Anti-IGF-1r / TSHR antibody constructs and uses thereof

Abstract

The present invention provides multispecific antibody constructs that specifically bind to TSHR and IGF-1R. Also provided are antibody constructs that specifically bind to TSHR. Compositions, kits, methods of use (e.g., treating disease), and methods of making are also provided.

Description

ANTI-IGF-1R / TSHR ANTIBODY CONSTRUCTS AND USES THEREOFFIELD OF THE INVENTION

[0001] The present invention relates to multispecific antibody constructs that specifically bind to TSHR and IGF-1R. Further provided herein are anti-TSHR antibody constructs. Also provided are pharmaceutical compositions comprising the multispecific antibody constructs or anti-TSHR antibody constructs, methods of treating a disease or condition (e.g., Thyroid Eye Disease or Grave’s disease) using the constructs thereof, and kits comprising the constructs thereof. REFERENCE TO AN ELECTRONIC SEQUENCE LISTING

[0002] The contents of the electronic sequence listing (701672001540SEQLIST. xml; Size: 123, 587 bytes; and Date of Creation: November 1, 2024) is herein incorporated by reference in its entirety.BACKGROUND OF THE INVENTION

[0003] Insulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) is a trans-membrane tyrosine kinase expressed in almost every mammalian cell. Studies in tissue-specific experimental models revealed a central role for IGF-1R signaling in regulating glucose metabolic functions in the liver, skeletal muscles, and adipose tissue. Shifts in the regulatory balance of T cells following IGF-1R inhibition have been recognized in several autoimmune conditions including multiple sclerosis, rheumatoid arthritis, and type I diabetes mellitus. In short, IGF-1R plays an important role in the pathogenesis of aberrant T cell self-recognition. Additionally, a different mode of IGF-1R dependent autoimmunity has been described in thyroiditis, where IGF-1R bearing B cells are responsible for the production of pathogenic antibodies against the thyrotropin receptor. See, e.g., Erlandsson et al. (2022) Front. Immunol. 13: 958206. While various later-stage clinical trials of anti-IGF-1R blocking antibodies to treat cancer failed to show significant clinical benefit, their therapeutic potential in preventing or treating autoimmune disease (s) remains to be elucidated.

[0004] Thyroid stimulating hormone receptor (also called thyrotropin receptor, TSH receptor, or TSHR) is a G-protein-coupled seven-transmembrane receptor located at the basolateral membrane of thyroid follicular cells. TSHR is a major controller of thyroid cell function and growth and plays a pivotal role thyroid hormone metabolism. TSHR is located on chromosome 14q and contains 10 exons. The first 9 exons of the gene encode a large amino-terminal ectodomain, and exon 10 encodes seven transmembrane segments and an intra-cytoplasmic domain with a carboxyl-terminal segment. Of the several G protein subtypes involved in signal transduction, the Gαs and Gαq subtypes have been shown to be the major subtypes that mediate TSHR signals. TSH levels positively modulate TSHR in normal cells up to a certain limit, while down regulating TSHR at high concentrations. Over-activation of the cAMP pathway by chronic TSHR stimulation causes excess hormone secretion and thyroid hyperplasia, which results in clinical hyperthyroidism. Increased secretion of the thyroid hormone then leads to negative feedback at the hypothalamic-pituitary level, resulting in suppressed TSH secretion. Mutations in the TSHR gene have been identified that can be present in several diseases, such as familial gestational hyperthyroidism, autonomous toxic adenomas, hereditary or sporadic toxic thyroid hyperplasia, familial non-autoimmune hyperthyroidism, Graves’ disease, and autoimmune hypothyroidism. See, e.g., Tuncel (2017) Mol Imaging Radionucl Ther. 26 (suppl 1) : 87-91. Further, TSHR has been identified as an autoantigen in autoimmune diseases such as Graves’ disease. See, e.g., Martin et al. (1997) J Clin Endocrinol Metab. 82 (10) : 3361-3366.

[0005] There exists a need for therapies that can target both IGF-1R and TSHR for treating related conditions or diseases (e.g., Thyroid Eye Disease) .

[0006] The disclosures of all publications, patents, patent applications and published patent applications referred to herein are hereby incorporated herein by reference in their entirety. BRIEF SUMMARY OF THE INVENTION

[0007] The present invention provides multispecific constructs that specifically bind to IGF-1R and to TSHR, anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding the multispecific constructs or anti-TSHR antibody constructs, or pharmaceutical compositions comprising the multispecific constructs or anti-TSHR antibody constructs, and methods of treating conditions or diseases (e.g., Thyroid Eye Disease) using the constructs thereof.

[0008] In one aspect of the present invention, there is provided an antibody construct comprising an antibody moiety that specifically recognizes thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR; anti-TSHR antibody moiety) comprising a heavy chain variable region (VH-TSHR) and a light chain variable region (VL-TSHR) . In some embodiments, the antibody construct comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 47, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 48. In some embodiments, the antibody construct comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 51, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 53. In some embodiments, the antibody construct comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 49, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 50.

[0009] In some embodiments, the VH-TSHR comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 67, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 68, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 69.

[0010] In some embodiments, the VH-TSHR comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70.

[0011] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, 49, or 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47, 49, or 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, 50, 52, or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48, 50, 52, or 53. In some embodiments, (ii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48; (ii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; (iii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53.

[0012] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, (i) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (ii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (iii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53.

[0013] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the TSHR antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody.

[0014] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the antibody construct comprises a multispecific antibody further comprising an antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R ( “anti-IGF-1R antibody moiety” ) .

[0015] In a second aspect of the present invention, there is provided an antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR; anti-TSHR antibody moiety) and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R ( “anti-IGF-1R antibody moiety” ) .

[0016] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 9; (b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15; (c) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 10, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 11; (d) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15; (e) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15; (f) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 2; (g) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 4; (h) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 5; or (i) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 7.

[0017] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (b) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (c) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (d) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (e) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (f) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; or (g) a VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and a VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35.

[0018] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35.

[0019] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14, or a variant having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14; and / or (b) the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15, or a variant having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15.

[0020] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity.

[0021] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 8; and (b) the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 9. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9.

[0022] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the anti-IGF-1R antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody.

[0023] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the antibody construct further comprises an Fc fragment selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments from human IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is derived from human IgG1, wherein the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein in each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions (EU numbering) , optionally wherein each subunit comprises M252Y, S254T, and T256E substitutions. In some embodiments, each subunit comprises M252Y, S254T, and T256E substitutions. In some embodiments, the first subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) . In some embodiments, the first subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) .

[0024] In some embodiments according to any of the antibody constructs described herein, the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) . In some embodiments, the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence.

[0025] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 81, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 81, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 82, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 82, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 83, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 84, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 84.

[0026] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 93, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 94, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 94, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 95, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 96, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 96.

[0027] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 97, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 98, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 98, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 99, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 99, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 100, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 100.

[0028] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 101, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 102, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 102, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 103, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 104, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 104.

[0029] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 75, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 75, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 76, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 76, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 77, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 77, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 78, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 78.

[0030] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 85, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 86, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 86, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 87, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 87, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 88, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 88.

[0031] In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 89, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 89, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 90, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 90, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 91, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 91, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 92, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 92.

[0032] Also provided are pharmaceutical compositions comprising any of the antibody constructs described herein, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier.

[0033] Also provided are isolated nucleic acids encoding any of the antibody constructs described herein, vectors comprising such nucleic acids, and isolated host cells comprising such nucleic acids or vectors.

[0034] Also provided are kits comprising any of the antibody constructs or pharmaceutical constructs described herein.

[0035] Also provided are methods of treating a condition or disease in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of any of the antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, or any of the pharmaceutical compositions described herein. In some embodiments, the disease or condition is a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease. In some embodiments, the disease or disorder is Thyroid Eye Disease (TED) . In some embodiments, the antibody construct or multispecific antibody construct described herein, or the pharmaceutical composition described herein is administered intravenously or subcutaneously into the individual. In some embodiments, the individual is a human.

[0036] Also provided are methods of treating a disease or condition comprising administering: (a) an anti-IGF-1R antibody agent, and (b) an anti-TSHR antibody agent. In some embodiments, the IGF-1R antibody agent and the TSHR antibody agent is a single antibody construct that binds to both IGF-1R and TSHR. In some embodiments, the disease or condition is a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease. In some embodiments, the disease or disorder is Thyroid Eye Disease (TED) . In some embodiments, the antibody construct or multispecific antibody construct described herein, or the pharmaceutical composition described herein is administered intravenously or subcutaneously into the individual. In some embodiments, the individual is a human.

[0037] Also provided are methods of producing any of the antibody constructs described herein, comprising: (i) culturing any of the isolated host cells described herein under a condition suitable for the expression of the antibody construct; and (ii) obtaining the expressed antibody construct from the host cell.

[0038] These and other aspects and advantages of the present invention will become apparent from the subsequent detailed description and the appended claims. It is to be understood that one, some, or all of the properties of the various embodiments described herein may be combined to form other embodiments of the present invention.

[0039] The disclosures of all publications, patents, patent applications and published patent applications referred to herein are hereby incorporated herein by reference in their entirety.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0040] FIG. 1 depicts the process of generating exemplary TSHR-binding and IGF-1R-binding arms of the exemplary anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody.

[0041] FIGs. 2A-2B show the binding affinity of exemplary anti-TSHR Fab fragments to human TSHR produced by Expi293 cells in culture. MFI, mean fluorescence intensity; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. EC50 values are provided.

[0042] FIGs. 2C-2E show the binding affinity of exemplary anti-TSHR Fab fragments to human TSHR produced by CHOS cells in culture. MFI, mean fluorescence intensity; conc., concentration; IgG, IgG isotype control. EC50 values are provided.

[0043] FIGs. 2F-2I show the binding affinity of exemplary anti-TSHR Fab fragments to rhesus macaque TSHR produced by GS-CHO cells in culture. MFI, mean fluorescence intensity; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. EC50 values are provided.

[0044] FIGs. 3A-3C show the inhibition of cyclic AMP (cAMP) activation in Expi293-human TSHR reporter cells when treated with exemplary anti-TSHR antibodies. Conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.

[0045] FIGs. 3D-3E show the inhibition of cyclic AMP (cAMP) generation in Expi293-human TSHR reporter cells when treated with exemplary anti-TSHR antibodies. Conc., concentration; IgG, IgG isotype control. IC50 values are provided.

[0046] FIGs. 3F-3P show the inhibition of luciferase activity in Expi293-human TSHR reporter cells when treated with exemplary anti-TSHR antibodies. Conc., concentration; IgG, IgG isotype control. IC50 values are provided.

[0047] FIGs. 4A-4D show the binding affinity of exemplary anti-TSHR Fab fragments to human IGF-1R expressed by CHOS cells (FIGs. 4A and 4C) and to rhesus macaque IGF-1R expressed by GS-CHO cells (FIGs. 4B and 4D) . MFI, mean fluorescence intensity; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. EC50 values are provided.

[0048] FIGs. 5A-5B show the inhibition of IGF-1 binding to IGF-1R by exemplary bispecific antibodies in CHOS reporter cells that express high levels of IGF-1R. MFI, mean fluorescence intensity; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.

[0049] FIGs. 6A-6E show the inhibition of HT-29 cell proliferation upon treatment with exemplary bispecific antibodies. OD, optical density; conc, concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.

[0050] FIGs. 7A-7E show the inhibition of fibroblast proliferation upon treatment with exemplary bispecific antibodies. OD, optical density; conc, concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.

[0051] FIGs. 8A-8E show the inhibition of hyaluronic acid (HA) expression by fibroblasts treated with exemplary bispecific antibodies. HA, hyaluronic acid; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.

[0052] FIGs. 9A-9B show the degree of fibroblast differentiation into adipocytes. FIG. 9A provides exemplary fields of view for Oil Red O-stained sections as assessed via light microscopy, and FIG. 9B provides the average adipocyte cell counts across each condition. IgG1, IgG1 isotype control.

[0053] FIGs. 10A-10B show the degree of myofibroblast differentiation. FIG. 10A provides exemplary immunoflorescence (IF) section staining showing the overlay of α-SMA as a marker for myofibroblasts and DAPI to mark cell nuclei, and FIG. 10B provides the average myofibroblast cell counts across each condition. IgG1, IgG1 isotype control.

[0054] FIG. 11 shows the inhibition of HA secretion by adipocyte precursor cells when treated with exemplary bispecific antibodies. HA, hyaluronic acid; conc., concentration; IgG1, IgG1 isotype control. IC50 values are provided.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0055] The present invention in one aspect provides a multispecific antibody construct (such as a bispecific construct) comprising an anti-IGF-1R antibody moiety that specifically binds to IGF-1R and an anti-TSHR moiety that specifically binds to TSHR. In some embodiments, the multispecific antibody construct comprises a first binding moiety and a second binding moiety, wherein the first binding moiety comprises a means for binding to TSHR, and wherein the second binding moiety comprises a means for binding to IGF-1R. In some embodiments, the multispecific antibody construct comprises one anti-IGF-1R antibody moiety. In some embodiments, the multispecific antibody construct comprises two or more anti-IGF-1R antibody moieties. In some embodiments, the multispecific antibody construct comprises one anti-TSHR antibody moiety. In some embodiments, the multispecific antibody construct comprises two or more anti-TSHR antibody moieties. The present invention in another aspect provides novel anti-TSHR antibody constructs.

[0056] Also provided are pharmaceutical compositions and kits comprising any of the multispecific antibody constructs or anti-TSHR antibody constructs described herein, and methods of use thereof for treating conditions or diseases, such as thyroid eye disease. Methods of making any of the multispecific antibody constructs or anti-THSR antibody constructs described herein are also provided.

[0057] IGF-1R plays a key pathogenic role in the occurrence and development of diseases such as thyroid eye disease. Currently, there are limited treatments targeting IGF-1R to treat related diseases (e.g., thyroid eye disease) . The monoclonal antibody teprotumumab targeting IGF-1R has shown positive clinical responses, but there is still room for improvement of the response rate and proptosis.

[0058] The inventions disclosed herein targets an additional target (TSHR) , and thereby improving the treatment of diseases such as thyroid eye disease. IGF-1R blocking activity disclosed herein is stronger and specifically blocks IGF-1 / IGF-1R; at the same time, the progression of related diseases (e.g., thyroid eye disease) is slowed by targeting the additional TSHR. I. Definitions

[0059] The term “antibody” is used in its broadest sense and encompasses various antibody structures, including but not limited to monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, multispecific antibodies (e.g., bispecific antibodies) , full-length antibodies and antigen-binding fragments thereof, so long as they exhibit the desired antigen-binding activity. The term “antibody moiety” refers to a full-length antibody or an antigen-binding fragment thereof.

[0060] A full-length antibody comprises two heavy chains and two light chains. The variable regions of the light and heavy chains are responsible for antigen binding. The variable domains of the heavy chain and light chain may be referred to as “VH” and “VL” , respectively. The variable regions in both chains generally contain three highly variable loops called the complementarity determining regions (CDRs) (light chain (LC) CDRs including LC-CDR1, LC-CDR2, and LC-CDR3, heavy chain (HC) CDRs including HC-CDR1, HC-CDR2, and HC-CDR3) . CDR boundaries for the antibodies and antigen-binding fragments disclosed herein may be defined or identified by the conventions of Kabat, Chothia, or Al-Lazikani (Al-Lazikani 1997; Chothia 1985; Chothia 1987; Chothia 1989; Kabat 1987; Kabat 1991) . The three CDRs of the heavy or light chains are interposed between flanking stretches known as framework regions (FRs) , which are more highly conserved than the CDRs and form a scaffold to support the hypervariable loops. The constant regions of the heavy and light chains are not involved in antigen binding, but exhibit various effector functions. Antibodies are assigned to classes based on the amino acid sequence of the constant region of their heavy chain. The five major classes or isotypes of antibodies are IgA, IgD, IgE, IgG, and IgM, which are characterized by the presence of α, δ, ε, γ, and μ heavy chains, respectively. Several of the major antibody classes are divided into subclasses such as lgG1 (γ1 heavy chain) , lgG2 (γ2 heavy chain) , lgG3 (γ3 heavy chain) , lgG4 (γ4 heavy chain) , lgA1 (α1 heavy chain) , or lgA2 (α2 heavy chain) . Chimeric Fc regions (such as IgG2 / 4 mixture) are also contemplated herein.

[0061] The term “antigen-binding fragment” as used herein refers to an antibody fragment including, for example, a diabody, a Fab, a Fab’, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a bispecific dsFv (dsFv-dsFv’) , a disulfide stabilized diabody (ds diabody) , a single-chain Fv (scFv) , an scFv dimer (bivalent diabody) , a multispecific antibody formed from a portion of an antibody comprising one or more CDRs, a camelid single domain antibody, a nanobody, a domain antibody, a bivalent domain antibody, or any other antibody fragment that binds to an antigen but does not comprise a complete antibody structure. An antigen-binding fragment is capable of binding to the same antigen to which the parent antibody or a parent antibody fragment (e.g., a parent scFv) binds. In some embodiments, an antigen-binding fragment may comprise one or more CDRs from a particular human antibody grafted to a framework region from one or more different human antibodies.

[0062] “Fv” is the minimum antibody fragment, which contains a complete antigen-recognition and -binding site. This fragment consists of a dimer of one heavy-and one light-chain variable region domain in tight, non-covalent association. From the folding of these two domains emanate six hypervariable loops (3 loops each from the heavy and light chain) that contribute the amino acid residues for antigen binding and confer antigen binding specificity to the antibody. However, even a single variable domain (or half of an Fv comprising only three CDRs specific for an antigen) has the ability to recognize and bind antigen, although often at a lower affinity than the entire binding site.

[0063] “Single-chain Fv, ” also abbreviated as “sFv” or “scFv, ” are antibody fragments that comprise the VH and VL antibody domains connected into a single polypeptide chain. In some embodiments, the scFv polypeptide further comprises a polypeptide linker between the VH and VL domains which enables the scFv to form the desired structure for antigen binding. For a review of scFv, see Plückthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994) .

[0064] As used herein, the term “CDR” or “complementarity determining region” is intended to mean the non-contiguous antigen combining sites found within the variable region of both heavy and light chain polypeptides. These particular regions have been described by Kabat et al., J. Biol. Chem. 252: 6609-6616 (1977) ; Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, “Sequences of proteins of immunological interest” (1991) ; Chothia et al., J. Mol. Biol. 196: 901-917 (1987) ; Al-Lazikani B. et al., J. Mol. Biol., 273: 927-948 (1997) ; MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996) ; Abhinandan and Martin, Mol. Immunol., 45: 3832-3839 (2008) ; Lefranc M. P. et al., Dev. Comp. Immunol., 27: 55-77 (2003) ; and Honegger and Plückthun, J. Mol. Biol., 309: 657-670 (2001) , where the definitions include overlapping or subsets of amino acid residues when compared against each other. Nevertheless, application of either definition to refer to a CDR of an antibody or grafted antibodies or variants thereof is intended to be within the scope of the term as defined and used herein. The amino acid residues which encompass the CDRs as defined by each of the above-cited references are set forth below in Table 1 as a comparison. CDR prediction algorithms and interfaces are known in the art, including, for example, Abhinandan and Martin, Mol. Immunol., 45: 3832-3839 (2008) ; Ehrenmann F. et al., Nucleic Acids Res., 38: D301-D307 (2010) ; and Adolf-Bryfogle J. et al., Nucleic Acids Res., 43: D432-D438 (2015) . The contents of the references cited in this paragraph are incorporated herein by reference in their entireties for use in the present application and for possible inclusion in one or more claims herein. In some embodiments, the CDR sequences provided herein are based on IMGT definition. For example, the CDR sequences may be determined by the VBASE2 tool (http:  / / www. vbase2. org / vbase2. php, see also Retter I, Althaus HH, Münch R, Müller W: VBASE2, an integrative V gene database. Nucleic Acids Res. 2005 Jan 1; 33 (Database issue) : D671-4, which is incorporated herein by reference in its entirety) . TABLE 1: CDR DEFINITIONS 1Residue numbering follows the nomenclature of Kabat et al., supra2Residue numbering follows the nomenclature of Chothia et al., supra3Residue numbering follows the nomenclature of MacCallum et al., supra4Residue numbering follows the nomenclature of Lefranc et al., supra5Residue numbering follows the nomenclature of Honegger and Plückthun, supra

[0065] The expression “variable-domain residue-numbering as in Kabat” or “amino-acid-position numbering as in Kabat, ” and variations thereof, refers to the numbering system used for heavy-chain variable domains or light-chain variable domains of the compilation of antibodies in Kabat et al., supra. Using this numbering system, the actual linear amino acid sequence may contain fewer or additional amino acids corresponding to a shortening of, or insertion into, a FR or hypervariable region (HVR) of the variable domain. For example, a heavy-chain variable domain may include a single amino acid insert (residue 52a according to Kabat) after residue 52 of H2 and inserted residues (e.g. residues 82a, 82b, and 82c, etc. according to Kabat) after heavy-chain FR residue 82. The Kabat numbering of residues may be determined for a given antibody by alignment at regions of homology of the sequence of the antibody with a “standard” Kabat numbered sequence.

[0066] Unless indicated otherwise herein, the numbering of the residues in an immunoglobulin heavy chain is that of the EU index as in Kabat et al., supra. The “EU index as in Kabat” refers to the residue numbering of the human IgG1 EU antibody.

[0067] “Framework” or “FR” residues are those variable-domain residues other than the CDR residues as herein defined.

[0068] “Humanized” forms of non-human (e.g., rodent) antibodies are chimeric antibodies that contain minimal sequence derived from the non-human antibody. For the most part, humanized antibodies are human immunoglobulins (recipient antibody) in which residues from a hypervariable region (HVR) of the recipient are replaced by residues from a hypervariable region of a non-human species (donor antibody) such as mouse, rat, rabbit or non-human primate having the desired antibody specificity, affinity, and capability. In some instances, framework region (FR) residues of the human immunoglobulin are replaced by corresponding non-human residues. Furthermore, humanized antibodies can comprise residues that are not found in the recipient antibody or in the donor antibody. These modifications are made to further refine antibody performance. In general, the humanized antibody will comprise substantially all of at least one, and typically two, variable domains, in which all or substantially all of the hypervariable loops correspond to those of a non-human immunoglobulin and all or substantially all of the FRs are those of a human immunoglobulin sequence. The humanized antibody optionally also will comprise at least a portion of an immunoglobulin constant region (Fc) , typically that of a human immunoglobulin. For further details, See Jones et al., Nature 321: 522-525 (1986) ; Riechmann et al., Nature 332: 323-329 (1988) ; and Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2: 593-596 (1992) .

[0069] A “human antibody” is an antibody that possesses an amino-acid sequence corresponding to that of an antibody produced by a human and / or has been made using any of the techniques for making human antibodies as disclosed herein. This definition of a human antibody specifically excludes a humanized antibody comprising non-human antigen-binding residues. Human antibodies can be produced using various techniques known in the art, including phage-display libraries. Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227: 381 (1991) ; Marks et al., J. Mol. Biol., 222: 581 (1991) . Also available for the preparation of human monoclonal antibodies are methods described in Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985) ; Boerner et al., J. Immunol., 147 (1) : 86-95 (1991) . See also van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol., 5: 368-74 (2001) . Human antibodies can be prepared by administering the antigen to a transgenic animal that has been modified to produce such antibodies in response to antigenic challenge, but whose endogenous loci have been disabled, e.g., immunized xenomice (see, e.g., U.S. Pat. Nos. 6,075,181 and 6,150,584 regarding XENOMOUSETM technology) . See also, for example, Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103: 3557-3562 (2006) regarding human antibodies generated via a human B-cell hybridoma technology.

[0070] “Percent (%) amino acid sequence identity” or “homology” with respect to the polypeptide and antibody sequences identified herein is defined as the percentage of amino acid residues in a candidate sequence that are identical with the amino acid residues in the polypeptide being compared, after aligning the sequences considering any conservative substitutions as part of the sequence identity. Alignment for purposes of determining percent amino acid sequence identity can be achieved in various ways that are within the skill in the art, for instance, using publicly available computer software such as BLAST, BLAST-2, ALIGN, Megalign (DNASTAR) , or MUSCLE software. Those skilled in the art can determine appropriate parameters for measuring alignment, including any algorithms needed to achieve maximal alignment over the full-length of the sequences being compared. For purposes herein, however, %amino acid sequence identity values are generated using the sequence comparison computer program MUSCLE (Edgar, R.C., Nucleic Acids Research 32 (5) : 1792-1797, 2004; Edgar, R.C., BMC Bioinformatics 5 (1) : 113, 2004) .

[0071] “Homologous” refers to the sequence similarity or sequence identity between two polypeptides or between two nucleic acid molecules. When a position in both of the two compared sequences is occupied by the same base or amino acid monomer subunit, e.g., if a position in each of two DNA molecules is occupied by adenine, then the molecules are homologous at that position. The percent of homology between two sequences is a function of the number of matching or homologous positions shared by the two sequences divided by the number of positions compared times 100. For example, if 6 of 10 of the positions in two sequences are matched or homologous then the two sequences are 60%homologous. By way of example, the amino acid sequences TKLEIK and TALGIE share 50%homology. Generally, a comparison is made when two sequences are aligned to give maximum homology.

[0072] The term “constant domain” refers to the portion of an immunoglobulin molecule having a more conserved amino acid sequence relative to the other portion of the immunoglobulin, the variable domain, which contains the antigen-binding site. The constant domain contains the CH1, CH2 and CH3 domains (collectively, CH) of the heavy chain and the CHL (or CL) domain of the light chain.

[0073] The “light chains” of antibodies (immunoglobulins) from any mammalian species can be assigned to one of two clearly distinct types, called kappa ( “κ” ) and lambda ( “λ” ) , based on the amino acid sequences of their constant domains.

[0074] The “CH1 domain” (also referred to as “C1” of “H1” domain) usually extends from about amino acid 118 to about amino acid 215 (EU numbering system) .

[0075] “Hinge region” is generally defined as a region in IgG corresponding to Glu216 to Pro230 of human IgG1 (Burton, Molec. Immunol. 22: 161-206 (1985) ) . Hinge regions of other IgG isotypes may be aligned with the IgG1 sequence by placing the first and last cysteine residues forming inter-heavy chain S-Sbonds in the same positions.

[0076] The “CH2 domain” of a human IgG Fc region (also referred to as “C2” domain) usually extends from about amino acid 231 to about amino acid 340. The CH2 domain is unique in that it is not closely paired with another domain. Rather, two N-linked branched carbohydrate chains are interposed between the two CH2 domains of an intact native IgG molecule. It has been speculated that the carbohydrate may provide a substitute for the domain-domain pairing and help stabilize the CH2 domain. Burton, Molec Immunol. 22: 161-206 (1985) .

[0077] The “CH3 domain” (also referred to as “C2” domain) comprises the stretch of residues C-terminal to a CH2 domain in an Fc region (i.e. from about amino acid residue 341 to the C-terminal end of an antibody sequence, typically at amino acid residue 446 or 447 of an IgG) .

[0078] The term “Fc region” or “fragment crystallizable region” herein is used to define a C-terminal region of an immunoglobulin heavy chain, including native-sequence Fc regions and variant Fc regions. Although the boundaries of the Fc region of an immunoglobulin heavy chain might vary, the human IgG heavy-chain Fc region is usually defined to stretch from an amino acid residue at position Cys226, or from Pro230, to the carboxyl-terminus thereof. The C-terminal lysine (residue 447 according to the EU numbering system) of the Fc region may be removed, for example, during production or purification of the antibody, or by recombinantly engineering the nucleic acid encoding a heavy chain of the antibody. In some cases, the subsequent C-terminal glycine (residue 446 according to the EU numbering system) of the Fc region may also be removed. Accordingly, a composition of intact antibodies may comprise antibody populations with all K447 residues removed, antibody populations with no K447 residues removed, and antibody populations having a mixture of antibodies with and without the K447 residue. Suitable native-sequence Fc regions for use in the antibodies described herein include human IgG1, IgG2 (IgG2A, IgG2B) , IgG3 and IgG4.

[0079] “Fc receptor” or “FcR” describes a receptor that binds the Fc region of an antibody. The preferred FcR is a native sequence human FcR. Moreover, a preferred FcR is one which binds an IgG antibody (a gamma receptor) and includes receptors of the FcγRI, FcγRII, and FcγRIII subclasses, including allelic variants and alternatively spliced forms of these receptors, FcγRII receptors include FcγRIIA (an “activating receptor” ) and FcγRIIB (an “inhibiting receptor” ) , which have similar amino acid sequences that differ primarily in the cytoplasmic domains thereof. Activating receptor FcγRIIA contains an immunoreceptor tyrosine-based activation motif (ITAM) in its cytoplasmic domain. Inhibiting receptor FcγRIIB contains an immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif (ITIM) in its cytoplasmic domain. (See M.   Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997) . FcRs are reviewed in Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-92 (1991) ; Capel et al., Immunomethods 4: 25-34 (1994) ; and de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995) . Neonatal Fc receptors (FcRN) are encompassed herein. Other FcRs, including those to be identified in the future, are also encompassed by the term “FcR” herein.

[0080] The term “epitope” as used herein refers to the specific group of atoms or amino acids on an antigen to which an antibody or antibody moiety binds. Two antibodies or antibody moieties may bind the same epitope within an antigen if they exhibit competitive binding for the antigen.

[0081] As used herein, a first antibody or fragment thereof “competes” for binding to a target antigen with a second antibody or fragment thereof when the first antibody or fragment thereof inhibits the target antigen binding of the second antibody of fragment thereof by at least about 50%(such as at least about any one of 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%or 99%) in the presence of an equimolar concentration of the first antibody or fragment thereof, or vice versa. A high throughput process for “binning” antibodies based upon their cross-competition is described in PCT Publication No. WO 03 / 48731.

[0082] As use herein, the terms “specifically binds, ” “specifically recognizing, ” and “is specific for” refer to measurable and reproducible interactions, such as binding between a target and an antibody or antibody moiety, which is determinative of the presence of the target in the presence of a heterogeneous population of molecules, including biological molecules. For example, an antibody or antibody moiety that specifically recognizes a target (which can be an epitope) is an antibody or antibody moiety that binds this target with greater affinity, avidity, more readily, and / or with greater duration than its bindings to other targets. In some embodiments, the extent of binding of an antibody to an unrelated target is less than about 10%of the binding of the antibody to the target as measured, e.g., by a radioimmunoassay (RIA) . In some embodiments, an antibody that specifically binds a target has a dissociation constant (KD) of ≤10-5 M, ≤10-6 M, ≤10-7 M, ≤10-8 M, ≤10-9 M, ≤10-10 M, ≤10-11 M, or ≤10-12 M. In some embodiments, an antibody specifically binds an epitope on a protein that is conserved among the protein from different species. In some embodiments, specific binding can include, but does not require exclusive binding. Binding specificity of the antibody or antigen-binding domain can be determined experimentally by methods known in the art. Such methods comprise, but are not limited to Western blots, ELISA-, RIA-, ECL-, IRMA-, EIA-, BIACORETM -tests and peptide scans.

[0083] An “isolated” antibody (or construct) is one that has been identified, separated and / or recovered from a component of its production environment (e.g., natural or recombinant) . Preferably, the isolated polypeptide is free of association with all other components from its production environment.

[0084] An “isolated” nucleic acid molecule encoding a construct, antibody, or antigen-binding fragment thereof described herein is a nucleic acid molecule that is identified and separated from at least one contaminant nucleic acid molecule with which it is ordinarily associated in the environment in which it was produced. Preferably, the isolated nucleic acid is free of association with all components associated with the production environment. The isolated nucleic acid molecules encoding the polypeptides and antibodies described herein is in a form other than in the form or setting in which it is found in nature. Isolated nucleic acid molecules therefore are distinguished from nucleic acid encoding the polypeptides and antibodies described herein existing naturally in cells. An isolated nucleic acid includes a nucleic acid molecule contained in cells that ordinarily contain the nucleic acid molecule, but the nucleic acid molecule is present extrachromosomally or at a chromosomal location that is different from its natural chromosomal location.

[0085] The term “control sequences” refers to DNA sequences necessary for the expression of an operably linked coding sequence in a particular host organism. The control sequences that are suitable for prokaryotes, for example, include a promoter, optionally an operator sequence, and a ribosome binding site. Eukaryotic cells are known to utilize promoters, polyadenylation signals, and enhancers.

[0086] Nucleic acid is “operably linked” when it is placed into a functional relationship with another nucleic acid sequence. For example, DNA for a pre-sequence or secretory leader is operably linked to DNA for a polypeptide if it is expressed as a preprotein that participates in the secretion of the polypeptide; a promoter or enhancer is operably linked to a coding sequence if it affects the transcription of the sequence; or a ribosome binding site is operably linked to a coding sequence if it is positioned so as to facilitate translation. Generally, “operably linked” means that the DNA sequences being linked are contiguous, and, in the case of a secretory leader, contiguous and in reading frame. However, enhancers do not have to be contiguous. Linking is accomplished by ligation at convenient restriction sites. If such sites do not exist, the synthetic oligonucleotide adaptors or linkers are used in accordance with conventional practice.

[0087] The term “vector, ” as used herein, refers to a nucleic acid molecule capable of propagating another nucleic acid to which it is linked. The term includes the vector as a self-replicating nucleic acid structure as well as the vector incorporated into the genome of a host cell into which it has been introduced. Certain vectors are capable of directing the expression of nucleic acids to which they are operatively linked. Such vectors are referred to herein as “expression vectors. ”

[0088] The term “transfected” or “transformed” or “transduced” as used herein refers to a process by which exogenous nucleic acid is transferred or introduced into the host cell. A “transfected” or “transformed” or “transduced” cell is one which has been transfected, transformed or transduced with exogenous nucleic acid. The cell includes the primary subject cell and its progeny.

[0089] The terms “host cell, ” “host cell line, ” and “host cell culture” are used interchangeably and refer to cells into which exogenous nucleic acid has been introduced, including the progeny of such cells. Host cells include “transformants” and “transformed cells, ” which include the primary transformed cell and progeny derived therefrom without regard to the number of passages. Progeny may not be completely identical in nucleic acid content to a parent cell, and may contain mutations. Mutant progeny that have the same function or biological activity as screened or selected for in the originally transformed cell are included herein.

[0090] The term “immunoconjugate” includes reference to a covalent linkage of a therapeutic agent or a detectable label to an antibody such as an antibody moiety described herein. The linkage can be direct or indirect through a linker (such as a peptide linker) .

[0091] As used herein, “treatment” or “treating” is an approach for obtaining beneficial or desired results, including clinical results. For purposes of this application, beneficial or desired clinical results include, but are not limited to, one or more of the following: alleviating one or more symptoms resulting from the disease, diminishing the extent of the disease, stabilizing the disease (e.g., preventing or delaying the worsening of the disease) , preventing or delaying the recurrence of the disease, delaying or slowing the progression of the disease, ameliorating the disease state, providing a remission (partial or total) of the disease, decreasing the dose of one or more other medications required to treat the disease, delaying the progression of the disease, and / or increasing or improving the quality of life. The methods of the application contemplate any one or more of these aspects of treatment.

[0092] The terms “inhibition” or “inhibit” refer to a decrease or cessation of any phenotypic characteristic or to the decrease or cessation in the incidence, degree, or likelihood of that characteristic. To “reduce” or “inhibit” is to decrease, reduce or arrest an activity, function, and / or amount as compared to that of a reference. In certain embodiments, by “reduce” or “inhibit” is meant the ability to cause an overall decrease of 20%or greater. In another embodiment, by “reduce” or “inhibit” is meant the ability to cause an overall decrease of 50%or greater. In yet another embodiment, by “reduce” or “inhibit” is meant the ability to cause an overall decrease of 75%, 85%, 90%, 95%, or greater.

[0093] A “reference” as used herein, refers to any sample, standard, or level that is used for comparison purposes. A reference may be obtained from a healthy and / or non-diseased sample. In some examples, a reference may be obtained from an untreated sample. In some examples, a reference is obtained from a non-diseased or non-treated sample of an individual. In some examples, a reference is obtained from one or more healthy individuals who are not the individual or patient.

[0094] As used herein, “delaying development of a disease" means to defer, hinder, slow, retard, stabilize, suppress and / or postpone development of the disease. This delay can be of varying lengths of time, depending on the history of the disease and / or individual being treated. As is evident to one skilled in the art, a sufficient or significant delay can, in effect, encompass prevention, in that the individual does not develop the disease.

[0095] “Preventing” as used herein, includes providing prophylaxis with respect to the occurrence or recurrence of a disease in an individual that may be predisposed to the disease but has not yet been diagnosed with the disease.

[0096] The terms “subject, ” “individual, ” and “patient” are used interchangeably herein to refer to a mammal, including, but not limited to, human, bovine, horse, feline, canine, rodent, or primate. In some embodiments, the individual is a human.

[0097] An “effective amount” of an agent refers to an amount effective, at dosages and for periods of time necessary, to achieve the desired therapeutic or prophylactic result. The specific dose may vary depending on one or more of: the particular agent chosen, the dosing regimen to be followed, whether it is administered in combination with other compounds, timing of administration, the tissue to be imaged, and the physical delivery system in which it is carried.

[0098] The terms “pharmaceutical formulation” and “pharmaceutical composition” refer to a preparation which is in such form as to permit the biological activity of the active ingredient (s) to be effective, and which contains no additional components which are unacceptably toxic to an individual to which the formulation would be administered. Such formulations may be sterile.

[0099] A “pharmaceutically acceptable carrier” refers to a non-toxic solid, semisolid, or liquid filler, diluent, encapsulating material, formulation auxiliary, or carrier conventional in the art for use with a therapeutic agent that together comprise a “pharmaceutical composition” for administration to an individual. A pharmaceutically acceptable carrier is non-toxic to recipients at the dosages and concentrations employed and is compatible with other ingredients of the formulation. The pharmaceutically acceptable carrier is appropriate for the formulation employed.

[0100] A “sterile” formulation is aseptic or essentially free from living microorganisms and their spores.

[0101] Administration “in combination with” one or more further therapeutic agents includes simultaneous (concurrent) and consecutive or sequential administration in any order.

[0102] The term “concurrently” is used herein to refer to administration of two or more therapeutic agents, where at least part of the administration overlaps in time or where the administration of one therapeutic agent falls within a short period of time relative to administration of the other therapeutic agent. For example, the two or more therapeutic agents are administered with a time separation of no more than about 60 minutes, such as no more than about any of 30, 15, 10, 5, or 1 minutes.

[0103] The term “sequentially” is used herein to refer to administration of two or more therapeutic agents where the administration of one or more agent (s) continues after discontinuing the administration of one or more other agent (s) . For example, administration of the two or more therapeutic agents are administered with a time separation of more than about 15 minutes, such as about any of 20, 30, 40, 50, or 60 minutes, 1 day, 2 days, 3 days, 1 week, 2 weeks, or 1 month, or longer.

[0104] As used herein, “in conjunction with” refers to administration of one treatment modality in addition to another treatment modality. As such, “in conjunction with” refers to administration of one treatment modality before, during or after administration of the other treatment modality to the individual.

[0105] The term “package insert” is used to refer to instructions customarily included in commercial packages of therapeutic products, that contain information about the indications, usage, dosage, administration, combination therapy, contraindications and / or warnings concerning the use of such therapeutic products.

[0106] An “article of manufacture” is any manufacture (e.g., a package or container) or kit comprising at least one reagent, e.g., a medicament for treatment of a disease or disorder, or a probe for specifically detecting a biomarker described herein. In certain embodiments, the manufacture or kit is promoted, distributed, or sold as a unit for performing the methods described herein.

[0107] It is understood that embodiments of the application described herein include “consisting” and / or “consisting essentially of” embodiments.

[0108] Reference to “about” a value or parameter herein includes (and describes) variations that are directed to that value or parameter per se. For example, description referring to “about X” includes description of “X” .

[0109] As used herein, reference to “not” a value or parameter generally means and describes “other than” a value or parameter. For example, the method is not used to treat a disease of type X means the method is used to treat the disease of types other than X.

[0110] The term “about X-Y” used herein has the same meaning as “about X to about Y. ”

[0111] As used herein and in the appended claims, the singular forms “a, ” “or, ” and “the” include plural referents unless the context clearly dictates otherwise. II. Anti-TSHR Antibody Constructs and Multispecific Antibody Constructs Thereof

[0112] Thyroid stimulating hormone receptor (i.e., thyrotropin receptor, TSH receptor, or TSHR) is a G-protein-coupled seven-transmembrane receptor located at the basolateral membrane of thyroid follicular cells. TSHR is located on chromosome 14q and contains 10 exons, of which the first 9 exons of the gene encode a large amino-terminal ectodomain, and exon 10 encodes seven transmembrane segments and an intra-cytoplasmic domain with a carboxyl-terminal segment. TSHR is a major controller of thyroid cell function and growth and plays a pivotal role thyroid hormone metabolism.

[0113] In one aspect, the present application provides an antibody construct (e.g., an anti-TSHR antibody construct) comprising (or consisting of, or consisting essentially of) an anti-TSHR antibody moiety that specifically recognizes TSHR, such as any of the anti-TSHR antibody moieties described herein. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises one or more anti-TSHR antibody moieties. Hence in some embodiments, the present application also provides anti-TSHR antibody moieties, such as any of the anti-TSHR antibody moieties described herein. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is monospecific. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multispecific (e.g., bispecific) . In some embodiments, there is provided a multispecific anti-TSHR antibody construct comprising one or more of any of the anti-TSHR antibody moieties (e.g., anti-TSHR full-length antibody, anti-TSHR scFv, or anti-TSHR Fab) described herein, and one or more additional antibody moieties specifically recognizing one or more additional target antigens or epitopes. Also provided are isolated anti-TSHR antibody constructs and isolated anti-TSHR antibody moieties that compete for binding to TSHR with any of the anti-TSHR antibody constructs or anti-TSHR antibody moieties described herein. In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct comprising a means for specifically recognizing TSHR, which can be any of the anti-TSHR binding moieties described herein or functional equivalents thereof. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is an isolated anti-TSHR antibody construct.

[0114] In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises (or consists of, or consists essentially of) an anti-TSHR full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody, or a combination thereof. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises (or consists of, or consists essentially of) an anti-TSHR Fab fragment. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises (or consists of, or consists essentially of) an anti-TSHR scFv. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises (or consists of, or consists essentially of) an anti-TSHR full-length antibody.

[0115] In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is monovalent. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multivalent. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multivalent and monospecific (i.e., comprising two or more antibody moieties binding to the same TSHR epitope) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multivalent and multispecific.

[0116] In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is selected from the group consisting of: a monospecific antibody construct, a multispecific antibody construct (e.g., bispecific antibody construct) , antibody-drug conjugate (ADC) , and an antibody-detection tag conjugate.

[0117] The invention further provides fusion proteins comprising any of the anti-TSHR antibody moieties (e.g., full-length antibody, scFv, or Fab) described herein, and conjugates (e.g., detection tag conjugates, ADC) comprising any of the anti-TSHR antibody constructs or anti-TSHR antibody moieties described herein. Also provided are anti-TSHR antibody constructs comprising any of the anti-TSHR antibody moieties (e.g., full-length antibody, scFv, or Fab) described herein, and a fusion partner (e.g., another protein, an expression tag, a purification tag, or a moiety for enhancing half-life) .

[0118] In some embodiments, the N-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs described herein is additionally fused with a signal peptide for better expression.

[0119] In some embodiments, the N-terminus and / or C-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs described herein may comprise a histidine tag (HIS-tag) for protein purification. For example, the C-terminus of the anti-TSHR antibody construct may further comprise a histidine tag. Anti-TSHR antibody moiety

[0120] The present invention in one aspect provides anti-TSHR antibody moieties. Any of the anti-TSHR antibody moieties described herein can be used as an antibody moiety in any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. Means for binding to TSHR described herein can be any of the anti-TSHR antibody moieties described herein and functional equivalents thereof.

[0121] The anti-TSHR antibody construct or the multispecific antibody construct (such as bispecific construct) described herein can comprise one or more (e.g., 1, 2, 3, 4, 5, or more, such as 1 or 2) anti-TSHR antibody moieties (e.g., full-length antibody, scFv, Fab) that specifically bind to TSHR. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct or the multispecific antibody construct comprises two or more anti-TSHR antibody moieties (e.g., scFvs or Fabs) .

[0122] TSHR antigens may be from various animal species, including human TSHR, primate TSHR, mouse TSHR, rat TSHR, rabbit TSHR, or other mammalian TSHR. In some embodiments, the TSHR molecule is human TSHR. In some embodiments, the TSHR molecule is mouse TSHR or cynomolgus monkey TSHR. In some embodiments, the TSHR molecule is wild-type. In some embodiments, the TSHR molecule is a mutant (e.g., comprises one or more insertions, deletions, and / or amino acid substitutions) .

[0123] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety binds to an TSHR antigen with a Kd ≤ 1 μM, such as ≤100 nM, preferably ≤10 nM, more preferably ≤1 nM. For example, the Kd value of the anti-TSHR antibody moiety is between about 1 nM and about 1 pM. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety binds to a human TSHR antigen and / or a monkey (e.g., cynomolgus) TSHR antigen with a Kd of from about 1×10-19 M to about 1×10-9 M (e.g., from about 1×10-18 M to about 1×10-17 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-16 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-15 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-14 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-13 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-18 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-16 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-15 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-14 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-13 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-17 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-15 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-14 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-13 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-16 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-14 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-13 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-15 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-14 M to about 1×10-13 M, from about 1×10-14 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-14 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-14 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-14 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-13 M to about 1×10-12 M, from about 1×10-13 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-13 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-13 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-12 M to about 1×10-11 M, from about 1×10-12 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-12 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-11 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-11 M to about 1×10-9 M, or from about 1×10-10 M to about 1×10-9 M, ) .

[0124] The anti-TSHR antibody moieties described herein can be of any format and derived from any suitable anti-TSHR antibodies or antigen-binding fragments thereof. For example, the anti-TSHR antibody moiety can be selected from a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody, and other antigen-specific binding domains derived from other protein scaffolds. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is a Fab or an scFv. The anti-TSHR antibody moiety can be human, humanized, or chimeric. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is derived from a monoclonal antibody of mouse, rat, monkey, or rabbit. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is derived from any anti-TSHR monoclonal antibodies known in the art. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is derived from a fully human antibody, for example, developed using phage-display, yeast-display, or transgenic mice bearing human Ig genes. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is a monospecific antibody, a multispecific antibody, a monovalent antibody, or a multivalent (e.g., bivalent) antibody.

[0125] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety specifically binds to both human and non-human (such as non-human primates, e.g., cynomolgus monkey) TSHR. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety only binds to human TSHR. Multispecific antibody constructs (such as any multispecific antibody constructs described herein) comprising such anti-TSHR antibody moieties with cross-reactivity to monkey TSHR may facilitate toxicity studies in non-human primates, which can provide more relevant safety assessments for human clinical trial candidates, without having to perform toxicity studies in chimpanzees or using surrogate molecules. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety binds to human TSHR stronger (such as at least about any of 1.5, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 1000-fold, or more) than non-human (e.g., cynomolgus monkey) TSHR.

[0126] The anti-TSHR antibody moiety may fully or partially modulate, block, inhibit, reduce, antagonize, neutralize, or interfere with the functional activity of TSHR. When the functional activity of TSHR is reduced by at least about 95% (such as at least about any of 96%, 97%, 98%, 99%, or 100%) in the presence of an anti-TSHR antibody moiety compared to not bound by an anti-TSHR antibody moiety, the anti-TSHR antibody moiety is considered capable of fully modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing or interfering with the functional activity of TSHR. When the functional activity of TSHR is reduced by at least about 50% (such as at least about any of 55%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, or 90%) in the presence of an anti-TSHR antibody moiety compared to not bound by anti-TSHR antibody moiety, the anti-TSHR antibody moiety is considered capable of significantly modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing or interfering with the functional activity of TSHR. When the functional activity of the target antigen is reduced by less than about 95%(such as reduced by less than about any of 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 85%, or 90%) in the presence of an anti-TSHR antibody moiety compared to not bound by an anti-TSHR antibody moiety, the anti-TSHR antibody moiety is considered capable of partially modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing, or interfering with the functional activity of TSHR.

[0127] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises one or more variations in the sequence compared to any of the anti-TSHR antibody moiety amino acid sequences described in more detail below. In some embodiments, the amino acid variations (e.g., substitutions) in the variant sequences do not substantially reduce (e.g., reducing at most about any of 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 1%, or less) the ability of the anti-TSHR antibody moiety to bind to TSHR. Also contemplated are modifications that substantially improve (e.g., improving at least about any of 1.2, 1.5, 2, 5, 10, 20, 50-fold, or more) the binding affinity of the anti-TSHR antibody moiety to TSHR or other properties, such as specificity, immunogenicity, and / or cross-reactivity with TSHR epitope variants.

[0128] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is an scFv (also referred herein as “anti-TSHR scFv” ) . In some embodiments, the anti-TSHR scFv comprises from N-terminus to C-terminus: VH-TSHR-optional linker-VL-TSHR, or VL-TSHR-optional linker-VH-TSHR. Any linker in the “Linkers” subsection below can be used for linking VH-TSHR and VL-TSHR of the anti-TSHR scFv.

[0129] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is a Fab fragment (anti-TSHR Fab fragment) , comprising a first polypeptide comprising a VH-TSHR and a CH1, and a second polypeptide comprising a VL-TSHR and a CL. In some embodiments, the configuration of the variable and constant regions within the anti-TSHR Fab fragment may be different from what is found in a native anti-TSHR Fab fragment. For example, in some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment comprises a first polypeptide comprising a VH-TSHR and a CL, and a second polypeptide comprising a VL-TSHR and a CH1 (see, for example, Shaefer et al. (2011) , PNAS, 108: 111870-92, the content of which is incorporated herein by reference in its entirety) .

[0130] In some embodiments, the CH1 and VH-TSHR heterodimerize with the CL and VL-TSHR in the anti-TSHR Fab and are covalently linked by a disulfide bond between the heavy and light chain constant regions. In some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment has the basic structure NH2-VL-TSHR-CL-S-S-CH1-VH-TSHR-NH2. In some embodiments, the CH1 and the CL of the anti-TSHR Fab fragment are connected by one or more disulfide bonds. In some embodiments, the number of disulfide bonds between CH1 and CL of the anti-TSHR Fab fragment is at least one, such as 2, 3, 4, 5, or more. In some embodiments, cysteine residues are engineered in the anti-TSHR Fab fragment (such as in the CH1 and CL regions) to introduce disulfide bonds.

[0131] In some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment does not comprise a disulfide bond at the C-terminus. For example, the heavy and light chains of the anti-TSHR Fab fragment may be engineered in such a way so as to stably interact without the need for disulfide bonds. For example, the heavy and light chains may be engineered in such a way so as to stably interact without the need for disulfide bonds. In some embodiments, the heavy chain or light chain can be engineered to remove a cysteine residue, and wherein the heavy and light chains still stably interact and function as a Fab. In some embodiments, mutations are made to facilitate stable interactions between the heavy and light chains. For example, a “knobs into holes” engineering strategy can be used to facilitate dimerization between the heavy and light chains of a Fab (see e.g., 1996 Protein Engineering, 9: 617 –621) . Also contemplated for use herein are variant Fab fragments designed for a particular purpose, for example, amino acid changes in the constant domains of CH1 and / or CL, and removal of a disulfide bond or addition of tags for purification, etc. These mutations are described in more detail in the “Fc Fragments” subsection below.

[0132] In some embodiments, the CH1 and the CL of the anti-TSHR Fab fragment are connected by about 2 disulfide bonds. In some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment comprises a human immunoglobulin CH1. In some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment comprises a human lambda light chain constant region. In some embodiments, the anti-TSHR Fab fragment comprises a human kappa light chain constant region.

[0133] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-TSHR) and a light chain variable region (VL-TSHR) , wherein the VH-TSHR comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 47, and wherein the VL-TSHR comprises an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 48. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-TSHR) and a light chain variable region (VL-TSHR) , wherein the VH-TSHR comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 49, and wherein the VL-TSHR comprises an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 50. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-TSHR) and a light chain variable region (VL-TSHR) , wherein the VH-TSHR comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 51, and wherein the VL-TSHR comprises an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having an amino acid sequence comprising SEQ ID NO: 52 or 53.

[0134] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises a VH-TSHR and a VL-TSHR, wherein the VH-TSHR comprises (i) a CDR-H1 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 58 or 71, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) ; (ii) a CDR-H2 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 59, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) ; and (iii) a CDR-H3 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 60, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) ; and the VL-TSHR comprises (i) a CDR-L1 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 61, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) ; (ii) a CDR-L2 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 62, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) ; and (iii) a CDR-L3 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 63 or 70, or a variant thereof comprising up to 3 amino acid variations (e.g., insertion, deletion, or substitution, such as conservative substitution) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises a VH-TSHR comprising: a CDR-H1 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 58 or 71, a CDR-H2 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 59, and a CDR-H3 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 60; and a VL-TSHR comprising: a CDR-L1 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 61, a CDR-L2 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 62, and a CDR-L3 comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 63 or 70. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises: (i) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 47; and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 48; (ii) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 49; and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 50; (iii) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 51; and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 52, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 52; or (iv) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 51; and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 53, or an amino acid sequence having at least about 80% (such as at least about any of 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, or more) identity with SEQ ID NO: 53. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety comprises: (i) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (ii) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (iii) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 52; or (iv) a VH-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and a VL-TSHR comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 53.

[0135] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety competes for binding (for example, competing binding by at least about any of 50%, 55%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%or more) to TSHR against a reference anti-TSHR antibody comprising a reference VH-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 47, 49, and 51; and a reference VL-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53. In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody moiety comprising a VH-TSHR and a VL-TSHR, wherein the VH-TSHR comprises CDR-H1, CDR-H2, and CDR-H3 sequences of a reference VH-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 47, 49, and 51; and the VL-TSHR comprises CDR-L1, CDR-L2, and CDR-L3 sequences of a reference VL-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53.

[0136] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety binds to essentially the same epitope as a reference anti-TSHR antibody comprising a VH-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 47, 49, and 51, and a VL-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53. In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody moiety that binds to essentially the same epitope as a reference anti-TSHR antibody comprising a VH-TSHR and a VL-TSHR, wherein the VH-TSHR comprises CDR-H1, CDR-H2, and CDR-H3 sequences of a reference VH-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 47, 49, and 51, and the VL-TSHR comprises CDR-L1, CDR-L2, and CDR-L3 sequences of a reference VL-TSHR comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53.

[0137] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is an scFv (anti-TSHR scFv) . In some embodiments, the anti-TSHR scFv comprises a VH-TSHR and a VL-TSHR fused to each other via an optional linker. In some embodiments, the optional linker comprises an amino acid sequence selected from the group consisting of GG and SEQ ID NOs: 196-211.

[0138] In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is a full-length antibody (anti-TSHR full-length antibody) . In some embodiments, the anti-TSHR full-length antibody comprises a human kappa CL or a human lambda CL. In some embodiments, the anti-TSHR full-length antibody comprises an Fc fragment derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and any combinations and hybrids thereof, such as human IgG. In some embodiments, the anti-TSHR full-length antibody comprises an Fc fragment derived from human IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and any combinations and hybrids thereof, such as human IgG1. Any Fc fragments described below can be used herein. In some embodiments, the Fc fragment is derived from human IgG1, wherein the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein in each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, according to EU numbering. For example, in some embodiments, the first subunit and / or the second subunit of the Fc fragment comprises: i) L234A+L235A ( “LALA” ) mutations, ii) M252Y+S254T+T256E ( “YTE” ) mutations, and / or iii) M428L+N434S ( “LS” ) mutations, according to EU numbering. In some embodiments, the Fc fragment further comprises knob-into-hole mutation, such as S364R and D399K “knob” mutations in one Fc subunit, and K370S, Y349T, and K409D “hole” mutations in another Fc subunit. Thus, in some embodiments, (a) the first subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) ; or (b) the first subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) .

[0139] In some embodiments, the anti-TSHR full-length antibody comprise two heavy chains and two light chains, wherein the two heavy chains each comprises the amino acid sequence of any of SEQ ID NOs: 47, 51, 49, or a variant thereof having at least about 80% (such as at least about any one of 85%, 90%, 95%, 99%, or more) sequence identity to the amino acid sequence of any of SEQ ID NOs: SEQ ID NOs: 47, 51, 49, and the two light chains each comprises the amino acid sequence of any of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53, or a variant thereof having at least about 80% (such as at least about any one of 85%, 90%, 95%, 99%, or more) sequence identity to the amino acid sequence of any of SEQ ID NOs: 48, 50, 52, and 53.

[0140] In some embodiments, the anti-TSHR full-length antibody comprises: (a) two heavy chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and two light chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (b) two heavy chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and two light chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53; or (c) two heavy chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and two light chains each comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 50. Multispecific Anti-TSHR Antibody Constructs (e.g., anti-TSHR×anti-IGF-1R Multispecific Antibody Constructs)

[0141] In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct described herein is a multispecific anti-TSHR antibody construct comprising an anti-TSHR antibody moiety (e.g., any of the anti-TSHR antibody moieties described herein, such as anti-TSHR full-length antibody, anti-TSHR Fab, or anti-TSHR scFv) , and a second antibody moiety specifically recognizing a second target antigen (e.g., IGF-1R) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct comprises one or more anti-TSHR antibody moieties (e.g., any of the anti-TSHR antibody moieties described herein) , and one or more antibody moieties specifically recognizing one or more target antigens (e.g., IGF-1R) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multivalent but monospecific, i.e., all antibody moieties contained therein specifically recognize the same TSHR epitope. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct is multivalent and multispecific (e.g., bispecific) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct specifically recognizes two or more epitopes of TSHR. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct specifically recognizes TSHR via its one or more anti-TSHR antibody moieties, and one or more target antigens that are not TSHR. In some embodiments, the second target antigen is IGF-1R. In some embodiments, the two or more anti-TSHR antibody moieties (e.g., scFv, Fab) have the same amino acid sequence. In some embodiments, the two or more anti-TSHR antibody moieties (e.g., scFv, Fab) have different amino acid sequences. In some embodiments, the two or more anti-TSHR antibody moieties bind to the same TSHR epitope. In some embodiments, the two or more anti-TSHR antibody moieties bind to different TSHR epitopes. In some embodiments, the second antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the second antibody moiety is an scFv (e.g., anti-IGF-1R scFv) . In some embodiments, the second antibody moiety is a Fab (e.g., anti-IGF-1R Fab) . In some embodiments, the second antibody moiety is a full-length antibody (e.g., anti-IGF-1R full-length antibody) . In some embodiments, the one or more anti-TSHR antibody moieties (e.g., any of the anti-TSHR antibody moieties described herein) , and one or more antibody moieties specifically recognizing one or more target antigens are fused to each other via an optional linker. Any linker described in the “Linkers” subsection below can be used herein. In some embodiments, the linker comprises an amino acid sequence selected from any of GG and SEQ ID NO: 111. When the anti-TSHR antibody construct comprises an Fc fragment, any Fc fragment described in the “Fc Fragments” subsection below can be used herein.

[0142] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising: i) a first means for specifically binding to TSHR (such as any of the anti-TSHR antibody moieties described herein) , and ii) a second means for specifically binding to a second target antigen (e.g., IGF-1R) . The anti-TSHR antibody moieties described herein can have one or more of the following advantageous properties, including, for example: 1) high binding affinity to TSHR; 2) blocking TSH / TSHR interaction; and 3) inhibiting TSH signaling through the TSHR. The anti-IGF-1R antibody moieties described herein can have one or more of the following advantageous properties, including, for example: 1) high binding affinity to IGF-1R; 2) binding to IGF1 / IGF-1R or IGF2 / IGF-1R complex; and 3) inhibiting IGF1 or IGF2 signaling through the IGF-1R.

[0143] In some embodiments, the multispecific antibody constructs described herein have an increased (e.g., increasing at least about any of 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or more times) in vivo half-life compared to the anti-TSHR antibody moiety (e.g., Fab, scFv, full-length antibody) alone. In some embodiments, the multispecific antibody constructs described herein have an increased (e.g., increasing at least about any of 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or more times) in vivo half-life compared to the anti-IGF-1R antibody moiety alone.

[0144] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) . In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0145] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, optionally wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0146] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the anti-TSHR antibody moiety comprises: an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 63; or an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0147] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence; and wherein the anti-TSHR antibody moiety comprises: an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 63; or an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, the anti-TSHR antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0148] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (b) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (c) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (d) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprisin (g the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, (an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (e) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (f) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; or (g) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0149] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence; and wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (b) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (c) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (d) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (e) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (f) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; or (g) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0150] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the anti-TSHR antibody moiety comprises: an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 63; or an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70; and wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (b) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (c) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (d) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (e) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (f) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; or (g) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7. In some embodiments, each of the anti-TSHR antibody moiety and the anti-IGF-1R antibody moiety is selected independently from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0151] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; wherein the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence; wherein the anti-TSHR antibody moiety comprises: an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 63; or an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70; and wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: (a) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (b) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (c) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (d) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27; (e) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; (f) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; or (g) an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, (a) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48; (b) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; (c) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53. In some embodiments, (a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; (b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; (e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; (f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4; (h) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5; or (i) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7. In some embodiments, each of the anti-TSHR antibody moiety and the anti-IGF-1R antibody moiety is selected independently from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof. In some embodiments, the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments derived from a human IgG selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof, e.g., human IgG1. In some embodiments, each subunit of the Fc fragment comprises (i) L234A and L235A ( “LALA” ) substitutions (EU numbering) ; (ii) M428L and N434S ( “LS” ) substitutions (EU numbering) ; and / or (iii) M252Y, S254T, and T256E ( “YTE” ) substitutions (EU numbering) . In some embodiments, (i) the first subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the second subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) ; or (ii) the second subunit of the Fc fragment comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions (EU numbering) , and the first subunit of the Fc fragment comprises S364R and D399K substitutions (EU numbering) . In some embodiments, the Fc fragment contains any combinations of mutations described above, e.g., LALA+LS, LALA+YTE, LS+YTE, LALA+LS+YTE, optionally in combination with knob / hole mutations.

[0152] In some embodiments, there is provided an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (i.e., anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (i.e., anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the antibody construct comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; and wherein (a) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 81, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 81, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 82, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 82, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 83, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 84, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 84; (b) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 93, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 94, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 94, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 95, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 96, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 96; (c) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 97, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 98, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 98, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 99, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 99, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 100, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 100; or (d) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 101, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 102, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 102, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 103, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 104, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 104. In some embodiments, (a) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 75, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 75, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 76, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 76, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 77, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 77, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 78, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 78; (b) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 85, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 86, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 86, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 87, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 87, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 88, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 88; or (c) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 89, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 89, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 90, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 90, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 91, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 91, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 92, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 92.

[0153] The invention further provides fusion proteins comprising any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, such as anti-TSHR antibody construct conjugates or multispecific antibody construct conjugates (e.g., small molecule drug conjugates) . Isolated nucleic acids, vectors, and isolated cells encoding the polypeptide portion of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein are also provided. The N-terminus and / or C-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein may comprise a histidine tag (HIS-tag) or another tag (e.g., a FLAG tag, an HA tag, a PHE-tag, etc. ) known in the art for protein purification (see, e.g., Kimple et al. (2013) Curr Protoc Protein Sci. 73: 9.9.1-9.9.2, hereby incorporated by reference in its entirety) . The N-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein may comprise a signal peptide for expression purpose. Anti-IGF-1R antibody moiety

[0154] The multispecific antibody constructs described herein can comprise an anti-IGF-1R antibody moiety. These anti-IGF-1R antibody moiety are also provided herein. Insulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) (also called IGFR, CD221, IGFIR, or JTK13) is a type 2 tyrosine kinase transmembrane receptor that is normally found as a heterotetramer with two alpha and two beta subunits and binds with high affinity to IGF1 and to IGF2. IGF-1R exists as a homodimer, where each protomer consists of an extracellular ectodomain, a transmembrane, and a cytoplasmic tyrosine kinase domain. IGF-1 binding to IGF-1R promotes receptor homodimerization or heterodimerization with insulin receptor (INSR) . Ligand-activated IGF-1R first binds to intracellular adaptor proteins, such as insulin receptor substrate 1 (IRS1) and SHC. These adaptor proteins transmit signals through the phosphatidyl-inositol-3 kinase (PI3K) -AKT1-mammalian target of rapamycin (MTOR) pathway and through the mitogen activated protein kinase (MAPK) pathway (see, e.g., Iams &Lovely (2016) Clin Cancer Res. 21 (19) : 4270-4277) . Activation of this signaling pathway is critical for cell proliferation, growth, and survival.

[0155] Any of the anti-IGF-1R antibody moieties available in the field or described herein can be used as the one or more antibody moieties specifically recognizing IGF-1R in any of the anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody constructs described herein.

[0156] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety specifically binds a target epitope of an IGF-1R molecule. IGF-1R antigens may be from various animal species, including human, non-human primate, mouse, rat, rabbit, or other non-human mammals. In some embodiments, the IGF-1R molecule is human IGF-1R. In some embodiments, the IGF-1R molecule is mouse IGF-1R or cynomolgus monkey IGF-1R. In some embodiments, the IGF-1R molecule is wild-type. In some embodiments, the IGF-1R molecule is a mutant (e.g., comprises one or more insertions, deletions, and / or amino acid substitutions) . In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety cross-reacts with a human IGF-1R and a cynomolgus monkey IGF-1R.

[0157] The anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody construct described herein may comprise one or more (e.g., 1, 2, 3, 4, 5, or more, such as 1 or 2) anti-IGF-1R antibody moieties (e.g., full-length antibody, scFv, Fab) . In some embodiments, the anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody construct comprises two or more anti-IGF-1R antibody moieties (e.g., scFvs, e.g., Fabs) .

[0158] In some embodiments, the anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody constructs described herein have an increased (e.g., increasing at least about any of 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or more times) in vivo half-life compared to the anti-IGF-1R antibody moiety (e.g., Fab, scFv) alone.

[0159] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety (e.g., full-length, sdAb, scFv, or Fab) binds to an IGF-1R antigen with a Kd ≤ 1 μM, such as ≤100 nM, preferably ≤10 nM, more preferably ≤1 nM. For example, the Kd value of the anti-IGF-1R antibody moiety is between about 1 nM and about 1 pM. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety binds to a human IGF-1R and / or a monkey (e.g., cynomolgus) IGF-1R with a Kd of from about 1×10-11 M to about 1×10-7 M (e.g., from about 1×10-11 M to about 1×10-10 M, from about 1×10-11 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-11 M to about 1×10-8 M, from about 1×10-10 M to about 1×10-9 M, from about 1×10-10 M to about 1×10-8 M, from about 1×10-10 M to about 1×10-7 M, from about 1×10-9 M to about 1×10-7 M, from about 1×10-9 M to about 1×10-8 M, or from about 1×10-8 M to about 1×10-7 M) .

[0160] The anti-IGF-1R antibody moieties described herein can be of any format and derived from any suitable anti-IGF-1R antibodies or antigen-binding fragments thereof. For example, the anti-IGF-1R antibody moiety can be selected from a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody, and other antigen-specific binding domains derived from other protein scaffolds. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is a Fab (also referred herein as “anti-IGF-1R Fab” ) . In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is an scFv (also referred herein as “anti-IGF-1R scFv” ) . The anti-IGF-1R antibody moiety can be humanized, human, or chimeric. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is derived from a monoclonal antibody of mouse, rat, monkey or rabbit. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is derived from any anti-IGF-1R monoclonal antibodies known in the art. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is derived from a fully human antibody, for example, developed using phage-display, yeast-display, or transgenic mice bearing human Ig genes. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is a monospecific antibody, a multispecific antibody, a monovalent antibody, or a multivalent (e.g., bivalent) antibody.

[0161] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety specifically binds to both human and non-human (such as non-human primates, e.g., cynomolgus monkey) IGF-1R. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety only binds to human IGF-1R. Anti-TSHR×anti-IGF-1R multispecific antibody constructs employing such anti-IGF-1R antibody moieties with cross-reactivity to monkey IGF-1R may facilitate toxicity studies in non-human primates, which can provide more relevant safety assessments for human clinical trial candidates, without having to perform toxicity studies in chimpanzees or using surrogate molecules. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety binds to human IGF-1R stronger (such as at least about any of 1.5, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 1000-fold, or more) than non-human (e.g., cynomolgus monkey) IGF-1R.

[0162] The anti-IGF-1R antibody moiety may fully or partially modulate, block, inhibit, reduce, antagonize, neutralize, or interfere with the functional activity of IGF-1R. When the functional activity of IGF-1R is reduced by at least about 95% (such as at least about any of 96%, 97%, 98%, 99%, or 100%) in the presence of an anti-IGF-1R antibody moiety compared to not bound by an anti-IGF-1R antibody moiety, the anti-IGF-1R antibody moiety is considered capable of fully modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing or interfering with the functional activity of IGF-1R. When the functional activity of IGF-1R is reduced by at least about 50% (such as at least about any of 55%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, or 90%) in the presence of an anti-IGF-1R antibody moiety compared to not bound by anti-IGF-1R antibody moiety, the anti-IGF-1R antibody moiety is considered capable of significantly modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing or interfering with the functional activity of IGF-1R. When the functional activity of the target antigen is reduced by less than about 95% (such as reduced by less than about any of 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 85%, or 90%) in the presence of an anti-IGF-1R antibody moiety compared to not bound by an anti-IGF-1R antibody moiety, the anti-IGF-1R antibody moiety is considered capable of partially modulating, blocking, inhibiting, reducing, antagonizing, neutralizing, or interfering with the functional activity of IGF-1R.

[0163] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises one or more variations in the sequence compared to any of the anti-IGF-1R antibody moiety amino acid sequences described in more detail below. In some embodiments, the amino acid variations (e.g., substitutions) in the variant sequences do not substantially reduce (e.g., reducing at most about any of 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 1%, or less) the ability of the anti-IGF-1R antibody moiety to bind to IGF-1R. Also contemplated are modifications that substantially improve (e.g., improving at least about any of 1.2, 1.5, 2, 5, 10, 20, 50-fold, or more) the binding affinity of the anti-IGF-1R antibody moiety to IGF-1R or other properties, such as specificity, immunogenicity, and / or cross-reactivity with IGF-1R epitope variants.

[0164] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is an anti-IGF-1R scFv. In some embodiments, the anti-IGF-1R scFv comprises from N-terminus to C-terminus: VH-IGF-1R-optional linker-VL-IGF-1R, or VL-IGF-1R-optional linker-VH-IGF-1R. Any linker in the “Linkers” subsection below can be used for linking VH-IGF-1R and VL-IGF-1R of the anti-IGF-1R scFv. In some embodiments, the optional linker comprises an amino acid sequence selected from the group consisting of GG and SEQ ID NO: 111.

[0165] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is an anti-IGF-1R Fab, comprising a first polypeptide comprising a VH-IGF-1R and a CH1, and a second polypeptide comprising a VL-IGF-1R and a CL. In some embodiments, the configuration of the variable and constant regions within the anti-IGF-1R Fab fragment may be different from what is found in a native anti-IGF-1R Fab fragment. For example, in some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment comprises a first polypeptide comprising a VH-IGF-1R and a CL, and a second polypeptide comprising a VL-IGF-1R and a CH1 (see, for example, Shaefer et al. (2011) , PNAS, 108: 111870-92, the content of which is incorporated herein by reference in its entirety) .

[0166] In some embodiments, the CH1 and VH-IGF-1R heterodimerize with the VL-IGF-1R and CL in the anti-IGF-1R Fab fragment and are covalently linked by a disulfide bond between the heavy and light chain constant regions. In some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment has the basic structure NH2-VL-IGF-1R-CL-S-S-CH1-VH-IGF-1R-NH2. In some embodiments, the CH1 and the CL of the anti-IGF-1R Fab fragment are connected by one or more disulfide bonds. In some embodiments, the number of disulfide bonds between CH1 and CL of the anti-IGF-1R Fab fragment is at least one, such as 2, 3, 4, 5, or more. In some embodiments, cysteine residues are engineered in the anti-IGF-1R Fab fragment (such as in the CH1 and CL regions) to introduce disulfide bonds.

[0167] In some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment does not comprise a disulfide bond at the C-terminus. For example, the heavy and light chains of the anti-IGF-1R Fab fragment may be engineered in such a way so as to stably interact without the need for disulfide bonds. For example, the heavy and light chains may be engineered in such a way so as to stably interact without the need for disulfide bonds. In some embodiments, the heavy chain or light chain can be engineered to remove a cysteine residue, and wherein the heavy and light chains still stably interact and function as a Fab. In some embodiments, mutations are made to facilitate stable interactions between the heavy and light chains. For example, a “knobs into holes” engineering strategy can be used to facilitate dimerization between the heavy and light chains of a Fab (see e.g., 1996 Protein Engineering, 9: 617 -621) . Also contemplated are addition of tags for purification, etc.

[0168] In some embodiments, the CH1 and the CL of the anti-IGF-1R Fab fragment are connected by about 2 disulfide bonds. In some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment comprises a human immunoglobulin CH1. In some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment comprises a human lambda light chain constant region. In some embodiments, the anti-IGF-1R Fab fragment comprises a human kappa light chain constant region.

[0169] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 9; b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; c) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 10, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 11; d) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; e) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; f) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 2; g) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 4; h) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 5; or i) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 7.

[0170] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises: i) an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14; or ii) an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VL-IGF-1R comprises: i) an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15; or ii) an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15.

[0171] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the antibody moiety comprises: a) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; b) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; c) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; d) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; e) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; f) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; g) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; h) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or i) a VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and a VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9; b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of any one of SEQ ID NO: 12, 13 and 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; e) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; f) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4 or 5; or g) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7.

[0172] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 42, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, 28, or 29, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of any one of SEQ ID NO: 12, 13 and 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15; or d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15.

[0173] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 45, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 43, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 44, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 46, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30 or 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, 37, or 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, 36, or 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34 or 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4; c) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5; or d) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7.

[0174] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 9. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9.

[0175] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises: a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 10, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 11; or b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11; or b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15.

[0176] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15.

[0177] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15.

[0178] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises: a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 2; or b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 4. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; or b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, a) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; or b) the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4.

[0179] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 5. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5.

[0180] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety comprises a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the HC-CDRs; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35, or a variant thereof comprising up to 5, 4, 3, 2, or 1 amino acid substitutions in the LC-CDRs. In some embodiments, the amino acid substitutions described above are limited to “exemplary substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the amino acid substitutions are limited to “preferred substitutions” shown in Table 2 of this application. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody or antigen-binding fragment thereof comprises an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the sequence set forth in SEQ ID NO: 7. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity. In some embodiments, the VH-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, and the VL-IGF-1R comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7.

[0181] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety competes for binding to an epitope of IGF-1R with an antibody or antibody fragment comprising a heavy chain variable region (VH-IGF-1R) and a light chain variable region (VL-IGF-1R) , wherein the antibody or antibody fragment comprises: a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 9; b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; c) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 10, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 11; d) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; e) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; f) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 2; g) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 4; h) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 5; or i) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 7.

[0182] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety binds to essentially the same epitope of IGF-1R as an antibody or antibody fragment comprising a heavy chain variable region (VH) and a light chain variable region (VL) , wherein the antibody or antibody fragment comprises: a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 9; b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; c) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 10, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 11; d) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; e) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 15; f) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 2; g) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 4; h) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 5; or i) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-IGF-1R having the sequence set forth in SEQ ID NO: 7.

[0183] In some embodiments, the anti-IGF-1R antibody moiety is a full-length antibody (anti-IGF-1R full-length antibody) . In some embodiments, the anti-IGF-1R full-length antibody comprises a human kappa CL or a human lambda CL. In some embodiments, the anti-IGF-1R full-length antibody comprises an Fc fragment derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and any combinations and hybrids thereof, such as human IgG. In some embodiments, the anti-IGF-1R full-length antibody comprises an Fc fragment derived from human IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and any combinations and hybrids thereof, such as human IgG1. Any Fc fragments described below can be used herein. In some embodiments, the Fc fragment is derived from human IgG1, wherein the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein in each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, according to EU numbering. For example, in some embodiments, the first subunit and / or the second subunit of the Fc fragment comprises: i) L234A+L235A ( “LALA” ) mutations, ii) M252Y+S254T+T256E ( “YTE” ) mutations, and / or iii) M428L+N434S ( “LS” ) mutations, according to EU numbering. In some embodiments, the Fc fragment further comprises knob-into-hole mutation, such as S364R and D399K “knob” mutations in one Fc subunit, and K370S, Y349T, and K409D “hole” mutations in another Fc subunit. Thus, in some embodiments, (a) the first subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) ; or (b) the first subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) .

[0184] In some embodiments, the N-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-IGF-1R antibody moieties described herein is additionally fused with a signal peptide for better expression.

[0185] In some embodiments, the N-terminus and / or C-terminus of the one or more polypeptides of any of the anti-IGF-1R antibody moieties described herein may comprise a histidine tag (HIS-tag) for protein purification. For example, the C-terminus of one or more polypeptides of an anti-IGF-1R antibody moiety may further comprise a histidine tag. Fc Fragments

[0186] The Fc (Fragment, crystallizable) fragment is the tail region of an antibody that interacts with cell surface receptors called Fc receptors and some proteins of the complement system. The Fc-mediated effector functions of antibodies include antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) , antibody-dependent cellular phagocytosis (ADCP) , and complement-dependent cytotoxicity (CDC) . This property is key for antibodies to activate the immune system. This fragment is composed of two or three constant domains attached to the CH domain on each of two heavy chains, depending on the class of the antibody. Mutations in the CH3 subunits of the Fc fragment on both heavy chains, termed “knob-into-hole” mutations, can further improve heterodimerization when assembling two antibody polypeptides. For example, the CH3 domain of the Fc fragment on a first heavy chain can comprise “knob” mutations (e.g., S364R and D399K) , when the following “hole” substitutions are introduced at positions 370, 349, and 409: K370S, Y349T, and K409D in the CH3 domain of the Fc fragment on a second heavy chain. The location of the knob vs. hole mutations can be switched, e.g., the knob mutation can be on the second heavy chain, and the hole mutations can be on the first heavy chain. Additional Fc fragment mutations, such as the LALA mutations (e.g., L234A and L235A substitutions in the CH2 domain of the Fc fragment) , can be introduced to reduce FcγR activation and Fc-mediated toxicity that could induce side effects such as cytokine release syndrome in individuals being administered the antibody. Furthermore, Fc fragment mutations, such as the LS mutations (e.g., M428L and N434S substitutions in the CH3 domain of the Fc fragment) , can be introduced to extend antibody half-life without impacting potency. FcRn affinity-enhancing Fc mutant can also be used herein, such as the M252Y / S254T / T256E (YTE) mutation which, when incorporated into the Fc fragment, is able to extend serum half-life. Accordingly, the described mutations can be used singly or in combination for improved antibody function and reduced toxicity to the patient. In some embodiments, the Fc fragment comprises the LALA mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises the LS mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises the YTE mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises the LS or YTE mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises the LALA mutations and the LS mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises the LALA mutations and the YTE mutations. In some embodiments, the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein in each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, optionally wherein each subunit comprises M252Y, S254T, and T256E substitutions, wherein the first subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, according to EU numbering. In some embodiments, the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein in each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, optionally wherein each subunit comprises M252Y, S254T, and T256E substitutions, wherein the first subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, according to EU numbering.

[0187] Hence in some embodiments, there is provided an isolated anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (anti-IGF-1R antibody moiety) , wherein the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct comprises: i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) ; and wherein: (a) the HC1 comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions, and the HC2 comprises S364R and D399K substitutions; (b) the HC1 comprises S364R and D399K substitutions, and the HC2 comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions; (c) the HC1 comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions and any one or more of the L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, and the HC2 comprises S364R and D399K substitutions and any one or more of the L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions; or (d) the HC1 comprises S364R and D399K substitutions and any one or more of the L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions, and the HC2 comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions and any one or more of the L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions; wherein the amino acid position is according to EU numbering. In some embodiments, any of the mutations on the HC1 described herein can be on the HC2 instead, and any of the mutations on the HC2 described herein can be on the HC1 instead. Linkers

[0188] The anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein may comprise one or more linkers (such as a peptide linker) connecting various components therein, e.g., between VH and VL, between constant domain and variable domain, or between an antibody domain and a non-antibody domain (e.g., a fusion partner) . When there are multiple linkers, the linkers can be the same or different. In some embodiments, the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein do not comprise a linker.

[0189] The linkers can be peptide linkers of any length. In some embodiments, the peptide linker is from about 1 to about 10 amino acids (aa) , from about 2 to about 15 aa, from about 3 to about 12 aa, from about 4 to about 10 aa, from about 5 to about 9 aa, from about 6 to about 8 aa, from about 1 to about 20 aa, from about 21 to about 30 aa, from about 1 to about 30 aa, from about 2 to about 20 aa, from about 10 to about 30 aa, from about 2 to about 19 aa, from about 2 to about 18 aa, from about 2 to about 17 aa, from about 2 to about 16 aa, from about 2 to about 10 aa, from about 2 to about 14 aa, from about 2 to about 12 aa, from about 2 to about 8 aa, or from about 2 to about 6 aa. In some embodiments, the peptide linker is any of 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 amino acids long. In some embodiments, the peptide linker is any of 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, or 30 amino acids long. In some embodiments, the peptide linker is about 2 to about 30 aa long, such as about 2 to about 15 aa, about 15 aa, or about 6 aa.

[0190] A peptide linker can have a naturally occurring sequence or a non-naturally occurring sequence. For example, a sequence derived from the hinge region of a heavy chain only antibody can be used as a linker. See, for example, WO1996 / 34103. In some embodiments, the peptide linker is a human IgG1 or IgG4 hinge. In some embodiments, the peptide linker is a mutated human IgG1 or IgG4 hinge. In some embodiments, the linker is a flexible linker. Exemplary flexible linkers include glycine polymers (G) n (e.g., GG) , glycine-serine polymers (including, for example, (GS) n, (GSGGS) n (SEQ ID NO: 112) , (GGGS) n (SEQ ID NO: 113) , or (GGGGS) n (SEQ ID NO: 114) , where n is an integer of at least one) , glycine-alanine polymers, alanine-serine polymers, and other flexible linkers known in the art. Glycine and glycine-serine polymers are relatively unstructured, and therefore may be able to serve as a neutral tether between components. Glycine accesses significantly more phi-psi space than even alanine and is much less restricted than residues with longer side chains. In some embodiments, the linker comprises amino acid residues selected from the group consisting of glycine, serine, arginine, and alanine. Exemplary flexible linkers include, but are not limited to GG, GGGG (SEQ ID NO: 115) , GGSGG (SEQ ID NO: 116) , GSGSG (SEQ ID NO: 117) , GSGGG (SEQ ID NO: 118) , GGGSG (SEQ ID NO: 119) , GSSSG (SEQ ID NO: 120) , GGSGGS (SEQ ID NO: 121) , SGGGGS (SEQ ID NO: 122) , GRAGGGGAGGGG (SEQ ID NO: 123) , GRAGGG (SEQ ID NO: 124) , GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 125) , GGGGS (SEQ ID NO: 126) , and the like. In some embodiments, the linker is GGGG (SEQ ID NO: 127) . In some embodiments, the linker is GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 128) . In some embodiments, the linker is GG. The ordinarily skilled artisan will recognize that design of an anti-TSHR antibody construct or a multispecific antibody construct can include linkers that are all or partially flexible, such that the linker can include a flexible linker portion as well as one or more portions that confer less flexible structure to provide a desired an anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct structure.

[0191] In some embodiments, the linker is a stable linker (not cleavable by protease, especially MMPs) . III. Methods of Preparation

[0192] Also provided are methods of making any of the anti-TSHR antibody constructs and / or the multispecific antibody constructs described herein.

[0193] The anti-TSHR antibody constructs and / or the multispecific antibody constructs described herein each may be prepared by any of the known protein expression and purification methods in the art. DNA sequence encoding the anti-TSHR antibody constructs and / or the multispecific antibody constructs can be fully synthesized. After obtaining such sequence, it is cloned into a suitable expression vector, then transfected into a suitable host cell. The transfected host cells are cultured, and the supernatant is harvested and purified to obtain the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. In some embodiments, the host cell is lysed to obtain the expressed multispecific antibody constructs or anti-TSHR antibody constructs.

[0194] In some embodiments, the present application provides isolated nucleic acids encoding one or more of the polypeptides of any one of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. The isolated nucleic acids may be DNA or RNA.

[0195] In some embodiments, the isolated nucleic acid is inserted into a vector, such as an expression vector, a viral vector, or a cloning vector. In some embodiments, viral vectors comprise virus-like vectors or particles, such as a retroviral vector or particle (e.g., a lentiviral vector or particle) , an AAV vector or particle, or a virus-like particle. In some embodiments, the viral vector is a lentiviral vector or an adeno-associated virus (AAV) vector. In some embodiments, the vectors provided herein can be further used for gene therapy, e.g., for packaging and introducing into an individual in need thereof nucleic acids encoding any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific constructs described herein. Hence also provided are vectors comprising any of the isolated nucleic acids described herein, or vectors encoding one or more of the polypeptides of any one of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. For expression of the nucleic acids, the vector may be introduced into a host cell to allow expression of the nucleic acids within the host cell. The expression vectors may contain a variety of elements for controlling expression, including, without limitation, promoter sequences, transcription initiation sequences, enhancer sequences, selectable markers, and signal sequences. These elements may be selected as appropriate by a person of ordinary skill in the art. For example, the promoter sequence (s) may be selected to promote the transcription of the polynucleotide in the vector. Suitable promoter sequences include, without limitation, T7 promoter, T3 promoter, SP6 promoter, beta-actin promoter, EF1a promoter, CMV promoter, and SV40 promoter. Enhancer sequences may be selected to enhance the transcription of the nucleic acids. Selectable markers may be selected to allow selection of the host cells inserted with the vector from those cells lacking the vector, for example, the selectable markers may be genes that confer antibiotic resistance. Signal sequences may be selected to allow the expressed polypeptide to be transported outside of the host cell.

[0196] In some embodiments, there is provided an isolated host cell comprising any of the isolated nucleic acids or vectors encoding the polypeptide portion of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. In some embodiments, there is provided an isolated host cell expressing any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. In some embodiments, two or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs (e.g., full-length antibody or Fab fragment) or multispecific antibody constructs described herein are encoded by a single vector. In some embodiments, two or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs (e.g., full-length antibody or Fab fragment) or multispecific antibody constructs described herein are encoded by two or more vectors. The host cells containing the vector may be useful in expression or cloning of the isolated nucleic acids. Suitable host cells can include, without limitation, prokaryotic cells, fungal cells, yeast cells, or higher eukaryotic cells such as mammalian cells. The expression of antibodies and antigen-binding fragments in prokaryotic cells such as E. coli is well established in the art. For a review, see for example Pluckthun, A. BioTechnology 9: 545-551 (1991) . Expression in eukaryotic cells in culture is also available to those skilled in the art as an option for production of antibodies or antigen-binding fragments thereof, see reviews, for example Ref, M. E. (1993) Curr. Opinion Biotech. 4: 573-576; Trill J. J. et al. (1995) Curr. Opinion Biotech 6: 553-560. Higher eukaryotic cells, in particular those derived from multicellular organisms can be used for expression of glycosylated polypeptides. Suitable higher eukaryotic cells include, without limitation, invertebrate cells and insect cells, and vertebrate cells. In some embodiments, the host cell is E. coli. In some embodiments, the host cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell, an HEK293 cell, an HT-29 cell, or an Expi293 cell.

[0197] The vector can be introduced to the host cell using any suitable methods known in the art, including, but not limited to, DEAE-dextran mediated delivery, calcium phosphate precipitate method, cationic lipids mediated delivery, liposome mediated transfection, electroporation, microprojectile bombardment, receptor-mediated gene delivery, delivery mediated by polylysine, histone, chitosan, and peptides. Standard methods for transfection and transformation of cells for expression of a vector of interest are well known in the art. In some embodiments, the host cells comprise two or more vectors each encoding a polypeptide of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. The two or more vectors can be introduced into the host cells at a same ratio, or at different ratios. In some embodiments, the host cells comprise a single vector comprising isolated nucleic acids encoding two or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. The two or more nucleic acids encoding the two or more polypeptides of the multispecific antibody construct or the anti-TSHR antibody construct can be under the same promoter control, or different promoter controls. For example, two or more nucleic acids under the same promoter control can be connected via an IRES sequence, or a sequence encoding a self-cleaving peptide (e.g., P2A, T2A) .

[0198] In some embodiments, the present application provides methods of making any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, comprising: i) culturing an isolated host cell comprising any of the isolated nucleic acids described herein or any of the vectors described herein, or any of the isolated host cells described herein (e.g., a host cell comprising any of the isolated nucleic acids or vectors described herein) , under a condition suitable for the expression of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs, and ii) obtaining the expressed anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs from said host cell (e.g., from the cell culture, or by lysing the host cell) . The isolated host cells are cultured under conditions that allow expression of the isolated nucleic acids inserted in the vectors. Suitable conditions for expression of polynucleotides may include, without limitation, suitable medium, suitable density of host cells in the culture medium, presence of necessary nutrients, presence of supplemental factors, suitable temperatures and humidity, and absence of microorganism contaminants. A person with ordinary skill in the art can select the suitable conditions as appropriate for the purpose of the expression. In some embodiments, the methods of making further comprise purifying any of the obtained anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs.

[0199] In some embodiments, the polypeptides expressed by the host cell can assemble together (e.g., form a polypeptide complex such as a dimer) and produce any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein. In some embodiments, the polypeptide complex may be formed inside the host cell. For example, the polypeptide complex may be formed inside the host cell with the aid of relevant enzymes and / or cofactors. In some embodiments, the polypeptide complex may be secreted out of the cell. In some embodiments, individual polypeptides may be secreted out of the host cell then form a polypeptide complex (such as any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein) outside of the host cell.

[0200] In some embodiments, two or more polypeptides of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein may be separately expressed and allowed to form (e.g., dimerize) the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs under suitable conditions. For example, the first polypeptide and the second polypeptide may be combined in a suitable buffer to allow the first protein monomer and the second protein monomer to dimerize through appropriate interactions such as hydrophobic interactions. In some embodiments, the first polypeptide and the second polypeptide may be combined in a suitable buffer containing an enzyme and / or a cofactor which can promote the dimerization of the first polypeptide and the second polypeptide. In some embodiments, the first polypeptide and the second polypeptide may be combined in a suitable vehicle allowing them to react with each other in the presence of a suitable reagent and / or catalyst.

[0201] The expressed polypeptide (s) and / or the polypeptide complex can be collected using any suitable methods. The polypeptide (s) and / or the polypeptide complex can be expressed intracellularly, in the periplasmic space, or secreted outside of the cell into the culture medium. If the polypeptide and / or the polypeptide complex are expressed intracellularly, the host cells containing the polypeptide and / or the polypeptide complex may be lysed, and the polypeptide and / or the polypeptide complex may be isolated from the lysate by removing the unwanted debris by centrifugation or ultrafiltration. If the polypeptide and / or the polypeptide complex is secreted into periplasmic space of E. coli, the cell paste may be thawed in the presence of agents such as sodium acetate (pH 3.5) , EDTA, and phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) for about 30 min, and cell debris can be removed by centrifugation (Carter et al., BioTechnology 10: 163-167 (1992) ) . If the polypeptide and / or the polypeptide complex is secreted into the medium, the supernatant of the cell culture may be collected and concentrated using a commercially available protein concentration filter, for example, an Amincon or Millipore Pellicon ultrafiltration unit. A protease inhibitor and / or an antibiotic may be included in the collection and concentration steps to inhibit protein degradation and / or growth of contaminating microorganisms.

[0202] The expressed polypeptide (s) and / or the polypeptide complex can be further purified by a suitable method, such as, without limitation, affinity chromatography, hydroxylapatite chromatography, size exclusion chromatography, gel electrophoresis, dialysis, ion exchange fractionation on an ion-exchange column, ethanol precipitation, reverse phase HPLC, chromatography on silica, chromatography on heparin sepharose, chromatography on an anion or cation exchange resin (such as a polyaspartic acid column) , chromatofocusing, SDS-PAGE, and ammonium sulfate precipitation (see, for review, Bonner, P. L., Protein purification, published by Taylor &Francis. 2007; Janson, J. C., et al., Protein purification: principles, high resolution methods and applications, published by Wiley-VCH, 1998) .

[0203] In some embodiments, the polypeptides and / or polypeptide complexes can be purified by affinity chromatography. In some embodiments, protein A chromatography or protein A / G (fusion protein of protein A and protein G) chromatography can be useful for purification of polypeptides and / or polypeptide complexes comprising a component derived from antibody CH2 domain and / or CH3 domain (Lindmark et al., J. Immunol. Meth. 62: 1-13 (1983) ) ; Zettlit, K. A., Antibody Engineering, Part V, 531-535, 2010) . In some embodiments, protein G chromatography can be useful for purification of polypeptides and / or polypeptide complexes comprising IgG γ3 heavy chain (Guss et al., EMBO J. 5: 1567 1575 (1986) ) . In some embodiments, protein L chromatography can be useful for purification of polypeptides and / or polypeptide complexes comprising κ light chain (Sudhir, P., Antigen engineering protocols, Chapter 26, published by Humana Press, 1995; Nilson, B. H. K. et al., J. Biol. Chem., 267, 2234-2239 (1992) ) . The matrix to which the affinity ligand is attached is most often agarose, but other matrices are available. Mechanically stable matrices such as controlled pore glass or poly (styrenedivinyl) benzene allow for faster flow rates and shorter processing times than can be achieved with agarose. Where any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein comprises an additional CH3 domain, the Bakerbond ABX resin (J. T. Baker, Phillipsburg, N. J. ) is useful for purification. IV. Pharmaceutical Compositions, Unit Dosages, Articles of Manufacture, and Kits

[0204] Further provided by the present application are pharmaceutical compositions comprising an anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct of the present disclosure, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier. In some embodiments, the pharmaceutical composition comprises a nucleic acid or viral vector (e.g., lentiviral vector) encoding any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier. In some embodiments, the pharmaceutical composition comprising the nucleic acid or viral vector is for use as a gene therapy or as part of a gene therapy.

[0205] The anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or pharmaceutical compositions thereof, may be suitable for a variety of modes of administration described herein, including for example systemic or localized administration. In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated for intravenous administration. In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated for subcutaneous injection.

[0206] “Carriers” as used herein include pharmaceutically acceptable carriers, excipients, or stabilizers which are nontoxic to the cell or mammal being exposed thereto at the dosages and concentrations employed. Often the physiologically acceptable carrier is an aqueous pH buffered solution. Acceptable carriers, excipients, or stabilizers are nontoxic to recipients at the dosages and concentrations employed, and include buffers such as phosphate, citrate, and other organic acids; antioxidants including ascorbic acid and methionine; preservatives (such as octadecyldimethylbenzyl ammonium chloride; hexamethonium chloride; benzalkonium chloride, benzethonium chloride; phenol, butyl or benzyl alcohol; alkyl parabens such as methyl or propyl paraben; catechol; resorcinol; cyclohexanol; 3-pentanol; and m-cresol) ; low molecular weight (less than about 10 residues) polypeptides; proteins, such as serum albumin, gelatin, or immunoglobulins; hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone; amino acids such as glycine, glutamine, asparagine, histidine, arginine, or lysine; monosaccharides, disaccharides, and other carbohydrates including glucose, mannose, or dextrins; chelating agents such as EDTA; sugars such as sucrose, mannitol, trehalose, or sorbitol; salt-forming counter-ions such as sodium; metal complexes (e.g. Zn-protein complexes) ; and / or non-ionic surfactants such as TWEENTM, PLURONICSTM, or polyethylene glycol (PEG) .

[0207] In some embodiments, the pharmaceutical composition is formulated to have a pH in the range of about 4.5 to about 9.0, including for example pH ranges of any one of about 5.0 to about 8.0, about 6.5 to about 7.5, about 6.5 to about 7.0, or about 7.0 to about 7.5. In some embodiments, the pharmaceutical composition can also be made to be isotonic with blood by the addition of a suitable tonicity modifier, such as glycerol.

[0208] The pharmaceutical compositions to be used for in vivo administration are generally formulated as sterile, substantially isotonic, and in full compliance with all Good Manufacturing Practice (GMP) regulations of the U.S. Food and Drug Administration. Sterility is readily accomplished by filtration through sterile filtration membranes. In some embodiments, the composition is free of any pathogens. For injection, the pharmaceutical composition can be in the form of liquid solutions, for example in physiologically compatible buffers such as Hank's solution or Ringer's solution. In addition, the pharmaceutical composition can be in a solid form and re-dissolved or suspended immediately prior to use. Lyophilized compositions are also included.

[0209] In some embodiment, the pharmaceutical composition is formulated in accordance with routine procedures as a pharmaceutical composition adapted for parenteral (e.g., intravenous, intramuscular, or subcutaneous) administration. Typically, compositions for injection are solutions in sterile isotonic aqueous buffer. Where necessary, the composition may also include a solubilizing agent and a local anesthetic such as lidocaine to ease pain at the site of the injection. Generally, the ingredients are supplied either separately or mixed together in unit dosage form, for example, as a dry lyophilized powder or water free concentrate in a hermetically sealed container such as an ampule or sachette indicating the quantity of active agent. Where the composition is to be administered by infusion, it can be dispensed with an infusion bottle containing sterile pharmaceutical grade water or saline. Where the composition is administered by injection, an ampoule of sterile water for injection or saline can be provided so that the ingredients may be mixed prior to administration.

[0210] In some embodiments, the pharmaceutical composition is suitable for administration to a mammal, such as a human. In some embodiments, the pharmaceutical composition is suitable for administration to a rodent (e.g., mice, rats) or non-human primates (e.g., cynomolgus monkey or rhesus macaque) . In some embodiments, the pharmaceutical composition is contained in a single-use vial, such as a single-use sealed vial. In some embodiments, the pharmaceutical composition is contained in a multi-use vial. In some embodiments, the pharmaceutical composition is contained in bulk in a container. In some embodiments, the pharmaceutical composition is cryopreserved.

[0211] Also provided are unit dosage forms of any of the anti-TSHR antibody constructs or multispecific antibody constructs described herein, or compositions (such as pharmaceutical compositions) thereof. The term “unit dosage form” refers to a physically discrete unit suitable as unitary dosages for an individual (e.g., human) , each unit containing a predetermined quantity of active material calculated to produce the desired therapeutic effect, in association with a suitable pharmaceutical carrier, diluent, or excipient. These unit dosage forms can be stored in a suitable packaging in single or multiple unit dosages and may also be further sterilized and sealed.

[0212] The present application further provides articles of manufacture comprising the compositions (such as pharmaceutical compositions) described herein in suitable packaging. Suitable packaging for compositions (such as pharmaceutical compositions) described herein are known in the art, and include, for example, vials (such as sealed vials) , vessels, ampules, bottles, jars, flexible packaging (e.g., sealed Mylar or plastic bags) , and the like. These articles of manufacture may further be sterilized and / or sealed.

[0213] The present application also provides kits comprising compositions (such as pharmaceutical compositions) described herein and may further comprise instruction (s) on methods of using the composition, such as uses described herein. The kits described herein may further include other materials desirable from a commercial and user standpoint, including other buffers, diluents, filters, needles, syringes, and / or applicators and package inserts with instructions for performing any methods described herein. V. Methods of Treating Diseases

[0214] Also provided are methods of treating a disease or condition in an individual (e.g., human) , comprising administering (e.g., intravenously or subcutaneously, or by orbital local administration) to the individual an effective amount of any of the multispecific antibody constructs, anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical compositions described herein. In some embodiments, the disease or condition is a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease. In some embodiments, the disease or disorder is Thyroid Eye Disease (TED) .

[0215] Also provided are methods of treating a disease or condition in an individual (e.g., human) , comprising administering (e.g., intravenously or subcutaneously, or by orbital local administration) to the individual an effective amount of: (a) an anti-IGF-1R antibody agent, and (b) an anti-TSHR antibody agent. In some embodiments, the IGF-1R antibody agent and the TSHR antibody agent is a single antibody construct that binds to both IGF-1R and TSHR. In some embodiments, the disease or condition is a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease. In some embodiments, the disease or disorder is Thyroid Eye Disease (TED) .

[0216] In some embodiments, the disease or condition can be any of, e.g., a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease, etc. In some embodiments, the disease or condition is a disease or condition wherein immune function is implicated (e.g., Graves’ disease, Thyroid Eye Disease (TED) ) . In some embodiments, the disease or condition is an autoimmune disease, such as Graves’ disease or Thyroid Eye Disease (TED) .

[0217] In some embodiments, there is provided a method of treating a disease or condition (e.g., Thyroid Eye Disease (TED) ) in an individual (e.g., human) , comprising administering (e.g., intravenously or subcutaneously, or by orbital local administration) to the individual an effective amount of an anti-TSHR antibody construct, such as any of the anti-TSHR antibody constructs described herein (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or a pharmaceutical composition thereof) .

[0218] In some embodiments, there is provided a method of treating a disease or condition (e.g., a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease) in an individual (e.g., human) , comprising administering (e.g., intravenously or subcutaneously, or by orbital local administration) to the individual an effective amount of an anti-TSHR antibody construct (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or a pharmaceutical composition thereof) , wherein the anti-TSHR antibody construct comprises an anti-TSHR full-length antibody, such as full length antibodies comprises any of the heavy chain and light chain sequences described herein.

[0219] In some embodiments, there is provided a method of treating a disease or condition (e.g., a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease) in an individual (such as a human) , comprising administering (e.g., intravenously or subcutaneously, or by orbital local administration) to the individual an effective amount of a multispecific antibody construct (such as any of the multispecific antibody constructs described herein) (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or a pharmaceutical composition thereof) comprising a first antibody moiety that specifically recognizes TSHR (anti-TSHR antibody moiety) , and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R (anti-IGF-1R antibody moiety) . In some embodiments, there is provided a method of treating a disease or condition (e.g., a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease) in an individual (such as a human) , comprising administering (e.g., intravenously, subcutaneously, topically, or via inhalation) to the individual an effective amount of a multispecific antibody construct (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or a pharmaceutical composition thereof) comprising a first means (such as antibody means) for binding to TSHR, and a second means (such as antibody means) for binding IGF-1R. In some embodiments, the multispecific antibody construct (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or a pharmaceutical composition thereof) comprises: (i) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ; (ii) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR, an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment; (iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R, an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and (iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) . In some embodiments, the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 93, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 94, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 94, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 95, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 96, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 96.

[0220] In some embodiments, the individual has an elevated serum level of anti-nuclear antibodies (e.g., at least about 20%, 40%, 60%, 80%, 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, or 500%higher serum level anti-nuclear antibodies than that of a healthy individual) . In some embodiments, the individual has an elevated serum level of anti-dsDNA antibodies (e.g., at least about 20%, 40%, 60%, 80%, 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, or 500%higher serum level anti-dsDNA antibodies than that of a healthy individual) . In some embodiments, the individual has an elevated serum level of IFNα (e.g., at least about 20%, 40%, 60%, 80%, 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, or 500%higher serum level of IFNα than that of a healthy individual) . In some embodiments, the individual has an elevated protein level in urine (e.g., at least about 20%, 40%, 60%, 80%, 100%, 150%, 200%, 300%, 400%, or 500%higher level of protein in urine than that of a healthy individual) .

[0221] In some embodiments, the method of treating a disease or condition (e.g., a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease) described herein can achieve one or more of the following biological activities: (1) inhibiting (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) fibroblast cell maturation; (2) inhibiting (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) proliferation of fibroblast cells; (3) reducing (by e.g., at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) systemic or local levels anti-nuclear antibodies or anti-dsDNA antibodies, etc. ; (4) alleviating (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) one or more symptoms in an individual having the disease or condition; (5) reducing (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) systemic or local pro-inflammatory cytokine levels (e.g., IFNα) ; (6) reducing (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) the presentation, incidence, or burden of the disease or condition; (7) prolonging the time after symptoms of the disease or condition subside until symptoms reappear in the individual by at least about any of 1, 2, 4, 6, 12, 18, 20, or more hours, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or more days, 1, 2, 3, 4, or more weeks, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18, or 24 months, or more; (8) preventing the reappearance of symptoms of the disease or condition by at least about any of 1, 2, 4, 6, 12, 18, 20, or more hours, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or more days, 1 week, 2 weeks, 3 weeks, 4 weeks, 5 weeks, 6 weeks, 7 weeks, 8 weeks, 9 weeks, 10 weeks, 11 weeks, 12 weeks, 1 month, 2 months, 3 months, 4 months, 5 months, 6 months, 7 months, 8 months, 9 months, 10 months, 11 months, 12 months, or more; and (9) preventing, inhibiting, or reducing (e.g., by at least about any of 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 100%) the likelihood of the recurrence of a disease or condition.

[0222] The methods provided herein may be practiced in a primary therapeutic setting, i.e., wherein the methods being carried out are the primary / definitive therapy. In some embodiments, the method may be carried out before or in conjunction with the primary / definitive therapy. In some embodiments, the method is used to treat an individual (such as a human) who has previously been treated. Any of the methods of treatment provided herein may be used to treat an individual (such as a human) who has not previously been treated. In some embodiments, the method is used as a first line therapy. In some embodiments, the method is used as a second line therapy.

[0223] The methods described herein are suitable for treating a variety of diseases or conditions. The methods are applicable to diseases or conditions of all stages, including shortly after onset of symptoms or for a disease or condition that is in remission. The methods described herein may be used as a first therapy, second therapy, third therapy, or combination therapy with other types of therapies known in the art, such as anti-inflammatory agents (e.g., corticosteroids) , gene therapy, immunotherapy, bone marrow transplantation, stem cell transplantation, targeted therapy, nutritional therapy, or the like. In some embodiments, the disease or condition has been unresponsive to prior therapy.

[0224] Exemplary routes of administration of any of the multispecific antibody constructs or anti-TSHR antibody constructs described herein (or nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or pharmaceutical compositions thereof) include, but are not limited to, intravenous, intracavitary, intraarterial, intramuscular, subcutaneous, parenteral, transdermal, topical, inhalation, oral, or intraperitoneal routes, or be delivered into lymph glands, body spaces, organs, or tissues affected by the disease or condition. In some embodiments, the multispecific antibody constructs or isolated anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or pharmaceutical compositions thereof, are administered intravenously, such as by infusion. Intravenous infusion can be at any suitable rate.

[0225] The dosing regimen of the multispecific antibody constructs or anti-TSHR antibody constructs described herein, nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or pharmaceutical compositions thereof, administered to the individual (such as a human) may vary with the particular composition, the method of administration, and the particular type of disease or condition being treated. In some embodiments, the effective amount of the multispecific antibody constructs or isolated anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vectors) encoding thereof, or pharmaceutical compositions thereof, is below the level that induces a toxicological effect (i.e., an effect above a clinically acceptable level of toxicity) or is at a level where a potential side effect can be controlled or tolerated when the composition is administered to the individual.

[0226] In some embodiments, the individual to be treated is a mammal, including, but not limited to, humans, rodents, simians, felines, canines, equines, bovines, porcines, ovines, caprines, mammalian laboratory animals, mammalian farm animals, mammalian sport animals, and mammalian pets. The individual can be male or female and can be any suitable age, including infant, juvenile, adolescent, adult, and geriatric individuals. In particular embodiments, the individual is a human or a non-human primate (e.g., rhesus macaque or cynomolgus monkey) . Dosing and Method of Administering the anti-TSHR Antibody Construct

[0227] The dosing regimen of any of the multispecific antibody constructs, anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical compositions described herein (such as the specific dosages and frequencies) used for treating a disease or condition as described herein administered into the individual may vary with the particular anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) , the mode of administration, and the type of disease or condition being treated. In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct is an amount that is effective to alleviate at least one symptom of the disease or condition. In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) is an amount that is sufficient to prolong overall remission of the disease or condition in the individual. In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) is an amount that is sufficient to produce clinical benefit of more than about any of 50%, 60%, 70%, 80%, or 90%among a population of individuals treated with the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) .

[0228] In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) is an amount that slows or inhibits the progression of the disease or condition (for example, by at least about 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%) as compared to that of the individual not receiving the treatment. In some embodiments, the disease or condition is an autoimmune disease. In some embodiments, the disease or condition is Thyroid Eye Disease (TED) .

[0229] In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) reduces serum level of anti-nuclear antibodies by at least about 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, or 70%compared to that of a reference individual (e.g., an individual having the same disease or condition but not treated with the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) ) . In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) reduces serum level of anti-dsDNA antibodies by at least about 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, or 70%compared to that of a reference individual (e.g., an individual having the same disease or condition but not treated with the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) ) . In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) reduces serum level of IFNα by at least about 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, or 70%compared to that of a reference individual (e.g., an individual having the same disease or condition but not treated with the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) ) . In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) reduces protein levels in urine by at least about 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 70%, 80%, or 90%compared to that of a reference individual (e.g., an individual having the same disease or condition but not treated with the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) ) .

[0230] In some embodiments, the effective amount of the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) is an amount that reduces the side effects of a disease or condition (e.g., Thyroid Eye Disease, TED) (for example, by at least about 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, or 50%) as compared to that of the individual not receiving the treatment.

[0231] The anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) can be administered to an individual (such as human) via various routes, including, for example, orbital, intravenous, intra-arterial, intraperitoneal, intrapulmonary, oral, inhalation, intravesicular, intramuscular, intra-tracheal, subcutaneous, intraocular, intrathecal, transmucosal, and transdermal. In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct is included in a pharmaceutical composition while administered into the individual. In some embodiments, sustained continuous release formulation of the composition may be used. In some embodiments, the composition is administered intravenously. In some embodiments, the composition is administered intraperitoneally. In some embodiments, the composition is administered intravenously. In some embodiments, the composition is administered intraperitoneally. In some embodiments, the composition is administered intramuscularly. In some embodiments, the composition is administered subcutaneously. In some embodiments, the composition is administered intravenously. In some embodiments, the composition is administered orally. In some embodiments, the composition is administered locally (e.g., at the orbital) . In some embodiments, the anti-TSHR antibody construct or multispecific antibody construct (or pharmaceutical composition thereof) is administered intravenously or subcutaneously into the individual. Combination therapy

[0232] This application also provides methods of administering any of the multispecific antibody constructs, isolated anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical compositions described herein into an individual (e.g., a human) for treating a disease or condition, wherein the method further comprises administering a second agent or therapy. In some embodiments, the second agent or therapy is a standard or commonly used agent or therapy for treating the disease or condition.

[0233] In some embodiments, any of the multispecific antibody constructs, anti-TSHR antibody constructs, nucleic acids or vectors (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical compositions described herein is administered simultaneously with the second agent or therapy. In some embodiments, the multispecific antibody construct, anti-TSHR antibody construct, nucleic acid or vector (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical composition thereof is administered concurrently with the second agent or therapy. In some embodiments, the multispecific antibody construct, anti-TSHR antibody construct, nucleic acid or vector (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical composition thereof is administered sequentially with the second agent or therapy. In some embodiments, the multispecific antibody construct, anti-TSHR antibody construct, nucleic acid or vector (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical composition thereof is administered prior to the second agent or therapy. In some embodiments, the multispecific antibody construct, anti-TSHR antibody construct, nucleic acid or vector (e.g., viral vector) encoding thereof, or pharmaceutical composition thereof is administered after the second agent or therapy. EXAMPLES

[0234] The examples below are intended to be purely exemplary of the invention and should therefore not be considered to limit the invention in any way. The following examples and detailed description are offered by way of illustration and not by way of limitation. For the embodiments in which details of the experimental methods are not described, such methods are carried out according to conventional conditions such as those described in Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) , or as suggested by the manufacturers. Example 1: Anti-TSHR antibody hybridoma screeningImmunization:

[0235] Mice were immunized with GS-CHO or expi-293 cell lines that highly express human TSHR, and were immunized once every two weeks, for three times in total.Cell fusion and high-throughput screening:

[0236] When the serum titer meets the requirements, the spleen of the mouse is removed to prepare a B lymphocyte suspension, which is mixed with SP2 / 0 myeloma cells (ATCC) and then electrofused. The fused cells were then diluted with HAT-containing medium. Cell suspension was added to a 96-well plate. On the 7th day after fusion, the medium was changed to selection medium, and positive clones were selected using flow cytometry (FACS) after the about 10 days of culture or longer.

[0237] Hybridoma cells specifically expressing TSHR antibodies were screened by flow cytometry (FACS) . Cells to be detected (GS-CHO or expi-293 human TSHR) were diluted to 1×106 cells / ml, and added to a U-shaped bottom 96-well plate at 100 μl / well. The plate was centrifuge at 500 g for 5 min to remove the cell culture medium. The culture supernatant from the hybridoma 96-well plate was added to the U-shaped plate and cells were resuspended. 100 μl resuspended cells were added to each well and rested on ice for 30 minutes. The cells were centrifuged at 500g for 5 minutes to remove the supernatant, and washed once with PBS. PBS was removed at 500g for 5 minutes, and 100 μl of anti-mouse Fab FITC-labeled secondary antibody (1: 500 diluted in PBS) was added to each well, and 100 μl of anti-human Fc PE labeled secondary antibody was added to the positive control antibody. The cells were incubated on ice for 30 minutes in the dark. The supernatant was removed and the cells were washed once with PBS, and resuspended in PBS for FACS detection.Hybridoma cells inhibit cAMP secretion function:

[0238] The positive clones of the above hybridoma cells were selected and their activity in inhibiting cAMP secretion was further tested. Based on the blocking results, subclones of positive clones were selected.Positive hybridoma cell subclones:

[0239] Subcloning by limiting dilution: Prepare a 96-well plate, add 200 μl medium to each well. The medium is based on the screening medium, with HAT replaced with HT (Gibco, Cat#11067-030) , while the rest of the formula being the same. Make a cell suspension from the cells in the positive wells screened by the above fusion. Add 100 μl to each well in the first row and mix well. Then add 100 μl of the cell suspension in the first row to the second row and mix thoroughly. After homogenization, add 100 μl to the next row; repeat the above steps, let the 96-well plate stand for 30 minutes, and observe and count under a microscope. Take the volume corresponding to 100 cells, add 20 ml of culture medium, mix well and plate 200 μl per well. One week later, observe under a microscope to determine and mark the single clone wells.

[0240] When the confluence of cells in each well reaches more than 50%, the same high-throughput screening method as mentioned above is used to detect the cAMP inhibitory function. Target positive wells are selected, and cells are cryopreserved after expansion and culture. Example 2: Preparation of chimeric antibodies

[0241] The antibody light and heavy chain gene sequences were retrieved from the hybridoma candidate clones obtained in Example 1, and based on functional experiments and sequence similarity, 14-9-30 (14D8) were selected to construct human-mouse chimeric antibodies.

[0242] Approximately 5×106 cells from each freshly cultured cell line were taken to extract RNA (Macherey-Nagel, Cat#740984.250) . cDNA was obtained by reverse transcription using PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Takara) . Upstream primers were designed based on the sequence located in the FR1 region at the 5' end, and downstream primers were designed based on the sequence located in the antibody constant region or FR4 region to amplify the antibody light chain and heavy chain variable region gene fragments. The fragments were then connected to the T vector (Mighty TA-cloning Kit, Takara) . Single clones were picked for sequencing, and the sequencing results were analyzed using MEGA7 software.

[0243] After sequence comparison, candidate clone sequences were obtained based on sequence homology. The light and heavy chain variable region gene fragments were connected to the pcDNA3.1 vector through homologous recombinase ( II, catalog number: C112-01) from Nanjing Novizan Company to obtain light chain and heavy chain expression plasmids. The light chain plasmid and heavy chain plasmid of the same antibody were mixed at a molar ratio of 1: 1, and 293F cells were transfected with polyethylenimine (PEI) (Polysciences, Cat#23966) . After 5-7 days of culture when the cell viability was below 60%, the cell culture supernatant was collected and the antibody was purified. Example 3: Humanization of anti-TSHR antibodies

[0244] Antibody 14-9-30 obtained by methods above were humanized by the steps below: 1) Determine the CDR ring structures of VH and VL respectively; 2) Find the closest homologous sequences for the V / J regions respectively in the human germline sequence database; 3) Graft the CDR regions of the antibodies onto the human framework region; 4) Analyze sequence and structural features to determine the amino acid positions in the framework region that maintain the CDR function; 5) Analyze whether important amino acid positions undergo backmutation; 6) Optimize amino acids at risk sites.

[0245] The CDR sequences of the antibodies are listed in Table 1A.

[0246] The humanized antibodies comprise VH and VL sequences are listed in Table 1B. Table 1A. Table 1B. Example 4: Preparation of anti-IGF-1R / TSHR bispecific antibodies

[0247] Anti-IGF-1R antibodies were generated using similar methods (e.g., screening of hybridoma and humanization) as described above, and IGF-1R antibody sequences are shown as following.

[0248] Table E4A1

[0249] Table E4A2

[0250] Table E4A3

[0251] Table E4B1

[0252] Table E4B2

[0253] Table E4B3

[0254] The bispecific antibodies in the present invention were prepared by expressing and purifying two parent proteins separately and then recombining them through reduction and oxidation in vitro (FIG. 1) . Table E4C1 shows the sequences of the bispecific antibodies. All antibodies have an IgG1 Fc fragment.

[0255] Table E4C1

[0256] The sequence was synthesized and loaded into the pcDNA3.1 vector.

[0257] Expi293F cells were cultured in Expi293F medium. The cell density was adjusted to 3 × 106 cells / mL on the day of transfection. Some of the final transfection volume of Opti-MEM medium was used as the transfection buffer, and each plasmid to be transfected was added at a ratio of 1 mg / L, with molar ratio between the light chain plasmid and heavy chain plasmid at 1: 1. After thorough mixing, PEIMax was added according to DNA: PEI mass ratio of 1: 3 and mixed well. The mixture was then incubated at room temperature for 20 minutes, and then gently added into the Expi293F cell suspension. Cells were then cultured at 36.5℃ and 120 rpm with 8%CO2.

[0258] After culturing, glucose solution was added to a final concentration of 5 g / L and Valproic acid sodium salt was added to a final concentration of 2.2 mM to the cell suspension, and mixed gently. The cells continued to be cultured at 36.5℃ and 120 rpm with 8%CO2 for 7 days until sample collection. For sample collection, after centrifugation, the cells were filtered with a 0.22 μm disposable vacuum filter device.Affinity purification:

[0259] The antibodies were captured using an affinity chromatography column. Before purification, the chromatography column was balanced with 5 times the column volume of 1×PBS (Gibco) . The filtered cell feed was passed through the chromatography column, followed with 10 times the column volume of 1×PBS to remove non-specific binding proteins. The column was washed with 5 times the column volume of elution buffer (100 mM sodium citrate, pH 3.5) . The eluate was collected and adjust to pH 6.0 with 2 M Tris. Size exclusion chromatography (SEC) was then used to detect the purity of the sample after filtration and sterilization.In vitro redox recombination:

[0260] Protein obtained by affinity chromatography was mixed with GSH at a molar ratio of 1: 1, and pH was adjusted to 8.0 with arginine. The mixture was left at room temperature overnight. The reaction solution was changed to PBS and placed at 4℃ until use. Ion exchange chromatography was used to purify the bispecific antibody, using a Mono S 5 / 50 GL (from GE Healthcare) ion exchange chromatography column placed in the AKTApure system (from GE Healthcare) . 5-10 times the column volume of loading buffer...

Claims

1.An antibody construct comprising an antibody moiety that specifically recognizes thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR; anti-TSHR antibody moiety) comprising a heavy chain variable region (VH-TSHR) and a light chain variable region (VL-TSHR) , wherein the VH-TSHR and the VL-TSHR comprise:i) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 47, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 48;ii) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 51, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 53; oriii) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VH-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 49, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within the VL-TSHR having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 50.2.The antibody construct of claim 1, wherein:i) the VH-TSHR comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 63; orii) the VH-TSHR comprises an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 58 or 71, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 60; and the VL-TSHR comprises an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 62, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 70.3.The antibody construct of claim 1 or claim 2, wherein:(i) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, 49, or 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47, 49, or 51; and(ii) the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, 50, 52, or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48, 50, 52, or 53.4.The antibody construct of any one of claims 1-3, wherein:(i) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 47; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 48;(ii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 49; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 50; or(iii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 51; and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 52 or 53.5.The antibody construct of claim 4, wherein:(i) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 47, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 48;(ii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 50; or(iii) the VH-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 51, and the VL-TSHR comprises an amino acid sequence of SEQ ID NO: 52 or 53.6.The antibody construct of any one of claims 1-5, wherein the TSHR antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’ ) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody.7.The antibody construct of any one of claims 1-6, wherein the antibody construct comprises a multispecific antibody further comprising an antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R ( “anti-IGF-1R antibody moiety” ) .8.An antibody construct comprising a first antibody moiety that specifically recognizes thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR; “anti-TSHR antibody moiety” ) and a second antibody moiety that specifically recognizes IGF-1R ( “anti-IGF-1R antibody moiety” ) .9.The antibody construct of claim 7 or claim 8, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises:a) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 8, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 9.b) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 13, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15;c) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 11;d) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 12, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15;e) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 14, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 15;f) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having v set forth in SEQ ID NO: 1, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 2;g) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 4;h) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 3, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 5; ori) an HC-CDR1, an HC-CDR2, and an HC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VH-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 6, and an LC-CDR1, an LC-CDR2, and an LC-CDR3, respectively, comprising the amino acid sequences of a CDR1, a CDR2, and a CDR3 within a VL-IGF-1R chain region having the amino acid sequence as set forth in SEQ ID NO: 7.10.The antibody construct of any one of claims 7-9, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises:a) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35;b) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 28, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27;c) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 23, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27;d) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 29, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 24; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 25, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27;e) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35;f) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35; org) the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 30, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 38, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 34, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35.11.The antibody construct of claim 10, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises the VH-IGF-1R comprising an HC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 39, an HC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40, and an HC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32; and the VL-IGF-1R comprising an LC-CDR1 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 33, an LC-CDR2 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41, and an LC-CDR3 comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 35.12.The antibody construct of any one of claims 9-11, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises:a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14, or a variant having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 1, 3, 6, 8, 10, 12, 13, and 14; and / orb) the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15, or a variant having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to any one of SEQ ID NOs: 2, 4, 5, 7, 9, 11, and 15.13.The antibody construct of any one of claims 9-12, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises:a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;b) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;c) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;d) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;e) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 14, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 15, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;f) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;g) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 4, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity;h) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; ori) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity; and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity.14.The antibody construct of claim 13, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises: a) the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 8; and b) the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9, or a variant comprising an amino acid sequence having at least about any of 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%or 99%sequence identity to SEQ ID NO: 9.15.The antibody construct of claim 14, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety comprises the VH-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 8, and the VL-IGF-1R comprising an amino acid sequence of SEQ ID NO: 9.16.The antibody construct of any one of claims 8-15, wherein the anti-IGF-1R antibody moiety is selected from the group consisting of a full-length antibody, a bispecific antibody, a multispecific antibody, a single-chain Fv (scFv) fragment, a Fab fragment, a Fab’ fragment, a F (ab’ ) 2, an Fv fragment, a disulfide stabilized Fv fragment (dsFv) , a (dsFv) 2, a Fv-Fc fusion, a scFv-Fc fusion, a scFv-Fv fusion, a diabody, a tribody, and a tetrabody.17.The antibody construct of any one of claims 1-16, further comprising an Fc fragment selected from the group consisting of Fc fragments derived from human IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, and combinations and hybrids thereof.18.The antibody construct of claim 17, wherein the Fc fragment is selected from the group consisting of Fc fragments from human IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, and combinations and hybrids thereof.19.The antibody construct of claim 17 or 18, wherein the Fc fragment is derived from human IgG1, wherein the Fc fragment comprises a first subunit and a second subunit, wherein each subunit comprises one or more mutations in the human IgG1 Fc fragment sequence selected from the group consisting of: L234A, L235A, M252Y, S254T, T256E, M428L, and N434S substitutions (EU numbering) , optionally wherein each subunit comprises M252Y, S254T, and T256E substitutions.20.The antibody construct of claim 19, wherein the first subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) .21.The antibody construct of claim 19 or 20, wherein the first subunit comprises K370S, Y349T, and K409D substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence, and the second subunit comprises S364R and D399K substitutions in the human IgG1 Fc fragment sequence (EU numbering) .22.The antibody construct of any one of claims 8-21, wherein the construct comprises:(i) a first heavy chain (HC1) comprising the VH-TSHR and an HC1 constant region ( “HC1-CH1” ) , and a first subunit of an Fc fragment;(ii) a first light chain (LC1) comprising the VL-TSHR and an LC1 constant region ( “LC1-CL” ) ;(iii) a second heavy chain (HC2) comprising the VH-IGF-1R and an HC2 constant region ( “HC2-CH1” ) , and a second subunit of the Fc fragment; and(iv) a second light chain (LC2) comprising the VL-IGF-1R and an LC2 constant region ( “LC2-CL” ) .23.The antibody construct of claim 22, wherein the HC2 further comprises a second VH-IGF-1R, wherein the VH-IGF-1R and the second VH-IGF-1R comprise the same sequence.24.The antibody construct of any one of claims 8-22, wherein:(a) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 81, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 81, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 82, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 82, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 83, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 84, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 84;(b) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 93, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 94, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 94, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 95, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 96, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 96;(c) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 97, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 98, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 98, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 99, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 99, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 100, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 100; or(d) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 101, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 102, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 102, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 103, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 104, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 104.25.The antibody construct of claim 23, wherein:(a) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 75, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 75, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 76, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 76, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 77, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 77, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 78, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 78;(b) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 85, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 86, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 86, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 87, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 87, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 88, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 88; or(c) the HC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 89, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 89, the LC2 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 90, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 90, the HC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 91, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 91, and the LC1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 92, or a variant thereof comprising an amino acid sequence having at least about 80%, 85%, 88%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%sequence identity to SEQ ID NO: 92.26.A pharmaceutical composition comprising the antibody construct of any one of claims 1-25, and a pharmaceutical acceptable carrier.27.An isolated nucleic acid encoding the antibody construct of any one of claims 1-25.28.A vector comprising the isolated nucleic acid of claim 27.29.An isolated host cell comprising the isolated nucleic acid of claim 27 or the vector of claim 28.30.A method of producing an antibody construct, comprising:(i) culturing the isolated host cell of claim 29 under conditions effective to express the antibody construct; and(ii) obtaining the expressed the antibody construct from the host cell.31.A method of treating a disease or condition in an individual, comprising administering to the individual an effective amount of the multispecific antibody construct of any one of claims 1-25, or the pharmaceutical composition of claim 26.32.A method of treating a disease or condition comprising administering:(a) an anti-IGF-1R antibody agent, and(b) an anti-TSHR antibody agent,33.The method of claim 32, wherein the IGF-1R antibody agent and the TSHR antibody agent is a single antibody construct that binds to both IGF-1R and TSHR.34.The method of any one of claims 31-33, wherein the disease or condition a Thyroid Eye Disease (TED) or Grave’s disease.35.The method of claim 34, wherein the disease or disorder is Thyroid Eye Disease (TED) .36.The method of any one of claims 31-35, wherein the antibody construct of any one of claims 1-25 or the pharmaceutical composition of claim 26 is administered intravenously or subcutaneously into the individual.37.The method of any one of claims 31-36, wherein the individual is a human.38.A kit comprising the antibody construct of any one of claims 1-25 or the pharmaceutical composition of claim 26.

Images