Abasic modification compound, gene modulating agents and the use thereof

Abstract

Disclosed is an abasic modification structure which can be incorporated into an oligonucleotide to effectively modulate the expression of target genes in subjects while mitigating the non-target specificity. A gene modulating agent and a pharmaceutical composition comprising the abasic modification structure and a method of modulating the expression of a target gene while mitigating the non-target specificity by using the same are also disclosed.

Description

ABASIC MODIFICATION COMPOUND, GENE MODULATING AGENTS AND THE USE THEREOFFIELD OF THE INVENTION

[0001] The present disclosure relates to the technical field of gene modulation, and in particular to unique compounds useful for modulating the expression regulation of target genes in subjects while mitigating the non-target specificity.BACKGROUND OF THE INVENTION

[0002] Oligonucleotides are an emerging class of therapeutics currently under active development for the treatment of a wide variety of diseases. Major categories of therapeutic oligonucleotide agents include single-stranded antisense oligonucleotides (ASOs) and double-stranded RNAs (dsRNAs) .

[0003] Duplex oligonucleotide or dsRNAs include small interfering RNA (siRNA) and small activating RNA (saRNA) , and microRNA (miRNA) , all of which are loaded to argonaute (AGO) proteins in cytoplasm as the initial step before specifically acting on their targets. siRNA binds to target mRNA mainly in the cytoplasm to down-regulate gene expression post-transcriptionally via the RNA interference (RNAi) mechanism. saRNA targets gene regulatory sequences in the nucleus such as gene promoters to upregulate gene expression at the transcriptional level via the RNA activation (RNAa) mechanism. miRNAs are also duplex RNAs that typically bind to the 3’ untranslated region (3’UTR) of mRNAs with imperfect complementarity following loading into AGO protein and partially inhibit expression via translational repression or / and mRNA degradation.

[0004] Oligonucleotide-mediated gene activation / inhibition has provided a promising strategy for up-regulating / silencing the expression of target genes by changing endogenous transcript levels. However, in the development of this new technology, undesired non-target activity could be one of the concerning side effects, leading to potential toxicity. Therefore, the challenge remains in developing an oligonucleotide agent that meets the safety requirements without compromising its pharmacological properties.

[0005] After persistent exploration, we have developed unique compounds which can modulate gene expression via oligonucleotides while achieving mitigated non-targeting activity, and they have successfully provided a solution to the above said long-existing challenges in the relevant field.SUMMARY OF THE INVENTION

[0006] The present disclosure provides an abasic modification structure which can be used as a substitution moiety to be incorporated into at least one oligonucleotide so as to modulate the expression regulation of target genes in subjects while mitigating the non-target activity. The abasic modification structure, which is also referred as abasic modification moiety, abasic moiety or modification structure herein, can be derived from a precursor compound which will be referred as “abasic compound” or “abasic modification compound” hereafter.

[0007] According to an embodiment of the present disclosure, the abasic modification compound has a structure represented by Formula I:

[0008] Also provided herein is a gene modulating agent comprising a single-stranded oligonucleotide or a double-stranded oligonucleotide, wherein the single-stranded oligonucleotide or at least one strand of the double-stranded oligonucleotide comprises at least one abasic modification moiety having a structure represented by Formula II: -L1-A-L2- Formula II, wherein the oligonucleotide can be one or more of antisense oligonucleotide, antisense  RNA, short interfering RNA, microRNA, small activating RNA, double-stranded RNA, small guide RNA (sgRNA) , and any combinations or conjugated composite thereof.

[0009] According to an alternative embodiment, the abasic modification moiety may also be derived from one or more precursors other than those represented by Formula I.

[0010] Also provided herein is a pharmaceutical composition comprising the gene modulating agent of the present disclosure, the pharmaceutical composition may optionally comprise additional ingredients, such as pharmaceutically acceptable carrier, excipient, solvent, diluent, stabilizer, dispersant, buffer, compatibilizer, preservative agent and combinations thereof.

[0011] Also provided herein is method of modulating the expression of a target gene in a subject, wherein the method comprises the step of administrating the gene modulating agent or the pharmaceutical composition of the present disclosure to a subject in the case of in vivo assays or therapeutic treatment, or contacting the gene modulating agent or the pharmaceutical composition with a cell in the case of in vitro assays, wherein the method can mitigate non-target specificity during the gene modulation.

[0012] It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not restrictive of the invention, as claimed.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0013] A better understanding of the features and advantages of the present invention will be obtained with reference to the following detailed description that sets forth illustrative embodiments, in which the principles of the invention are utilized, and the accompanying drawings (also “figure” and “FIG. ” herein) , of which:

[0014] FIGs. 1A-1B show the effect of chemically modified siRNA (CM-siRNA) for modulating target and non-target specificity in COS-7 cells. The pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17122, RD-17127, RD-17128 and RD-17130) were transfected into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as siRNA control. RD-17118 was a glycerol nucleic acid modified siRNA (GNA-siRNA) and transfected by following the same procedure as CM-siRNA. Mock treatments ware transfected in absence of oligonucleotide and the sample served as a non-treatment control (not shown) . dsCon2 duplex served as a non-specific control (not shown) . FIG. 1A shows Ttr expression in target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System (Promega) . FIG. 1B shows Ttr expression in non-target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. Firefly luciferase activity was quantified and served as a target reporter gene. Renilla luciferase activity was quantified and served as internal reporter gene to normalize the data. Data represents the relative expression level of Ttr gene relative to mock after normalized to renilla luminescence (mean ± SEM of three replicated transfection wells) .

[0015] FIGs. 2A-2B show the effect of CM-siRNA and GNA-siRNA for modulating target and non-target specificity in COS-7 cells. The pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17127 and RD-17128) were transfected into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as siRNA control. RD-17118 was a GNA-siRNA and transfected by following the same procedures as CM-siRNA. Mock treatments were transfected in absence of oligonucleotide and served as a non-treatment control (not shown) . dsCon2 duplex served as a non-specific control (not shown) . FIG. 2A shows Ttr expression in target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. FIG. 2B shows Ttr expression in non-target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. Firefly luciferase activity was quantified and served as a target reporter gene. Renilla luciferase activity was quantified and served as internal reporter gene to normalize the data. Data represents the relative expression level of Ttr gene relative to mock after normalized to renilla luminescence (mean ± SEM of three replicated transfection wells) .

[0016] FIGs. 3A-3D show the effect of CM-siRNA with the modification at different positions for modulating target and non-target specificity in COS-7 cells. The pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17639, RD-17641, RD-17642, RD-17643, RD-17644, RD-17128 and RD-17645) were transfected into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as siRNA control. RD-17118 was a GNA-siRNA and transfected by following the same procedure as CM-siRNA. Mock treatments ware transfected in absence of oligonucleotide and the sample served as a non-treatment control (not shown) . dsCon2 duplex served as a non-specific control (not shown) . FIG. 3A and FIG. 3B show Ttr expression in target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. FIG. 3C and FIG. 3D show Ttr expression in non-target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. Firefly luciferase activity was quantified and served as a target reporter gene. Renilla luciferase activity was quantified and served as internal reporter gene to normalize the data. Data represents the relative expression level of Ttr gene relative to mock after normalized to renilla luminescence (mean ± SEM of three replicated transfection wells) .DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0017] While various embodiments of the invention have been shown and described herein, it will be obvious to those skilled in the art that such embodiments are provided by way of example only. Numerous variations, changes, and substitutions may occur to those skilled in the art without departing from the invention. It should be understood that various alternatives to the embodiments of the invention described herein may be employed.

[0018] The newly developed abasic modification structure and the gene modulating agent comprising at least one oligonucleotide strand chemically modified with the abasic modification structure enables the modulation of target gene expression level with significantly mitigated non-target specificity, and thus may improve bioactive and pharmacological properties which include higher RNA-induced silencing complex (RISC) loading efficiency, enhanced metabolic stability, better cell uptake, biodistribution, bioavailability, longer duration / half-life, lower toxicity, lower dose, less frequent administrations, less undesired immune responses.

[0019] Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which the invention belongs. Also, all publications, patent applications, patents, and other references mentioned herein are incorporated by reference.

[0020] As disclosed herein, singular forms, such as “a” and “this” , include plural objects, unless otherwise specified clearly in the context.

[0021] As disclosed herein, the terms “approximately, ” “about, ” “substantially” , and similar terms are intended to have a broad meaning in harmony with the common and accepted usage by those of ordinary skill in the art to which the subject matter of this disclosure pertains.

[0022] As disclosed herein, “and / or” means “and, or as an alternative” . If any numerical ranges are provided, the ranges include any numerical values in the range (including the upper and lower values) , and also any sub-ranges in the range. For example, the range from 1 to 3 may include any of the numerical values 1, 2 and 3, as well as sub-ranges from 1 to 2 and from 2 to 3.

[0023] The term “oligonucleotide” , as used herein, refers to polymers of nucleotides, and includes, but is not limited to, single-stranded or double-stranded nucleic acid molecules of DNA, RNA, or DNA / RNA hybrid, oligonucleotide strands contained regularly and irregularly alternating deoxyribosyl portions and ribosyl portions, as well as modified and naturally or unnaturally existing frameworks for such oligonucleotides.

[0024] The terms “oligonucleotide strand” , “strand” and “oligonucleotide sequence” as used herein can be used interchangeably, referring to a generic term for short nucleotide sequences having less than 50 bases, such as less than 35 bases (including nucleotides in deoxyribonucleic acid or ribonucleic acid) . In a non-limiting example, the length of a strand can be any length from 16 to 35 nucleotides.

[0025] The term “target gene” as used herein can refer to nucleic acid sequences, transgenes, viral or bacterial sequences, chromosomes or extrachromosomal genes that are naturally present in organisms, and / or can be transiently or stably transfected or incorporated into cells and / or chromatins thereof. The target gene can be a protein-coding gene or a non-protein-coding gene (such as a microRNA gene and a long non-coding RNA gene) . “Target sequence” or “target site” used interchangeably refers to a sequence fragment in the sequence of a target gene, such as, the cDNA of a target gene, which is homologous or complementary with a sense strand or an antisense strand of a siRNA; or the promotor sequence of a target gene, which is which is homologous or complementary with a sense strand or an antisense strand of a saRNA.

[0026] As used herein, the terms “sense strand” and “sense oligonucleotide strand” are interchangeable. The sense oligonucleotide strand of siRNA or saRNA molecule can include, for example, a first nucleic acid strand of siRNA comprising a fragment of a sequence in the human genome or the sequence of a target gene.

[0027] As used herein, the terms “antisense strand” and “antisense oligonucleotide strand” are interchangeable. The antisense oligonucleotide strand of a siRNA or a saRNA molecule can include, for example, a second nucleic acid strand in a duplex of siRNA / saRNA that is complementary to the sense oligonucleotide strand.

[0028] The term “coding strand” as used herein refers to a DNA strand in the target gene which cannot be used for transcription, and the nucleotide sequence of this strand is the same as that of a RNA produced from transcription (in the RNA, T in DNA is replaced by U) .

[0029] The term “template strand” as used herein refers to the other strand complementary with the coding strand in the double-stranded DNA of the target gene, i.e., the strand that, as a template, can be transcribed into RNA, and this strand is complementary with the transcribed RNA (A to U and G to C) . In the process of transcription, RNA polymerase binds to the template strand, moves along the 3'→5' direction of the template strand, and catalyzes the synthesis of the RNA along the 5'→3' direction.

[0030] As used herein, the term “LNA” refers to a locked nucleic acid in which the 2'-oxygen and 4'-carbon atoms are joined by an extra bridge. As used herein, the term “BNA” refers to a 2'-0 and 4'-aminoethylene bridged nucleic acid that can contain a five-membered or six-membered bridged structure with an N-O linkage. As used herein, the term “PNA” refers to a nucleic acid mimic with a pseudopeptide backbone composed of N- (2-aminoethyl) glycine units with the nucleobases attached to the glycine nitrogen via carbonyl methylene linkers. As used herein, the term “GNA” also referred to as glycerol nucleic acid, is a nucleic acid similar to DNA or RNA but differing in the composition of its sugar-phosphodiester backbone, using propylene glycol in place of ribose or deoxyribose.

[0031] As used herein, the terms “gene silencing” , “inhibition of gene expression” , “inhibiting gene expression” , “knockdown of gene expression” , “gene downregulation” and “downregulating gene expression” can be used interchangeably, and means a decrease or downregulation in transcription, translation, expression or activity of a certain nucleic acid sequence as determined by measuring the transcription level, mRNA level, protein level, enzymatic activity, methylation state, chromatin state or configuration, translation level or the activity or state in a cell or biological system of a gene. These activities or states can be determined directly or indirectly. In addition, “inhibition of gene expression” , “inhibiting gene expression” , “gene downregulation” or “downregulating gene expression” refers to a decrease in activity associated with a nucleic acid sequence, regardless of the mechanism of such downregulation. For example, gene downregulation occurs at the transcriptional level to decrease or silence transcription into RNA and the RNA is not translated into a protein, thereby decreasing or silencing the expression of the protein.

[0032] As used herein, the terms “short interfering RNA” , “siRNA” and “silencing RNA” can be used interchangeably and refer to a ribonucleic acid molecule that can downregulate, knockdown, or silence target gene expression. It can be a double-stranded nucleic acid molecule. siRNA binds to target mRNA mainly in the cytoplasm to down-regulate gene expression post-transcriptionally via the RNA interference mechanism. siRNAs may contain natural nucleotides or chemically modified nucleotides. The modifications can impart increased stability and / or increased cellular potency. Examples of chemical modifications include phosphorothioate backbone modification, 2'-deoxynucleotide, 2'-OCH3-containing ribonucleotides, 2'-F-ribonucleotides, 2'-O-methyl ribonucleotides, 2'-O-methoxyethyl ribonucleotides, combinations thereof and the like. The siRNA can have varying lengths (e.g., 10-200 bps) and structures (e.g.., hairpins, single / double strands, bulges, nicks / gaps, mismatches) and are processed in cells to knock down target mRNA. A double-stranded siRNA can have the same number of nucleotides on each strand (blunt ends) or asymmetric ends (overhangs) . An overhang of 1-2 nucleotides, for example, can be present on the sense and / or the antisense strand, as well as present on the 5'-and / or the 3'-ends of a given strand. The length of the siRNA molecule is typically about 10 to about 60, about 10 to about 50, about 15 to about 30, about 17 to about 29, about 18 to about 28, about 19 to about 27, about 20 to about 26, about 21 to about 25, and about 22 to about 24 base pairs, and typically about 15, about 16, about 17, about 18, about 19, about 20, about 21, about 23, about 25, about 30, about 40, or about 50 base pairs. In addition, the terms “small interfering RNA” , “silencing RNA” and “siRNA” also contain nucleic acids other than the ribonucleotide, including, but not limited to, modified nucleotides or analogues.

[0033] As used herein, the term “complementary” refers to the capability of forming base pairs between two oligonucleotide strands. The base pairs are generally formed through hydrogen bonds between nucleotides in the antiparallel oligonucleotide strands. The bases of the complementary oligonucleotide strands can be paired in the Watson-Crick manner (such as A to T, A to U, and C to G) or in any other manner allowing the formation of a duplex (such as Hoogsteen or reverse Hoogsteen base pairing) .

[0034] Complementarity includes complete complementarity and incomplete complementarity. “Complete complementarity” or “100%complementarity” means that each nucleotide from the first oligonucleotide strand can form a hydrogen bond with a nucleotide at a corresponding position in the second oligonucleotide strand in the double-stranded region of the siRNA molecule, with no base pair being “mispaired” . “Incomplete complementarity” or “mismatch” means that not all the nucleotide units of the two strands are bound with each other by hydrogen bonds. For example, for two oligonucleotide strands each of 20 nucleotides in length in the double-stranded region, if only two base pairs in this double-stranded region can be formed through hydrogen bonds, the oligonucleotide strands have a complementarity of 10%. In the same example, if 18 base pairs in this double-stranded region can be formed through hydrogen bonds, the oligonucleotide strands have a complementarity of 90%. Substantial complementarity refers to at least about 75%, about 79%, about 80%, about 85%, about 90%, about 95%or 99%complementarity.

[0035] The term “sequence specific mode” as used herein means a binding or hybridization way of two nucleic acid fragments according to their nucleotide sequence, e.g., a Watson-Crick manner (such as A to T, A to U, and C to G) or any other manner allowing the formation of a duplex (such as Hoogsteen or reverse Hoogsteen base pairing) .

[0036] The term “oligonucleotide modulator” refer to and agent comprising at least one oligonucleotide directly or indirectly bonded to the chemical structure derived from the compound of the present application, and has the activity of modulating target gene expression while mitigating the non-target effect. In certain embodiments, the oligonucleotide modulator comprises an RNA, a DNA, a bridged nucleic acid (BNA) , an locked nucleic acid (LNA) , a glycerol nucleic acid (GNA) or a peptide nucleic acid (PNA) .

[0037] As used herein, the terms “subject” and “individual” are used interchangeably herein to mean any living organism that may be treated with agents of the present application. The term “patient” means a human subject or individual, including disclosure infants, children, and adults.

[0038] As used herein, the upper cased “Ttr” or “Ttr gene” refers to a human gene. As used herein, the term “Ttr mRNA” refers to a message RNA (mRNA) generated from the expression of Ttr gene, or the transcription of Ttr gene.

[0039] As used herein, the term “Ttr” and “Ttr protein” can be used interchangeably and refers to a protein generated from the expression of Ttr gene, or translation of the Ttr mRNA.

[0040] The phrases “administration” , “parenteral administration” , “administrated” and “administered parenterally” as used herein have their art-understood meaning referring to ordinary enteral administration, topical administration, and especially, injection administration, and may include, without limitation, intravenous, intramuscular, intraarterial, intrathecal, intracapsular, intraorbital, intracardiac, intradermal, intraperitoneal, transtracheal, subcutaneous, subcuticular, intraarticulare, subcapsular, subarachnoid, intraspinal, and intrasternal injection and infusion.

[0041] As used herein, the term “pharmaceutical composition” refers to an active agent, such as the gene modulating agent of the present disclosure, optionally formulated together with one or more pharmaceutically acceptable carriers and other additives. In some embodiments, active agent is present in unit dose amount appropriate for administration in a therapeutic regimen that shows a statistically significant probability of achieving a predetermined therapeutic effect when administered to a relevant population. In some embodiments, pharmaceutical compositions may be specially formulated for administration in solid or liquid form, including those adapted for the following: oral administration, for example, drenches (aqueous or non-aqueous solutions or suspensions) , tablets, e.g.., those targeted for buccal, sublingual, and systemic absorption, boluses, powders, granules, pastes for application to the tongue; parenteral administration, for example, by subcutaneous, intramuscular, intravenous or epidural injection as, for example, a sterile solution or suspension, or sustained-release formulation; topical application, for example, as a cream, ointment, or a controlled-release patch or spray applied to the skin, lungs, or oral cavity; intravaginally or intrarectally, for example, as a pessary, cream, or foam; sublingually; ocularly; transdermally; or nasally, pulmonary, and to other mucosal surfaces.

[0042] As used herein, the term “pharmaceutically acceptable carrier” means a pharmaceutically acceptable material, composition or vehicle, such as a liquid or solid filler, diluent, excipient, or solvent encapsulating material, involved in carrying or transporting the subject compound from one organ, or portion of the body, to another organ, or portion of the body. Each carrier must be “acceptable” in the sense of being compatible with the other ingredients of the formulation and not injurious to the patient. Some examples of materials which can serve as pharmaceutically-acceptable carriers include: sugars, such as lactose, glucose and sucrose; starches, such as corn starch and potato starch; cellulose, and its derivatives, such as sodium carboxymethyl cellulose, ethyl cellulose and cellulose acetate; powdered tragacanth; malt; gelatin; talc; excipients, such as cocoa butter and suppository waxes; oils, such as peanut oil, cottonseed oil, safflower oil, sesame oil, olive oil, corn oil and soybean oil; glycols, such as propylene glycol; polyols, such as glycerin, sorbitol, mannitol and polyethylene glycol; esters, such as ethyl oleate and ethyl laurate; agar; buffeting agents, such as magnesium hydroxide and aluminum hydroxide; alginic acid; pyrogen-free water; isotonic saline; Ringer's solution; ethyl alcohol; pH buffered solutions; polyesters, polycarbonates and / or polyanhydrides; and other non-toxic compatible substances employed in pharmaceutical formulations.

[0043] The regime of administration may affect what constitutes an effective amount. The agent of the application can be administered to the subject either prior to or after the disease diagnosis or condition. Further, several divided dosages, as well as staggered dosages, can be administered daily or sequentially, or the dose can be continuously infused, or can be a bolus injection. Further, the dosages of the agent (s) of the application could be proportionally increased or decreased as indicated by the exigencies of the therapeutic or prophylactic situation.

[0044] The terms “treat, ” “treated, ” “treating” , or “treatment” as used herein have the meanings commonly understood in the medical arts, and therefore do not require cure or complete remission, and include any beneficial or desired clinical results. Non-limiting examples of such beneficial or desired clinical results are prolonging survival as compared to expected survival without treatment, reduced symptoms including one or more of the followings: weakness and atrophy of proximal skeletal muscles, inability to sit or walk independently, difficulties in swallowing, breathing, etc.

[0045] The term “non-target specificity” refers to the non-specific, non-targeting or unintended function occurred during the gene regulation by an oligonucleotide and may cause by incomplete complementarity or mismatch between the oligonucleofide and a non-specific or non-targeting sequence. A “non-target specificity” may also be caused by a non-specific or non-targeting sequence resulted from genetic mutation, deletion, inversion and / or translocation at one or more genetic locus. The “non-target specificity” may notably influence the accuracy and safety of the oligonucleotide regulation technology. One of the purposes of the present disclosure is to minimize or completely avoid the undesirable “non-target specificity” , i.e., to achieve “target specificity” or “decreased / mitigated non-target specificity” .

[0046] The present disclosure is based on an unexpected discovery that a particularly designed abasic modification structure may be incorporated into at least one strand of the oligonucleotide, e.g. by inserting the abasic modification structure between two nucleotides or by substituting at least one nucleotide in the oligonucleotide with the abasic modification structure, so as to significantly mitigate the non-target specificity, thus achieving improved modulation of a target gene.

[0047] According to some embodiments, the abasic modification structure can be derived from a particularly designed precursor compound, which is also known as a modification compound or an abasic modification compound herein, having a structure represented by Formula I:

[0048] According to an embodiment, the precursor compound is abasic as it does not comprise an nucleobase in the molecular structure thereof, wherein the nucleobase can be those generally known in the gene technical field, and may be selected from the group consisting of adenine (A) , guanine (G) , cytosine (C) , thymine (T) and uracil (U) , which are generally contained in all the organism. The nucleobase may also synthesis nucleobase newly developed in the past few years, or will be developed in the future, and examples of the synthesis nucleobase may include substituted or modified derivatives of A, G, C, T and U, such as methylcytosine (mC) , methyladenine (mA) , hydroxymethyladenine (hmC) , formylcytosine, carboxylcytosine, etc. According to an embodiment, the nucleobase may include substituted derivatives of A, G, C, T or U, where the substituting group can be sleeted from at least one of C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-Cl-Cl 2 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-.

[0049] According to an embodiment, A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C12 alkylene, linear or branched C4-C12 alkenylene, linear or branched C4-C12 alkynyl, C3-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-Cl2 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C3-C16 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-Cl6 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-Cl6 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 arylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-Cl6 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) N (R4) (C3-C16 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) -O- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) -O- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) -O- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene-O) a- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene-O) a- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) C (O) (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) C (O) (C6-Cl6 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) C (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S(O) - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) - (C3-C16 cycloalkylene-O-, - (C6-C16 arylene-O-) S (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) 2- (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S(O) 2- (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) S (O) 2- (C6-C16 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH(C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl, C6-C16 aryl, C4-C16 heteroaryl, C6-C16 aryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, C4-C16 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-.

[0050] According to another embodiment, the moiety A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C8 alkylene, linear or branched C3-C8 alkenylene, linear or branched C4-C8 alkynyl, C4-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C2-C8 alkylene) -, C3-C12 heterocycloalkylene, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C3-C12 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C3-C12 heterocycloalkylene) - (linear or branched C2-C8 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C2-C8 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C2-C8 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) N (R4) (C3-C16 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) O (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) O (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) O (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C8 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C8 alkylene) , - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C8 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C12 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-.

[0051] According to another embodiment, the moiety A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C6 alkylene, linear or branched C3-C6 alkenylene, linear or branched C3-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C3-C8 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 heteroarylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) N (R4) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) O (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) O (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) O (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S(O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH(C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-.

[0052] According to another embodiment, the moiety A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C7 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, - (linear or branched C1-C2 alkylene) - (C3-C6 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C2 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C1-C5 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C5 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C2-C3 alkylene) O (linear or branched C2-C3 alkylene) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C4 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C4 alkyl) -C (O) -N (C1-C4 alkyl) -, C1-C4 alkoxy-C1-C4 alkylene; wherein R4 is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-and (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -.

[0053] According to some embodiments, a is an integrate of 1 to 12, such as 1 to 10, or 2 to 8, or 3 to 6, or 1 to 4, or 2 to 5, or within any numerical ranges obtained by combining any two of the above indicated end point values.

[0054] According to some embodiments, m is an integer of 0, 1 or 2; and n is an integer of 0, 1 or 2, with the proviso that the sum of m and n equals to 2 or larger. According to a specific embodiment, m is 0 and n is 2; or m is 2 and n is 0; or m is 1 and n is 1.

[0055] According to an embodiment, the moiety X is a protection group, such as those selected from group consisting of H, C1-C12 alkyl, (C1-C12) alkylcarbonyl, (C1-C12) alkoxycarbonyl, (C6-C16) aryl, (C6-C16) arylcarbonyl, (C6-C16) aryloxycarbonyl, tri( (C1-C16) alkyl) silyl and tri ( (C1-C16) alkoxy) silyl and di (C1-C12 alkoxy) trityl. According to another embodiment, the moiety X is selected from H, C1-C8 alkyl, (C1-CS) alkylcarbonyl, (C1-CS) alkoxycarbonyl, (C6-C12) aryl, (C6-C12) arylcarbonyl, (C6-C12) aryloxycarbonyl, tri( (C1-CS) alkyl) silyl and tri ( (C1-C12) alkoxy) silyl and di (C1-C8 alkoxy) trityl. According to another embodiment, the moiety X is selected from H, C1-C6 alkyl, (C1-C6) alkylcarbonyl, (C1-C6) alkoxycarbonyl, (C6-C10) aryl, (C6-C10) arylcarbonyl, (C6-C10) aryloxycarbonyl, tri( (C1-C6) alkyl) silyl and tri ( (C1-C6) alkoxy) silyl and di (C1-C6 alkoxy) trityl.

[0056] According to an embodiment, each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl, C6-C16 aryl. According to another embodiment, each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C8 alkyl, C3-C12 cycloalkyl, C6-C12 aryl. According to another embodiment, each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6-C12 aryl.

[0057] According to an embodiment, R3 is selected from the group consisting of C1-C12 alkylene-, C2-C12 alkenylene-, C3-C16 cycloalkylene and C6-C22 arylene. According to another embodiment, R3 is selected from the group consisting of C1-C8 alkylene-, C2-C8 alkenylene-, C3-C12 cycloalkylene and C6-C16 arylene. According to another embodiment, R3 is selected from the group consisting of C1-C6 alkylene-, C2-C6 alkenylcnc-, C3-C6 cycloalkylene and C6-C8 arylene.

[0058] According to a specific ambodiment, the arylene, on each occurrence (e.g., as the above stated groups of A, R1, R2, R3, R4, X or the substituent (s) attached thereto) , is phenylene; and the heteroarylene, on each occurrence (e.g. as the above stated groups of A, R1, R2, R3, R4, X or the substituent (s) attached thereto) , is derived from an heteroaromatic compound selected from the group off

[0059] According to some embodiments, moiety A does not have a structure with a main chain comprising two or less carbon atoms. For example, the moiety A does not have a structure represented by the following formula: wherein R5, R6, R7 and R8 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3- C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; and the asterisk represents the site wherein A is covalently attached to L1 or L2.

[0060] According to some embodiments, the moiety A has a structure which does not comprise any one of the following substituting groups:

[0061] According to some embodiments, when moiety A is - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, R4 does not comprise alkenyl, alkynyl or acyl.

[0062] According to some embodiments, the precursor compound of the present application may have a structure represented by any of the following formulae:

[0063] According to some alternative embodiments, the abasic modification structure of the present disclosure may derived from a precursor compound other than those shown in Formula I. For example, such a precursor may comprise A structure as stated above, and two or more hydroxyl groups protected or terminated with other substituents.

[0064] Another embodiment of the present disclosure provides a gene modulating agent comprising a single-stranded oligonucleotide or a double-stranded oligonucleotide, wherein the single-stranded oligonucleotide or at least one strand of the double-stranded oligonucleotide comprises at least one modification spacer having a structure represented by Formula II: -L1-A-L2- Formula II wherein the structure of A is as defined above.

[0065] According to an embodiment, the abasic modification structure is abasic and thus does not comprise any nucleobase, such as those indicated above, in the molecular structure thereof, nor is the abasic modification structure covalently attached to any of the nucleobase.

[0066] According to some embodiments, A has a structure selected from the group consisting of wherein *represents the site where the abasic modification structure represented by  Formula II is covalently attached to the rest part of the oligonucleotide, e.g., to the adjacent nucleotides via the linkage group L1 and L2; and **represents the site where the abasic modification structure represented by Formula  II is covalently attached to another oligonucleotide strand or a substituting group.

[0067] According to an embodiment, each of L1 and L2 is independently a linkage group selected from the group consisting of direct bond, - (C1-C8) alkylene-, -C (O) -, -O-C (O) -, -C (O) -O-, -O-C (O) -O-, -NH-, -N ( (C1-C6) alkyl) -, -N ( (C1-C6) alkyl) -C (O) -O-, -C (O) -NH-, -P (O) 2-, -OP (O) O-, -OP (O) 2O-, -OP (O) O-, -P (S) (O) -, -OP (S) O-, -OP (S) (O) O-and -OP (S) O-. According to an embodiment, each of L1 and L2 has a structure of wherein  represents an anion selected from the group consisting of O-, and S-, and * represents the site where the linkage group is attached with the nucleotide or A group.

[0068] According to an embodiment, the oligonucleotide (s) is selected from the group consisting of antisense oligonucleotide, antisense RNA, short interfering RNA, microRNA, small activating RNA, double-stranded RNA, small guide RNA, and any combinations or conjugated composite thereof.

[0069] According to an exemplary embodiment, the gene modulating agent comprises a single-stranded oligonucleotide, and the single-stranded oligonucleotide comprises at least one, such as one, two or three abasic modification moieties having a structure represented by Formula II, where the abasic modification structure of Formula II is covalently attached to the adjacent nucleotides. According to a specific embodiment, the single-stranded oligonucleotide comprises 12 to 50 nucleotides, such as 15 to 40, or 16 to 30, or 17 to 28, or 18 to 25, or 19 to 24, or 20 to 21 nucleotides. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the single-stranded oligonucleotide, counting from the 5’-end, such as 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the single-stranded oligonucleotide, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the single-stranded oligonucleofide, counting from the 5’-end, such as 2 to 11, 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the single-stranded oligonucleotide, counting from the 5’-end.

[0070] According to an exemplary embodiment, the gene modulating agent comprises a double-stranded oligonucleotide comprising, e.g., a sense strand and an anfisense strand, each strand of the double-stranded oligonucleotide comprises 12 to 50 nucleotides, such as 15 to 40, or 16 to 30, or 17 to 28, or 18 to 25, or 19 to 24, or 20 to 21 nucleotides.

[0071] According to a specific embodiment, the antisense strand comprises at least one, such as one, two or three abasic modification moieties having a structure represented by Formula II, where the abasci modification structure of Formula II is covalently attached to the adjacent nucleotides. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the antisense strand, counting from the 5’-end, such as 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the antisense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 2 to 7 of the antisense strand, counting from the 5’-end, such as 3 to 7, or 4 to 6, or 5 to 7, or 6 to 7, of the antisense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the anfisense strand, counting from the 5’-end, such as 2 to 11, 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the antisense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the antisense strand, counting from the 5’-end, such as 2 to 7, 3 to 7, or 4 to 6, or 5 to 7, or 6 to 7, of the anfisense strand, counting from the 5’-end.

[0072] According to a specific embodiment, the sense strand comprises at least one, such as one, two or three abasic modification moieties having a structure represented by Formula II, where the abasic modification structure of Formula II is covalently attached to the adjacent nucleotides. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the sense strand, counting from the 5’-end, such as 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the antisense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 2 to 7 of the sense strand, counting from the 5’-end, such as 3 to 7, or 4 to 6, or 5 to 7, or 6 to 7, of the sense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the sense strand, counting from the 5’-end, such as 2 to 11, 3 to 11, or 4 to 10, or 5 to 9, or 6 to 8, or 7 to 8, of the antisense strand, counting from the 5’-end. According to a specific embodiment, the abasic modification structure represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the sense strand, counting from the 5’-end, such as 2 to 7, 3 to 7, or 4 to 6, or 5 to 7, or 6 to 7, of the sense strand, counting from the 5’-end.

[0073] All nucleotides of the oligonucleotides described herein may be natural, i.e., non-chemically modified, nucleotides or at least one nucleotide may be a chemically modified nucleotide. Non-limiting examples of the chemical modification include one or more of a combination of the following: 1) modification of a phosphodiester bond of nucleotides in the oligonucleotide  sequence; 2) modification of 2'-OH of the ribose in the nucleotide; 3) modification of a base in the nucleotide; 4) at least one nucleotide in the oligonucleotide sequence being a locked nucleic acid,  and 5) at least one nucleotide in the oligonucleotide sequence being a deoxyribonucleotide.

[0074] Chemical modifications of nucleotides or oligonucleotides in the present disclosure are well known to those skilled in the art, and modifications of the phosphodiester bond refer to modifications of oxygen in the phosphodiester bond, including phosphorothioate modifications and boronated phosphate modifications. The modifications disclosed herein stabilize an oligonucleotide structure, maintaining high specificity and high affinity for base pairing. The modifications disclosed herein also stabilize a nucleic acid structure and maintain its delivering accessory properties including bioavailability, biodistribution, and / or cellular uptake of the oligonucleotide agent in various tissues prefrontal cortex, cerebellum, spinal cord (e.g., cervical, thoracic, lumbar) , muscle, liver, and kidney.

[0075] In some embodiments, the chemical modification is to substitute the phosphodiester bond with phosphorothioate (PS) bond on the backbone of the oligonucleotide disclosed herein. In some embodiments, the oligonucleotide disclosed herein comprises at least one PS backbone modification in one oligonucleotide strand. In some embodiments, the oligonucleotide comprises at least 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 28, 32, or40 PS backbone modifications in one oligonucleotide strand.

[0076] In some embodiments, the nucleotides or oligonucleotides of the present application includes at least one chemically modified nucleotide which is modified at 2'-OH in pentose of a nucleotide, i.e., the introduction of certain substituents at the hydroxyl position of the ribose, such as 2'-fluoro modification, 2'-oxymethyl modification, 2'-oxyethylidene methoxy modification, 2, 4'-dinitrophenol modification, locked nucleic acid, 2'-amino modification or 2'-deoxy modification, e.g., a 2’-deoxy-2’-fluoro modified nucleotide, a 2’-deoxy-modified nucleotide.

[0077] In some embodiments, the nucleotides or oligonucleotides of the present application includes at least one chemically modified nucleofide which is modified at the base of the nucleotide, e.g., 5 '-bromouracil modification, 5’-iodouracil modification, N-methyluracil modification, or 2, 6-diaminopurine modification.

[0078] In some embodiments, the chemical modification of the nucleotides or oligonucleotides in the present application is an addition of a (E) -vinylphosphonate moiety at the 5'end of the sense or antisense sequence. In some embodiments, the chemical modification of at least one chemically modified nucleotide is an addition of a 5-methyl cytosine moiety at the 5' end of the sense or antisense sequence. The oligonucleotides used in the present disclosure may be commercially available from various vendors, or synthesized in a lab scale or industrial scale. According to an exemplary embodiment, the oligonucleotides can be synthesized by using a commercialized synthesizer or a particularly customized synthesizer, such as a K&ADNA synthesizer purchased from K&ALaborgeraete GbR, Schaafheim, Germany, by using ordinary synthesis procedures, e.g., a solid phase synthesis technique comprising the steps of sequentially adding batches of raw materials (e.g., phosphoramidite monomers including various linkers and conjugates) onto a solid support known in the art and subjecting each base addition to a preparation cycle consisted of four chemical reactions of detritylation, coupling, oxidation / thiolation and capping, so as to produce the oligonucleotides with desired full-length.

[0079] According to another embodiment, the gene modulating agent further comprises at least one accessory oligonucleotide (ACO) conjugated with the oligonucleotide (s) . The term “accessory oligonucleotide (ACO) ” herein means a non-targeting single-stranded oligonucleotide having at least 6 nucleotides with or without one or more linker moieties conjugated to another oligonucleotide. The ACO component is not designed to specifically target any complementary nucleic acid sequence in the subject to be administered to. The ACO component can be chemically-modified on its backbone, nucleoside or other positions, e.g., a phosphorothioate, mesyl phosphoramidate or boranophosphate backbone, a 2'-fluoro-2'-deoxynucleoside (2'-F) , a 2'-O-methyl (2'-O-Me) , a 2'-O- (2-methoxyethyl) (2'-O-MOE) , LNA, BNA, PNA, 5’- (E) -vinylphosphonate moiety, 5-methyl cytosine moiety, etc., to impart physiochemical properties conducive to improve the oligonucleotide (s) ’ bioavailability and delivery. Covalent linker moieties can be natural or unnatural nucleotides, ethlyglycol, carbohydrates, alkyl chains, or any other linker used to covalently connect any two oligonucleotides positioned on the 3’-or 5’-terminus of one or both of the strands within the oligonucleotide agent. ACO may be described and prepared according to those disclosed in WO2023280190Al, which is herein incorporated by reference in its entirety.

[0080] According to another embodiment, the gene modulating agent further comprises at least one chemical moiety conjugated with the oligonucleotide (s) . In certain embodiments, the chemical moiety is through direct binding or mediated by one or more conjugated moieties which is covalently linked to sense strand or antisense strand of the double-stranded oligonucleotide, or both. In some embodiments, the one or more conjugated moieties comprise a cell-penetrating peptide, polyethylene glycol, an alkaloid, a tryptamine, a benzimidazole, a quinolone, an amino acid, a cholesterol, glucose, and N-acetylgalactosamine. In certain embodiments, the chemical moiety comprises one or more of a lipid, a fatty acid, a fluorophore, a saccharide, a peptide, an antibody and any other commonly used conjugation moieties. In certain embodiments, the oligonucleotide is conjugated to a lipid selected from C4-30 fatty acid. In certain embodiments, the conjugation moiety is a lipid / fatty acid having a saturated or unsaturated, linear or branched C16 carbon chain.

[0081] Another embodiment of the present disclosure provides a pharmaceutical composition comprising the gene modulating agent. According to another embodiment, the pharmaceutical composition may comprise one or more additional ingredients, such as pharmaceutically acceptable carrier, excipient, solvent, diluent, stabilizer, dispersant, buffer, compatibilizer, preservative agent and combinations thereof.

[0082] Another embodiment of the present disclosure provides a method of modulating the expression of a target gene while mitigating the non-target specificity, comprising the step of administrating the pharmaceutical composition to a subject, or contacting the pharmaceutical composition with cells of the subject. For example, it is estimated that the gene modulating agent and pharmaceutical composition can be applied in various organs, tissues and cells, such as liver, lung, kidney, intestine, pancreas, cholecyst, muscle, bone, eye, central nervous system (CNS) , and modulate the expression of one or more target genes in the cell thereof.Particular embodiments

[0083] The present application provides the following particular embodiments: 1. An abasic modification compound having a structure represented by Formula I: wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C12 alkylene,  linear or branched C4-C12 alkenylene, linear or branched C4-C12 alkynyl, C3-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C3-C16 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 arylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) 2N (R4) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2N (R4) , - (linear or branched C1-C12 alkylene) -O- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) -O- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) -O- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene-O) a- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene-O) a- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) C (O) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2C (O) , - (C6-C16 arylene) 2C (O) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) C (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) - (C3-C16 cycloalkylene-O-, - (C6-C16 arylene-O-) S (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) 2- (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) 2- (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) S (O) 2- (C6-C16 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl,  C6-C16 aryl, C4-C16 heteroaryl, C6-C16 aryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, C4-C16 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-; a is an integrate of 1 to 6; m is an integer of 0, 1 or 2, and n is an integer of 0, 1 or 2, with the proviso that the  sum of m and n equals to 2 or larger; X represents a protection group; each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16  cycloalkyl, C6-C16 aryl; and R3 is selected from the group consisting of C1-C12 alkylene-, C2-C12 alkenylene-, C3-C16  cycloalkylene and C6-C22 arylene. 2. The abasic modification compound according to embodiment 1, wherein X is  selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, (C1-C12) alkylcarbonyl, (C1-C12) alkoxycarbonyl, (C6-C16) aryl, (C6-C16) arylcarbonyl, (C6-C16) aryloxycarbonyl, tri ( (C1-C16) alkyl) silyl and tri ( (C1-C16) alkoxy) silyl and di (C1-C12 alkoxy) trityl. 3. The abasic modification compound according to embodiment 1, wherein the abasic  modification compound does not comprises a nucleobase selected from the group consisting of adenine, guanine, cytosine, thymine and uracil; wherein the nucleobase is optionally substituted with C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6- C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-. 4. The abasic modification compound according to embodiment 1, wherein A is  selected from the group consisting of linear or branched C4-C8 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, linear or branched C4-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C3-C8 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 heteroarylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) N (R4) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) O (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) O (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) O (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (-C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S(O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl,  C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; a is an integrate of 1 to 6; m is an integer of 1, 2 or 3, and n is an integer of 1 or 2; X is a protection group; each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8  cycloalkyl, C6-C12 aryl; and R3 is selected from the group consisting of C1-C6 alkylene-, C2-C6 alkenylene-, C3-C16  cycloalkylene and C6-C22 arylene. 5. The abasic modification compound according to embodiment 1, wherein A is  selected from the group consisting of linear or branched C4-C7 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, - (linear or branched C1-C2 alkylene) - (C3-C6 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C2 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C1-C5 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C5 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C2-C3 alkylene) O (linear or branched C2-C3 alkylene) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C4 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C4 alkyl) -C (O) -N (C1-C4 alkyl) -, C1-C4 alkoxy-C1-C4 alkylene; wherein R4 is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6- C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-and (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -; mis 1, andnis 1; X is selected from H, C1-C3 alkyl, (C1-C3) alkylcarbonyl, (C1-C3) alkoxycarbonyl, (C6- C12) aryl, (C6-C12) arylcarbonyl, (C6-C12) aryloxycarbonyl, tri ( (C1-C3) alkyl) silyl and tri ( (C1-C3) alkoxy) silyl and di (C1-C3 alkoxy) trityl; each of R1 and R2 is C1-C4 alkyl; and R3 is C1-C4 alkylene. 6. The abasic modification compound according to any one of embodiments 1 to 5,  wherein A does not have a structure of: wherein R5, R6, R7 and R8 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3- C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; and the asterisk represents the site wherein A is covalently attached to -OX or 7. The abasic modification compound according to any one of embodiments i to 5,  wherein the arylene, on each occurrence, is phenylene; and the heteroarylene, on each occurrence, is derived from an heteroaromatic compound  selected from the group off 8. The abasic modification compound according to embodiment 1, having a structure  of 9. A gene modulating agent comprising a single-stranded oligonucleotide or a double- stranded oligonucleotide, wherein the single-stranded oligonucleotide or at least one strand of the double-stranded oligonucleotide comprises at least one abasic modification moiety having a structure represented by Formula II: -L1-A-L2- Formula II wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C12 alkylene,  linear or branched C4-C12 alkenylene, linear or branched C4-C12 alkynyl, C3-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C3-C16 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 arylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) 2N (R4) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2N (R4) , - (linear or branched C1-C12 alkylene) -O- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) -O- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) -O- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene-O) a- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene-O) a- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) C (O) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2C (O) , - (C6-C16 arylene) 2C (O) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) C (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) - (C3-C16 cycloalkylene-O-, - (C6-C16 arylene-O-) S (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) 2- (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) 2- (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) S (O) 2- (C6-C16 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl,  C6-C16 aryl, C4-C16 heteroaryl, C6-C16 aryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, C4-C16 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of subsfituent selected from H, C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-; a is an integrate of 1 to 6; each of L1 and L2 is independently a linkage group selected from the group consisting  of direct bond, - (C1-Cs) alkylene-, -C (O) -, -O-C (O) -, -C (O) -O-, -O-C (O) -O-, -NH-, -N ( (C1-C6) alkyl) -, -N ( (C1-C6) alkyl) -C (O) -O-, -C (O) -NH-, -P (O) 2-, -OP (O) O-, -OP (O) 2O-, -OP (O) O-, -P (S) (O) -, -OP (S) O-, -OP (S) (O) O-and -OP (S) O-. 10. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein the abasic  modification moiety represented by Formula II is derived from the abasic modification compound according to any one of embodiments 1 to 8. 11. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein the abasic  modification moiety represented by Formula II does not comprise and is not attached to a nucleobase selected from the group consisting of adenine, guanine, cytosine, thymine and uracil; wherein the nucleobase is optionally substituted with C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6- C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-. 12. The gene modulating agent according to any one of embodiments 9 to 11, wherein  A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C8 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, linear or branched C4-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C3-C8 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 heteroarylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) N (R4) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) O (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) O (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) O (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (-C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl,  C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; a is an integrate of 1 to 6. 13. The gene modulating agent according to any one of embodiments 9 to 11, wherein  A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C7 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, - (linear or branched C1-C2 alkylene) - (C3-C6 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C2 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C1-C5 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C5 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C2-C3 alkylene) O (linear or branched C2-C3 alkylene) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C4 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C4 alkyl) -C (O) -N (C1-C4 alkyl) -, C1-C4 alkoxy-C1-C4 alkylene; wherein R4 is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6- C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-and (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -. 14. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein A does not have a  structure of: wherein R5, R6, R7 and R8 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3- C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substitucnt sclectcd from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-; and the asterisk represents the site wherein A is covalently attached to L1 or L2. 15. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein the arylene, on each occurrence, is phenylene; and the heteroarylene, on each occurrence, is derived from an heteroaromatic compound  selected from the group of: 16. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein A has a structure  selected from the group consisting of wherein * represents the site where the abasic modification moiety represented by  Formula II is covalently attached to the rest part of the oligonucleotide; and ** represents the site where the abasic modification moiety represented by Formula II  is covalently attached to another oligonucleotide or a substituting group. 17. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein the  oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end, or the oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50  nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the single-stranded oligonucleotide, counting from the 5'-end. 18. The gene modulating agent according to embodiment 9, wherein the  oligonucleotide is a double-stranded oligonucleofide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end, or the oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50  nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end. 19. The gene modulating agent according to embodiment 18, wherein the  oligonucleotide is a double-stranded oligonucleofide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end, or the oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50  nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end. 20. The gene modulating agent according to embodiment 19, wherein the  oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 15 to 30 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 7 to 8 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5'-end, or the oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 15 to 30  nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 7 to 8 of the single-stranded oligonucleotide counting from the 5'-end. 21. The gene modulating agent according to embodiment 9 or 10, wherein the  oligonucleotide (s) is selected from the group consisting of antisense oligonucleotide (ASO) , antisense RNA, short interfering RNA (siRNA) , microRNA (miRNA) , small activating RNA (saRNA) , double-stranded RNA (dsRNA) , small guide RNA (sgRNA) , and any combinations or conjugated composite thereof. 22. The gene modulating agent according to embodiment 9 or 10, further comprising at  least one accessory oligonucleotide (ACO) conjugated with the oligonucleotide (s) . 23. A pharmaceutical composition comprising: a) the gene modulating agent according to any one of embodiments 9 to 22; and b) optionally, one or more ingredients selected from the group consisting of  pharmaceutically acceptable carrier, excipient, solvent, diluent, stabilizer, dispersant, buffer, compatibilizer, preservative agent and combinations thereof. 24. A method of modulating the expression of a target gene in a subject while  mitigating the non-target specificity, wherein the method comprising the step of administrating the gene modulating agent according to any one of embodiment s 9-22 or the pharmaceutical composition according to embodiment 23 to a subject. 25. The method of embodiment 24, wherein the gene modulating agent or the  pharmaceutical composition increases the expression of the target gene. 26. The method of embodiment 24, wherein the gene modulating agent or the  pharmaceutical composition decreases the expression of the target gene. 27. The method of any one of embodiments 24 to 26, wherein the subject is a mammal. 28. The method of embodiment 27, wherein the mammal is a rodent. 29. The method of embodiment 28, wherein the rodent is a mouse. 30. The method of embodiment 28, wherein the rodent is a rat. 31. The method of embodiment 27, wherein the mammal is a non-human primate. 32. The method of embodiment 27, wherein the mammal is a human. 33. The method of embodiment 24, wherein the target gene is associated with a disease  or disorder. 34. The method of embodiment 33, wherein the target gene is associated with a disease  or disorder in the central nervous system, eye, lung, spleen, muscle, heart, kidney, bladder, or liver. 35. A method of modulating the expression of a target gene while mitigating the non- target effect, the method comprising contacting a cell with the gene modulating agent according to any one of embodiments 9-22 or the pharmaceutical composition of embodiment 23. 36. The method of embodiment 35, wherein the gene modulating agent or the  pharmaceutical composition increases the expression of the target gene. 37. The method of embodiment 35, wherein the gene modulating agent or the  pharmaceutical composition decreases the expression of the target gene. 38. The method of any one of embodiments 34-37, wherein the cell is a mammalian  cell. 39. The method of embodiment 38, wherein the mammalian cell is a mouse cell. 40. The method of embodiment 38, wherein the mammalian cell is a rat cell. 41. The method of embodiment 38, wherein the mammalian cell is a non-human  primate cell. 42. The method of embodiment 38, wherein the mammalian cell is a human cell. 43. The method of embodiment 35, wherein the target gene is associated with a disease  or disorder. 44. The method of embodiment 35, wherein the target gene is associated with a disease  or disorder in the central nervous system, eye, lung, spleen, muscle, heart, kidney, bladder, or liver.EXAMPLES

[0084] Some embodiments of the invention will now be described in the following Examples, wherein all parts and percentages are by weight unless otherwise specified. However, the scope of the present disclosure is not, of course, limited to the formulations set forth in these examples. Rather, the Examples are merely inventive of the disclosure.

[0085] The following examples are set forth so as to provide those of ordinary skill in the art with a complete disclosure and description of how to make and use the present invention and are not intended to limit the scope of what the inventors regard as their invention nor are they intended to represent that the experiments below are all or the only experiments performed. Efforts have been made to ensure accuracy with respect to numbers used (e.g.., amounts, temperature, etc. ) but some experimental errors and deviations should be accounted for. Unless indicated otherwise, parts are parts by weight, molecular weight is weight average molecular weight, temperature is in degrees Celsius, and pressure is at or near atmospheric. Standard abbreviations rnay be used, e.g.., bp, base pair (s) ; kb, kilobase (s) ; Nm, nanomolar (s) ; s or sec, second (s) ; min, minute (s) ; h or hr, hour (s) ; aa, amino acid (s) ; nt, nucleotide (s) ; i.m., intramuscular (ly) ; i.p., intraperitoneal (ly) ; s.c., subcutaneous (ly) ; ivt or IVT, intravitreous; iv or IV, tail vein, intravenous; i. c. v. or icy or ICV, intracerebroventricular and the like.

[0086] All the starting materials, reagents and solvents used hereafter were purchased from commercial sources and used as received unless stated otherwise. Purification of reaction products was performed with a column chromatography comprising a silica gel (200-300 mesh) and eluting agents of hexanc / ethyl acetate, DCM / MeOH. Thin layer chromatography (TLC) was carried out using pre-coated silica Gel GF plates and visualized using KmnO4 stains. 1H-NMR spectra were recorded at 400 or 500 MHz (Varian) using CDCl3 with TMS. High-resolution mass spectra (HRMS) were recorded on LC / MS (Agilent Technologies 1260 Infinity II / 6120 Quadrupole) and a time-of-flight mass spectrometer by ESI or matrix assisted laser desorption / ionization (MALDI) .Example 1. The preparation of compound B2 of the present disclosure

[0087] Compound B2 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) Thc preparation of compound 2.

[0088] To a solution of ( (lr, 4r) -cyclohexane-l, 4-diyl) dimethanol 1 (10 g, 69.3 mmol, 1.0 eq) in anhydrous pyridine (200 mL) under nitrogen atmosphere was added DMTrCl (23.48 g, 69.3 mmol, 1.0 eq) slowly. The reaction mixture was stirred at room temperature for 6 h, and then concentrated under reduced pressure. The resultant residue was purified by flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-3%of MeOH / DCM) to provide compound 2 (12.1 g, 39%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 446.25; MW Found: 303.09 [DMT] -, 144.15 [DMT off+ H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.49 (d, J = 7.4 Hz, 2H) , 7.37 (t, J = 6.0 Hz, 4H) , 7.34 -7.31 (m, 2H) , 7.23 (dd, J= 4.7, 2.4 Hz, 1H) , 6.88 -6.85 (m, 4H) , 3.83 (s, 6H) , 3.53 -3.49 (m, 2H) , 2.93 (dd, J = 6.2, 3.8 Hz, 2H) , 1.91 (dd, J = 13.0, 5.0 Hz, 4H) , 1.63 (d, J = 3.3 Hz, 1H) , 1.43 (s, 1H) , 1.03 (dd, J = 12.7, 7.9 Hz, 4H) . (2) The preparation of compound B2.

[0089] To a solution of compound 2 (3.4 g, 7.65 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (2.6 g, 15.3 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 30 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (4.6 g, 15.3 mmol, 2.0 eq. ) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B2 (3.65 g, 75%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 646.35; MW Found: 303.09 [DMT] -, 302.36 [DMT and one isopropyl off] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J = 7.3 Hz, 2H) , 7.35 (t, J= 6.0 Hz, 4H) , 7.30 (d, J= 8.4 Hz, 2H) , 7.24 -7.20 (m, 1H) , 6.87 -6.83 (m, 4H) , 3.94 -3.83 (m, 2H) , 3.82 (s, 6H) , 3.64 (ddt, J = 13.6, 10.1, 6.8 Hz, 2H) , 3.52 (dt, J = 9.7, 7.4 Hz, 1H) , 3.43 (dt, J= 9.9, 7.1 Hz, 1H) , 2.91 (d, J= 6.3 Hz, 2H) , 2.67 (t, J= 6.5 Hz, 2H) , 1.88 (dd, J = 24.8, 6.2 Hz, 4H) , 1.64 -1.55 (m, 2H) , 1.22 (dd, J = 6.8, 3.2 Hz, 12H) , 1.02 (t, J = 10.4 Hz, 4H) .Example 2. The preparation of compound B3 of the present disclosure

[0090] Compound B3 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 4.

[0091] To a solution of 2, 2′- (l, 4-phenylene) bis (ethan-l-ol) 3 (3 g, 18.0 mmol, 1.0 eq) in anhydrous pyridine (50 mL) under nitrogen atmosphere was added DMTrCl (6.1 g, 18.0 mmol, 1.0 eq) slowly. The reaction mixture was stirred at room temperature for 6 h, and then concentrated under reduced pressure. The resultant residue was purified by flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-3%of MeOH / DCM) to provide compound 4 (3.74 g, 44%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 468.23; MW Found: 303.16 [DMT] -, 491.31 [M + Na] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 (dd, J = 5.3, 3.3 Hz, 2H) , 7.33 -7.29 (m, 4H) , 7.28 (d, J = 7.8 Hz, 2H) , 7.22 (s, 1H) , 7.18 (s, 4H) , 6.85 -6.81 (m, 4H) , 3.88 (dd, J = 8.3, 4.8 Hz, 2H) , 3.81 (s, 6H) , 3.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H) , 2.93 -2.87 (m, 4H) . (2) The preparation of compound B3.

[0092] To a solution of compound 4 (884 mg, 1.89 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (647 mg, 3.78 mmol, 2.0 eq) in anhydrous DCM (10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.14 g, 3.78 mmol, 2.0 eq. ) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B3 (292 mg, 23%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 -7.38 (m, 2H) , 7.29 (d, J = 7.9 Hz, 6H) , 7.23 (d, J = 7.1 Hz, 1H) , 7.18 -7.14 (m, 4H) , 6.85 -6.80 (m, 4H) , 3.96 -3.82 (m, 2H) , 3.81 (d, J =6.8 Hz, 6H) , 3.78 -3.72 (m, 2H) , 3.65 -3.55 (m, 2H) , 3.29 (t, J= 7.0 Hz, 2H) , 2.92 (dt, J = 16.8, 7.1 Hz, 4H) , 2.52 (td, J= 6.5, 2.9 Hz, 2H) , 1.18 (dd, J= 14.4, 6.8 Hz, 12H) .Example 3. The preparation of compound B4 of the present disclosure

[0093] Compound B4 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 6.

[0094] To a solution of compound 5 (10 g, 50 mrnol, 1.0 eq) in anhydrous THF (200 rnL) , under nitrogen atmosphere and immersed in ice bath, was added LiAlH4 (5.7 g, 150 mmol, 3.0 eq) . After 10 minutes, the mixture was removed from the ice bath and warmed up to room temperature and stirred for about 1 h. Then the reaction system was recooled with the ice bath, and saturated potassium sodium tartrate solution (100 mL) was added slowly into the mixture. After 30 minutes, the reaction was extracted 3 times by Et2O, then the organic phase was combined and washed by brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 172.15; MW Found: 173.22 [M + H] +. (2) The preparation of compound 7.

[0095] To a solution of compound 6 (3 g, 17.4 mmol, 1.0 eq) in anhydrous pyridine (50 mL) under nitrogen atmosphere was added DMTrCl (4.7 g, 13.92 mmol, 0.8 eq) slowly. The reaction mixture was stirred at room temperature for 6 h then concentrated under reduced pressure. The resultant residue was purified by flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-3%of MeOH / DCM) to provide compound 7 (3.0 g, 36%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 -7.41 (m, 2H) , 7.35 -7.30 (m, 4H) , 7.28 (d, J = 2.3 Hz, 2H) , 7.19 -7.15 (m, 1H) , 6.84 -6.80 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.59 (dd, J= 9.5, 5.8 Hz, 2H) , 3.11 (t, J= 7.2 Hz, 2H) , 1.45-1.34 (m, 10H) , 1.20 (dd, J = 6.8, 3.4 Hz, 4H) . (3) The preparation of compound B4.

[0096] To a solution of compound 7 (1.3 g, 2.74 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (938 mg, 5.48 mmol, 2.0 eq) in anhydrous DCM (15 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.65 g, 5.48 mmol, 2.0 eq. ) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B4 (425 mg, 23%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.29-7.25 (m, 2H) , 7.22 -7.16 (m, 1H) , 6.86 -6.79 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.78 -3.71 (m, 2H) , 3.65 -3.50 (m, 4H) , 3.10 (t, J = 7.4 Hz, 2H) , 2.58 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 1.66 (t, J = 7.4 Hz, 2H) , 1.51 (t, J = 7.6 Hz, 2H) , 1.37 (dd, J = 18.4, 4.5 Hz, 6H) , 1.22 (s, 4H) , 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 6H) , 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 6H) .Example 4. The preparation of compound B5 of the present disclosure

[0097] Compound B5 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 9

[0098] To a solution of methyl 2- (4-fluoro-3-nitrophenyl) acetate 8 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and K2CO3 (4.85 g, 35.1 mmol, 1.5 eq) in anhydrous DMF (40 mL) , under nitrogen atmosphere, was added 25 wt%methylamine in water (4.36 mL, 35.1 mmol, 1.5 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 3 h, then cold water (80 mL) was added therein. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was washed three times with saturated LiCl solution and one time with brine. Then the organic phase was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure to form compound 9 as red solid, which was directly used in the next step without further purification. The compound 9 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 224.08; MW Found: 225.17 [M+H] +. (2) The preparation of compound 10

[0099] To a solution of compound 9 (23.4 mmol, 1.0 eq) in THF / H2O (9: 1, 111 rnL) , under ice bath, was added HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) and Zn powder (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) . After stirred for 10 minutes, the reaction mixture was moved from the ice bath and stirred at room temperature overnight. Then the reaction mixture was filtered and concentrated under reduced pressure. After that, water (100 mL) was added into the mixture, then the mixture was extracted three times with ethyl acetate, the organic phase was washed one time with brine. After dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure, product 10 formed then was directly used in the next step without further purification. Compound 10 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 194.11; MW Found: 195.26 [M+H] +. (3) The preparation of compound 12

[0100] To a solution of compound 10 (23.4 mmol, 1.0 eq) in EtOH (50 rnL) under nitrogen atmosphere, was added compound 11 (2.39 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and AcOH (5.39 mL, 93.6 mrnol, 4.0 eq) . The reaction mixture was stirred at 80℃ overnight, and then concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 12 (2.64 g, 41%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 276.15; MW Found: 277.25 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (s, 1H) , 7.30 -7.20 (m, 1H) , 7.17 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 3.73 (s, 2H) , 3.70 -3.63 (m, 8H) , 2.90 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 2.09 -1.94 (m, 2H) , 1.71 (dt, J = 13.0, 6.3 Hz, 2H) . (4) The preparation of compound 13

[0101] To a solution of compound 12 (2.6 g, 9.41 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 1.43 g, 14.12 mmol, 1.5 eq) in DCM (20 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (3.5 g, 10.35 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 13 was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 578.28; MW. Found: 579.30 [M + H] +. (5) The preparation of compound 14

[0102] To a solution of compound 13 (9.41 mmol, 1.0 eq) in anhydrous THF (50 mL) under nitrogen atmosphere and ice bath, was added LiAlH4 (536 mg, 14.12 mmol, 1.5 eq) . After 10 minutes, the mixture was removed from the ice bath, warmed up to room temperature and stirred for 1 h. Then the reaction was immersed in an ice bath, saturated potassium sodium tartrate solution (10 mL) was added slowly into the mixture. After 30 minutes, the reaction was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 14 (2.4 g, 46%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 550.28; MW Found: 551.63 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H) , 7.46 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.28 (m, 4H) , 7.25 (dd, J= 8.3, 5.7 Hz, 2H) , 7.19 (d, J= 8.4 Hz, 2H) , 7.10 (dd, J= 8.2, 1.3 Hz, 1H) , 6.84 -6.76 (m, 4H) , 3.87 (t, J= 6.7 Hz, 2H) , 3.76 (s, 6H) , 3.62 (s, 3H) , 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H) , 2.96 (t, J = 6.7 Hz, 2H) , 2.87 -2.80 (m, 2H) , 1.99 -1.89 (m, 2H) , 1.83 -1.70 (m, 2H) . (6) The preparation of compound B5

[0103] The compound 14 (2.3 g, 4.18 mmol, 1.0 eq) and diisoropyl ammonium tetrazolide (2.15 g, 12.54 mmol, 3.0 eq) were dissolved in anhydrous DCM (40 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (Bis (diisopropylamino) phosphino) oxy) propanenitrile (3.78 g, 12.54 mmol, 3.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 6 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B5 (2.9 g, 91%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (s, 1H) , 7.46 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.28 -7.23 (m, 2H) , 7.22 -7.16 (m, 2H) , 7.1 l (dd, J = 8.2, 1.4 Hz, 1 H) , 6.83 -6.77 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.76 -3.72 (m, 2H) , 3.64 (s, 3H) , 3.61 -3.48 (m, 4H) , 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H) , 3.04 (t, J = 7.3 Hz, 2H) , 2.87 -2.80 (m, 2H) , 2.57 -2.47 (m, 2H) , 2.03 -1.90 (m, 2H) , 1.79 -1.72 (m, 2H) , 1.19 (s, 3H) , 1.18 (s, 3H) , 1.16 (s, 3H) , 1.14 (s, 3H) .Example 5. The preparation of compound B6 of the present disclosure

[0104] Compound B6 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 16

[0105] To a solution of methyl 2- (4-fluoro-3-nitrophenyl) acetate 8 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and K2CO3 (3.56 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) in anhydrous DMF (40 mL) , under nitrogen atmosphere, was added compound 15 (3.58 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, then cold water (100 mL) was added. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was washed three times with saturated LiCl solution and one time with brine. Then the organic phase was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure to form compound 16 as yellow oil which was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 332.15; MW Found: 333.22 [M + H] +. (2) The preparation of compound 17

[0106] To a solution of compound 16 (23.4 mmol, 1.0 eq) in THF / H2O (9: 1, 111 mL) , under ice bath, was added HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) and Zn powder (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) . After stirred for 10 minutes, the reaction mixture was moved from the ice bath and stirred at room temperature overnight. Then the reaction mixture was filtered and concentrated under reduced pressure. After that, water (200 mL) was added into the mixture, then the mixture was extracted three times with ethyl acetate, the organic phase was washed one time with brine. After dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure, the product 17 forned then was directly used in the next step without further purification. The compound 17 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 302.17; MW Found: 303.22 [M + H] +. (3) The preparation of compound 18

[0107] To a solution of compound 17 (23.4 mmol, 1.0 eq) in EtOH (50 mL) under nitrogen atmosphere, was added 5-Hydroxypentanal 11 (2.39 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and AcOH (5.39 mL, 93.6 mmol, 4.0 eq) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 4 h, and then concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The product 18 formed then was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 384.22; MW Found: 385.30 [M + H] +. (4) The preparation of compound 19

[0108] To a solution of compound 18 (8.27 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 1.26 g, 12.41 mmol, 1.5 eq) in DCM (20 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (3.36 g, 9.92 mmol, 1.2 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 19 was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 686.35; MW. Found: 385.27 [M -DMT + H] +. (5) The preparation of compound 20

[0109] To a solution of compound 19 (8.27 mmol, 1.0 eq) in anhydrous THF (40 mL) under nitrogen atmosphere and ice bath, was added LiAlH4 (471 mg, 12.4 mmol, 1.5 eq) . After 10 minutes, the mixture was moved from the ice bath, warmed up to room temperature and stirred for 1 h. Then the reaction was immersed into ice bath, saturated potassium sodium tartrate solution (20 mL) was added slowly into the mixture. After 30 minutes, the reaction was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-8%of MeOH / DCM) to provide compound 20 (1.15 g, 21%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 658.35; MW Found: 357.27 [M -DMT + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H) , 7.44 -7.40 (m, 2H) , 7.32 -7.28 (m, 4H) , 7.26 (s, 2H) , 7.19 (dd, , J= 7.8, 3.7 Hz, 1H) , 7.10 (dd, J= 8.2, 1.4 Hz, 1H) , 7.01 (d, J= 8.2 Hz, 1H) , 6.95 (d, J= 8.3 Hz, 1H) , 6.82 -6.78 (m, 4H) , 6.77 (d, J = 1.3 Hz, 1H) , 4.07 -4.00 (m, 2H) , 3.88 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 3.81 (d, J =7.0 Hz, 2H) , 3.77 (s, 6H) , 3.11 (t, J = 6.2 Hz, 2H) , 2.97 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 2.78 -2.70 (m, 2H) , 2.25 (s, 3H) , 2.22 -2.15 (m, 2H) , 1.98 (dd, J = 15.2, 7.4 Hz, 2H) , 1.80 -1.70 (m, 2H) . (6) The preparation of compound B6

[0110] The compound 20 (1.1 g, 1.67 mmol, 1.0 eq) and Diisoropyl ammonium tetrazolide (858 mg, 5.01 mmol, 3.0 eq) were dissolved in anhydrous DCM (15 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (Bis (diisopropylamino) phosphino) oxy) propanenitrile (1.51 g, 5.01 mmol, 3.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 6 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B6 (1.15 g, 80%yield) . The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H) , 7.45 -7.39 (m, 2H) , 7.33 -7.28 (m, 4H) , 7.27 (d, J= 8.0 Hz, 2H) , 7.22 -7.17 (m, 1H) , 7.10 (dd, J= 8.2, 1.4 Hz, 1H) , 7.02 (d, J= 8.2 Hz, 1H) , 6.95 (d, J= 8.3 Hz, 1H) , 6.85 -6.78 (m, 4H) , 6.78 (d, J= 1.3 Hz, 1H) , 4.21 -4.11 (m, 2H) , 4.07 -4.00 (m, 2H) , 3.8 1 (d, J= 7.0 Hz, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.57 -3.51 (m, 2H) , 3.11 (t, J= 6.3 Hz, 2H) , 3.03 (t, J= 7.2 Hz, 2H) , 2.79-2.72 (m, 4H) , 2.61 -2.51 (m, 2H) , 2.26 (s, 3H) , 2.22 -2.13 (m, 2H) , 2.02-1.95 (m, 2H) , 1.80-1.69 (m, 2H) , 1.19-1.11 (m, 12H) .Example 6. The preparation of compound B7 of the present disclosure

[0111] Compound B7 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 22

[0112] To a solution of methyl 2- (4-fluoro-3-nitrophenyl) acetate 8 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and K2CO3 (3.56 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) in anhydrous DMF (40 mL) , under nitrogen atmosphere, was added compound 21 (2.65 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at 50 ℃ overnight, then cold water (100 mL) was added. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was washed three times with saturated LiCl solution and one time with brine. Then the organic phase was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure to form compound 22 as yellow oil which was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 296.14; MW Found: 297.77 [M + H] +. (2) The preparation of compound 23

[0113] To a solution of compound 22 (23.4 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 3.55 g, 35.1 mmol, 1.5 eq) in DCM (50 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (8.72 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 3 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 23 was directly used in the next step without further purification. (3) The preparation of compound 24

[0114] To a solution of compound 23 (23.4 mmol, 1.0 eq) in THF / H2O (9: 1, 111 mL) , under ice bath, was added HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) and Zn powder (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) . After stirred for 10 minutes, the reaction mixture was removed from the ice bath and stirred at room temperature overnight. Then the reaction mixture was filtered and concentrated under reduced pressure. After that, water (100 mL) was added into the mixture, then the mixture was extracted three times with ethyl acetate, the organic phase was washed one time with brine. After dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure, the product 24 formed then was directly used in the next step without further purification. The compound 24 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 568.29; MW Found: 267.19 [M-DMT + H] +. (4) The preparation of compound 25

[0115] To a solution of compound 24 (23.4 mmol, 1.0 eq) in EtOH (50 mL) under nitrogen atmosphere, was added Paraformaldehyde (2.1 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) and AcOH (5.4 mL, 93.6 mmol, 4.0 eq) . The reaction mixture was stirred at 80 ℃ for 3 h, and then concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 25 (6.6 g, 49%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 578.28; MW Found: 579.40 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.83 (s, 1H) , 7.69 (s, 1H) , 7.44 -7.37 (m, 2H) , 7.34 -7.24 (m, 7H) , 7.23 -7.17 (m, 2H) , 6.84 -6.77 (m, 4H) , 4.10 (d, J= 7.2 Hz, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.75 (s, 2H) , 3.68 (s, 3H) , 3.04 (t, J= 6.4 Hz, 2H) , 1.88 -1.78 (m, 2H) , 1.69-1.58 (m, 2H) , 1.50-1.36 (m, 2H) . (5) The preparation of compound 26

[0116] To a solution of compound 25 (6.6 g, 9.32 mmol, 1.0 eq) in anhydrous THF (50 mL) under nitrogen atmosphere and ice bath, was added LiAlH4 (531 mg, 14 mmol, 1.5 eq) . After 10 minutes, the mixture was removed from the ice bath, warmed up to room temperature, and stirred for 1 h. Then the reactor was immersed into the ice bath, saturated potassium sodium tartrate solution (20 mL) was added slowly into the mixture. After 30 minutes, the reaction was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 26 (5.72 g, 90%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 550.28; MW Found: 551.46 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H) , 7.65 (d, J= 0.7 Hz, 1H) , 7.40 (dd, J= 8.3, 3.3 Hz, 2H) , 7.30 -7.24 (m, 7H) , 7.22 -7.12 (m, 2H) , 6.84 -6.77 (m, 4H) , 4.12 (t, J= 7.1 Hz, 2H) , 3.90 (t, J = 6.5 Hz, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.02 (dt, J= 16.5, 6.5 Hz, 4H) , 1.84 (dt, J= 15.0, 7.3 Hz, 2H) , 1.63 (dd, J= 14.4, 6.8 Hz, 2H) , 1.49 -1.35 (m, 2H) . (6) The preparation of compound B7

[0117] The compound 26 (2 g, 3.63 mmol, 1.0 eq) and diisoropyl ammonium tetrazolide (1.86 g, 10.89 mmol, 3.0 eq) were dissolved in anhydrous DCM (20 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (Bis (diisopropylamino) phosphino) oxy) propanenitrile (3.28 g, 10.89 mmol, 3.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 6 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B7 (2.48 g, 91%yield) . The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H) , 7.63 (s, 1H) , 7.42 -7.38 (m, 2H) , 7.30 -7.26 (m, 7H) , 7.20 (dd, J = 7.8, 3.7 Hz, 1H) , 7.17 -7.13 (m, 1H) , 6.83 -6.78 (m, 4H) , 4.11 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.60 -3.50 (m, 4H) , 3.04 (t, J = 6.5 Hz, 4H) , 2.75 (td, J= 6.3, 2.0 Hz, 1H) , 2.55 (td, J = 6.6, 3.5 Hz, 2H) , 1.84 (dt, J = 15.0, 7.4 Hz, 3H) , 1.69 -1.58 (m, 2H) , 1.50 -1.37 (m, 2H) , 1.18-1.13 (m, 12H) .Example 7. The preparation of compound B8 of the present disclosure

[0118] Compound B8 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 28

[0119] To a solution of compound 27 (5 g, 25.12 mmol, 1.0 eq) and K2CO3 (3.8 g, 27.6 mmol, 1.1 eq) in anhydrous DMF (40 mL) , under nitrogen atmosphere, was added compound 21 (2.84 g, 27.6 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, then cold water (100 mL) was added. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was washed three times with saturated LiCl solution and one time with brine. Then the organic phase was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure to torm compound 28 as yellow oil which was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 282.12; MW Found: 283.86 [M + H] +. (2) The preparation of compound 29

[0120] To a solution of compound 28 (25.12 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 3.81 g, 37.68 mmol, 1.5 eq) in DCM (50 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (8.51 g, 27.63 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 29 was directly used in the next step without further purification. (3) The preparation of compound 30

[0121] To a solution of compound 29 (25.12 mmol, 1.0 eq) in THF / H2O (9: 1, 111 mL) , under ice bath, was added HCOONH4 (9.51 g, 150.72 mmol, 6.0 eq) and Zn powder (9.86 g, 150.72 mmol, 6.0 eq) . After stirred for 10 minutes, the reaction mixture was removed from the ice bath and stirred at room temperature overnight. Then the reaction mixture was filtered and concentrated under reduced pressure. After that, water (100 mL) was added into the mixture, then the mixture was extracted three times with ethyl acetate, the organic phase was washed one time with brine. After dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure, the product 30 formed then was directly used in the next step without further purification. The compound 30 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 554.28; MW Found: 253.19 [M -DMT + H] +. (4) The preparation of compound 31

[0122] To a solution of compound 30 (25.12 mmol, 1.0 eq) in EtOH (140 mL) under nitrogen atrnosphere, was added 5-Hydroxypentanal 11 (2.57 g, 25.12 mmol, 1.0 eq) and AcOH (5.8 mL, 100.48 mmol, 4.0 eq) . The reaction mixture was stirred at 80 ℃ for 6 h, and then concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three tirnes with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 31 (9.4 g, 60%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 636.32; MW Found: 637.51 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J= 1.2 Hz, 1H) , 7.94 (dd, J= 8.5, 1.5 Hz, 1H) , 7.43 -7.37 (rn, 2H) , 7.30 -7.25 (m, 6H) , 7.24 (d, J= 1.6 Hz, 1H) , 7.22 -7.16 (m, 1H) , 6.83 -6.78 (m, 4H) , 4.08 (dd, J = 10.1, 4.7 Hz, 2H) , 3.92 (s, 3H) , 3.77 (s, 6H) , 3.67 (t, J = 6.1 Hz, 2H) , 3.04 (t, J = 6.3 Hz, 2H) , 2.88 (t, J= 7.2 Hz, 2H) , 1.78 -1.70 (m, 4H) , 1.66-1.61 (m, 2H) , 1.53 -1.41 (m, 2H) , 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 2H) . (5) The preparation of compound B8

[0123] To a solution of the compound 31 (2 g, 3.14 mmol, 1.0 eq) and diisoropyl ammonium tetrazolide (1.61 g, 9.43 mmol, 3.0 eq) dissolved in anhydrous DCM (20 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphino) oxy) propanenitrile (2.85 g, 9.43 mmol, 3.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 6 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B8 (2.4 g, 93%yield) . The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J= 1.2 Hz, 1H) , 7.94 (dd, J= 8.5, 1.5 Hz, 1H) , 7.42 -7.37 (m, 2H) , 7.30 -7.26 (m, 7H) , 7.23 -7.16 (m, 1H) , 6.83 -6.78 (m, 4H) , 4.10 (t, J = 7.4 Hz, 2H) , 3.93 (s, 3H) , 3.78 (s, 6H) , 3.64 -3.49 (m, 5H) , 3.04 (t, J = 6.3 Hz, 2H) , 2.91 -2.85 (m, 2H) , 2.65 -2.55 (m, 3H) , 2.00 (dt, J = 15.3, 7.6 Hz, 2H) , 1.82 -1.76 (m, 4H) , 1.64 (dd, J =14.2, 6.7 Hz, 2H) , 1.51 -1.44 (m, 2H) , 1.17-1.13 (m, 12H) .Example 8. The preparation of compound B9 of the present disclosure

[0124] Compound B9 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 33.

[0125] To a solution of 2, 2′-oxybis (ethan-l-ol) 32 (5 g, 47.12 mmol, 1.0 eq) in anhydrous pyridine (100 mL) under nitrogen atmosphere was added DMTrCl (15.96 g, 47.12 mmol, 1.0 eq) slowly. The reaction mixture was stirred at room temperature for 6 h then concentrated under reduced pressure, the resultant residue was purified by flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-50%of EtOAc / Hexane) to provide compound 33 (9.25 g, 48%yield) as yellow oil. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 (d, J = 7.6 Hz, 2H) , 7.34 (d, J = 8.8 Hz, 4H) , 7.29 -7.25 (m, 2H) , 7.20 (t, J = 7.4 Hz, 1H) , 6.85 -6.80 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.75 -3.72 (m, 2H) , 3.69 -3.66 (m, 2H) , 3.63 -3.60 (m, 2H) , 3.27 -3.23 (m, 2H) . (2) The preparation of compound B9

[0126] To a solution of compound 34 (1.0 g, 2.45 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (839 mg, 4.9 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.48 g, 4.9 mmol, 2.0 eq. ) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B9 (1.27 g, 85%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 608.30; MW Found: 609.2 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.36 -7.32 (m, 4H) , 7.29 -7.24 (m, 2H) , 7.20 -7.16 (m, 1H) , 6.82 -6.75 (m, 4H) , 3.87 -3.81 (m, 2H) , 3.80 -3.79 (m, 2H) , 3.78 (s, 3H) , 3.75 (s, 3H) , 3.72 -3.66 (m, 4H) , 3.64 -3.55 (m, 2H) , 3.25 -3.21 (m, 2H) , 2.69 -2.48 (m, 2H) , 1.2 1 -1.15 (m, 12H) .Example 9. The preparation of compound B10 of the present disclosure

[0127] Compound B10 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 36

[0128] To a solution ofbutane-l, 4-diol 35 (3.0 g, 33.29 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 5.05 g, 49.94 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (9 g, 26.63 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 36 (5.25 g, 40%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 -7.40 (m, 2H) , 7.36 -7.30 (m, 4H) , 7.29 -7.25 (m, 2H) , 7.23 -7.15 (m, 1H) , 6.86 -6.77 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.62 (t, J =6.5 Hz, 2H) , 3.11 (t, J= 5.8 Hz, 2H) , 1.72-1.63 (m, 4H) . (2) The preparation of compound B10

[0129] To a solution of compound 36 (1.0 g, 2.54 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (872 mg, 5.09 mmol, 2.0 eq) in anhydrous Dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.62 mL, 5.09 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B10 (1.30 g, 86%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.28 -7.24 (m, 2H) , 7.22 -7.17 (m, 1H) , 6.84 -6.79 (m, 4H) , 3.86 -3.81 (m, 1H) , 3.79 (s, 6H) , 3.68 -3.48 (m, 5H) , 3.07 (t, J= 5.9 Hz, 2H) , 2.61 (t, J= 6.5 Hz, 2H) , 1.75-1.64 (m, 4H) , 1.18 (d, 12H) .Example 10. The preparation of compound B11 of the present disclosure

[0130] Compound B11 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 38.

[0131] To a solution of compound 8 (10.69 g, 50.2 mmol, 1.0 eq) and K2CO3 (10.4 g, 75.3 mmol, 1.5 eq) in anhydrous DMF (150 mL) , under nitrogen atmosphere, was added cornpound 37 (4.15 g, 55.22 mmol, 1.1 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, then cold water (100 mL) was added. The mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was washed three times with saturated LiCl solution and one time with brine. Then the organic phase was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure to form compound 38 as yellow oil which was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 268.11; MW Found: 269.30 [M + H] +. (2) The preparation of compound 39.

[0132] To a solution of compound 38 (50.2 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 7.62 g, 75.3 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (17 g, 50.2 mmol, 1.0 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 39 was directly used in the next step without further purification. (3) The preparation of compound 40.

[0133] To a solution of compound 39 (50.2 mmol, 1.0 eq) in anhydrous THF (200 mL) under nitrogen atmosphere and ice bath, was added LiAlH4 (1.9 g, 50.2 mmol, 1.0 eq) . After 10 minutes, the mixture was removed from the ice bath, warmed up to room temperature and stirred for 1 h. Then the reactor was immersed into the ice bath, saturated potassium sodiurn tartrate solution (50 mL) was added slowly into the mixture. After 30 minutes, the reaction was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was dissolved in anhydrous DMF (120 mL) , then imidazole (5.13 g, 75.3 mmol, 1.5 eq) and TBSCl (9.08 g, 60.24 mmol, 1.2 eq) were added. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2h, then H2O (60 mL) was added. The mixture was extracted three times by ethyl acetate, then the organic phase was washed three times by saturated LiCl solution and one time by brine. Then dried by anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure. The resultant residue 40 was directly used in next step without further purification. The resultant residue was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 656.33; MW Found: 355.3 [M -DMT + H] +. (4) The preparation of compound 41.

[0134] To a solution of compound 40 (50 mmol, 1.0 eq) in THF / H2O (9: 1, 222 mL) , under ice bath, was added HCOONH4 (1 8.9 g, 300 mmol, 6.0 eq) and Zn powder (19.6 g, 300 mmol, 6.0 eq) . After stirred for 10 minutes, the reaction mixture was removed from the ice bath and stirred at room temperature overnight. Then the reaction mixture was filtered and concentrated under reduced pressure. After that, water (100 mL) was added into the mixture, then the mixture was extracted three times with ethyl acetate, the organic phase was washed one time with brine. After dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure, product 41 formed then was directly used in the next step without further purification. The compound 41 was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 626.35; MW Found: 649.4 [M + Na] +. (5) The preparation of compound 43.

[0135] To a solution of compound 42 (2 g, 11.76 mmol, 1.0 eq) in DMF (40 mL) , under nitrogen atmosphere, was added HBTU (8.9 g, 23.52 mmol, 2.0 eq) and DIPEA (6.6 mL, 40 mmol, 3.4 eq) . After stirred for 5 minutes, compound 41 (7.36 g, 11.76 mmol, 1.0 eq) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight. After that, a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with DCM, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 43 (6.37 g, 69%yield) as yellow solid. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 778.38; MW Found: 475.5 [M -DMT] -. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.31 -7.25 (m, 6H) , 7.22 -7.12 (m, 3H) , 7.01 -6.93 (m, 1H) , 6.80 (d, J= 8.7 Hz, 4H) , 6.68 (d, J= 8.3 Hz, 1H) , 5.66 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 3.77 (s, 6H) , 3.24 -3.16 (m, 3H) , 3.03 (q, J = 7.3 Hz, 5H) , 2.68 (t, J= 7.1 Hz, 2H) , 2.01 -1.73 (m, 2H) , 0.87 (s, 9H) , 0.03 (s, 6H) . (6) The preparation of compound 44.

[0136] To a solution of compound 43 (1.45 g, 1.86 mmol, 1.0 eq) in EtOH (10 mL) under nitrogen atmosphere, was added AcOH (429 μL, 7.44 mmol, 4.0 eq) . The reaction mixture was stirred at 80 ℃ for 2 h, and then concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (20 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resulting residue was dissolved in 8 mL THF, then 1 M TBAF THF solution (2.79 mL, 2.79 mmol, 1.5 eq) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for about 4 h, and then concentrated under reduced pressure. Then water (20 mL) was added, the mixture was extracted 3 times by DCM, then the organic phase was combined and washed by brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM) to provide compound 44 (294 mg, 24%yield) . The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 646.28; MW Found: 647.33 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H) , 7.57 (s, 1H) , 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.42 -7.38 (m, 2H) , 7.30 (dd, J = 7.9, 2.0 Hz, 4H) , 7.28 -7.25 (m, 4H) , 7.23 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.13 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H) , 6.84 -6.79 (m, 4H) , 5.69 (dd, J = 8.0, 2.1 Hz, 1H) , 4.99 (s, 2H) , 4.46 (t, J= 6.9 Hz, 2H) , 3.91 -3.85 (m, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.14 (t, J= 5.5 Hz, 2H) , 2.97 (t, J= 6.5 Hz, 2H) , 2.09 -1.98 (m, 2H) . (7) The preparation of compound B11.

[0137] To a solution of compound 44 (158 mg, 0.244 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (84 mg, 0.488 mmol, 2.0 eq) in anhydrous DCM (12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (147 mg, 0.488 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-5%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B11 (165 mg, 80%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J= 8.0 Hz, 1H) , 7.40 (d, J= 7.4 Hz, 2H) , 7.32 -7.25 (m, 8H) , 7.22 (t, J= 7.2 Hz, 1H) , 7.18 -7.11 (m, 1H) , 6.82 (d, J= 8.9 Hz, 4H) , 5.70 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 4.99 (s, 2H) , 4.45 (t, J = 6.9 Hz, 2H) , 4.23 -4.10 (m, 2H) , 3.79 (s, 6H) , 3.61 -3.48 (m, 4H) , 3.14 (t, J= 5.5 Hz, 2H) , 3.03 (t, J= 7.2 Hz, 2H) , 2.54 (td, J= 6.6, 2.8 Hz, 2H) , 2.07-1.99 (m, 2H) , 1.17-1.12 (m, 12H) .Example 11. The preparation of compound B12 of the present disclosure

[0138] Compound B12 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 46.

[0139] To a solution of compound 45 (226 mg, 2.15 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 261 mg, 2.58 mmol, 1.5 eq) in DCM (10 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (582 mg, 1.72 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (20 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resulting residue was dissolved in 15 mL DMF, then imidazole (219 mg, 3.22 mmol, 1.5 eq) and TBSCl (389 mg, 2.58 mmol, 1.2 eq) were added. The reaction mixture was stirred at room temperature for about 4 h, and then water (20 mL) was added, the mixture was extracted 3 times by EtOAc, then the organic phase was combined and washed by brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 46 was directly used in the next step without further purification. (2) The preparation of compound 48.

[0140] To a solution of compound 47 (262 mg, 0.94 mmol, 1.0 eq) in DCM (6 mL) , under nitrogen atmosphere, was added HBTU (713 mg, 1.88 mmol, 2.0 eq) and DIPEA (530 μL, 3.2 mmol, 3.4 eq) . After stirred for 5 minutes, compound 46 (589 mg, 1.13 mmol, 1.2 eq) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight. After that, a saturated NaHCO3 solution (10 mL) was added, the mixture was extracted three times with DCM, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-8%of MeOH / DCM) to provide compound 49 (611 mg, 83%yield) as yellow solid. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 782.38; MW Found: 783.3 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57 (s, 1H) , 7.45 (dd, J = 8.1, 1.4 Hz, 2H) , 7.36 -7.32 (m, 4H) , 7.31 -7.29 (m, 2H) , 7.21 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 6.80 (d, J = 8.5 Hz, 4H) , 5.23 (s, 2H) , 3.82 -3.80 (m, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.67 (dd, J= 11.5, 5.2 Hz, 2H) , 3.38 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.33 (t, J = 4.5 Hz, 2H) , 1.93 -1.89 (m, 1H) , 1.25 (d, J = 6.9 Hz, 6H) , 0.84 (s, 9H) , 0.03 (s, 6H) . (3) The preparation of compound 49.

[0141] To a solution of compound 48 (610 mg, 0.78 mmol, 1.0 eq) in THF (8 mL) under nitrogen atmosphere, was added 1 M TBAF THF solution (1.17 mL, 1.17 mmol, 1.5 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for about 4 h, and then concentrated under reduced pressure. Then water (10 mL) was added, the mixture was extracted 3 times by DCM, then the organic phase was combined and washed by brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue 48 was directly used in the next step without further purification. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 668.30; MW Found: 669.2 [M + H] +. (4) The preparation of compound B12.

[0142] To a solution of compound 49 (372 mg, 0.56 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (192 mg, 1.12 mmol, 2.0 eq) in anhydrous DCM (6 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (337 mg, 1.12 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 6 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-8%of MeOH / DCM, 1%Et3N) to provide compound B12 (413 mg, 85%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 668.30; MW Found: 669.2 [M + H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.55 (s, 1H) , 7.45 -7.42 (m, 2H) , 7.34 -7.30 (m, 4H) , 7.24 -7.21 (m, 2H) , 7.18 -7.16 (m, 1H) , 6.81 (d, J= 8.4 Hz, 4H) , 5.21 (s, 2H) , 3.89 -3.83 (m, 2H) , 3.77 (s, 6H) , 3.74 -3.70 (m, 2H) , 3.46 (d, J= 6.8 Hz, 2H) , 3.33 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.25 (t, J = 5.0 Hz, 2H) , 2.65 (d, J = 5.9 Hz, 2H) , 2.59 (dd, J = 6.2, 2.9 Hz, 2H) , 2.04 -2.00 (m, 1H) , 1.18 (s, 6H) , 1.13 -1.10 (m, 12H) .Example 12. The preparation of compound B13 of thc present disclosure

[0143] Compound B13 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 62.

[0144] To a solution of 2-methylpropane-1, 3-diol 61 (5.0 g, 55.50 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 6.74 g, 66.60 mmol, 1.2 eq) in DCM (277 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (15.04 g, 44.40 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 62 (4.90 g, 45%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.26 (m, 6H) , 7.24 -7.19 (m, 1H) , 6.86 -6.81 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.63 -3.55 (m, 2H) , 3.22 (dd, 1H) , 3.02 (dd, 1H) , 2.04 -1.98 (m, 1H) , 0.85 (d, J= 6.9 Hz, 3H) . (2) The preparation of compound B13

[0145] To a solution of compound 62 (1.0 g, 2.54 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (872 mg, 5.09 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.62 mL, 5.09 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B13 (1.20 g, 80%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.28 -7.24 (m, 2H) , 7.22 -7.17 (m, 1H) , 6.84 -6.78 (m, 4H) , 3.82 -3.77 (m, 6H) , 3.76 -3.68 (m, 2H) , 3.64 -3.56 (m, 2H) , 3.56 -3.43 (m, 2H) , 3.07 -2.95 (m, 2H) , 2.58 -2.51 (m, 2H) , 2.12 -2.05 (m, 1H) , 1.17 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 1.12 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 0.97 (t, J= 7.1 Hz, 3H) .Example 13. The preparation of compound B14 of the present disclosure

[0146] Compound B14 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 64

[0147] To a solution of 2, 2-dimethylpropane-1, 3-diol 63 (3.0 g, 28.80 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 3.50 g, 34.60 mmol, 1.2 eq) in DCM (144 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (7.81 g, 23.00 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 64 (4.80 g, 50%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.33 -7.28 (m, 6H) , 7.19 -7.15 (m, 1H) , 6.84 -6.82 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.51 (s, 1H) , 3.41 (s, 1H) , 2.96 (s, 2H) , 0.93 (s, 6H) . (2) The preparation of compound B14.

[0148] To a solution of compound 64 (1.0 g, 2.46 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (841 mg, 4.91 mmol, 2.0 eq) in anhydrous Dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.56 mL, 4.91 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B14 (1.14 g, 77%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (s, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.27 -7.24 (m, 2H) , 7.22 -7.18 (m, 1H) , 6.84 -6.79 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.70 (q, 2H) , 3.59 -3.50 (m, 3H) , 3.37 (dd, J = 9.6, 5.6 Hz, 1H) , 2.92 -2.83 (m, 2H) , 2.52 (t, J = 6.5 Hz, 2H) , 1.16 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 1.12 (d, J=6.8 Hz, 6H) , 0.93 (s, 6H) .Example 14. The preparation of compound B15 of the present disclosure

[0149] Compound B15 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 66.

[0150] To a solution of cyclopropane-1, l-diyldimethanol 65 (5.0 g, 48.96 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 5.94 g, 58.75 mmol, 1.2 eq) in DCM (245 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (13.30 g, 39.17 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 66 (9.70 g, 51%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 -7.41 (m, 2H) , 7.36 -7.25 (m, 6H) , 7.23 -7.18 (m, 1H) , 6.85 -6.81 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.54 (d, J = 5.5 Hz, 2H) , 3.09 (s, 2H) , 0.51 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 0.40 (t, 2H) . (2) The preparation of compound B15.

[0151] To a solution of compound 66 (1.0 g, 2.47 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (842 mg, 4.94 mmol, 2.0 eq) in anhydrous Dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.60 mL, 4.94 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B15 (1.25 g, 84%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 -7.42 (m, 2H) , 7.34 -7.24 (m, 6H) , 7.22 -7.17 (m, 1H) , 6.83 -6.79 (m, 4H) , 3.82 (dd, 1H) , 3.78 (q, 6H) , 3.72 -3.64 (m, 2H) , 3.56 (dd, 2H) , 3.51 -3.45 (m, 1H) , 3.10 (d, J = 9.1 Hz, 1H) , 2.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H) , 2.51 (td, 2H) , 1.16 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 1.11 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 0.53 -0.46 (m, 2H) , 0.46 -0.38 (m, 2H) .Example 15. The preparation of compound B16 of the present disclosure

[0152] Compound B16 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 68.

[0153] To a solution of cyclobutane-1, 1-diyldimcthanol 67 (3.0 g, 25.83 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 3.10 g, 31.00 mmol, 1.2 eq) in DCM (129 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (7.00 g, 20.66 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 68 (4.80 g, 44%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.35 -7.25 (m, 6H) , 7.24 -7.19 (m, 1H) , 6.87 -6.81 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.67 (d, J = 5.9 Hz, 2H) , 3.21 (s, 2H) , 1.94 -1.79 (m, 4H) , 1.79 -1.71 (m, 2H) . (2) The preparation of compound B16.

[0154] To a solution of compound 68 (1.0 g, 2.39 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (817 mg, 4.77 mmol, 2.0 eq) in anhydrous Dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.51 mL, 4.77 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B16 (1.30 g, 87%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 -7.42 (m, 2H) , 7.35 -7.26 (m, 6H) , 7.22 -7.17 (m, 1H) , 6.85 -6.79 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.75 (dd, 1H) , 3.73 -3.67 (m, 2H) , 3.64 (dd, J = 5.7 Hz, 1H) , 3.60 -3.51 (m, 2H) , 3.09 (s, 2H) , 2.52 (td, J = 5.7 Hz, 2H) , 1.89-1.74 (m, 6H) , 1.17 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 1.13 (d, J= 6.8 Hz, 6H) .Example 16. The preparation of compound B17 of the present disclosure

[0155] Compound B17 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 70.

[0156] To a solution of (S) -butane-1, 3-diol 69 (2.0 g, 22.20 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 2.70 g, 26.64 mmol, 1.2 eq) in DCM (111 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (6.90 g, 17.75 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (50 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 70 (7.70 g, 88%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 -7.39 (m, 2H) , 7.34 -7.25 (m, 6H) , 7.23 -7.18 (m, 1H) , 6.86 -6.80 (m, 4H) , 4.04 -3.91 (m, 1H) , 3.79 (s, 6H) , 3.40 -3.31 (m, 1H) , 3.26-3.17 (m, 1H) , 1.83-1.73 (m, 1H) , 1.72-1.64 (m, 1H) , 1.16 (d, J= 6.2 Hz, 3H) . (2) The preparation of compound B17.

[0157] To a solution of compound 70 (2.0 g, 5.09 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (1.74 g, 10.18 mmol, 2.0 eq) in anhydrous Dichloromethane (DCM, 25 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (3.20 mL, 10.18 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B17 (3.01 g, 91%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.39 (m, 2H) , 7.34 -7.24 (m, 6H) , 7.23 -7.15 (m, 1H) , 6.84 -6.78 (m, 4H) , 4.18 -4.04 (m, 1H) , 3.78 (s, 6H) , 3.77 -3.65 (m, 1H) , 3.62 -3.47 (m, 3H) , 3.19 -3.12 (m, 2H) , 2.60 (t, J= 6.5 Hz, 1H) , 2.44 (td, 1H) , 2.00-1.90 (m, 1H) , 1.83-1.68 (m, 1H) , 1.21-1.11 (m, 12H) , 1.07 (d, J= 6.8 Hz, 3H) .Example 17. The preparation of compound B18 of the present disclosure

[0158] Compound B18 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 72.

[0159] To a solution of 2- ( (benzyloxy) methyl) propane-1, 3-diol 71 (2.0 g, 10.2 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 1.24 g, 12.20 mmol, 1.2 eq) in DCM (277 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (3.17 g, 8.16 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (25 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane) to provide compound 72 (4.00 g, 79%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 -7.38 (m, 2H) , 7.35-7.25 (m, 11H) , 7.23 -7.18 (m, 1H) , 6.84-6.78 (m, 4H) , 4.51 -4.48 (m, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.77 -3.73 (m, 2H) , 3.70 -3.59 (m, 2H) , 3.23 (d, J = 5.8 Hz, 2H) , 2.21 -2.12 (m, 1H) . (2) The preparation of compound B18.

[0160] To a solution of compound 72 (1.0 g, 2.00 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (685 mg, 4.00 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.30 mL, 4.00 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B18 (1.20 g, 86%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 -7.38 (m, 2H) , 7.34 -7.23 (m, 1 1H) , 7.21 -7.15 (m, 1H) , 6.83 -6.75 (m, 4H) , 4.49 -4.45 (m, 2H) , 3.83 -3.78 (m, 1H) , 3.77 (s, 6H) , 3.72 -3.65 (m, 3H) , 3.64 -3.57 (m, 2H) , 3.56 -3.47 (m, 2H) , 3.24 -3.14 (m, 2H) , 2.52 -2.46 (m, 2H) , 2.32 -2.21 (m, 1H) , 1.15 (d, J= 6.8 Hz, 6H) , 1.10 (d, J= 6.7 Hz, 6H) .Example 18. The preparation of compound B19 of the present disclosure

[0161] Compound B19 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 74.

[0162] To a solution of (E) -but-2-ene-1, 4-diol 73 (3.0 g, 34.05 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 5.17 g, 51.07 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (9.2 g, 27.24 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 74 (5.16 g, 39%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 -7.40 (m, 2H) , 7.38 -7.31 (m, 4H) , 7.29 -7.26 (m, 2H) , 7.22 -7.18 (m, 1H) , 6.93 -6.76 (m, 4H) , 6.07 -5.93 (m, 1H) , 5.80 (dt, J = 15.5, 4.9 Hz, 1H) , 4.19 -4.16 (m, 2H) , 3.78 (s, 6H) , 3.66 -3.60 (m, 2H) . (2) The preparation of compound B19.

[0163] To a solution of compound 74 (1.0 g, 2.56 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (877 mg, 5.12 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 12 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyi) oxy) propanenitrile (1.62 mL, 5.12 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B19 (1.20 g, 80%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 -7.42 (m, 2H) , 7.36 -7.30 (m, 4H) , 7.28 -7.25 (m, 2H) , 7.23 -7.18 (m, 1H) , 6.84 -6.79 (m, 4H) , 5.95 (td, 1H) , 5.82 (td, 1H) , 4.29 -4.08 (m, 2H) , 3.92 -3.80 (m, 2H) , 3.79 (s, 6H) , 3.68 -3.58 (m, 4H) , 2.64 (t, J= 6.5 Hz, 2H) , 1.20 (d, J= 8.4 Hz, 12H) .Example 19. The preparation of compound B20 of the present disclosure

[0164] Compound B20 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 76.

[0165] To a solution of 1, 2-phenylenedimethanol 75 (3.0 g, 21.7 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 3.29 g, 32.55 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (5.88 g, 17.36 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 76 (2.38 g, 25%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (d, J = 7.4 Hz, 2H) , 7.39 (t, J = 6.1 Hz, 5H) , 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.21 (s, 1H) , 6.87 -6.83 (m, 4H) , 6.71 (d, J= 8.8 Hz, 3H) , 5.28 (s, 1H) , 4.42 (d, J= 6.4 Hz, 2H) , 4.18 (s, 2H) , 3.78 (s, 6H) . (2) The preparation of compound B20.

[0166] To a solution of compound 76 (1.0 g, 2.27 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (777 mg, 4.54 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 11 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.44 mL, 4.54 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B20 (1.20 g, 83%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51 -7.47 (m, 2H) , 7.43 -7.33 (m, 6H) , 7.32 -7.26 (m, 4H) , 7.24 -7.20 (m, 1H) , 6.86 -6.81 (m, 4H) , 4.60 (dd, 1H) , 4.49 (dd, 1H) , 4.18 (s, 2H) , 3.80 -3.78 (m, 6H) , 3.76 (t, 2H) , 3.67 (q, 2H) , 2.60 (t, 2H) , 1.17 (d, 12H) .Example 20. The preparation of compound B21 of the present disclosure

[0167] Compound B21 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 78.

[0168] To a solution of ( (1R, 2S) -cyclohexane-1, 2-diyl) dimethanol 77 (2.0 g, 13.87 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 2.1 g, 20.81 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (3.76 g, 11.10 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 78 (2.88 g, 47%yield) as green oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 -7.40 (m, 2H) , 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 4H) , 7.29 -7.24 (m, 2H) , 7.20 (dd, J = 8.3, 6.3 Hz, 1H) , 6.85 -6.80 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.48 -3.42 (m, 2H) , 3.17 -3.09 (m, 2H) , 2.17 -2.08 (m, 1H) , 1.95-1.85 (m, 1H) , 1.43 (dd, J= 13.0, 4.4 Hz, 2H) , 1.37-1.14 (m, 6H) . (2) The preparation of compound B21.

[0169] To a solution of compound 78 (880 mg, 1.97 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (675 mg, 3.94 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.19 g, 3.94 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B21 (1.02 g, 80%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45- 7.40 (m, 2H) , 7.31 (d, J= 7.3 Hz, 4H) , 7.28 -7.24 (m, 2H) , 7.19 (dd, J= 8.1, 6.3 Hz, 1H) , 6.81 (dd, J= 8.7, 1.8 Hz, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.76 (d, J = 7.1 Hz, 2H) , 3.48 -3.43 (m, 1H) , 3.42 -3.33 (m, 1H) , 3.08 -2.93 (m, 2H) , 2.61 (t, J = 6.4 Hz, 2H) , 2.58 -2.50 (m, 2H) , 2.08 -1.94 (m, 2H) , 1.53 -1.46 (m, 2H) , 1.45-1.30 (m, 6H) , 1.17-1.14 (s, 12H) .Example 21. The preparation of compound B22 of the present disclosure

[0170] Compound B22 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 80.

[0171] To a solution of ( (1R, 2R) -cyclohexane-1, 2-diyl) dimethanol 79 (2.0 g, 13.87 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 2.1 g, 20.81 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (3.76 g, 11.10 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 80 (3.13 g, 50%yield) as green oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 -7.39 (m, 2H) , 7.32 (dd, J = 7.9, 5.0 Hz, 4H) , 7.29 -7.24 (m, 2H) , 7.23 -7.17 (m, 1H) , 6.83 (dd, J= 8.9, 1.8 Hz, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.54 -3.40 (m, 2H) , 3.12 (dd, J= 9.6, 3.5 Hz, 1H) , 3.00 (dd, J=9.5, 6.5 Hz, 1H) , 1.75-1.70 (m, 2H) , 1.68-1.61 (m, 2H) , 1.31 -1.02 (m, 6H) . (2) The preparation of compound B22.

[0172] To a solution of compound 80 (1.09 g, 2.44 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (836 mg, 4.88 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.47 g, 4.88 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B22 (1.34 g, 85%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 2H) , 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 4H) , 7.27 -7.24 (m, 2H) , 7.19 (t, J= 7.2 Hz, 1H) , 6.81 (d, J= 8.8 Hz, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.78 -3.72 (m, 2H) , 3.56 -3.48 (m, 4H) , 3.15 -3.10 (m, 1H) , 2.94 (dd, J= 9.0, 5.3 Hz, 1H) , 2.58-2.48 (m, 2H) , 1.93-1.67 (m, 4H) , 1.53-1.23 (m, 6H) , 1.15-1.11 (m, 12H) .Example 22. The preparation of compound B23 of the present disclosure

[0173] Compound B23 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 82.

[0174] To a solution ofpentane-1, 5-diol 81 (4.0 g, 38.4 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 5.83 g, 57.6 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (10.4 g, 30.72 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 82 (4.77 g, 31%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 -7.41 (m, 2H) , 7.35 -7.30 (m, 4H) , 7.26 (d, J= 7.2 Hz, 2H) , 7.22 -7.16 (m, 1H) , 6.86 -6.75 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.61 (d, J= 7.2 Hz, 2H) , 3.06 (t, J= 6.5 Hz, 2H) , 1.65 (dd, J= 14.3, 7.1 Hz, 2H) , 1.53 (dd, J= 13.7, 6.8 Hz, 2H) , 1.47 -1.41 (m, 2H) . (2) The preparation of compound B23.

[0175] To a solution of compound 82 (1.0 g, 2.46 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (842 mg, 4.92 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.48 g, 4.92 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B23 (1.34 g, 90%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J = 7.4 Hz, 2H) , 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 4H) , 7.28 -7.24 (m, 2H) , 7.19 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 4H) , 3.85 -3.80 (m, 1H) , 3.79 (s, 6H) , 3.67 -3.49 (m, 5H) , 3.04 (t, J = 6.5 Hz, 2H) , 2.63 -2.58 (m, 2H) , 1.71 -1.58 (m, 4H) , 1.50-1.40 (m, 2H) , 1.19-1.15 (m, 12H) .Example 23. The preparation of compound B24 of the present disclosure

[0176] Compound B24 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 84.

[0177] To a solution of heptanc-1, 7-diol 83 (4.0 g, 30.26 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 4.59 g, 45.39 mmol, 1.5 eq) in DCM (100 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (8.2 g, 24.21 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 84 (4.7 g, 36%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 -7.41 (m, 2H) , 7.35 -7.29 (m, 4H) , 7.29 -7.24 (m, 2H) , 7.19 (dd, J= 8.3, 6.2 Hz, 1H) , 6.86 -6.79 (m, 4H) , 3.78 (s, 6H) , 3.62 (t, J = 5.6 Hz, 2H) , 3.04 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 1.61 (d, J = 4.3 Hz, 2H) , 1.53 (dd, J = 14.2, 6.8 Hz, 2H) , 1.37 -1.26 (m, 6H) . (2) The preparation of compound B24.

[0178] To a solution of compound 84 (1.0 g, 2.3 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (788 mg, 4.6 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.39 g, 4.6 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B24 (1.24 g, 85%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J = 7.4 Hz, 2H) , 7.32 (d, J = 8.9 Hz, 4H) , 7.28 -7.25 (m, 2H) , 7.19 (t, J = 7.3 Hz, 1H) , 6.82 (d, J= 8.9 Hz, 4H) , 3.89 -3.81 (m, 2H) , 3.79 (s, 6H) , 3.68 -3.54 (m, 4H) , 3.03 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 2.62 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 1.63-1.56 (m, 4H) , 1.38-1.26 (m, 6H) , 1.20-1.15 (m, 12H) .Example 24. The preparation of compound B26 of the present disclosure

[0179] Compound B26 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 86.

[0180] To a solution of 3, 3′-oxybis (propan-1-ol) 85 (2.0 g, 14.9 mmol, 1.0 eq) and triethylamine (TEA, 2.26 g, 22.35 mmol, 1.5 eq) in DCM (70 mL) under nitrogen atmosphere, was added DMTrCl (4.04 g, 11.92 mmol, 0.8 eq) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 h, after which it was concentrated under reduced pressure. Then a saturated NaHCO3 solution (100 mL) was added, the mixture was extracted three times with ethyl acetate, then the organic phase was combined and washed with brine, dried over Na2SO4, and concentrated. The resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane) to provide compound 86 (3.7 g, 57%yield) as yellow oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.33 -7.29 (m, 4H) , 7.27 (d, J= 8.3 Hz, 2H) , 7.20 (dd, J = 8.3, 6.2 Hz, 1H) , 6.86 -6.77 (m, 4H) , 3.79 (s, 6H) , 3.71 (dd, J= 11.1, 5.5 Hz, 2H) , 3.62 -3.54 (m, 4H) , 3.14 (t, J= 6.2 Hz, 2H) , 1.86 (dd, J= 12.7, 6.3 Hz, 2H) , 1.78 (dd, J= 11.4, 5.7 Hz, 2H) . (2) The preparation of compound B26.

[0181] To a solution of compound 86 (1.0 g, 2.29 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (784 mg, 4.58 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.38 g, 4.58 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-20%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B26 (1.17 g, 80%yield) as colorless oil. The product was characterized with 1H NMR. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 -7.40 (m, 2H) , 7.34 -7.29 (m, 4H) , 7.28 -7.23 (m, 2H) , 7.19 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 6.86 -6.77 (m, 4H) , 3.87 -3.81 (m, 1H) , 3.78 (s, 6H) , 3.76 -3.71 (m, 1H) , 3.68 -3.53 (m, 6H) , 3.49 (t, J= 6.3 Hz, 2H) , 3.13 (t, J = 6.2 Hz, 2H) , 2.60 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 1.85 (pd, J = 6.3, 2.9 Hz, 4H) , 1.17 (s, 12H) .Example 25. The preparation of compound B1 of the present disclosure

[0182] Compound B1 was prepared in this Example by using the following procedures. (1) The preparation of compound 88.

[0183] To a solution of 2, 2′-oxybis (ethan-l-ol) 87 (3.6 g, 30.12 mmol, 1.0 eq) in anhydrous pyridine (100 mL) under nitrogen atmosphere was added DMTrCl (10.2 g, 30.12 mmol, 1.0 eq) slowly. The reaction mixture was stirred at room temperature for 6 h then concentrated under reduced pressure, the resultant residue was purified by flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-50%of EtOAc / Hexane) to provide compound 88 (6.33 g, 50%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry and 1H NMR. MW calc.: 420.23; MW Found: 421.35 [M + H] +. (2) The preparation of compound B1

[0184] To a solution of compound 88 (1.3 g, 3.2 mmol, 1.0 eq) and diisopropylammonium tetrazolide (1.1 g, 6.4 mmol, 2.0 eq) in anhydrous dichloromethane (DCM, 10 mL) under nitrogen atmosphere was added 3- ( (bis (diisopropylamino) phosphaneyl) oxy) propanenitrile (1.93 g, 6.4 mmol, 2.0 eq) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 h. The mixture was extracted two times with DCM, then washed with brine and dried with anhydrous Na2SO4. The organic layer was concentrated under reduced pressure and the resultant residue was purified with flash chromatography (silica gel, gradient eluent: 1-30%of EtOAc / Hexane, 1%Et3N) to provide compound B1 (1.4 g, 70%yield) as yellow oil. The product was characterized with mass spectrometry. MW calc.: 620.34; MW Found: 621.41 [M + H] +.Example 26. Design and synthesis of oligonucleotides

[0185] Oligonucleotide sequences used for the tests in the following examples are listed in Table1. Example 27. In vitro test of chemical modification to siRNAs (CM-siRNAs) for  modulating target and non-target specificity.

[0186] To test in vitro modulation of both target and non-target specificity by CM-siRNAs, two plasmids were constructed: pmirGLO-Ttr target specificity plasmid which contained a target sequence with perfect complaritarity to the entire guide strand of the siRNA and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid which contained 4 copies of the partial target sequence with perfect complaritarity to the seed region only of the guide strand of the siRNA (see Materials and Methods) . The target sequences were inserted into the 3'UTR of the firefly luciferase reporter genes in both plasmids. These plasmids were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17122, RD-17127, RD-17128 and RD-17130) were transfected into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as a siRNA control. RD-17118 was a GNA-siRNA and transfected the same as CM-siRNA. FIG. 1A shows the Ttr expression in target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. FIG. 1B shows the Ttr expression in non-target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. FIG. 2A and FIG. 2B further show the comparation on Ttr expression in target and non-target specificity of CM-siRNA and GNA-siRNA. Table 2 summarized the IC50 values of target and non-target specificity and the ratio (IC50 non-target / IC50 target) following CM-siRNA treatments. Table 2. IC50 values of target and non-target specificity and the ratio (IC50 non-target / IC50 target)  following CM-siRNA treatments.

[0187] The chemical modification of the siRNA has resulted in a reduction of non-target knockdown effects while preserving the target specificity compared to the original siRNA, suggesting that these modifications can effectively diminish non-target effects without compromising the specificity for the intended targets.Example 28. In vitro test of CM-siRNAs for modulating target and non-target specificity.

[0188] To test the in vitro modulation of both target and non-target specificity of CM-siRNA, the pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17127, RD-17128, RD-17541, RD-17542, RD-17543, RD-17544, RD-17545, RD-17546, RD-17547, RD-17548, RD-17549, RD-17550, RD-17551, RD-17552, RD-17553 and RD-17555) were transfect into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as a siRNA control. RD-17118 was a GNA-siRNA and transfected the same as CM-siRNA. Mock treatments were transfected in absence of oligonucleotide and served as a non-treatment control (not shown) . dsCon2 duplex served as a non-specific control (not shown) . Firefly luciferase activity was quantified and served as a target reporter gene. Renilla luciferase activity was quantified and served as internal reporter gene to normalize the data. Data represents the mean expression level of Ttr gene relative to mock after normalized to renilla luminescence (mean ± SEM of three replicated transfection wells) . The IC50 values of target and non-target specificity, the ratio (IC50 non-target / IC50 target) and Emax knockdown activity following CM-siRNA treatments are summarized in Table 3. Table 3. IC50 values of target and non-target specificity, the ratio (IC50 non-target / IC50 target) and  Emax knockdown activity following CM-siRNA treatments.

[0189] The findings indicate that the chemical modifications to the siRNAs are capable of reducing non-target knockdown effects while retaining or even enhancing on target activity when compared to their unmodified counterparts, suggesting that these modifications can effectively address non-target effects without compromising on target activity of the modified siRNA.Example 29. In vitro effect of CM-siRNAs with the modification at different positions for  modulating target and non-target specificity.

[0190] To test the in vitro modulation of both target and non-target specificity of CM-siRNA with the modification at different positions, the pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid were transfected into COS-7 cells at 9 μg each for 24 hours. Subsequently, the indicated CM-siRNAs (i.e., RD-17639, RD-17641, RD-17642, RD-17643, RD-17644, RD-17128 and RD-17645) were transfected into COS-7 cells containing said plasmid at indicated concentrations (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10 and 50 nM) for 2 days. RD-17117 was transfected by following the same procedures as siRNA control. RD-17118 was a GNA-siRNA and transfected by following the same procedure as CM-siRNA.

[0191] FIG. 3A and FIG. 3B show the Ttr expression in target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. FIG. 3C and FIG. 3D show Ttr expression in non-target specificity plasmid as quantified firefly and renilla luciferase activity by Dual-Glo Luciferase Assay System. The IC50 values of target and non-target specificity and Emax knockdown activity following CM-siRNA treatments are summarized in Table 4. Table 4. IC50 values of target and non-target specificity and Emax knockdown activity following  CM-siRNA treatments.

[0192] The data indicates that the siRNAs chemically modified in different positions are able to reduce non-target effects while retaining on target activity relative to the parent siRNA, suggesting that these modifications can effectively alleviate non-target effects without compromising activity on the intended targets. Materials and MethodsGeneral synthesis method of oligonucleotide

[0193] The oligonucleotides used in the following examples were synthesized via the following general method. (1) Single-stranded synthesis method

[0194] The single-stranded oligonucleotide was synthesized on a K&A DNA synthesizer (K&A Laborgeraete GbR, chaafheim, Germany) by a solid-phase synthesis technique.

[0195] The starting material was universal solid support or special solid support commercially available or synthesized as disclosure in previous context. In general, phosphoramidite monomers including various linkers and conjugates (0.1M in acetonitrile or dichloromethane) , were added sequentially onto a solid support in the DNA synthesizer to generate the desired full-length oligonucleotides.

[0196] Amidite addition: each cycle of amidite addition consisted of four chemical reactions including detritylation, coupling, oxidation / thiolation and capping. In the first step, the detritylation was performed by using 3%dichloroacetic acid (DCA) in DCM for 45 seconds. In the second step, Phosphoramidite coupling was conducted for 6 minutes for all amidites by 12 eq.; In the third step, oxidation was performed by using 0.02 M iodine in THF: pyridine: water (70: 20: 10, v / v / v) for 1 minute; if phosphorothioate modification was needed, oxidation was replaced by thiolation which was carried out with 0.1 M solution of xanthane hydride in pyridine: ACN (50: 50, v / v) for 3 minutes; In the fourth step, the capping was performed by using a THF: acetic anhydride: Pyridine (80: 10: 10, v / v / v) (CAP A) and N-methylimidazole: THF (10: 90, v / v) , (CAP B) for 20 seconds. The Cycles of four chemical reactions will depend on the length of oligonucleotide.

[0197] Deprotection I (Nucleobase Deprotection) : after completion of the synthesis, the solid support was transferred to a screw-cap microcentrifuge tube. For a 1 μmol synthesis scale, 1 ml of a mixture of methylamine and ammonium hydroxide was added. The tube contained the solid support was then heated in an oven at 60℃ to 65℃ for 15 min and then allowed to cool to room temperature. The cleavage solution was collected and evaporated to dryness in a speedvac to provide crude single-stranded oligonucleotide.

[0198] Deprotection II (Removal of 2'-TBDMS Group) : if the crude RNA oligonucleotide, still carrying the 2'-TBDMS groups, it was dissolved in 0.1 ml of DMSO. After adding 1 ml of Triethylamine trihydrofluoride, the tube was capped, and the mixture was shaken vigorously to ensure complete dissolution. Then, it was heated in an oven at 65℃ for 15 minutes. The tube was removed from the oven and cooled down to room temperature. The solution contained completely desilylated oligonucleotide was cooled on dry ice. 2 ml of ice-cold n-butanol (-20℃) were carefully added in 0.5 ml portions to precipitate the oligonucleotides. The precipitate was filtered, washed with 1 ml ice-cold n-butanol, and subsequently dissolved in 0.01 M Tris (hydroxymethyl) aminomethanol hydrochloride buffer. (2) Purification of single-stranded oligonucleotides

[0199] The purification of oligonucleotides was performed on an AKTA explorer 10 equipped with a Source 15Q 4.6 / 100 PE column using the following conditions: buffer A: (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5) , B: (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 2M NaCl, pH 7.5) , gradient: 10%B to 60%B in 25 min, flow rate: 1 ml / min. The pure oligonucleotides were collected and desalted by a HiPrep 26 / 10 Desalting column. (3) Annealing to form duplex

[0200] For duplex formation, after generating desalted purified single-stranded solutions, the sense strand (passenger strand) and antisense strand (guide strand) were mixed by equal volumes at equimolar concentration in the tube. Place the tube in a heat block at 95℃ for 5 min and then cool to room temperature; subsequently, lyophilized to powder.In vitro screening by luciferase reporter gene assay

[0201] COS-7 cells (ATCC) were cultured in a humidified atmosphere of 5%CO2 at 37℃using Dulbecco's modified Eagle medium supplemented with 10%fetal bovine serum (Gibco) . COS-7 cells were transfected with 9 μg luciferase reporter plasmid with 30 μL Lipofectamine 2000 (Invitrogen) after 24 hours of cell seeding. The next day, COS-7 cells were split and plated in opaque-walled 96-well cell culture plates at 15,000 cells / well in absence of antibiotics. Cells were transfected with siRNAs targeting Ttr gene at indicated concentration (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10, 50 nM) using 0.2 μL of RNAiMAX (ThermoFisher, Waltham, MA, USA) in 75 μL medium for 2 days. Transfections were carried out using Lipofectamine 2000 (Invitrogen) and Lipofectamine RNAiMAX according to the manufacture's protocol. Wells treated in absence of siRNA served as non-treated (Mock) controls, and dsCon2 duplex served as a non-specific control.

[0202] The reporter plasmids were generated by cloning the complete or partial target sequences of the siRNAs into the pmirGLO plasmid between the NheI and SalI restriction enzyme (RE) sites in the 3'UTR region of the firefly luciferase gene (luc2) . The target specificity reporter plasmid contains in the 3'-UTR region of the firefly luciferase gene a single copy of the siRNA's target sequence which has perfect complementarity to the full-length of its guide strand. The non-target specificity reporter plasmid contains four tandem copies of partial target sequences which has perfect complementarity only to the seed region (the 1st -8th position counted from the 5' end) of the guide strand separated by a 19-nucleotide spacer (5'-TAATATTACATAAATAAAA-3') in the 3'-UTR of the firefly luciferase gene. Both plasmids co-expressed Renilla luciferase as a transfecfion control. Mark K Schlegel, et.al., Nucleic Acids Res. 2022 Jul 8; 50 (12) : 6656-6670. doi: 10.1093 / nar / gkac539 is incorporate herein by reference for the specificity tests on both the methodology and the insert sequence. luciferase assay and knockdown assessment

[0203] COS-7 cells (3,000,000 cells) were seeded in a 10-cm dish with 10 mL culture medium. COS-7 cells were transfected with 9 μg of pmirGLO-Ttr target specificity plasmid and pmirGLO-Ttr non-target specificity plasmid using 30 μL Lipofectamine 2000 after 24 hours of cell seeding. The next day, COS-7 cells were split and plated in opaque-walled 96-well cell culture plates at 15,000 cells / well in absence of antibiotics. Cells were transfected with siRNAs targeting Ttr gene at the indicated concentration (i.e., 0.00064, 0.0032, 0.016, 0.08, 0.4, 2, 10, 50 nM) using 0.2 μL of RNAiMAX in 75 μL medium for 2 days. Wells treated in absence of siRNAs served as non-treated (Mock) controls, and dsCon2 duplex served as a negative control.

[0204] Luciferase activity was quantified using the Dual-Glo Luciferase Assay System (Promega) according to the manufacture's protocol. Briefly, cells were lysed in 75 μL luciferase lysis buffer (Promega) and shaken at 600 rpm for 10 mins at room temperature, protected from light. Luminescence was subsequently measured on an Infinite 200 Pro microplate reader (Tecan) to quantify firefly luciferase activity. Following measurements, 75 μL of Dual-Glo Stop &Glo Reagent (Promega) was added to each well and shaken at 600 rpm for 3 mins at room temperature, followed by additional 7 mins incubation protected from light at room temperature. Luminescence was measured again to quantify Renilla activity, which served to normalize luciferase reported results. Data was calculated as the ratio of reporter luminescence to Renilla luminescence relative to the ratio of non-treated (Mock) controls. Percent luciferase activity (%) was calculated as: 1- (RatiosiRNA / Rationon-treated) *100.

[0205] While preferred embodiments of the present invention have been shown and described herein, it will be obvious to those skilled in the art that such embodiments are provided by way of example only. It is not intended that the invention be limited by the specific examples provided within the specification. While the invention has been described with reference to the aforementioned specification, the descriptions and illustrations of the embodiments herein are not meant to be construed in a limiting sense. Numerous variations, changes, and substitutions will now occur to those skilled in the art without departing from the invention. Furthermore, it should be understood that all aspects of the invention are not limited to the specific depictions, configurations or relative proportions set forth herein which depend upon a variety of conditions and variables. It should be understood that various alternatives to the embodiments of the invention described herein may be employed in practicing the invention. It is therefore contemplated that the invention shall also cover any such alternatives, modifications, variations or equivalents. It is intended that the following claims define the scope of the invention and that methods and structures within the scope of these claims and their equivalents be covered thereby.

Claims

1.An abasic modification compound having a structure represented by Formula I: wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C12 alkylene, linear or branched C4-C12 alkenylene, linear or branched C4-C12 alkynyl, C3-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C3-C16 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 arylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) 2N (R4) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2N (R4) , - (linear or branched C1-C12 alkylene) -O- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) -O- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) -O- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene-O) a- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene-O) a- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) C (O) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2C (O) , - (C6-C16 arylene) 2C (O) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) C (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) - (C3-C16 cycloalkylene-O-, - (C6-C16 arylene-O-) S (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) 2- (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) 2- (C3-C 16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) S (O) 2- (C6-Cl6 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-;wherein t4 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl, C6-C16 aryl, C4-C16 heteroaryl, C6-C16 aryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, C4-C16 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-;a is an integrate of 1 to 6;m is an integer of 0, 1 or 2, and n is an integer of 0, 1 or 2, with the proviso that the sum of m and n equals to 2 or larger;X represents a protection group;each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl, C6-C16 aryl; andR3 is selected from the group consisting of C1-C12 alkylene-, C2-C12 alkenylene-, C3-C16 cycloalkylene and C6-C22 arylene.2.The abasic modification compound according to claim 1, wherein X is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, (C1-C12) alkylcarbonyl, (C1-C12) alkoxycarbonyl, (C6-C16) aryl, (C6-C16) arylcarbonyl, (C6-C16) aryloxycarbonyl, tri ( (C1-C16) alkyl) silyl and tri ( (C1-C16) alkoxy) silyl and di (C1-C12 alkoxy) trityl.3.The abasic modification compound according to claim 1, wherein the abasic modification compound does not comprise a nucleobase selected from the group consisting of adenine, guanine, cytosine, thymine and uracil;wherein the nucleobase is optionally substituted with C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-.4.The abasic modification compound according to claim 1, wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C8 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, linear or branched C4-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C3-C8 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 heteroarylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) N (R4) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) O (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) O (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) O (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (-C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkryl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;a is an integrate of 1 to 6;m is an integer of 1, 2 or 3, and n is an integer of 1 or 2;X is a protection group;each of R1 and R2 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl; andR3 is selected from the group consisting of C1-C6 alkylene-, C2-C6 alkenylene-, C3-C16 cycloalkylene and C6-C22 arylene.5.The abasic modification compound according to claim 1, wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C7 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, - (linear or branched C1-C2 alkylene) - (C3-C6 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C2 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C1-C5 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C5 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C2-C3 alkylene) O (linear or branched C2-C3 alkylene) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C4 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C4 alkyl) -C (O) -N (C1-C4 alkyl) -, C1-C4 alkoxy-C1-C4 alkylene;wherein R4 is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-and (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -;m is 1, andn is 1;X is selected from H, C1-C3 alkyl, (C1-C3) alkylcarbonyl, (C1-C3) alkoxycarbonyl, (C6-C12) aryl, (C6-C12) arylcarbonyl, (C6-C12) aryloxycarbonyl, tri ( (C1-C3) alkyl) silyl and tri ( (C1-C3) alkoxy) silyl and di (C1-C3 alkoxy) trityl;each of R1 and R2 is C1-C4 alkyl; andR3 is C1-C4 alkylene.6.The abasic modification compound according to any one of claims 1 to 5, wherein A does not have a structure of: wherein R5, R6, R7 and R8 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;and the asterisk represents the site wherein A is covalently attached to -OX or7.The abasic modification compound according to any one of claims 1 to 5, wherein the arylene, on each occurrence, is phenylene; andthe heteroarylene, on each occurrence, is derived from an heteroaromatic compound selected from the group of:8.The abasic modification compound according to claim 1, having a structure of 9.A gene modulating agent comprising a single-stranded oligonucleotide or a double-stranded oligonucleotide, wherein the single-stranded oligonucleotide or at least one strand of the double-stranded oligonucleotide comprises at least one abasic modification moiety having a structure represented by Formula II: -L1-A-L2-   Formula IIwherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C12 alkylene, linear or branched C4-C12 alkenylene, linear or branched C4-C12 alkynyl, C3-C12 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C12 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C3-C16 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C3-C16 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 arylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 arylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, C6-C16 heteroarylene, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) - (C6-C16 heteroarylene) - (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) 2N (R4) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2N (R4) , - (linear or branched C1-C12 alkylene) -O- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene) -O- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene) -O- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C12 alkylene) -, - (C3-C16 cycloalkylene-O) a- (C3-C16 cycloalkylene) -, - (C6-C16 arylene-O) a- (C6-C16 arylene) -, - (linear or branched C1-C12 alkylene) C (O) , - (C3-C16 cycloalkylene) 2C (O) , - (C6-C16 arylene) 2C (O) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) C (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) - (C3-C16 cycloalkylene-O-, - (C6-C16 arylene-O-) S (O) - (C6-C16 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) S (O) 2- (linear or branched C1-C12 alkylene-O-) , - (C3-C16 cycloalkylene-O-) S (O) 2- (C3-C16 cycloalkylene-O-) , - (C6-C16 arylene-O-) S (O) 2- (C6-C16 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-;wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C12 alkyl, C3-C16 cycloalkyl, C6-C16 aryl, C4-C16 heteroaryl, C6-C16 aryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, C4-C16 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-;a is an integrate of 1 to 6;each of L1 and L2 is independently a linkage group selected from the group consisting of direct bond, - (C1-C8) alkylene-, -C (O) -, -O-C (O) -, -C (O) -O-, -O-C (O) -O-, -NH-, -N ( (C1-C6) alkyl) -, -N ( (C1-C6) alkyl) -C (O) -O-, -C (O) -NH-, -P (O) 2-, -OP (O) O-, -OP (O) 2O-, -OP (O) O-, -P (S) (O) -, -OP (S) O-, -OP (S) (O) O-and-OP (S) O-.10.The gene modulating agent according to claim 9, wherein the abasic modification moiety represented by Formula II is derived from the abasic modification compound according to any one of claims 1 to 8.11.The gene modulating agent according to claim 9, wherein the abasic modification moiety represented by Formula II does not comprise and is not attached to a nucleobase selected from the group consisting of adenine, guanine, cytosine, thymine and uracil;wherein the nucleobase is optionally substituted with C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoxy, C6-C16 aryl, C6-C16 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C16 aralkyl, C7-C16 alkylaryl, C4-C16 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C12 alkyl) , -N (C1-C12 alkyl) 2, -NH (C3-C12 cycloalkyl) , -N (C3-C12 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C12 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C12 alkyl) -C (O) -N (C1-C12 alkyl) -, C1-C12 alkoxy-C1-C12 alkylene, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-, C6-C16 aryl-C1-C16 alkylene-O-C1-C16 alkylene-.12.The gene modulating agent according to any one of claims 9 to 11, wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C8 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, linear or branched C4-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C3-C8 heterocycloalkylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C3-C8 heterocycloalkylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 arylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, C6-C12 heteroarylene, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) N (R4) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) O (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) O (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) O (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O) a- (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene-O) a- (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene-O) a- (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene) -, - (C3-C12 cycloalkylene) C (O) (C3-C12 cycloalkylene) -, - (C6-C12 arylene) C (O) (C6-C12 arylene) -, - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) C (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) C (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) C (O) (-C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) (C6-C12 arylene-O-) , - (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) S (O) 2 (linear or branched C1-C6 alkylene-O-) , - (C3-C12 cycloalkylene-O-) S (O) 2 (C3-C12 cycloalkylene-O-) , - (C6-C12 arylene-O-) S (O) 2 (C6-C12 arylene-O-) , each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from H, C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;wherein R4 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;a is an integrate of 1 to 6.13.The gene modulating agent according to any one of claims 9 to 11, wherein A is selected from the group consisting of linear or branched C4-C7 alkylene, linear or branched C4-C6 alkenylene, - (linear or branched C1-C2 alkylene) - (C3-C6 cycloalkylene) - (linear or branched C1-C2 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) - (C6-C12 arylene) - (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C1-C5 alkylene) - (C6-C12 heteroarylene) - (linear or branched C1-C5 alkylene) -, - (linear or branched C1-C4 alkylene) N (R4) (linear or branched C1-C4 alkylene) -, - (linear or branched C2-C3 alkylene) O (linear or branched C2-C3 alkylene) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C14 aralkyl, C7-C14 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C4 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C4 alkyl) -C (O) -N (C1-C4 alkyl) -, C1-C4 alkoxy-C1-C4 alkylene;wherein R4 is selected from the group consisting of C1-C3 alkyl, C3-C6 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C3 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C3 alkyl) , -N (C1-C3 alkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-and (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -.14.The gene modulating agent according to claim 9, wherein A does not have a structure of: wherein R5, R6, R7 and R8 is selected from the group consisting of H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C6-C12 aryl, C4-C12 heteroaryl, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-C (O) -, C4-C12 heteroaryl-C1-C12 alkylene-C (O) -, each of which is optionally substituted with at least one of substituent selected from C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C6-C12 aryl, C6-C12 aryloxy, nitro group, hydroxyl, halogen atom, C7-C12 aralkyl, C7-C12 alkylaryl, C4-C12 heteroaryl, -NH2, -NH (C1-C6 alkyl) , -N (C1-C6 alkyl) 2, -NH (C3-C8 cycloalkyl) , -N (C3-C8 cycloalkyl) 2, -NH (C6-C12 aryl) , -N (C6-C12 aryl) 2, (C1-C6 alkyl) -C (O) -NH-, (C1-C6 alkyl) -C (O) -N (C1-C6 alkyl) -, C1-C6 alkoxy-C1-C6 alkylene, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-, C6-C12 aryl-C1-C6 alkylene-O-C1-C6 alkylene-;and the asterisk represents the site wherein A is covalently attached to L1 or L2.15.The gene modulating agent according to claim 9, whereinthe arylene, on each occurrence, is phenylene; andthe heteroarylene, on each occurrence, is derived from an heteroaromatic compound selected from the group of:16.The gene modulating agent according to claim 9, wherein A has a structure selected from the group consisting of wherein *represents the site where the abasic modification moiety represented by Formula II is covalently attached to the rest part of the oligonucleotide; and**represents the site where the abasic modification moiety represented by Formula II is covalently attached to another oligonucleotide or a substituting group.17.The gene modulating agent according to claim 9, wherein the oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end, orthe oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 2 to 12 of the single-stranded oligonucleotide, counting from the 5’-end.18.The gene modulating agent according to claim 9, wherein the oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end, orthe oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 12 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end.19.The gene modulating agent according to claim 18, wherein the oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end, orthe oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 12 to 50 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 1 to 7 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end.20.The gene modulating agent according to claim 19, wherein the oligonucleotide is a double-stranded oligonucleotide comprising a sense strand and an antisense strand, each of which comprising 15 to 30 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 7 to 8 of the antisense strand or the sense strand, counting from the 5’-end, orthe oligonucleotide is a single-stranded oligonucleotide comprising 15 to 30 nucleotides, and the abasic modification moiety represented by Formula II is located at position 7 to 8 of the single-stranded oligonucleotide counting from the 5’-end.21.The gene modulating agent according to claim 9 or 10, wherein the oligonucleotide (s) is selected from the group consisting of antisense oligonucleotide (ASO) , antisense RNA, short interfering RNA (siRNA) , microRNA (miRNA) , small activating RNA (saRNA) , double-stranded RNA (dsRNA) , small guide RNA (sgRNA) , and any combinations or conjugated composite thereof.22.The gene modulating agent according to claim 9 or 10, further comprising at least one accessory oligonucleotide (ACO) conjugated with the oligonucleotide (s) .23.A pharmaceutical composition comprising:a) the gene modulating agent according to any one of claims 9 to 22; andb) optionally, one or more ingredients selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable carrier, excipient, solvent, diluent, stabilizer, dispersant, buffer, compatibilizer, preservative agent and combinations thereof.24.A method of modulating the expression of a target gene in a subject while mitigating the non-target specificity, wherein the method comprising the step of administrating the gene modulating agent according to any one of claims 9-22 or the pharmaceutical composition according to claim 23 to a subject.25.The method of claim 24, wherein the gene modulating agent or the pharmaceutical composition increases the expression of the target gene.26.The method of claim 24, wherein the gene modulating agent or the pharmaceutical composition decreases the expression of the target gene.27.The method of any one of claims 24 to 26, wherein the subject is a mammal.28.The method of claim 27, wherein the mammal is a rodent.29.The method of claim 28, wherein the rodent is a mouse.30.The method of claim 28, wherein the rodent is a rat.31.The method of claim 27, wherein the mammal is a non-human primate.32.The method of claim 27, wherein the mammal is a human.33.The method of claim 24, wherein the target gene is associated with a disease or disorder.34.The method of claim 33, wherein the target gene is associated with a disease or disorder in the central nervous system, eye, lung, spleen, muscle, heart, kidney, bladder, or liver.35.A method of modulating the expression of a target gene while mitigating the non-target effect, the method comprising contacting a cell with the gene modulating agent according to any one of claims 9-22 or the pharmaceutical composition of claim 23.36.The method of claim 35, wherein the gene modulating agent or the pharmaceutical composition increases the expression of the target gene.37.The method of claim 35, wherein the gene modulating agent or the pharmaceutical composition decreases the expression of the target gene.38.The method of any one of claims 34-37, wherein the cell is a mammalian cell.39.The method of claim 38, wherein the mammalian cell is a mouse cell.40.The method of claim 38, wherein the mammalian cell is a rat cell.41.The method of claim 38, wherein the mammalian cell is a non-human primate cell.42.The method of claim 38, wherein the mammalian cell is a human cell.43.The method of claim 35, wherein the target gene is associated with a disease or disorder.44.The method of claim 35, wherein the target gene is associated with a disease or disorder in the central nervous system, eye, lung, spleen, muscle, heart, kidney, bladder, or liver.

Images