Liquid formulations comprising high concentrations humanized antibodies for treating il-6 related diseases

Abstract

Disclosed herein are liquid formulations comprising high concentrations humanized antibodies for treating an IL-6-related disease. The antibody formulation provides good antibody stability, acceptable viscosity and osmolarity for subcutaneous injection, and prevents aggregation, degradation of the monoclonal antibody, and acidic isomer increase. The formulation is applicable in stabilizing the structure and function of the humanized antibody.

Description

Liquid Formulations Comprising High Concentrations Humanized Antibodies for Treating IL-6 Related DiseasesFIELD OF THE INVENTION

[0001] Disclosed herein are liquid formulations comprising high concentrations humanized antibodies for treating an IL-6-related disease. The antibody formulation provides good antibody stability, acceptable viscosity and osmolarity for subcutaneous injection, and prevents aggregation, degradation of the monoclonal antibody, and acidic isomer increase. The formulation is applicable in stabilizing the structure and function of the humanized antibody.BACKGROUND

[0002] Humanized anti-interleukin 6 receptor antibodies are useful for the treatment of rheumatoid arthritis (RA) [Josef S Smolen, et al. EULAR recommendations for the management of rheumatoid arthritis with synthetic and biological disease-modifying antirheumatic drugs: 2013 update, Ann Rheum Dis, 2014; 73 (3) : 492-509] by binding to soluble and membrane-bound IL-6 receptors (sIL-6R and mIL-6R) and inhibiting sIL-6R and mIL-6R mediated signaling.

[0003] Pharmaceutical antibodies are typically administered by injection. Subcutaneous injections allow faster administration as compared with intravenous injections. However, for antibodies that require a high dosage (e.g., over 100 mg per dose) , the antibody concentration in a subcutaneous formulation needs to be high due to the limited volume that can be administered by each subcutaneous injection, which presents formulation challenges. For example, due to high concentration, antibodies tend to aggregate which leads to reduced stability and shorter self-life. High concentration also increases the viscosity of the formulation which can make manufacturing and injection through a needle difficult. To increase shelf-life, formulations can be prepared as powders by the lyophilization. However, lyophilized powder requires reconstitution in water, making administration more complicated. Therefore, there is a need for high concentration antibody liquid formulations having long term stability and suitable for subcutaneous injection that do not require reconstitution.SUMMARY

[0004] Various non-limiting aspects and embodiments of the invention are described below. In one aspect, the present disclosure provides an antibody formulation comprising: (1) 120-300 mg / mL of humanized anti-IL-6 receptor antibody; (2) a buffer system comprising 4-30 mM histidine salt, or 5-40 mM sodium acetate; (3) 0.1-1.0 mg / mL of a surfactant; (4) 5-250 mM of a stabilizer, wherein the stabilizer is selected from arginine hydrochloride, sucrose, proline, lysine hydrochloride, methionine, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) , sulfobutylether-β-cyclodextrin or combinations thereof; (5) water for injection; a pH of the antibody formulation being 5.0-7.0. In some embodiments, the stabilizer comprises proline and methionine or lysine and methionine.

[0005] In some embodiments, the concentration of the humanized anti-IL-6 receptor antibody is 160-200 mg / mL. In some embodiments, the concentration of the humanized anti-IL-6 receptor antibody is 170-190 mg / mL. In some embodiments, the concentration of the humanized anti-IL-6 receptor antibody is about 180 mg / mL.

[0006] In some embodiments, the pH of the antibody formulation is 5.0-7.0. In some embodiments, the pH of the antibody formulation is 5.5-6.5. In some embodiments, the pH of the antibody formulation is 5.6-6.4.

[0007] In some embodiments, the antibody is tocilizumab. In some embodiments, the antibody comprises two heavy chains and two light chains, wherein the heavy chain comprises an amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1, and the light chain comprises an amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 2. In some embodiments, the antibody is BAT1806 or BIIB800.

[0008] In some embodiments, the antibody formulation has a viscosity of from 0 to 20 cP. In some embodiments, the antibody formulation has a viscosity of from 5 to 15 cP. In some embodiments, the antibody formulation has a viscosity of from 9 to 11 cP.

[0009] In some embodiments, the stabilizer is selected from 70-200 mM arginine hydrochloride; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride and 10-30 mg / mL sucrose; a combination of 70-250 mM of proline and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-250 mM lysine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride, 5-50 mM of methionine and 70-200 mM of proline; or a combination of 5-100 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin and 5-50 mM of methionine, or a combination of 70-250  mM of proline and 0.01-0.1 mM of EDTA, or a combination of 70-200 mM of arginine hydrochloride and 0.01-0.1 mM of EDTA. In some embodiments, the stabilizer is a combination of 70-250 mM of proline and 5-50 mM of methionine or a combination of 70-250 mM lysine hydrochloride and 5-50 mM of methionine.

[0010] In some embodiments, the surfactant is polysorbate 80. In some embodiments, the surfactant is 0.1-0.7 mg / mL polysorbate 80.

[0011] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0012] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0013] (2) 10-30 mM sodium acetate buffer;

[0014] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0015] (4) 80-120 mM arginine hydrochloride;

[0016] (5) 15-25 mg / mL sucrose;

[0017] (6) water for injection;

[0018] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0019] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0020] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0021] (2) 10-30 mM sodium acetate buffer;

[0022] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0023] (4) 80-100 mM arginine hydrochloride;

[0024] (5) water for injection;

[0025] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0026] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0027] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0028] (2) 10-30 mM sodium acetate buffer;

[0029] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0030] (4) 110-130 mM arginine hydrochloride;

[0031] (5) 5-25 mM of methionine;

[0032] (6) water for injection;

[0033] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0034] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0035] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0036] (2) 5-30 mM histidine salt buffer;

[0037] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0038] (4) 20-60 mM arginine hydrochloride;

[0039] (5) 70-200 mM of proline;

[0040] (6) 5-15 mM of methionine;

[0041] (7) water for injection;

[0042] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0043] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0044] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0045] (2) 5-30 mM histidine salt buffer;

[0046] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0047] (4) 70-130 mM lysine hydrochloride;

[0048] (5) 25-35 mM of methionine;

[0049] (6) water for injection;

[0050] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0051] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0052] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0053] (2) 5-30 mM histidine salt buffer;

[0054] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0055] (4) 70-250 mM of proline;

[0056] (5) 5-30 mM of methionine;

[0057] (6) water for injection;

[0058] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0059] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0060] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0061] (2) 5-30 mM histidine salt buffer;

[0062] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0063] (4) 5-100 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin

[0064] (5) 5-50 mM of methionine;

[0065] (6) water for injection;

[0066] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0067] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0068] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0069] (2) 10-40 mM sodium acetate buffer;

[0070] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0071] (4) 70-250 mM proline;

[0072] (5) 10-30 mM of methionine;

[0073] (6) water for injection;

[0074] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0075] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0076] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0077] (2) 10-40 mM sodium acetate buffer;

[0078] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0079] (4) 70-250 mM proline;

[0080] (5) 0.01-0.1 mM of EDTA;

[0081] (6) water for injection;

[0082] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0083] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0084] (1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0085] (2) 10-40 mM sodium acetate buffer;

[0086] (3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;

[0087] (4) 70-150 mM arginine hydrochloride;

[0088] (5) 0.01-0.1 mM of EDTA;

[0089] (6) water for injection;

[0090] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0091] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0092] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0093] (2) about 10 mM sodium acetate buffer;

[0094] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0095] (4) about 90 mM arginine hydrochloride;

[0096] (5) about 20 mg / mL sucrose;

[0097] (6) water for injection;

[0098] with a pH of 5.6-6.4.

[0099] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0100] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0101] (2) about 15 mM sodium acetate buffer;

[0102] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0103] (4) about 90 mM arginine hydrochloride;

[0104] (5) about 20 mg / mL sucrose;

[0105] (6) water for injection;

[0106] with a pH of 5.6-6.4.

[0107] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0108] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0109] (2) about 10 mM sodium acetate buffer;

[0110] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0111] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0112] (5) water for injection;

[0113] with a pH of 5.6-6.4.

[0114] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0115] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0116] (2) about 20 mM sodium acetate buffer;

[0117] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0118] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0119] (5) water for injection;

[0120] with a pH of 5.6-6.4.

[0121] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0122] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0123] (2) about 10 mM sodium acetate buffer;

[0124] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0125] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0126] (5) about 8 mM of methionine;

[0127] (6) water for injection;

[0128] with a pH of 5.6-6.4.

[0129] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0130] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0131] (2) about 20 mM sodium acetate buffer;

[0132] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0133] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0134] (5) about 8 mM of methionine;

[0135] (6) water for injection;

[0136] with a pH of 5.6-6.4.

[0137] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0138] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0139] (2) about 20 mM histidine salt buffer;

[0140] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0141] (4) about 40 mM arginine hydrochloride;

[0142] (5) about 120 mM of proline;

[0143] (6) about 8 mM of methionine;

[0144] (7) water for injection;

[0145] with a pH of 5.6-6.4.

[0146] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0147] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0148] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0149] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0150] (4) about 40 mM arginine hydrochloride;

[0151] (5) about 120 mM of proline;

[0152] (6) about 8 mM of methionine;

[0153] (7) water for injection;

[0154] with a pH of 5.6-6.4.

[0155] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0156] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0157] (2) about 20 mM histidine salt buffer;

[0158] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0159] (4) about 180 mM of proline;

[0160] (5) about 20 mM of methionine;

[0161] (6) water for injection;

[0162] with a pH of 5.6-6.4.

[0163] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0164] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0165] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0166] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0167] (4) about 180 mM of proline;

[0168] (5) about 20 mM of methionine;

[0169] (6) water for injection;

[0170] with a pH of 5.6-6.4.

[0171] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0172] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0173] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0174] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0175] (4) about 200 mM of proline;

[0176] (5) about 20 mM of methionine;

[0177] (6) water for injection;

[0178] with a pH of 5.6-6.4.

[0179] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0180] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0181] (2) about 20 mM histidine salt buffer;

[0182] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0183] (4) about 95 mM lysine hydrochloride;

[0184] (5) about 30 mM of methionine;

[0185] (6) water for injection;

[0186] with a pH of 5.6-6.4.

[0187] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0188] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0189] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0190] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0191] (4) about 95 mM lysine hydrochloride;

[0192] (5) about 30 mM of methionine;

[0193] (6) water for injection;

[0194] with a pH of 5.6-6.4.

[0195] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0196] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0197] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0198] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0199] (4) about 100 mM lysine hydrochloride;

[0200] (5) about 30 mM of methionine;

[0201] (6) water for injection;

[0202] with a pH of 5.6-6.4.

[0203] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0204] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0205] (2) about 20 mM histidine salt buffer;

[0206] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0207] (4) about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;

[0208] (5) about 8 mM of methionine;

[0209] (6) water for injection;

[0210] with a pH of 5.6-6.4.

[0211] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0212] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0213] (2) about 10 mM histidine salt buffer;

[0214] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0215] (4) about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;

[0216] (5) about 8 mM of methionine;

[0217] (6) water for injection;

[0218] with a pH of 5.6-6.4.

[0219] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0220] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0221] (2) about 20 mM sodium acetate buffer;

[0222] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0223] (4) about 180 mM proline;

[0224] (5) about 20 mM of methionine;

[0225] (6) water for injection;

[0226] with a pH of 5.6-6.4.

[0227] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0228] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0229] (2) about 25 mM sodium acetate buffer;

[0230] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0231] (4) about 180 mM proline;

[0232] (5) about 20 mM of methionine;

[0233] (6) water for injection;

[0234] with a pH of 5.6-6.4.

[0235] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0236] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0237] (2) about 20 mM sodium acetate buffer;

[0238] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0239] (4) about 200 mM proline;

[0240] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0241] (6) water for injection;

[0242] with a pH of 5.6-6.4.

[0243] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0244] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0245] (2) about 30 mM sodium acetate buffer;

[0246] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0247] (4) about 200 mM proline;

[0248] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0249] (6) water for injection;

[0250] with a pH of 5.6-6.4.

[0251] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0252] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0253] (2) about 20 mM sodium acetate buffer;

[0254] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0255] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0256] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0257] (6) water for injection;

[0258] with a pH of 5.6-6.4.

[0259] In some embodiments, the antibody formulation comprises:

[0260] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0261] (2) about 25 mM sodium acetate buffer;

[0262] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0263] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0264] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0265] (6) water for injection;

[0266] with a pH of 5.6-6.4.

[0267] In some embodiments, the antibody formulation is a subcutaneous injection formulation.

[0268] In some embodiments, the antibody formulation remains stable for at least 3 months at room temperature.

[0269] In some embodiments, the antibody formulation remains stable for at least 2 years when stored at 2-8℃.

[0270] In some embodiments, the antibody formulation is used for treating IL-6 related diseases.

[0271] In another aspect, the present disclosure provides a method of treating an IL-6 related disease, the method comprising administering any of the antibody formulations described in the present disclosure.

[0272] In some embodiments, the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, giant lymph node hyperplasia, cytokine storms caused by immunotherapy, cytokine release syndrome, adult Still’s disease, recurrent polychondritis, type II diabetes, ankylosing spondylitis, thyroid-associated ophthalmopathy, cardiovascular disease caused by rheumatoid arthritis, polymyalgia rheumatica, acute graft-versus-host disease, non-ST-segment elevation  myocardial infarction, systemic lupus erythematosus, schizophrenia, uveitis, ovarian cancer, anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis, neuromyelitis optica, chronic glomerulonephritis, and colorectal cancer.

[0273] In some embodiments, the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, cytokine release syndrome, and giant lymph node hyperplasia.

[0274] In another aspect, the present disclosure provides a method to prepare the antibody formulations disclosed herein, comprising the steps of:

[0275] (1) dissolving the buffer, stabilizer and surfactant in water for injection to form a solution;

[0276] (2) adding surfactant into an antibody solution; and

[0277] (3) mixing the solution prepared in the step (1) with the antibody surfactant solution prepared in the step (2) to provide the formulation.

[0278] In another aspect, the present disclosure provides a kit comprising any of the antibody formulations disclosed in the present disclosure contained in a container.

[0279] In some embodiments, the container is a single-use container or a multi-use container. In some embodiments, the single use-container or multi-use container is a vial, ampoule, syringe, or autoinjector. In some embodiments, the container is a pre-fillable syringe (PFS) or autoinjector.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0280] Figure 1 depicts SEC-HPLC monomer purity results under 40℃.

[0281] Figure 2 depicts aggregate contents under 40℃ results.

[0282] Figure 3 depicts fragment contents under 40℃ results.

[0283] Figure 4 depicts IEC-HPLC main peak contents under 40℃ results.

[0284] Figure 5 depicts acidic peak contents under 40℃ results.

[0285] Figure 6 depicts aggregate contents under 25℃ accelerated conditions results.

[0286] Figure 7 depicts IEC-HPLC main peak contents under 25℃ accelerated conditions results.

[0287] Figure 8 depicts acidic peak contents under 25℃ accelerated conditions results.

[0288] Figure 9 depicts SEC-HPLC monomer purity under illumination conditions results.

[0289] Figure 10 depicts CE-SDS (NR) main peak contents under illumination conditions results.DETAILED DESCRIPTION

[0290] The present invention provides antibody formulations by selecting buffer solutions and stabilizers, to enhance the stability of the high concentration humanized anti-interleukin 6 receptor antibody formulation, and prevent monoclonal antibody aggregation, degradation and acidic isomer increase, while having low turbidity and viscosity acceptable for subcutaneous injection.

[0291] The term “about” when used before a numerical value indicates that the value may vary within a reasonable range, such as within ±10%, ±5%or ±1%of the stated value, and include the stated value.

[0292] As used herein, the term “comprising” is intended to mean that the compositions or methods, etc., include the recited elements, but do not exclude others. “Consisting essentially of” when used to define compositions or methods, shall mean excluding other elements of any essential significance to the combination for the intended use, but not excluding elements that do not materially affect the characteristic (s) of the compositions or methods. “Consisting of” shall mean excluding elements not specifically recited. Embodiments defined by each of these transition terms are within the scope of this invention.

[0293] Terms as “stability” and “stable” used herein refer to the situation that in a liquid formulation comprising an antibody, the antibody does not, or only rarely, aggregate, degrade, or fragment under given production, formulation, transportation, and / or storage conditions. “Stable” formulations maintain biological activity under given production, formulation, transportation and / or storage conditions. The stability of the antibody, can be assessed by measuring the degree of aggregation, degradation or fragmentation and the like of the formulation by techniques such as SEC-HPLC, IEC-HPLC, CE-SDS, etc. In some embodiments, the main antibody peak in a stable formulation does not decrease more than 5 %after storing at room temperature for at least 3 months.

[0294] It should be noted that in the present invention, where a buffer or buffer system is included in a formulation, it is also meant that the buffer is included in the formulation and the buffer system is formed in the formulation by the buffer. A buffer is typically a combination of a  weak acid or a weak base and its salt. For example, a histidine buffer (also called a histidine salt buffer) is typically formed by histidine and one or more of its salts, such as histidine hydrochloride, an acetate buffer is typically formed by acetic acid and one or more of its salts, such as sodium acetate. Unless otherwise specified, regardless of whether the buffer is in the form of acid / base and / or salt, the molar concentration of the buffer includes both the free acid / base and the salts.

[0295] In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is between about 120 and about 300 mg / mL. In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is about 130 to about 280 mg / mL. In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is about 140 to about 250 mg / mL. In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is about 160 to about 200 mg / mL. In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is about 170 to about 190 mg / mL. In some embodiments, the concentration of monoclonal antibody in the antibody formulation is about 180 mg / mL.

[0296] In some embodiments, a formulation comprises a humanized PM-1 antibody described in US2005 / 0142635, and optionally one or more of its variants, such as those described in US2016 / 0152714. In some embodiments, the humanized anti-interleukin 6 receptor antibody is tocilizumab ( or or a biosimilar thereof, such as BAT1806 (BIIB800) ) . In some embodiments, tocilizumab comprises an antibody comprising a heavy chain shown in SEQ ID NO. 1 and a light chain shown in SEQ ID NO. 2. SEQ ID NO. 1 is shown in Table 1 and SEQ ID NO. 2 is shown in Table 2. In some embodiments, tocilizumab comprises an antibody comprising two heavy chains, each shown in SEQ ID NO. 1 and two light chains, each shown in SEQ ID NO. 2. In some embodiments, tocilizumab further comprises one or more variants of the antibody comprising a heavy chain shown in SEQ ID NO. 1 and a light chain shown in SEQ ID NO. 2, such as those described in US2016 / 0152714. In some embodiments, the humanized anti-interleukin 6 receptor antibody is expressed in CHO cells by genetic engineering methods and purified by a series of standard chromatographic steps. After the antibody is prepared, a pharmaceutical formulation is prepared. Each of US2005 / 0142635 and US2016 / 0152714 is hereby incorporated by reference in its entirety.

[0297] Table 1.

[0298] Table 2.

[0299] In some embodiments, the buffer system is selected from histidine (His) buffer, citrate (CB) buffer, sodium acetate (NaAc) buffer, and succinic acid (Sua) buffer. In some embodiments, the buffer system is histidine buffer. In some embodiments, the buffer system is sodium acetate buffer.

[0300] In some embodiments, the stabilizer comprises one or more (e.g., 2 or 3) of arginine, proline, lysine hydrochloride, glycine, histidine, sucrose, proline, methionine, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) or glutamic acid, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises one or more (e.g., 2 or 3) of arginine hydrochloride, proline, lysine hydrochloride, glycine, histidine, sucrose, proline, methionine, EDTA or sodium glutamate. The addition of the stabilizers further decreases the viscosity of the formulation. In some embodiments, the stabilizer is arginine hydrochloride. In some embodiments, the stabilizer comprises one or more of arginine, proline, or lysine and methionine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises proline and methionine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises lysine and methionine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises arginine, proline and methionine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises proline and EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises arginine and EDTA, or a salt thereof.

[0301] In some embodiments, the surfactant is polysorbate 80.

[0302] Preferred formulations were selected by selecting buffers and viscosity reducing agents.

[0303] The present invention provides formulations comprising a high concentration antibody, which may comprise about 120 to about 300 mg / mL antibody, about 4 to about 30 mM histidine salt buffer or about 5 to about 40 mM sodium acetate buffer, about 0.1 to about 1 mg / mL polysorbate 80, and a stabilizer selected from the group of arginine hydrochloride, sucrose, proline, lysine hydrochloride, methionine, sulfobutylether-β-cyclodextrin, EDTA, or combinations thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises methionine and one or more of arginine, proline, or lysine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises methionine and proline, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises methionine and lysine, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises methionine, arginine and proline, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises proline and EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises arginine and EDTA, or a salt thereof.

[0304] In some embodiments, the stabilizer is selected from 70-200 mM arginine hydrochloride ; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride and 10-30 mg / mL sucrose; a combination of 70-250 mM of proline and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-250 mM lysine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride, 5-50 mM of methionine and 70-200 mM of proline; or a combination of 5-100 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin and 5-50 mM of methionine. In some embodiments, the stabilizer comprises between about 0.01 mM and about 0.1 mM of EDTA. In some embodiments, the stabilizer comprises between about 0.02 mM and about 0.07 mM of EDTA. In some embodiments, the stabilizer comprises about 0.02 mM, about 0.03 mM, about 0.04 mM, about 0.05 mM, about 0.06 mM, about 0.07 mM, about 0.08 mM, about 0.09 mM, or about 0.1 mM of EDTA. In some embodiments, the stabilizer comprises 70-250 mM of proline and 0.01-0.1 mM of EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises 150-250 mM of proline and 0.02-0.07 mM of EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises about 200 mM of proline and about 0.05 mM of EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises 70-200 mM of arginine and 0.01-0.1 mM of EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises 100-150 mM of arginine and 0.02- 0.07 mM of EDTA, or a salt thereof. In some embodiments, the stabilizer comprises about 120 mM of arginine and about 0.05 mM of EDTA, or a salt thereof.

[0305] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0306] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0307] (2) 10-25 mM sodium acetate buffer;

[0308] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0309] (4) about 90 mM arginine hydrochloride;

[0310] (5) about 20 mg / mL sucrose;

[0311] (6) water for injection;

[0312] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0313] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0314] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0315] (2) 10-25 mM sodium acetate buffer;

[0316] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0317] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0318] (5) water for injection;

[0319] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0320] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0321] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0322] (2) 10-25 mM sodium acetate buffer;

[0323] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0324] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0325] (5) about 8 mM of methionine;

[0326] (6) water for injection;

[0327] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0328] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0329] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0330] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0331] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0332] (4) about 40 mM arginine hydrochloride;

[0333] (5) about 120 mM of proline;

[0334] (6) about 8 mM of methionine;

[0335] (7) water for injection;

[0336] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0337] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0338] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0339] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0340] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0341] (4) about 180 mM of proline;

[0342] (5) about 20 mM of methionine;

[0343] (6) water for injection;

[0344] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0345] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0346] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0347] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0348] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0349] (4) about 200 mM of proline;

[0350] (5) about 20 mM of methionine;

[0351] (6) water for injection;

[0352] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0353] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0354] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0355] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0356] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0357] (4) about 95 mM lysine hydrochloride;

[0358] (5) about 30 mM of methionine;

[0359] (6) water for injection;

[0360] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0361] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0362] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0363] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0364] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0365] (4) about 100 mM lysine hydrochloride;

[0366] (5) about 30 mM of methionine;

[0367] (6) water for injection;

[0368] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0369] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0370] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0371] (2) 5-20 mM histidine salt buffer;

[0372] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0373] (4) about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;

[0374] (5) about 8 mM of methionine;

[0375] (6) water for injection;

[0376] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0377] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0378] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0379] (2) 20-35 mM sodium acetate buffer;

[0380] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0381] (4) about 180 mM proline;

[0382] (5) about 20 mM of methionine;

[0383] (6) water for injection;

[0384] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0385] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0386] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0387] (2) 20-35 mM sodium acetate buffer;

[0388] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0389] (4) about 200 mM proline;

[0390] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0391] (6) water for injection;

[0392] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0393] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0394] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0395] (2) 20-35 mM sodium acetate buffer;

[0396] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0397] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0398] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0399] (6) water for injection;

[0400] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0401] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0402] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0403] (2) 15-20 mM sodium acetate buffer;

[0404] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0405] (4) about 90 mM arginine hydrochloride;

[0406] (5) about 20 mg / mL sucrose;

[0407] (6) water for injection;

[0408] with a pH of 5.6-6.4.

[0409] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0410] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0411] (2) 15-20 mM sodium acetate buffer;

[0412] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0413] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0414] (5) water for injection;

[0415] with a pH of 5.6-6.4.

[0416] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0417] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0418] (2) 15-20 mM sodium acetate buffer;

[0419] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0420] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0421] (5) about 8 mM of methionine;

[0422] (6) water for injection;

[0423] with a pH of 5.6-6.4.

[0424] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0425] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0426] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0427] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0428] (4) about 40 mM arginine hydrochloride;

[0429] (5) about 120 mM of proline;

[0430] (6) about 8 mM of methionine;

[0431] (7) water for injection;

[0432] with a pH of 5.6-6.4.

[0433] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0434] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0435] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0436] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0437] (4) about 180 mM of proline;

[0438] (5) about 20 mM of methionine;

[0439] (6) water for injection;

[0440] with a pH of 5.6-6.4.

[0441] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0442] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0443] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0444] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0445] (4) about 200 mM of proline;

[0446] (5) about 20 mM of methionine;

[0447] (6) water for injection;

[0448] with a pH of 5.6-6.4.

[0449] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0450] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0451] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0452] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0453] (4) about 95 mM lysine hydrochloride;

[0454] (5) about 30 mM of methionine;

[0455] (6) water for injection;

[0456] with a pH of 5.6-6.4.

[0457] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0458] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0459] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0460] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0461] (4) about 100 mM lysine hydrochloride;

[0462] (5) about 30 mM of methionine;

[0463] (6) water for injection;

[0464] with a pH of 5.6-6.4.

[0465] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0466] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0467] (2) 9-15 mM histidine salt buffer;

[0468] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0469] (4) about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;

[0470] (5) about 8 mM of methionine;

[0471] (6) water for injection;

[0472] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0473] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0474] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0475] (2) 23-34 mM sodium acetate buffer;

[0476] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0477] (4) about 180 mM proline;

[0478] (5) about 20 mM of methionine;

[0479] (6) water for injection;

[0480] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0481] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0482] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0483] (2) 23-34 mM sodium acetate buffer;

[0484] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0485] (4) about 200 mM proline;

[0486] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0487] (6) water for injection;

[0488] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0489] In some embodiments, the antibody formulation comprises, consists essentially of, or consists of:

[0490] (1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;

[0491] (2) 23-34 mM sodium acetate buffer;

[0492] (3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;

[0493] (4) about 120 mM arginine hydrochloride;

[0494] (5) about 0.05mM of EDTA;

[0495] (6) water for injection;

[0496] with a pH of 5.0-7.0, 5.5-6.5, or 5.6-6.4.

[0497] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose with a pH of 5.6-6.4.

[0498] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 15 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose with a pH of 5.6-6.4.

[0499] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride with a pH of 5.6-6.4.

[0500] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride with a pH of 5.6-6.4.

[0501] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, with a pH of 5.6-6.4.

[0502] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, with a pH of 5.6-6.4.

[0503] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0504] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0505] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0506] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0507] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10-20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 200 mM of proline, about 20 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0508] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, with a pH of 5.6-6.4.

[0509] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, with a pH of 5.6-6.4.

[0510] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10-20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 100 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, with a pH of 5.6-6.4.

[0511] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0512] In some embodiments, the formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine with a pH of 5.6-6.4.

[0513] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0514] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0515] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0516] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 30 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0517] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0518] In some embodiments, the antibody formulation comprises about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0519] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0520] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 15 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0521] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0522] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0523] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0524] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL  polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0525] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0526] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0527] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0528] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0529] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 200 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0530] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 200 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0531] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0532] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0533] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 100 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0534] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 100 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0535] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0536] In some embodiments, the formulation consists essentially of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0537] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0538] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0539] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0540] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 30 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0541] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0542] In some embodiments, the antibody formulation consists essentially of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0543] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0544] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 15 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 90 mM arginine hydrochloride, about 20 mg / mL sucrose, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0545] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0546] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0547] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0548] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM sodium acetate buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80,  about 120 mM arginine hydrochloride, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0549] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0550] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 40 mM arginine hydrochloride, about 120 mM of proline, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0551] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0552] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 180 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0553] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 200 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0554] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 200 mM of proline, about 20 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0555] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0556] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 95 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0557] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 100 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0558] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 100 mM lysine hydrochloride, about 30 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0559] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 20 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0560] In some embodiments, the formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody, about 10 mM histidine salt buffer, about 0.5 mg / mL polysorbate 80, about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin, about 8 mM of methionine, water for injection, with a pH of 5.6-6.4.

[0561] In some embodiments, the antibody formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0562] In some embodiments, the antibody formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 180 mM proline; about 20 mM of methionine; with a pH of 5.6-6.4.

[0563] In some embodiments, the antibody formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0564] In some embodiments, the antibody formulation consists of: about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 30 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 200 mM proline; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0565] In some embodiments, the antibody formulation consists of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 20 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL  polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0566] In some embodiments, the antibody formulation consists of about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody; about 25 mM sodium acetate buffer; about 0.5 mg / mL polysorbate 80; about 120 mM arginine hydrochloride; about 0.05mM of EDTA; with a pH of 5.6-6.4.

[0567] In some embodiments, the viscosity of the formulation is 8-18 cP. In some embodiments, the viscosity of the formulation is 8-13 cP. In some embodiments, the viscosity of the formulation is 9-11 cP. In some embodiments, the viscosity of the formulation is 9-10 cP.

[0568] In some embodiments, the formulation is Formulation 1. In some embodiments, the formulation is Formulation 2. In some embodiments, the formulation is Formulation 3. In some embodiments, the formulation is Formulation 4. In some embodiments, the formulation is Formulation 6. In some embodiments, the formulation is Formulation 7. In some embodiments, the formulation is Formulation 8. In some embodiments, the formulation is Formulation 9. In some embodiments, the formulation is Formulation 10. In some embodiments, the formulation is Formulation 11.

[0569] According to the evaluation of the stability of the above formulations, antibody formulations of the present invention can remain stable for at least 3 months at room temperature. The Formulations 1-6 and Formulations 9-11 can remain stable for at least 2 years when stored at 2-8℃. For example, it is surprisingly found that combination of histidine and proline or lysine significantly increase the stability of polysorbate 80 (Tween 80) in the formulation.

[0570] Liquid formulations containing the monoclonal antibodies provided by the invention provide formulations capable of stably storing the active ingredient.

[0571] Table 3 shows ingredients of Formulations 1-11:

[0572] Table 3. Formulation Ingredient List

[0573] The technical solution of the present invention is further illustrated by the following specific examples, which are not intended to limit the scope of the present invention. Other non-essential modifications and adaptations of the invention according to the inventive concept are within the scope of the invention.

[0574] In some embodiments, formulations of the present disclosure can be administered with a Pre-Fillable Syringe (PFS) , such as BD HypakTM PFS, BD NeopakTM PFS or Wego PFS, Sterifill SCFTM, or an autoinjector, such as YpsoMateTM autoinjector, SelfDoseTM Patient-Controlled Injector, BD PhysiojectTM disposable autoinjector and  II Syringe Injector. It is surprisingly found that combination of histidine and proline or lysine led to acceptable viscosity of the formulation in a PFS.

[0575] It should be noted that in the present invention, “mass to volume ratio” refers to the ratio of the mass of the ingredients to the volume of the formulation.

[0576] EXAMPLES

[0577] The following examples are provided to further describe some of the embodiments disclosed herein. The examples are intended to illustrate, not to limit, the disclosed embodiments.

[0578] Antibody Sample

[0579] The antibody used in the examples below is tocilizumab. Tocilizumab is a humanized anti-interleukin 6 receptor antibody prepared through antibody preparation technology. A CHO cell line capable of stably expressing tocilizumab was constructed and cultured in a cell culture medium. The supernatant of the cell culture was collected and purified to obtain tocilizumab antibody solution.

[0580] Example 1. Formulation Preparation

[0581] Formulation Preparation

[0582] The formulations shown in Table 4 were prepared according to known methods. Briefly a high concentration antibody solution having a desired buffer can be prepared by buffer exchange into the desired buffer followed by concentration through tangential filtration. The desired excipients are added to the high concentration antibody solution. If needed, the resulting solution can be diluted using the appropriate buffer to the final formulation having the desired antibody concentration. The formulation is filtered using 0.22 μm filters and filled into a container (e.g. Eppendorf tubes or 1 ml PFS) .

[0583] Table 4. Formulation Information

[0584] Note: PFS = pre-filled syringe; EP = Eppendorf tubes; TW80=Tween 80

[0585] Example 2. Analytic Methods

[0586] The following methods were used to analyze the formulations disclosed herein.

[0587] SEC-HPLC analysis method:

[0588] A sample of a formulation being tested was diluted with water to an antibody concentration of 5 mg / mL and tested by SEC-HPLC. The chromatographic column was TSK-GEL G3000SWXL 7.8×300 mM, 5 μm (TOSOH) . The mobile phase was 200 mM K3PO4 with 250 mM KCl (pH 7.0) . UV detection wavelength was set at 280nm, the column temperature was 30 ℃, the loading quantity of sample was 40 μL (200 μg protein) , and the flow was kept for 35 minutes at a rate of 0.5mL / min. Chromatography was recorded and after integration, the percentage of monomer and aggregate in the sample solution was calculated by area normalization method.

[0589] IEC-HPLC analysis method:

[0590] A sample of a formulation being tested was diluted with water to an antibody concentration of 5mg / mL and tested by IEC-HPLC. Chromatographic conditions: column, TSK-GEL CM- 4.6×100 mM, 7 μm (TOSOH) ; mobile phase, mobile phase A (20 mM ACES, pH 8.0) and mobile phase B (20 mM ACES+200 mM NaCl, pH 8.0) ; the loading quantity of sample was 50 μg; UV detection wavelength was 280 nm; gradient elution was performed according to the elution gradient given below for 45 minutes. Chromatography was recorded. And after integration, the percentage of the main peak, the acidic region and the basic region was respectively calculated using a peak area normalization method. (Chromatography was manually integrated, a base line was drawn at a place where the base line was relatively flat, the integration starting time and the integration ending time were about 8 minutes before and after the retention time of the main peak, vertical lines were drawn at two peak valleys around the main peak, the acidic region was before the main peak that was followed by the basic region (the main peak was  followed by basic peak 1, basic peak 2 and basic peak 3 in sequence) , and a vertical line was drawn at each peak valley of the basic region. )

[0591] Elution Gradients

[0592] Viscosity Determination:

[0593] Samples were returned to 25℃ normal temperature, and then measured it with a viscometer (Brookfield, DV2T) . About 1.2 to about 1.5mL of the sample were slowly injected into the cone (to avoid bubbles) , spread evenly, and then tested on the viscometer at a temperature of 25±2℃. The torque was between 40%-70%, and the rotation is about 7 to about 9 times for data recording.

[0594] Turbidity Determination:

[0595] Samples were returned to room temperature and an ultraviolet spectrophotometer (Eppendorf, BioPhotometer plus) was used for detection. The UV spectrophotometer was adjusted to 340nm, calibrated with water, and sample detection was performed only when the calibration result was 0.The disposable cuvette was rinsed with 300μl sample during the test, and then the 300μl sample was slowly poured into the disposable cuvette to avoid air bubbles during the process, and the cuvette was put into the UV spectrophotometer for data recording.

[0596] Example 3. Stability Studies

[0597] Formulation characteristics

[0598] The viscosity, turbidity, and osmotic pressure of Formulations 1-11 were determined. The turbidity and viscosity of the formulations were determined according to the methods of Example 2. The results are shown in Table 5.

[0599] Table 5. Viscosity, turbidity and osmolarity data

[0600] Stability Studies under High Temperature Conditions

[0601] Formulations 1-8 were subjected to high temperature studies to investigate the stability of the formulations under high temperature (40 ℃ for up to 4 weeks) .

[0602] The monomer purity (SEC-HPLC, abbreviated SEC) and charge isomer (IEC-HPLC, abbreviated IEC) of the Formulations 1-8 at a high temperature of 40 ℃ for 4 weeks (W) or at the condition of light (4500 ± 500 Lux) for 10 days (d) were investigated.

[0603] The results under high temperature conditions are shown in Table 6.

[0604] Table 6. Test Results under High Temperature Conditions (40 ℃)

[0605] According to the data in Table 6 and Figures 1-3, after 4 weeks at 40℃, the SEC-HPLC monomer purity of Formulation 8 decreased rapidly, and the remaining 10 formulations had little difference; aggregates and fragments of Formulation 1 and Formulation 8 increased faster, and the rest of the formulations are not very different.

[0606] According to the data in Table 6 and Figures 4-5, after 4 weeks at 40℃, the IEC-HPLC main peak content of Formulations 1, 2, 6 and 8 decreased slightly faster, while the acid peak of Formulations 1, 2, 6 and 8 increased faster, the IEC-HPLC quality of formulations 3-5 and 7 did not differ much.

[0607] Stability Studies under the Acceleration Conditions

[0608] Formulations 1-8 were placed in a biochemical incubator under the condition of (25±2) ℃ and sampled after preparation (0d) , and at the end of the 1st (1M) , 2nd (2M) , 3rd (3M) and 6th (6M) month respectively.

[0609] The results are shown in Table 7.

[0610] Table 7. Stability under the Acceleration Conditions

[0611] According to Table 7 and Fig. 6, after 6 months under 25℃ accelerated conditions, SEC-HPLC monomer purity of the 8 formulations did not differ much, the aggregate contents of Formulations 1, 4 and 8 increased faster.

[0612] According to Table 7 and Figures 7-8, after 6 months under 25℃ accelerated conditions, the IEC-HPLC main peak contents of Formulation 8 decreased faster, and the acid peak increased faster, and the other 7 formulations showed little difference. From the CE-SDS (NR) data, the 8 formulations showed little difference.

[0613] Stability Studies under Illumination Conditions

[0614] The stability of Formulations 1-8 under light test (4500 ± 500 Lux) for 10 days was investigated.

[0615] The results under illumination conditions are shown in Table 8.

[0616] Table 8. Test Results under Illumination Conditions

[0617] According to the data in Table 8 and Figures 9-10, all samples degraded to a certain extent after 10 days of illumination, and the formulations containing methionine had better antioxidant properties and better stability under illumination conditions.

[0618] Tween Content and Binding Studies under the High Temperature and Acceleration Conditions

[0619] Tween content and binding activity of Formulations 1-8 were tested under high temperature conditions and under 40℃ and 25℃ accelerated conditions.

[0620] The results are shown in Table 9.

[0621] Table 9. Tween content and binding activity data of different formulations under 40℃ and 25℃ accelerated conditions

[0622] Note: N / A=not tested

[0623] Based on the above data, the viscosity of Formulation 8 was relatively high, and the other 10 formulations had little difference, about 10 cP. Tween 80 in Formulations 2 and 3 showed little degradation while Tween 80 in Formulation 1, Formulation 4 and Formulation 9 degrades faster under high temperature conditions, and methionine in the formulations can inhibit the degradation of Tween 80 to a certain extent.

[0624] Example 4. Sliding Force and Stability Studies in Pre-Fillable Syringe (PFS)

[0625] The sliding force for Formulations 1-5 in PFS was evaluated. The results are shown in Table 10.

[0626] Table 10. Sliding force data

[0627] Stability Studies under High Temperature Conditions (PFS)

[0628] Formulations 1-5 and 9-11 in PFS were subjected to high temperature studies to investigate the stability of the formulations under high temperature (40 ℃ for up to 4 weeks) .

[0629] The results under high temperature conditions are shown in Table 11.

[0630] Table 11. PFS Test Results under High Temperature Conditions (40 ℃)

[0631] Based on the data in Table 11, the SEC-HPLC monomer purity of Formulation 1 decreased slightly faster, followed by Formulations 3 and 4, the monomer purity of Formulations  2 and 5 decreased slowly, and the aggregates and fragments of Formulation 1 increased slightly faster, and its stability is slightly worse than other formulations.

[0632] Based on the data in Table 11, after 4 weeks at 40℃, the IEC-HPLC main peak contents of Formulation 1 and Formulation 2 decreased slightly faster, followed by Formulation 3 and Formulation 4. The acid peak of Formulation 1 and Formulation 2 increased slightly faster, and their stability is slightly worse than other formulations, but the overall difference is not big. From the CE-SDS (NR) data analysis, there was little difference among the 8 formulations. The purify decrease after 4 weeks under 40℃ for Formulations 9-11 was slow, and Formulation 11 had slower aggregate increase than Formulations 9 and 10.

[0633] Stability Studies under the Acceleration Conditions (PFS)

[0634] Formulations 1-5 and 9-11 in PFS were placed in a biochemical incubator under the condition of (25±2) ℃ and sampled after preparation (0d) , and at the end of the 1st (1M) , 2nd (2M) , 3rd (3M) and 6th (6M) month respectively.

[0635] The results are shown in Table 12.

[0636] Table 12. Stability under the Acceleration Conditions (PFS)

[0637] Based on the data in Table 12, under accelerated conditions at 25℃, the SEC-HPLC monomer purity of Formulation 1 decreased slightly faster. Aggregates of Formulation 1 increased slightly faster, and stability is slightly worse than that of other formulations.

[0638] Based on the data in Table 12, the content of the main IEC-HPLC peaks of Formulation 1 and Formulation 2 decreased slightly faster, and the acid peak increased slightly faster, but the overall quality difference was not obvious. From the CE-SDS (NR) data analysis, there was little difference in the 8 formulations. Formulation 9-11 show similar stability under accelerated conditions at 25℃.

[0639] Stability Studies under Illumination Conditions (PFS)

[0640] Formulations 1-5 and 9-11 in PFS were subjected to illumination studies to investigate the stability of the formulations in PFS under light test (4500 ± 500 Lux) for 10 days.

[0641] The results under illumination conditions are shown in Table 13.

[0642] Table 13. PFS Test Results under Illumination Conditions

[0643] Tween Content and Binding Studies under the High Temperature and Acceleration Conditions (PFS)

[0644] Tween content and binding activity of Formulations 1-5 and 9-11 in PFS were tested under high temperature conditions and under 40℃ and 25℃ accelerated conditions.

[0645] Tween content results are shown in Table 14. Binding activity data are shown in Table 15.

[0646] Table 14. Tween content data under 40℃ and 25℃ accelerated conditions (PFS)

[0647] Table 15. Binding activity data under light and under 40℃ or 25℃ accelerated conditions (PFS)

[0648] From the analysis of stability data under high temperature and accelerated conditions, the stability of Formulation 1 in PFS was slightly worse than formulations 2-5. Under high temperature and accelerated conditions, the degradation rate of Tween 80 in Formulation 2 was slower. Based on binding activity data, the protein-antibody and antigen-binding capacity of the eight formulations did not change under the conditions of high temperature, acceleration and light stress. The number of particles was within the acceptable range, without much difference between the formulations 1-5. Also, the Formulations 1-6 and Formulations 9-11 can remain stable for at least 2 years when stored at 2-8℃.

Claims

1.An antibody formulation comprising:(1) 120-300 mg / mL of humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) a buffer system comprising 4-30 mM histidine salt, or 5-40 mM sodium acetate;(3) 0.1-1.0 mg / mL of a surfactant;(4) 5-250 mM of a stabilizer, wherein the stabilizer is selected from arginine hydrochloride, sucrose, proline, lysine hydrochloride, methionine, EDTA, sulfobutylether-β-cyclodextrin or combinations thereof;(5) water for injection;a pH of the antibody formulation being 5.0-7.0.2.The antibody formulation according to claim 1, wherein the concentration of the humanized anti-IL-6 receptor antibody is 160-200 mg / mL.3.The antibody formulation according to claim 1, wherein the concentration of the humanized anti-IL-6 receptor antibody is about 180 mg / mL.4.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 3, wherein the pH of the antibody formulation is 5.5-6.5.5.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 3, wherein the pH of the antibody formulation is 5.6-6.4.6.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 5 having a viscosity of from 0 to 20 cP.7.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 6, having a viscosity of from 5 to 15 cP.8.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 7, wherein the stabilizer is selected from 70-200 mM arginine hydrochloride; a combination of 70-200 mM arginine  hydrochloride and 10-30 mg / mL sucrose; a combination of 70-250 mM of proline and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-250 mM lysine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride and 5-50 mM of methionine; a combination of 70-200 mM arginine hydrochloride, 5-50 mM of methionine and 70-200 mM of proline; or a combination of 5-100 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin and 5-50 mM of methionine; or a combination of 70-250 mM of proline and 0.01-0.1 mM of EDTA; or a combination of 70-200 mM of arginine hydrochloride and 0.01-0.1 mM of EDTA.9.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 8, wherein the surfactant is polysorbate 80.10.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 9, wherein the surfactant is 0.1-0.7 mg / mL polysorbate 80.11.An antibody formulation comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-30 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 80-120 mM arginine hydrochloride;(5) 15-25 mg / mL sucrose;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-30 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 80-100 mM arginine hydrochloride;(5) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-30 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 110-130 mM arginine hydrochloride;(5) 5-25 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 5-30 mM histidine salt buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 20-60 mM arginine hydrochloride;(5) 70-200 mM of proline;(6) 5-15 mM of methionine;(7) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-30 mM histidine salt buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 70-130 mM lysine hydrochloride;(5) 25-35 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 5-30 mM histidine salt buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 70-250 mM of proline;(5) 5-30 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 5-30 mM histidine salt buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 5-100 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;(5) 5-50 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-40 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 70-250 mM proline;(5) 10-30 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-40 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 70-250 mM proline;(5) 0.01-0.1 mM of EDTA;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) 160-200 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) 10-40 mM sodium acetate buffer;(3) 0.2-0.7 mg / mL polysorbate 80;(4) 70-150 mM arginine hydrochloride;(5) 0.01-0.1 mM of EDTA;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4.12.An antibody formulation comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 15 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 90 mM arginine hydrochloride;(5) about 20 mg / mL sucrose;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 20 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 120 mM arginine hydrochloride;(5) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 20 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 120 mM arginine hydrochloride;(5) about 8 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 40 mM arginine hydrochloride;(5) about 120 mM of proline;(6) about 8 mM of methionine;(7) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 180 mM of proline;(5) about 20 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 200 mM of proline;(5) about 20 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 95 mM lysine hydrochloride;(5) about 30 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 100 mM lysine hydrochloride;(5) about 30 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 10 mM histidine salt buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 55 mM sulfobutylether-β-cyclodextrin;(5) about 8 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 25 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 180 mM proline;(5) about 20 mM of methionine;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 30 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 200 mM proline;(5) about 0.05mM of EDTA;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4;or comprising:(1) about 180 mg / mL humanized anti-IL-6 receptor antibody;(2) about 25 mM sodium acetate buffer;(3) about 0.5 mg / mL polysorbate 80;(4) about 120 mM arginine hydrochloride;(5) about 0.05mM of EDTA;(6) water for injection;with a pH of 5.6-6.4.13.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 12, wherein the antibody is tocilizumab.14.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 13, wherein the antibody comprises two heavy chains and two light chains, wherein the heavy chain comprises an amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1, and the light chain comprises an amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 2.15.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 14, wherein the antibody is BAT1806 or BIIB800.16.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 15, characterized in that, the antibody formulation is a subcutaneous injection formulation.17.The antibody formulation according to any one of claims 1 to 16, characterized in that, the formulation remains stable for at least 3 months at room temperature.18.Use of the antibody formulation according to any one of claims 1 to 17 for treating IL-6 related diseases.19.The use of claim 18, wherein the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, giant lymph node hyperplasia, cytokine storms caused by immunotherapy, cytokine release syndrome, adult Still’s disease, recurrent polychondritis, type II diabetes, ankylosing spondylitis, thyroid-associated ophthalmopathy, cardiovascular disease caused by rheumatoid arthritis, polymyalgia rheumatica, acute graft-versus-host disease, non-ST-segment elevation  myocardial infarction, systemic lupus erythematosus, schizophrenia, uveitis, ovarian cancer, anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis, neuromyelitis optica, chronic glomerulonephritis, and colorectal cancer.20.The use of claim 19, wherein the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, cytokine release syndrome, and giant lymph node hyperplasia.21.A method to prepare the antibody formulation according to any one of claims 1 to 17, comprising the steps of:(1) dissolving the buffer, stabilizer and surfactant in water for injection to form a solution;(2) adding surfactant into an antibody solution; and(3) mixing the solution prepared in the step (1) with the antibody surfactant solution prepared in the step (2) to provide the formulation.22.A method of treating an IL-6 related disease, the method comprising administering the antibody formulation according to any one of claims 1 to 17.23.The method of claim 22, wherein the wherein the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, giant lymph node hyperplasia, cytokine storms caused by immunotherapy, cytokine release syndrome, adult Still’s disease, recurrent polychondritis, type II diabetes, ankylosing spondylitis, thyroid-associated ophthalmopathy, cardiovascular disease caused by rheumatoid arthritis, polymyalgia rheumatica, acute graft-versus-host disease, non-ST-segment elevation myocardial infarction, systemic lupus erythematosus, schizophrenia, uveitis, ovarian cancer, anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis, neuromyelitis optica, chronic glomerulonephritis, and colorectal cancer.24.The method of claim 23, wherein the IL-6 related disease is selected from rheumatoid arthritis, systemic juvenile idiopathic arthritis, polyarticular juvenile idiopathic arthritis, giant cell arteritis, cytokine release syndrome, and giant lymph node hyperplasia.25.A kit comprising the antibody formulation according to any one of claims 1 to 17 contained in a container.26.The kit of claim 25, wherein the container is a single-use container or a multi-use container.27.The kit of claim 25, wherein the container is a vial, ampoule, syringe, or autoinjector.28.The kit of claim 25, wherein the container is a pre-fillable syringe.

Images