 36-51, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.

[0087] Embodiment 53 is the method of any one of embodiments 36-52, wherein the individual comprises tumor IHC Ki67 ≥ 20%.

[0088] Embodiment 54 is the method of any one of embodiments 36-53, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay.

[0089] Embodiment 55 is the method of any one of embodiments 36-53, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) .

[0090] Embodiment 56 is the method of any one of embodiments 36-55, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a breast pathological complete response (bpCR) rate in the population of individuals.

[0091] Embodiment 57 is the method of any one of embodiments 36-56, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in PEPI score.

[0092] Embodiment 58 is the method of any one of embodiments 36-57, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in one or more of preoperative endocrine prognostic index, including Ki67 expression in surgical specimens, pathological tumor size, lymph node status, and estrogen receptor (ER) levels.

[0093] Embodiment 59 is the method of any one of embodiments 36-58, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole to a population of individuals results in an increased proportion of patients with PEPI score of 0.

[0094] Embodiment 60 is a method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0095] Embodiment 61 is a method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0096] Embodiment 62 is the method of embodiment 60 or 61, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.

[0097] Embodiment 63 is the method of any one of embodiments 60-62, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.

[0098] Embodiment 64 is the method of any one of embodiments 60-63, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.

[0099] Embodiment 65 is the method of any one of embodiments 60-64, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0100] Embodiment 66 is the method of any one of embodiments 60-65, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises:

[0101] Embodiment 67 is the method of any one of embodiments 60-66, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.

[0102] Embodiment 68 is the method of embodiment 67, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein the initial dose of pertuzumab is 840 mg intravenously the first week, and wherein any subsequent dose of pertuzumab is 420 mg intravenously; wherein pertuzumab is administered to the individual once every 3 weeks or 21 days.

[0103] Embodiment 69 is the method of any one of embodiments 68, wherein the individual is administered disitamab vedotin and pertuzumab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0104] Embodiment 70 is the method of embodiment 68 or 69, further comprising administering an anti-PD-1 antibody, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.

[0105] Embodiment 71 is the method of any one of embodiments 68-70, further comprising administering toripalimab.

[0106] Embodiment 72 is the method of embodiment 70, wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.

[0107] Embodiment 73 is the method of embodiment 72, wherein the individual is administered disitamab vedotin, pertuzumab, and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.

[0108] Embodiment 74 is the method of any one of embodiments 68-73, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0109] Embodiment 75 is the method of any one of embodiments 60-74, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.

[0110] Embodiment 76 is the method of any one of embodiments 60-75, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC3+, as measured by IHC assay.

[0111] Embodiment 77 is the method of any one of embodiments 60-75, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that exhibit HER2 gene amplification, as measured by ISH assay (ISH-positive) .

[0112] Embodiment 78 is the method of any one of embodiments 1-77, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a total pathological complete response (tpCR) rate in the population of individuals.

[0113] Embodiment 79 is the method of any one of embodiments 1-78, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to the individual results in a complete response (CR) , partial response (PR) , or stable disease (SD) in the individual.

[0114] Embodiment 80 is the method of any one of embodiments 1-79, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, results in an improvement from baseline in in the European Organization for Research and Treatment of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and / or emotional function scores.

[0115] Embodiment 81 is the method of any one of embodiments 1-80, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or as a combination therapy, results in improved levels of tumor-infiltrating lymphocytes, PD-L1 expression, and / or CD8.

[0116] Embodiment 82 is the method of any one of embodiments 1-81, wherein the individual is a human.DETAILED DESCRIPTIONI. Definitions

[0117] Before describing the invention in detail, it is to be understood that this invention is not limited to particular compositions or biological systems, which can, of course, vary. It is also to be understood that the terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only, and is not intended to be limiting.

[0118] As used in this specification and the appended claims, the singular forms “a” , “an” and “the” include plural referents unless the content clearly dictates otherwise. Thus, for example, reference to “a molecule” optionally includes a combination of two or more such molecules, and the like.

[0119] It is understood that aspects and embodiments of the invention described herein include “comprising, ” “consisting, ” and “consisting essentially of” aspects and embodiments.

[0120] Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this disclosure is related. For example, the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; and the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press, provide one of skill with a general dictionary of many of the terms used in this disclosure. For purposes of the present disclosure, the following terms are defined.

[0121] “Hormone receptor (HR) negative” : According to the American Society of Clinical Oncology / College of American Pathologists (ASCO / CAP) 2020 guidelines, if the tumor shows estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PgR) expression<1%, the tumor is considered to be hormone receptor (HR) negative.

[0122] “HER2-low” expression: HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 1+ detected by immunohistochemistry (IHC) or as HER2 protein expression of IHC 2+ detected by IHC and no amplification of HER2 detected by in situ hybridization (ISH) , according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer (2019 edition) . Confirmation of HER2 status (both IHC and ISH assays) by central laboratory.

[0123] The term "and / or" where used herein is to be taken as specific disclosure of each of the two specified features or components with or without the other. Thus, the term "and / or" as used in a phrase such as "A and / or B" herein is intended to include "A and B, " "A or B, " "A" (alone) , and "B" (alone) . Likewise, the term "and / or" as used in a phrase such as "A, B, and / or C" is intended to encompass each of the following aspects: A, B, and C; A, B, or C; A or C; A or B; B or C; A and C; A and B; B and C; A (alone) ; B (alone) ; and C (alone) .

[0124] The terms “about” and “approximately” as used herein shall generally mean an acceptable degree of error for the quantity measured given the nature or precision of the measurements. Typical, exemplary degrees of error are within 20 percent (%) , preferably within 10%, and more preferably within 5%of a given value or range of values. Any reference to “about X” specifically indicates at least the values X, 0.95X, 0.96X, 0.97X, 0.98X, 0.99X, 1.01X, 1.02X, 1.03X, 1.04X, and 1.05X. Thus, “about X” is intended to teach and provide written description support for a claim limitation of, e.g ., “0.98X. ” The terms “about” and “approximately, ” particularly in reference to a given quantity, encompass and describe the given quantity itself.

[0125] Alternatively, in biological systems, the terms “about” and “approximately” may mean values that are within an order of magnitude, preferably within 5-fold, and more preferably within 2-fold of a given value. Numerical quantities given herein are approximate unless stated otherwise, meaning that the term “about” or “approximately” can be inferred when not expressly stated.

[0126] When “about” is applied to the beginning of a numerical range, it applies to both ends of the range. Thus, “from about 5 to 20%” is equivalent to “from about 5%to about 20%” When “about” is applied to the first value of a set of values, it applies to all values in that set. Thus, “about 7, 9, or 11 mg / kg” is equivalent to “about 7, about 9, or about 11 mg / kg. ”

[0127] "Administering" or “administration” refer to the physical introduction of a therapeutic agent to a subject, using any of the various methods and delivery systems known to those skilled in the art. Exemplary routes of administration include oral, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intraperitoneal, spinal or other parenteral routes of administration, for example by injection or infusion (e.g intravenous infusion) . The phrase "parenteral administration" as used herein means modes of administration other than enteral and topical administration, usually by injection, and includes, without limitation, intravenous, intramuscular, intraarterial, intrathecal, intralymphatic, intralesional, intracapsular, intraorbital, intracardiac, intradermal, intraperitoneal, transtracheal, subcutaneous, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subarachnoid, intraspinal, epidural and intrasternal injection and infusion, as well as in vivo electroporation. A therapeutic agent can be administered via a non-parenteral route, or orally. Other non-parenteral routes include a topical, epidermal or mucosal route of administration, for example, intranasally, vaginally, rectally, sublingually or topically. Administration can also be performed, for example, once, a plurality of times, and / or over one or more extended periods.

[0128] As used herein, the term “administering” when referring to two or more components (e.g., an anti-PD-1 antibody and an anti-HER2 antibody-drug conjugate) includes sequential or simultaneous administration of the anti-PD-1 antibody and the anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some instances, the co-administered compounds are administered via different routes. For example, one or two compounds can be administered orally, and the other compound (s) can be administered, e.g, sequentially or simultaneously, via intravenous, intramuscular, subcutaneous, or intraperitoneal injection. The simultaneously or sequentially administered compounds or compositions can be administered such that the anti-HER2 antibody-drug conjugate and the anti-PD-1 antibody are simultaneously present in a subject or in a cell at an effective concentration.

[0129] “Simultaneous administration, ” as used herein, means that the two or more therapies (e.g., in a combination therapy) are administered with a time separation of no more than about 15 minutes, such as no more than about any of 10, 5, or 1 minutes. When the two or more therapies are administered simultaneously, the two or more therapies can be contained in the same composition (e.g., a composition comprising both a first and second therapy) or in separate compositions (e.g., a first therapy in one composition and a second therapy is contained in another composition) .

[0130] As used herein, the term “sequential administration” means that the two or more therapies (e.g., in a combination therapy) are administered with a time separation of more than about 15 minutes, such as more than about any of 20, 30, 40, 50, 60, or more minutes. Any of the two or more therapies may be administered first. The two or more therapies are contained in separate compositions, which may be contained in the same or different packages or kits.

[0131] As used herein, the term "concurrent administration” means that the administration of two or more therapies (e.g., in a combination therapy) overlap with each other. For example, the two or more therapies may be administered in the same day, or with a time separation of within one day, within two days, within three days, within four days, within five days, within six days, within seven days, within ten days, within fourteen days, or within twenty-one days.

[0132] A "cancer" refers to a broad group of various diseases characterized by the uncontrolled growth of abnormal cells in the body. A "cancer" or "cancer tissue" can include a tumor.

[0133] The term “metastasis” is an art known term that refers to the spread of cancer cells from the place where they first formed (the primary site) to one or more other sites in a subject (one or more secondary sites) . In metastasis, cancer cells break away from the original (primary) tumor, travel through the blood or lymph system, and form a new tumor (ametastatic tumor) in other organs or tissues of the body. The new, metastatic tumor includes the same or similar cancer cells as the primary tumor. At the secondary site, the tumor cell may proliferate and begin the growth or colonization of a secondary tumor at this distant site.

[0134] The term “HER2” (also known as also known as HER2 / neu, ERBB2, CD340, receptor tyrosine-protein kinase erbB-2, proto-oncogene Neu, and human epidermal growth factor receptor 2) refers to a member of the human epidermal growth factor receptor (HER / EGFR / ERBB) family of receptor tyrosine kinases. Amplification or overexpression of HER2 plays a significant role in the development and progression of certain aggressive types of cancer, including colorectal cancer, gastric cancer, lung cancer (e.g non-small cell lung cancer (NSCLC) ) , biliary cancers (e.g., cholangiocarcinoma, gallbladder cancer) , bladder cancer, esophageal cancer, melanoma, ovarian cancer, liver cancer, prostate cancer, pancreatic cancer, small intestine cancer, head and neck cancer, uterine cancer, cervical cancer, and breast cancer. Non-limiting examples of HER2 nucleotide sequences are set forth in GenBank reference numbers NP_001005862, NP_001289936, NP_001289937, NP_001289938, and NP_004448. Non-limiting examples of HER2 peptide sequences are set forth in GenBank reference numbers NP OO 1005862, NP_001276865, NP_001276866, NP_001276867, and NP_004439.

[0135] The term “anti-HER2 antibody-drug conjugate” refers to an anti-HER2 antibody conjugated to a therapeutic agent {i.e., a drug or cytotoxic molecule) optionally via a linker.

[0136] An “anti-HER2 antibody” , as used herein, refers to an antibody that binds to the HER2 protein. Anti-HER2 antibodies used for the treatment of cancer are typically monoclonal, although polyclonal antibodies are not excluded by the term. Anti-HER2 antibodies inhibit HER2 activation or downstream signaling by various mechanisms. As non-limiting examples, anti-HER2 antibodies can prevent ligand binding, receptor activation or receptor signal propagation, result in reduced HER2 expression or localization to the cell surface, inhibit HER2 cleavage, or induce antibody-mediated cytotoxicity. Non-limiting examples of anti-HER2 antibodies that are suitable for use in the methods and compositions of the present invention include hertuzumab, trastuzumab, pertuzumab, margetuximab, and combinations thereof.

[0137] "Treatment" or "therapy" of a subject refers to any type of intervention or process performed on, or the administration of an active agent to, the subject with the objective of reversing, alleviating, ameliorating, inhibiting, slowing down, or preventing the onset, progression, development, severity, or recurrence of a symptom, complication, condition, or biochemical indicia associated with a disease. In some embodiments, the disease is cancer. As used herein, the terms "treatment" and "treating" when referring, e.g., to the treatment of a cancer, are not intended to be absolute terms. For example, “treatment of cancer” and “treating cancer” , as used in a clinical setting, is intended to include obtaining beneficial or desired clinical results and can include an improvement in the condition of a subject having cancer. Beneficial or desired clinical results include, but are not limited to, one or more of the following: reducing the proliferation of (or destroying) neoplastic or cancerous cells, inhibiting metastasis of neoplastic cells, a decrease in metastasis in a subject, shrinking or decreasing the size of a tumor, change in the growth rate of one or more tumor (s) in a subject, an increase in the period of remission for a subject (e.g., as compared to the one or more metric (s) in a subject having a similar cancer receiving no treatment or a different treatment, or as compared to the one or more metric (s) in the same subject prior to treatment) , decreasing symptoms resulting from a disease, increasing the quality of life of those suffering from a disease (e.g., assessed using FACT-G or EORTC-QLQC30) , decreasing the dose of other medications required to treat a disease, delaying the progression of a disease, and / or prolonging survival of subjects having a disease.

[0138] The term "prophylactic" or “prophylactically” refers to any type of intervention or process performed on, or the administration of an active agent to, the subject with the objective of protecting or preventing a disease or condition from developing or at least not developing fully (e.g., to reduce the symptoms or severity of the disease or condition) such as in the development of a side effect (e.g., diarrhea) .

[0139] A "subject" includes any human or non-human animal. The term "non-human animal" includes, but is not limited to, vertebrates such as non-human primates, sheep, dogs, and rodents such as mice, rats, and guinea pigs. In some embodiments, the subject is a human. The terms "subject" and "patient" and “individual” are used interchangeably herein.

[0140] An “effective amount” or "therapeutically effective amount" or "therapeutically effective dosage" of a drug or therapeutic agent is any amount of the drug that, when used alone or in combination with another therapeutic agent, protects a subject against the onset of a disease or promotes disease regression evidenced by a decrease in severity of disease symptoms, an increase in frequency and duration of disease symptom-free periods, or a prevention of impairment or disability due to the disease affliction. The ability of a therapeutic agent to promote disease regression can be evaluated using a variety of methods known to the skilled practitioner, such as in human subjects during clinical trials, in animal model systems predictive of efficacy in humans, or by assaying the activity of the agent in in vitro assays.

[0141] By way of example, an "anti-cancer agent" promotes cancer regression in a subject. In some embodiments, a therapeutically effective amount of the drug promotes cancer regression to the point of eliminating the cancer. "Promoting cancer regression" means that administering an effective amount of the drug, alone or in combination with an anti-cancer agent, results in a reduction in tumor growth or size, necrosis of the tumor, a decrease in severity of at least one disease symptom, an increase in frequency and duration of disease symptom-free periods, or a prevention of impairment or disability due to the disease affliction. In addition, the terms "effective" and "effectiveness" with regard to a treatment includes both pharmacological effectiveness and physiological safety. Pharmacological effectiveness refers to the ability of the drug to promote cancer regression in the patient. Physiological safety refers to the level of toxicity or other adverse physiological effects at the cellular, organ and / or organism level (adverse effects) resulting from administration of the drug.

[0142] The phrase "pharmaceutically acceptable" indicates that the substance or composition must be compatible chemically and / or toxicologically, with the other ingredients comprising a formulation, and / or the mammal being treated therewith.

[0143] As used herein, the term “pharmaceutically acceptable carrier” refers to a substance that aids the administration of an active agent to a cell, an organism, or a subject. “Pharmaceutically acceptable carrier” refers to a carrier or excipient that can be included in the compositions of the disclosure and that causes no significant adverse toxicological effect on the subject. Non-limiting examples of pharmaceutically acceptable carriers include water, NaCl, normal saline solutions, lactated Ringer’s , normal sucrose, normal glucose, binders, fillers, disintegrants, lubricants, coatings, sweeteners, flavors and colors, liposomes, dispersion media, microcapsules, cationic lipid carriers, isotonic and absorption delaying agents, and the like. The carrier may also be substances for providing the formulation with stability, sterility and isotonicity (e.g., antimicrobial preservatives, antioxidants, chelating agents and buffers) , for preventing the action of microorganisms (e.g. antimicrobial and antifungal agents, such as parabens, chlorobutanol, phenol, sorbic acid and the like) or for providing the formulation with an edible flavor etc. In some instances, the carrier is an agent that facilitates the delivery of a small molecule drug or antibody to a target cell or tissue. One of skill in the art will recognize that other pharmaceutical carriers are useful in the present disclosure.

[0144] The phrase "pharmaceutically acceptable salt" as used herein, refers to pharmaceutically acceptable organic or inorganic salts of a compound of the disclosure. Exemplary salts include, but are not limited, to sulfate, citrate, acetate, oxalate, chloride, bromide, iodide, nitrate, bisulfate, phosphate, acid phosphate, isonicotinate, lactate, salicylate, acid citrate, tartrate, oleate, tannate, pantothenate, bitartrate, ascorbate, succinate, maleate, genisinate, fumarate, gluconate, glucuronate, saccbarate, formate, benzoate, glutamate, methanesulfonate "mesylate" , ethanesulfonate, benzenesulfonate, p-toluenesulfonate, pamoate (i.e., 4, 4’ -methylene-bis - (2-hydroxy-3-napbthoate) ) salts, alkali metal (e.g., sodium and potassium) salts, alkaline earth metal (e.g., magnesium) salts, and ammonium salts. A pharmaceutically acceptable salt may involve the inclusion of another molecule such as an acetate ion, a succinate ion or other counter ion. The counter ion may be any organic or inorganic moiety that stabilizes the charge on the parent compound. Furthermore, a pharmaceutically acceptable salt may have more than one charged atom in its structure. Instances where multiple charged atoms are part of the pharmaceutically acceptable salt can have multiple counter ions. Hence, a pharmaceutically acceptable salt can have one or more charged atoms and / or one or more counter ion. II. Methods of treating breast cancer

[0145] Certain aspects of the present disclosure relate to method for treating or preventing progression of breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate, either as a monotherapy or a combination therapy.

[0146] In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate, either as a monotherapy or a combination therapy.

[0147] In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate, either as a monotherapy or a combination therapy.

[0148] In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some aspects, provided here is a method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate, either as a monotherapy or a combination therapy. Antibody-drug conjugates

[0149] In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain. In some embodiments, the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) or ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and / or the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) . In some embodiments, the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and / or the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .

[0150] In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a VH domain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or a VL domain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8. In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a VH domain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and a VL domain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.

[0151] In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10 and / or a light chain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11. In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10 and a light chain that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.

[0152] In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises one, two, three, four, five, or six CDR sequences shown in Table 2 below. In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises one, two, or all three CDR sequences from a VH domain or heavy chain sequence shown in Table 2 below and / or one, two, or all three CDR sequences from a VL domain or light chain sequence shown in Table 2 below. In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a VH domain sequence and / or VL domain sequence shown in Table 2 below. In some embodiments, the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain and / or a light chain sequence shown in Table 2 below. Table 2. Anti-HER2 antibody sequences

[0153] In some embodiments, the anti-HER2 antibody is disitamab (RC48) . See, e.g., U.S. Pat. No. 10,087,260, the contents of which are incorporated herein by reference in its entirety.

[0154] In some embodiments, the cytotoxic molecule of an antibody-drug conjugate of the present disclosure comprises a tubulin inhibitor or DNA damaging agent.

[0155] In some embodiments, the tubulin inhibitor comprises a dolastatin or derivative thereof, auristatin or derivative thereof, or maytansinoid or derivative thereof. In some embodiments, the tubulin inhibitor comprises monomethyl auristatin E (MMAE) , monomethyl auristatin F (MMAF) , or auristatin F (AF) . In some embodiments, the tubulin inhibitor comprises mertansine (DM1) , maytansine (DM3) , or ravtansine (DM4) . Structures for MMAE and MMAF are provided below. Additional descriptions and examples of tubulin inhibitors may be found, e.g., in Chen, H. et al. (2017) Molecules 22 (8) : 1281.

[0156] In some embodiments, the DNA damaging agent comprises a calicheamicin, duocarmycin, pyrrolobenzodiazepine (PBD) , or SN-38.

[0157] In some embodiments, the cytotoxic molecule comprises an amanitin, anthracycline, baccatin, camptothecin, cemadotin, colchicine, colcemid, combretastatin, cryptophycin, discodermolide, docetaxel, doxorubicin, echinomycin, eleutherobin, epothilone, estramustine, lexitropsin, maytansine, methotrexate, netropsin, puromycin, rhizoxins, taxane, tubulysin, or vinca alkaloid.

[0158] In some embodiments, the antibody-drug conjugate is represented by formula Ab-(L-U) n, wherein Ab is the anti-HER2 antibody, L is a linker between the cytotoxic molecule and the anti-HER2 antibody, U is the conjugated cytotoxic molecule, and n is an integer from 1 to 8, representing the number of cytotoxic molecules bound to the antibody. For example, in some embodiments, the antibody-drug conjugate used is named RC48-mc-vc-pAB-MMAE, which conforms to the structure of the general formula Ab- (L-U) n, in which RC48 (a humanized anti-HER2 monoclonal antibody) is coupled to MMAE through the linker mc-vc-pAB, and the number of coupling ranges from 1 to 8, including 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 or a combination of antibody-drug conjugates with varying MMAE coupling numbers ranging from 1 to 8. In some embodiments, the number of cytotoxic molecules bound to the antibody is given as an average number of cytotoxic molecules bound to the antibody, e.g., within a given sample, population, or composition. In some embodiments, an average of 4 MMAE molecules are conjugated to the antibody, e.g., via a linker such as mc-vc-pAB.

[0159] In some embodiments, the linker is attached to the anti-HER2 antibody via a thiol or amino moiety. In some embodiments, the cytotoxic molecule is conjugated to the antibody through site-directed or undirected conjugation.

[0160] In some embodiments, the linker is selected from the group consisting of maleimidocaproyl valine citrulline p-amino-benzyloxy (mc-vc-pAB) , maleimidocaproyl (mc) , triglycyl peptide linker, 3-maleimido-propionic acid, Mal-di-EG-OPFP (perfluorophenyl 3- (2- (2- (3- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) propanamido) ethoxy) ethoxy) propanoate) , Mal-di-EG-Osu (2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 3- (2- (2- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) ethoxy) ethoxy) propanoate) , Mal-Tri-EG-Osu (2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 3- (2- (2- (2- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) ethoxy) ethoxy) ethoxy) ethoxypropanoate) , Mal-Tetra-EG-Osu (2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 1- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -3-oxo-7, 10, 13, 16-tetraoxa-4-azanonadecan-19-oate) , Br-di-EG-Osu (2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 3 (2- (2- (2-bromoacetamido) ethoxy) ethoxy) propanoate) , Py-ds-prp-Osu (2-5-dioxopyrrolidin-1-yl 3- (pyridine-2-yldisulfanyl) propanoate) , Py-ds-Prp-OPEP (perfluorophenyl 3- (pyridine-2-yldisulfanyl) propanoate) , Py-ds-dmBut-Osu (2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 4-methyl-4- (pyridine-2-yldisulfanyl) pentanoate, Py-ds-dmBut-OPF (perfluorophenyl 4-methyl-4- (pyridine-2-yldisulfanyl) pentanoate) , SMCC (N-succinimidyl 4- (maleimidomethyl) cyclohexanecarboxylate) , MBS (3-maleimidobenzoic acid N-hydroxysuccinimide ester) , SATA (S- (N-succinimidyl) thioacetate) , SPDP ( (N-succinimidyl 3- (2-pyridyldithio) propionate) , and SMPT ( (N-succinimidyloxy carbonyl) -1-methyl-1- (2-pyridyldithio) toluene) .

[0161] In some embodiments, the linker is a linker described in Table 3 below. Table 3. Exemplary linkers for antibody-drug conjugates.

[0162] In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin (DV; also referred to as disitamab vedotin) . Disitamab vedotin (DV hereafter) is an antibody-drug conjugate (ADC) that targets cancers expressing HER2, an oncogenic growth factor receptor which promotes cell proliferation and survival. disitamab vedotin consists of an anti-HER2 monoclonal antibody disitamab (RC48) conjugated with an average of 4 molecules of the tubulin-disrupting anti-mitotic agent monomethyl auristatin E (MMAE) via a cleavable peptide linker. See, e.g., U.S. Pat. No. 10,087,260 and U.S. PG Pub Nos. 2020 / 0289663 and 2021 / 0154314, the contents of which are incorporated herein by reference in their entirety. disitamab vedotin has multimodal antitumor mechanisms of action that include direct cytotoxicity of HER2-expressing cancer cells and bystander effect based-cytotoxicity of neighboring cells, both of which are mediated by the intracellular release of MMAE within the targeted cell. Released MMAE can induce immunogenic cell death (ICD) , which promotes immune cell recruitment to the tumor. In addition, disitamab vedotin stimulates Fc-gamma receptor mediated antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) , which can lead to target cell death. disitamab vedotin also inhibits HER2-activated downstream signaling pathways, further blocking cellular growth and proliferation.

[0163] In some embodiments, the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 monoclonal antibody-vc-MMAE, wherein the cytotoxic molecule is MMAE, wherein the anti-HER2 monoclonal antibody is connected to MMAE via a linker vc, and the structure of the linker and MMAE after connection is: In some embodiments, the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE,  wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: In some embodiments, the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin (DV) . Combination therapies

[0164] In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is administered in combination with one or more of a second medicament, e.g., an anti-PD-1 antibody (e.g., toripalimab) , letrozole, pertuzumab, epirubicin, cyclophosphamide, or carboplatin.Anti-PD-1 antibodies

[0165] Programmed death-1 (PD-1) is an inhibitory receptor expressed on T-cells that promotes apoptosis of inflammatory T-cells and inhibits apoptosis of anti-inflammatory regulatory T-cells, thereby promoting self-tolerance and preventing autoimmune diseases. To evade immune surveillance, tumor cells often exploit this system by over-expressing PD-L1, the ligand which binds to and activates PD-1. Anti-PD-1 antibodies are used to block the binding of PD-L1 to PD-1 and thereby enhance immune response against cancer cells. Anti-PD-1 antibodies have showed promising results in various cancers via enhancing T cell functions. PD-1 (programmed death 1) is also referred to in the art as "programmed cell death 1, " "PDCD1, " "CD279, " and "SLEB2. " An exemplary human PD-1 is shown in UniProtKB / Swiss-Prot Accession No. Q15116.

[0166] In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is administered in combination with a PD-1 antibody. In some embodiments, the PD-1 antibody is toripalimab. Toripalimab, also known as JS-001, TAB-001, teriprolizumab, Loqtorzi, and Tuoyi, refers to an IgG4 selective, recombinant, humanized monoclonal antibody against programmed death protein 1 (PD-1) , which is able to bind to PD-1 and block the interaction with its ligands. Toripalimab is the first monoclonal anti-PD-1 antibody approved by the China NMPA onto the market. It consists of two heavy chains of 452 amino acids, two light chains of 219 amino acids, and includes an N-linked glycosylation site at N302 in each heavy chain. The average molecular weight of toripalimab is 149,670 Daltons. Without wishing to be bound by theory, it is believed that the interaction of toripalimab with PD-1 is mainly attributed to the complementarity determining regions of the heavy chain of the former and the FG loop of the latter; the light chain complementarity determining regions of toripalimab participate mainly in recognizing the epitopes on PD-1.

[0167] In some embodiments, toripalimab is administered in a pharmaceutical composition comprising toripalimab and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, toripalimab is administered intravenously.

[0168] In some embodiments, the heavy chain of toripalimab comprises an amino acid sequence comprising: and the light chain of toripalimab comprises an amino acid sequence comprising: Anti-HER2 antibodies

[0169] In some embodiments, the second medicament is a second anti-HER2 antibody. In some embodiments, an “anti-HER2 antibody” refers to an antibody that binds to the HER2 protein. Anti-HER2 antibodies used for the treatment of cancer are typically monoclonal, although polyclonal antibodies are not excluded by the term. Anti-HER2 antibodies inhibit HER2 activation or downstream signaling by various mechanisms. As non-limiting examples, anti-HER2 antibodies can prevent ligand binding, receptor activation or receptor signal propagation, result in reduced HER2 expression or localization to the cell surface, inhibit HER2 cleavage, or induce antibody-mediated cytotoxicity. In some embodiments, the combination treatment comprises a first anti-HER2 antibody and a second anti-HER2 antibody. In some embodiments, the first anti-HER2 antibody is disitamab vedotin. In some embodiments, the second anti-HER2 antibody is pertuzumab.

[0170] In some embodiments, pertuzumab is administered in a pharmaceutical composition comprising pertuzumab and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, pertuzumab is administered intravenously.

[0171] In some embodiments, the heavy chain of pertuzumab comprises an amino acid sequence comprising: and the light chain of pertuzumab comprises an amino acid sequence comprising: Other second medicaments

[0172] In some embodiments, the second medicament is one or more of carboplatin, epirubicin, cyclophosphamide, and letrozole.

[0173] In some embodiments, the second medicament administered in combination with the disitamab vedotin is carboplatin. Carboplatin is a chemotherapy drug that contains the metal platinum. It stops or slows the growth of cancer cells and other rapidly growing cells by damaging their DNA. In some embodiments, carboplatin is administered in a pharmaceutical composition comprising carboplatin and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, carboplatin is administered intravenously.

[0174] In some embodiments, the second medicament administered in combination with the disitamab vedotin is epirubicin. Epirubicin is an anthracycline drug used for chemotherapy. In some embodiments, epirubicin is administered in a pharmaceutical composition comprising epirubicin and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, epirubicin is administered intravenously.

[0175] In some embodiments, the second medicament administered in combination with the disitamab vedotin is cyclophosphamide. In some embodiments, cyclophosphamide is administered in a pharmaceutical composition comprising cyclophosphamide and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, cyclophosphamide is administered intravenously.

[0176] In some embodiments, the second medicament administered in combination with the disitamab vedotin is letrozole. In some embodiments, letrozole is administered in tablet form. In some embodiments, letrozole is administered in a pharmaceutical composition comprising letrozole and one or more pharmaceutically acceptable carriers. The pharmaceutical compositions are typically administered as an intravenous infusion. In some embodiments, letrozole is administered orally. Cancers

[0177] In some embodiments, the cancer is breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is HR-negative breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is HER2-low expression breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is HR-negative, HER2-low expression breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is clinical stage T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0. In some embodiments, the breast cancer is HR-negative, HER2-low expression breast cancer in clinical stage T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0. In some embodiments, the breast cancer is HR-positive breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is HR-positive, HER2-low expression breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is clinical stage T2-3N0-3M0 breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is HR-positive, HER2-low expression breast cancer in clinical stage T2-3N0-3M0. In some embodiments, the breast cancer is HER2-positive breast cancer. In some embodiments, the breast cancer is breast cancer is HER2-positive breast cancer in clinical stage T2-3N0-3M0.

[0178] In some embodiments, cells of the cancer express HER2. In some embodiments, the cancer is a HER2-positive (HER2+) cancer. In some embodiments, cells of the cancer exhibit HER2 gene amplification. In some embodiments, cells of the cancer overexpress HER2, e.g., on their cell surface. Overexpression and / or amplification of HER2 is seen in many malignancies including breast, gastric, ovarian, pancreatic, colorectal, and endometrial cancer (Neve, R.M. et al. (2001) Ann Oncol 12 (Suppl1) : S9-S13; Menard, S. et al. (2003) Oncogene 22 (42) : 6570-6578; Moasser, M.M. (2007) Oncogene 26 (45) : 6469-6487; Iqbal, N. et al. (2014) Mol Biol Int 2014: 852748) . In some embodiments, cells of the cancer express HER2, wherein the cells have an IHC score of IHC≥1 and / or are ISH positive.

[0179] In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface, as measured by an immunohistochemistry (IHC) assay. IHC assays for HER2 involve semi-quantitative measurements of HER2 cellular expression / overexpression. These are typically done by staining a sample including cancer cells using a primary anti-HER2 antibody, followed by visualization using a labeled secondary antibody and subsequent analysis of HER2 expression, e.g., membrane expression on the surface. Variables factoring into the IHC score (given on a scale from 0 to 3+) can include intensity of staining, location and / or completeness of staining (e.g., surface / membrane expression) , and proportion of tumor cells exhibiting staining. Methods and criteria for determining HER2 status by IHC are known in the art and can be found, e.g., in Wolff, A.C. et al. (2013) J Clin Oncol 31 (31) : 3997-4013 and Wolff, A.C. et al. (2018) J Clin Oncol 36 (20) : 2105-2122. See also the HercepTestTM semi-quantitative IHC test kit.

[0180] Evaluation of HER2 by IHC may involve one or more, or all, of the steps of: 1. The entire section is first observed under low magnification to determine whether  the staining is satisfactory and whether there is heterogeneity in HER2 expression; 2. Quality control slides are read when evaluating; cytoplasmic and nuclear staining  should be negligible, and normal epithelium should not show strong cell membrane staining; 3. Tissue margins and poorly prepared (e.g., obviously extruded) cancer tissue is  ignored during evaluation. 4. If the tumor has obvious heterogeneity, the percentage of each scoring level is  indicated separately when interpreting. 5. If invasive cancer is the object during evaluation, it is indicated separately if the  non-invasive cancer part has overexpressed HER2 (2+ or 3+) . 6. If multiple blocks or sections are detected, results are reported separately.

[0181] In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that exhibit HER2 gene amplification, as measured by an in situ hybridization (ISH) assay (ISH-positive) . In some embodiments, a sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by an in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) . ISH assays for HER2 gene amplification typically involve measurement of level of hybridization to a HER2-specific probe using microscopy. In some embodiments, cells are stained with dual probes: a HER2-specific probe, and a control probe (hybridizing to, e.g., chromosome 17 or CEP17) , such that the ratio of HER2: control signal is indicative of HER2 copy number and / or amplification. Variables factoring into the ISH status can include number of signal copies of HER2, ratio of HER2: control copy number, and formation of HER2 clusters. Methods and criteria for determining HER2 amplification status by ISH are known in the art and can be found, e.g., in Wolff, A.C. et al. (2013) J Clin Oncol 31 (31) : 3997-4013 and Wolff, A.C. et al. (2018) J Clin Oncol 36 (20) : 2105-2122. Detection of HER2 may be performed by FISH, e.g., using one or more, or all, of the following steps: (1) Selecting a representative wax block of tumor tissue. Section by professional and  technical personnel, the section is complete, smooth, of uniform thickness, without affecting the diagnosis of knife mark wrinkles. (Tissue containing calcified particles and other uncontrollable factors are excluded) , section thickness: 4-5 μm; (2) Tissue section pretreatment using either of the following methods:Method 1 (Manual operation) : a) Immerse in xylene and dewaxed twice, 15 minutes each time, and then  immerse in 100%ethanol for 5 minutes at room temperature, b) Rehydrate in 100%ethanol, 85%ethanol and 70%ethanol for 2  minutes respectively at room temperature, then immerse in deionized water at room temperature for 3 minutes, c) Treatment with 90～93℃ deionized water for 20 minutes, d) 1 ml gastric enzyme storage solution (200mg / mL) is dissolved in  200ml 0.01MHCL to obtain gastric enzyme working solution (1mg / ml) ; Soak the tissue section in gastric enzyme working solution and incubate at 37℃ for 15-30 minutes (the time depends on the thickness of the tissue, generally about 20 minutes) , e) After digestion by gastric enzymes, then rinse in deionized water for 5  minutes, f) Dehydrate respectively in 70%ethanol, 85%ethanol and 100%ethanol  for 2 minutes at room temperature, g) After drying, then perform the following hybrid denaturation.Method 2 (Fully automatic) : a) Soak in xylene for dewaxing twice at room temperature for 15 minutes  each, and then immerse in 100%ethanol twice for 5 minutes each, b) Dry tissue section at room temperature, c) Initialize the system and select program, fill the reagent according to  the instrument algorithm, d) Place the dry slides tissue face upward on the glass shelf, put it in the  reaction tank, cover the reaction tank cover, close the machine cover, and run the selected program; (3) Hybridization apparatus denatured hybridization using the following steps: a) Drop 10μ L probe mixture into the slide hybridization area, immediately  cover the slide and seal the edge with rubber glue, b) Prepare hybridization machine, covariance condition: 75℃, 5 minutes,  hybridization condition: 37℃, 16 h; (be careful to maintain humidity in hybridization instrument) ; (4) Glass slide rinsing (need to avoid light operation) using the following steps: a) Carefully remove the cover glass slide, place the glass slide in a solution of  0.3%NP-40 / 2×SSC at 73℃, shake for 1～3 seconds, wash for 2 minutes, b) Rinse at room temperature in 70%ethanol for 3 minutes; (5) Counterstaining using the following steps: a) Naturally dried glass slides in dark; b) Drop 10μ L DAPI at the hybridization site and immediately cover the cover  glass. Put in the dark for 10 to 20 minutes, then observe the glass slides under fluorescence microscope with appropriate filter group.

[0182] Assessment of HER2, e.g., in a FISH section, for example, generated as described above, may be performed using any suitable method known in the art. For example, using one or more, or all of the following steps: (a) Observe whole FISH section under low magnification to preliminarily determine  the test quality (such as the normal cell signals of normal tissues in the specimen) and whether there is heterogeneity in HER2 amplification; (b) Find at least 2 areas of invasive cancer and count at least 20 invasive cancer cells.  FISH is not suitable for microinvasive nidus with too few cells; (c) IHC sections can be used to determine the areas of invasive cancer that may be  amplified; and (d) Observe HER2 and CEPl7 signals through a specific channel filter under high  magnification (60x or 100x objective) , and calculate the signal count and ratio.

[0183] In some embodiments, the sample is a biopsy sample, e.g., from a core needle biopsy. In some embodiments, the sample is from an incisional or excisional surgical procedure. In some embodiments, the sample is a formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) tissue block or sample, e.g., with corresponding H&E stain. In some embodiments, the sample comprises unstained slides sectioned from a tissue block, e.g., FFPE tissue block. In some embodiments, the sample is from a primary tumor or metastasis, e.g., from the chest wall, regional lymph node, or a distant organ. In some embodiments, the same sample is used for IHC and ISH assays. In some embodiments, different samples from the same individual are used for IHC and ISH assays.

[0184] In some embodiments, cells of the cancer express HER2. In some embodiments, cells of the cancer express HER2, wherein the cells have an IHC score of IHC≥1 (e.g., IHC1+, IHC2+, IHC3+) and / or are ISH-positive.

[0185] In some embodiments, the cancer is a HER2-low breast cancer. In some embodiments, HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 1+ or IHC 2+ and no amplification of HER2 in situ hybridization (ISH) detected by central laboratory-confirmed invasive tumor immunohistochemistry (IHC) , (according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer 2019 edition) . In some embodiments, HER2 status (both IHC and ISH assays) is confirmed by central laboratory.

[0186] In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by IHC assay (IHC1+) . In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay (IHC2+) ; and the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by ISH assay (IHC2+ / ISH-negative) . In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) is IHC1+. In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) is IHC2+ / ISH-negative. In some embodiments, low HER2 expression confirmed is defined as IHC 1+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and no amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) . In some embodiments, primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection. In some embodiments, tumor hormone receptor (HR) negative, according to ASCO / CAP Guideline 2020, is defined as the proportion of IHC-stained ER and PgR nuclear staining positive invasive cancer cells are < 1%. In some embodiments, the cancer is histologically confirmed invasive breast cancer with investigator-assessed clinical stage T1cN1-2M0, or T2-3N0-2M0, according to AJCC eighth edition. In some embodiments, the cancer is HR-negative, HER2-low, and stage T1cN1-2M0, or T2-3N0-2M0. In some embodiments, the breast cancer is histologically confirmed invasive breast cancer with clinical stage T2-3 (tumor > 2cm) , cN0-3, M0. In some embodiments, the breast cancer is clinical stage of T2-3N0-3M0, according to AJCC 8th edition. In some embodiments, the cancer comprises tumor estrogen receptor (ER) expression ≥10% (according to ASCO / CAP guidelines 2020) . In some embodiments, HR-positive is defined as the cancer comprising tumor estrogen receptor (ER) expression ≥10% (according to ASCO / CAP guidelines 2020) . In some embodiments, the cancer comprises Tumor IHC detection Ki67 ≥ 20%. In some embodiments, the cancer is HER2-low, HR-positive, and clinical stage clinical stage T2-3N0-3M0. In some embodiments, the cancer is HER2-low, ER expression ≥10%, and clinical stage clinical stage T2-3N0-3M0.

[0187] In some embodiments, the cancer is a HER2-positive breast cancer. In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC3+, as measured by IHC assay (IHC3+) . In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay (IHC2+) ; and wherein the sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) comprises cancer cells that exhibit HER2 gene amplification, as measured by ISH assay (IHC2+ / ISH-positive) . In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) is IHC3+. In some embodiments, a sample obtained from the individual (e.g., from the cancer of the individual) is IHC3+ / ISH+. In some embodiments, HER2-positive is defined as IHC 3+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) . In some embodiments, primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) is provided for HER2 detection. In some embodiments, the breast cancer is T2-3 (tumor > 2cm) , cN0-3, M0. In some embodiments, the breast cancer is HER2-positive, i.e., IHC 3+, or IHC 2+ with ISH amplification. HER2-positive, i.e., IHC 3+ or IHC 2+ with ISH amplification, and clinical stage T2-3N0-3M0. Individuals to be treated

[0188] In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has invasive breast tumor tissue with low HER2 expression confirmed by the central laboratory. In some embodiments, HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 1+ or IHC 2+ and no amplification of HER2 in situ hybridization (ISH) detected by central laboratory-confirmed invasive tumor immunohistochemistry (IHC) , (according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer 2019 edition) . In some embodiments, HER2 status (both IHC and ISH assays) is confirmed by central laboratory. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual is tumor hormone receptor (HR) negative. According to ASCO / CAP Guideline 2020, tumor hormone receptor (HR) negative is defined as the proportion of IHC-stained ER and PgR nuclear staining positive invasive cancer cells are < 1%. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has histologically confirmed invasive breast cancer with investigator-assessed clinical stage T1cN1-2M0, or T2-3N0-2M0, according to AJCC eighth edition. In some embodiments, the individual can tolerate and plan to undergo radical surgery for breast cancer and prior to treatment according to the methods disclosed herein, has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. According to the American Society of Clinical Oncology / College of American Pathologists (ASCO / CAP) 2020 guidelines, if the tumor shows estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PgR) expression<1%, the tumor is considered to be hormone receptor (HR) negative.

[0189] In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual meets at least one or more of the following criteria: · ECOG physical status 0 or 1; · At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; · Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; · Bone marrow or organ function should meet the following criteria within 7 days before  the first dosing (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤  2.5 times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤  1.5×ULN; · Creatinine clearance (CrCl) ≥ 60 mL / min calculated by Cockcroft-Gault  formula. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the  individual does not have bilateral invasive breast cancer. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual does not have previous history of invasive breast cancer. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has not previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy within 5 years of surgery. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the anti-HER2 antibody is disitamab vedotin, and the individual has not received disitamab vedotin or major surgery within 4 weeks prior to start of administration of disitamab vedotin as a monotherapy or combination therapy. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has not received allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ transplantation. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has not been previously treated with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other Antibody-Drug Conjugates.

[0190] In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of toripalimab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of letrozole and an anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has histologically confirmed invasive breast cancer with clinical stage T2-3 (tumor > 2cm) , cN0-3, M0. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual can tolerate and plan to undergo radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, invasive breast tumor tissue with low HER2 expression is confirmed by the central laboratory. In some embodiments, low HER2 expression is defined as IHC 1+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and no amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) . In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual comprises tumor estrogen receptor (ER) expression ≥10% (according to ASCO / CAP guidelines 2020) . In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual comprises tumor IHC detection Ki67 ≥ 20%. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual meets at least one or more of the following criteria: · ECOG physical status 0 or 1; · At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; · Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; · Bone marrow or organ function should meet the following criteria within 7 days  before the study dose (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤  2.5 times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤  1.5×ULN; · Serum creatinine ≤ 1.5×ULN or creatinine clearance (CrCl) ≥ 50 mL / min  according to Cockcroft-Gault formula method.

[0191] In some embodiments, provided herein are methods for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has histologically confirmed invasive breast cancer with clinical stage T2-3 (tumor > 2cm) , cN0-3, M0. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual has invasive breast tumor tissue with HER2-positive confirmed by the central laboratory. HER2-positive is defined as IHC 3+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) . In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual can tolerate and plan to undergo radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer. In some embodiments, e.g., prior to treatment according to the methods disclosed herein, the individual meets at least one or more of the following criteria: · ECOG physical status 0 or 1; · At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; · Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; · Bone marrow or organ function should meet the following criteria within 7 days  before the study dose (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤  2.5 times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤  1.5×ULN; · Creatinine clearance (CrCl) ≥ 50 mL / min according to Cockcroft-Gault  formula method. Administration

[0192] In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.0 mg / kg or 2.5 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.5 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.0 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.5 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered intravenously to the individual.

[0193] In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.5 mg / kg to 2.5 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.6 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.7 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.8 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.9 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.0 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.1 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.2 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.3 mg / kg. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.4 mg / kg.

[0194] The concentration of a protein-based drug substance can be estimated using various methods that typically reference a comparative standard. Methods and reference standards evolve over time to be more precise and accurate in determining protein concentrations. In some embodiments, the dose is measured using the BSA-based Extinction Coefficient (EC) method. The BSA-based Extinction Coefficient (EC) method is a UV spectrophotometric method for determining the protein concentration using the sample’s absorbance and an extinction coefficient (EC) . Exemplary protocols are provided in Examples 4 and 5. Briefly, the absorbance of the sample at 280 nm with scatter-correction at 320 nm is read over multiple pathlengths, producing a slope (Abs / mm) which is then used to calculate protein concentration using Beer-Lambert’s law and a product-specific extinction coefficient of 1.07 (mg / ml) -1·cm-1.

[0195] In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 1.5 mg / kg, measured using the BSA-based EC method. In other embodiments, the dose contains the same mole-quantity of the drug as 1.5 mg / kg measured using the BSA-based EC method, but is measured using another method and therefore expressed differently, for example, as 1.1 mg / kg dose as measured using a disitamab vedotin-based EC method. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.0 mg / kg, measured using the BSA-based EC method. In other embodiments, the dose contains the same mole-quantity of the drug as 2.0 mg / kg measured using the BSA-based EC method, but is measured using another method and therefore expressed differently, for example, as 1.5 mg / kg dose as measured using a disitamab vedotin-based EC method. In some embodiments, the antibody-drug conjugate is administered to the individual at a dose of 2.5 mg / kg, measured using the BSA-based EC method. In other embodiments, the dose contains the same mole-quantity of the drug as 2.5 mg / kg measured using the BSA-based EC method, but is measured using another method and therefore expressed differently, for example, as 1.9 mg / kg dose as measured using a disitamab vedotin-based EC method. Briefly, in the disitamab vedotin-based EC method, the absorbance of the sample at 280 nm with scatter-correction at 320 nm is read over multiple pathlengths, producing a slope (Abs / mm) which is then used to calculate protein concentration using Beer-Lambert’s law and a different extinction coefficient.

[0196] In some embodiments, the individual has HR-negative and HER2-low expression breast cancer and is administered with an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate. In some embodiments, disitamab vedotin is administered as a monotherapy. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered three doses of disitamab vedotin over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0197] In some embodiments, the individual has HR-negative and HER2-low expression breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate and an anti-PD-1 antibody (e.g., toripalimab) . In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin. In some embodiments, disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0198] In some embodiments, the individual has HR-negative and HER2-low expression breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate, carboplatin and an anti-PD-1 antibody (e.g., toripalimab) . In some embodiments, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin. In some embodiments, disitamab vedotin, toripalimab and carboplatin are administered as a combination therapy. In some embodiments, disitamab vedotin, toripalimab and carboplatin are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and carboplatin is administered at a dose of AUC3, according to the Calvert method once every 2 weeks or 14 days, or at a dose of AUC1.5, according to the Calvert method, once a week. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin, toripalimab and carboplatin over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method. The myelotoxicity and clinical efficacy of carboplatin correlate with the clearance of the drug, which is correlated to the glomerular filtration rate (GFR) . In some embodiments, the Calvert method can be used to calculate the carboplatin dose accurately in order to obtain a target AUC by using only the GFR. In some embodiments, the dosage of carboplatin is calculated using the Calvert method, which is defined by the equation: dose (mg) = AUC (mg ml-1 min) x [GFR (ml / min) + 25 (ml / min) ] .

[0199] In some embodiments, the individual has HR-negative and HER2-low expression breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate and toripalimab, followed sequentially by epirubicin, and cyclophosphamide, and toripalimab treatment. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, and treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days and the individual is subsequently administered a combination treatment of epirubicin, and cyclophosphamide, and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, and optionally treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, and optionally treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy, followed sequentially by administration of the combination of epirubicin, cyclophosphamide and toripalimab. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin intravenously at a dose of 2.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days; wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days in combination with cyclophosphamide intravenously at a dose of 600 mg / m2 once every three weeks or 21 days and in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days; and wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days. In some embodiments, the combination of disitamab vedotin and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days; and wherein the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0200] In some embodiments, the individual has HR-positive, HER2-low breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate and toripalimab. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously at a dose of 3.0 mg / kg every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0201] In some embodiments, the individual has HR-positive, HER2-low breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate and letrozole. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein letrozole is administered orally at a dose of 2.5 mg once daily. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and letrozole over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0202] In some embodiments, the individual has HER2-positive breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate and pertuzumab. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein the initial dose of pertuzumab is 840 mg intravenously the first week, and wherein any subsequent dose of pertuzumab is 420 mg intravenously; wherein pertuzumab is administered to the individual once every 3 weeks or 21 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin and pertuzumab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0203] In some embodiments, the individual has HER2-positive breast cancer and is administered with an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate, pertuzumab, and toripalimab. In some embodiments, disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein the initial dose of pertuzumab is 840 mg intravenously the first week, and wherein any subsequent dose of pertuzumab is 420 mg intravenously; wherein pertuzumab is administered to the individual once every 3 weeks or 21 days. In some embodiments, toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days. In some embodiments, the individual is administered disitamab vedotin, pertuzumab, and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days. In some embodiments, the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.

[0204] In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a total pathological complete response (tpCR) rate in the population of individuals. In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to the individual results in a complete response (CR) , partial response (PR) , or stable disease (SD) in the individual. In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, results in an improvement from baseline in in the European Organization for Research and Treatment of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and / or emotional function scores. In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or as a combination therapy, results in improved levels of tumor-infiltrating lymphocytes, PD-L1 expression, and / or CD8. In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or as a combination therapy results in association of RCB grading with other clinical endpoints.

[0205] In some embodiments, administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a breast pathological complete response (bpCR) rate in the population of individuals. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in PEPI score. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement any one or more of preoperative endocrine prognostic index, including Ki67 expression in surgical specimens, pathological tumor size, lymph node status, and estrogen receptor (ER) levels. In some embodiments, administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole to a population of individuals results in an increased proportion of patients with PEPI score of 0.

[0206] In some embodiments, response to treatment according the methods disclosed herein is evaluated using RECIST v1.1 criteria. Exemplary criteria are provided below.

[0207] In some embodiments, the individual is a human. III. Kits and Articles of Manufacture

[0208] In another aspect, an article of manufacture or kit is provided which comprises an anti-HER2 antibody-drug conjugate as described herein. The article of manufacture or kit may further comprise instructions for use of the antibody-drug conjugate in the methods of the present disclosure, e.g., for administering an effective amount of the antibody-drug conjugate in combination with another agent (e.g., (1) toripalimab, (2) carboplatin and toripalimab, (3) toripalimab, epirubicin, and cyclophosphamide, (4) letrozole, (5) pertuzumab, or (6) toripalimab and pertuzumab) to an individual in need thereof according to any one of the methods disclosed herein. In some embodiments, the article of manufacture or kit comprises (1) disitamab vedotin, (2) disitamab vedotin and toripalimab, (3) disitamab vedotin, carboplatin, and toripalimab, (4) disitamab vedotin, toripalimab, epirubicin, and cyclophosphamide, (5) disitamab vedotin and letrozole, (6) disitamab vedotin and pertuzumab, or (7) disitamab vedotin, toripalimab and pertuzumab. Thus, in certain embodiments, the article of manufacture or kit comprises instructions for the use of treating or preventing progression of cancer in an individual, e.g., according to any one of the methods disclosed herein.

[0209] The article of manufacture or kit may further comprise a container. Suitable containers include, for example, bottles, vials (e.g., dual chamber vials) , syringes (such as single or dual chamber syringes) and test tubes. The container may be formed from a variety of materials such as glass or plastic. The container holds the formulation.

[0210] The article of manufacture or kit may further comprise a label or a package insert, which is on or associated with the container, may indicate directions for reconstitution and / or use of the formulation. The label or package insert may further indicate that the formulation is useful or intended for intravenous or other modes of administration. The container holding the formulation may be a single-use vial or a multi-use vial, which allows for repeat administrations of the reconstituted formulation. The article of manufacture or kit may further comprise a second container comprising a suitable diluent. The article of manufacture or kit may further include other materials desirable from a commercial, therapeutic, and user standpoint, including other buffers, diluents, filters, needles, syringes, and package inserts with instructions for use.

[0211] In a specific embodiment, the present invention provides kits for a single dose-administration unit. Such kits comprise a container of an aqueous formulation of therapeutic antibody, including both single or multi-chambered pre-filled syringes. Exemplary pre-filled syringes are available from Vetter GmbH, Ravensburg, Germany.

[0212] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising another medicament, e.g., (1) toripalimab, (2) carboplatin and toripalimab, (3) toripalimab, epirubicin, and cyclophosphamide, (4) letrozole, (5) pertuzumab, or (6) toripalimab and pertuzumab.

[0213] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., toripalimab.

[0214] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., carboplatin and toripalimab.

[0215] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., toripalimab, epirubicin, and cyclophosphamide.

[0216] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., letrozole.

[0217] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., pertuzumab.

[0218] The article of manufacture or kit herein optionally further comprises a container comprising one or more medicaments, e.g., toripalimab and pertuzumab. EXAMPLES

[0219] The invention will be more fully understood by reference to the following examples. They should not, however, be construed as limiting the scope of the invention. It is understood that the examples and embodiments described herein are for illustrative purposes only and that various modifications or changes in light thereof will be suggested to persons skilled in the art and are to be included within the spirit and purview of this application and scope of the appended claims. Example 1: A randomized, open-label, multicenter Phase II clinical study evaluating the  efficacy and safety of disitamab vedotin or in combination with toripalimab or sequential chemotherapy in the neoadjuvant treatment of patients with HR-negative, HER2-low breast cancer.

[0220] This example describes a Phase II clinical study evaluating the efficacy and safety of disitamab vedotin or in combination with toripalimab or sequential chemotherapy in the neoadjuvant treatment of patients with HR-negative, HER2-low breast cancer. An estimated total of 80 to 160 subjects with HR-negative, central laboratory-confirmed HER2 low expression (IHC 1+, or IHC 2+ without ISH amplification) breast cancer with clinical stage T1cN1-2M0, or T2-3N0-2M0 are to be enrolled. At least 44 such subjects have been enrolled. Design

[0221] This example describes a randomized, open-label, multicenter phase II clinical trial conducted in China. An estimated 20 to 40 patients per treatment group will be enrolled, for a total of 80 to 160 patients with HR-negative, HER2-low breast cancer. Seventeen subjects have been enrolled in Group 3 described below, and 15 subjects have been enrolled in Group 4 described below. Patients with initially treated breast cancer according to AJCC 8th edition, clinical stage of T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0 are enrolled. According to the American Society of Clinical Oncology / College of American Pathologists (ASCO / CAP) 2020 guidelines, if the tumor shows estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PgR) expression<1%, the tumor is considered to be hormone receptor (HR) negative. HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 1+or IHC 2+ and no amplification of HER2 in situ hybridization (ISH) detected by central laboratory-confirmed invasive tumor immunohistochemistry (IHC) according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer (2019 edition) . Confirmation of HER2 status (both IHC and ISH assays) by central laboratory is performed.

[0222] Eligible subjects are randomized in a 1: 1: 1: 1 ratio to receive the following neoadjuvant treatments: · Group 1: disitamab vedotin disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) monotherapy, one  treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) . · Group 2: disitamab vedotin + toripalimab disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination  with toripalimab (3.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) . · Group 3: disitamab vedotin + toripalimab + carboplatin disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination  with toripalimab (3.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination with carboplatin (AUC3, intravenous infusion, every 2 weeks or AUC1.5, intravenous infusion, every one week) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) . · Group 4: disitamab vedotin + toripalimab sequential epirubicin +  cyclophosphamide + toripalimab disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination  with toripalimab (3.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) , one treatment cycle last 6 weeks, there are 2 cycles (12 weeks) . Sequential EC (epirubicin for injection, 90mg / m2, intravenous infusion, every 3 weeks; cyclophosphamide for injection, 600mg / m2, intravenous infusion, once every 3 weeks) in combination with toripalimab (3.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 2 cycles (12 weeks) .

[0223] Treatment groups are randomized using a stratified compartmentalized randomization scheme, with stratification factors including: breast cancer staging according to AJCC 8th edition (Stage II vs Stage III) ; and PD-L1 expression status (positive vs negative) .

[0224] Subjects receive neoadjuvant treatment until progressive disease, intolerable toxicity, active withdrawal, completion of protocol neoadjuvant treatment, or sponsor termination of the study (whichever occurred first) . Subjects are expected to complete neoadjuvant treatment as required. If the treatment can’ t be continued due to adverse events during neoadjuvant treatment, the treatment is handled according to the principles of drug suspension and dose adjustment. If the dose adjustment principle is exceeded, the medical monitor is contacted to determine the specific reduction or adjustment of medication. Subjects with progressive disease during neoadjuvant treatment are selected for radical surgery if they have the conditions for radical surgery. If the conditions for radical surgery are not available, corresponding systemic rescue treatment is carried out according to clinical guidelines.

[0225] During neoadjuvant treatment, tumor imaging evaluation of breast and / or axillary lymph nodes is performed using MRI scan and enhanced MRI. According to clinical indications, CT / MRI scan and enhanced CT / MRI are used for imaging evaluation of chest, abdomen, pelvis and / or neck. According to RECIST v1.1 criteria, tumor assessments are performed every 6 weeks (±7 days) after initiation of neoadjuvant treatment during the screening period until completion of neoadjuvant treatment, progressive disease, death, acceptance of new antitumor therapy, withdrawal of informed consent, or sponsor's decision to terminate the study (whichever occurred first) . The tumor evaluation time points are not affected by dose adjustment or interruption of the trial drug.

[0226] During the neoadjuvant study period, safety of the investigational drug is evaluated and adverse events and drug combinations are collected. The quality of life of subjects is evaluated by EORTC QLQ-C30 during the screening period, every 6 weeks (±7 days) after the start of neoadjuvant treatment, at the end of treatment or exit visit.

[0227] During the screening period and at the time of surgery, tumor tissue (fresh tissue or archived tissue) is collected for exploratory detection of TILs, PD-L1 expression and CD8.

[0228] Surgical treatment is completed within 3 to 6 weeks after the last dosing of neoadjuvant operable subjects, and within 6 weeks after withdrawal from therapy in subjects who withdrew early from therapy operable. According to the postoperative pathological report, the adjuvant treatment plan is determined by the investigator. Within 5 years after surgery, a comprehensive examination is recommended every 6 months (±1 month) , including physical examination, blood tumor markers, breast ultrasound (every 6 months) , chest CT scan + enhanced CT (every year) , abdominal ultrasound (every 6 months, and then changed to every year after 3 years) , bone scan (every year) . If the patient has craniocerebral symptoms, craniocerebral MRI or CT scan + enhanced CT examination are performed at any time, and the specific examination and frequency are determined by the researcher according to the clinical situation.

[0229] After completion of treatment, all subjects are followed for survival every 12 weeks (±14 days) until death, loss of follow-up, withdrawal of informed consent, end of study, or sponsor's decision to terminate study (whichever occurs first) . Inclusion / Exclusion Criteria

[0230] Subjects are eligible to be included in the study only if all the following criteria are met: 1. Invasive breast tumor tissue with low HER2 expression confirmed by the central laboratory  is defined as IHC 1+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and no amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) ; primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection; 2. Tumor hormone receptor (HR) negative, according to ASCO / CAP Guideline 2020, defined  as the proportion of IHC-stained ER and PgR nuclear staining positive invasive cancer cells are < 1%; 3. Histologically confirmed invasive breast cancer with investigator-assessed clinical stage  T1cN1-2M0, or T2-3N0-2M0, according to AJCC eighth edition; 4. As assessed by the research center, the subjects can tolerate and plan to undergo radical  surgery for breast cancer and have not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer; 5. ECOG physical status 0 or 1; 6. At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; 7. Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; 8. Bone marrow or organ function meet the following criteria within 7 days before the first  dosing (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤ 2.5  times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤ 1.5×ULN; · Creatinine clearance (CrCl) ≥ 60 mL / min calculated by Cockcroft-Gault formula. 9. Willing and able to comply with trial and follow-up procedures. · A serum pregnancy test (minimum sensitivity 25 mIU / mL or equivalent units of β- human chorionic gonadotropin [β-hCG] ) is negative within 72 hours before the first dosing of the study intervention. Subjects with false positive results who are confirmed not to be pregnant are eligible for study. · Agree to contraception for the duration of the study and for at least 6 months after the  last dose of investigational drug. · Agree not to breastfeed or donate eggs from the time of signing the informed consent  until 6 months after the last dose of investigational drug. · If sexually active and likely to result in pregnancy, continuous use of at least 2  acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 6 months after the last dosing of the investigational drug. 10. Fertile male subjects who meet the following conditions; · Agree not to donate sperm from the time of signing the informed consent until at least  4 months after the last dose of investigational drug. · If sexual activity with a fertile person is likely to result in pregnancy, continuous use of  at least 2 acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 4 months after the last dosing of the investigational drug. · If sexually active with a pregnant or breastfeeding patient, condom use continues from  informed consent until at least 4 months after the last dosing of the investigational drug; 11. Voluntarily agree to participate in the study and signs the informed consent; 12. Age ≥18 years old (including the threshold value) ; 13. Able to understand trial requirements, willing and able to follow trial and follow-up  procedures.

[0231] Subjects who meet any of the following criteria are excluded from this study plan: 1. Bilateral invasive breast cancer; 2. Previous history of invasive breast cancer; 3. Previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy  within 5 years of surgery; 4. Use of the investigational drug or major surgery within 4 weeks prior to study dosing; 5. Have received or plan to receive live or attenuated vaccine within 4 weeks before the  start of study dose; 6. Previous history of receiving allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ  transplantation; 7. Previous treatment with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other antibody-drug  conjugates; 8. Uncontrolled or significant cardiovascular and cerebrovascular diseases, including (but  not limited to) : · Any of the following have occurred within 6 months prior to first dosing, such as  congestive heart failure (NYHA Class III or IV) , myocardial infarction or cerebral infarction (other than lacunar cerebral infarction) , pulmonary embolism, unstable angina, or arrhythmia requiring treatment at the time of screening; · Primary cardiomyopathy (e.g., dilated cardiomyopathy, hypertrophic cardiomyopathy,  arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy, restricted cardiomyopathy, undefined cardiomyopathy) ; · History of clinically significant prolonged QTc, grade II type II atrioventricular block  or grade III atrioventricular block, or QTc interphase (F method) > 470 msec (female) or > 450msec (male) ; · Atrial fibrillation (EHRA grade ≥2b) ; · Uncontrolled hypertension that is deemed unsuitable for study by investigators; 9. Presence of a history of interstitial lung disease requiring treatment or current presence  of serious lung disease, including but not limited to active tuberculosis, interstitial lung disease; 10. Suffering from an active infection that requires systematic treatment; 11. Have active autoimmune diseases requiring systemic treatment within the past 2 years  (such as corticosteroids or immunosuppressive drugs, etc. ) , allowing for relevant replacement therapy (such as thyroxine, insulin, or physiologic corticosteroid replacement therapy for adrenal or pituitary insufficiency) ; 12. Have a clear past or present history of neurological or psychiatric disorders, including  epilepsy or dementia; 13. Persistent ≥ grade 2 sensory or motor neuropathy; 14. In the judgment of the investigator, there is a serious concomitant disease that endangers  the safety of the subject or interferes with the completion of the clinical study; 15. Positive HIV test result; patients with active hepatitis B or C (HBsAg positive with HBV  DNA titers higher than the upper limit of normal; HCVAb positive and HCV RNA titer higher than the upper limit of normal) ; persistent coronavirus (COVID-19) infection; 16. Known hypersensitivity or delayed anaphylaxis to components of disitamab vedotin and  toripalimab or similar drugs; 17. Known hypersensitivity or delayed anaphylaxis to epirubicin, cyclophosphamide,  carboplatin preparations or components or similar drugs; 18. Suffering from another malignancy within 5 years prior to signing the informed consent  (except for non-melanoma skin cancer, cervical carcinoma in situ, or other tumors that have been effectively treated and are considered cured malignancies) ; Endpoints

[0232] The primary efficacy endpoint of the study is total pathological complete response (tpCR) rate, i.e., proportion of subjects with a pathological assessment of tpCR (ypT0 / Tis, ypN0) in the analysis population.

[0233] Secondary efficacy endpoints include: · Survival (EFS) : time from randomization to the earliest occurrence of any of the  following events: inability to perform surgery due to any progressive disease, recurrence of disease after surgery (local or distant recurrence) , disease progression in patients without surgery, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause. Includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Disease-free survival (DFS) : time from the surgery to the earliest occurrence of any of  the following events: local / distant recurrence, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause; this includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Objective response rate (ORR) : Tumor response rate as assessed by radiography  according to RECIST v1.1. · Overall survival (OS) : the time from random to death from any cause.

[0234] Safety indicators include: · Adverse events (AEs) and their incidence; · Vital signs, physical examination, laboratory examination, electrocardiogram,  echocardiography;

[0235] Exploratory evaluation indicators include: · The association of RCB grading with other clinical endpoints; · Changes from baseline in the European Organization for Research and Treatment of  Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and emotional function scores; · Biomarker changes (TILs, PD-L1 expression, CD8 detection) . Sample size calculation and statistical analysis Sample size calculation

[0236] The study plans to enroll 20 to 40 patients in each group, with a total of 80 to 160 participants.

[0237] Bilateral 95%CI (Clopper-Pearson) obtained at different sample sizes and tpCR rates are as follows: Analytical population

[0238] Intention to treat (ITT) analysis set: Comprised of all subjects randomly enrolled according to the intentionality principle, regardless of whether they received the investigational drug or completed all treatment. When the research center assigns a random number to subjects, the subjects are considered randomized to complete.

[0239] Response evaluation set (RES) : consists of all randomized participants who have received at least one investigational drug treatment, have baseline evaluable tumor lesions, and undergo post-treatment tumor evaluation. The primary efficacy endpoint tpCR rate and the secondary efficacy endpoint ORR are analyzed mainly based on RES.

[0240] Safety Analysis Set (SS) : consists of subjects who have received at least one investigational drug treatment and at least one safety evaluation after baseline. The group of subjects is based on the actual treatment received. Statistical analysis

[0241] Statistical analysis is performed with SAS 9.4 or later statistical software. Descriptive statistics are used to summarize continuous variables, including number of cases, mean, median, standard deviation, maximum and minimum. Type variables are described in terms of the number and percentage of each type. Unless otherwise specified, the hypothesis test is a bilateral test with 0.05 as the test level.

[0242] Tabular summary and descriptive statistical analysis of demographic data and other baseline characteristics are performed by group.

[0243] For the primary endpoint total pathologic complete response (tpCR) rate, the tpCR and bilateral 95%confidence interval (CI) (Clopper-Pearson method) for each group are calculated, and the 95%CI for the difference between groups is calculated. The two groups are statistically tested for differences between the groups using the stratified Cochran-Mantel-Haenszel (CMH) method according to randomized stratification factors (breast cancer stage: stage II vs III, PD-L1 expression status: positive vs negative) , and the associated p-value is calculated.

[0244] For event-free survival (EFS) of the secondary endpoint, the Kaplan-Meier method is used to plot the EFS survival curves of the two groups and calculate the median and 25%and 75%quantiles of EFS of the two groups, and Greenwood’s formula is used to calculate the bilateral 95%CI of EFS of the two groups. 3-year  / 5-year event-free survival rates are also calculated for both groups. The two groups are statistically tested for differences in EFS between groups using a stratified log-rank according to randomly stratification factors (breast cancer stage: stage II vs III, PD-L1 expression status: positive vs negative) , and the associated p-value is calculated. A COX proportional risk model is used, with EFS time as the dependent variable, and treatment group and random stratification factors as the model independent variables for model fitting, and the hazard ratio (HR) and the bilateral 95%CI for both groups are calculated.

[0245] The secondary endpoint objective response rate (ORR) is statistically analyzed using the same method as the primary endpoint tpCR rate. Secondary endpoints disease-free survival (DFS) and overall survival (OS) are statistically analyzed in the same way as EFS.

[0246] For safety endpoints, adverse events are coded using the Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA) , confirming preferred terms (PT) and Systematic Organ Classification (SOC) . The number and incidence of all TEAE, treatment-related TEAE (TRAE) , severe TEAE, treatment-related severe TEAE and other types of events are aggregated by groups. Results

[0247] In Group 3 described above, 17 subjects have been enrolled, out of which nine have completed surgery. Among those nine subjects, four had non-pathological complete response (pCR) results, and five achieved pCR, resulting in a surprisingly effective pCR rate of 55.5%.

[0248] In Group 4 described above, 15 subjects have been enrolled, out of which five have completed surgery. Among those five subjects, two had non-pCR results, and three achieved pCR, resulting in a surprisingly effective pCR rate of 60%. Example 2: A randomized, open-label, multicenter Phase II clinical study evaluating the  efficacy and safety of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole in the neoadjuvant treatment of patients with HR-positive, HER2-low breast cancer

[0249] This example describes a Phase II clinical study evaluating the efficacy and safety of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole in the neoadjuvant treatment of patients with HR-positive, HER2-low breast cancer. A planned estimated total of 60 to 80 subjects with estrogen receptor (ER) ≥10%, central laboratory-confirmed HER2 low expression (IHC 1+, or IHC 2+ without ISH amplification) breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0 will be enrolled. At least six such subjects have been enrolled. Design

[0250] This example describes a randomized, open-label, multicenter phase II clinical trial conducted in China. The study plans to enroll 30 to 40 patients per treatment group, for a total of 60 to 80 patients with HR-positive, HER2-low breast cancer. The study enrolls patients with initially treated breast cancer according to AJCC 8th edition, clinical stage of T2-3N0-3M0. HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 1+ or IHC 2+ and no amplification of HER2 in situ hybridization (ISH) detected by central laboratory-confirmed invasive tumor immunohistochemistry (IHC) (according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer 2019 edition) . HER2 status (both IHC and ISH assays) is confirmed by central laboratory.

[0251] Eligible subjects are randomized in a 1: 1 ratio to receive disitamab vedotin in combination with toripalimab or disitamab vedotin in combination with letrozole in the neoadjuvant treatment: · Group 1: disitamab vedotin + toripalimab disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in  combination with toripalimab (3.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) . · Group 2: disitamab vedotin + letrozole disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in  combination with letrozole (2.5 mg, orally, once daily) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) ; for premenopausal subjects, treatment with an ovarian function suppressant (goserelin, leuprorelin, or triptorelin) is initiated before or concurrently with the first endocrine investigational drug treatment.

[0252] This study is randomized in a 1: 1 ratio using a stratified block randomization scheme, with stratification factors including: clinical N-stage (N-vs N+) ; and HER2 status as determined by the central laboratory (IHC 1+ vs IHC 2+ / ISH-) .

[0253] Subjects receive neoadjuvant treatment until progressive disease, intolerable toxicity, active withdrawal, completion of protocol neoadjuvant treatment, or sponsor termination of the study (whichever occurred first) . Subjects are expected to complete neoadjuvant treatment as required. If the treatment can’ t be continued due to adverse events during neoadjuvant treatment, the treatment is handled according to the principles of drug suspension and dose adjustment; If the dose adjustment principle is exceeded, the medical monitor is first contacted to determine the specific reduction or adjustment of medication. Subjects with progressive disease during neoadjuvant treatment are selected for radical surgery if they have the conditions for radical surgery. If the conditions for radical surgery are not available, corresponding systemic rescue treatment is carried out according to clinical guidelines.

[0254] During neoadjuvant treatment, tumor imaging evaluation of breast and / or axillary lymph nodes is performed using MRI scan + enhanced MRI. According to clinical indications, CT / MRI scan + enhanced CT / MRI are used for imaging evaluation of chest, abdomen, pelvis and / or neck. According to RECIST v1.1 criteria, tumor assessments are performed every 6 weeks (±7 days) after initiation of neoadjuvant treatment during the screening period until completion of neoadjuvant treatment, progressive disease, death, acceptance of new antitumor therapy, withdrawal of informed consent, or sponsor's decision to terminate the study (whichever occurred first) . The tumor evaluation time points are not affected by dose adjustment or interruption of the trial drug.

[0255] During the neoadjuvant study period, the safety of the investigational drug is evaluated and the adverse events and drug combinations are collected. The quality of life of subjects is evaluated by EORTC QLQ-C30 during the screening period, every 6 weeks (±7 days) after the start of neoadjuvant treatment, at the end of treatment or exit visit.

[0256] During the screening period, neoadjuvant treatment period and at the time of surgery, tumor tissue (fresh tissue or archived tissue) is collected for exploratory detection of TILs, PD-L1 expression, Ki67 expression, endocrine indicators, CD8 and RCB grading, etc.

[0257] Surgical treatment is completed within 3 to 6 weeks after the last dosing of neoadjuvant operable subjects, and within 6 weeks after withdrawal from therapy in subjects who withdrew early from therapy operable. According to the postoperative pathological report, the adjuvant treatment plan is determined by the investigator. Within 5 years after surgery, a comprehensive examination is recommended every 6 months (±1 month) , including physical examination, blood tumor markers, breast ultrasound (every 6 months) , chest CT scan + enhanced CT (every year) , abdominal ultrasound (every 6 months, and then changed to every year after 3 years) , bone scan (every year) , If the patient has craniocerebral symptoms, craniocerebral MRI or CT scan + enhanced CT examination are performed at any time, and the specific examination and frequency are determined by the researcher according to the clinical situation.

[0258] After completion of treatment, all subjects are followed for survival every 12 weeks (±14 days) until death, loss of follow-up, withdrawal of informed consent, end of study, or sponsor's decision to terminate study (whichever occurred first) . Inclusion / Exclusion Criteria

[0259] Subjects are eligible to be included in the study only if all the following criteria are met: 1. Voluntarily agree to participate in the study and sign the informed consent; 2. Age ≥18 years old (including the threshold value) ; 3. Histologically confirmed invasive breast cancer with clinical stage T2-3 (tumor > 2cm) ,  cN0-3, M0; 4. As assessed by the research center, the subjects can tolerate and plan to undergo radical  surgery for breast cancer and have not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer; 5. Invasive breast tumor tissue with low HER2 expression confirmed by the central  laboratory is defined as IHC 1+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and no amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) ; primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection; 6. Tumor estrogen receptor (ER) expression ≥10% (according to ASCO / CAP guidelines  2020) ; 7. Tumor IHC detection Ki67 ≥ 20%; 8. ECOG physical status 0 or 1; 9. At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; 10. Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; 11. Bone marrow or organ function meet the following criteria within 7 days before the study  dose (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤ 2.5  times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤ 1.5×ULN; · Serum creatinine ≤ 1.5×ULN or creatinine clearance (CrCl) ≥ 50 mL / min according  to Cockcroft-Gault formula method; 12. Fertile female subjects who meet the following conditions · A serum pregnancy test (minimum sensitivity 25 mIU / mL or equivalent units of β- human chorionic gonadotropin [β-hCG] ) is negative within 72 hours before the first dosing of the study intervention. Subjects with false positive results who are confirmed not to be pregnant are eligible for study. · Agree to contraception for the duration of the study and for at least 6 months after the  last dose of investigational drug. · Agree not to breastfeed or donate eggs from the time of signing the informed consent  until 6 months after the last dose of investigational drug. · If sexually active and likely to result in pregnancy, continuous use of at least 2  acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 6 months after the last dosing of the investigational drug. 13. Fertile male subjects who meet the following conditions · Agree not to donate sperm from the time of signing the informed consent until at least  4 months after the last dose of investigational drug. · If engaging in sexual activity with a fertile person is likely to result in pregnancy,  continuous use of at least 2 acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 4 months after the last dosing of the investigational drug. · If sexually active with a pregnant or breastfeeding patient, condom use continues  from informed consent until at least 4 months after the last dosing of the investigational drug. 14. Able to understand trial requirements, willing and able to follow trial and follow-up  procedures.

[0260] Subjects who met any of the following criteria are excluded from this study plan: 1. Bilateral invasive breast cancer; 2. Previous history of invasive breast cancer; 3. Previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy  within 5 years of surgery; 4. Use of the investigational drug or major surgery within 4 weeks prior to study dosing; 5. Have received or plan to receive live or attenuated vaccine within 4 weeks before the  start of study dose; 6. Previous history of receiving allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ  transplantation; 7. Previous treatment with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other antibody-drug  conjugates; 8. Uncontrolled or significant cardiovascular and cerebrovascular diseases, including (but  not limited to) : · Any of the following have occurred within 6 months prior to first dosing, such as  congestive heart failure (NYHA Class III or IV) , myocardial infarction or cerebral infarction (other than lacunar cerebral infarction) , pulmonary embolism, unstable angina, or arrhythmia requiring treatment at the time of screening; · Primary cardiomyopathy (e.g., dilated cardiomyopathy, hypertrophic cardiomyopathy,  arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy, restricted cardiomyopathy, undefined cardiomyopathy) ; · History of clinically significant prolonged QTc, grade II type II atrioventricular block  or grade III atrioventricular block, or QTc interphase (F method) > 470 msec (female) or > 450msec (male) ; · Atrial fibrillation (EHRA grade ≥2b) ; · Uncontrolled hypertension that is deemed unsuitable for study by investigators; 9. Presence of other treatable or serious lung diseases, including but not limited to active  tuberculosis, interstitial lung disease, etc. ; 10. Suffering from an active infection that requires systematic treatment; 11. Have active autoimmune diseases requiring systemic treatment within the past 2 years  (such as corticosteroids or immunosuppressive drugs, etc. ) , allowing for relevant replacement therapy (such as thyroxine, insulin, or physiologic corticosteroid replacement therapy for adrenal or pituitary insufficiency) ; 12. Have a clear past or present history of neurological or psychiatric disorders, including  epilepsy or dementia; 13. Persistent ≥ grade 2 sensory or motor neuropathy; 14. In the judgment of the investigator, there is a serious concomitant disease that endangers  the safety of the subject or interferes with the completion of the clinical study; 15. Positive HIV test result; patients with active hepatitis B or C (HBsAg positive with HBV  DNA titers higher than the upper limit of normal; HCVAb positive and HCV RNA titer higher than the upper limit of normal) ; persistent coronavirus (COVID-19) infection; 16. Known hypersensitivity or delayed anaphylaxis to certain components of disitamab  vedotin, letrozole and toripalimab or similar drugs; 17. Suffering from another malignancy within 5 years prior to signing the informed consent  (except for non-melanoma skin cancer, cervical carcinoma in situ, or other tumors that have been effectively treated and are considered cured malignancies) . Endpoints

[0261] The primary objective of the study is to evaluate the efficacy of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole in the neoadjuvant treatment of patients with HR-positive, HER2-low breast cancer. The primary efficacy endpoint is breast pathological complete response (bpCR) rate, i.e., proportion of subjects with a pathological assessment of bpCR (ypT0 / Tis, ypN0) in the analysis population.

[0262] The secondary objective of the study is to evaluate the safety of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole in the neoadjuvant treatment of patients with HR-positive, HER2-low breast cancer. Secondary efficacy endpoints include: · Total pathological complete response (tpCR) rate, i.e., proportion of subjects with a  pathological assessment of tpCR (ypT0 / Tis, ypN0) in the analysis population; · Event-free survival (EFS) : time from randomization to the earliest occurrence of any  of the following events: inability to perform surgery due to any progressive disease, recurrence of disease after surgery (local or distant recurrence) , disease progression in patients without surgery, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause. Includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Disease-free survival (DFS) : time from the surgery to the earliest occurrence of any of  the following events: local / distant recurrence, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause; this includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Objective response rate (ORR) : Tumor response rate as assessed by radiography  according to RECIST v1.1. · Overall survival (OS) : the time from random to death from any cause.

[0263] Safety indicators include: · Adverse events (AEs) and their incidence; · Vital signs, physical examination, laboratory examination, electrocardiogram,  echocardiography.

[0264] Exploratory objectives include: · To evaluate correlations between biomarkers and clinical outcomes; · To evaluate correlations between endocrine indicators and clinical outcomes; · To explore quality of life of subjects receiving disitamab vedotin in combination  with toripalimab or letrozole;

[0265] Exploratory evaluation indicators include: · Biomarker changes (TILs, CD8, PD-L1, Ki67 expression, etc. ) ; · Changes from baseline in the European Organization for Research and Treatment  of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and emotional function scores; · PEPI score (preoperative endocrine prognostic index, including Ki67 expression in  surgical specimens, pathological tumor size, lymph node status, and estrogen receptor [ER] levels) ; · Proportion of patients with PEPI score =0; · RCB (residual cancer burden) 0&I grade ratios. Sample size calculation and statistical analysis Sample size calculation

[0266] The study plans to enroll 30 to 40 patients in each group, with a total of 60 to 80 participants.

[0267] The historical control bpCR is estimated based on the results of tpCR in the historical literature for similar indications, assuming that the bpCR (P0) of the historical control is 10%～25%, and also assuming that the difference between the expected bpCR (P1) and the historical control (P1-P0) of this study is 10%. Based on the above assumptions, under the condition that the significance level α=0.2, the bpCR in this study can achieve a statistically significant power compared with the historical control when the sample size of a single group is 30 to 40 cases, and the overall power range is about 0.50 to 0.74, as detailed in the following table: Analytical population

[0268] Intention to treat (ITT) analysis set: Comprised of all subjects randomly enrolled according to the intentionality principle, regardless of whether they received the investigational drug or completed all treatment. When the research center assigns a random number to subjects, the subjects are considered randomized to complete.

[0269] Per Protocol Set (PPS) : Consists of all subjects who are randomized and met the primary inclusion / exclusion criteria, received at least one treatment with investigational drug, and had no major protocol deviations. PPS analysis set definitions are clarified prior to database lock.

[0270] Safety Analysis Set (SS) : Consists of subjects who have received at least one investigational drug treatment and at least one safety evaluation after baseline. The group of subjects is based on the actual treatment received. Statistical analysis

[0271] Statistical analysis is performed with SAS 9.4 or later statistical software. Descriptive statistics are used to summarize continuous variables, including number of cases, mean, median, standard deviation, maximum and minimum. Type variables are described in terms of the number and percentage of each type. Unless otherwise specified, the hypothesis test is a bilateral test with 0.05 as the test level.

[0272] Tabular summary and descriptive statistical analysis of demographic data and other baseline characteristics are performed by group.

[0273] For the primary endpoint breast pathologic complete response (bpCR) rate, the bpCR and bilateral 95%confidence interval (CI) (Clopper-Pearson method) for each group are calculated, and the 95%CI for the difference between groups is calculated. The two groups are statistically tested for differences between the groups using the stratified Cochran-Mantel-Haenszel (CMH) method according to randomized stratification factors (Clinical N stage: N-vs. N+, HER2 expression: IHC1+ vs. IHC2+ / ISH-) , and the associated p-value is calculated.

[0274] For event-free survival (EFS) of the secondary endpoint, the Kaplan-Meier method is used to plot the EFS survival curves of the two groups and calculate the median and 25%and 75%quantiles of EFS of the two groups, and Greenwood’s formula is used to calculate the bilateral 95%CI of EFS of the two groups. 3-year  / 5-year event-free survival rates are also calculated for both groups. The two groups are statistically tested for differences in EFS between groups using a stratified log-rank according to randomly stratification factors (Clinical N stage: N-vs. N+, HER2 expression: IHC1+ vs. IHC2+ / ISH-) , and the associated p-value is calculated. A COX proportional risk model is used, with EFS time as the dependent variable, treatment group and random stratification factors as the model independent variables for model fitting, and the hazard ratio (HR) and the bilateral 95%CI for both groups are calculated.

[0275] The secondary endpoint total pathologic complete response (tpCR) , objective response rate (ORR) are statistically analyzed using the same method as the primary endpoint bpCR rate. Secondary endpoints disease-free survival (DFS) and overall survival (OS) are statistically analyzed in the same way as EFS. For safety endpoints, adverse events are coded using the Medical Dictionary for Regulatory  Activities (MedDRA) , confirming preferred terms (PT) and Systematic Organ Classification (SOC) . The number and incidence of all TEAE, treatment-related TEAE (TRAE) , severe TEAE, treatment-related severe TEAE and other types of events are aggregated by groups. Results

[0276] Six subjects have been enrolled, out of which three have tumor assessments with a partial response (PR) of greater than 50%. There have been no surgical outcomes. Example 3: A randomized, open-label, multicenter phase II clinical study evaluating the  efficacy and safety of disitamab vedotin in combination with pertuzumab with or without toripalimab in the neoadjuvant treatment of patients with HER2-positive breast cancer

[0277] This example describes a Phase II clinical study evaluating the efficacy and safety of disitamab vedotin in combination with pertuzumab with or without toripalimab in the neoadjuvant treatment of patients with HER2-positive breast cancer. A planned estimated total of 40 to 80 subjects with central laboratory-confirmed HER2-positive (IHC 3+, or IHC 2+ with ISH amplification) breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0 will be enrolled. At least 31 such subjects have been enrolled. Design

[0278] This example describes a randomized, open-label, multicenter phase II clinical trial conducted in China. A planned estimated 20 to 40 patients per treatment group, for a total of 40 to 80 patients with HER2-positive breast cancer, will be enrolled. Sixteen subjects have been enrolled in Group 1 described below, and 15 subjects have been enrolled in Group 2 described below. Patients with initially treated breast cancer according to AJCC 8th edition, clinical stage of T2-3N0-3M0 are enrolled. HER2 low expression is defined as HER2 protein expression of IHC 3+or IHC 2+ and amplification of HER2 in situ hybridization (ISH) detected by central laboratory-confirmed invasive tumor immunohistochemistry (IHC) (according to HER2 Detection Guidelines for Breast Cancer 2019 edition) . HER2 status (both IHC and ISH assays) is confirmed by central laboratory.

[0279] Eligible subjects are randomized in a 1: 1 ratio to receive disitamab vedotin in combination with pertuzumab with or without toripalimab in the neoadjuvant treatment: · Group 1: disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination  with pertuzumab (the initial dose is 840mg intravenously followed by 420mg every 3 weeks) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) . · Group 2: disitamab vedotin (2.0 mg / kg, intravenous infusion, every 2 weeks) in combination  with toripalimab (3.0 mg, intravenous infusion, every 2 weeks) , in combination with pertuzumab (the initial dose is 840mg intravenously followed by 420mg every 3 weeks) , one treatment cycle lasts 6 weeks, there are 3 cycles (18 weeks) .

[0280] This study is randomized in a 1: 1 ratio using a stratified block randomization scheme, with stratification factors including: clinical N-stage (N-vs N+) ; Hormone receptor (HR) status (positive vs. negative) . HR status: According to the ASCO / CAP 2020 guidelines, estrogen receptor and progesterone receptor expression in invasive cancer < 1%is considered negative for hormone receptors (HR) . If the expression of estrogen receptor or progesterone receptor in tumor cells is ≥1%, the hormone receptor (HR) is considered positive.

[0281] Subjects receive neoadjuvant treatment until progressive disease, intolerable toxicity, active withdrawal, completion of protocol neoadjuvant treatment, or sponsor termination of the study (whichever occurred first) . Subjects are expected to complete neoadjuvant treatment as required. If the treatment can’ t be continued due to adverse events during neoadjuvant treatment, the treatment is handled according to the principles of drug suspension and dose adjustment; if the dose adjustment principle is exceeded, the medical monitor is first contacted to determine the specific reduction or adjustment of medication. Subjects with progressive disease during neoadjuvant treatment will be selected for radical surgery if they have the conditions for radical surgery. If the conditions for radical surgery are not available, corresponding systemic rescue treatment is carried out according to clinical guidelines.

[0282] During neoadjuvant treatment, tumor imaging evaluation of breast and / or axillary lymph nodes are performed using MRI scan + enhanced MRI. According to clinical indications, CT / MRI scan + enhanced CT / MRI are used for imaging evaluation of chest, abdomen, pelvis and / or neck. According to RECIST v1.1 criteria, tumor assessments are performed every 6 weeks (±7 days) after initiation of neoadjuvant treatment during the screening period until progressive disease, death, acceptance of new antitumor therapy, withdrawal of informed consent, or sponsor's decision to terminate the study (whichever occurred first) . The tumor evaluation time points are not affected by dose adjustment or interruption of the trial drug.

[0283] During the neoadjuvant study period, the safety of the investigational drug is evaluated and the adverse events and drug combinations are collected. The quality of life of subjects is evaluated by EORTC QLQ-C30 during the screening period, every 6 weeks (±7 days) after the start of neoadjuvant treatment, at the end of treatment or exit visit.

[0284] During the screening period and at the time of surgery, tumor tissue (fresh tissue or archived tissue) is collected for exploratory detection of TILs, PD-L1 expression, CD8.

[0285] Surgical treatment is completed within 3 to 6 weeks after the last dosing of neoadjuvant operable subjects, and within 6 weeks after withdrawal from therapy in subjects who withdrew early from therapy operable. According to the postoperative pathological report, the adjuvant treatment plan is determined by the investigator. Within 5 years after surgery, a comprehensive examination is recommended every 6 months (±1 month) , including physical examination, blood tumor markers, breast ultrasound (every 6 months) , chest CT scan + enhanced CT (every year) , abdominal ultrasound (every 6 months, and then changed to every year after 3 years) , bone scan (every year) . If the patient has craniocerebral symptoms, craniocerebral MRI or CT scan + enhanced CT examination are performed at any time, and the specific examination and frequency are determined by the researcher according to the clinical situation.

[0286] After completion of treatment, all subjects are followed for survival every 12 weeks (±14 days) until death, loss of follow-up, withdrawal of informed consent, end of study, or sponsor's decision to terminate study (whichever occurred first) . Inclusion / Exclusion Criteria

[0287] Subjects are eligible to be included in the study only if all the following criteria are met: 1. Voluntarily agree to participate in the study and sign the informed consent; 2. Age ≥18 years old (including the threshold value) ; 3. Histologically confirmed invasive breast cancer with clinical stage T2-3 (tumor > 2cm) ,  cN0-3, M0; 4. Invasive breast tumor tissue with HER2-positive confirmed by the central laboratory is  defined as IHC 3+ or IHC 2+ expression of HER2 protein detected by immunohistochemistry (IHC) , and amplification detected by in situ hybridization (ISH) (according to the Breast Cancer HER2 Detection Guidelines 2019) ; primary tumor specimens (wax pieces, slices or fresh tissues) are provided for HER2 detection; 5. As assessed by the research center, the subjects can tolerate and plan to undergo radical  surgery for breast cancer and have not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer; 6. ECOG physical status 0 or 1; 7. At least one measurable lesion according to RECIST v1.1 standard; 8. Heart function: · New York Heart Association (NYHA) Grade < 3; · left ventricular ejection fraction ≥50%; 9. Bone marrow or organ function meet the following criteria within 7 days before the study  dose (normal values are based on the clinical trial center, no blood transfusion, hematopoietic stimulating factors, albumin or blood products within 14 days before the examination) : · Hemoglobin ≥ 90g / L; · Absolute neutrophil count (ANC) ≥1.5×109 / L; · Platelet ≥ 100 ×109 / L; · Serum total bilirubin ≤ 1.5 times the upper limit of normal value (ULN) ; · Aspartate aminotransferase (AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT) ≤ 2.5  times the upper limit of normal value; · International normalized ratio (INR) and activated partial thrombin time ≤ 1.5×ULN; · Creatinine clearance (CrCl) ≥ 50 mL / min according to Cockcroft-Gault formula  method; 10. Fertile subjects who meet the following conditions · A serum pregnancy test (minimum sensitivity 25 mIU / mL or equivalent units of β- human chorionic gonadotropin [β-hCG] ) is negative within 72 hours before the first dosing of the study intervention. Subjects with false positive results who are confirmed not to be pregnant are eligible for study. · Agree to contraception for the duration of the study and for at least 6 months (7  months after the last dose of pertuzumab) after the last dose of investigational drug. · Agree not to breastfeed or donate eggs from the time of signing the informed consent  until 6 months (7 months after the last dose of pertuzumab) after the last dose of investigational drug. · If sexually active and likely to result in pregnancy, continuous use of at least 2  acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 6 months (7 months after the last dose of pertuzumab) after the last dosing of the investigational drug. 11. Fertile subjects who meet the following conditions · Agree not to donate sperm from the time of signing the informed consent until at least  4 months (7 months after the last dose of pertuzumab) after the last dose of investigational drug. · If engaging in sexual activity with a fertile person is likely to result in pregnancy,  continuous use of at least 2 acceptable forms of contraception, at least 1 of which is highly effective from the time of the informed consent and continues until at least 4 months (7 months after the last dose of pertuzumab) after the last dosing of the investigational drug. · If sexually active with a pregnant or breastfeeding patient, condom use continues  from informed consent until at least 4 months (7 months after the last dose of pertuzumab) after the last dosing of the investigational drug. 12. Able to understand trial requirements, willing and able to follow trial and follow-up  procedures.

[0288] Subjects who meet any of the following criteria are excluded from this study plan: 1. Bilateral invasive breast cancer; 2. Previous history of invasive breast cancer; 3. Previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy  within 5 years of surgery; 4. Previous treatment with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other antibody-drug  conjugates; 5. Previous received anti-HER2 therapy, including but not limited to ADC; 6. Use of the investigational drug or major surgery within 4 weeks prior to study dosing; 7. Have received or plan to receive live or attenuated vaccine within 4 weeks before the  start of study dose; 8. Previous history of receiving allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ  transplantation; 9. Uncontrolled or significant cardiovascular and cerebrovascular diseases, including (but  not limited to) : · Any of the following occurring within 6 months prior to first dosing, such as  congestive heart failure (NYHA Class III or IV) , myocardial infarction or cerebral infarction (other than lacunar cerebral infarction) , pulmonary embolism, unstable angina, or arrhythmia requiring treatment at the time of screening; · Primary cardiomyopathy (e.g., dilated cardiomyopathy, hypertrophic cardiomyopathy,  arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy, restricted cardiomyopathy, undefined cardiomyopathy) ; · History of clinically significant prolonged QTc, grade II type II atrioventricular block  or grade III atrioventricular block, or QTc interphase (F method) > 470 msec (female) or > 450msec (male) ; · Atrial fibrillation (EHRA grade ≥2b) ; · Uncontrolled hypertension that is deemed unsuitable for study by investigators; 10. Presence of a history of interstitial lung disease requiring treatment or current presence  of serious lung disease, including but not limited to active tuberculosis, interstitial lung disease; 11. Have a clear past or present history of neurological or psychiatric disorders, including  epilepsy or dementia; 12. Persistent ≥ grade 2 sensory or motor neuropathy; 13. Suffering from an active infection that requires systematic treatment; · Active infections requiring systemic treatment ≤7 days prior to drug dosing,  allowing routine antimicrobial prophylaxis; · Positive HIV test result; · Patients with active hepatitis B or C (HBsAg positive with HBV DNA titers  higher than the upper limit of normal; HCVAb positive and HCV RNA titer higher than the upper limit of normal) ; · Persistent coronavirus (COVID-19) infection; 14. Have active autoimmune diseases requiring systemic treatment within the past 2 years  (such as corticosteroids or immunosuppressive drugs, etc. ) , allowing for relevant replacement therapy (such as thyroxine, insulin, or physiologic corticosteroid replacement therapy for adrenal or pituitary insufficiency) ; 15. Suffering from another malignancy within 5 years prior to signing the informed consent  (except for non-melanoma skin cancer, cervical carcinoma in situ, localized prostate cancer, stage I endometrial cancer or other tumors that have been effectively treated and are considered cured malignancies) ; 16. Known hypersensitivity or delayed anaphylaxis to certain components of disitamab  vedotin, pertuzumab and toripalimab or similar drugs; 17. In the judgment of the investigator, there is a serious concomitant disease that endangers  the safety of the subject or interferes with the completion of the clinical study; Endpoints

[0289] The primary objective of the study is to evaluate the efficacy of disitamab vedotin in combination with pertuzumab with or without toripalimab in the neoadjuvant treatment of patients with HER2-positive breast cancer. The primary efficacy endpoint is total pathological complete response (tpCR, defined as the absence of residual invasive cancer [ypT0 / is, ypN0] in breast and axillary lymph nodes) , and the proportion of subjects with a pathological assessment of tpCR in the analysis population.

[0290] The secondary objective of the study is to evaluate the safety of disitamab vedotin in combination with pertuzumab with or without toripalimab in the neoadjuvant treatment of patients with HER2-positive breast cancer. Secondary efficacy endpoints include: · Breast pathological complete response (bpCR, the absence of residual invasive cancer  ypT0 / Tis in breast) rate, i.e., the proportion of subjects with a pathological assessment of bpCR in the analysis population; · Event-free survival (EFS) : time from randomization to the earliest occurrence of any  of the following events: inability to perform surgery due to any progressive disease, recurrence of disease after surgery (local or distant recurrence) , disease progression in patients without surgery, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause. Includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Disease-free survival (DFS) : time from the surgery to the earliest occurrence of any of  the following events: local / distant recurrence, second primary cancer (breast cancer or other malignancy) , or death from any cause; This includes 3-year and 5-year event-free survival rates. · Objective response rate (ORR) : Tumor response rate as assessed by radiography  according to RECIST v1.1. · Overall survival (OS) : the time from random to death from any cause.

[0291] Safety indicators include: · Adverse events (AEs) and their incidence; · Vital signs, physical examination, laboratory examination, electrocardiogram,  echocardiography.

[0292] Exploratory objectives include: · To evaluate correlations between biomarkers and clinical outcomes; · To explore quality of life of subjects receiving disitamab vedotin in combination  with pertuzumab with or without toripalimab.

[0293] Exploratory evaluation indicators include: · Biomarker changes (TILs, CD8, PD-L1, etc. ) ; · Changes from baseline in the European Organization for Research and Treatment  of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and emotional function scores; · RCB grading. Sample size calculation and statistical analysis Sample size calculation

[0294] The study plans to enroll 20 to 40 patients in each group, with a total of 40 to 80 participants.

[0295] According to the historical literature on similar indications, the tpCR (P0) of the historical control is assumed to be 50%～65%, and the difference between the expected tpCR (P1) and the historical control (P1-P0) of this study is assumed to be 15%. Based on the above assumptions, under the condition that the significance level α=0.2, the tpCR in this study can achieve a statistically significant power compared with the historical control when the sample size of a single group is 20 to 40 cases, and the overall power range is about 0.53 to 0.8, as detailed in the following table Analytical population

[0296] Intention to treat (ITT) analysis set: Comprised of all subjects randomly enrolled according to the intentionality principle, regardless of whether they received the investigational drug or completed all treatment. When the research center assigns a random number to subjects, the subjects are considered randomized to complete.

[0297] Per Protocol Set (PPS) : Consists of all subjects who are randomized and met the primary inclusion / exclusion criteria, received at least one treatment with investigational drug, and had no major protocol deviations. PPS analysis set definitions are clarified prior to database lock.

[0298] Safety Analysis Set (SS) : Consists of subjects who have received at least one investigational drug treatment and at least one safety evaluation after baseline. The group of subjects is based on the actual treatment received. Statistical analysis

[0299] Statistical analysis is performed with SAS 9.4 or later statistical software. Descriptive statistics are used to summarize continuous variables, including number of cases, mean, median, standard deviation, maximum and minimum. Type variables are described in terms of the number and percentage of each type. Unless otherwise specified, the hypothesis test is a bilateral test with 0.05 as the test level.

[0300] Tabular summary and descriptive statistical analysis of demographic data and other baseline characteristics are performed by group.

[0301] For the primary endpoint tpCR and secondary endpoint bpCR, the tpCR, bpCR and bilateral 95%confidence interval (CI) (Clopper-Pearson method) for each group are calculated, and the 95%CI for the difference between groups is calculated. The two groups are statistically tested for differences between the groups using the stratified Cochran-Mantel-Haenszel (CMH) method according to randomized stratification factors (Clinical N stage: N-vs. N+, HER2 expression: IHC1+ vs. IHC2+ / ISH-) , and the associated p-value is calculated.

[0302] For event-free survival (EFS) of the secondary endpoint, the Kaplan-Meier method is used to plot the EFS survival curves of the two groups and calculate the median and 25%and 75%quantiles of EFS of the two groups, and Greenwood’s formula is used to calculate the bilateral 95%CI of EFS of the two groups. 3-year  / 5-year event-free survival rates are also calculated for both groups. The two groups are statistically tested for differences in EFS between groups using a stratified log-rank according to randomly stratification factors (Clinical N stage: N-vs. N+, HER2 expression: IHC1+ vs. IHC2+ / ISH-) , and the associated p-value is calculated. A COX proportional risk model is used, with EFS time as the dependent variable, treatment group and random stratification factors as the model independent variables for model fitting, and the hazard ratio (HR) and the bilateral 95%CI for both groups are calculated.

[0303] The secondary endpoint objective response rate (ORR) is statistically analyzed using the same method as the primary endpoint tpCR rate. Secondary endpoints disease-free survival (DFS) and overall survival (OS) are statistically analyzed in the same way as EFS.

[0304] For safety endpoints, adverse events are coded using the Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA) , confirming preferred terms (PT) and Systematic Organ Classification (SOC) . The number and incidence of all TEAE, treatment-related TEAE (TRAE) , severe TEAE, treatment-related severe TEAE and other types of events are aggregated by groups. Results

[0305] In Group 1 described above, 16 subjects have been enrolled, out of which 10 have completed surgery. Among those 10 subjects, eight had non-pCR results, and two achieved pCR, with a pCR rate of 20%.

[0306] In Group 2 described above, 15 subjects have been enrolled, out of which 10 have completed surgery. Among those 10 subjects, four had non-pCR results, and six achieved pCR, with a pCR rate of 50%. Example 4: Bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method

[0307] This example describes a method used to determine the concentration of disitamab vedotin using a bovine serum albumin-based (BSA-based) UV spectrophotometric method that determines the protein concentration using the absorbance of the sample and an extinction coefficient (EC) .

[0308] The Lowry colorimetric method was previously used to determine disitamab vedotin concentration using BSA as the reference standard. Alternatively, UV spectrophotometric methods were also previously developed to determine the protein concentration using the absorbance of the sample and an extinction coefficient. The BSA-based extinction coefficient method used in the present application uses an EC value that was established mathematically to align the Lowry colorimetric and UV spectrophotometric methods, such that both yield the same estimated measurements of disitamab vedotin protein concentration.

[0309] Briefly, the sample is transferred to a vessel, and the absorbance at 280 nm with scatter-correction at 320 nm is read over multiple pathlengths using a SoloVPE system. This produces a slope (Abs / mm) which is then used to calculate protein concentration using Beer’s law and a product-specific extinction coefficient.

[0310] Calculations and Data Analysis: · The concentration will be calculated by the SoloVPE software, and results can be  included in a report generated by the software. Alternatively, calculate the protein concentration using the following equation: Where: m280 = slope at 280 nm (mm-1) ε = Extinction Coefficient · Calculate the average concentration from the duplicate or triplicate measurements  to three decimal places. · For lyophilized samples: Calculate drug product content for lyophilized product  vials using the following equation: drug product content = concentration (mg / mL) x final reconstitution volume  (mL / vial) Example 5: Concentration calculation of disitamb vedotin Introduction to Methods

[0311] This describes the method for a universal protein concentration assay, wherein the protein has the maximum UV absorption at 280 nm. Measure the absorbance value of the sample at this wavelength, and the absorbance value at 280 nm is proportional to the protein concentration, which is calculated according to the Lambert-Beer law. Main equipment

[0312] UV-Vis spectrophotometer PE model: Lambda 365 Analysis process

[0313] The sample was diluted to 0.5-0.1mg / ml with ultrapure water (the dilution multiple was determined according to the labeled sample concentration, and the dilution multiple ≤ 10 each time) , and the final volume of the sample after dilution ≥ 1 ml. Two sample solutions were prepared in parallel, labeled A and B respectively, diluted and then measured the absorbance of A and B solutions at 260 nm, 280 nm , 320 nm , 325 nm , 330 nm , 335 nm , 340 nm , 345 nm , 350 nm, and each solution was measured twice in parallel. Data AnalysisConcentration Calculation

[0314] The formula for calculating protein concentration of the sample solution is listed below, and the average protein concentration of the two parallel solutions is used as the final value. Where: 1.07 = the extinction coefficient value ( (mg / ml) -1·cm-1) of disitamab vedotin; A280 = the average absorbance of the sample solution at 280 nm.System Suitability

[0315] 1) the CV values of absorbance values were measured in parallel ≤ 2.0%

[0316] 2) the blank absorbance value A280 ≤ 0.001Standard Limit

[0317] The protein concentration of sample is 9.0～11.0 mg / ml.

Claims

1.A method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .2.A method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .3.The method of claim 1 or 2, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.4.The method of any one of claims 1-3, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.5.The method of any one of claims 1-4, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.6.The method of any one of claims 1-5, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: 7.The method of any one of claims 1-6, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.8.The method of claim 7, wherein disitamab vedotin is administered as a monotherapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.9.The method of claim 7 or 8, wherein the individual is administered three doses of disitamab vedotin over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.10.The method of claim 7, wherein disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody are administered as a combination therapy, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.11.The method of claim 7 or 10, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy.12.The method of claim 7, 10, or 11, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.13.The method of any one of claims 7 and 10-12, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.14.The method of claim 7, 10, or 11, wherein disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin are administered as a combination therapy.15.The method of any one of claims 7, 10, 11, and 14, wherein disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin are administered as a combination therapy; wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein carboplatin is administered at a dose of AUC3, according to the Calvert method once every 2 weeks or 14 days, or at a dose of AUC1.5, according to the Calvert method, once a week or 7 days.16.The method of any one of claims 7, 10, 11, 14, and 15, wherein the individual is administered disitamab vedotin, toripalimab, and carboplatin over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.17.The method of any one of claims 7 and 10-12, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.18.The method of claim 17, wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days, cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days, and toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days.19.The method of claim 18, wherein epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab are administered to the individual over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.20.The method of claims 18 or 19, wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.21.The method of any one of claims 7 and 10-12, where disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy, followed sequentially by administration of the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab.22.The method of any one of claims 7, 10-12, and 17-21, wherein the individual is administered disitamab vedotin intravenously at a dose of 2.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0 mg / kg once every 2 weeks or 14 days; wherein the individual is further administered epirubicin intravenously at a dose of 90mg / m2 once every three weeks or 21 days in combination with cyclophosphamide intravenously at a dose of 600mg / m2 once every three weeks or 21 days and in combination with toripalimab intravenously at a dose of 3.0mg / kg once every 2 weeks or 14 days; and wherein the individual is administered the combination of epirubicin, cyclophosphamide, and toripalimab after the individual is administered the combination of disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks or 42 days.23.The method of any one of claims 7, 10-12, and 17-22, wherein the combination of disitamab vedotin (DV) and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days; and wherein the combination of epirubicin, cyclophosphamide and toripalimab is administered over a treatment cycle of six weeks or 42 days, optionally wherein the treatment continues for at least two cycles, or 12 weeks or 84 days.24.The method of any one of claims 8-23, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.25.The method of any one of claims 1-24, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T1cN1-2M0 or T2-3N0-2M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.26.The method of any one of claims 1-25, wherein the method for treating or preventing progression of HR-negative and HER2-low expression breast cancer is a neoadjuvant treatment.27.The method of any one of claims 1-26, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.28.The method of any one of claims 1-27, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay.29.The method of any one of claims 1-27, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) .30.The method of any one of claims 1-29, wherein the individual does not have bilateral invasive breast cancer.31.The method of any one of claims 1-30, wherein the individual does not have previous history of invasive breast cancer.32.The method of any one of claims 1-31, wherein the individual has not previously had carcinoma in situ of the breast and received adjuvant endocrine therapy within 5 years of surgery.33.The method of any one of claims 1-32, wherein the anti-HER2 antibody-drug conjugate is disitamab vedotin, and wherein the individual has not received disitamab vedotin or major surgery within 4 weeks prior to start of administration of disitamab vedotin as a monotherapy or combination therapy.34.The method of any one of claims 1-33, wherein the individual has not received allogeneic hematopoietic stem cell transplantation or organ transplantation.35.The method of any one of claims 1-34, wherein the individual has not been previously treated with PD- (L) 1, PD-L2, CTLA4 inhibitors and other antibody-drug conjugates.36.A method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .37.A method for treating or preventing progression of HR-positive, HER2-low breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .38.The method of claim 36 or 37, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.39.The method of any one of claims 36-38, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.40.The method of any one of claims 36-39, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.41.The method of any one of claims 36-40, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.42.The method of any one of claims 36-41, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: 43.The method of any one of claims 36-42, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.44.The method of claim 43, wherein disitamab vedotin and an anti-PD-1 antibody are administered as a combination therapy, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.45.The method of claim 43 or 44, wherein disitamab vedotin and toripalimab are administered as a combination therapy.46.The method of claim 44 or 45, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein toripalimab is administered intravenously at a dose of 3.0 mg / kg every two weeks or every 14 days.47.The method of any one of claims 44-46, wherein the individual is administered disitamab vedotin and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.48.The method of claim 43, wherein disitamab vedotin and letrozole are administered as a combination therapy.49.The method of claim 48, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein letrozole is administered orally at a dose of 2.5 mg once daily.50.The method of claim 49, wherein the individual is administered disitamab vedotin and letrozole over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.51.The method of any one of claims 46-50, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.52.The method of any one of claims 36-51, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.53.The method of any one of claims 36-52, wherein the individual comprises tumor IHC Ki67 ≥ 20%.54.The method of any one of claims 36-53, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC1+, as measured by immunohistochemistry (IHC) assay.55.The method of any one of claims 36-53, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that do not exhibit HER2 gene amplification, as measured by in situ hybridization (ISH) assay (ISH-negative) .56.The method of any one of claims 36-55, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a breast pathological complete response (bpCR) rate in the population of individuals.57.The method of any one of claims 36-56, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in PEPI score.58.The method of any one of claims 36-57, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole results in an improvement in one or more of preoperative endocrine prognostic index, including Ki67 expression in surgical specimens, pathological tumor size, lymph node status, and estrogen receptor (ER) levels.59.The method of any one of claims 36-58, wherein administration of disitamab vedotin in combination with toripalimab or letrozole to a population of individuals results in an increased proportion of patients with PEPI score of 0.60.A method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence NYLFDH (SEQ ID NO: 3) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .61.A method for treating or preventing progression of HER2-positive breast cancer in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of pertuzumab and an anti-HER2 antibody-drug conjugate that comprises an anti-HER2 antibody and a cytotoxic molecule; wherein the anti-HER2 antibody comprises a heavy chain comprising a heavy chain variable (VH) domain and a light chain comprising a light chain variable (VL) domain; wherein the VH domain comprises a CDR-H1 comprising the amino acid sequence DYYIH (SEQ ID NO: 1) , a CDR-H2 comprising the amino acid sequence RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) , and a CDR-H3 comprising the amino acid sequence ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 12) ; and wherein the VL domain comprises a CDR-L1 comprising the amino acid sequence KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) , a CDR-L2 comprising the amino acid sequence WASIRHT (SEQ ID NO: 5) , and a CDR-L3 comprising the amino acid sequence HQFATYT (SEQ ID NO: 6) .62.The method of claim 60 or 61, wherein the breast cancer is breast cancer with clinical stage T2-3N0-3M0, according to American Joint Committee on Cancer Staging Manual eighth edition.63.The method of any one of claims 60-62, wherein the VH domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 and / or the VL domain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 8.64.The method of any one of claims 60-63, wherein the heavy chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9 or SEQ ID NO: 10.65.The method of any one of claims 60-64, wherein the light chain of the anti-HER2 antibody comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11.66.The method of any one of claims 60-65, wherein the antibody-drug conjugate is an anti-HER2 antibody-linker-MMAE, wherein the anti-HER2 antibody is connected to MMAE via a linker, and the structure of the linker and MMAE after connection comprises: 67.The method of any one of claims 60-66, wherein the antibody-drug conjugate is disitamab vedotin.68.The method of claim 67, wherein disitamab vedotin is administered intravenously to the individual at a dose of 2.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days, and wherein the initial dose of pertuzumab is 840 mg intravenously the first week, and wherein any subsequent dose of pertuzumab is 420 mg intravenously; wherein pertuzumab is administered to the individual once every 3 weeks or 21 days.69.The method of any one of claims 68, wherein the individual is administered disitamab vedotin and pertuzumab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.70.The method of claim 68 or 69, further comprising administering an anti-PD-1 antibody, optionally wherein the anti-PD-1 antibody is toripalimab.71.The method of any one of claims 68-70, further comprising administering toripalimab.72.The method of claim 70, wherein toripalimab is administered intravenously to the individual at a dose of 3.0 mg / kg once every two weeks or every 14 days.73.The method of claim 72, wherein the individual is administered disitamab vedotin, pertuzumab, and toripalimab over a treatment cycle of six weeks, or 42 days, and optionally wherein the treatment continues for at least three cycles, or 18 weeks or 126 days.74.The method of any one of claims 68-73, wherein the dose of disitamab vedotin is measured using the bovine serum albumin (BSA) -based Extinction Coefficient (EC) method.75.The method of any one of claims 60-74, wherein the individual can tolerate radical surgery for breast cancer and has not previously received any anti-tumor systemic therapy for breast cancer.76.The method of any one of claims 60-75, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC3+, as measured by IHC assay.77.The method of any one of claims 60-75, wherein a sample obtained from the individual comprises cancer cells that express HER2 on their cell surface at a level of IHC2+, as measured by IHC assay; and wherein the sample obtained from the individual comprises cancer cells that exhibit HER2 gene amplification, as measured by ISH assay (ISH-positive) .78.The method of any one of claims 1-77, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to a population of individuals results in a total pathological complete response (tpCR) rate in the population of individuals.79.The method of any one of claims 1-78, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, to the individual results in a complete response (CR) , partial response (PR) , or stable disease (SD) in the individual.80.The method of any one of claims 1-79, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or combination therapy, results in an improvement from baseline in in the European Organization for Research and Treatment of Cancer Core QoL 30 (EORTC QLQ-C30) Global Health status  / QoL (GHS / QoL) , physiological function, fatigue and / or emotional function scores.81.The method of any one of claims 1-80, wherein administration of disitamab vedotin, as a monotherapy or as a combination therapy, results in improved levels of tumor-infiltrating lymphocytes, PD-L1 expression, and / or CD8.82.The method of any one of claims 1-81, wherein the individual is a human.

Images