Selective drug release from conjugates of biologically active compounds

Abstract

Provided is a compound of the formula (X), or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, and a conjugate containing the compound. S-D (X)

Description

SELECTIVE DRUG RELEASE FROM CONJUGATES OF BIOLOGICALLY ACTIVE COMPOUNDS

[0001] CROSS-REFERENCE TO RELATED APPLICATION

[0002] This application claims priority to PCT Application PCT / CN2023 / 130153 filed on November 07, 2023, and PCT Application PCT / CN2024 / 125035 filed on October 15, 2024, the contents of which are incorporated by reference in its entirety for all purposes.FIELD OF THE INVENTION

[0003] The present disclosure relates to a compound of formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, and a conjugate containing the compound.BACKGROUND OF THE INVENTION

[0004] The invention relates to Drug Conjugate compounds and compositions thereof, including Antibody Drug Conjugates (ADCs) and Ligand Drug Conjugates (LDCs) , that have improved selectivity for targeted cells in comparison to non-targeted cells. The invention also relates to Drugs and Drug-Linkers and compositions thereof, which are useful as part of the Drug Conjugate compounds.

[0005] Traditional ADCs and LDCs exhibit biological activity towards targeted cells, which display the targeted moiety that is recognized by the antibody or ligand moiety of the Conjugate, by binding to the targeted moiety and then entering into the cell by internalization of the bound Conjugate. Selectivity for the targeted cells over non-targeted cells is primarily achieved by a traditional ADCs and LDCs as a result of the targeted moiety being present in greater abundance on the targeted cells in comparison to non-targeted normal cells, which are cells not intended to be acted upon by the Conjugate. When conditional release of a conjugated compound, which is cytotoxic in free form, is to be affected by an intracellular protease internalization of bound Conjugate is followed by enzymatic processing of a peptide-based Linker Unit of the Conjugate. Reduction in premature release of the cytotoxic compound, which otherwise would cause undesired side effects, from traditional peptide-based ADCs and LDCs is accomplished by optimizing for selectivity for a specific lysosomal protease that is believed to be upregulated in cancer cells. As the protease responsible for intracellular processing of the traditional ADCs and LDCs is common to all cells, selectivity for the targeted cells is primarily due to the greater abundance of the targeted moiety on the cells intended to be acted upon by the Conjugate, notwithstanding the differing intracellular activity levels of the processing protease within targeted cancer cells and non-targeted normal cells. However, that approach does not take into consideration possible exposure differences of the released cytotoxic compound between tumor and normal tissue, which are presently exploited by the ADCs and LDCs of the present invention.

[0006] Thus, the peptide sequences of traditional ADCs and LDCs, which were designed to be selectively acted upon by an intracellular protease upregulated in cancer cells of the tumor tissue, are still capable of being acted upon by proteases confined within normal tissue. Such action can occur either within the microenvironment of the normal tissue or within cells of the normal tissue after immunologically specific or non-specific uptake into these cells, resulting in on-target or off-target toxicity, respectively. Those toxicities ear a more acute problem to be solved for targeted delivery of highly cytotoxic compounds. It is therefore believed a ADCs and LDCs with an improved peptide sequence that provides lower exposure to normal tissue in comparison to a traditional peptide-based ADCs  and LDCs, and hence reduces exposure to a cytotoxic compound released therefrom, while maintaining the efficacy provided by these traditional conjugates, would improve tolerability to therapy.

[0007] It is further believed that a ADCs and LDCs having an improved peptide sequence that is more prone to proteolysis by tumor tissue over proteolysis by normal tissue in comparison to proteolysis of a traditional peptide-based ADCs and LDCs by these tissues would also decrease exposure to the released cytotoxic compound, which would contribute to improving tolerability to therapy. Determining those proteolytic differences using tissue homogenates should capture those differences driven by the microenvironment of these tissues and / or subsequent to cellular internalization.SUMMARY OF THE INVENTION

[0008] To provide the solution to that problem in the art, disclosed herein are ADCs and LDCs having peptide-based Linker Units whose sequences result in more selective exposure of targeted cells of the tumor effect to the cytotoxic compound released from the Conjugate in comparison to exposure of cells of normal tissue to the free cytotoxin such that tolerability to the Conjugate is improved while retaining the efficacy of the traditional peptide-based Conjugates. In treating cancer in mammalian subjects, that difference exposure may result from greater selectivity for proteolysis of ADCs and LDCs having the selectivity conferring peptide sequences within tumor tissue over proteolysis within normal tissue in comparison to proteolysis of the traditional peptide-based Conjugate. Because altering the peptide sequence may also affect the physiochemical properties of the Conjugate compound, greater exposure from improved biodistribution into tumor tissue and not normal tissue and / or improved disposition once distributed into these tissues, which preferentially retains the Conjugate compound in tumor tissue and / or preferentially eliminates the Conjugate compound from normal tissue, respectively, can occur. Those biodistribution effects may even become the dominant factors over preferential proteolysis, which could be difficult to observe in vivo.

[0009] Thus, Conjugate compounds having peptide sequences providing enhanced exposure of released free cytotoxic compounds to tumor tissue in comparison to normal tissue should exhibit reduced undesired toxicities due to the peptide sequences being overall less susceptible to proteolysis within normal tissue or cells thereof in comparison to those of the tumor and / or from improved pharmacokinetic properties for Conjugate compounds incorporating those peptide sequences that favor tumor tissue over normal tissue.

[0010] The drug release from tumor-targeting devices of the present disclosure could ideally take place in the tumor microenvironment, allowing the subsequent diffusion of the active payload and its internalization into neighboring neoplastic cells. Indeed, proteolytic enzymes such as cathepsin B, urokinase-type plasminogen activator (uPA) , lysyl oxidase (LOX) and matrix metalloproteinases (MMPs) , which are involved in cancer progression features like angiogenesis, invasion and metastasis.

[0011] In a first aspect, provided is a compound of the formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0012] S-D (X)

[0013] wherein,

[0014] S is a linker, and the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-;

[0015] P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;

[0016] P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;

[0017] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof;

[0018] D is a drug moiety.

[0019] In another aspect, provided is a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0020] L-P-Y-D (I)

[0021] wherein,

[0022] L is represented by L1-L2-X-;

[0023] L1 is a ligand covalent binding moiety, and alternatively is selected from

[0024] -L2-X-is a stretcher unit;

[0025] L2 is selected from C1-20 alkylene, -C2-20 alkenylene, and C2-20 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 non-adjacent carbon atoms in C1-20 alkylene can be optionally replaced with O or S;

[0026] X is absent or -C (O) -;

[0027] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0028] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0029] Y is a spacer unit;

[0030] D is a drug moiety;

[0031] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0032] P3 is selected from serine or an analog thereof;

[0033] P2 is selected from glycine or an analog thereof;

[0034] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof.

[0035] In another aspect, the present disclosure provides a conjugate of the formula (II) :

[0036] T- (S’-D) k (II)

[0037] wherein,

[0038] T is a targeting moiety;

[0039] S’is a linker, which is a divalent group formed by the connection between S and T;

[0040] wherein, the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3, P2 and P1 are as defined in the context;

[0041] D is a drug moiety;

[0042] k ranges from 1 to about 20.

[0043] In another aspect, the present disclosure provides a conjugate disclosed herein, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier (s) or excipient (s) .

[0044] In another aspect, the present disclosure provides a pharmaceutical composition comprising a conjugate disclosed herein and a pharmaceutically acceptable excipient (s) , which further comprises other therapeutic agent (s) .

[0045] In another aspect, the present disclosure provides a kit comprising a pharmaceutical composition comprising a conjugate disclosed herein, other therapeutic agent (s) , and a pharmaceutically acceptable carrier (s) ,  adjuvant (s) or vehicle (s) .

[0046] In another aspect, the present disclosure provides a use of a compound, or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, a conjugate or a composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for treating and / or preventing a disease.

[0047] In another aspect, the present disclosure provides a method for preventing and / or treating a disease in a subject in need thereof, comprising administrating to the subject a conjugate disclosed herein.

[0048] In another aspect, the method further comprises administering to the subject a second therapeutic agent, preferably wherein the second therapeutic agent is selected from an antibody, a chemotherapeutic agent and a small molecule drug.

[0049] In another aspect, the present disclosure provides a compound, or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, a conjugate or a composition disclosed herein, for use in treating and / or preventing a disease.

[0050] In a specific embodiment, the disease is selected from a cancer, an infectious disease, an inflammatory disease, an autoimmune disease and an immunodeficiency disease.

[0051] It is to be understood that one, some, or all of the properties of the various embodiments described herein may be combined to form other embodiments of the present disclosure. These and other aspects of the disclosure will become apparent to one of skill in the art. These and other embodiments of the disclosure are further described by the detailed description that follows.

[0052] DEFINITIONS

[0053] Listed below are definitions of various terms used to describe this invention. These definitions apply to the terms as they are used throughout this specification and claims, unless otherwise limited in specific instances, either individually or as part of a larger group.

[0054] Chemical definitions

[0055] When a range of values is listed, it is intended to encompass each value and sub-range within the range. For example “C1-6 alkyl” is intended to include C1, C2, C3, C4, C5, C6, C1-6, C1-5, C1-4, C1-3, C1-2, C2-6, C2-5, C2-4, C2-3, C3-6, C3-5, C3-4, C4-6, C4-5 and C5-6 alkyl.

[0056] “C1-20 alkyl” refers to a radical of a straight or branched, saturated hydrocarbon group having 1 to 20 carbon atoms. “C1-10 alkyl” refers to a radical of a straight or branched, saturated hydrocarbon group having 1 to 10 carbon atoms. “C1-6 alkyl” refers to a radical of a straight or branched, saturated hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms. In some embodiments, C1-4 alkyl is preferred. Examples of C1-6 alkyl include methyl (C1) , ethyl (C2) , n-propyl (C3) , iso-propyl (C3) , n-butyl (C4) , tert-butyl (C4) , sec-butyl (C4) , iso-butyl (C4) , n-pentyl (C5) , 3-pentyl (C5) , pentyl (C5) , neopentyl (C5) , 3-methyl-2-butyl (C5) , tert-pentyl (C5) and n-hexyl (C6) . The term “C1-6 alkyl” also includes heteroalkyl, wherein one or more (e.g., 1, 2, 3 or 4) carbon atoms are subsituted with heteroatoms (e.g., oxygen, sulfur, nitrogen, boron, silicon, phosphorus) . Alkyl groups can be optionally substituted with one or more substituents, for example, with 1 to 5 substituents, 1 to 3 substituents or 1 substituent. Conventional abbreviations of alkyl include Me (-CH3) , Et (-CH2CH3) , iPr (-CH (CH3) 2) , nPr (-CH2CH2CH3) , n-Bu (-CH2CH2CH2CH3) or i-Bu (-CH2CH (CH3) 2) .

[0057] “C1-6 alkoxy” employed alone or in combination with other terms means, unless otherwise stated, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms connected to the rest of the molecule via an oxygen atom, such as, for example,  methoxy, ethoxy, 1-propoxy, 2-propoxy (isopropoxy) and the higher homologs and isomers. In some embodiments, C1-4 alkoxy is preferred.

[0058] “C2-20 alkenyl” refers to a radical of a straight or branched hydrocarbon group having 2 to 20 carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond. “C2-10 alkenyl” refers to a radical of a straight or branched hydrocarbon group having 2 to 10 carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond. In some embodiments, C2-6 alkenyl is preferred. In some embodiments, C2-4 alkenyl is more preferred. Examples of C2-6 alkenyl include vinyl (C2) , 1-propenyl (C3) , 2-propenyl (C3) , 1-butenyl (C4) , 2-butenyl (C4) , butadienyl (C4) , pentenyl (C5) , pentadienyl (C5) , hexenyl (C6) , etc. The term “C2-6 alkenyl” also includes heteroalkenyl, wherein one or more (e.g., 1, 2, 3 or 4) carbon atoms are replaced by heteroatoms (e.g., oxygen, sulfur, nitrogen, boron, silicon, phosphorus) . The alkenyl groups can be optionally substituted with one or more substituents, for example, with 1 to 5 substituents, 1 to 3 substituents or 1 substituent.

[0059] “C2-20 alkynyl” refers to a radical of a straight or branched hydrocarbon group having 2 to 20 carbon atoms, at least one carbon-carbon triple bond, and optionally one or more carbon-carbon double bonds. “C2-10 alkynyl” refers to a radical of a straight or branched hydrocarbon group having 2 to 10 carbon atoms, at least one carbon-carbon triple bond, and optionally one or more carbon-carbon double bonds. In some embodiments, C2-6 alkynyl is preferred. In some embodiments, C2-4 alkynyl is more preferred. Examples of C2-6 alkynyl include, but are not limited to, ethynyl (C2) , 1-propynyl (C3) , 2-propynyl (C3) , 1-butynyl (C4) , 2-butynyl (C4) , pentynyl (C5) , hexynyl (C6) , etc. The term “C2-6 alkynyl” also includes heteroalkynyl, wherein one or more (e.g., 1, 2, 3 or 4) carbon atoms are replaced by heteroatoms (e.g., oxygen, sulfur, nitrogen, boron, silicon, phosphorus) . The alkynyl groups can be substituted with one or more substituents, for example, with 1 to 5 substituents, 1 to 3 substituents or 1 substituent.

[0060] “C1-20 alkylene” refers to a divalent group formed by removing another hydrogen of the C1-20 alkyl, and can be a substituted or unsubstituted alkylene. In some embodiments, C1-10 alkylene is preferred. In some embodiments, C1-6 alkylene is preferred. In some embodiments, C1-4 alkylene is particularly preferred. The unsubstituted alkylene groups include, but are not limited to, methylene (-CH2-) , ethylene (-CH2CH2-) , propylene (-CH2CH2CH2-) , butylene (-CH2CH2CH2CH2-) , pentylene (-CH2CH2CH2CH2CH2-) , hexylene (-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-) , etc. Examples of substituted alkylene groups, such as those substituted with one or more alkyl (methyl) groups, include, but are not limited to, substituted methylene (-CH (CH3) -, -C (CH3) 2-) , substituted ethylene (-CH (CH3) CH2-, -CH2CH (CH3) -, -C (CH3) 2CH2-, -CH2C (CH3) 2-) , substituted propylene (-CH (CH3) CH2CH2-, -CH2CH (CH3) CH2-, -CH2CH2CH (CH3) -, -C (CH3) 2CH2CH2-, -CH2C (CH3) 2CH2-, -CH2CH2C (CH3) 2-) , etc.

[0061] “C2-20 alkenylene” refers to a divalent group formed by removing another hydrogen of the C2-20 alkenyl, and can be substituted or unsubstituted alkenylene. In some embodiments, C2-10 alkenylene is preferred. In some embodiments, C2-6 alkenylene is preferred. In some embodiments, C2-4 alkenylene is particularly preferred. Exemplary unsubstituted alkenylene groups include, but are not limited to, ethenylene (-CH=CH-) and propenylene (e.g., -CH=CHCH2-, -CH2-CH=CH-) . Exemplary substituted alkenylene groups, e.g., substituted with one or more alkyl (methyl) groups, include but are not limited to, substituted ethenylene (-C (CH3) =CH-, -CH=C (CH3) -) , substituted propenylene (e.g., -C (CH3) =CHCH2-, -CH=C (CH3) CH2-, -CH=CHCH (CH3) -, -CH=CHC (CH3) 2-, -CH (CH3) -CH=CH-, -C (CH3) 2-CH=CH-, -CH2-C (CH3) =CH-, -CH2-CH=C (CH3) -) , and the like.

[0062] “C2-20 alkynylene” refers to a divalent group formed by removing another hydrogen of the C2-20 alkynyl, and can be substituted or unsubstituted alkynylene. In some embodiments, C2-10 alkynylene is preferred. In some  embodiments, C2-6 alkynylene is preferred. In some embodiments, C2-4 alkynylene is particularly preferred. Exemplary alkynylene groups include, but are not limited to, ethynylene (-C≡C-) , substituted or unsubstituted propynylene (-C≡CCH2-) , and the like.

[0063] “Halo” or “halogen” refers to fluorine (F) , chlorine (Cl) , bromine (Br) and iodine (I) .

[0064] “C1-6 haloalkyl” means the above “C1-6 alkyl” which is substituted with one or more halogen groups. “C1-6 haloalkoxyl” means the above “C1-6 alkoxyl” which is substituted with one or more halogen groups. Examples include mono-, di-, and poly-halogenated, including perhalogenated, alkyl. A monohalogen substituent in the group may be an iodine, bromine, chlorine or fluorine atom; dihalogen substituents and polyhalogen substituents may be two or more identical halogen atoms or a combination of different halogens. Examples of preferred haloalkyl groups include monofluoromethyl, difluoromethyl, trifluoromethyl, chloromethyl, dichloromethyl, trichloromethyl, pentafluoroethyl, heptafluoropropyl, difluorochloromethyl, dichlorofluoromethyl, difluoroethyl, difluoropropyl, dichloroethyl and dichloropropyl. The haloalkyl group can be substituted at any available point of attachment, for example, with 1 to 5 substituents, 1 to 3 substituents or 1 substituent.

[0065] “C3-10 cycloalkyl” refers to a radical of a non-aromatic cyclic hydrocarbon group having from 3 to 10 ring carbon atoms and zero heteroatom. In some embodiments, C3-7 cycloalkyl is especially preferred, C4-6 cycloalkyl is more preferred, and C3-5 cycloalkyl is even more preferred. Cycloalkyl also includes ring systems wherein the cycloalkyl ring, as defined above, is fused with one or more aryl or heteroaryl groups wherein the point of attachment is on the cycloalkyl ring, and in such instances, the number of carbons continues to designate the number of carbons in the cycloalkyl ring system. Exemplary cycloalkyl groups include, but is not limited to, cyclopropyl (C3) , cyclopropenyl (C3) , cyclobutyl (C4) , cyclobutenyl (C4) , cyclopentyl (C5) , cyclopentenyl (C5) , cyclohexyl (C6) , cyclohexenyl (C6) , cyclohexadienyl (C6) , cycloheptyl (C7) , cycloheptenyl (C7) , cycloheptadienyl (C7) , cycloheptatrienyl (C7) , and the like.

[0066] The terms “heterocyclic” , “heterocyclyl” or “heterocycloalkyl” can be used interchangeably and referred to a non-aromatic ring or a bi-or tri-cyclic group fused, bridged or spiro system, where (i) each ring system contains at least one heteroatom independently selected from oxygen, sulfur and nitrogen, (ii) each ring system can be saturated or unsaturated (iii) the nitrogen and sulfur heteroatoms may optionally be oxidized, (iv) the nitrogen heteroatom may optionally be quaternized, (v) any of the above rings may be fused to an aromatic ring, and (vi) the remaining ring atoms are carbon atoms which may be optionally oxo-substituted or optionally substituted with exocyclic olefinic, iminic or oximic double bond.

[0067] “3-to 10-membered heterocyclyl” refers to a radical of a 3-to 10-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 5 ring heteroatoms, wherein each heteroatom is independently selected from nitrogen, oxygen, sulfur, boron, phosphorus, and silicon. In heterocyclyl groups that contain one or more nitrogen atoms, the point of attachment can be a carbon or nitrogen atom, as long as valency permits. In some embodiments, 3-to 9-membered heterocyclyl is preferred, which is a radical of a 3-to 9-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 5 ring heteroatoms; in some embodiments, 3-to 7-membered heterocyclyl is preferred, which is a radical of a 3-to 7-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 4 ring heteroatoms; 3-to 6-membered heterocyclyl is preferred, which is a radical of a 3-to 6-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 3 ring heteroatoms; 4-to 7-membered heterocyclyl is preferred, which is a radical of a 4-to 7-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 3 ring heteroatoms; 4-to 6-membered heterocyclyl is preferred, which is a radical of a 4-to 6-membered non-aromatic  ring system having ring carbon atoms and 1 to 3 ring heteroatoms; 5-to 6-membered heterocyclyl is more preferred, which is a radical of a 5-to 6-membered non-aromatic ring system having ring carbon atoms and 1 to 3 ring heteroatoms. Heterocyclyl also includes ring systems wherein the heterocyclyl ring, as defined above, is fused with one or more cycloalkyl groups, and the point of attachment is on the cycloalkyl ring; or wherein the heterocyclyl ring, as defined above, is fused with one or more aryl or heteroaryl groups, and the point of attachment is on the heterocyclyl ring; and in such instances, the number of ring members continues to designate the number of ring members in the heterocyclyl ring system. Exemplary 3-membered heterocyclyl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, azirdinyl, oxiranyl, and thiorenyl. Exemplary 4-membered heterocyclyl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, azetidinyl, oxetanyl and thietanyl. Exemplary 5-membered heterocyclyl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrothiophenyl, dihydrothiophenyl, pyrrolidinyl, dihydropyrrolyl and pyrrolyl-2, 5-dione. Exemplary 5-membered heterocyclyl groups containing two heteroatoms include, but are not limited to, dioxolanyl, oxasulfuranyl, disulfuranyl, and oxazolidin-2-one. Exemplary 5-membered heterocyclyl groups containing three heteroatoms include, but are not limited to, triazolinyl, oxadiazolinyl, and thiadiazolinyl. Exemplary 6-membered heterocyclyl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, piperidinyl, tetrahydropyranyl, dihydropyridinyl, and thianyl. Exemplary 6-membered heterocyclyl groups containing two heteroatoms include, but are not limited to, piperazinyl, morpholinyl, dithianyl, and dioxanyl. Exemplary 6-membered heterocyclyl groups containing three heteroatoms include, but are not limited to, triazinanyl. Exemplary 7-membered heterocyclyl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, azepanyl, oxepanyl and thiepanyl. Exemplary 5-membered heterocyclyl groups fused to a C6 aryl ring (also referred to herein as a 5, 6-bicyclic heterocyclic ring) include, but are not limited to, indolinyl, isoindolinyl, dihydrobenzofuranyl, dihydrobenzothienyl, benzoxazolinonyl, and the like. Exemplary 6-membered heterocyclyl groups fused to a C6 aryl ring (also referred to herein as a 6, 6-bicyclic heterocyclic ring) include, but are not limited to, tetrahydroquinolinyl, tetrahydroisoquinolinyl, and the like.

[0068] The 3-to 10-membered heterocyclyl also includes a spiroheterocyclic group, that is, a group in which two rings (e.g., a heterocyclyl and a carbocyclyl) share one carbon atom, wherein at least one ring is a heterocyclyl as defined above. More specifically, the spiroheterocyclyl is a spiro ring formed by two 4-membered rings, two 5-membered rings, two 6-membered rings, one 4-membered ring and one 5-membered ring, one 4-membered ring and one 6-membered ring, or one 5-membered ring and one 6-membered ring, wherein at least one ring is a 4-to 6-membered heterocyclyl as defined above, a 4-to 6-membered heterocyclyl containing 1, 2 or 3 O, N or S heteroatoms is preferred, and a 4-to 6-membered heterocyclyl containing 1 N heteroatom is more preferred. Specific spiroheterocyclyl groups include, but are not limited to:

[0069] “C6-10 aryl” refers to a radical of a monocyclic or polycyclic (e.g., bicyclic) 4n+2 aromatic ring system  (e.g., having 6 or 10 π electrons shared in a cyclic array) having 6-10 ring carbon atoms and zero heteroatom. In some embodiments, an aryl group has six ring carbon atoms ( “C6 aryl” ; e.g., phenyl) . In some embodiments, an aryl group has ten ring carbon atoms ( “C10 aryl” ; e.g., naphthyl such as 1-naphthyl and 2-naphthyl) . Aryl also includes ring systems wherein the aryl ring, as defined above, is fused with one or more cycloalkyl, or heterocyclyl groups and the point of attachment is on the aryl ring, and in such instances, the number of carbon atoms continues to designate the number of carbon atoms in the aryl ring system.

[0070] “5-to 10-membered heteroaryl” refers to a radical of a 5-10 membered monocyclic or bicyclic 4n+2 aromatic ring system (e.g., having 6 or 10 π electrons shared in a cyclic array) having ring carbon atoms and 1-4 ring heteroatoms, wherein each heteroatom is independently selected from nitrogen, oxygen and sulfur. In heteroaryl groups that contain one or more nitrogen atoms, the point of attachment can be a carbon or nitrogen atom, as long as valency permits. Heteroaryl bicyclic ring systems can include one or more heteroatoms in one or both rings. Heteroaryl further includes ring systems wherein the heteroaryl ring, as defined above, is fused with one or more cycloalkyl, or heterocyclyl groups and the point of attachment is on the heteroaryl ring, and in such instances, the number of ring members continues to designate the number of ring members in the heteroaryl ring system. In some embodiments, 5-to 6-membered heteroaryl is especially preferred, which is a radical of a 5-6 membered monocyclic or bicyclic 4n+2 aromatic ring system having ring carbon atoms and 1-4 ring heteroatoms. Exemplary 5-membered heteroaryl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, pyrrolyl, furanyl and thiophenyl. Exemplary 5-membered heteroaryl groups containing two heteroatoms include, but are not limited to, imidazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, and isothiazolyl. Exemplary 5-membered heteroaryl groups containing three heteroatoms include, but are not limited to, triazolyl, oxadiazolyl (e.g., 1, 2, 4-oxadiazolyl) , and thiadiazolyl. Exemplary 5-membered heteroaryl groups containing four heteroatoms include, but are not limited to, tetrazolyl. Exemplary 6-membered heteroaryl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, pyridinyl. Exemplary 6-membered heteroaryl groups containing two heteroatoms include, but are not limited to, pyridazinyl, pyrimidinyl, and pyrazinyl. Exemplary 6-membered heteroaryl groups containing three or four heteroatoms include, but are not limited to, triazinyl and tetrazinyl, respectively. Exemplary 7-membered heteroaryl groups containing one heteroatom include, but are not limited to, azepinyl, oxepinyl, and thiepinyl. Exemplary 5, 6-bicyclic heteroaryl groups include, but are not limited to, indolyl, isoindolyl, indazolyl, benzotriazolyl, benzothiophenyl, isobenzothiophenyl, benzofuranyl, benzoisofuranyl, benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzisoxazolyl, benzoxadiazolyl, benzthiazolyl, benzisothiazolyl, benzthiadiazolyl, indolizinyl, and purinyl. Exemplary 6, 6-bicyclic heteroaryl groups include, but are not limited to, naphthyridinyl, pteridinyl, quinolinyl, isoquinolinyl, cinnolinyl, quinoxalinyl, phthalazinyl, and quinazolinyl.

[0071] It is understood that any alkyl, alkoxyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, or the like, described herein can also be a divalent or multivalent group when used as a linkage to connect two or more groups or substituents, which can be at the same or different atom (s) . One of skill in the art can readily determine the valence of any such group from the context in which it occurs.

[0072] The term “optionally substituted” , as used herein, means that the referenced group may be substituted or unsubstituted. In one embodiment, the referenced group is optionally substituted with zero substituents, i.e., the referenced group is unsubstituted. In another embodiment, the referenced group is optionally substituted with one or more additional group (s) individually and independently selected from groups described herein.

[0073] The term “hydrogen” includes hydrogen and deuterium. In addition, the recitation of an atom includes  other isotopes of that atom so long as the resulting compound is pharmaceutically acceptable.

[0074] Alkyl, alkoxy, alkenyl, alkynyl, alkylene, alkenylene, alkynylene, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl groups, as defined herein, are optionally substituted groups. In general, the term “substituted” , whether preceded by the term “optionally” or not, means that at least one hydrogen present on a group (e.g., a carbon or nitrogen atom) is replaced with a permissible substituent, e.g., a substituent which upon substitution results in a stable compound, e.g., a compound which does not spontaneously undergo transformation such as by rearrangement, cyclization, elimination, or other reaction. Unless otherwise indicated, a “substituted” group has a substituent at one or more substitutable positions of the group, and when more than one position in any given structure is substituted, the substituent is either the same or different at each position. The term “substituted” is contemplated to include substitution with all permissible substituents of organic compounds, any of the substituents described herein that results in the formation of a stable compound. For purposes of this invention, heteroatoms such as nitrogen may have hydrogen substituents and / or any suitable substituent as described herein which satisfy the valencies of the heteroatoms and results in the formation of a stable moiety.

[0075] Exemplary substituents on a carbon atom include, but are not limited to, halogen, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -ORaa, -ON (Rbb) 2, -N (Rbb) 2, -N (Rbb) 3+X-, -N (ORcc) Rbb, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C (=O) Raa, -CO2H, -CHO, -C (ORcc) 2, -CO2Raa, -OC (=O) Raa, -OCO2Raa, -C (=O) N (Rbb) 2, -OC (=O) N (Rbb) 2, -NRbbC (=O) Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC (=O) N (Rbb) 2, -C (=NRbb) Raa, -C (=NRbb) ORaa, -OC (=NRbb) Raa, -OC (=NRbb) ORaa, -C (=NRbb) N (Rbb) 2, -OC (=NRbb) N (Rbb) 2, -NRbbC (=NRbb) N (Rbb) 2, -C (=O) NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N (Rbb) 2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S (=O) Raa, -OS (=O) Raa, -Si (Raa) 3, -OSi (Raa) 3, -C (=S) N (Rbb) 2, -C (=O) SRaa, -C (=S) SRaa, -SC (=S) SRaa, -SC (=O) SRaa, -OC (=O) SRaa, -SC (=O) ORaa, -SC (=O) Raa, -P (=O) 2Raa, -OP (=O) 2Raa, -P (=O) (Raa) 2, -OP (=O) (Raa) 2, -OP (=O) (ORcc) 2, -P (=O) 2N (Rbb) 2, -OP (=O) 2N (Rbb) 2, -P (=O) (NRbb) 2, -OP (=O) (NRbb) 2, -NRbbP (=O) (ORcc) 2, -NRbbP (=O) (NRbb) 2, -P (Rcc) 2, -P (Rcc) 3, -OP (Rcc) 2, -OP (Rcc) 3, -B (Raa) 2, -B (ORcc) 2, -BRaa (ORcc) , alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rdd groups;

[0076] or two geminal hydrogens on a carbon atom are replaced with the group =O, =S, =NN (Rbb) 2, =NNRbbC (=O) Raa, =NNRbbC (=O) ORaa, =NNRbbS (=O) 2Raa, =NRbb, or =NORcc;

[0077] each instance of Raa is, independently, selected from alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, or two Raa groups are joined to form a heterocyclyl or heteroaryl ring, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rdd groups;

[0078] each instance of Rbb is, independently, selected from hydrogen, -OH, -ORaa, -N (Rcc) 2, -CN, -C (=O) Raa, -C (=O) N (Rcc) 2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C (=NRcc) ORaa, -C (=NRcc) N (Rcc) 2, -SO2N (Rcc) 2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C (=S) N (Rcc) 2, -C (=O) SRcc, -C (=S) SRcc, -P (=O) 2Raa, -P (=O) (Raa) 2, -P (=O) 2N (Rcc) 2, -P (=O) (NRcc) 2, alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, or two Rbb groups are joined to form a heterocyclyl or heteroaryl ring, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rdd groups;

[0079] each instance of Rcc is, independently, selected from hydrogen, alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, or two Rcc groups are joined to form a heterocyclyl or heteroaryl ring, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rdd groups;

[0080] each instance of Rdd is, independently, selected from halogen, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -ORee, -ON (Rff) 2, -N (Rff) 2, -N (Rff) 3+X-, -N (ORee) Rff, -SH, -SRee, -SSRee, -C (=O) Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC (=O) Ree, -OCO2Ree, -C (=O) N (Rff) 2, -OC (=O) N (Rff) 2, -NRffC (=O) Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC (=O) N (Rff) 2, -C (=NRff) ORee, -OC (=NRff) Ree, -OC (=NRff) ORee, -C (=NRff) N (Rff) 2, -OC (=NRff) N (Rff) 2, -NRffC (=NRff) N (Rff) 2, -NRffSO2Ree, -SO2N (Rff) 2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S (=O) Ree, -Si (Ree) 3, -OSi (Ree) 3, -C (=S) N (Rff) 2, -C (=O) SRee, -C (=S) SRee, -SC (=S) SRee, -P (=O) 2Ree, -P (=O) (Ree) 2, -OP (=O) (Ree) 2, -OP (=O) (ORee) 2, alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rgg groups, or two geminal Rdd substituents can be joined to form =O or =S;

[0081] each instance of Ree is, independently, selected from alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, aryl, heterocyclyl, and heteroaryl, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rgg groups;

[0082] each instance of Rff is, independently, selected from hydrogen, alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl and heteroaryl, or two Rff groups are joined to form a heterocyclyl or heteroaryl ring, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rgg groups; and

[0083] each instance of Rgg is, independently, halogen, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -OH, -OC1-6 alkyl, -ON (C1-6 alkyl) 2, -N (C1-6 alkyl) 2, -N (C1-6 alkyl) 3+X-, -NH (C1-6 alkyl) 2+X-, -NH2 (C1-6 alkyl) +X-, -NH3+X-, -N (OC1-6 alkyl) (C1-6 alkyl) , -N (OH) (C1-6 alkyl) , -NH (OH) , -SH, -SC1-6 alkyl, -SS (C1-6 alkyl) , -C (=O) (C1-6 alkyl) , -CO2H, -CO2 (C1-6 alkyl) , -OC (=O) (C1-6 alkyl) , -OCO2 (C1-6 alkyl) , -C (=O) NH2, -C (=O) N (C1-6 alkyl) 2, -OC (=O) NH (C1-6 alkyl) , -NHC (=O) (C1-6 alkyl) , -N (C1-6 alkyl) C (=O) (C1-6 alkyl) , -NHCO2 (C1-6 alkyl) , -NHC (=O) N (C1-6 alkyl) 2, -NHC (=O) NH (C1-6 alkyl) , -NHC (=O) NH2, -C (=NH) O (C1-6 alkyl) , -OC (=NH) (C1-6 alkyl) , -OC (=NH) OC1-6 alkyl, -C (=NH) N (C1-6 alkyl) 2, -C (=NH) NH (C1-6 alkyl) , -C (=NH) NH2, -OC (=NH) N (C1-6 alkyl) 2, -OC (NH) NH (C1-6 alkyl) , -OC (NH) NH2, -NHC (NH) N (C1-6 alkyl) 2, -NHC (=NH) NH2, -NHSO2 (C1-6 alkyl) , -SO2N (C1-6 alkyl) 2, -SO2NH (C1-6 alkyl) , -SO2NH2, -SO2C1-6 alkyl, -SO2OC1-6 alkyl, -OSO2C1-6 alkyl, -SOC1-6 alkyl, -Si (C1-6 alkyl) 3, -OSi (C1-6 alkyl) 3 -C (=S) N (C1-6 alkyl) 2, C (=S) NH (C1-6 alkyl) , C (=S) NH2, -C (=O) S (C1-6 alkyl) , -C (=S) SC1-6 alkyl, -SC (=S) SC1-6 alkyl, -P (=O) 2 (C1-6 alkyl) , -P (=O) (C1-6 alkyl) 2, -OP (=O) (C1-6 alkyl) 2, -OP (=O) (OC1-6 alkyl) 2, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C3-C7 carbocyclyl, C6-C10 aryl, C3-C7 heterocyclyl, C5-C10 heteroaryl; or two geminal Rgg substituents can be joined to form =O or =S; wherein X-is a counterion.

[0084] Exemplary substituents on a nitrogen atom include, but are not limited to, hydrogen, -OH, -ORaa, -N (Rcc) 2, -CN, -C (=O) Raa, -C (=O) N (Rcc) 2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C (=NRbb) Raa, -C (=NRcc) ORaa, -C (=NRcc) N (Rcc) 2, -SO2N (Rcc) 2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C (=S) N (Rcc) 2, -C (=O) SRcc, -C (=S) SRcc, -P (=O) 2Raa, -P (=O) (Raa) 2, -P (=O) 2N (Rcc) 2, -P (=O) (NRcc) 2, alkyl, haloalkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl, or two Rcc groups attached to a nitrogen atom are joined to form a heterocyclyl or heteroaryl ring, wherein each alkyl, alkenyl, alkynyl, carbocyclyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl is independently substituted with 0, 1, 2, 3, 4, or 5 Rdd groups, and wherein Raa, Rbb, Rcc and Rdd are as defined above.

[0085] Other definitions

[0086] As used herein, “cancer” refers to any disease that is caused by or results in inappropriately high levels of cell division, inappropriately low levels of apoptosis, or both. Examples of cancer include, but are not limited to,  leukemias (e.g., acute leukemia, acute lymphocytic leukemia, acute myelocytic leukemia, acute myeloblasts leukemia, acute promyelocytic leukemia, acute myelomonocytic leukemia, acute monocytic leukemia, acute erythroleukemia, chronic leukemia, chronic myelocytic leukemia, chronic lymphocytic leukemia) , polycythemia vera, lymphoma (Hodgkin's disease, non-Hodgkin's disease) , Waldenstrom's macroglobulinemia, heavy chain disease, and solid tumors.

[0087] Unless indicated, otherwise the term “treatment” as used herein includes the effect on a subject who is suffering from a particular disease, disorder, or condition, which reduces the severity of the disease, disorder, or condition, or delays or slows the progression of the disease, disorder or condition ( “therapeutic treatment” ) . The term also includes the effect that occurs before the subject begins to suffer from a specific disease, disorder or condition ( “prophylactic treatment” ) .

[0088] The term “treating / treatment” as used herein relates to reversing, alleviating, inhibiting the progression or prophylaxis of a disorder or condition to which the term applies, or one or more symptoms of such disorder or condition. The noun “treating / treatment” as used herein relates to the action of treat, which is a verb, and the latter is as just defined.

[0089] “Disease, ” “disorder, ” and “condition” can be used interchangeably herein.

[0090] Generally, the “effective amount” of a compound refers to an amount sufficient to elicit a target biological response. As understood by those skilled in the art, the effective amount of the compound of the disclosure can vary depending on the following factors, such as the desired biological endpoint, the pharmacokinetics of the compound, the diseases being treated, the mode of administration, and the age, health status and symptoms of the subjects. The effective amount includes therapeutically effective amount and prophylactically effective amount.

[0091] Unless indicated, otherwise the “therapeutically effective amount” of the compound as used herein is an amount sufficient to provide therapeutic benefits in the course of treating a disease, disorder or condition, or to delay or minimize one or more symptoms associated with the disease, disorder or condition. The therapeutically effective amount of a compound refers to the amount of the therapeutic agent that, when used alone or in combination with other therapies, provides a therapeutic benefit in the treatment of a disease, disorder or condition. The term “therapeutically effective amount” can include an amount that improves the overall treatment, reduces or avoids the symptoms or causes of the disease or condition, or enhances the therapeutic effect of other therapeutic agents.

[0092] “Combination” and related terms refer to the simultaneous or sequential administration of the compounds of the present disclosure and other therapeutic agents. For example, the compounds of the present disclosure can be administered simultaneously or sequentially in separate unit dosage with other therapeutic agents, or simultaneously in a single unit dosage with other therapeutic agents.

[0093] The term “pharmaceutically acceptable” as used herein denotes within the scope of sound medical judgment, the substances are suitable for use in contact with the patient's tissue without undue toxicity, irritation, allergic response and the like, and are commensurate with a reasonable benefit / risk ratio, and are effective for their intended use, including, if possible, the zwitterionic form of the compounds disclosed herein.

[0094] The term “salt” denotes relatively non-toxic, inorganic and organic acid addition salts of the compounds disclosed herein. These salts can be prepared in situ during the final isolation and purification of the compound, or by isolating salts produced by separately reacting the purified compound in the free base form with a suitable organic or inorganic acid.

[0095] The pharmaceutically acceptable base addition salts are formed with metals or amines, such as alkali  metal and alkaline earth metal hydroxides or organic amines. Examples of the metals used as cations include sodium, potassium, magnesium, calcium, etc. Examples of suitable amines are N, N'-dibenzylethylenediamine, chloroprocaine, choline, diethanolamine, ethylenediamine, N-methylglucamine and procaine.

[0096] The salts can be prepared from the inorganic acids, which include sulfates, pyrosulfates, bisulfates, sulfites, bisulfites, nitrates, phosphates, monohydrogen phosphates, dihydrogen phosphates, metaphosphates, pyrophosphates, chlorides, bromides and iodides. Examples of the acids include hydrochloric acid, nitric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, phosphoric acid, etc. The representative salts include hydrobromide, hydrochloride, sulfate, bisulfate, nitrate, acetate, oxalate, valerate, oleate, palmitate, stearate, laurate, borate, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maleate, fumarate, succinate, tartrate, naphthalate, methanesulfonate, glucoheptanate, lactobionate, lauryl sulfonate, isethionate, etc. The salts can also be prepared from the organic acids, which include aliphatic monocarboxylic and dicarboxylic acids, phenyl-substituted alkanoic acids, hydroxyalkanoic acids, alkanedioic acid, aromatic acids, aliphatic and aromatic sulfonic acids, etc. The representative salts include acetate, propionate, octanoate, isobutyrate, oxalate, malonate, succinate, suberate, sebacate, fumarate, maleate, mandelate, benzoate, chlorobenzoate, methyl benzoate, dinitrobenzoate, naphthoate, besylate, tosylate, phenylacetate, citrate, lactate, maleate, tartrate, methanesulfonate, etc. The pharmaceutically acceptable salts can include cations based on alkali metals and alkaline earth metals, such as sodium, lithium, potassium, calcium, magnesium, etc., as well as non-toxic ammonium, quaternary ammonium, and amine cations including, but not limited to, ammonium, tetramethylammonium, tetraethylammonium, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, triethylamine, ethylamine, etc. Salts of amino acids are also included, such as arginine salts, gluconates, galacturonates, etc. (for example, see Berge S.M. et al., “Pharmaceutical Salts, ” J. Pharm. Sci., 1977; 66: 1-19, which is incorporated herein byreference) .

[0097] As used herein, the term “pharmaceutically acceptable salt” refers to those salts which are, within the scope of sound medical judgment, suitable for use in contact with the tissues of humans and lower animals without undue toxicity, irritation, allergic response and the like, and are commensurate with a reasonable benefit / risk ratio. Pharmaceutically acceptable salts are well known in the art. For example, S.M. Berge, et al. describes pharmaceutically acceptable salts in detail in J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977) . The salts can be prepared in situ during the final isolation and purification of the compounds of the invention, or separately by reacting the free base function with a suitable organic acid. Examples of pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to, nontoxic acid addition salts are salts of an amino group formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, sulfuric acid and perchloric acid or with organic acids such as acetic acid, maleic acid, tartaric acid, citric acid, succinic acid or malonic acid or by using other methods used in the art such as ion exchange. Other pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to, adipate, alginate, ascorbate, aspartate, benzenesulfonate, benzoate, bisulfate, borate, butyrate, camphorate, camphorsulfonate, citrate, cyclopentane-propionate, digluconate, dodecylsulfate, ethanesulfonate, formate, fumarate, glucoheptonate, glycerophosphate, gluconate, hemisulfate, heptanoate, hexanoate, hydroiodide, 2-hydroxy-ethanesulfonate, lactobionate, lactate, laurate, lauryl sulfate, malate, maleate, malonate, methanesulfonate, 2-naphthalenesulfonate, nicotinate, nitrate, oleate, oxalate, palmitate, pamoate, pectinate, persulfate, 3-phenylpropionate, phosphate, picrate, pivalate, propionate, stearate, succinate, sulfate, tartrate, thiocyanate, p-toluenesulfonate, undecanoate, valerate salts, and the like. Representative alkali or alkaline earth metal salts include sodium, lithium, potassium, calcium, magnesium, and the like. Further pharmaceutically acceptable salts  include, when appropriate, nontoxic ammonium, quaternary ammonium, and amine cations formed using counterions such as halide, hydroxide, carboxylate, sulfate, phosphate, nitrate, alkyl having from 1 to 6 carbon atoms, sulfonate and aryl sulfonate.

[0098] In certain embodiments, the compounds of each formula herein are defined to include isotopically labelled compounds. An “isotopically labelled compound” is a compound in which at least one atomic position is enriched in a specific isotope of the designated element to a level which is significantly greater than the natural abundance of that isotope. For example, one or more hydrogen atom positions in a compound can be enriched with deuterium to a level which is significantly greater than the natural abundance of deuterium, for example, enrichment to a level of at least 1%, preferably at least 20%or at least 50%. Such a deuterated compound may, for example, be metabolized more slowly than its non-deuterated analog, and therefore exhibit a longer half-life when administered to a subject. Such compounds can synthesize using methods known in the art, for example by employing deuterated starting materials. Unless stated to the contrary, isotopically labelled compounds are pharmaceutically acceptable.

[0099] The term “hydroxy protecting group” , as used herein, refers to a labile chemical moiety which is known in the art to protect a hydroxyl group against undesired reactions during synthetic procedures. After said synthetic procedure (s) the hydroxy protecting group as described herein may be selectively removed. Hydroxy protecting groups as known in the art are described generally in T.H. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999) . Examples of hydroxyl protecting groups include benzyloxycarbonyl, 4-methoxybenzyloxycarbonyl, tert-butoxy-carbonyl, isopropoxycarbonyl, diphenylmethoxycarbonyl, 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl, allyloxycarbonyl, acetyl, formyl, chloroacetyl, trifluoroacetyl, methoxyacetyl, phenoxyacetyl, benzoyl, methyl, t-butyl, 2, 2, 2-trichloroethyl, 2-trimethylsilyl ethyl, allyl, benzyl, triphenyl-methyl (trityl) , methoxymethyl, methylthiomethyl, benzyloxymethyl, 2- (trimethylsilyl) -ethoxymethyl, methanesulfonyl, trimethylsilyl, triisopropylsilyl, and the like.

[0100] The term “amino protecting group” , as used herein, refers to a labile chemical moiety which is known in the art to protect an amino group against undesired reactions during synthetic procedures. After said synthetic procedure (s) the amino protecting group as described herein may be selectively removed. Amino protecting groups as known in the art are described generally in T.H. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999) . Examples of amino protecting groups include, but are not limited to, methoxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, 9-fluorenyl-methoxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, and the like.

[0101] The term “amino acid” refers to naturally occurring and synthetic α, β, γ, or δ or amino acids, and includes but is not limited to, amino acids found in proteins or intermediates in metabolism of amino acids or proteins, i.e. glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, methionine, phenylalanine, tryptophan, proline, serine, threonine, cysteine, tyrosine, asparagine, glutamine, aspartate, glutamate, lysine, citrulline, arginine and histidine. In certain embodiments, the amino acid is in the L-configuration. In certain embodiments, the amino acid is in the D-configuration. In certain embodiments, the amino acid is provided as a substituent of a compound described herein, wherein the amino acid is a residue selected from the group consisting of alanyl, valinyl, leucinyl, isoleuccinyl, prolinyl, phenylalaninyl, tryptophanyl, methioninyl, glycinyl, serinyl, threoninyl, cysteinyl, tyrosinyl, asparaginyl, glutaminyl, aspartoyl, glutaroyl, lysinyl, argininyl, histidinyl, β-alanyl, β-valinyl, β-leucinyl, β-isoleuccinyl, β-prolinyl, β-phenylalaninyl, β-tryptophanyl, β-methioninyl, β-glycinyl, β-serinyl, β-threoninyl, β-cysteinyl, β-tyrosinyl, β-asparaginyl, β-glutaminyl, β-aspartoyl, β-glutaroyl, β-lysinyl, β-argininyl and β-histidinyl.

[0102] Combinations of substituents and variables envisioned by this invention are only those that result in the  formation of stable compounds. The term “stable” , as used herein, refers to compounds which possess stability sufficient to allow manufacture and which maintains the integrity of the compound for a sufficient period of time to be useful for the purposes detailed herein (e.g., therapeutic or prophylactic administration to a subject) .

[0103] The synthesized compounds can be separated from a reaction mixture and further purified by a method such as column chromatography, high pressure liquid chromatography, or recrystallization. As can be appreciated by the skilled artisan, further methods of synthesizing the compounds of the Formula herein will be evident to those of ordinary skill in the art. Additionally, the various synthetic steps may be performed in an alternate sequence or order to give the desired compounds. Synthetic chemistry transformations and protecting group methodologies (protection and deprotection) useful in synthesizing the compounds described herein are known in the art and include, for example, those such as described in R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, 2nd Ed. Wiley-VCH (1999) ; T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999) ; L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994) ; and L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) , and subsequent editions thereof.

[0104] The compounds of this invention may be modified by appending appropriate functionalities to enhance selective biological properties. Such modifications are known in the art and may include those which increase biological penetration into a given biological system (e.g., blood, lymphatic system, central nervous system) , increase oral availability, increase solubility to allow administration by injection, alter metabolism and alter rate of excretion.

[0105] The compounds described herein contain one or more asymmetric centers and thus give rise to enantiomers, diastereomers, and other stereoisomeric forms that may be defined, in terms of absolute stereochemistry, as (R) -or (S) -or the mixture thereof, or as (D) -or (L) -for amino acids or the mixture thereof. The present invention is meant to include all such possible isomers, as well as their racemic and optically pure forms. Optical isomers may be prepared from their respective optically active precursors by the procedures described above, or by resolving the racemic mixtures. The resolution can be carried out in the presence of a resolving agent, by chromatography or by repeated crystallization or by some combination of these techniques which are known to those skilled in the art. Further details regarding resolutions can be found in Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions (John Wiley & Sons, 1981) . When the compounds described herein contain olefinic double bonds, other unsaturation, or other centers of geometric asymmetry, and unless specified otherwise, it is intended that the compounds include both E and Z geometric isomers or cis-and trans-isomers. Likewise, all tautomeric forms are also intended to be included. Tautomers may be in cyclic or acyclic. The configuration of any carbon-carbon double bond appearing herein is selected for convenience only and is not intended to designate a particular configuration unless the text so states; thus, a carbon-carbon double bond or carbon-heteroatom double bond depicted arbitrarily herein as trans may be cis, trans, or a mixture of the two in any proportion.

[0106] Certain compounds of the present invention may also exist in different stable conformational forms which may be separable. Torsional asymmetry due to restricted rotation about an asymmetric single bond, for example because of steric hindrance or ring strain, may permit separation of different conformers. The present invention includes each conformational isomer of these compounds and mixtures thereof.

[0107] ABBREVIATIONS

[0108] Abbreviations which may be used in the descriptions of the scheme and the examples that follow are: Ac for acetyl; AcOH for acetic acid; AIBN for azobisisobutyronitrile; aq. for aqueous; BINAP for 2, 2’-bis (diphenylphosphino) -1, 1’-binaphthyl; Boc2O for di-tert-butyl-dicarbonate; Boc for t-butoxycarbonyl; Bpoc for 1-methyl-1- (4-biphenylyl) ethyl carbonyl; Bz for benzoyl; Bn for benzyl; BocNHOH for tert-butyl N-hydroxycarbamate; t-BuOK for potassium tert-butoxide; Bu3SnH for tributyltin hydride; BOP for (benzotriazol-1-yloxy) tris (dimethylamino) phospho-nium Hexafluorophosphate; Brine for sodium chloride solution in water; BSA for N, O-bis- (trimethylsilyl) acetamide; Bz for benzoyl; CDI for carbonyldiimidazole; CH2Cl2 for dichloromethane; CH3 for methyl; CH3CN for acetonitrile; CO2 for carbon dioxide; COMU for (1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidenaminooxy) dimethylamino-morpholino-carbenium hexafluorophosphate; Cs2CO3 for cesium carbonate; CuCl for copper (I) chloride; CuI for copper (I) iodide; dba for dibenzylidene acetone; dppb for diphenylphos-phinobutane; DBU for 1, 8-diazabicyclo [5.4.0] -undec-7-ene; DCC for N, N’-dicyclohexyl-carbodiimide; DCDMH for 1, 3-dichloro-5, 5-dimethylhydantoin; DCE for 1, 1-dichloroethane; DEAD for diethylazodicarboxylate; DIAD for diisopropyl azodicarboxylate; DIPEA (DIEA) or (i-Pr) 2EtN for N, N, -diisopropylethyl amine; Dess-Martin periodinane for 1, 1, 1-tris (acetyloxy) -1, 1-dihydro-1, 2-benziodoxol-3- (1H) -one; DMAP for 4-dimethylamino-pyridine; DME for 1, 2-dimethoxyethane; DMF for N, N-dimethylformamide; DMSO for dimethyl sulfoxide; DMT for di (p-methoxyphenyl) -phenylmethyl or dimethoxytrityl; DMTMM for 4- (4, 6-dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methylmorpholin-4-ium chloride; DPPA for diphenylphosphoryl azide; EDC for N- (3-dimethylaminopropyl) -N’-ethylcarbodiimide; EDC HCl for N- (3-dimethylaminopropyl) -N’-ethylcarbodiimide hydrochloride; EDTA for ethylenediamine tetraacetic acid; EtOAc for ethyl acetate; EtOH for ethanol; Et2O for diethyl ether; Fmoc for 9-fluorenylmethoxycarbonyl; HATU for O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N’, N’, -tetramethyluronium Hexafluoro-phosphate; HCl for hydrogen chloride; HOBT (HOBt) for 1-hydroxybenzotriazole; hr for hour (s) ; K2CO3 for potassium carbonate; K4 [Fe (CN) 6] for tetrapotassium hexacyanoferrate trihydrate; n-BuLi for n-butyl lithium; i-BuLi for i-butyl lithium; t-BuLi for t-butyl lithium; PhLi for phenyl lithium; LDA for lithium diisopropylamide; LiTMP for lithium 2, 2, 6, 6-tetramethyl-piperidinate; MeOH for methanol; Mg for magnesium; min for minute (s) ; MOM for methoxymethyl; Ms for mesyl or -SO2-CH3; Ms2O for methanesulfonic anhydride or mesyl-anhydride; MTBE for t-butyl methyl ether; NaN (TMS) 2 for sodium bis (trimethylsilyl) amide; NaCl for sodium chloride; NaH for sodium hydride; NaHCO3 for sodium bicarbonate or sodium hydrogen carbonate; Na2CO3 for sodium carbonate; NaOH for sodium hydroxide; Na2SO4 for sodium sulfate; NaHSO3 for sodium bisulfite or sodium hydrogen sulfite; Na2S2O3 for sodium thiosulfate; NBS for N-bromosuccinimide; NH2NH2 for hydrazine; NH4HCO3 for ammonium bicarbonate; NH4Cl for ammonium chloride; NMO for N-methyl-morpholine N-oxide; NaIO4 for sodium periodate; Ni for nickel; NSFI for N-fluorobenzene-sulfonimide; OH for hydroxyl; o / n for overnight; OsO4 for osmium tetroxide; PE for petroleum ether; PTSA for p-toluenesulfonic acid; PPTS for pyridinium p-toluenesulfonate; TBAF for tetrabutyl-ammonium fluoride; TBDMS (TBS) for t-butyldimethylsilyl; TBDPS for t-butyldiphenylsilyl; TCFH for N, N, N', N'-Tetramethylchloroformamidinium hexafluorophosphate; TEA or Et3N for triethylamine; TES for triethylsilyl; TESCl for triethylsilyl chloride; TESOTf for triethylsilyl trifluoro-methanesulfonate; TFA for trifluoroacetic acid; THF for tetrahydro-furan; TMEDA for N, N, N’, N’-tetramethylethylene-diamine; TPP or PPh3 for triphenyl-phosphine; Troc for 2, 2, 2-trichloroethyl carbonyl; Ts for tosyl or –SO2-C6H4CH3; Ts2O for tolylsulfonic anhydride or tosyl-anhydride; TsOH for p-tolylsulfonic acid; Pd for palladium; Ph for phenyl; PdOH for palladium hydroxide; POPd for dihydrogen dichlorobis (di-tert-butylphosphinito-P) palladate (II) ; Pd2 (dba) 3 for tris (dibenzylideneacetone) dipalladium (0) ; Pd (PPh3) 4 for tetrakis (triphenyl-phosphine) palladium (0) ; PdCl2 (PPh3) 2  for trans-dichlorobis- (triphenylphosphine) palladium (II) ; Pt for platinum; Rh for rhodium; rt for room temperature; Ru for ruthenium; satd. For saturated; SFC for supercritical fluid chromatography; TBS for tert-butyl dimethylsilyl; TMS for trimethylsilyl; or TMSCl for trimethylsilyl chloride; Zn for zinc (powder) ; Zn (CN) 2 for zinc cyanide.

[0109] “PG” is the abbreviation of protecting group, such as hydroxyl protecting group, or amino protecting group, which is as defined above.

[0110] The abbreviation “PABC” refers to the self-immolative spacer:

[0111] The abbreviation “MC” refers to the stretcher maleimidocaproyl:

[0112] The abbreviation “MsP” refers to the stretcher BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0113] Fig. 1 shows the western blot to detect the enzyme uPA in the A431 tumor leaching solution and homogenate.

[0114] Fig. 2 shows the cytotoxicity of tripeptide-based ADCs with Ag+ cancer cells without / with uPA enzyme.

[0115] Fig. 3 shows the cytotoxicity of tripeptide-based ADCs with Ag-cancer cells without / with uPA enzyme.

[0116] Fig. 4 shows the human plasma stability of ADCs of a) RP007T2-LP13; b) RP007T2-LP17; and c) RP007T2-MC-GGFG-DXd.

[0117] Fig. 5 shows the pharmacokinetics of ADCs of ADC1 (RP007T2-LP13) and ADC2 (RP007T2-LP17) .

[0118] Fig. 6 shows a) tumor volume change and b) body weight change of the A431 cells mouse tumor model after the administration of ADC of RP007T2-LP13, RP007T2-LP17 or RP007T2-MC-GGFG-DXd.

[0119] Fig. 7 shows the human plasma stability of ADCs of a) RP007T2-LP35; b) RP007T2-LP36; and c) RP007T2-MC-GGFG-DXd.

[0120] Fig. 8 shows the pharmacokinetics of ADCs of RP007T2-LP35 and RP007T2-LP36.

[0121] Fig. 9 shows a) tumor volume change and b) body weight change of the A431 cells mouse tumor model after the administration of ADCs of RP007T2-LP35, RP007T2-LP36 and RP007T2-MC-GGFG-DXd.

[0122] Fig. 10 shows the body weight change of the female and male BALB / c mice after the administration of ADC of RP007T2-LP35 or RP007T2-LP36.

[0123] Fig. 11 shows the hematology test results of the female and male BALB / c mice after the administration of ADC of RP007T2-LP35 or RP007T2-LP36.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0124] As used herein, the term “compound disclosed herein” refers to the following compounds of formulae (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof.

[0125] In the present disclosure, compounds are named generally described herein using standard nomenclature. For compounds having an asymmetric center, it should be understood, unless otherwise stated, that all optical  isomers and mixtures thereof are included. Furthermore, unless otherwise specified, all isomer compounds and carbon-carbon double bonds included in the present disclosure may occur in the form of Z and E. Compounds that exist in different tautomeric forms, one of which is not limited to any particular tautomer, but is intended to cover all tautomeric forms.

[0126] I. Compound

[0127] In one embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0128] S-D (X)

[0129] wherein,

[0130] S is a linker, and the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-;

[0131] P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;

[0132] P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;

[0133] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof;

[0134] D is a drug moiety.

[0135] In another embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0136] L-P-Y-D (I)

[0137] wherein,

[0138] L is represented by L1-L2-X-;

[0139] L1 is a ligand covalent binding moiety, and alternatively is selected from

[0140] -L2-X-is a stretcher unit;

[0141] L2 is selected from C1-20 alkylene, -C2-20 alkenylene, and C2-20 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 non-adjacent carbon atoms in C1-20 alkylene can be optionally replaced with O or S;

[0142] X is absent or -C (O) -;

[0143] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0144] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0145] Y is a spacer unit;

[0146] D is a drug moiety;

[0147] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0148] P3 is selected from serine or an analog thereof;

[0149] P2 is selected from glycine or an analog thereof;

[0150] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof.

[0151] 1.1 Variables

[0152] S

[0153] In a specific embodiment, S is a linker, and the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-.

[0154] In a specific embodiment, the linker S further comprises a cleavable linker or a non-cleavable linker.

[0155] In a specific embodiment, the cleavable linker comprises an acid-labile linker a hydrophilic linker, a protease-sensitive linker, photolabile linker, a hydrazone linker, a dimethyl linker or a disulfide-containing linker.

[0156] L

[0157] In a specific embodiment, L is represented by L1-L2-X-.

[0158] In a specific embodiment, L is wherein m is 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8; alternatively, m is selected from 4, 5 or 6, yet alternatively is 5.

[0159] In a specific embodiment, L is wherein m is 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8; alternatively, m is selected from 3, 4, 5 or 6, yet alternatively is 4.

[0160] In a specific embodiment, L is wherein n is 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8; alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, yet alternatively is 3.

[0161] In a specific embodiment, L is unsubstituted; in another specific embodiment, L is substituted with 1 RL group; in another specific embodiment, L is substituted with 2 RL groups; in another specific embodiment, L is substituted with 3 RL groups; in another specific embodiment, L is substituted with 4 RL groups; in another specific embodiment, L is substituted with 5 RL groups.

[0162] In a specific embodiment, RL is H; in another specific embodiment, RL is D; in another specific embodiment, RL is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, RL is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, RL is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, RL is C1-4 haloalkyl.

[0163] L1

[0164] In a specific embodiment, L1 is a ligand covalent binding moiety; in a specific embodiment, L1 is capable of forming a covalent bond with a functional group of an amino acid; in a specific embodiment, L1 is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid; in another specific embodiment, L1 is in another specific embodiment, L1 is

[0165] L2 and X

[0166] In a specific embodiment, -L2-X-is a stretcher unit.

[0167] In a specific embodiment, L2 is selected from C1-20 alkylene, -C2-20 alkenylene, and C2-20 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 non-adjacent carbon atoms in C1-20 alkylene can be optionally replaced with O or S; in another specific embodiment, L2 is C1-10 alkylene; in another specific embodiment, L2 is -C0-4 alkylene- (C1-4 alkylene-O) 1-10-C0-4 alkylene-; in another specific embodiment, L2 is -C2-10 alkenylene; in another specific embodiment, L2 is C2-10 alkynylene; in another specific embodiment, L2 is -C0-4 alkylene- (O-C1-4 alkylene) 1-10-C0-4 alkylene-; in another specific embodiment, L2 is - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-10- (CH2) 0-4-; in another specific embodiment, L2 is - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-10- (CH2) 0-4-.

[0168] In a specific embodiment, L2 is C1-10 alkylene, wherein, 1, 2, 3, 4 or 5 non-adjacent carbon atoms in C1-10 alkylene can be optionally replaced with O or S; in another specific embodiment, L2 is - (C1-4 alkylene-O) 1-6-; in another specific embodiment, L2 is - (O-C1-4 alkylene) 1-6-; in another specific embodiment, L2 is - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-6- (CH2) 0-4-; in another specific embodiment, L2 is - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-6- (CH2) 0-4-; in another specific embodiment, L2 is -C2-10 alkenylene; in another specific embodiment, L2 is C2-10 alkynylene.

[0169] In a specific embodiment, X is absent; in another specific embodiment, X is -C (O) -.

[0170] P

[0171] In a specific embodiment, P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, and P1 is connected to Y.

[0172] P3

[0173] In a specific embodiment, P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof.

[0174] In a specific embodiment, P3 is selected from serine or an analog thereof.

[0175] In a specific embodiment, P3 is wherein, “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration, or the mixture thereof.

[0176] In a specific embodiment, Rc1 is H; in another specific embodiment, Rc1 is OH; in another specific embodiment, Rc1 is CN; in another specific embodiment, Rc1 is NH2; in another specific embodiment, Rc1 is halogen; in another specific embodiment, Rc1 is O-PG; in another specific embodiment, Rc1 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rc1 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rc1 is C1-6 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc1 is C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc1 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rc1 is C3-10 cycloalkyl; in another specific embodiment, Rc1 is 3-to 10-membered heterocyclyl; in another specific embodiment, Rc1 is 5-to 10-membered heteroaryl, such as 5-to 6-membered heteroaryl; in another specific embodiment, Rc1 is C6-10 aryl, such as phenyl.

[0177] In a specific embodiment, Rc2 is H; in another specific embodiment, Rc2 is OH; in another specific embodiment, Rc2 is CN; in another specific embodiment, Rc2 is NH2; in another specific embodiment, Rc2 is  halogen; in another specific embodiment, Rc2 is O-PG; in another specific embodiment, Rc2 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rc2 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rc2 is C1-6 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc2 is C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc2 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rc2 is C3-10 cycloalkyl; in another specific embodiment, Rc2 is 3-to 10-membered heterocyclyl; in another specific embodiment, Rc2 is 5-to 10-membered heteroaryl, such as 5-to 6-membered heteroaryl; in another specific embodiment, Rc2 is C6-10 aryl, such as phenyl.

[0178] In a specific embodiment, Rc3 is H; in another specific embodiment, Rc3 is OH; in another specific embodiment, Rc3 is CN; in another specific embodiment, Rc3 is NH2; in another specific embodiment, Rc3 is halogen; in another specific embodiment, Rc3 is O-PG; in another specific embodiment, Rc3 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rc3 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rc3 is C1-6 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc3 is C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc3 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rc3 is C3-10 cycloalkyl; in another specific embodiment, Rc3 is 3-to 10-membered heterocyclyl; in another specific embodiment, Rc3 is 5-to 10-membered heteroaryl, such as 5-to 6-membered heteroaryl; in another specific embodiment, Rc3 is C6-10 aryl, such as phenyl.

[0179] In a specific embodiment, Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-7 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form 3-to 10-membered heterocyclylene.

[0180] In a specific embodiment, Rc1 is unsubstituted; in another specific embodiment, Rc1 is substituted with 1 Rc group; in another specific embodiment, Rc1 is substituted with 2 Rc groups; in another specific embodiment, Rc1 is substituted with 3 Rc groups.

[0181] In a specific embodiment, Rc2 is unsubstituted; in another specific embodiment, Rc2 is substituted with 1 Rc group; in another specific embodiment, Rc2 is substituted with 2 Rc groups; in another specific embodiment, Rc2 is substituted with 3 Rc groups.

[0182] In a specific embodiment, Rc3 is unsubstituted; in another specific embodiment, Rc3 is substituted with 1 Rc group; in another specific embodiment, Rc3 is substituted with 2 Rc groups; in another specific embodiment, Rc3 is substituted with 3 Rc groups.

[0183] In a specific embodiment, c is 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6.

[0184] In a specific embodiment, P3 is unsubstituted; in another specific embodiment, P3 is substituted with 1 Rc group; in another specific embodiment, P3 is substituted with 2 Rc groups; in another specific embodiment, P3 is substituted with 3 Rc groups; in another specific embodiment, P3 is substituted with 4 Rc groups; in another specific embodiment, P3 is substituted with 5 Rc groups.

[0185] In a specific embodiment, Rc is H; in another specific embodiment, Rc is OH; in another specific embodiment, Rc is CN; in another specific embodiment, Rc is NH2; in another specific embodiment, Rc is halogen; in another specific embodiment, Rc is PG; in another specific embodiment, Rc is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rc is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rc is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rc is C1-4 haloalkyl; in another specific embodiment, Rc is C1-6 alkoxyl, such as C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, Rc is C1-6 haloalkoxyl.

[0186] In a specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is  in another specific embodiment, P3 is in another specific embodiment, P3 is

[0187] P2

[0188] In a specific embodiment, P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof.

[0189] In a specific embodiment, P2 is selected from glycine or an analog thereof.

[0190] In a specific embodiment, P2 is wherein, “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration, or the mixture thereof.

[0191] In a specific embodiment, Rb1 is H; in another specific embodiment, Rb1 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rb1 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rb1 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rb1 is - (CH2) 1-6-OH; in another specific embodiment, Rb1 is - (CH2) 1-4-OH.

[0192] In a specific embodiment, Rb2 is H; in another specific embodiment, Rb2 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rb2 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rb2 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, Rb2 is - (CH2) 1-6-OH; in another specific embodiment, Rb2 is - (CH2) 1-4-OH.

[0193] In a specific embodiment, Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-7 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene; in another specific embodiment, Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form 3-to 10-membered heterocyclylene.

[0194] In a specific embodiment, P2 is unsubstituted; in another specific embodiment, P2 is substituted with 1 Rb group; in another specific embodiment, P2 is substituted with 2 Rb groups; in another specific embodiment, P2 is substituted with 3 Rb groups; in another specific embodiment, P2 is substituted with 4 Rb groups; in another specific embodiment, P2 is substituted with 5 Rb groups.

[0195] In a specific embodiment, Rb is H; in another specific embodiment, Rb is halogen; in another specific  embodiment, Rb is PG; in another specific embodiment, Rb is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rb is C1-6 haloalkyl.

[0196] In a specific embodiment, P2 is in another specific embodiment, P2 is in another specific embodiment, P2 is in another specific embodiment, P2 is

[0197] P1

[0198] In a specific embodiment, P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof.

[0199] In a specific embodiment, P1 is selected from wherein, “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration, or the mixture thereof.

[0200] In a specific embodiment, La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S; in another specific embodiment, La is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; in another specific embodiment, La is -CH2-; in another specific embodiment, La is -CH2CH2-; in another specific embodiment, La is CH2CH2CH2-; in another specific embodiment, La is -CH2OCH2CH2-.

[0201] In a specific embodiment, Xa is bond; in another specific embodiment, Xa is -NR-.

[0202] In a specific embodiment, R is H; in another specific embodiment, R is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, R is C1-4 alkyl.

[0203] In a specific embodiment, R1 is H; in another specific embodiment, R1 is Boc; in another specific embodiment, R1 is NR’R”, such as NH2; in another specific embodiment, R1 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, R1 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, R1 is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, R1 is -OR’; in another specific embodiment, R1 is -C (O) R’; in another specific embodiment, R1 is -C (O) OR’; in another specific embodiment, R1 is -C (O) OH; in another specific embodiment, R1 is -C (O) O-C1-4 alkyl; in another specific embodiment, R1 is -C (NH) NR’R”; in another specific embodiment, R1 is -C (NH) NH2; in another specific embodiment, R1 is -C (O) NR’R”; in another specific embodiment, R1 is -C (O) NH2; in another specific embodiment, R1 is -C (O) NH-C1-4 alkyl; in another specific embodiment, R1 is -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH.

[0204] In a specific embodiment, R’ is H; in another specific embodiment, R’ is halogen; in another specific embodiment, R’ is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, R’ is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, R’ is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, R’ is -C1-6 alkylene-CN; in another specific embodiment, R’ is -C1-6 alkylene-NH2; in another specific embodiment, R’ is -C1-6 alkylene-OH; in another specific embodiment, R’ is -C1-4 alkylene-OH.

[0205] In a specific embodiment, R” is H; in another specific embodiment, R” is halogen; in another specific embodiment, R” is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, R” is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, R” is C1-6 haloalkyl; in another specific embodiment, R” is -C1-6 alkylene-CN; in another specific embodiment, R” is -C1-6 alkylene-NH2; in another specific embodiment, R” is -C1-6 alkylene-OH; in another specific embodiment, R”  is -C1-4 alkylene-OH.

[0206] In a specific embodiment, P1 is unsubstituted; in another specific embodiment, P1 is substituted with 1 Ra group; in another specific embodiment, P1 is substituted with 2 Ra groups; in another specific embodiment, P1 is substituted with 3 Ra groups; in another specific embodiment, P1 is substituted with 4 Ra groups; in another specific embodiment, P1 is substituted with 5 Ra groups.

[0207] In a specific embodiment, Ra is H; in another specific embodiment, Ra is halogen; in another specific embodiment, Ra is PG; in another specific embodiment, Ra is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Ra is C1-6 haloalkyl.

[0208] In a specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment, P1 is in another specific embodiment,  P1 is in another specific embodiment, P1 is

[0209] In some embodiments, PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytrityl.

[0210] Y

[0211] In a specific embodiment, Y is a spacer unit.

[0212] In a specific embodiment, Y comprises a self-immolative spacer unit.

[0213] In a specific embodiment, Y is in another specific embodiment, Y is

[0214] In a specific embodiment, RY1 is H; in another specific embodiment, RY1 is halogen; in another specific embodiment, RY1 is OH; in another specific embodiment, RY1 is CN; in another specific embodiment, RY1 is C1-6 alkyl, such as C1-4 alkyl; in another specific embodiment, RY1 is C1-6 alkoxyl, such as C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, RY1 is C1-6 haloalkyl, such as C1-4 haloalkyl; in another specific embodiment, RY1 is C1-6 haloalkoxyl, such as C1-4 haloalkoxyl.

[0215] In a specific embodiment, RY2 is H; in another specific embodiment, RY2 is halogen; in another specific embodiment, RY2 is OH; in another specific embodiment, RY2 is CN; in another specific embodiment, RY2 is C1-6 alkyl, such as C1-4 alkyl; in another specific embodiment, RY2 is C1-6 alkoxyl, such as C1-4 alkoxyl; in another specific embodiment, RY2 is C1-6 haloalkyl, such as C1-4 haloalkyl; in another specific embodiment, RY2 is C1-6 haloalkoxyl, such as C1-4 haloalkoxyl.

[0216] In a specific embodiment, p is 0, 1, or 2.

[0217] In a specific embodiment, q is 0, 1, 2, 3 or 4.

[0218] In a specific embodiment, Y is in another specific embodiment, Y is (PABC) .

[0219] D

[0220] In a specific embodiment, the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune  modulatory agents and chelating ligand.

[0221] In a specific embodiment, the drug moiety D is a tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor, which is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, eribulin and rhizoxin.

[0222] In a specific embodiment, the drug moiety D is an antibiotic, which is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines.

[0223] In a specific embodiment, the drug moiety D is a DNA synthesis inhibitor, which is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) .

[0224] In a specific embodiment, the drug moiety D is a topoisomerase I inhibitor, which is selected from a group consisting of camptothecin and camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) .

[0225] In a specific embodiment, the drug moiety D is an immune modulatory agent, which is selected from a group consisting of TRL7 agonists, TLR8 agonists, STING agonists and RIG-I agonists.

[0226] In a specific embodiment, the drug moiety D is in another specific embodiment, the drug moiety D is in another specific embodiment, the drug moiety D is

[0227] In a specific embodiment, the drug moiety D is derived from the compound of formula (D-I) or (D-II) :

[0228] wherein, the variables Rd1, Rd2 and Rd3 are as defined in the context.

[0229] In a specific embodiment, the drug moiety D is derived from the following compound:

[0230] In a specific embodiment, the drug moiety D is selected from the compound of formula (D-I) or (D-II) :

[0231] wherein, the indicates the attachment site to the rest of the compound;

[0232] the variables Rd1, Rd2 and Rd3’ are as defined in the context.

[0233] In a specific embodiment, the drug moiety D is selected from the following compound:

[0234] In a specific embodiment, the drug moiety D is

[0235] Rd1 and Rd2

[0236] In a specific embodiment, Rd1 is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rd1 is C1-6 alkoxyl; in another specific embodiment, Rd1 is C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rd1 is C1-4 alkoxyl, such as Me or OMe.

[0237] In a specific embodiment, Rd2 is halogen; in another specific embodiment, Rd2 is F.

[0238] In a specific embodiment, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-10 membered heterocyclylene or 5-10 membered heteroarylene, which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-6 membered heterocyclylene or 5-6 membered heteroarylene (preferably form 5-6 membered heterocyclylene) , which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-4 alkyl; in another specific embodiment, Rd1, Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form

[0239] Rd3

[0240] In a specific embodiment, Rd3 is - (CH2) p-ORda; in another specific embodiment, Rd3 is - (CH2) p-C (O) ORda; in another specific embodiment, Rd3 is - (CH2) p-NHC (O) -Rda; in another specific embodiment, Rd3 is - (CH2) p-CH2NRdbRdc.

[0241] In a specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is

[0242] In a specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is in another specific embodiment, Rd3 is

[0243] Rd3’

[0244] In a specific embodiment, Rd3’ is - (CH2) p-ORda’-; in another specific embodiment, Rd3’ is - (CH2) p- C (O) ORda’-; in another specific embodiment, Rd3’ is - (CH2) p-NHC (O) -Rda’-; in another specific embodiment, Rd3’ is - (CH2) p-CH2NRdbRdc’-.

[0245] In a specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is  in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is

[0246] In a specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is in another specific embodiment, Rd3’ is

[0247] Rda, Rdb and Rdc

[0248] In a specific embodiment, Rda is H; in another specific embodiment, Rda is C1-6 alkyl; in another specific embodiment, Rda is C1-6 alkylene-OH; in another specific embodiment, Rda is C1-6 alkylene-NH2; in another specific embodiment, Rda is CH3; in another specific embodiment, Rda is CH2OH; in another specific embodiment, Rda is CH2CH2OH; in another specific embodiment, Rda is CH2CH2NH2.

[0249] In a specific embodiment, Rdb is H; in another specific embodiment, Rdb is C1-6 alkyl, such as CH3.

[0250] In a specific embodiment, Rdc is H; in another specific embodiment, Rdc is C1-6 alkyl, such as CH3.

[0251] Rda’ and Rdc’

[0252] In a specific embodiment, Rda’ is bond; in another specific embodiment, Rda’ is C1-6 alkylene; in another specific embodiment, Rda’ is -C1-6 alkylene-O-; in another specific embodiment, Rda’ is -C1-6 alkylene-NH-; in  another specific embodiment, Rda’ is -CH2-; in another specific embodiment, Rda’ is -CH2O-; in another specific embodiment, Rda’ is -CH2CH2O-; in another specific embodiment, Rda’ is -CH2CH2NH-.

[0253] In a specific embodiment, Rdc’ is bond; in another specific embodiment, C1-6 alkylene, such as -CH2-.

[0254] p

[0255] In a specific embodiment, each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6.

[0256] Any technical solution in any one of the above specific embodiments, or any combination thereof, may be combined with any technical solution in other specific embodiments or any combination thereof. For example, any technical solution of L or any combination thereof may be combined with any technical solution of Y, P, D or any combination thereof. The present disclosure is intended to include all combination of such technical solutions, which are not exhaustively listed here to save space.

[0257] 1.2 Embodiments

[0258] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0259] L is represented by L1-L2-X-;

[0260] L1 is a ligand covalent binding moiety, and alternatively is selected from

[0261] -L2-X-is a stretcher unit;

[0262] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (C1-4 alkylene-O) 1-6-, - (O-C1-4 alkylene) 1-6-, -C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0263] X is absent or -C (O) -;

[0264] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0265] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl.

[0266] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0267] L is represented by L1-L2-X-;

[0268] L1 is selected from

[0269] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-6- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-6- (CH2) 0-4-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0270] X is absent or -C (O) -;

[0271] L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;

[0272] RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl.

[0273] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0274] L is selected from

[0275] m and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;

[0276] alternatively, m is selected from 4, 5 or 6, alternatively is 5;

[0277] alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3.

[0278] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0279] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0280] wherein, P3 is

[0281] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;

[0282] or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0283] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0284] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0285] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0286] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0287] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0288] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0289] P1 is selected from

[0290] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;

[0291] Xa is bond or -NR-;

[0292] R is H or -C1-4 alkyl;

[0293] R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0294] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene- NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0295] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0296] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0297] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0298] PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytrityl.

[0299] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0300] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0301] wherein, P3 is

[0302] Rc1 is selected from OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0303] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;

[0304] Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0305] c is 0, 1 or 2;

[0306] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0307] P1 is selected from

[0308] La is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O;

[0309] alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;

[0310] Xa is bond or -NR-;

[0311] R is H or -C1-4 alkyl;

[0312] R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;

[0313] R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH.

[0314] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0315] R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;

[0316] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0317] yet alternatively,

[0318] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0319] wherein, P3 is selected from:

[0320] P2 is selected from:

[0321] P1 is selected from:

[0322] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0323] Y is selected from:

[0324] RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0325] RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0326] p is 0, 1, or 2;

[0327] q is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0328] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0329] Y is selected from:

[0330] RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0331] RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0332] p is 0, 1, or 2;

[0333] q is 0, 1, or 2.

[0334] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0335] Y is selected from:

[0336] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0337] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors and topoisomerase I inhibitors.

[0338] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the drug moiety D is a tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor, which is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, and rhizoxin.

[0339] the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;

[0340] the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;

[0341] wherein the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) .

[0342] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0343] D is selected from:

[0344] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0345] L is represented by L1-L2-X-;

[0346] L1 is a ligand covalent binding moiety, and alternatively is selected from

[0347] -L2-X-is a stretcher unit;

[0348] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (C1-4 alkylene-O) 1-6-, - (O-C1-4 alkylene) 1-6-, -C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0349] X is absent or -C (O) -;

[0350] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0351] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0352] Y is selected from:

[0353] RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0354] RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0355] p is 0, 1, or 2;

[0356] q is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0357] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors and topoisomerase I inhibitors;

[0358] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0359] wherein, P3 is

[0360] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;

[0361] or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3- to 10-membered heterocyclylene;

[0362] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0363] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0364] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0365] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0366] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0367] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0368] P1 is selected from

[0369] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;

[0370] Xa is bond or -NR-;

[0371] R is H or -C1-4 alkyl;

[0372] R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0373] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0374] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0375] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0376] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0377] PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytrityl.

[0378] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0379] L is represented by L1-L2-X-;

[0380] L1 is selected from

[0381] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-6- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-6- (CH2) 0-4-, C2-10  alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0382] X is absent or -C (O) -;

[0383] L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;

[0384] RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0385] Y is selected from:

[0386] RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0387] RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0388] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors and topoisomerase I inhibitors;

[0389] wherein the tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, and rhizoxin;

[0390] the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;

[0391] the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;

[0392] the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) ;

[0393] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0394] wherein, P3 is

[0395] Rc1 is selected from OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0396] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;

[0397] Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0398] c is 0, 1 or 2;

[0399] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0400] P1 is selected from

[0401] La is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;

[0402] Xa is bond or -NR-;

[0403] R is H or -C1-4 alkyl;

[0404] R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;

[0405] R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH;

[0406] alternatively, R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;

[0407] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration.

[0408] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein:

[0409] L is selected from

[0410] m and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;

[0411] alternatively, m is selected from 4, 5 or 6, alternatively is 5;

[0412] alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;

[0413] Y is selected from:

[0414] D is selected from:

[0415] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0416] wherein, P3 is selected from:

[0417] P2 is selected from:

[0418] P1 is selected from:

[0419] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is selected from:

[0420] wherein, m, n, P3, P2 and P1 are as defined in the context;

[0421] alternatively,

[0422] m is selected from 4, 5 or 6, alternatively is 4 or 5;

[0423] n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3.

[0424] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-VGR-DXD:

[0425] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGR-DXD:

[0426] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-VGR-PABC-MMAE:

[0427] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGR-PABC-MMAE:

[0428] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGC-DXD:

[0429] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SAC-DXD:

[0430] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-SGC-DXD:

[0431] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-S (tBu) GC-DXD:

[0432] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGOrn (Boc) -DXD:

[0433] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGC-PABC-Exatecan:

[0434] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGO (DEt) -PABC-Exatecan:

[0435] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGE-PABC-Exatecan:

[0436] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGE (tBu) -PABC-Exatecan:

[0437] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGC (Me) -PABC-Exatecan:

[0438] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGC (Peg) -PABC-Exatecan:

[0439] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-TGC-PABC-Exatecan:

[0440] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGhC (O) -PABC-Exatecan:

[0441] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-YSR-PABC-Exatecan:

[0442] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGE-DXD:

[0443] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGC (Peg) -DXD:

[0444] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-TSR-DXD:

[0445] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-YSR-DXD:

[0446] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGO-DXD:

[0447] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGK-DXD:

[0448] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is Mal-PEG4-VGR-DXD:

[0449] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is  Mal-PEG4-SGR-DXD:

[0450] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGhR-DXD:

[0451] In a specific embodiment, the present disclosure refers to a compound of the formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MC-SGN-DXD:

[0452] 1.3 Prefered Embodiments

[0453] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0454] S-D (X)

[0455] wherein,

[0456] S is a linker, and the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-;

[0457] P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;

[0458] P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;

[0459] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof;

[0460] D is a drug moiety.

[0461] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0462] the linker S further comprises a cleavable linker or a non-cleavable linker;

[0463] alternatively, the cleavable linker comprises an acid-labile linker a hydrophilic linker, a protease-sensitive linker, photolabile linker, a hydrazone linker, a dimethyl linker or a disulfide-containing linker.

[0464] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) , wherein, the compound has the structure of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0465] L-P-Y-D (I)

[0466] L is represented by L1-L2-X-;

[0467] L1 is a ligand covalent binding moiety,

[0468] -L2-X-is a stretcher unit;

[0469] Y is a spacer unit;

[0470] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0471] P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;

[0472] P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;

[0473] P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof

[0474] D is a drug moiety.

[0475] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0476] wherein, P3 is

[0477] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;

[0478] or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0479] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0480] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0481] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl, alternatively selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0482] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0483] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0484] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0485] P1 is selected from

[0486] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;

[0487] Xa is bond or -NR-;

[0488] R is H or -C1-4 alkyl;

[0489] R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0490] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0491] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0492] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0493] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0494] PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytritylalternatively,

[0495] alternatively,

[0496] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0497] wherein, P3 is

[0498] Rc1 is selected from H, OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0499] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;

[0500] Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl, C1-4 alkoxyl and C1-4 haloalkyl, alternatively selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0501] c is 0, 1 or 2;

[0502] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0503] P1 is selected from

[0504] La is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-, CH2CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;

[0505] Xa is bond or -NR-;

[0506] R is H or -C1-4 alkyl;

[0507] R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’, preferably selected from H, Boc, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;

[0508] R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH;

[0509] alternatively, R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;

[0510] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0511] yet alternatively,

[0512] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0513] wherein, P3 is selected from:  alternatively selected from:

[0514] P2 is selected from:

[0515] P1 is selected from:

[0516] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0517] L is represented by L1-L2-X-;

[0518] L1 is a ligand covalent binding moiety, alternatively, L1 is capable of forming a covalent bond with a functional group of an amino acid, and still alternatively, L1 is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid;

[0519] -L2-X-is a stretcher unit;

[0520] L2 is selected from C1-20 alkylene, -C2-20 alkenylene, and C2-20 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 non-adjacent carbon atoms in C1-20 alkylene can be optionally replaced with O or S;

[0521] X is absent or -C (O) -;

[0522] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0523] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl.

[0524] alternatively,

[0525] L is represented by L1-L2-X-;

[0526] L1 is a ligand covalent binding moiety that is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid, and alternatively is selected from

[0527] -L2-X-is a stretcher unit;

[0528] L2 is selected from C1-10 alkylene, -C0-4 alkylene- (C1-4 alkylene-O) 1-10-C0-4 alkylene-, -C0-4 alkylene- (O-C1-4 alkylene) 1-10-C0-4 alkylene-, -C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0529] X is absent or -C (O) -;

[0530] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0531] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0532] alternatively,

[0533] L is represented by L1-L2-X-;

[0534] L1 is selected from

[0535] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-10- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-10- (CH2) 0-4-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0536] X is absent or -C (O) -;

[0537] L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;

[0538] RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0539] alternatively,

[0540] L is selected from

[0541] m and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;

[0542] alternatively, m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;

[0543] alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3.

[0544] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0545] Y is selected from:

[0546] RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0547] RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0548] p is 0, 1, or 2;

[0549] q is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0550] alternatively,

[0551] Y is selected from:

[0552] RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0553] RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0554] p is 0, 1, or 2;

[0555] q is 0, 1, or 2;

[0556] yet alternatively,

[0557] Y is selected from:

[0558] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0559] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand; alternatively,

[0560] wherein the tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as maytansine, maytansinol, DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, eribulin and rhizoxin;

[0561] the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;

[0562] the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;

[0563] wherein the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin and camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) ;

[0564] wherein the immune modulatory agent is selected from a group consisting of TRL7 agonists, TLR8 agonists, STING agonists and RIG-I agonists;

[0565] still alternatively,

[0566] D is selected from:

[0567] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof:

[0568] L is represented by L1-L2-X-;

[0569] L1 is a ligand covalent binding moiety that is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid, and alternatively is selected from

[0570] -L2-X-is a stretcher unit;

[0571] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (C1-4 alkylene-O) 1-10-, - (O-C1-4 alkylene) 1-10-, -C2-10 alkenylene, and C2-10  alkynylene;

[0572] X is absent or -C (O) -;

[0573] L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;

[0574] RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0575] Y is selected from:

[0576] RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0577] RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0578] p is 0, 1, or 2;

[0579] q is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0580] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand;

[0581] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0582] wherein, P3 is

[0583] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;

[0584] or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0585] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0586] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0587] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl, alternatively selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0588] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;

[0589] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0590] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0591] P1 is selected from

[0592] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced

[0593] with O or S;

[0594] Xa is bond or -NR-;

[0595] R is H or -C1-4 alkyl;

[0596] R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0597] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0598] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0599] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0600] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0601] PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytrityl.

[0602] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0603] L is represented by L1-L2-X-;

[0604] L1 is selected from

[0605] L2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-10- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-10- (CH2) 0-4-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;

[0606] X is absent or -C (O) -;

[0607] L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;

[0608] RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0609] Y is selected from:

[0610] RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0611] RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0612] the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand; wherein the tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins,  cryptophycins, eribulin and rhizoxin;

[0613] the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;

[0614] the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;

[0615] the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin and camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) ;

[0616] wherein the immune modulatory agent is selected from a group consisting of TRL7 agonists, TLR8 agonists, STING agonists and RIG-I agonists;

[0617] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0618] wherein, P3 is

[0619] Rc1 is selected from OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0620] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;

[0621] Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl, C1-4 alkoxyl and C1-4 haloalkyl, alternatively selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;

[0622] c is 0, 1 or 2;

[0623] P2 is Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;

[0624] P1 is selected from

[0625] La is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-, CH2CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;

[0626] Xa is bond or -NR-;

[0627] R is H or -C1-4 alkyl;

[0628] R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’, preferably selected from H, Boc, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;

[0629] R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH;

[0630] alternatively, R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;

[0631] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration.

[0632] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0633] L is selected from

[0634] m and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;

[0635] alternatively, m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;

[0636] alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;

[0637] Y is selected from:

[0638] D is selected from:

[0639] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0640] wherein, P3 is selected from:  alternatively selected from:

[0641] P2 is selected from:

[0642] P1 is selected from:  preferably selected from

[0643] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0644] L, Y and D are as defined in the context;

[0645] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0646] -P3-P2-P1-is

[0647] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0648] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;

[0649] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0650] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0651] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0652] Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH;

[0653] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0654] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0655] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;

[0656] Xa is bond or -NR-;

[0657] R is H or -C1-4 alkyl;

[0658] R1 is selected from Boc, C1-6 alkyl, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0659] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0660] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0661] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0662] alternatively

[0663] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0664] Rc1 is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;

[0665] Rc2 and Rc3 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;

[0666] c is 0, 1, 2 or 3;

[0667] Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0668] La is -C1-6 alkylene-;

[0669] Xa is -NR-;

[0670] R is H or -C1-4 alkyl;

[0671] R1 is selected from -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0672] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0673] alternatively,

[0674] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0675] Rc1 is selected from H, OH, CN, NH2 and halogen, preferably is OH;

[0676] Rc2 and Rc3 are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;

[0677] c is 0, 1 or 2, preferably is 0;

[0678] Rb1 and Rb2 are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;

[0679] La is -C1-6 alkylene-;

[0680] Xa is -NH-;

[0681] R1 is selected from -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably is -C (NH) NR’R”;

[0682] R’ and R” are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;

[0683] yet alternatively,

[0684] -P3-P2-P1-is

[0685] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein,

[0686] L, Y and D are as defined in the context;

[0687] P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;

[0688] -P3-P2-P1-is

[0689] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0690] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;

[0691] c is 0, 1, 2, 3 or 4;

[0692] P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;

[0693] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0694] Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH;

[0695] P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;

[0696] Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0697] La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;

[0698] Xa is bond or -NR-;

[0699] R is H or -C1-4 alkyl;

[0700] R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0701] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;

[0702] P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;

[0703] Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0704] alternatively

[0705] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0706] Rc1 and Rc2 are independently selected from H, halogen, OH and C1-6 alkoxyl;

[0707] Rc3 is selected from H, halogen, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) ;

[0708] c is 0, 1, 2 or 3;

[0709] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc group (s) ;

[0710] Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;

[0711] Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl and - (CH2) 1-6-OH;

[0712] La is -C1-6 alkylene-;

[0713] Xa is -NR-;

[0714] R is H or -C1-4 alkyl;

[0715] R1 is selected from -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;

[0716] R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;

[0717] alternatively,

[0718] “*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;

[0719] Rc1 and Rc2 are independently selected from H, OH and C1-4 alkoxyl, preferably is H;

[0720] Rc3 is selected from H, halogen, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , preferably is phenyl;

[0721] c is 0, 1 or 2, preferably is 0;

[0722] Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc group (s) ;

[0723] Rc is selected from H, OH, C1-6 alkyl and C1-6 alkoxyl;

[0724] Rb1 and Rb2 are independently selected from H and - (CH2) 1-4-OH, preferably is H or -CH2-OH;

[0725] La is -C1-6 alkylene-;

[0726] Xa is -NH-;

[0727] R1 is selected from -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably is -C (NH) NR’R”;

[0728] R’ and R” are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;

[0729] yet alternatively,

[0730] -P3-P2-P1-is

[0731] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is selected from:

[0732] wherein, m, n, P3, P2 and P1 are as defined in the context;

[0733] alternatively,

[0734] m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;

[0735] n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;

[0736] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-SGR-DXD:

[0737] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-YSR-DXD:

[0738] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-SGR-Exatecan:

[0739] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-YSR-Exatecan:

[0740] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is  MsP-SGR-PABC-Exatecan:

[0741] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-YSR-PABC-Exatecan:

[0742] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-SGE-DXD:

[0743] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-TSR-DXD:

[0744] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-SGK-DXD:

[0745] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is MsP-Y (Me) SR-DXD:

[0746] In some embodiments, the present disclosure refers to a compound of the formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is Mal-PEG8-SGR-PABC-Exatecan:

[0747] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein, the drug moiety D is derived from the compound of formula (D-I) or (D-II) :

[0748] Rd1 is C1-6 alkyl or C1-6 alkoxyl;

[0749] Rd2 is halogen;

[0750] or, preferably, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-10 membered heterocyclylene or 5-10 membered heteroarylene, which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-6 alkyl;

[0751] Rd3 is selected from - (CH2) p-ORda, - (CH2) p-C (O) ORda, - (CH2) p-NHC (O) -Rda and - (CH2) p-CH2NRdbRdc;

[0752] Rd3 is preferably selected from - (CH2) p-ORda, - (CH2) p-C (O) ORda and - (CH2) p-NHC (O) -Rda;

[0753] Rda is selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 alkylene-OH, C1-6 alkylene-NH2, such as H, CH3, CH2OH, CH2CH2OH and CH2CH2NH2;

[0754] Rdb and Rdc are independently selected from H and C1-6 alkyl, such as H and CH3;

[0755] each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;

[0756] alternatively,

[0757] Rd1 is C1-6 alkyl or C1-6 alkoxyl;

[0758] Rd2 is halogen;

[0759] or, preferably, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-6 membered heterocyclylene or 5-6 membered heteroarylene (preferably form 5-6 membered heterocyclylene) , which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-4 alkyl;

[0760] Rd3 is selected from preferably is

[0761] Rda, Rdb and Rdc are independently selected from H and C1-6 alkyl;

[0762] each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;

[0763] alternatively,

[0764] Rd1 is C1-4 alkyl or C1-4 alkoxyl, such as Me or OMe;

[0765] Rd2 is halogen, such as F;

[0766] or, preferably, Rd1, Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form

[0767] Rd3 is selected from

[0768] still alternatively, the drug moiety D is derived from the following compound:

[0769] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein, the drug moiety D is selected from the compound of formula (D-III) or (D-IV) :

[0770] wherein,

[0771] the indicates the attachment site to the rest of the compound;

[0772] Rd1 and Rd2 are as defined in the context;

[0773] Rd3’ is selected from - (CH2) p-ORda’-, - (CH2) p-C (O) ORda’-, - (CH2) p-NHC (O) -Rda’-and - (CH2) p-CH2NRdbRdc’-;

[0774] Rd3’ is preferably selected from - (CH2) p-ORda’-, - (CH2) p-C (O) ORda’-and - (CH2) p-NHC (O) Rda’-;

[0775] Rda’ is selected from bond, C1-6 alkylene, -C1-6 alkylene-O-and -C1-6 alkylene-NH-, such as bond, -CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-and -CH2CH2NH-;

[0776] Rdb is selected from H and C1-6 alkyl, such as H and CH3;

[0777] Rdc’ is selected from bond and C1-6 alkylene, such as bond and -CH2-;

[0778] each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;

[0779] alternatively,

[0780] Rd3’ is selected from such as,  preferably is

[0781] Rda’ and Rdc’ are independently selected from bond and C1-6 alkylene;

[0782] Rdb is selected from H and C1-6 alkyl;

[0783] each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6.

[0784] still alternatively,

[0785] the drug moiety D is selected from:

[0786] In some embodiments, the present disclosure refers to the compound of formula (X) or formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof, wherein the compound is selected from:

[0787] wherein, m, n, P3, P2 and P1 are as defined in the context;

[0788] alternatively,

[0789] m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;

[0790] n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;

[0791] still alternatively, the compound is selected from:

[0792] II. Conjugate

[0793] In one aspect of the disclosure, conjugates of the formula (II) are provided:

[0794] T- (S’-D) k (II)

[0795] wherein,

[0796] T is a targeting moiety;

[0797] S’ is a linker, which is a divalent group formed by the connection between S and T;

[0798] wherein, the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3, P2 and P1 are as defined in the context;

[0799] D is a drug moiety;

[0800] k ranges from 1 to about 20.

[0801] In some embodiments, the targeting moiety is selected from an antibody or an antigen binding fragment thereof, a ligand, or a targeting peptide.

[0802] In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen;

[0803] wherein the ligand binds to a receptor expressed on a tumor cell or an immune cell, or a receptor expressed in the  tumor microenvironment; and / or;

[0804] wherein targeting peptide binds to a target molecule expressed on a tumor cell or an immune cell, or a receptor expressed in the tumor microenvironment.

[0805] In some embodiments, the antibody or antigen binding fragment thereof, the ligand or the targeting peptide binds to a protein including, but are not limited to CD163, CD74, CXCR4, CD11, CD71, CD70, TNFRSF13c, CD30, IL-6, FRβ and TNFβ.

[0806] In some embodiments, the antibody is a monoclonal antibody. In some embodiments, the antibody is a bi-specific antibody. In some embodiments, the antibody is a multi-specific antibody.

[0807] In some embodiments, the antibody is a murine antibody. In some embodiments, the antibody is a chimeric antibody. In some embodiments, the antibody is a humanized antibody. In some embodiments, the antibody is or a human antibody.

[0808] In some embodiments, the antibody is of an isotype selected from the group consisting of IgG, IgA, IgM, IgE and IgD. In some embodiments, the antibody is of a subtype selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4.

[0809] In some embodiments, the antigen binding fragment is selected from the group consisting of Fab, Fab’, F (ab’) 2, Fv, scFv, and ds-scFv.

[0810] In some embodiments, k ranges from 1 to about 20; in other embodiments, k ranges from 1 to about 10; in other embodiments, k ranges from 2 to about 9; in other embodiments, k ranges from 4 to about 8; in other embodiments, k is about 1, about 2, about 3, about 4, about 5, about 6, about 7, about 8, about 9 or about 10.

[0811] In some embodiments, -S’-D is represented by formula (III) :

[0812] wherein the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0813] L’is represented by the formula of -L1’-L2-X-, wherein, L1’ is a divalent group formed by the connection between L1 and T;

[0814] L1, L2, P, Y and D are as defined in the context;

[0815] alternatively, L1’ is selected from yet alternatively, L1’ is selected from

[0816] In some embodiments, -S’-D is:

[0817] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0818] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0819] In some embodiments, -S’-D is:

[0820] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0821] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0822] In some embodiments, -S’-D is:

[0823] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0824] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0825] In some embodiments, -S’-D is:

[0826] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0827] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0828] In some embodiments, -S’-D is:

[0829] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0830] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0831] In some embodiments, -S’-D is:

[0832] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0833] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0834] In some embodiments, -S’-D is:

[0835] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0836] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0837] In some embodiments, -S’-D is:

[0838] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0839] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0840] In some embodiments, -S’-D is:

[0841] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0842] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0843] In some embodiments, -S’-D is:

[0844] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0845] m, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0846] In some embodiments, -S’-D is:

[0847] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0848] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0849] In some embodiments, -S’-D is:

[0850] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in  the context;

[0851] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0852] In some embodiments, -S’-D is:

[0853] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0854] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0855] In some embodiments, -S’-D is:

[0856] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0857] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0858] In some embodiments, -S’-D is:

[0859] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context;

[0860] n, P3, P2 and P1 are as defined in the context.

[0861] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-VGR-DXD:

[0862] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0863] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGR-DXD:

[0864] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0865] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-VGR-PABC-MMAE:

[0866] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0867] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGR-PABC-MMAE:

[0868] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0869] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGC-DXD:

[0870] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0871] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SAC-DXD:

[0872] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0873] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGC-DXD:

[0874] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0875] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-S (tBu) GC-DXD:

[0876] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0877] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGOrn (Boc) -DXD:

[0878] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0879] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGC-PABC-Exatecan:

[0880] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0881] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGO (DEt) -PABC-Exatecan:

[0882] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0883] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGE-PABC-Exatecan:

[0884] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0885] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGE (tBu) -PABC-Exatecan:

[0886] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0887] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGC (Me) -PABC-Exatecan:

[0888] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0889] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGC (Peg) -PABC-Exatecan:

[0890] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0891] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-TGC-PABC-Exatecan:

[0892] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0893] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGhC (O) -PABC-Exatecan:

[0894] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0895] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-YSR-PABC-Exatecan:

[0896] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0897] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGE-DXD:

[0898] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0899] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGC (Peg) -DXD:

[0900] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0901] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-TSR-DXD:

[0902] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0903] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-YSR-DXD:

[0904] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0905] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGO-DXD:

[0906] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0907] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGK-DXD:

[0908] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0909] In some specific embodiments, -S’-D is -Mal-PEG4-VGR-DXD:

[0910] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0911] In some specific embodiments, -S’-D is -Mal-PEG4-SGR-DXD:

[0912] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0913] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGhR-DXD:

[0914] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in  the context.

[0915] In some specific embodiments, -S’-D is -MC-SGN-DXD:

[0916] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0917] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGR-DXD:

[0918] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0919] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-YSR-DXD:

[0920] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0921] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGR-Exatecan:

[0922] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0923] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-YSR-Exatecan:

[0924] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0925] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGR-PABC-Exatecan:

[0926] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0927] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-YSR-PABC-Exatecan:

[0928] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0929] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGE-DXD:

[0930] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in  the context.

[0931] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-TSR-DXD:

[0932] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0933] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-SGK-DXD:

[0934] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0935] In some specific embodiments, -S’-D is -MsP-Y (Me) SR-DXD:

[0936] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0937] In some specific embodiments, -S’-D is -Mal-PEG8-SGR-PABC-Exatecan:

[0938] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0939] In some specific embodiments, -S’-D is:

[0940] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0941] In some specific embodiments, -S’-D is:

[0942] wherein, the indicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in the context.

[0943] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0944] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0945] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0946] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0947] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0948] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0949] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0950] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0951] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0952] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0953] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0954] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0955] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0956] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0957] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0958] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0959] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0960] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0961] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0962] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0963] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0964] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0965] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0966] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0967] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0968] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0969] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0970] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0971] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0972] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0973] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0974] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0975] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0976] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0977] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0978] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0979] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0980] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0981] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0982] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0983] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0984] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0985] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0986] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0987] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0988] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0989] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0990] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0991] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0992] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0993] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0994] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0995] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0996] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[0997] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[0998] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[0999] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1000] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1001] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1002] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1003] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1004] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1005] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1006] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1007] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1008] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1009] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1010] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1011] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1012] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1013] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1014] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1015] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1016] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1017] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1018] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1019] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1020] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1021] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1022] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1023] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1024] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1025] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1026] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1027] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1028] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1029] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1030] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1031] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1032] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1033] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1034] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1035] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1036] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1037] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1038] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1039] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1040] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1041] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1042] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1043] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1044] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1045] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1046] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1047] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1048] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1049] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1050] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1051] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1052] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1053] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1054] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1055] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1056] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof,

[1057] k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1058] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1059] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen;

[1060] and wherein k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1061] In some specific embodiments, wherein, the conjugate is:

[1062] wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen;

[1063] and wherein k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.

[1064] In some embodiments of any of the above conjugates, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen.

[1065] In some embodiments of any of the above conjugates, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor associated antigen; the tumor associated antigen (TAA) includes , but are not limited to HER2, TROP2, EGFR, FLOR2, MUC16, CEACAM, nectin4, CD19, CD33, MSLN, EpCAM, NaPi2b, ROR1, CLDN6, CLDN18.2, ROR2, LY6G6D, fibronectin, B7H3, B7H4, BCMA, TF, MET and others.

[1066] In some embodiments of any of the above conjugates, Ab is a TROP2 antibody.

[1067] In some embodiments, the Trop2 antibody comprises a heavy chain (HC) and a light chain (LC) , and wherein:

[1068] the HC comprises an amino acid sequence having at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%sequence identity to SEQ ID NO: 1, and the LC comprises an amino acid sequence having at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 98%, at least 99%, or 100%sequence identity to SEQ ID NO: 2.

[1069] III. Antibody

[1070] As used herein, the term “antibody” refers to an immunoglobulin molecule which has the ability to specifically bind to an antigen. An antibody often comprises a variable region and a constant region in each of a heavy chain and a light chain. The variable regions of the heavy and light chains of antibodies contain a binding domain that interacts with an antigen. The constant regions of antibodies may mediate the binding of the immunoglobulin to host tissues or factors, including various cells of the immune system (such as effector cells) and components of the complement system such as C1q, the first component in the classical pathway of complement activation. Most antibodies have a heavy chain variable region (VH) and a light chain variable region (VL) that together form the portion of the antibody that binds to the antigen.

[1071] A “light chain variable region” (VL) or “heavy chain variable region” (VH) consists of four “framework” regions interrupted by three “complementarity determining regions” or “CDRs” . The framework regions serve to align the CDRs for specific binding to an epitope of an antigen. The CDRs include the amino acid residues of an antibody that are primarily responsible for antigen binding. From amino-terminus to carboxyl-terminus, both VL and VH domains comprise the following framework (FR) and CDR regions: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, and FR4. CDRs 1, 2, and 3 of a VL domain are also referred to herein, respectively, as LCDR1, LCDR2, and LCDR3; CDRs 1, 2, and 3 of a VH domain are also referred to herein, respectively, as HCDR1, HCDR2, and HCDR3.

[1072] The term “antibody” as used herein should be understood in its broadest meaning, and includes monoclonal antibodies (including full-length monoclonal antibodies) , polyclonal antibodies, antibody fragments, and multi-specific antibodies containing at least two different antigen binding regions (e.g., bispecific antibodies) . The antibody may contain additional modifications, such as non-naturally occurring amino acids, mutations in Fc regions, and mutations in glycosylation sites. Antibodies also include post-translation modified antibodies, fusion proteins containing the antigenic determinants of the antibody, and immunoglobulin molecules containing any other modifications to antigen recognition sites, as long as these antibodies exhibit desired biological activity.

[1073] As used herein, the term “antigen binding fragment” of an antibody refers to one or more fragments of an antibody that retain the ability to specifically bind to an antigen. It has been shown that the antigen binding function of an antibody can be performed by fragments of a full-length antibody.

[1074] Examples of antigen binding fragment of an antibody include (i) a Fab fragment, a monovalent fragment consisting of the VL, VH, CL and CH1 domains; (ii) a F (ab') 2 fragment, a bivalent fragment comprising two Fab fragments linked by a disulfide bridge at the hinge region; (iii) a Fab' fragment, which is essentially an Fab with part of the hinge region (see, FUNDAMENTALIMMUNOLOGY (Paul ed., 3. sup. rd ed. 1993) ) ; (iv) a Fd fragment consisting of the VH and CH1 domains; (v) a Fd' fragment having VH and CH1 domains and one or more cysteine residues at the C-terminus of the CH1 domain; (vi) a Fv fragment consisting of the VL and VH domains of a single arm of an antibody, (vii) a dAb fragment (Ward et al., (1989) Nature 341: 544-546) , which consists of a VH domain; (viii) an isolated complementarity determining region (CDR) ; and (ix) a nanobody, a heavy chain variable region containing a single variable domain and two constant domains. Furthermore, although the two domains of the Fv fragment, V Land VH are coded for by separate genes, they can be joined, using recombinant methods, by a synthetic linker that enables them to be made as a single protein chain in which the VL and VH regions pair to form monovalent molecules (known as single chain Fv (scFv) ; see e.g., Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; and Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883) . Such single chain antibodies are also intended to  be encompassed within the term "antigen binding fragment" of an antibody. Furthermore, the term also includes a "linear antibody" comprising a pair of tandem Fd segments (VH-CH1-VH-CH1) , which forms an antigen binding region together with a complementary light chain polypeptide, and a modified version of any of the foregoing fragments, which retains antigen binding activity.

[1075] As used herein, the term “monoclonal antibody” refers to an antibody obtained from a substantially homogeneous antibody population. That is, each antibody constituting the population are the same, except for possible naturally occurring mutations in small amount. Monoclonal antibodies are highly specific and are directed against a single antigen. The term "monoclonal antibody" herein is not limited to antibodies produced by hybridoma technology, and should not be interpreted as requiring production of antibodies by any specific method.

[1076] The term “bispecific antibody” is in the context of the present invention to be understood as an antibody having two different antigen-binding regions defined by different antibody sequences. This can be understood as different target binding but includes as well binding to different epitopes in one target.

[1077] IV. Linker

[1078] The term “linker” , “drug linker” are as used interchangeably herein, refers to a chemical or biological moiety that connects the antibody and the cytotoxic payload.

[1079] The one or more drug moieties may be indirectly conjugated to the antibodies (e.g. by way of a linker with direct covalent or non-covalent interactions) . Linkers can be chemical linking agents, such as homobifunctional and heterobifunctional cross-linkers, which are available from many commercial sources.

[1080] In some embodiments, the linker S further comprises a cleavable linker or a non-cleavable linker; in some embodiments, the cleavable linker comprises an acid-labile linker a hydrophilic linker, a protease-sensitive linker, photolabile linker, a hydrazone linker, a dimethyl linker or a disulfide-containing linker. In some embodiments, the linker S is derived from the following groups: sulfo-SPDB (N-succinimidyl-4- (2-pyridyldithio) -2-sulfo-butanoate) , SPDB, MC (6-maleimidocaproyl) , dimethylethylamine (DMEA) , CL2A, Mal-PEG8, MsP, AcBut (4- (4-acetylphenoxy) -butanoic acid) , dibenzocyclooctyne (DBCO) , bicyclo [6.1.0] nonyne (BCN) , BCN-PEG3-, dimethylhydrazide (3-methyl-3-mercaptobutane hydrazide) , AcBut-dimethylhydrazide or SMCC (N-Succinimidyl 4- (N-maleimidomethyl) cyclohexane-carboxylate) .

[1081] In some embodiments, the linker S further comprises MC (6-maleimidocaproyl) :  in some embodiments, the linker S further comprises MsP:  in some embodiments, the linker S further comprises sulfo-SPDB (N-succinimidyl-4- (2-pyridyldithio) -2-sulfo-butanoate) :  in some embodiments, the linker S further comprises SPDB:  in some embodiments, the linker  S further comprises CL2A, which a noncleavable complicated PEG8-and triazole-containing PABC-peptide-mc linker; in some embodiments, the linker S further comprises dibenzocyclooctyne (DBCO) :  in some embodiments, the linker S further comprises bicyclo [6.1.0] nonyne (BCN) :  in some embodiments, the linker S further comprises AcBut-dimethylhydrazide:  in some embodiments, the linker S further comprises SMCC (N-Succinimidyl 4- (N-maleimidomethyl) cyclohexane-carboxylate) :

[1082] In some embodiments, the linker S is derived from or comprises one or more of the following groups: C1-10 alkyl, C1-10 alkenyl, C1-10 alkynyl, C1-10 alkylene, C2-10 alkenylene, C2-10 alkynylene, (OC1-10 alkylene) 1-10, -O-, -S-, -SH, -N3, -C (O) -, -C (O) NH-, -OC (O) NH-, cycloalkyl, heteroaryl, aryl, heteroaryl, cycloalkylene, heteroarylene, arylene, heteroarylene (BCN) ,   (BCN-PEG3) ,   (DBCO) , and the combination thereof,  wherein, Rs is hydrogen, halogen, OR, -NO2, -CN, -S (O) 2R, C1-24 alkyl, or 6-24 membered aryl or heteroaryl, wherein the C1-24 alkyl, or 6-24 membered aryl or heteroaryl, is optionally substituted with one or more aryl or heteroaryl; or two Rs together form an annelated 6-24 membered cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, or heteroaryl;

[1083] Rs’ is C (Rs) 2, O, S or NR; and

[1084] R is hydrogen, alkyl, heteroalkyl, cycloalkyl, or heterocycloalkyl;

[1085] s1 is an integer 1, 2, 3, 4, 5 or 6;

[1086] s2 is an integer 1, 2, 3, 4, 5 or 6.

[1087] In some embodiments, the linker (S) in the present disclosure comprises a ligand covalent binding moiety (L1) .

[1088] In some embodiments, L1 is capable of forming a covalent bond with a functional group of an amino acid. In some embodiments, L1 is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid. In some specific embodiments, the ligand covalent binding moiety (L1) is in other specific embodiments, the ligand covalent binding moiety (L1) is in other specific embodiments, the ligand covalent binding moiety (L1) is in other specific embodiments, the ligand covalent binding moiety (L1) is

[1089] After the connection of Ab and linker, the L1’ is used as the joint part of the linker, which is a divalent group of L1. In some embodiments, L1’ is in other embodiments, L1’ is

[1090] The linker in the present disclosure comprises a stretcher unit (-L2-X-) . In some embodiments, L2 is selected from C1-10 alkylene, -C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4 or 5 non-adjacent carbon atoms in C1-10 alkylene can be optionally replaced with O or S; X is absent or -C (O) -;

[1091] In some embodiments, the linker in the present disclosure comprises in other embodiments, the linker in the present disclosure comprises in other embodiments, the  linker in the present disclosure comprises

[1092] The linker (S) comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-. In some embodiments, the linker (S) further comprises a cleavable linker or a non-cleavable linker. In some embodiments, the cleavable linker comprises an acid-labile linker a hydrophilic linker, a protease-sensitive linker, photolabile linker, a hydrazone linker, a dimethyl linker or a disulfide-containing linker.

[1093] The linker in the present disclosure comprises a peptide cleavable unit (P) . In some embodiments P contains a tripeptide that is directly attached to the drug moiety so that Y is absent. When Y is presence and is a self-immolative spacer unit, the tripeptide is attached to the self-immolative spacer unit so that cleavage by the protease provides a drug linker fragment of formula Y-D in which Y undergoes self-immolation so as to complete release of the free drug.

[1094] The peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y, and P1, P2 and P3 are amino acid residues that confer selectivity for protease cleavage by tumor issue homogenate over normal tissue homogenate as described here.

[1095] In some embodiments, P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof, wherein, an analog of serine refers to a chemically or biologically modified serine, an analog of tyrosine refers to a chemically or biologically modified tyrosine. In some embodiments, P3 is selected from serine or an analog thereof, wherein, an analog of serine refers to a chemically or biologically modified serine.

[1096] In some embodiments, P3 is which is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) , wherein, the variables are as defined in the context.

[1097] In some specific embodiments, wherein, P3 is selected from:

[1098] In some specific embodiments, P3 is selected from:

[1099] In some embodiments, P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof, wherein, an analog of  glycine refers to a chemically or biologically modified glycine, and an analog of serine refers to a chemically or biologically modified serine. In some embodiments, P2 is selected from glycine or an analog thereof, wherein, an analog of glycine refers to a chemically or biologically modified glycine.

[1100] In some embodiments, P2 is which is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) , wherein, the variables are as defined in the context.

[1101] In some specific embodiments, P2 is selected from:

[1102] In some embodiments, P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof, wherein, an analog of amino acid refers to a chemically or biologically modified amino acid.

[1103] In some embodiments, P1 is which is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) , wherein, the variables are as defined in the context.

[1104] In some specific embodiments, P1 is selected from:

[1105] The linker in the present disclosure comprise a spacer unit (Y) . The spacer unit may comprise one or more self-immolative spacer unit. The term “self-immolative spacer” as used herein refers to a bifunctional chemical moiety which is capable of covalently linking together two spaced moieties (e.g., a clotting factor or a procoagulant peptide and a protein-cleavable substrate) into a normally stable tripartite molecule. The self-immolative spacer will spontaneously separate from the second moiety (e.g., a clotting factor or a procoagulant peptide) if its bond to the first moiety (e.g., a protein-cleavable substrate) is cleaved.

[1106] In some aspects, a self-immolative spacer is exemplified by an optionally substituted p-aminobenzyl  alcohol (PAB) moiety, ortho or para-aminobenzylacetals, or other aromatic compounds that are electronically similar to the PAB group (i.e., PAB-type) such as 2-aminoimidazol-5 -methanol derivatives (see. e.g., Hay et al, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett. 9: 2237) or those in which the phenyl group of the p-aminobenzyl alcohol (PAB) moiety is replaced by a heteroarylene.

[1107] In some embodiments, Y is wherein, the variables are as defined in the context; in other embodiments, Y is wherein, the variables are as defined in the context.

[1108] In some embodiments, Y is selected from:   (AM) ; in other embodiments, Y is

[1109] V. Drug

[1110] The terms “drug moiety, ” “drug payload, ” “cytotoxic payload, ” “therapeutic molecule, ” “therapeutic payload, ” “therapeutic agents, ” and “therapeutic moieties, ” as used interchangeably herein, refers to a chemical or biological moiety that is conjugated to an antibody.

[1111] In some aspects, the free drug incorporated into a drug moiety is a cytotoxic compound, typically one that has a secondary aliphatic amine as the conjugation handle.

[1112] Examples of drugs that may be used in ADCs, i.e., drugs that may be conjugated to the antibodies, are provided below, and include antibiotics, DNA synthesis inhibitors, RNA polymerase II inhibitors, and RNA spliceosome inhibitors, mitotic inhibitors (such as tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors) , antitumor antibiotics, immunomodulating agents, gene therapy vectors, alkylating agents, antiangiogenic agents, antimetabolites, boron-containing agents, chemoprotective agents, hormone agents, glucocorticoids, photoactive therapeutic agents, oligonucleotides, radioactive isotopes, radiosensitizers, topoisomerase inhibitors (such as topoisomerase I inhibitors) , tyrosine kinase inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand and combinations thereof.

[1113] In some embodiments, tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, RNA polymerase II inhibitors, and RNA spliceosome inhibitors is preferred.

[1114] In some embodiments, the drug moiety is tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors. In some specific embodiments, the drug moiety is auristatins. In some specific embodiments, the drug moiety is maytansines. In some specific embodiments, the drug moiety is tubulysins. In some specific embodiments, the drug moiety is cryptophycins. In some specific embodiments, the drug moiety is eribulin. In some specific embodiments, the drug moiety is rhizoxin.

[1115] In some embodiments, the drug moiety is antibiotics. In some specific embodiments, the drug moiety is calicheamicins. In some specific embodiments, the drug moiety is doxorubicin. In some specific embodiments,  the drug moiety is anthracyclines.

[1116] In some embodiments, the drug moiety is DNA synthesis inhibitors. In some specific embodiments, the drug moiety is duocarmycins. In some specific embodiments, the drug moiety is PBDs (pyrrolobenzodiazepines) . In some specific embodiments, the drug moiety is IGNs (indolinobenzodiazepines) .

[1117] In some embodiments, the drug moiety is topoisomerase I inhibitors. In some specific embodiments, the drug moiety is camptothecin. In some specific embodiments, the drug moiety is camptothecin analogs.

[1118] In some embodiments, the drug moiety is RNA polymerase II inhibitors. In some specific embodiments, the drug moiety is amanitins.

[1119] In some embodiments, the drug moiety is RNA spliceosome inhibitors selected from a group consisting of spliceostatins and thailanstatins.

[1120] In some embodiments, maytansinoids (maytansine, maytansinol, DM1, DM2, DM3, DM4, maytansine, and ansamitocins) and their analogs is preferred.

[1121] In some embodiments, the drug moiety is an immune modulatory agent.

[1122] In some embodiments, the immune modulatory agent is an TLR7 agonist. In some embodiments, the TLR7 agonist is an imidazoquinoline, an imidazoquinoline amine, a thiazoquinoline, an aminoquinoline, an aminoquinazoline, a pyrido [3, 2-d] pyrimidine-2, 4-diamine, pyrimidine-2, 4-diamine, 2-aminoimidazole, 1-alkyl-1H-benzimidazol-2-amine, tetrahydropyridopyrimidine, heteroarothiadiazide-2, 2-dioxide, a benzonaphthyridine, a guanosine analog, an adenosine analog, a thymidine homopolymer, ssRNA, CpG-A, PolyG10, or PolyG3.

[1123] In some embodiments, the immune modulatory agent is a TLR8 agonist. In some embodiments, the TLR8 agonist is selected from an imidazoquinoline, a thiazoloquinoline, an aminoquinoline, an aminoquinazoline, a pyrido [3, 2-d] pyrimidine-2, 4-diamine, pyrimidine-2, 4-diamine, 2-aminoimidazole, 1-alkyl-1H-benzimidazol-2-amine, tetrahydropyridopyrimidine or a ssRNA.

[1124] In some embodiments, the immune modulatory agent is a STING agonist.

[1125] In some embodiments, the immune modulatory agent is a RIG-I agonist.

[1126] In some embodiments, the RIG-I agonist is selected from KIN1148, SB-9200, KIN700, KIN600, KIN500, KIN100, KIN101, KIN400 and KIN2000.

[1127] In some embodiments, the drug moiety is a chelating ligand.

[1128] In some embodiments, the chelating ligand is selected from platinum (Pt) , ruthenium (Ru) , rhodium (Rh) , gold (Au) , silver (Ag) , copper (Cu) , molybdenum (Mo) , titanium (Ti) , or iridum (Ir) ; a radioisotope such as yittrium-88, yittrium-90, technetium-99, copper-67, rhenium-188, rhenium-186, galium-66, galium-67, indium-111, indium-114, indium-115, lutetium-177, strontium-89, sararium-153, and lead-212.

[1129] In a specific embodiment, the drug moiety is DXD. DXD is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1130] In a specific embodiment, the drug moiety is Exatecan. Exatecan is represented by the following structural  formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1131] In a specific embodiment, the drug moiety is monomethyl auristatin E (also known as MMAE) . MMAE is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1132] In a specific embodiment, the drug moiety is monomethyl auristatin F (also known as MMAF) . MMAF is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1133] In a specific embodiment, the drug moiety is SG3199, which is a cytotoxic DNA minor groove interstrand crosslinking pyrrolobenzodiazepine (PBD) dimer. SG3199 is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1134] In a specific embodiment, the drug moiety is 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin (also known as SN38) . SN38 is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1135] In a specific embodiment, the drug moiety is N2’-deacetyl-N2’- (3-mercapto-1-oxopropyl) -maytansine (also known as DM1) . DM1 is represented by the following structural formula, wherein the indicates the  attachment site to the linker.

[1136] In some specific embodiments, the maytansinoid drug moiety is N2’-deacetyl-N2’- (4-methyl-4-mercapto-1-oxopentyl) -maytansine (also known as DM4) . DM4 is represented by the following structural formula, wherein the indicates the attachment site to the linker.

[1137] VI. Pharmaceutical compositions

[1138] The present disclosure also provides a composition, e.g., a pharmaceutical composition, containing the conjugate of the present disclosure, formulated together with a pharmaceutically acceptable carrier.

[1139] Therapeutic formulations of this disclosure can be prepared by mixing the conjugate having the desired degree of purity with optional physiologically acceptable carriers, excipients or stabilizers in the form of lyophilized formulations or aqueous solutions. Acceptable carriers, excipients, or stabilizers are nontoxic to recipients at the dosages and concentrations employed, and include buffers such as phosphate, citrate, and other organic acids; antioxidants including ascorbic acid and methionine; preservatives (such as octadecyldimethylbenzyl ammonium chloride; hexamethonium chloride; benzalkonium chloride; benzethonium chloride; phenol, butyl or benzyl alcohol; alkyl parabens such as methyl or propyl paraben; catechol; resorcinol; cyclohexanol; 3-pentanol; and m-cresol) ; low molecular weight (less than about 10 amino acid residues) proteins, such as serum albumin, gelatin, or immunoglobulins; hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone; amino acids such as glycine, glutamine, asparagine, histidine, arginine, or lysine; monosaccharides, disaccharides, and other carbohydrates; chelating agents such as EDTA; sugars such as sucrose, mannitol, trehalose or sorbitol; salt-forming counter-ions such as sodium; metal complexes (e.g., Zn-protein complexes) ; and / or non-ionic surfactants such as Tween, Pluronics, or PEG.

[1140] The formulation may also contain more than one active compound as necessary for the particular indication being treated, preferably those with complementary activities that do not adversely affect each other. For instance, the formulation may further comprise another antibody or bispecific antibody, cytotoxic agent, chemotherapeutic agent or ADC. Such molecules are suitably present in combination in amounts that are effective for the purpose intended.

[1141] The active ingredients may also be entrapped in microcapsule prepared, for example, by coacervation  techniques or by interfacial polymerization, for example, hydroxymethylcellulose or gelatin-microcapsule and poly- (methylmethacylate) microcapsule, respectively, in colloidal drug delivery systems (for example, liposomes, albumin microspheres, microemulsions, nano-particles and nanocapsules) or in macroemulsions. Such techniques are disclosed in Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980) .

[1142] Pharmaceutical compositions of the disclosure can be administered in combination therapy, i.e., combined with other agents. Examples of therapeutic agents that can be used in combination therapy are described in greater detail below.

[1143] The formulations to be used for in vivo administration must be sterile. This can be readily accomplished by filtration through sterile filtration membranes. Sterile injectable solutions can be prepared by incorporating the active compound in the required amount in an appropriate solvent with one or a combination of ingredients enumerated above, as required, followed by sterilization microfiltration. Generally, dispersions are prepared by incorporating the active compound into a sterile vehicle that contains a basic dispersion medium and the required other ingredients from those enumerated above. In the case of sterile powders for the preparation of sterile injectable solutions, the preferred methods of preparation are vacuum drying and freeze-drying (lyophilization) that yield a powder of the active ingredient plus any additional desired ingredient from a previously sterile-filtered solution thereof.

[1144] VII. Dosage

[1145] The amount of active ingredient which can be combined with a carrier material to produce a single dosage form will vary depending upon the subject being treated, and the particular mode of administration. The amount of active ingredient which can be combined with a carrier material to produce a single dosage form will generally be that amount of the composition which produces a therapeutic effect. Generally, out of one hundred percent, this amount will range from about 0.01%to about 99%of active ingredient, preferably from about 0.1%to about 70%, most preferably from about 1%to about 30%of active ingredient in combination with a pharmaceutically acceptable carrier.

[1146] Dosage regimens are adjusted to provide the optimum desired response (e.g., a therapeutic response) . For example, a single bolus may be administered, several divided doses may be administered over time or the dose may be proportionally reduced or increased as indicated by the exigencies of the therapeutic situation. It is especially advantageous to formulate parenteral compositions in dosage unit form for ease of administration and uniformity of dosage. Dosage unit form as used herein refers to physically discrete units suited as unitary dosages for the subjects to be treated; each unit contains a predetermined quantity of active compound calculated to produce the desired therapeutic effect in association with the required pharmaceutical carrier. The specification for the dosage unit forms of the disclosure are dictated by and directly dependent on (a) the unique characteristics of the active compound and the particular therapeutic effect to be achieved, and (b) the limitations inherent in the art of compounding such an active compound for the treatment of sensitivity in individuals.

[1147] For administration of the conjugate of this disclosure, the dosage ranges from about 0.0001 to 100 mg / kg, and more usually 0.01 to 50 mg / kg, of the host body weight. For example, dosages can be 0.3 mg / kg body weight, 1 mg / kg body weight, 3 mg / kg body weight, 5 mg / kg body weight or 10 mg / kg body weight or within the range of 1-10 mg / kg. An exemplary treatment regime entails administration daily, twice per week, once per week, once every two weeks, once every three weeks, once every four weeks, once a month, once every 3 months or once every  three to 6 months. Preferred dosage regimens for conjugate of the disclosure include 1 mg / kg body weight or 3 mg / kg body weight via intravenous administration, with the conjugate being given using one of the following dosing schedules: (i) every four weeks for six dosages, then every three months; (ii) every three weeks; (iii) 3 mg / kg body weight once followed by 1 mg / kg body weight every three weeks.

[1148] Alternatively, conjugate can be administered as a sustained release formulation, in which case less frequent administration is required. Dosage and frequency vary depending on the half-life of the conjugate in the patient. In general, human antibodies show the longest half-life, followed by humanized antibodies, chimeric antibodies, and nonhuman antibodies. The dosage and frequency of administration can vary depending on whether the treatment is prophylactic or therapeutic. In prophylactic applications, a relatively low dosage is administered at relatively infrequent intervals over a long period of time. Some patients continue to receive treatment for the rest of their lives. In therapeutic applications, a relatively high dosage at relatively short intervals is sometimes required until progression of the disease is reduced or terminated, and preferably until the patient shows partial or complete amelioration of symptoms of disease. Thereafter, the patient can be administered a prophylactic regime.

[1149] Actual dosage levels of the active ingredients in the pharmaceutical compositions of the present disclosure may be varied so as to obtain an amount of the active ingredient which is effective to achieve the desired therapeutic response for a particular patient, composition, and mode of administration, without being toxic to the patient. The selected dosage level will depend upon a variety of pharmacokinetic factors including the activity of the particular compositions of the present disclosure employed, the route of administration, the time of administration, the rate of excretion of the particular compound being employed, the duration of the treatment, other drugs, compounds and / or materials used in combination with the particular compositions employed, the age, sex, weight, condition, general health and prior medical history of the patient being treated, and like factors well known in the medical arts.

[1150] A “therapeutically effective dosage” of an ADC of the disclosure preferably results in a decrease in severity of disease symptoms, an increase in frequency and duration of disease symptom-free periods, or a prevention of impairment or disability due to the disease affliction. For example, for the treatment of tumors, a “therapeutically effective dosage” preferably inhibits cell growth or tumor growth or metastasis by at least about 20%, more preferably by at least about 40%, even more preferably by at least about 60%, and still more preferably by at least about 80%relative to untreated subjects. The ability of an agent or compound to inhibit tumor growth can be evaluated in an animal model system predictive of efficacy in human tumors. Alternatively, this property of a composition can be evaluated by examining the ability of the compound to inhibit, such inhibition in vitro by assays known to the skilled practitioner. A therapeutically effective amount of a therapeutic compound can decrease tumor size, metastasis, or otherwise ameliorate symptoms in a subject. One of ordinary skill in the art would be able to determine such amounts based on such factors as the subject’s size, the severity of the subject’s symptoms, and the particular composition or route of administration selected.

[1151] VIII. Administration

[1152] A composition of the disclosure can be administered via one or more routes of administration using one or more of a variety of methods known in the art. As will be appreciated by the skilled artisan, the route and / or mode of administration will vary depending upon the desired results. Preferred routes of administration for conjugate of the disclosure include intravenous, intramuscular, intradermal, intraperitoneal, subcutaneous, spinal or other parenteral routes of administration, for example by injection or infusion. The phrase “parenteral  administration” as used herein means modes of administration other than enteral and topical administration, usually by injection, and includes, without limitation, intravenous, intramuscular, intraarterial, intrathecal, intracapsular, intraorbital, intracardiac, intradermal, intraperitoneal, transtracheal, subcutaneous, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subarachnoid, intraspinal, epidural and intrasternal injection and infusion. Alternatively, a conjugate of the disclosure can be administered via a non-parenteral route, such as a topical, epidermal or mucosal route of administration, for example, intranasally, orally, vaginally, rectally, sublingually or topically.

[1153] The active compounds can be prepared with carriers that will protect the compound against rapid release, such as a controlled release formulation, including implants, transdermal patches, and microencapsulated delivery systems. Biodegradable, biocompatible polymers can be used, such as ethylene vinyl acetate, polyanhydrides, polyglycolic acid, collagen, polyorthoesters, and polylactic acid. Many methods for the preparation of such formulations are patented or generally known to those skilled in the art. See, e.g., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

[1154] Therapeutic compositions can be administered with medical devices known in the art. For example, a therapeutic composition of the disclosure can be administered with a needleless hypodermic injection device, such as the devices disclosed in US 5399163, US 5383851, US 5312335, US 5064413, US 4941880, US 4790824, and US 4596556. Examples of well-known implants and modules useful in the present disclosure include those described in US 4487603, US 4486194, US 4447233, US 4447224, US 4439196, and US 4475196. These patents are incorporated herein by reference. Many other such implants, delivery systems, and modules are known to those skilled in the art.

[1155] IX. Treatment Methods

[1156] In one aspect, the present disclosure relates to the treatment of a disease of a subject in vivo using the above-described conjugate. In one embodiment, the disclosure provides a method of preventing and / or treating a disease in a subject in need, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a conjugate or the composition comprising the conjugate.

[1157] In some embodiments, the disease is selected from a cancer, an infectious disease, an inflammatory disease, an autoimmune disease and an immunodeficiency disease.

[1158] In one specific embodiment, the disease is a cancer.

[1159] Non-limiting examples of preferred cancers for treatment include head and neck cancer, esophageal cancer, lung cancer, colon cancer, rectal cancer, stomach cancer, pancreatic cancer, ovarian cancer, prostate cancer, breast cancer, leukemia, myeloma, epithelial squamous cell cancer, melanoma, brain cancer, cervical cancer, liver cancer, bladder cancer, breast cancer, renal cancer, testicular cancer, and thyroid cancer.

[1160] Non-limiting examples of preferred autoimmune diseases to be treated include systemic sclerosis and atherosclerosis.

[1161] In another aspect, the present disclosure relates to treatment of a subject in vivo using the above-described conjugate such that growth and / or metastasis of cancerous tumors is inhibited. In one embodiment, the disclosure provides a method of inhibiting growth and / or restricting metastatic spread of tumor cells in a subject, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a conjugate.

[1162] As used herein, the term “subject” is intended to include human and non-human animals. Non-human animals include all vertebrates, e.g., mammals and non-mammals, such as non-human primates, sheep, dogs, cats,  cows, horses, chickens, amphibians, and reptiles, although mammals are preferred, such as non-human primates, sheep, dogs, cats, cows and horses. Preferred subjects include human patients in need of enhancement of an immune response. The methods are particularly suitable for treating human patients having a disorder that can be treated by augmenting the immune response.

[1163] The above treatment may also be combined with standard cancer treatments. For example, it may be effectively combined with chemotherapeutic regimes. In these instances, it may be possible to reduce the dose of chemotherapeutic reagent administered (Mokyr, M. et al. Cancer Res., 1998, 58, 5301–5304) .

[1164] Other antibodies which may be used to activate host immune responsiveness can be used in or with the bispecific molecule drug conjugate of this disclosure. These include molecules targeting on the surface of dendritic cells which activate DC function and antigen presentation. For example, anti-CD40 antibodies are able to substitute effectively for T cell helper activity (Ridge, J. et al. Nature, 1998, 393, 474–478) and can be used in conjunction with the bispecific molecule drug conjugate of this disclosure (Ito, N. et al. Immunobiology, 2000, 201, 527–540) . Similarly, antibodies targeting T cell costimulatory molecules such as CTLA-4 (US 5811097) , CD28 (Haan, J. et al. Immunol. Lett., 2014, 162, 103–112) , OX-40 (Weinberg, A. et al. J. Immunol., 2000, 164, 2160–2169) , 4-1BB (Melero, I. et al. Nature Med., 1997, 3, 682–685) , and ICOS (Hutloff, A. et al. Nature, 1999, 397, 262–266) or antibodies targeting PD-1 (US 8008449) and PD-L1 (US 7943743; US 8168179) may also provide for increased levels of T cell activation. In another example, the bispecific molecule drug conjugate of this disclosure can be used in conjunction with anti-neoplastic antibodies, such as RITUXAN (rituximab) , HERCEPTIN (trastuzumab) , BEXXAR (tositumomab) , ZEVALIN (ibritumomab) , CAMPATH (alemtuzumab) , LYMPHOCIDE (eprtuzumab) , AVASTIN (bevacizumab) , and TARCEVA (erlotinib) , and the like.

[1165] SYNTHETIC METHODS

[1166] The compounds and processes of the present invention will be better understood in connection

[1167] EXAMPLES

[1168] The compounds and processes of the present invention will be better understood in connection with the following examples, which are intended as an illustration only and not limiting of the scope of the invention. Various changes and modifications to the disclosed embodiments will be apparent to those skilled in the art and such changes and modifications including, without limitation, those relating to the chemical structures, substituents, derivatives, formulations and / or methods of the invention may be made without departing from the spirit of the invention and the scope of the appended claims.

[1169] General Methods

[1170] 1H NMR and other NMR spectra were recorded on a Bruker Ascend 400 spectrometer. Chemical shifts are expressed in parts per million (ppm) . Coupling constants are in units of hertz (Hz) . Splitting patterns describe apparent multiplicities and are designated as s (singlet) , d (doublet) , t (triplet) , q (quartet) , quint (quintet) , m (multiplet) , br (broad) .

[1171] The analytical low-resolution mass spectra (MS) were recorded on Agilent 1290 with SQ Detectors using a Waters Xbridge C18, 4.6 x 50 mm, 3.5 μm using a gradient elution method.

[1172] Mobile phase A: Solvent A: 0.1%TFA in water; Solvent B: 0.1%TFA in acetonitrile; 5-95%B over 1.3 min.

[1173] Mobile phase B: Solvent A: 0.1%FA in water; Solvent B: 0.1%FA in acetonitrile; 5-95%B over 2.0 min.

[1174] Preparative high pressure liquid chromatography (Prep-HPLC) was run on Gilson or Waters using the following conditions:

[1175] Method A: Waters SunFire 10 pm C18 column (100 A, 250 x 19 mm) . Solvent A was water / 0.01%trifluoroacetic acid (TFA) and solvent B was acetonitrile. The elution condition was a linear gradient increase of solvent B from 5%to 100%over 20 minutes at a flow rate of 30 mL / min.

[1176] Method B: Waters SunFire 10 pm C18 column (100 A, 250 x 19 mm) . Solvent A was water / 0.05%formic acid (FA) and solvent B was acetonitrile. The elution condition was a linear gradient increase of solvent B from 5%to 100%over 20 minutes at a flow rate of 30 mL / min.

[1177] Method C: Waters Xbridge 10 pm C18 column (100 A, 250 x 19 mm) . Solvent A was ater / 10 mM ammonium bicarbonate (NH4HCO3) and solvent B was acetonitrile. The elution condition was a linear gradient increase of solvent B from 5%to 100%over f 20 minutes at a flow rate of 30 mL / min.

[1178] The compounds and processes of the present invention will be better understood in connection with the following examples, which are intended as an illustration only and not limiting of the scope of the invention. Various changes and modifications to the disclosed embodiments will be apparent to those skilled in the art and such changes and modifications including, without limitation, those relating to the chemical structures, substituents, derivatives, formulations and / or methods of the invention may be made without departing from the spirit of the invention and the scope of the appended claims.

[1179] Example 1: preparation of LP1 (MC-VGR-DXD)

[1180] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -7- (3-guanidinopropyl) -14-methyl-1, 6, 9, 12-tetraoxo-3-oxa-5, 8, 11-triazapentadecan-13-yl) hexanamide

[1181] Step 1a. A mixture of ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) -L-arginine (CAS: 91000-69-0) (8.0 g, 20.0 mmol) and Glycine tert-butyl ester hydrochloride (2.62 g, 20.0 mmol) in DMF (120 mL) was added N, N, N', N'-tetramethylchloroformamidinium hexafluorophosphate (8.4 g, 30.0 mmol) and 1-methylimidazole (4.1 g, 50.0 mmol) . The mixture was stirred at 30 ℃ for 12 h and concentrated at reduced pressure. The residue was purified to afford the desired compound (4.32 g, 41%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 510.3.

[1182] Step 1b. A mixture of the compound from Step 1a (8.0 g) and TFA (30 mL) in DCM (80 mL) . The mixture was stirred at 30 ℃ for 3 h. The filtrate was concentrated at reduced pressure to give the crude (8.0 g) as a grey solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 454.2.

[1183] Step 1c. A mixture of the compound from Step 1b (4.4 g, 9.73 mmol) and Cu (OAc) 2 (1.14 g, 0.973 mmol) and Pb (OAc) 4 (6.5 g, 14.6 mmol) in THF (40 mL) was stirred at 30 ℃ for 4 h. The organic solvents were removed at reduced pressure. The residue was partitioned between EtOAc (3*100 mL) and water (300 mL) . The residue was washed with water (3*10 mL) and aq. NH4Cl (sat. 200 mL) . The combined organics were dried over anhydrous Na2SO4. The filtrate was concentrated in vacuo to give the desired compound (5.0 g) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 468.2.

[1184] Step 1d. A mixture of the compound from Step 1c (6.82 g, 14.6 mmol) , benzyl 2-hydroxyacetate (12.2 g, 73 mmol) and pyridinium p-toluenesulfonate (3.7 g, 14.6 mmol) in THF (120 mL) was stirred at 25℃ for 24 h. The  organic solvents were removed at reduced pressure. The residue was purified to afford the desired compound (800 mg, 10%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 574.2.

[1185] Step 1e. A mixture of the compound from Step 1d (800 mg) in EtOAc (10 mL) and methanol (10 mL) and 10%Pd / C (0.5 g) was stirred at 30 ℃ for 5 h. The filtrate was washed by methanol (20mL*3) and concentrated at reduced pressure to afford the crude (1.0 g) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 484.2.

[1186] Step 1f. A mixture of the compound from Step 1e (966 mg, 2.04 mmol) , 4- (4, 6-dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methylmorpholin-4-ium chloride (452 mg, 1.632 mmol) , Exatecan mesylate (CAS 169869-90-3) (870 mg, 1.632 mmol) and DIPEA (792 mg, 6.12 mmol) in DMF (8 mL) was stirred at 30 ℃ for 1 h. It was quenched with water (0.5 mL) and then concentrated, and the residue was purified by prep-HPLC (Xbridge-C18, CH3CN / H2O (0.1%NH3) ) to give the desired compound as a white solid (990 mg, 55%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 910.4.

[1187] Step 1g. A mixture of the compound from Step 1f (628 mg, 0.698 mmol) and diethylamine (2 mL) in DCM (10 mL) was stirred at 30 ℃ for 2 h. It was quenched with water (0.5 mL) and then concentrated and the residue was purified by prep-HPLC (Xbridge-C18, CH3CN / H2O (0.1%NH3) ) to give the desired compound as a light-yellow oil (350 mg, 74%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 679.4.

[1188] Step 1h. A mixture of 2- [ (2S) -2- ( { [ (9H-fluoren-9-yl) methoxy] carbonyl} amino) -3-methylbutanamido] acetic acid (CAS 142810-19-3) (1.0 g, 2.52 mmol) in DMF (80 mL) and DBU (403 mg) was stirred at 30 ℃ for 3 hr. It was concentrated to give the crude into the next step without further purification. A mixture of the crude, 2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanoate (932 mg) and DIPEA (423 mg) in DMF (4 mL) was stirred at 30 ℃ for 2 h. It was concentrated and the residue was purified by prep-HPLC (Xbridge-C18, CH3CN / H2O (0.1%NH3) ) to give the desired compound as a white solid (466 mg, 50%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 368.2.

[1189] Step 1i. A mixture of the compound from Step 1g (25 mg, 0.036 mmol) , the compound from Step 1h (15 mg, 0.041 mmol) , 4- (4, 6-dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methylmorpholin-4-ium chloride (10 mg, 0.036 mmol) and triethylamine (19 mg, 0.18 mmol) in DMF (1 mL) was stirred at 30 ℃ for 18 h. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (12 mg, 32%yield) as a light-yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1028.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO+D2O) δ 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.34 (s, 1H) , 6.97 (s, 2H) , 5.60-5.58 (m, 1H) , 5.41 (q, J = 7.6 Hz, 2H) , 5.20 (q, J = 7.2 Hz, 2H) , 4.58-4.65 (m, 2H) , 4.22 (t, J = 8.0 Hz, 1H) , 4.01-4.03 (m, 3H) , 3.72 (s, 2H) , 3.36 (t, J = 4.0 Hz, 2H) , 3.08-3.16 (m, 2H) , 3.07 (t, J = 4.0 Hz, 2H) , 2.40 (s, 3H) , 2.02-2.19 (m, 3H) , 1.87 –1.66 (m, 3H) , 1.52-1.45 (m, 7H) , 1.24 –1.17 (m, 4H) , 0.89-0.82 (m, 9H) .

[1190] Example 2: preparation of LP2 (MC-SGR-DXD)

[1191] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -7- (3- guanidinopropyl) -14-hydroxy-1, 6, 9, 12-tetraoxo-3-oxa-5, 8, 11-triazatetradecan-13-yl) hexanamide

[1192] Step 2a. A mixture of carbobenzyloxy-O-benzyl-L-Serine (CAS 20806-43-3) (6.0 g, 18.2 mmol) , tert-butyl glycinate (2.4 g, 18.2 mmol) , HATU (10.4 g, 27.3 mmol) and DIPEA (6.36 mL, 36.4 mmol) in DMF (80 mL) was stirred at 30 ℃ for 1 h. It was quenched with water (150 mL) and then concentrated and the residue in DCM (80 mL) was added TFA (20 mL) . The mixture was stirred at 30 ℃ for 12 h. It was concentrated to give the desired compound as a yellow solid (6.5 g, 92%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 387.2.

[1193] Step 2b. A mixture of the compound from Step 2a (3.8 g, 9.8 mmol) in methanol (35 mL) and 10%Pd / C (0.38 g) under hydrogen atmosphere was stirred at 30 ℃ for 18 h. The filtrate was washed by MeCN / water (1: 1, 10mL*3) and concentrated at reduced pressure to afford the desired compound (1.1 g, 68%yield) as a white solid.

[1194] Step 2c. A mixture of the compound from Step 2b (1.1 g, 6.8 mmol) , 2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanoate (3.13 g, 10.2 mmol) and DIPEA (2.36 g, 13.6 mmol) in DMF (3 mL) , MeCN (3 mL) and water (3 mL) was stirred at 30 ℃ for 6 h. It was concentrated and the residue was purified by prep-HPLC (Xbridge-C18, CH3CN / H2O (0.1%NH3) ) to give the desired compound as a white solid (1.0 g, 42%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 356.2.

[1195] Step 2d. A mixture of the compound from Step 1g (25 mg, 0.0393 mmol) , the compound from Step 2c (18 mg, 0.0472 mmol) , 4- (4, 6-dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methylmorpholin-4-ium chloride (18 mg, 0.0472 mmol) and DIPEA (16 mg, 0.12 mmol) in DMF (1 mL) was stirred at 30 ℃ for 4 h. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (11 mg, 28%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1016.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO+D2O) δ 8.76 (t, J = 8.0 Hz, 1H) , 8.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.77 (d, J = 12.0 Hz, 1H) , 7.38 –7.30 (m, 1H) , 7.34 (s, 1H) , 6.97 (s, 2H) , 5.58 (q, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.41 (d, J = 4.0 Hz, 2H) , 5.19 (d, J = 4.0 Hz, 2H) , 4.63 (d, J = 4.0 Hz, 2H) 4.19 –4.21 (m, 2H) , 4.01 (s, 2H) , 3.45 –3.39 (m, 2H) , 3.25 –3.11 (m, 2H) , 3.02-3.24 (m, 3H) , 2.42 (s, 3H) , 2.11 –2.18 (m, 3H) , 1.85-1.88 (m, 2H) , 1.53 –1.46 (m, 7H) , 1.24 –1.18 (m, 4H) ,  0.87 (t, J = 7.6 Hz, 3H) .

[1196] Example 3 preparation of LP3 (MC-SGC-DXD)

[1197] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -14-hydroxy-1, 6, 9, 12-tetraoxo-7- (3-ureidopropyl) -3-oxa-5, 8, 11-triazatetradecan-13-yl) hexanamide

[1198] Step 3a. To a solution of (2S) -5- [ (aminocarbonyl) amino] -2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) pentanoic acid (10.0 g, 25.2 mmol) in DMF (100 mL) was added [chloro (dimethylamino) methylidene] dimethylammonium hexafluoro-λ5-phosphanuide (7.77 g, 27.678 mmol) and 1-methylimidazole (4.212 mL, 52.839 mmol) at 0 ℃. The mixture was stirred for 10 minutes. 2-methylpropan-2-yl aminoacetate (3.47 g, 26.420 mmol) was added to the mixture and the mixture was stirred at 15 ℃ for 12 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash  chromatography (160 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～8%) to afford the desired product (8.8 g, white solid, yield: 69%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 511.2.

[1199] Step 3b. To a solution of the compound from Step 3a (8.8 g, 17.2 mmol) was added 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (19.8 mL, 258.5 mmol) in DCM (80 mL) at 0 ℃ for 5 minutes. The mixture was naturally warmed to 20 ℃and then stirred for 12 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue was dissolved in DMF (20 mL) . The solution was purified by reverse phase column (220 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～16%) to afford the desired product (4.5 g, white solid, yield: 58%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 455.2.

[1200] Step 3c. To a mixture of the compound from Step 3b (1.1 g, 2.4 mmol) , oxidane copper (2+) diacetate (140 mg, 0.73 mmol) and acetic acid (1.0 mL, 17.0 mmol) in THF (40 mL) was added plumbanylidene tetraacetate (1.6 g, 3.6 mmol) . The mixture was stirred at 30 ℃ for 2 hours under N2. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (120 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～35%) to afford the desired product (1.0 g, white solid, yield: 79%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 491.2.

[1201] Step 3d. To a mixture of the compound from Step 3c (400 mg, 0.85 mmol) and 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (3.3 mL, 42.7 mmol) in DCM (4 mL) was added benzyl hydroxyacetate (709.4 mg, 4.3 mmol) in DCM (4 mL) at 0 ℃ for 10 minutes. The mixture was stirred at 20 ℃ for 4 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (220 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～47%) to afford the desired product (210 mg, white solid, yield: 42.8%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 597.2.

[1202] Step 3e. To a mixture of the compound from Step 3d (200 mg, 0.348 mmol) in MeOH (10 mL) and EA (10 mL) was added palladium (0) (111.12 mg, 0.104 mmol) . The mixture was stirred at 15 ℃ for 2 hours. The mixture was concentrated to obtain the title compound which was used in the next step without purification (0.16 g, white solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 507.2.

[1203] Step 3f. To a mixture of the compound from Step 3e (150.40 mg, 0.310 mmol) , (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid (150 mg, 0.282 mmol) and DIPEA (0.14 mL, 0.847 mmol) in DMF (6 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 minutes. 4- (4, 6-dimethoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) -4-methyl-1, 4-oxazinan-4-ium chloride hydrate (91.43 mg, 0.310 mmol) was added to the mixture. The mixture was stirred for 0.5 hour at 0 ℃. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (80 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～46%) to afford the desired product (180 mg, white solid, yield: 70.7%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 902.2.

[1204] Step 3g. To a solution of the compound from Step 3f (85.0 mg, 0.094 mmol) was added diethylamine (0.097 mL, 0.942 mmol) in DMF (1 mL) at 0 ℃ for 2 h. The mixture was naturally warmed to 15 ℃ and stirred for 60 minutes. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (64 mg, yellow solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 680.4.

[1205] Step 3h. To a mixture of N- [ (2S) -2- { [6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -1-oxohexyl] amino} -3-hydroxypropanoyl] glycine (60.0 mg, 0.17 mmol) and 1-hydroxytetrahydropyrrole-2, 5-dione (29.2 mg, 0.25 mmol) in DMF (1 mL) was stirred at 0 ℃ for 5 minutes. DCC (55.8 mg, 0.27 mmol) was added to the mixture. The mixture was naturally warmed to 15 ℃ and stirred for 12 hours. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (76.4 mg, white solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 453.2.

[1206] Step 3i. To a mixture of the compound from Step 3g (65 mg, 0.096 mmol) and DIPEA (0.032 mL, 0.192 mmol) in DMF (2 mL) was added the compound from Step 3h (64.90 mg, 0.143 mmol) . The mixture was stirred at 15 ℃ for 30 minutes. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (18.2 mg, 18.7%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1017.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.65 (t, J = 6.4 Hz, 1H) , 8.44 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 8.07 (t, J = 5.6 Hz, 1H) , 7.84 (t, J = 6.8 Hz, 2H) , 7.72 (d, J = 10.8 Hz, 1H) , 7.25 (s, 1H) , 6.94-6.92 (m, 2H) , 6.45 (s, 1H) , 5.83 (d, J = 6.4 Hz, 1H) , 5.53-5.51 (m, 1H) , 5.36 (s, 2H) , 5.30 (s, 2H) , 5.14 (s, 2H) , 4.92-4.89 (m, 1H) , 4.57-4.51 (m, 2H) , 4.15-4.11 (m, 2H) , 3.92 (s, 2H) , 3.67-3.65 (m, 2H) , 3.49-3.45 (m, 2H) , 3.07-3.05 (m, 2H) , 2.84-2.82 (m, 2H) , 2.33 (s, 3H) , 2.08-2.03 (m, 3H) , 1.86-1.74 (m, 3H) , 1.57-1.55 (m, 2H) , 1.42-1.38 (m, 4H) , 1.26-1.24 (m, 2H) , 1.18-1.03 (m, 4H) , 0.80 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1207] Example 4: preparation of LP4 (MC-SAC-DXD)

[1208] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (7S, 10S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -14-hydroxy-10-methyl-1, 6, 9, 12-tetraoxo-7- (3-ureidopropyl) -3-oxa-5, 8, 11-triazatetradecan-13-yl) hexanamide

[1209] Step 4a. To a solution of (2S) -2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) -3- [ (2-methylprop-2-yl) oxy] propanoic acid (3 g, 7.824 mmol) in DMF (20 mL) , HATU (2.97 g, 7.824 mmol) , DIPEA (2.586 mL, 15.648 mmol) and 2-methylpropan-2-yl L-alaninate (1.25 g, 8.606 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (50 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (3.5 g, white solid, 87%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 533.2.

[1210] Step 4b. To a solution of the compound from Step 4a (3.3 g, 6.463 mmol) in DMF (20 mL) , diethylamine (2.006 mL, 19.388 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at room temperature for about 1 h. It was concentrated at reduced pressure and the mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (1.86 g, light yellow oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 289.4.

[1211] Step 4c. To a solution of the compound from Step 4b (1.8 g, 6.242 mmol) in DCM (20 mL) , DIPEA (2.063 mL, 12.483 mmol) and 1- {1- [ (2, 5-dioxotetrahydro-1H-pyrrol-1-yl) oxy] -1-oxohex-6-yl} pyrrole-2, 5-dione (2.31 g, 7.490 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at room temperature for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (200 mL) and water (100 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (100 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (2.2 g, white solid, 73%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 504.2.

[1212] Step 4d. To a solution of the compound from Step 4c (500 mg, 1.038 mmol) in DCM (10 mL) , TFA (3 mL, 10.694 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (340 mg, white solid, 88%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+1) , 370.2.

[1213] Step 4e. To a solution of the compound from Step 4d (150 mg, 0.422 mmol) in DMF (0.5 mL) , 1-hydroxytetrahydropyrrole-2, 5-dione (97.16 mg, 0.844 mmol) and DCC (174.19 mg, 0.844 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 2 h. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (190 mg, white solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 467.2.

[1214] Step 4f. To a solution of the compound from Step 3g (45 mg, 0.066 mmol) in DMF (1 mL) , DIPEA (0.033 mL, 0.199 mmol) and the compound from Step 6e (61.76 mg, 0.132 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 2 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (10.6 mg, yellow solid, 15.5%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1031.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.55-8.52 (m, 1H) , 8.44-8.42 (m, 1H) , 8.06-8.04 (m, 1H) , 7.8-7.79 (m, 2H) , 7.72-7.70 (m, 1H) , 7.24 (s, 1H) , 6.92 (s, 2H) , 6.58-6.24 (m, 1H) 5.87 (s, 1H) , 5.55-5.50 (m, 1H) , 5.36 (s, 2H) , 5.13 (s, 2H) , 4.59-4.50 (m, 2H) , 4.24-4.22 (m, 1H) , 4.14-4.11 (m, 1H) , 4.06-4.03 (m, 1H) , 3.92 (s, 2H) , 3.31-3.2 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.55-8.52 (m, 1H) , 8.44-8.42 (m, 1H) , 8.06-8.04 (m, 1H) , 7.8-7.79 (m, 2H) , 7.72-7.70 (m, 1H) , 7.24 (s, 1H) , 6.92 (s, 2H) , 6.58-6.24 (m, 1H) 5.87 (s, 1H) , 5.55-5.50 (m, 1H) , 5.36 (s, 2H) , 5.13 (s, 2H) , 4.59-4.50 (m, 2H) , 4.24-4.22 (m, 1H) , 4.14-4.11 (m, 1H) , 4.06-4.03 (m, 1H) , 3.92 (s, 2H) , 3.31-3.27 (m, 3H) , 3.19-3.03 (m, 3H) , 2.84-2.83 (m, 2H) , 2.70 (s, 1H) , 2.33 (s, 3H) , 2.14-2.08 (m, 2H) , 2.05-2.02 (m, 2H) , 1.81-1.77 (m, 2H) , 1.55-1.52 (m, 1H) , 1.41-1.37 (m, 6H) , 1.22-1.08 (m, H) , 0.80 (t, J = 7.2 Hz, 3H) . 7 (m, 3H) , 3.19-3.03 (m, 3H) , 2.84-2.83 (m, 2H) , 2.70 (s, 1H) , 2.33 (s, 3H) , 2.14-2.08 (m, 2H) , 2.05-2.02 (m, 2H) , 1.81-1.77 (m, 2H) , 1.55-1.52 (m, 1H) , 1.41-1.37 (m, 6H) , 1.22-1.08 (m, H) , 0.80 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1215] Example 5: preparation of LP5 (MC-S (tBu) GC-DXD)

[1216] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -16, 16-dimethyl-1, 6, 9, 12-tetraoxo-7- (3-ureidopropyl) -3, 15-dioxa-5, 8, 11-triazaheptadecan-13-yl) hexanamide

[1217] Step 5a. To a solution of (S) -2- (3- (tert-butoxy) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) propanamido) acetic acid (100 mg, 0.24 mmol) was added DCC (75.22 mg, 0.36 mmol) and 1-hydroxytetrahydropyrrole-2, 5-dione (41.96 mg, 0.36 mmol) in DMF (3 mL) at 0 ℃ for 6 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (100 mg, white oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 531.2.

[1218] Step 5b. To a mixture of the compound from Step 3g (30 mg, 0.04 mmol) , DIPEA (17.1 mg, 0.13 mmol) in DMF (2 mL) was added the compound from Step 5a (45 mg, 0.08 mmol) . The mixture was stirred at 0 ℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (17.2 mg, 36.3%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1074.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.77–8.70 (m, 1H) , 8.55–8.51 (m, 1H) , 8.10–8.07 (m, 1H) , 8.00–7.85 (m, 2H) , 7.79–7.75 (m, 1H) , 7.31 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 5.95–5.92 (m, 1H) , 5.62–5.58 (m, 1H) , 5.43 (s, 2H) , 5.21 (s, 2H) , 4.65–4.61 (m, 2H) , 4.31 –4.14 (m, 2H) , 3.99 (s, 2H) , 3.81 –3.66 (m, 2H) , 3.29–3.18 (m, 8H) , 2.91 (s, 3H) , 2.45–2.40 (m, 3H) , 2.20–2.12 (m, 4H) , 1.92 –1.81 (m, 2H) , 1.56 –1.39 (m, 6H) , 1.39–1.32 (m, 2H) , 1.21 –1.15 (m, 2H) , 1.09 (s, 9H) , 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1219] Example 6: preparation of LP6 (MC-SGO (Boc) -DXD)

[1220] tert-butyl ( (S) -4- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3- hydroxypropanamido) acetamido) -5- ( ( (2- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -2-oxoethoxy) methyl) amino) -5-oxopentyl) carbamate

[1221] Step 6a. To a solution of (S) -2- ( ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) amino) -5- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) pentanoic acid (5.0 g, 11.0 mmol) , benzyl 2-aminoacetate (1.82 g, 11.0 mmol) , EDCI (2.53 g, 13.2 mmol) , HOBT (1.78 g, 13.2 mmol) in DCM (150 mL) was added DIPEA (4.27 g, 33.0 mmol) in one portion at 20 ℃. The mixture was stirred at 20 ℃ for 12 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (80 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～10%) to afford the desired product (6.0 g, white solid, yield: 90.7%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 624.2.

[1222] Step 6b. To a solution of the compound from Step 6a (1.5 g, 2.49 mmol) was added Pd / C (80 mg, 0.75 mmol) in CH3OH (30 mL) at 20 ℃ under H2. The mixture was stirred for 12 hours. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (1.1 g, white solid, yield: 86.35%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 534.2.

[1223] Step 6c. To a solution of the compound from Step 6b (1.5 g, 2.93 mmol) , cupric bis (acetate) hydrate (0.18 g, 0.88 mmol) , Pb (CH3COO) 4 (4.69 g, 4.39 mmol) , in THF (50 mL) was added acetic acid (0.70 g, 11.7 mmol) in one portion at 30 ℃. The mixture was stirred at 30 ℃ for 2 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (45 g silica gel column, PE / EA with EA from 0～55%) to afford the desired product (1.1 g, white solid, yield: 71.4%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 548.4.

[1224] Step 6d. To a mixture of the compound from Step 6c (1.1 g, 2.09 mmol) and benzyl hydroxyacetate (1.74 g, 10.46 mmol) in THF (20 mL) was added 4-methylbenzenesulfonic acid (0.04 g, 0.21 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 2 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (30 g silica gel column, PE / EA with EA from 0～60%) to afford the desired product (0.49 g, white solid, yield: 37.1%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 654.2.

[1225] Step 6e. To a mixture of the compound from Step 6d (0.49 g, 0.78 mmol) in MeOH (20 mL) was added Pd / C (20 mg, 0.23 mmol) at 20 ℃ under H2. The resulting mixture was then stirred at 20 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (0.45 g, white solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 564.3.

[1226] Step 6f. To a solution of the compound from Step 6e (280 mg, 0.52 mmol) , (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid (CAS 171335-80-1) (250 mg, 0.46 mmol) and DMTMM (250 mg, 0.52 mmol) was added DIPEA (200 mg, 1.55 mmol) in DMF (10 mL) at 0 ℃ for 5 minutes. The mixture was naturally warmed to 20 ℃ and stirred for 2 hours. The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) and H2O (50 mL) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～10%) to afford the desired product (0.27 g, brown solid, yield: 54.5%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 960.2

[1227] Step 6g. To a solution of the compound from Step 6f (50 mg, 0.05 mmol) was added diethylamine (0.08 mL, 0.78 mmol) in DMF (2 mL) at 0 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (42 mg, white oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 737.2.

[1228] Step 6h. To a mixture of the compound from Step 3h (100 mg, 0.22 mmol) , DIPEA (22.1 mg, 0.17 mmol) in DMF (5 mL) was added the compound from Step 6g (42 mg, 0.057 mmol) . The mixture was stirred at 0 ℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (7.1 mg, 11.6%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1074.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.80-8.70 (m, 1H) , 8.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H) , 8.30-8.13 (m, 2H) , 7.90 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.79 (d, J = 10.8 Hz, 1H) , 7.32 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.80-6.75 (m, 1H) , 6.59-6.51 (m, 1H) , 5.65-5.59 (m, 1H) , 5.42 (s, 2H) , 5.21 (s, 2H) , 4.65-4.55 (m, 2H) , 4.28 –4.10 (m, 3H) , 3.99 (s, 2H) , 3.75-3.71 (m, 2H) , 3.58-3.55 (m, 8H) , 2.90-2.86 (m, 2H) , 2.40 (s, 3H) , 2.20-2.18 (m, 2H) , 2.16 –2.10 (m, 4H) , 1.90-1.85 (m, 2H) , 1.65-1.61 (m, 2H) , 1.50-1.46 (m, 4H) , 1.35 (s, 9H) , 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1229] Example 7: preparation of LP7 (MC-SGE-DXD)

[1230] (4S) -4- { [ (5S) -12- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -5- (hydroxymethyl) -1, 4, 7-trioxo-3, 6-diazadodec-1-yl] amino} -5- ( { [ (2- { [ (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 12, 15-hexahydro-1H- cyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl] amino} -2-oxoethyl) oxy] methyl} amino) -5-oxopentanoic acid

[1231] Step 7a. A solution of (2S) -2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) -5- [ (2-methylprop-2-yl) oxy] -5-oxopentanoic acid (5000 mg, 11.751 mmol) , benzyl aminoacetate (1941.22 mg, 11.751 mmol) , EDCI (2703.30 mg, 14.102 mmol) , HOBt (1905.57 mg, 14.102 mmol) in DCM (150 mL) was added DIEA (4.27 g, 33.0 mmol) in one portion at 20 ℃. The mixture was stirred at 20 ℃ for 16 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (80 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～10%) to afford the desired product (5500 mg, 9.604 mmol, 81.73%) as yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M-55) , 517.3.

[1232] Step 7b. To a mixture of the compound from Step 7a (2000 mg, 3.492 mmol) was added Pd / C 10% (37.17 mg, 0.349 mmol) in MeOH (20 mL) at 20 ℃ under H2. The mixture was stirred for 12 hours. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (1600 mg, 2.487 mmol, 71.21%) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M-55) , 427.2.

[1233] Step 7c. A solution of the compound from Step 7b (1100 mg, 2.280 mmol) , cupric bis (acetate) hydrate (227.57 mg, 1.140 mmol) , lead tetraacetate (1516.13 mg, 3.419 mmol) , in THF (15 mL) , toluene (15 mL) was added pyridine (0.367 mL, 4.559 mmol) in one portion at 30 ℃. The mixture was stirred at 30 ℃ for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under vacuum purified by flash chromatography (PE / EA with EA from 0～40%) to afford the desired compound (280 mg, 0.564 mmol, 24.7%) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 519.2.

[1234] Step 7d. A solution of the compound from Step 7c (280 mg, 0.564 mmol) , benzyl hydroxyacetate (468.53 mg, 2.819 mmol) , 4-methylbenzenesulfonic acid (9.71 mg, 0.056 mmol) , in THF (20 mL) was stirred at 30 ℃ for  16 hours. The reaction mixture was concentrated under vacuum purified by flash chromatography (PE / EA with EA from 0～50%) to afford the desired compound (280 mg, 0.465 mmol, 82.39%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 625.4.

[1235] Step 7e. To a solution of the compound from Step 7d was added Pd / C 10% (280 mg, 0.465 mmol) in MeOH (15 mL) at 30 ℃ for 16 hours under H2. The mixture was concentrated to obtain the desired compound (230 mg, 96.6%yield) as a yellow solid, which was used in the next step without purification. LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 535.2.

[1236] Step 7f. To a mixture of the compound from Step 7e (0.23 g, 0.49 mmol) , Exatecan mesylate (CAS: 169869-90-3) (190 mg, 0.36 mmol) , DIPEA (174 mg, 1.35 mmol) in DMF (10 mL) was added DMTMM (159 mg, 0.54 mmol) . The mixture was stirred at 0 ℃ for 2 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (20 mL) and water (20 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (20 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / CH3OH with CH3OH from 0～5%) to afford the desired product (200 mg, white solid, yield: 47.9%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 930.2.

[1237] Step 7g. To a solution of the compound from Step 7f (200 mg, 0.21 mmol) in DCM (1.5 mL) was added TFA (0.32 ml, 4.3 mmol) at 0 ℃. After stirring at 25 ℃ for 3 hours. The solution was concentrated, and the residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / CH3OH with CH3OH from 0～5%) to afford the desired product (15 mg, yellow solid, yield: 7.9%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 946.2

[1238] Step 7h. To a solution of the compound from Step 7g (15 mg, 0.017 mmol) in DMF (0.5 mL) was added diethylamine (18.8 mg, 0.25 mmol) at 0 ℃. After stirring at 0 ℃ for 2 hours, the solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound, which was used in the next step without purification, (11 mg, yellow oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 652.2.

[1239] Step 7i. To a solution of the compound from Step 7h (11 mg, 0.017 mmol) , the compound from Step 3h (7.64 mg, 0.017 mmol) in DMF (0.5 mL) was added DIEA (6.55 mg, 0.05 mmol) at 0 ℃. After stirring 25℃ for 2 hours, the solvent was removed under vacuum and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1%FA) to afford the title compound (3.2 mg, 19 %yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 989.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ12.15 (s, 1H) , 8.73 –8.69 (m, 1H) , 8.55 –8.51 (m, 1H) , 8.20 –8.16 (m, 1H) , 8.04 –7.95 (m, 2H) , 7.81 –7.79 (m, 1H) , 7.31 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.51 (s, 1H) , 5.64 –5.60 (m, 1H) , 5.42 (s, 2H) , 5.22 (s, 2H) , 4.65 –4.61 (m, 2H) , 4.23 –4.18 (m, 2H) , 4.00 (s, 2H) , 3.73 –3.70 (m, 1H) , 3.58 –3.55 (m, 2H) , 3.20 –3.14 (m, 2H) , 2.40 (s, 3H) , 2.23 –2.13 (m, 8H) , 1.91 –1.87 (m, 4H) , 1.48 –1.43 (m, 4H) , 1.27 –1.20 (m, 4H) , 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1240] Example 8: preparation of LP8 (MC-SGC (PEG) -DXD)

[1241] 6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -N- ( (9S, 15S) -9- ( ( (2- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -2-oxoethoxy) methyl) carbamoyl) -1, 16-dihydroxy-4, 11, 14-trioxo-3, 5, 10, 13-tetraazahexadecan-15-yl) hexanamide

[1242] Step 8a. A mixture of 2- { [ (2-methylprop-2-yl) diphenylsilyl] oxy} ethan-1-amine (5 g, 16.69 mmol) and 1- ( { [ (2, 5-dioxotetrahydro-1H-pyrrol-1-yl) oxy] carbonyl} oxy) tetrahydropyrrole-2, 5-dione (4.28 g, 16.69 mmol) in DCM (50 mL) was stirred at 25 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound, which was used in the next step without further purification, (5 g, colorless oil, yield: 67.9%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 463.2.

[1243] Step 8b. A mixture of the compound from Step 8a (5 g, 11.34 mmol) , (2S) -5-amino-2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) pentanoic acid (3.42 g, 9.67 mmol) and DIPEA (4.40 g, 34.0 mmol) in DMF (50 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hr. The mixture was concentrated, and the residue was purified by reverse phase column chromatography (H2O / CH3CN with CH3CN from 0～50%) to afford the desired product (0.8 g, white solid, yield: 10.4%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 680.2.

[1244] Step 8c. A mixture of the compound from Step 8b (0.8 g, 1.17 mmol) , benzyl aminoacetate hydrochloride (0.31 g, 1.53 mmol) , EDCI (0.29 g, 1.53 mmol) , HOBT (0.21 g, 1.53 mmol) and DIEA (0.46 g, 3.53 mmol) in DCM (20 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hrs. The reaction was quenched by water (20 mL) . The aqueous layer was separated and extracted with DCM (20 mL*2) . The combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography (PE / EA with EA from 0～50%) to afford the desired product (0.5 g, white solid, yield: 51.4 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 827.6.

[1245] Step 8d. A mixture of the compound from Step 8c (500 mg, 4.69 mmol) and Pd / C (100 mg, 0.03 mmol) in CH3OH (15 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hrs under H2 atmosphere. The mixture was filtered and concentrated to obtain the desired compound, which was used in the next step without further purification, (0.4 g, white solid, yield: 89.9%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 737.4.

[1246] Step 8e. A mixture of the compound from Step 8d (400 mg, 0.54 mmol) , acetic acid (130 mg, 2.17 mmol) , acetic acid (32.5 mg, 0.16 mmol) and Pb (OAc) 4 (721 mg, 1.6 mmol) in THF (15 mL) was stirred at 30℃ for 2 hrs. The mixture was diluted with DCM (20 mL) and washed with water (10 mL) . The aqueous layer was separated and  extracted with DCM (20 mL*4) . The combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography (PE / EA with EA from 0～50%) to afford the desired product (180 mg, yellow solid, yield: 44.16%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 773.4.

[1247] Step 8f. A mixture of the compound from Step 8e (180 mg, 0.24 mmol) , benzyl hydroxyacetate (199 mg, 1.20 mmol) and 4-methylbenzenesulfonic acid hydrate (23 mg, 0.12 mmol) in THF (5 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 hrs. The mixture was diluted with DCM (20 mL) and washed with water (10 mL) . The aqueous layer was separated and extracted with DCM (20 mL*4) . The combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography (PE / EA with EA from 0～60%) to afford the desired product (60 mg, white solid, 29.2%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 857.6.

[1248] Step 8g. A mixture of the compound from Step 8f (60 mg, 0.07 mmol) and Pd / C (20 mg, 0.19 mmol) in MeOH (8 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hrs under H2 atmosphere. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without further purification (50 mg, white solid, 93.1%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 767.4.

[1249] Step 8h. A mixture of the compound from Step 8g (60 mg, 0.08 mmol) , Exatecan mesylate (CAS: 169869-90-3) (29 mg, 0.07 mmol) in DMF (8 mL) was added DMTMM (46 mg, 0.15 mmol) and DIEA (30 mg, 0.23 mmol) at 0 ℃. The solution was diluted with DCM (20 mL) and washed with water (10 mL) and the phases were separated. The aqueous layer was extracted four times with DCM (20 mL) , the combined organic phases were dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was purified by reverse phase column chromatography (H2O / CH3CN with CH3CN from 0～60%) to afford the desired product (30 mg, yellow solid, yield: 32.6%) . LC-MS: (ESI) m / z (1 / 2M+H) , 593.0.

[1250] Step 8i. A mixture of the compound from Step 8h (25 mg, 0.02 mmol) and fluorine pyridine (5 mg, 0.04 mmol) in pyridine (2 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hrs. The solution was concentrated, and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %FA) to afford the desired product (10 mg, yellow solid, yield: 50.1%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 946.2.

[1251] Step 8j. A mixture of the compound from Step 8i (10 mg, 0.01 mmol) and diethylamine (15 mg, 0.21 mmol) in DMF (0.5 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 hrs. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound, which was used in the next step without purification, (8 mg, colorless oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 724.4.

[1252] Step 8k. A mixture of the compound from Step 8j (8 mg, 0.01 mmol) , the compound from Step 3h (5 mg, 0.01 mmol) and DIEA (4.3 mg, 0.03 mmol) in DMF (0.5 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 hrs, the solvent was removed under vacuum and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %FA) to afford the title compound (4.0 mg, 34.1%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (1 / 2M+H) , 531.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.74 –8.71 (m, 1H) , 8.55 –8.51 (m, 1H) , 8.20 –8.14 (m, 1H) , 7.95 –7.91 (m, 2H) , 7.82 –7.79 (m, 1H) , 7.32 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.52 (s, 1H) , 5.95 –5.93 (s, 1H) , 5.84 –5.82 (s, 1H) , 5.58 –5.55 (m, 1H) , 5.43 (s, 2H) , 5.21 (s, 2H) , 4.98 –4.95 (m, 1H) , 4.69 –4.63 (m, 3H) , 4.26 –4.20 (m, 2H) , 3.99 (s, 2H) , 3.75 –3.71 (m, 2H) , 3.58 –3.54 (m, 3H) , 3.17 –3.15 (m, 1H) , 3.05 –3.01 (m, 2H) , 2.95 –2.92 (m, 2H) , 2.40 (s, 3H) , 2.20 –2.10 (m, 4H) , 1.91 –1.84 (m, 2H) , 1.70 –1.62 (m, 2H) , 1.52 –1.46 (m, 6H) , 1.39 –1.25 (m, 6H) , 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1253] The following examples 9-11 were prepared using procedures similar to those described above:

[1254] Example 12: preparation of LP12 (MsP-SGC-DXD)

[1255] N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -14-hydroxy-1, 6, 9, 12-tetraoxo-7- (3-ureidopropyl) -3-oxa-5, 8, 11-triazatetradecan-13-yl) -6- (2- (methylsulfonyl) pyrimidin-5-yl) hex-5-ynamide

[1256] Step 12a. To a solution of (2S) -2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) -3- [ (2-methylprop-2-yl) oxy] propanoic acid (1 g, 2.608 mmol) in DMF (20 mL) , HATU (1.49 g, 3.912 mmol) , 2-methylpropan-2-yl aminoacetate (0.41 g, 3.130 mmol) and DIPEA (1.293 mL, 7.824 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (50 mL) and water (20 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (20 mL×2) , and the combined  organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-50%PE in EA) to afford the desired compound (1.1 g, white solid, 84%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 519.4.

[1257] Step 12b. To a solution of the compound from Step 12a (3.5 g, 7.048 mmol) in DCM (50 mL) , TFA (10 mL, 2.215 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (2.2 g, white solid, 81%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+1) , 385.4.

[1258] Step 12c. To a solution of the compound from Step 12b (91.61 mg, 0.238 mmol) in DMF (5 mL) , HATU (113.28 mg, 0.298 mmol) , DIPEA (0.098 mL, 0.596 mmol) and the compound from Step 3g (135 mg, 0.199 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 4 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (20 mL) and water (10 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (10 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (100 mg, white solid, 48%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1047.2.

[1259] Step 12d. To a solution of the compound from Step 12c (150 mg, 0.143 mmol) in DMF (5 mL) , diethylamine (0.045 mL, 0.430 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 2 h. It was concentrated at reduced pressure and the mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (118 mg, light yellow oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 824.2.

[1260] Step 12e. To a solution of 6- [2- (methyldioxo-λ6-sulfanyl) pyrimidin-5-yl] hex-5-ynoic acid (CAS 2356229-58-6) (58.62 mg, 0.218 mmol) in DMF (5 mL) , HATU (83.08 mg, 0.218 mmol) , DIPEA (0.072 mL, 0.437 mmol) and the compound from Step 12d (120 mg, 0.146 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 4 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (30.6 mg, yellow solid, 19%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1075.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.11 (s, 2H) , 8.74 (t, J = 6.4 Hz, 1H) , 8.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 8.21 (t, J = 5.6 Hz, 1H) , 8.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.79-7.75 (m, 1H) , 7.31 (s, 1H) , 5.95 (s, 1H) , 5.61-5.58 (m, 1H) , 5.43 (s, 2H) , 5.20 (s, 2H) , 4.63-4.61 (m, 2H) , 4.27-4.16 (m, 3H) , 4.00 (s, 3H) , 3.74 -3.71 (m, 3H) , 3.59-3.57 (m, 3H) , 3.25-3.11 (m, 2H) , 2.95-2.89 (m, 2H) , 2.58-2.54 (m, 2H) , 2.53-2.51 (m, 3H) , 2.38-2.33 (m, 5H) , 2.23-2.13 (m, 2H) , 1.92-1.77 (m, 4H) , 1.71 –1.62 (m, 1H) , 1.52-1.45 (m, 1H) , 1.40-1.25 (m, 2H) , 0.85 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1261] Example 13: preparation of LP13 (MsP-SGR-DXD)

[1262] N- ( (7S, 13S) -1- ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) amino) -7- (3-guanidinopropyl) -14-hydroxy-1, 6, 9, 12-tetraoxo-3-oxa-5, 8, 11-triazatetradecan-13-yl) -6- (2- (methylsulfonyl) pyrimidin-5-yl) hex-5-ynamide

[1263] Step 13a. A mixture of the compound from Step 12b and the compound from Step 1g (80 mg, 0.12 mmol) , DIEA (45 mg, 0.35 mmol) , DMTMM (70 mg, 0.24 mmol) in DMF (2 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hours. The mixture was concentrated in vacuo and the residue was purified by reverse phase column chromatography (C18, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～50%) to afford the desired product (40 mg, 32%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1044.6.

[1264] Step 13b. A mixture of the compound from Step 13a (40 mg, 0.038 mmol) and DEA (79 uL, 0.76 mmol) in DMF (2 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 hr. The solution was filtered and concentrated in vacuo to obtain the desired compound (32 mg) as a brown solid which was used in the next step without purification. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 822.7.

[1265] Step 13c. A mixture of the compound from Step 13b (32 mg, 0.039 mmol) , 6- (2- (methylsulfonyl) pyrimidin-5-yl) hex-5-ynoic acid (CAS: 2356229-58-6) (12 mg, 0.043 mmol) , HATU (29 mg, 0.078 mmol) and DIEA (15 mg, 0.117 mmol) in DMF (3 mL) was stirred at 25 ℃ for 2 hrs. The mixture was concentrated in vacuo and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (9.1 mg, 23%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1073.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.11 (s, 2H) , 8.77 –8.72 (m, 1H) , . 8.56 –8.54 (m, 1H) , 8.25 –8.21 (m, 1H) , 8.12 –8.06 (m 1H) , 8.03 –7.99 (m, 1H) , 7.83 –7.80 (m, 1H) , 7.46 –7.42 (m, 1H) , 7.33 (s, 1H) , 7.11 –6.78 (m, 2H) , 6.55 (s, 1H) , 5.63 –5.59 (m, 1H) , 5.43 (s, 2H) , 5.21 (s, 2H) , 5.10 –4.99 (m, 1H) , 4.70 –4.64 (m, 2H) , 4.29 –4.25 (m, 2H) , 4.01 (s, 2H) , 3.80 –3.74 (m, 2H) , 3.66 –3.60 (m, 2H) , 3.41 (s, 3H) , 3.22 –3.19 (m, 2H) , 3.15 –3.07 (m, 3H) , 2.60 –2.58 (m, 2H) , 2.40 (s, 3H) , 2.39 –2.37 (m, 2H) , 2.23 –2.18 (m, 2H) , 1.88 –1.79 (m, 4H) , 1.51 –1.46 (m, 4H) , 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1266] The following examples 14-18 were prepared using procedures similar to those described above:

[1267] Example 19: preparation of LP19 (MC-SGC-PABC-Exatecan)

[1268] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -5-ureidopentanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1269] Step 19a. To a solution of (S) -2- ( ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) amino) -5-ureidopentanoic acid (10.0 g, 19.9 mmol) in DCM (100 mL) , EEDQ (5.90 g, 23.88 mmol) and (4-aminophenyl) methanol (2.94 g, 23.88 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15 ℃ for about 16 hours. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (300 mL) and water (100 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (200 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (7.0 g, white solid, 70%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 503.2.

[1270] Step 19b. To a solution of the compound from Step 19a (1.0 g, 1.99 mmol) in DMF (20 mL) , 4-nitrophenyl carbonochloridate (510 mg, 2.38 mmol) and pyridine (310 mg, 3.98 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (50 mL) and water (20 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (30 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (270 mg, white solid, 20%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 668.2.

[1271] Step 19c. To a solution of the compound from Step 19b (150 mg, 0.225 mmol) in DMF (5 mL) , (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione (107.61 mg, 0.247 mmol) , DIPEA (0.111 mL, 0.674 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15℃ for about 3 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (120 mg, yellow solid, 55%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+1) , 964.4.

[1272] Step 19d. To a solution of the compound from Step 19c (120 mg, 0.124 mmol) in DMF (0.5 mL) , diethylamine (27.2 mg, 0.372 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15℃ for about 1 h. The mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (90 mg, light yellow solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+1) , 742.4.

[1273] Step 19e. To a solution of the compound from Step 19d (90 mg, 0.121 mmol) in DMF (0.5 mL) , the compound from Step 3h (109.784 mg, 0.242 mmol) , DIPEA (46.917 mg, 0.363 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 15℃ for about 3 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (10.3 mg, yellow solid, 7.8%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1079.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.87 (s, 1H) , 8.14 (m, 1H) , 7.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 7.93 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.86 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.71 (d, J = 10.8 Hz, 1H) , 7.56 (m, 2H) , 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.25 (s, 1H) , 6.92 (s, 2H) , 6.56-6.30 (m, 1H) , 5.90 (s, 1H) , 5.38 (s, 2H) , 5.22 (s, 3H) , 5.01 (s, 2H) , 4.33 (m, 1H) , 4.19-4.14 (m, 1H) , 3.68-3.67 (m, 2H) , 3.54-3.49 (m, 3H) , 3.10-2.99 (m, 2H) , 2.82-2.88 (m, 4H) , 2.60-2.58 (m, 1H) , 2.31 (s, 3H) , 2.28-2.24 (m, 1H) , 2.08-2.05 (m, 3H) , 1.86-1.76 (m, 2H) , 1.66-1.59 (m, 1H) , 1.54-1.52 (m, 1H) , 1.49-1.36 (m, 6H) , 1.17-1.08 (m, 3H) , 0.81 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1274] Example 20: preparation of LP20 (MC-SGO (dEt) -PABC-Exatecan)

[1275] 4- ( (S) -5- (diethylamino) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) pentanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrobenzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1276] Step 20a. To a solution of (S) -2- ( ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) amino) -5-aminopentanoic acid (5 g, 14.1 mmol) , acetaldehyde (4.97 g, 112.8 mmol) , acetic acid (2.54 g, 42.3 mmol) was added sodium cyanoboranuide (3.55 mL, 56.4 mmol) in EtOH (50 mL) at 20 ℃ for 4 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (120 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～40%) to afford the desired product (2 g, white solid, yield: 34.5%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 411.2.

[1277] Step 20b. To a solution of the compound from Step 20a (0.44 g, 5.36 mmol) in DMF (15 mL) at 25 ℃for 18 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were  dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (30 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～10%) to afford the desired product (0.4 g, white solid, yield: 31.8%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 516.4.

[1278] Step 20c. To a mixture of the compound from Step 20b (0.4 mg, 0.77 mmol) , 4-nitrophenyl [ (4-nitrophenyl) oxy] methanoate (0.47 mg, 1.55 mmol) , DMAP (10 mg, 0.08 mmol) in DMF (8 mL) was added DIPEA (300 mg, 2.33 mmol) . The mixture was stirred at 0 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (40 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～50%) to afford the desired product (200 mg, yellow solid, yield: 37.8%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 681.2.

[1279] Step 20d. To a mixture of (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid (140 mg, 0.26 mmol) , the compound from Step 20c (150 mg, 0.22 mmol) in DMF (5 mL) was added DIPEA (85 mg, 0.66 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (40 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～80%) to afford the desired product (110 mg, yellow solid, yield: 51.1%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 978.2.

[1280] Step 20e. To a mixture of the compound from Step 20d (50 mg, 0.05 mmol) in DMF (0.5 mL) was added diethylamine (60 mg, 0.76 mmol) at 0 ℃. The resulting mixture was then stirred at 0 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (35 mg, white solid, yield: 90.6%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 755.4.

[1281] Step 20f. To a mixture of the compound from Step 20e (35 mg, 0.046 mmol) and DIPEA (0.023 mL, 0.14 mmol) in DMF (1 mL) was added the compound from Step 3h (40 mg, 0.09 mmol) . The mixture was stirred at 20 ℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (17.7 mg, 34.9%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1093.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.98 (s, 1H) , 8.96 (s, 1H) , 8.30 -8.25 (m, 1H) , 8.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 8.01 -7.97 (m, 1H) , 7.81 -7.79 (m, 1H) , 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 2H) , 7.40 (s, 2H) , 7.32 (s, 1H) , 7.00 (s, 2H) , 6.50 (m, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.35 -5.29 (m, 3H) , 5.10 (s, 2H) , 4.50 -4.47 (m, 1H) , 4.27 -4.18 (m, 1H) , 3.81 -3.77 (m, 2H) , 3.65 -3.60 (m, 2H) , 3.32 -3.20 (m, 4H) , 3.15 -3.09 (m, 8H) , 2.39 (s, 3H) , 2.25 -2.11 (m, 5H) , 1.98 -1.75 (m, 4H) , 1.70 -1.67 (m, 2H) , 1.50 -1.48 (m, 4H) , 1.18 (t, J = 6.8 Hz, 6H) , 0.89 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1282] Example 21: preparation of LP21 (MC-SGE-PABC-Exatecan)

[1283] (S) -4- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -5- ( (4- ( ( ( ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrobenzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamoyl) oxy) methyl) phenyl) amino) -5-oxopentanoic acid LP21 was prepared according to step 21 of Example 22.

[1284] Example 22: preparation of LP22 (MC-SGE (tBu) -PABC-Exatecan)

[1285] (4- { [ (2S, 8S) -15- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) -8- (hydroxymethyl) -2- {3- [ (2-methylprop-2-yl) oxy] -3-oxopropyl} -1, 4, 7, 10-tetraoxo-3, 6, 9-triazapentadec-1-yl] amino} phenyl) methyl { [ (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 12, 15-hexahydro-1H-cyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl] amino} methanoate

[1286] Step 22a. To a mixture of (2S) -2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) -5- [ (2-methylprop-2-yl) oxy] -5-oxopentanoic acid (3.97 g, 9.337 mmol) and (4-aminophenyl) methanol (1 g, 8.120 mmol) in DMF (18.34 mL) was added 1-methylimidazole (1.359 mL, 17.051 mmol) . TCFH (2.73 g, 9.743 mmol) was added to the mixture. The mixture was stirred for 2 hours at 23 ℃. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between EA (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (30 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (160 g silica gel column, PE / EA with EA from 0～63%) to afford the desired product (3.2 g, white solid, yield: 74.3%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 553.3.

[1287] Step 22b. To a mixture of the compound from Step 22a (1.5 g, 2.827 mmol) and pyridine (1.137 mL, 14.134 mmol) in THF (50 mL) and DMF (25 mL) was added 4-nitrophenyl chloromethanoate (8.55 g, 42.403 mmol) at 0 ℃. The mixture was stirred at 20 ℃ for 3 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between EA (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (20 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (80 g silica gel column, PE / EA with EA from 0～55%) to afford the title product (1.46 g, colourless oil, yield: 74.2%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 718.4.

[1288] Step 22c. To a mixture of (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid  (257.86 mg, 0.485 mmol) , DIPEA (0.160 mL, 0.970 mmol) in DMF (6 mL) was added the compound from Step 22b (225 mg, 0.323 mmol) . The mixture was stirred at 20 ℃ for 12 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (80 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～84%) to afford the desired product (140 mg, yellow solid, yield: 43.6%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 992.4.

[1289] Step 22d. To a solution of the compound from Step 22c (140 mg, 0.14 mmol) was added diethylamine (154.8 mg, 2.11 mmol) in DMF (5 mL) at 0 ℃ for 2 hours. The solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (0.12 g, white solid, quantitative yield) . LC-MS:(ESI) m / z (M+H) , 770.4.

[1290] Step 22. To a mixture of the compound from Step 22d (124 mg, 0.16mmol) and DIPEA (62.3 mg, 0.48 mmol) in DMF (3 mL) was added the compound from Step 5h (145 mg, 0.32 mmol) . The mixture was stirred at 20 ℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound LP22 (278 mg, 15.7%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1108.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.80 (s, 1H) , 8.20 -8.18 (m, 1H) , 8.00 -7.99 (m, 1H) , 7.96 -7.86 (m, 2H) , 7.75 -7.72 (m, 1H) , 7.60 -7.56 (m, 2H) , 7.33 -7.30 (m, 2H) , 7.24 (s, 1H) , 6.93 (s, 2H) , 6.45 (s, 1H) , 5.38 (s, 2H) , 5.25 -5.23 (m, 3H) , 5.01 (s, 2H) , 4.39 -4.31 (m, 1H) , 4.20 -4.14 (m, 1H) , 3.70 -3.67 (m, 2H) , 3.53 -3.51 (m, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 2.10 -2.04 (m, 6H) , 1.85 -1.72 (m, 6H) , 1.43 -1.40 (m, 6H) , 1.30 (s, 9H) , 1.14 -1.10 (m, 2H) , 0.81 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1291] Step 21. To a mixture of the compound from Step 22 (i.e. Example 22, 20 mg, 0.018 mmol) in DCM (0.4 mL) was added TFA (0.04 mL, 0.54 mmol) . The mixture was stirred for 4 hours at 0 ℃. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound LP21 (i.e. Example 21, 6.4 mg, 34.2%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1052.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.13 (s, 1H) , 9.89 (s, 1H) , 8.30 -8.26 (m, 1H) , 8.09 -8.07 (m, 1H) , 8.05 -7.99 (m, 2H) , 7.81 -7.79 (m, 1H) , 7.65 -7.63 (m, 2H) , 7.40 -7.38 (m, 2H) , 7.32 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.53 (s, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.30 (s, 3H) , 5.09 (s, 2H) , 4.45 -4.39 (m, 1H) , 4.25 -4.22 (m, 1H) , 3.78 -3.75 (m, 2H) , 3.62 -3.58 (m, 2H) , 3.14 (s, 1H) , 2.38 (s, 3H) , 2.32 –2.11 (m, 8H) , 2.10 -1.87 (m, 6H) , 1.50 -1.47 (m, 4H) , 1.21 –1.15 (m, 2H) , 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1292] Example 23: preparation of LP23 (MC-SGC (Me) -PABC-Exatecan)

[1293] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -5- (3-methylureido) pentanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1294] Step 23a. To a solution of (2S) -5-amino-2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) pentanoic acid (3 g, 8.465 mmol) in DCM (50 mL) , TEA (3.530 mL, 25.394 mmol) and 1- (chlorooxidanyl) -N-methylmethanamide (1.85 g, 16.930 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃for about 3 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (50 mL) and water (20 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (20 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%DCM in MeOH) to afford the desired compound (2.2 g, white solid, 63%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 412.2.

[1295] Step 23b. To a solution of the compound from Step 23a (2.2 g, 5.347 mmol) in DMF (20 mL) , (4-aminophenyl) methanol (0.66 g, 5.347 mmol) , 1-methyl-1H-imidazole (0.92 g, 11.228 mmol) and TCFH (1.80 g, 6.416 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (50 mL) and water (30 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (30 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%MeOH in DCM) to afford the desired compound (450 mg, white solid, 16%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 517.2.

[1296] Step 23c. To a solution of the compound from Step 23b (300 mg, 0.581 mmol) in DMF (10 mL) , DIPEA (0.288 mL, 1.742 mmol) and 4-nitrophenyl [ (4-nitrophenyl) oxy] methanoate (1059.97 mg, 3.484 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (20 mL) and water (10 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (10 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%MeOH in DCM) to afford the desired compound (170 mg, yellow solid, 43%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 680.0.

[1297] Step 23d. To a solution of the compound from Step 23c (200 mg, 0.293 mmol) in DMF (5 mL) , DIPEA (0.048 mL, 0.293 mmol) and (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione (127.76 mg, 0.293 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred 20 ℃ for about 1 h. It was concentrated at reduced  pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (250 mg, yellow solid, 87%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 978.4.

[1298] Step 23e. To a solution of the compound from Step 23d (200 mg, 0.204 mmol) in DMF (5 mL) , diethylamine (0.063 mL, 0.613 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for about 2 h. It was concentrated at reduced pressure and the mixture was concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (154 mg, yellow solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 756.2.

[1299] Step 23f. To a solution of the compound from Step 23e (150 mg, 0.198 mmol) in DMF (5 mL) , DIPEA (0.098 mL, 0.595 mmol) and the compound from Step 3h (89.79 mg, 0.198 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 25 ℃ for about 1 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (28.3 mg, yellow solid, 13%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1094.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.93 (s, 1H) , 8.21 (t, J = 5.6 Hz, 1H) , 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 7.99 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.93 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.77 (d, J = 10.8 Hz, 1H) , 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.31 (s, 1H) , 6.98 (s, 2H) , 6.52 (s, 1H) , 5.95-5.91 (m, 1H) , 5.70-5.60 (m, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.28-5.27 (m, 3H) , 5.08 (s, 2H) , 4.41-4.36 (m, 1H) , 4.25-4.21 (m, 1H) , 3.75-3.74 (m, 2H) , 3.58-3.56 (m, 2H) , 3.28-3.19 (m, 2H) , 3.09-2.89 (m, 4H) , 2.37 (s, 4H) , 2.22-2.11 (m, 5H) , 1.92-1.83 (m, 2H) , 1.74-1.65 (m, 1H) , 1.61-1.57 (m, 1H) , 1.56-1.48 (m, 6H) , 1.37-1.31 (m, 1H) , 1.22-1.15 (m, 3H) , 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1300] Example 24: preparation of LP24 (MC-SGC (PEG) -PABC-Exatecan)

[1301] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -5- (3- (2-hydroxyethyl) ureido) pentanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrobenzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1302] Step 24a. To a solution of 2-aminoethan-1-ol (3 g, 49.16 mmol) , 1H-imidazole (6.69 g, 98.23 mmol) in DCM (50 mL) was added TBDPSCl (14.18 g, 51.57 mmol) at 20 ℃. After 18 hours stirring, the mixture was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between DCM (100 mL) and water (50 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (50 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (80 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～5%) to afford the desired product (7.5 g, colorless oil, yield: 53.57%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 300.2.

[1303] Step 24b. To a solution of 2- ( (tert-butyldiphenylsilyl) oxy) ethanamine (3 g, 10.01 mmol) in DCM (30 mL) was added the compound from Step 24a (3.08 g, 12.02 mmol) at 25 ℃. After 3 hours stirring, the solution was concentrated and the residue was purified by flash chromatography (80 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～5%) to afford the desired product (3 g, colorless oil, yield: 67.98 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 463.2.

[1304] Step 24c. To a mixture of the compound from Step 24b (3 g, 6.81 mmol) , (2S) -5-amino-2- ( { [ (9H-fluoren-9-ylmethyl) oxy] carbonyl} amino) pentanoic acid (2.9 g, 8.17 mmol) in DMF (8 mL) was added DIPEA (2.64 g, 20.43 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 18 hours. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (80 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～80%) to afford the desired product (0.36 g, white solid, yield: 7.78%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 680.2.

[1305] Step 24d. To a mixture of the compound from Step 24c (300 mg, 0.44 mmol) , (4-aminophenyl) methanol (70 mg, 0.52 mmol) , TCFH (150 mg, 0.52 mmol) in DMF (5 mL) was added 1-methylimidazole (80 mg, 0.97 mmol) at 0 ℃. The resulting mixture was then stirred at 0 ℃ for 2 hours, the mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (10 mL) and water (5 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (5 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and the filtrate concentrated  under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～5%) to afford the desired product (0.24 g, yellow solid, yield: 69.29 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 785.2.

[1306] Step 24e. To a solution of the compound from Step 24d (150 mg, 0.19 mmol) , 4-nitrophenyl [ (4-nitrophenyl) oxy] methanoate (116.25 g, 0.38 mmol) , 4- (dimethylamino) pyridine (11.67 mg, 8.96 mmol) in DMF (5 mL)was added DIPEA (74.09 g, 0.57 mmol) at 0 ℃. After stirring at 25℃ for 18 hours, the solution was diluted with DCM (20 mL) and washed with water (10 mL) and the phases were separated. The aqueous layer was extracted four times with DCM ( (20 mL) , the combined organic phases were dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～5%) to afford the desired product (0.24 g, yellow solid, yield : 69.29 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 951.4.

[1307] Step 24f. To a solution of the compound from Step 24e (120 mg, 0.23 mmol) , (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid (80 mg, 0.15 mmol) in DMF (10 mL) was added DIPEA (49 mg, 0.38 mmol) at 20 ℃. After stirring at 20 ℃ for 4 hours, the solution was concentrated and the residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, DCM / MeOH with MeOH from 0～5%) to afford the desired product (0.11 g, yellow solid, yield: 69.87 %) . LC-MS: (ESI) m / z (1 / 2M+H) , 624.0.

[1308] Step 24g. To a solution of the compound from Step 24f (100 mg, 0.08 mmol) , CH3COOH (0.08 ml, 1.39 mmol) in THF (5 mL) was added 1N HCl (0.08 ml, 0.08 mmol) at 0 ℃. After 18 hours stirring, the solution was filtered and the filtrate was purified by Prep-HPLC to afford the desired product (40 mg, yellow solid, yield: 49.46%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1009.4.

[1309] Step 24h. To a solution of the compound from Step 24g (40 mg, 0.04 mmol) in DMF (5 mL) was added diethylamine (43.5 mg, 0.59 mmol) at 0 ℃ for 2 hours. After 2 hours of stirring, the solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (50 mg, yellow oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 786.4.

[1310] Step 24i. To a solution of the compound from Step 24h (50 mg, 0.064 mmol) in DMF (3 mL) was added DIPEA (24.7 mg, 0.19 mmol) and the compound from Step 3h (57.57 mg, 0.13 mmol) at 25 ℃. After stirring 25 ℃for 2 hours, the solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (18.5 mg, 25.9%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1124.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.93 (s, 1H) , 8.21 (s, 1H) , 8.10 -8.06 (m, 1H) , 8.05 -8.00 (m, 1H) , 7.95 -7.93 (m, 1H) , 7.80 -7.78 (m, 1H) , 7.65 -7.62 (m, 2H) , 7.41 -7.37 (m, 2H) , 7.31 (s, 1H) , 7.00 (s, 2H) , 6.51 (s, 1H) , 5.97 (s, 1H) , 5.84 (s, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.30 -5.29 (m, 3H) , 5.08 (s, 2H) , 4.40 -4.38 (m, 1H) , 4.25 -4.21 (m, 1H) , 3.80 -3.75 (m, 2H) , 3.59 -3.56 (m, 2H) , 3.25 -3.14 (m, 4H) , 3.03 -2.95 (m, 6H) , 2.38 (s, 3H) , 2.20 -2.16 (m, 4H) , 1.91 -1.82 (m, 2H) , 1.75 -1.50 (m, 4H) , 1.49 -1.45 (m, 6H) , 1.21 -1.19 (m, 2H) , 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1311] Example 25: preparation of LP25 (MC-TGC-PABC-Exatecan)

[1312] 4- ( (S) -2- (2- ( (2S, 3S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxybutanamido) acetamido) -5-ureidopentanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-2, 3, 9, 10, 13, 15-hexahydro-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1313] Step 25a. To a solution of N- ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) -O- (tert-butyl) -L-allothreonine (2.0 g, 5.035 mmol) in DMF (20 mL) , HATU (2.87 g, 7.553 mmol) , DIPEA (2.488 mL, 15.105 mmol) and tert-butyl glycinate (660 mg, 5.035 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 25 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (10 mL) and water (5 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (10 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by chromatography (silica, 0-10%MeOH in DCM) to afford the desired compound (1.8 g, white solid, 70%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 533.4.

[1314] Step 25b. To a solution of the compound from Step 25a (700 mg, 1.372 mmol) in DCM (15 mL) , TFA (3 mL) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 25 ℃ for about 16 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (300 mg, white solid, 54%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 399.0.

[1315] Step 25c. To a solution of the compound from Step 19d (150 mg, 0.202 mmol) in DMF (5 mL) , HATU (115.34 mg, 0.303 mmol) , DIPEA (0.100 mL, 0.607 mmol) and the compound from Step 25b (96.68 mg, 0.243 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 25 ℃ for about 8 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was partitioned between EA (30 mL) and water (15 mL) . The aqueous layer was extracted with EA (20 mL×2) , and the combined organics were dried (Na2SO4) , filtered, and concentrated. The residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (60 mg, white solid, 26%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1122.4.

[1316] Step 25d. To a solution of the compound from Step 25c (60 mg, 0.053 mmol) in DMF (0.5 mL) , diethylamine (0.017 mL, 0.160 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 0 ℃ for about 2 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by RP-FC (C18, 5-95%MeCN in H2O) to afford the desired compound (35 mg, white solid, 72%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 900.2.

[1317] Step 25e. To a solution of the compound from Step 25d (35 mg, 0.039 mmol) in DMF (1 mL) , DIPEA (0.019 mL, 0.117 mmol) and 1- {6- [ (2, 5-dioxotetrahydro-1H-pyrrol-1-yl) oxy] -6-oxohexyl} pyrrole-2, 5-dione (17.98 mg, 0.058 mmol) was added slowly at 0 ℃. The resulting mixture was stirred at 25 ℃ for about 1 h. It was concentrated at reduced pressure and the residue was purified by Prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (2.7 mg, yellow solid, 6%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1093.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.00 (s, 1H) , 8.10-8.01 (m, 3H) , 7.80-7.72 (m, 2H) , 7.63-7.61 (m, 2H) , 7.37-7.35 (m, 2H) , 7.31 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.57-6.47 (m, 1H) , 5.98-5.94 (m, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.29 (s, 2H) , 5.08 (s, 2H) , 4.43-4.38 (m, 1H) , 4.17-4.14 (m, 1H) , 4.00-3.96 (m, 1H) , 3.76-3.75 (m, 3H) , 3.13-3.08 (m, 1H) , 3.04-2.97 (m, 2H) , 2.92-2.88 (m, 2H) , 2.80-2.78 (m, 1H) , 2.68-2.65 (m, 2H) , 2.38 (s, 3H) , 2.33-2.30 (m, 1H) , 2.23-2.13 (m, 4H) , 1.91-1.84 (m, 2H) , 1.72-1.65 (m, 1H) , 1.53-1.43 (m, 6H) , 1.23-1.16 (m, 3H) , 1.04 (d, J = 6.4 Hz, 3H) , 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1318] Example 26: preparation of LP26 (MC-SGhC (O) -PABC-Exatecan)

[1319] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -3- (2-ureidoethoxy) propanamido) benzyl ( (1S, 9S) -9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10, 13-dioxo-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrobenzo [de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-1-yl) carbamate

[1320] Step 26a. To a solution of benzyl (2S) -2- (methoxycarbonyl) aziridine-1-carboxylate (3.8 g, 16.154 mmol) in CHCl3 (10 mL) under N2 atmosphere was added 2-azidoethan-1-ol (133.23 mg, 1.530 mmol) followed by the addition of ethoxyethane trifluoroborane (27.14 mg, 0.191 mmol) at 0 ℃. After stirring 1 hour, then solution was warmed to 25 ℃ and continued stirring for a further 12 hours. Partition the reaction mixture between DCM (50 mL) and saturated NaHCO3 (50 mL) . The organic phase was washed with Brine (50 mL) , dried over Sodium Sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by flash chromatography (160 g silica gel column, PE / EA from 0～25%) to give the desired product (1.9 g, white solid, yield: 29.67%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 419.2.

[1321] Step 26b. To a solution of the compound from Step 26a (1.9 g, 4.79 mmol) in DCM (15 mL) was added 1N HCl (2.62 g, 71.9 mmol) at 20 ℃. After 3 hours stirring, the solution was concentrated and the residue was purified by reverse phase column (80 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～60%) to afford the desired product (0.95 g, white solid, yield: 66.89%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 297.2.

[1322] Step 26c. To a mixture of the compound from Step 26b (0.95 g, 3.2 mmol) , 1-oxo-N- (trimethylsilyl) methanimine (0.37 g, 3.2 mmol) in DCM (8 mL) was added TEA (0.65 mg, 16.4 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 18 hours, the solution was concentrated and the residue was diluted with DMF (2 mL) and purified by reverse phase column (80 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～60%) to afford the desired product (0.6 g, colorless oil, yield: 55.15%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 340.2.

[1323] Step 26d. To a mixture of the compound from Step 26c (540 mg, 1.59 mmol) in THF (15 mL) was added LiOH (80 mg, 3.18 mmol) at 0 ℃. After 18 hours stirring, the solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (540 mg, white solid, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 326.2.

[1324] Step 26e. To a solution of the compound from Step 26d (0.54 g, 1.66 mmol) was added Pd / C (100 mg) in CH3OH (30 mL) at 20 ℃. After 18 hours stirring, the solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (540 mg, white solid, quantitative yield) . LC-MS:  (ESI) m / z (M+H) , 192.2.

[1325] Step 26f. To a solution of the compound from Step 26e (0.54 g, 2.82 mmol) , 9H-fluoren-9-ylmethyl [ (2, 5-dioxotetrahydro-1H-pyrrol-1-yl) oxy] methanoate (0.95 g, 2.82 mmol) in DMF (20 mL) was added sodium bicarbonate (2.37 g, 28.2 mmol) at 20 ℃. After 18 hours stirring the solution was filtered and concentrated, the residue was diluted with DMF (3 mL) and purified by reverse phase column (40 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～40%) to afford the desired product (0.44 g, white solid, yield: 37.68%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 414.0.

[1326] Step 26g. To a solution of the compound from Step 26f (0.44 g, 1.06 mmol) , (4-aminophenyl) methanol (0.44 g, 1.27 mmol) , TCFH (0.36 g, 1.27 mmol) in DMF (15 mL) was added 1-methylimidazole (0.19 g, 2.34 mmol) at 0 ℃. After 2 hours stirring the solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (40 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～80%) to afford the desired product (0.16 g, white solid, yield: 28.18%) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 519.4.

[1327] Step 26h. To a solution of the compound from Step 26g (0.16 g, 0.15 mmol) , 4-nitrophenyl [ (4-nitrophenyl) oxy] methanoate (93 mg, 0.31 mmol) , 4- (dimethylamino) pyridine (1.88 mg, 0.01 mmol) in DMF (10 mL) was added DIPEA (60 mg, 0.46 mmol) at 0 ℃. After 4 hours stirring the solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase column (40 g C18 gel column, H2O / CH3CN with CH3CN from 0～80%) to afford the desired product (100 mg, white solid, yield: 95 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 706.2.

[1328] Step 26i. To a solution of the compound from Step 26h, (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-1, 2, 3, 9, 10, 12, 13, 15-octahydrocyclohexa [1, 2, 3-de] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinoline-10, 13-dione methanesulfonic acid (130 mg, 0.25 mmol) in DMF (8 mL) was added DIPEA (79.6 mg, 0.61 mmol) at 25 ℃. After 3 hours stirring, the solution was filtered and the filtrate was purified by Prep-HPLC to afford the desired product (70 mg, yellow solid, yield: 34.9 %) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 981.6.

[1329] Step 26j. To a solution of the compound from Step 26i (70 mg, 0.07 mmol) in DMF (3 mL) was added diethylamine (78.36 mg, 0.21 mmol) at 0 ℃. After 2 hours stirring the solution was filtered and concentrated to obtain the desired compound which was used in the next step without purification (70 mg, white oil, quantitative yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 758.4.

[1330] Step 26k. To a mixture of the compound from Step 26j (70 mg, 0.09 mmol) and DIPEA (35.82 mg, 0.27 mmol) in DMF (5 mL) was added the compound from Step 3h (62.70 mg, 0.14 mmol) . The mixture was stirred at 20 ℃ for 2 hours. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (17 mg, 16.8%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (1 / 2M+H) , 548.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.94 (s, 1H) , 8.30 -8.26 (m, 1H) , 8.15 -8.13 (m, 1H) , 8.09 -8.06 (m, 1H) , 7.95 -7.93 (m, 1H) , 7.80 -7.78 (m, 1H) , 7.65 -7.63 (m, 2H) , 7.40 -7.37 (m, 2H) , 7.31 (s, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.50 (s, 1H) , 5.94 (s, 1H) , 5.45 (s, 2H) , 5.29 -5.25 (m, 3H) , 5.08 (s, 2H) , 4.60 -4.58 (m, 1H) , 4.30 -4.25 (m, 1H) , 3.80 -3.78 (m, 2H) , 3.66 -3.64 (m, 2H) , 3.60 -3.55 (m, 3H) , 3.15 -3.10 (m, 4H) , 2.38 (s, 3H) , 2.23 -2.10 (m, 6H) , 1.91 -1.84 (m, 2H) , 1.50 -1.47 (m, 6H) , 1.29 -1.10 (m, 4H) , 0.87 (d, J = 7.2 Hz, 3H)

[1331] The following examples 27-32 were prepared using procedures similar to those described above:

[1332] Example 33: preparation of LP33 (MC-VGR-PABC-MMAE)

[1333] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-methylbutanamido) acetamido) -5-guanidinopentanamido) benzyl ( (S) -1- ( ( (S) -1- ( ( (3R, 4S, 5S) -1- ( (S) -2- ( (1R, 2R) -3- ( ( (1S, 2R) -1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl) amino) -1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl) pyrrolidin-1-yl) -3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan- 4-yl) (methyl) amino) -3-methyl-1-oxobutan-2-yl) amino) -3-methyl-1-oxobutan-2-yl) (methyl) carbamate

[1334] Step 33a. A mixture of Nα- (9-fluorenylmethoxycarbonyl) -L-arginine (CAS 91000-69-0) (8.0 g, 20.2 mmol) , 4- (hydroxymethyl) aniline (2.4 g, 20.2 mmol) , EDCI (4.6 g, 24.2 mmol) and HOBt (3.2 g, 24.2 mmol) in DMF (60 mL) was stirred at 30 ℃ for4 h. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the desired compound (8.0 g, 79%yield) as a white solid.

[1335] Step 33b. A mixture of the compound from Step 33a (2.0 g, 4.0 mmol) , 4-nitrophenyl carbonate (3.64 g, 12.0 mmol) , DIPEA (1.35 g, 8.0 mmol) and DMAP (95 mg, 0.8 mmol) in DMA (20 mL) was stirred at 30 ℃ for 2.5 hr. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the desired compound (0.7 g, 27%yield) as a light-brown solid.

[1336] Step 33c. A mixture of the compound from Step 33b (600 mg, 0.9 mmol) , monomethyl MMAE (CAS 474645-27-7) (550 mg, 0.76 mmol) , DIPEA (0.3 mL, 1.8 mmol) and HOBt (3.2 g, 24.2 mmol) in DMA (10 mL) and pyridine (3 mL) was stirred at 26 ℃ for 30 hr. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the desired compound (510 mg, 45%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1246.6.

[1337] Step 33d. A mixture of the compound from Step 33c (510 mg, 0.41 mmol) and diethylamine (1 mL) in THF (5 mL) was stirred at 25 ℃ for 2 hr. It was quenched with water (0.5 mL) and then concentrated and the residue was purified by prep-HPLC (Xbridge-C18, CH3CN / H2O (0.1%NH3) ) to give the desired compound as a light- yellow oil (400 mg, 95%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1023.8.

[1338] Step 33e. A mixture of the compound from Step 33d (50 mg) , the compound from Step 1h (18 mg, 0.049 mmol) , HATU (19.5 mg) and DIPEA (7.5 mg) in DMF (0.5 mL) was stirred at 30 ℃ for 1 hr. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (38 mg, 56%yield) as a light-yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1372.8.

[1339] Example 34: preparation of LP34 (MC-SGR-PABC-MMAE)

[1340] 4- ( (S) -2- (2- ( (S) -2- (6- (2, 5-dioxo-2, 5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl) hexanamido) -3-hydroxypropanamido) acetamido) -5-guanidinopentanamido) benzyl ( (S) -1- ( ( (S) -1- ( ( (3R, 4S, 5S) -1- ( (S) -2- ( (1R, 2R) -3- ( ( (1S, 2R) -1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl) amino) -1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl) pyrrolidin-1-yl) -3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl) (methyl) amino) -3-methyl-1-oxobutan-2-yl) amino) -3-methyl-1-oxobutan-2-yl) (methyl) carbamate

[1341] A mixture of the compound from Step 33d (102 mg, 0.1 mmol) , the compound from Step 2c (35.5 mg, 0.1 mmol) , HATU (57 mg, 0.15 mmol) and DIPEA (0.35 mL, 0.2 mmol) in DMF (3 mL) was stirred at 25 ℃ for 1 hr. The filtrate was concentrated at reduced pressure and purified by prep-HPLC (C18, 30-53 %acetonitrile in H2O with 0.1 %formic acid) to afford the title compound (24 mg, 18%yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1361.8.

[1342] Example 35: preparation of LP35 (MsP-SGR-P0035)

[1343] N- ( (6S, 12S) -1- (3- ( (S) -7-ethyl-7-hydroxy-8, 11-dioxo-7, 8, 11, 13-tetrahydro-10H- [1, 3] dioxolo [4, 5-g] pyrano [3', 4': 6, 7] indolizino [1, 2-b] quinolin-14-yl) bicyclo [1.1.1] pentan-1-yl) -6- (3-guanidinopropyl) -13-hydroxy-5, 8, 11-trioxo-2-oxa-4, 7, 10-triazatridecan-12-yl) -6- (2- (methylsulfonyl) pyrimidin-5-yl) hex-5-ynamide

[1344] Step 35a. A mixture of methyl 1- (hydroxymethyl) bicyclo [1.1.1] pentane-3-carboxylate (CAS 180464-87-3) (3.0 g, 19.20 mmol) , chloro (2-methylprop-2-yl) diphenylsilane (5.54 g, 20.16 mmol) and 1H-imidazole (2.62 g, 38.41 mmol) in DCM (50 mL) was stirred at 25 ℃ for 18 hours. The solution was concentrated, and the residue was purified by FC (PE / DCM with DCM from 0～45%) to afford the desired product (3.0 g, 7.59 mmol, 39.6%yield) as a colorless oil. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 395.2.

[1345] Step 35b. A mixture of the compound from Step 35a (1.8 g, 4.56 mmol) and lithium hydroxide (0.22 g, 9.12 mmol) in THF (40 mL) and water (10 mL) was stirred at 0 ℃ for 18 hours. The solution was concentrated, and the residue was purified by RP-FC (H2O / CH3CN with CH3CN from 0～60%) to give the desired compound as a white solid (0.87 g, 2.16 mmol, 50%yield) . LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 403.2.

[1346] Step 35c. A mixture of the compound from Step 35b (0.7 g, 1.84 mmol) , N, O-dimethylhydroxylamine hydrochloride (179 mg, 1.84 mmol) , HATU (1.4 g, 3.68mmol) and DIPEA (713 mg, 5.52 mmol) in DCM (20 mL) was stirred at 25 ℃ for 2 hours. The mixture was concentrated at reduced pressure and the residue partitioned between DCM (20 mL) and water (20 mL) . The aqueous layer was extracted with DCM (20 mL*2) , and the combined organic layers were dried over sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (10 g silica gel column, PE / DCM with DCM from 0～50%) to afford the desired compound (0.4 g, 0.94 mmol, 51.3 %yield) as a yellow oil. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 424.4.

[1347] Step 35d. A mixture of the compound from Step 35c (450 mg, 1.06 mmol) , 5-bromobenzo [d] [1, 3] dioxole (235 mg, 1.17 mmol) and n-BuLi (177 mg, 2.76 mmol) in THF (10 mL) was stirred at -65 ℃ for 2 hours. It was  concentrated, and the residue was purified by FC (PE / EA with EA from 0～15%) to afford the desired compound (45 mg, 0.089 mmol 15.5 %yield) as a yellow oil. LC-MS: (ESI) m / z (M+Na) , 507.2.

[1348] Step 35e. A mixture of the compound from Step 35d (45 mg, 0.09 mmol) and cupric nitrate (35 mg, 0.19 mmol) in acetic anhydride (0.25 mL) was stirred at 0℃ for 2 hours. It was concentrated, and the residue was purified to afford the desired product (15 mg, 0.028 mmol, 31 %yield) as a white solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 530.4.

[1349] Step 35f. A mixture of the compound from Step 35e (15 mg, 0.03 mmol) iron (0) (6 mg, 0.11 mmol) and NH4Cl (15 mg, 0.28 mmol) in EtOH (2 mL) and water (0.5 mL) was stirred at 0℃ for 2 hours. The solution was diluted with EA (2 mL) and washed with water (2 mL) and the phases were separated. The aqueous layer was extracted four times with EA (2 mL) , the combined organic phases were dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure to afford the desired compound (crude 15 mg) as a colorless oil. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 500.4.

[1350] Step 35g. A mixture of the compound from Step 35f (10 mg, 0.02 mmol) , (4S) -4-ethyl-4-hydroxy-3, 4, 6, 7, 8, 10-hexahydro-1H-pyrano [3, 4-f] indolizine-3, 6, 10-trione (CAS110351-94-5) (7 mg, 0.02 mmol) and PPTS (6 mg, 0.02 mmol) in methylbenzene (2 mL) was stirred at 110℃ for 18 hours. It was concentrated to afford the desired compound (crude 10 mg) as a brown solid, used in the next step without further purification. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 727.2.

[1351] Step 35h. A mixture of the compound from Step 35g (10 mg, 0.014 mmol) and 4N HCl (50 mg, 0.27 mmol) in 1, 4-dioxane (2 mL) was stirred at 0 ℃ for 2 hours. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the desired compound P0035 (1.7 mg, 0.003 mmol, 25.3%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 489.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.74 (s, 1H) , 7.52 (s, 1H) , 7.23 (s, 1H) , 6.48 (s, 1H) , 6.30 (s, 2H) , 5.40 –5.45 (m, 4H) , 4.75 –4.51 (m, 1H) , 3.53 (s, 2H) , 2.42 (s, 6H) , 1.90 –1.84 (m, 2H) , 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H) .

[1352] Step 35i. A mixture of (S, Z) -4- ( ( ( (9H-fluoren-9-yl) methoxy) carbonyl) amino) -9- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -13, 13-dimethyl-3, 11-dioxo-12-oxa-2, 8, 10-triazatetradec-9-en-1-yl acetate (200 mg, 0.300 mmol) , the compound from Step 35h, TsOH (25.79 mg, 0.150 mmol in THF (50 mL) was stirred at 25℃ for 16 hr. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was purified by silica-gel column chromatography (DCM / MeOH with EA from 0～15%) to afford the desired compound (65 mg, 20%) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1092.2.

[1353] Step 35j. A mixture of the compound from Step 35i (130 mg, 0.119 mmol) and DEA (53.10 mg, 0.356 mmol) in DMF (2 mL) was stirred at 25℃ for 1 hr. The solution was filtered and concentrated in vacuo to obtain the desired compound (120 mg) as a brown solid which was used in the next step without purification. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 873.5.

[1354] Step 35k. A mixture of the compound from Step 35j (100 mg, 0.114 mmol) (6- (2- (methylsulfonyl) pyrimidin-5-yl) hex-5-ynoyl) -L-serylglycine (47.19 mg, 0.114 mmol) , DIPEA (0.057 mL, 0.343 mmol) , HATU (65.26 mg, 0.172 mmol) in DMF (5 mL) was stirred at 15 ℃ for 2 hr. The mixture was concentrated in vacuo and the residue was purified to afford the desired product (30 mg, 20.7%yield) as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1267.2.

[1355] Step 35l. A mixture of the compound from Step 35k (25 mg, 0.020 mmol) , ZnBr2 (44.38 mg, 0.197 mmol) in DCM (5 mL) was stirred at 15 ℃ for 18 hr. The mixture was concentrated in vacuo and the residue was purified by prep-HPLC (C18, 20-60 %acetonitrile in H2O with 0.1 %TFA) to afford the title compound (5.4 mg, 25%yield)  as a yellow solid. LC-MS: (ESI) m / z (M+H) , 1068.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.10 (s, 2H) , 8.72 (t, ...

Claims

1.A compound of the formula (X) , or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof: S-D (X)wherein,S is a linker, and the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-;P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereof;D is a drug moiety.2.The compound of Claim 1, wherein,the linker S further comprises a cleavable linker or a non-cleavable linker;alternatively, the cleavable linker comprises an acid-labile linker a hydrophilic linker, a protease-sensitive linker, a photolabile linker, a hydrazone linker, a dimethyl linker or a disulfide-containing linker.3.The compound of Claim 1 or 2, wherein, the compound has the structure of formula (I) , or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof: L-P-Y-D (I)L is represented by L1-L2-X-;L1 is a ligand covalent binding moiety,-L2-X-is a stretcher unit;Y is a spacer unit;P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;P3 is selected from serine, tyrosine or an analog thereof;P2 is selected from glycine, serine or an analog thereof;P1 is selected from citrulline, arginine, glutamate or an analog thereofD is a drug moiety.4.The compound of any one of Claims 1-3,wherein, P3 isRc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;c is 0, 1, 2, 3 or 4;P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl, alternatively selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;P2 isRb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;P1 is selected fromLa is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytritylalternatively,alternatively,P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;wherein, P3 isRc1 is selected from H, OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl, C1-4 alkoxyl and C1-4 haloalkyl, alternatively selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;c is 0, 1 or 2;P2 isRb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;P1 is selected fromLa is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-, CH2CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’, preferably selected from H, Boc, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH;alternatively, R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;yet alternatively,P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;wherein, P3 is selected from: alternatively selected from: P2 is selected from: P1 is selected from: 5.The compound of Claim 3 or 4, wherein,L is represented by L1-L2-X-;L1 is a ligand covalent binding moiety, alternatively, L1 is capable of forming a covalent bond with a functional group of an amino acid, and still alternatively, L1 is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid;-L2-X-is a stretcher unit;L2 is selected from C1-20 alkylene, C2-20 alkenylene, and C2-20 alkynylene, wherein, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 non-adjacent carbon atoms in C1-20 alkylene can be optionally replaced with O or S;X is absent or -C (O) -;L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively,L is represented by L1-L2-X-;L1 is a ligand covalent binding moiety that is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid, and alternatively is selected from-L2-X-is a stretcher unit;L2 is selected from C1-10 alkylene, -C0-4 alkylene- (C1-4 alkylene-O) 1-10-C0-4 alkylene-, -C0-4 alkylene- (O-C1-4 alkylene) 1-10-C0-4 alkylene-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;X is absent or -C (O) -;L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively,L is represented by L1-L2-X-;L1 is selected fromL2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-10- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-10- (CH2) 0-4-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;X is absent or -C (O) -;L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;alternatively,L is selected fromm and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;alternatively, m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3.6.The compound of any of Claims 3-5, wherein,Y is selected from: RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;p is 0, 1, or 2;q is 0, 1, 2, 3 or 4;alternatively,Y is selected from: RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;p is 0, 1, or 2;q is 0, 1, or 2;yet alternatively,Y is selected from: 7.The compound of any one of Claims 1-6, wherein,the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand; alternatively,wherein the tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as maytansine, maytansinol, DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, eribulin and rhizoxin;the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;wherein the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin and camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) ;wherein the immune modulatory agent is selected from a group consisting of TRL7 agonists, TLR8 agonists, STING agonists and RIG-I agonists;still alternatively,D is selected from: 8.The compound of any one of Claims 3-7, wherein,L is represented by L1-L2-X-;L1 is a ligand covalent binding moiety that is capable of forming an amide bond or thioether bond with a functional group of an amino acid, and alternatively is selected from-L2-X-is a stretcher unit;L2 is selected from C1-10 alkylene, - (C1-4 alkylene-O) 1-10-, - (O-C1-4 alkylene) 1-10-, -C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;X is absent or -C (O) -;L is optionally substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 RL group (s) ;RL is selected from H, D, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;Y is selected from: RY1 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;RY2 is selected from H, halogen, OH, CN, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;p is 0, 1, or 2;q is 0, 1, 2, 3 or 4;the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand;P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;wherein, P3 isRc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, O-PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, C3-10 cycloalkyl, 3-to 10-membered heterocyclyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;c is 0, 1, 2, 3 or 4;P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl, alternatively selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;P2 isRb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-10 cycloalkylene or 3-to 10-membered heterocyclylene;P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;P1 is selected fromLa is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, NR’R”, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -OR’, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;PG is selected from: trimethylsilyl group (TMS) , triethylsilyl (TES) , dimethyl isopropyl silyl (DMIPS) , diethylisopropyl silyl (DEIPS) , tert-butyl dimethyl silyl (TBDMS) , tert-butyl diphenylsilyl (TBDPS) , triisopropyl silyl (TIPS) , acetyl (Ac) , chloroacetyl, dichloroacetyl, trichloroacetyl, trifluoroacetyl group (TFA) , benzoyl, p-methoxybenzoyl, 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) , allyloxycarbonyl (Alloc) 2, 2, 2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) , carboxybenzyl (Cbz) , tert-butyloxycarbonyl (Boc) , benzyl (Bn) , p-nmethoxybenzyl (PMB) , allyl, triphenylmethyl (Tr) , bis-p-methoxytrityl (DMTr) , methoxy methyl (MOM) , phenoxymethyl (BOM) , 2, 2, 2-trichloroethoxymethyl, 2-methoxy Ethoxymethyl (MEM) , methylthiomethyl (MTM) , p-methoxybenzyloxymethyl (PMBM) , -C (O) CH2CH2C (O) OH or 4, 4’-dimethoxytrityl.9.The compound of any one of Claims 3-8, wherein,L is represented by L1-L2-X-;L1 is selected fromL2 is selected from C1-10 alkylene, - (CH2) 0-4- (CH2CH2-O) 1-10- (CH2) 0-4-, - (CH2) 0-4- (O-CH2CH2) 1-10- (CH2) 0-4-, C2-10 alkenylene, and C2-10 alkynylene;X is absent or -C (O) -;L is optionally substituted with 1, 2 or 3 RL group (s) ;RL is selected from H, D, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;Y is selected from: RY1 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;RY2 is selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;the drug moiety D is selected from a group consisting of tubulin inhibitors and microtubule polymerization inhibitors, antibiotics, DNA synthesis inhibitors, topoisomerase I inhibitors, immune modulatory agents and chelating ligand;wherein the tubulin inhibitor and microtubule polymerization inhibitor is selected from a group consisting of auristatins (such as MMAE, MMAF, and MMAD) , maytansines (such as DM1, DM2, DM3, and DM4) , tubulysins, cryptophycins, eribulin and rhizoxin;the antibiotic is selected from a group consisting of calicheamicins, doxorubicin, and anthracyclines;the DNA synthesis inhibitor is selected from a group consisting of duocarmycins, PBDs (Benzodiazepines) , and IGNs (indolinobenzodiazepines) ;the topoisomerase I inhibitor is selected from a group consisting of camptothecin and camptothecin analogs (such as DXd, SN38, and exatecan) ;wherein the immune modulatory agent is selected from a group consisting of TRL7 agonists, TLR8 agonists, STING agonists and RIG-I agonists;P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;wherein, P3 isRc1 is selected from OH, O-PG and C1-4 alkoxyl, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, halogen, C1-4 alkyl, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , or Rc2 and Rc3 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc;Rc is selected from H, OH, C1-4 alkyl, C1-4 alkoxyl and C1-4 haloalkyl, alternatively selected from H, OH, C1-4 alkyl and C1-4 haloalkyl;c is 0, 1 or 2;P2 isRb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-4 alkyl and - (CH2) 1-4-OH, or Rb1 and Rb2 are taken together with the carbon atom to which they are attached to form C3-5 cycloalkylene;P1 is selected fromLa is - (CH2) 1-6-, wherein, 1, 2 or 3 non-adjacent carbon atoms in - (CH2) 1-6-can be optionally replaced with O; alternatively, La is selected from -CH2-, -CH2CH2-, CH2CH2CH2-, CH2CH2CH2CH2-and -CH2OCH2CH2-;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from H, Boc, NR’R”, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’, preferably selected from H, Boc, C1-4 alkyl, -C (NH) NR’R”, -C (O) NR’R” and -C (O) OR’;R’ and R” are independently selected from H, -C1-4 alkyl and -C1-4 alkylene-OH;alternatively, R1 is selected from Boc, NH2, C1-4 alkyl, -C (NH) NH2, -C (O) NH2, -C (O) NH-C1-4 alkyl, -C (O) NH-C1-4 alkylene-OH, -C (O) OH and -C (O) O-C1-4 alkyl;“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration.10.The compound of any one of Claims 3-9, wherein,L is selected fromm and n are independently selected from 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, or 8;alternatively, m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;alternatively, n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;Y is selected from: D is selected from: P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;wherein, P3 is selected from: alternatively selected from: P2 is selected from: P1 is selected from: 11.The compound of any one of Claims 1-10, wherein,L, Y and D are as defined as any one of Claims 3 and 5-10;P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;-P3-P2-P1-is“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;c is 0, 1, 2, 3 or 4;P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH;P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from Boc, C1-6 alkyl, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1 is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;Rc2 and Rc3 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl and C1-6 haloalkyl;c is 0, 1, 2 or 3;Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;La is -C1-6 alkylene-;Xa is -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively,“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1 is selected from H, OH, CN, NH2 and halogen, preferably is OH;Rc2 and Rc3 are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;c is 0, 1 or 2, preferably is 0;Rb1 and Rb2 are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;La is -C1-6 alkylene-;Xa is -NH-;R1 is selected from -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably is -C (NH) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;yet alternatively,-P3-P2-P1-is12.The compound of any one of Claims 1-10, wherein,L, Y and D are as defined as any one of Claims 3 and 5-10;P is a peptide cleavable unit, wherein the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3 is connected to X, P1 is connected to Y;-P3-P2-P1-is“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently selected from H, OH, CN, NH2, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl, 5-to 10-membered heteroaryl and C6-10 aryl;c is 0, 1, 2, 3 or 4;P3 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl and - (CH2) 1-6-OH;P2 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Rb group (s) ;Rb is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;La is -C1-8 alkylene-, wherein, 1, 2, 3 or 4 non-adjacent carbon atoms in -C1-8 alkylene-can be optionally replaced with O or S;Xa is bond or -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from H, Boc, C1-6 alkyl, -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -C1-6 alkylene-CN, -C1-6 alkylene-NH2 and -C1-6 alkylene-OH;P1 is optionally further substituted with 1, 2, 3, 4 or 5 Ra group (s) ;Ra is selected from H, halogen, PG, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1 and Rc2 are independently selected from H, halogen, OH and C1-6 alkoxyl;Rc3 is selected from H, halogen, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) ;c is 0, 1, 2 or 3;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, CN, NH2, halogen, PG, C1-6 alkyl, C1-6 alkoxyl, C1-6 haloalkyl and C1-6 haloalkoxyl;Rb1 and Rb2 are independently selected from H, C1-6 alkyl and - (CH2) 1-6-OH;La is -C1-6 alkylene-;Xa is -NR-;R is H or -C1-4 alkyl;R1 is selected from -C (O) R’, -C (O) OR’, -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H, halogen, C1-6 alkyl and C1-6 haloalkyl;alternatively,“*” represents a chiral center, which is selected from (S) or (R) configuration;Rc1 and Rc2 are independently selected from H, OH and C1-4 alkoxyl, preferably is H;Rc3 is selected from H, halogen, 5-to 10-membered heteroaryl (such as 5-to 6-membered heteroaryl) and C6-10 aryl (such as phenyl) , preferably is phenyl;c is 0, 1 or 2, preferably is 0;Rc1, Rc2 and Rc3 are independently optionally substituted with 1, 2 or 3 Rc group (s) ;Rc is selected from H, OH, C1-6 alkyl and C1-6 alkoxyl;Rb1 and Rb2 are independently selected from H and - (CH2) 1-4-OH, preferably is H or -CH2-OH;La is -C1-6 alkylene-;Xa is -NH-;R1 is selected from -C (NH) NR’R” and -C (O) NR’R”, preferably is -C (NH) NR’R”;R’ and R” are independently selected from H and C1-6 alkyl, preferably is H;yet alternatively,-P3-P2-P1-is13.The compound of any one of Claims 1-12, wherein, the compound is selected from: wherein, m, n, P3, P2 and P1 are as defined in any one of Claims 1, 3-5 and 11-12;alternatively,m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;still alternatively, the compound is selected from:14.The compound of any one of Claims 1-6, wherein,the drug moiety D is derived from the compound of formula (D-I) or (D-II) :Rd1 is C1-6 alkyl or C1-6 alkoxyl;Rd2 is halogen;or, preferably, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-10 membered heterocyclylene or 5-10 membered heteroarylene, which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-6 alkyl;Rd3 is selected from - (CH2) p-ORda, - (CH2) p-C (O) ORda, - (CH2) p-NHC (O) -Rda and - (CH2) p-CH2NRdbRdc;Rd3 is preferably selected from - (CH2) p-ORda, - (CH2) p-C (O) ORda and - (CH2) p-NHC (O) -Rda;Rda is selected from H, C1-6 alkyl, C1-6 alkylene-OH, C1-6 alkylene-NH2, such as H, CH3, CH2OH, CH2CH2OH and CH2CH2NH2;Rdb and Rdc are independently selected from H and C1-6 alkyl, such as H and CH3;each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;alternatively,Rd1 is C1-6 alkyl or C1-6 alkoxyl;Rd2 is halogen;or, preferably, Rd1 and Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to form 5-6 membered heterocyclylene or 5-6 membered heteroarylene (preferably form 5-6 membered heterocyclyl) , which is optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents selected from H, D, halogen and C1-4 alkyl;Rd3 is selected frompreferably isRda, Rdb and Rdc are independently selected from H and C1-6 alkyl;each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;alternatively,Rd1 is C1-4 alkyl or C1-4 alkoxyl, such as Me or OMe;Rd2 is halogen, such as F;or, preferably, Rd1, Rd2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached to formRd3 is selected fromstill alternatively, the drug moiety D is derived from the following compound:15.The compound of Claim 14, wherein,the drug moiety D is selected from the compound of formula (D-III) or (D-IV) :wherein,theindicates the attachment site to the rest of the compound;Rd1 and Rd2 are as defined in Claim 14;Rd3’ is selected from - (CH2) p-ORda’-, - (CH2) p-C (O) ORda’-, - (CH2) p-NHC (O) -Rda’-and - (CH2) p-CH2NRdbRdc’-;Rd3’ is preferably selected from - (CH2) p-ORda’-, - (CH2) p-C (O) ORda’-and - (CH2) p-NHC (O) Rda’-;Rda’ is selected from bond, C1-6 alkylene, -C1-6 alkylene-O-and -C1-6 alkylene-NH-, such as bond, -CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-and -CH2CH2NH-;Rdb is selected from H and C1-6 alkyl, such as H and CH3;Rdc’ is selected from bond and C1-6 alkylene, such as bond and -CH2-;each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6;alternatively,Rd3’ is selected fromsuch as, preferably isRda’ and Rdc’ are independently selected from bond and C1-6 alkylene;Rdb is selected from H and C1-6 alkyl;each p is independently 0, 1, 2, 3, 4, 5 or 6.still alternatively,the drug moiety D is selected from:16.The compound of any one of Claims 1-6 and 14-15, wherein the compound is selected from: wherein, m, n, P3, P2 and P1 are as defined in any one of Claims 1, 3-5 and 11-12;alternatively,m is selected from 4, 5, 6, 7, or 8, alternatively is 4, 5, or 8;n is selected from 2, 3 or 4, alternatively is 3;still alternatively, the compound is selected from:17.A conjugate of the formula (II) : T- (S’-D) k (II)wherein,T is a targeting moiety;S’ is a linker, which is a divalent group formed by the connection between S and T;wherein, the linker comprises a peptide cleavable unit, the peptide cleavable unit comprises a tripeptide having the sequence -P3-P2-P1-, P3, P2 and P1 are as defined in any one of Claims 1-16;D is a drug moiety;k ranges from 1 to about 20.18.The conjugate of Claim 17, wherein the targeting moiety is selected from an antibody or an antigen binding fragment thereof, a ligand, or a targeting peptide.19.The conjugate of Claim 18, wherein the antibody or antigen binding fragment thereof binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, an immune cell antigen or a T cell antigen;wherein the ligand binds to a receptor expressed on a tumor cell or an immune cell, or a receptor expressed in the tumor microenvironment; and / orwherein targeting peptide binds to a target molecule expressed on a tumor cell or an immune cell, or a receptor expressed in the tumor microenvironment.20.The conjugate of Claim 18 or Claim 19, wherein the antibody is a monoclonal antibody, a bi-specific antibody or a multi-specific antibody.21.The conjugate of any one of Claims 18-20, wherein the antibody is a murine antibody, a chimeric antibody, a humanized antibody, or a human antibody.22.The conjugate of any one of Claims 18-21, wherein the antibody is of an isotype selected from the group consisting of IgG, IgA, IgM, IgE and IgD, preferably wherein the antibody is of a subtype selected from the group consisting of IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4.23.The conjugate of any one of Claims 18-22, wherein the antigen binding fragment is selected from the group consisting of Fab, Fab’, F (ab') 2, Fv, scFv, and ds-scFv.24.The conjugate of any one of Claims 17-23, wherein, -S’-D is represented by formula (III) : wherein theindicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in any one of Claims 19-23;L’ is represented by the formula of -L1’-L2-X-, wherein, L1’ is a divalent group formed by the connection between L1 and T;L1, L2, P, Y and D are as defined in any one of Claims 1-16;alternatively, L1’ is selected from25.The conjugate of any one of Claims 17-24, wherein, -S’-D is selected from: wherein, theindicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in any one of Claims 19-23;m, n, P3, P2 and P1 are as defined in any one of Claims 1, 3-5 and 11-12;alternatively, -S’-D is selected from:wherein, theindicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in any one of Claims 19-23.26.The conjugate of any one of Claims 17-25, wherein, the conjugate is selected from: wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen;and wherein k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.27.The conjugate of any one of Claims 17-24, wherein -S’-D is selected from: wherein, theindicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in any one of Claims 19-23;m, n, P3, P2 and P1 are as defined in any one of Claims 1, 3-5 and 11-12;alternatively, -S’-D is selected from:wherein, theindicates the attachment site to the antibody or the antigen binding fragment thereof defined in any one of Claims 19-23;still alternatively, the conjugate is selected from:wherein, Ab is an antibody or an antigen binding fragment thereof which binds to a tumor antigen, a tumor associated antigen, or an immune cell antigen or a T cell antigen;and wherein k is an integer selected from 1 to 10, preferably 4 to 8, more preferably k is 4 or 8.28.The conjugate of Claim 26 or 27, wherein the antibody is Trop2 antibody.29.A composition comprising the conjugate of any one of Claims 17-28, and optionally a pharmaceutically acceptable carrier or excipient.30.Use of the compound, or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof of any one of Claims 1-16, the conjugate of any one of Claims 17-28 or the composition of Claim 29 in the manufacture of a medicament for treating and / or preventing a disease.31.The compound, or a pharmaceutically acceptable salt, tautomer, stereoisomer, enantiomer, diastereomer thereof, or a mixture thereof of any one of Claims 1-16, the conjugate of any one of Claims 17-28 or the composition of Claim 29, for use in treating and / or preventing a disease.32.A method for preventing and / or treating a disease in a subject in need thereof, comprising administrating to the subject the conjugate of any one of Claims 17-28 or the composition of Claim 29.33.The method of Claim 32, wherein the method further comprises administering to the subject a second therapeutic  agent, preferably wherein the second therapeutic agent is selected from an antibody, a chemotherapeutic agent and a small molecule drug.34.The use of Claim 30, or the compound, the conjugate or composition for use of Claim 31, or the method of Claim 32 or 33, wherein the disease is selected from a cancer, an infectious disease, an inflammatory disease, an autoimmune disease and an immunodeficiency disease;preferably, wherein the cancer is selected from head and neck cancer, esophageal cancer, lung cancer, colon cancer, rectal cancer, stomach cancer, pancreatic cancer, ovarian cancer, prostate cancer, breast cancer, leukemia, myeloma, epithelial squamous cell cancer, melanoma, brain cancer, cervical cancer, liver cancer, bladder cancer, breast cancer, renal cancer, testicular cancer, and thyroid cancer;preferably, wherein the autoimmune disease is selected from systemic sclerosis and atherosclerosis.

Images