TL1a antibody and use thereof

Abstract

The present disclosure provides a TL1A antibody or antigen-binding fragments thereof. The present disclosure provides an antibody against TNF-like ligand 1a (TL1A) or antigen-binding fragments thereof, wherein the antigen-binding protein or active fragment thereof comprises at least one light chain variable region and at least one heavy chain variable region. The present disclosure also provides a nucleic acid molecule encoding the TL1A antibody or antigen-binding fragments thereof, an expression vector, a host cell and use thereof in the prevention and / or treatment of TNF-like ligand 1a-related diseases, as well as a detection kit containing the TL1A antibody or antigen-binding fragments thereof.

Description

TL1A ANTIBODY AND USE THEREOFFIELD OF THE INVENTION

[0001] The present disclosure belongs to the field of biotechnology, specifically relates to TL1A antibodies or antigen-binding fragments thereof and use thereof.BACKGROUND OF THE INVENTION

[0002] TNF-like ligand 1a (TL1A) , one of the members of the tumor necrosis factor superfamily, is a type II membrane protein that is expressed by antigen-presenting cells (including dendritic cells, B cells, and macrophages) , CD4+ and CD8+ T cells, and endothelial cells and can be expressed on the cell surface or secreted as soluble cytokines.

[0003] TL1A mediates signaling pathways that promote the secretion of pro-inflammatory cytokines or promote apoptosis by binding to DR3. Depending on the cellular environment, the ligation of TL1A to DR3 can trigger one of two signaling pathways: activation of the transcription factor NF-kB or activation of caspase and apoptosis. TL1A has been involved as a potential therapeutic target for a variety of diseases and conditions. Currently, there is no medicament for this target on the domestic or foreign market.

[0004] Therefore, there is an urgent need for therapeutic agents and methods targeting TL1A.SUMMARY OF THE INVENTION

[0005] In order to address at least one of the above issues, the present disclosure provides an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically recognizes and / or binds to TNF-like ligand 1a, and use thereof. The antibodies or antigen-binding fragments thereof provided by the present disclosure have good affinity and biological activity and have broad application prospects in the treatment or prevention of TL1A-related diseases.

[0006] According to a first aspect of the present disclosure, there is provided an antibody against TNF-like ligand 1a (TL1A) or antigen-binding fragment thereof, wherein the antibody or antigen-binding fragment thereof comprises at least one light chain variable region and at least one heavy chain variable region;

[0007] wherein the heavy chain variable region has an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in general formula (1) , an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in general formula (2) , and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in general formula (3) ,

[0008] the light chain variable region has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in general formula (4) , an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in general formula (5) , and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in general formula (6) ,

[0009] the general formula (1) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10, wherein, X1 is selected from the group consisting of G and D, or is absent, X2 is selected from the group consisting of H, D, and Y, or is absent, X3 is selected from the group consisting of S and T, or is absent, X4 is selected from the group consisting of F, I, and N, or is absent, X5 is selected from the group consisting of S and T, or is absent, X6 is selected from the group consisting of S, D, H, G, N, and K, X7 is selected from the group consisting of Y, G, S, T, C, and M, X8 is selected from the group consisting of W, Y, V, G, and T, X9 is selected from the group consisting of I, W, M, and V, and X10 is selected from the group consisting of E, N, S, H, and G;

[0010] the general formula (2) has an amino acid sequence as shown in X1IX2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16, wherein, X1 is selected from the group consisting of E, L, W, R, T, and H, X2 is selected from the group consisting of L, Y, N, D, and S, X3 is selected from the group consisting of P, T, S, W, and Y, X4 is selected from the group consisting of G, Y, F, A, N, and S, X5 is selected from the group consisting of S, T, G, and D, X6 is selected from the group consisting of G, E, D, S, and R, X7 is selected from the group consisting of I, N, G, K, Q, E, Y, and S, X8 is selected from the group consisting of T, S, and P, or is absent, X9 is selected from the group consisting of N, Y, S, T, and K, X10 is selected from the group consisting of Y, H, and S, X11 is selected from the group consisting of N, A, and D, X12 is selected from the group consisting of E, Q, D, and P, X13 is selected from the group consisting of K, E, D, and S, X14 is selected from the group consisting of F, V, and L, X15 is selected from the group consisting of K, Q, and R, X16 is selected from the group consisting of G and S;

[0011] the general formula (3) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14, wherein, X1 is selected from the group consisting of S and H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of Y, I, and P, or is absent, X3 is selected from the group consisting of G, A, and R, or is absent, X4 is selected from the group consisting of T, D, I, Y, and L, or is absent, X5 is selected from the group consisting of H and G, or is absent, X6 is selected from the group consisting of R, Y, S, G, and T, or is absent, X7 is selected from the group consisting of R, G, A, Q, E, and D, or is absent, X8 is selected from the group consisting of T, D, N, R, Y, I, G, and A, or is absent, X9 is selected from the group consisting of H, S, Y, V, N, and L, or is absent, X10 is selected from the group consisting of W and Y, X11 is selected from the group consisting of F, A, and G, X12 is selected from the group consisting of F, M, and L, or is absent, X13 is selected from the group consisting of D, or is absent, X14 is selected from the group consisting of V, C, F, Y, and S;

[0012] the general formula (4) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13YX14X15, wherein, X1 is selected from the group consisting of G and R, or is absent, X2 is selected from the group consisting of S, or is absent, X3 is selected from the group consisting of S and A, or is absent, X4 is selected from the group consisting of Q and S, or is absent, X5 is selected from the group consisting of S, or is absent, X6 is selected from the group consisting of R, K, I, and S, X7 is selected from the group consisting of A and V, X8 is selected from the group consisting of S, T, and H, and R, X9 is selected from the group consisting of E, Q, and S, or is absent, X10 is selected from the group consisting of N and D, or is absent, X11 is selected from the group consisting of I, V, and G, or is absent, X12 is selected from the group consisting of Y, S, K, G, N, and D, or is absent, X13 is selected from the group consisting of S, K, N, and T, or is absent, X14 is selected from the group consisting of L, V, I, and M, X15 is selected from the group consisting of A, N, S, V, E, and H, or is absent,

[0013] the general formula (5) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7, wherein, X1 is selected from the group consisting of F, Y, N, D, I, K, and G, X2 is selected from the group consisting of A, T, and V, X3 is selected from the group consisting of R, T, K, and S, X4 is selected from the group consisting of R, T, I, K, and N, X5 is selected from the group consisting of L and R, X6 is selected from the group consisting of A, T, Q, H, F, and Y, X7 is selected from the group consisting of D, E, P, S, and T;

[0014] the general formula (6) has an amino acid sequence as shown in X1QX2X3X4X5X6X7X8T, wherein, X1 is selected from the group consisting of F, L, G, and H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of Q and H, or is absent, X3 is selected from the group consisting of G, H, T, W, V, and Y, X4 is selected from the group consisting of S, G, Y, N, and D, X5 is selected from the group consisting of H, E, R, T, S, Y, and N, X6 is selected from the group consisting of V, S, Y, L, N, D, and T, X7 is selected from the group consisting of P and L, X8 is selected from the group consisting of L and Y, or is absent.

[0015] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (1) , wherein X1 is G, X2 is selected from the group consisting of H and Y, X3 is selected from the group consisting of S and T, X4 is F, X5 is selected from the group consisting of S and T, X6 is selected from the group consisting of S, D, H, and G, X7 is selected from the group consisting of Y and S, X8 is selected from the group consisting of W, V, G, and T, X9 is selected from the group consisting of I, W, and M, X10 is selected from the group consisting of E, N, and S.

[0016] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (1) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is selected from the group consisting of N and K, X7 is selected from the group consisting of Y and C, X8 is G, X9 is M, X10 is N.

[0017] In some embodiments, the HCDR1 of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 1 to 13.

[0018] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is E, X2 is L or Y, X3 is P, X4 is G, X5 is S, X6 is G, X7 is selected from the group consisting of I and N, X8 is selected from the group consisting of T and S, X9 is selected from the group consisting of N and Y, X10 is Y, X11 is N, X12 is E, X13 is selected from the group consisting of K and E, X14 is F, X15 is K, X16 is G.

[0019] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is W, X2 is N, X3 is T, X4 is selected from the group consisting of F and Y, X5 is selected from the group consisting of T and S, X6 is selected from the group consisting of E and G, X7 is selected from the group consisting of K, Q, and E, X8 is P or T, X9 is T, X10 is selected from the group consisting of Y and H, X11 is A, X12 is D, X13 is D, X14 is F, X15 is K or R, X16 is G.

[0020] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is L, X2 is N, X3 is P, X4 is Y, X5 is S, X6 is G, X7 is G, X8 is T, X9 is selected from the group consisting of S and T, X10 is Y, X11 is N, X12 is Q, X13 is K, X14 is F, X15 is K, X16 is G.

[0021] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is R, X2 is D, X3 is P, X4 is A, X5 is S, X6 is D, X7 is N, X8 is T, X9 is K, X10 is Y, X11 is D, X12 is P, X13 is K, X14 is F, X15 is Q, X16 is G.

[0022] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is H, X2 is selected from the group consisting of L and S, X3 is selected from the group consisting of W and Y, X4 is selected from the group consisting of N and S; X5 is selected from the group consisting of D and G, X6 is selected from the group consisting of S and R, X7 is selected from the group consisting of K and S, X8 is absent, X9 is Y, X10 is selected from the group consisting of Y and S, X11 is N, X12 is P, X13 is selected from the group consisting of D and S, X14 is L, X15 is K, X16 is S.

[0023] In some embodiments, the HCDR2 of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 14 to 28.

[0024] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (3) , where X1 is H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of I and P, or is absent, X3 is selected from the group consisting of A and R, or is absent, X4 is selected from the group consisting of D, I, Y, and L, X5 is H, or is absent, X6 is selected from the group consisting of Y, S, G, and T, X7 is selected from the group consisting of R, G, A, and Q, X8 is selected from the group consisting of D, N, R, Y, and I, X9 is selected from the group consisting of S, Y and V, or is absent, X10 is Y, X11 is A, X12 is M, X13 is D, X14 is selected from the group consisting of C, F, and Y.

[0025] In some embodiments, the HCDR3 of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 29 to 41.

[0026] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is R, X7 is A, X8 is S, X9 is selected from the group consisting of E and Q, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is I, X12 is selected from the group consisting of Y and S, X13 is selected from the group consisting of S, K, and N, X14 is L, X15 is selected from the group consisting of A and N.

[0027] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is K, X7 is A, X8 includes S or T, X9 is selected from the group consisting of E and Q, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is selected from the group consisting of I and V, X12 is selected from the group consisting of K, G, and N, X13 is selected from the group consisting of S, K, and T, X14 is selected from the group consisting of L, I, and V, X15 is selected from the group consisting of S and V.

[0028] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , where X1 is selected from the group consisting of G and R, X2 is S, X3 is S, X4 is Q, X5 is S, X6 is I, X7 is V, X8 is H, X9 is S, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is G, X12 is selected from the group consisting of D and N, X13 is T, X14 is L, X15 is E.

[0029] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 is absent, X2 is S, X3 is A, X4 is S, X5 is S, X6 is S, X7 is V, X8 is selected from the group consisting of R and S, X9 to X13 are absent, X14 is M, X15 is H.

[0030] In some embodiments, the LCDR1 of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 42 to 53.

[0031] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is N, X2 is A, X3 is K, X4 is T, X5 is L, X6 is selected from the group consisting of A and T, X7 is E.

[0032] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is Y, X2 is selected from the group consisting of A and T, X3 is selected from the group consisting of T and S, X4 is selected from the group consisting of I, T, and R, X5 is L, X6 is selected from the group consisting of Q, H, and A, X7 is selected from the group consisting of D, P, and S.

[0033] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is G, X2 is selected from the group consisting of V and A, X3 is S, X4 is N, X5 is R, X6 is Y, X7 is T.

[0034] In some embodiments, the LCDR2 of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 54 to 65.

[0035] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (6) , X1 is selected from the group consisting of F and L, X2 is absent, X3 is selected from the group consisting of G and H, X4 is selected from the group consisting of S and G, X5 is selected from the group consisting of H and E, X6 is selected from the group consisting of V and S, X7 is P, X8 is L.

[0036] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (6) , wherein X1 is absent, X2 is selected from the group consisting of Q and H, X3 is selected from the group consisting of H, W, and V, X4 is selected from the group consisting of Y, N, and S, X5 is selected from the group consisting of T, S, and Y, X6 is selected from the group consisting of L, N, D, and T, X7 is P, X8 is Y.

[0037] In some embodiments, the LCDR3 of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 66 to 76.

[0038] In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 1 to 13, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 14 to 28, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 29 to 41.

[0039] In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 42 to 53, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 54 to 65, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 66 to 76.

[0040] In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 1, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 14, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 29. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 2, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 15, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 30. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 16, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 4, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 17, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 5, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 18, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 33. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 6, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 19, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 34. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 7, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 20, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 35. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 8, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 21, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 36. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 9, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 22, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 37. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 11, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 15, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 30. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 12, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 24, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 39. In some embodiments, the heavy chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 12, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 24, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 40. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 6, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 25, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 34. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 13, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 26, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 41. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 27, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31. In some embodiments, the heavy chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 28, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31. In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 8, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 21, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 36.

[0041] In some embodiments, the light chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 42, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 54, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 66. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 67. In some embodiments, the light chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 44, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 56, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 68. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 45, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 46, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 47, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 58, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 70. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 48, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 54, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 71. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 49, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 72. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 59, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 60, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 74. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 51, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 61, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 75. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 51, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 62, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 75. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 59, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 52, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 63, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 70. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 53, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 64, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 76. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 44, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 65, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 68. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 67. In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 49, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69.

[0042] In some embodiments, the heavy chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 92 to 111, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0043] In some embodiments, the light chain variable region of antibody or antigen-binding fragment thereof may have an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 112 to 131, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0044] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 92, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 112, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0045] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown SEQ ID NO: 93, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 113, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0046] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 94, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 114, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0047] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 95, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 115, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0048] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 96, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 116, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0049] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 97, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 117, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0050] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 98, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 118, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0051] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 99, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 119, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0052] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 100, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 120, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0053] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 101, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 121, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0054] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 102, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 122, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0055] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 103, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 123, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0056] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 104, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 124, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0057] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 105, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 125, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0058] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 106, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 126, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0059] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 107, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 127, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0060] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 108, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 128, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0061] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 109, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 129, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0062] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 110, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 130, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0063] In some embodiments, the antibody or antigen-binding fragment thereof may comprise: a heavy chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 111, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and a light chain variable region having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 131, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0064] In some embodiments, the antibody may be a humanized antibody. In some embodiments, the antibody may be a monoclonal antibody, a bispecific antibody, or a multispecific antibody.

[0065] In some embodiments, the antibody may be IgA, IgD, IgE, IgG, or IgM antibody. In some embodiments, the antibody may be IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, or IgA2 antibody.

[0066] According to a second aspect of the present disclosure, there is provided a nucleic acid molecule comprising a nucleotide sequence encoding the antibody or antigen-binding fragment thereof as described in the first aspect.

[0067] According to a third aspect of the present disclosure, there is provided an expression vector comprising the nucleic acid molecule as described in the second aspect.

[0068] According to a fourth aspect of the present disclosure, there is provided host cell comprising the nucleic acid molecule as described in the second aspect.

[0069] According to a fifth aspect of the present disclosure, there is provided a pharmaceutical composition comprising the antibody or antigen-binding fragment thereof as described in the first aspect, and a pharmaceutically acceptable carrier.

[0070] In some embodiments, the pharmaceutical composition may further comprise another pharmaceutical agent that is capable of treating or preventing TNF-like ligand 1a-related diseases.

[0071] According to a sixth aspect of the present disclosure, there is provided a kit for detecting TNF-like ligand 1a, which comprises the antibody or antigen-binding fragment thereof as described in the first aspect. In some embodiments, the kit can be used for in vitro detection of TNF-like ligand 1a. In some embodiments, the kit can be used for in vitro detection of TNF-like ligand 1a for non-diagnostic purposes.

[0072] According to a seventh aspect of the present disclosure, there is provided a method of preventing or treating a TNF-like ligand 1a-related disease, the method comprising administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of the antibody or antigen-binding fragment thereof as described in the first aspect.

[0073] According to an eighth aspect of the present, there is provided use of the antibody or antigen-binding fragment thereof as described in the first aspect in the preparation of a medicament for preventing and / or treating TNF-like ligand 1a-related diseases.

[0074] In some embodiments, the TNF-like ligand 1a-related diseases may include, but are not limited to, inflammatory bowel disease (IBD) , Crohn's disease, ulcerative colitis, asthma, allergies, diabetes mellitus, arthritis, rheumatoid arthritis, juvenile rheumatoid arthritis, osteoarthritis, psoriatic arthritis, ankylosing spondylitis, multiple sclerosis, transplant rejection, graft-versus-host disease (GVHD) , vertebral arthropathy, primary sclerosing cholangitis, primary biliary cirrhosis, atherosclerosis, bladder syndrome / interstitial cystitis, urinary tract dysfunction, sepsis, uveitis, encephalomyelitis, myasthenia gravis, systemic lupus erythematosus, cutaneous lupus erythematosus, autoimmune thyroiditis, atopic dermatitis, eczematous dermatitis, psoriasis, Sjogren's syndrome, scleroderma, and vasculitis.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

[0075] Figure 1 illustrates a non-reducing SDS-PAGE electrophoresis image of IgG4 humanized antibody. Figure 1A illustrates a non-reducing SDS-PAGE electrophoresis image of IgG4 humanized antibody, wherein M: marker; Lanes 1-3: 11F5-4-1, 11F5-4-2, 11F5-4-3, Lanes 4-6: 41E10-1-1, 41E10-1-2, 41E10-1-3, Lanes 7-9: 2G11-1-1, 2G11-1-2, 2G11-1-3. Figure 1B illustrates a non-reducing SDS-PAGE electrophoresis image of IgG4 humanized antibody, wherein M: marker; Lanes 1-3: 11F5-4-1, 11F5-4-2, 11F5-4-3, Lanes 4-6: 41E10-1-1, 41E10-1-2, 41E10-1-3, Lanes 7-9: 2G11-1-1, 2G11-1-2, 2G11-1-3.

[0076] Figure 2 illustrates the binding activity assay. Figure 2A illustrates the binding activity assay of IgG4 humanized antibody to human TL1A. Figure 2B illustrates the binding activity assay of the positive control antibody to human TL1A.

[0077] Figure 3 illustrates the in vitro activity of IgG4 humanized antibodies determined by PBMC cells.

[0078] Figure 4 illustrates the non-specific detection of humanized antibodies against TNF family factors. Figure 4A illustrates the results of non-specific detection of 41E10-1-3 IgG4 humanized antibody against TNF family factors. Figure 4B illustrates the non-specific detection of 2G11-1-3 IgG4 humanized antibody against TNF family factors.

[0079] Figure 5 illustrates the binding activity assay of IgG1 humanized antibody to human TL1A.

[0080] Figure 6 illustrates the biological activity assay of IgG1 humanized antibody. Figure 6A illustrates the results of biological activity assay of 2G11-1-3 IgG1 humanized antibody. Figure 6B illustrates the biological activity assay of 41E10-1-3 IgG1 humanized antibody. Figure 6C illustrates the biological activity assay of a positive control antibody.

[0081] Figure 7 illustrates the DSC thermal stability analysis of IgG1 humanized antibody.

[0082] Figure 8 illustrates the results of the ADCC assay for IgG1 humanized antibody.

[0083] Figure 9 illustrates the results of the CDC assay for IgG1 humanized antibody.

[0084] Figure 10 illustrates the effect of 41E10-1-3 on body weight in a SD rat model with DSS-induced colitis.

[0085] Figure 11 illustrates the effect of 41E10-1-3 on body weight difference in a SD rat model with DSS-induced colitis.

[0086] Figure 12 illustrates the effect of 41E10-1-3 on fecal property scores in a SD rat model with DSS-induced colitis.

[0087] Figure 13 illustrates the effect of 41E10-1-3 on fecal occult blood scores in a SD rat model with DSS-induced colitis.

[0088] Figure 14 illustrates the effect of 41E10-1-3 on colon length in a SD rat model with DSS-induced colitis.

[0089] Figure 15 illustrates the effect of 41E10-1-3 on colon weight in a SD rat model with DSS-induced colitis.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0090] In order to make the objectives, technical solutions and advantages of the present disclosure clearer and more understandable, the present disclosure is described in further detail below in connection with examples. The specific examples described herein are for the sole purpose of explaining the present disclosure and are not intended to constitute any limitation of the present disclosure. In addition, in the following description, the descriptions of publicly known structures and techniques are omitted, to avoid unnecessarily confusing the concepts of the present disclosure. Such structures and techniques are also described in many publications.

[0091] TL1A is related to the development of several diseases. As one example, TL1A is related with the development and severity of inflammatory bowel disease (IBD) . TL1A is believed to regulate adaptive immunity by bridging innate and adaptive immune responses, enhancing the functions of Th1, Th2, and Th17 effector cells, as well as T cell aggregation and immunopathology in inflammatory tissues, thereby participating in the pathogenesis of IBD. The main types of IBD are ulcerative colitis (UC) and Crohn's disease (CD) . These diseases are very prevalent and the number of available therapies is limited, and there are some patients who do not respond to initial treatment or whose response disappears over time. Currently, the only therapy for patients who do not respond to first-line treatment is surgery, that is, stricturoplasty (shaping of the bowel) or resection (removal of the bowel) . Surgical treatment of IBD is invasive, and some patients who undergo surgery experience postoperative risks such as anastomotic fistula, infection, and bleeding. The pathogenesis of IBD is thought to involve an uncontrolled immune response that may be triggered by certain environmental factors in genetically susceptible hosts. The heterogeneity of disease pathogenesis and clinical course, combined with the different responses to treatment and its associated side effects, suggests that a targeted therapeutic approach to treating these diseases is an ideal therapeutic strategy. Therefore, novel therapeutic approaches that specifically target the pathogenesis of IBD, drugs that inhibit TL1A activity, have become popular targets for the development of IBD therapies. There exists a huge clinical demand for IBD with broad market potential.

[0092] Definition

[0093] Unless otherwise defined, all technical or scientific terms used in the present disclosure have the same meaning as commonly used in the field to which the present disclosure belongs. For the purpose of interpreting this description, the following definitions will be applied and, where appropriate, terms used in the singular form will also include the plural form and vice versa.

[0094] The expressions "a" and "an" as used herein include the plural unless the context clearly indicates otherwise.

[0095] The expressions "about" or "approximately" as used herein are understood by those of ordinary skill in the art and vary within limits depending on the context in which they are used. If a person of ordinary skill in the art does not understand the use of the term in the context in which it is used, the term "about" will mean up to plus or minus 10 percent of the specified value.

[0096] The term “TNF-like ligand 1a (TL1A) ” as used herein, belongs to TNF superfamily member 15 (TNFSF15) , one of the members of the tumor necrosis factor superfamily, is a type II membrane protein that is expressed by antigen-presenting cells (including dendritic cells, B cells, and macrophages) , CD4+ and CD8+ T cells, and endothelial cells and can be expressed on the cell surface or secreted as soluble cytokines. TL1A expression can be induced by TNF-a and IL-1a, and TL1A is upregulated by the pro-inflammatory cytokines TNF and IL-1, and is also upregulated by immune complexes (IC) . TL1A can be cleaved from the cell membrane by a mechanism similar to that of TNF-α, and the soluble extracellular domain forms of TL1A have been reported. TL1A binds with high affinity to death receptor 3 (DR3) . The DR3 is a member of the TNF receptor family, also known as Wsl-1, Apo-3, TRAMP, and LARD, and is now known as TNF receptor superfamily member 25 (TNFRSF25) . DR3 is expressed by a variety of cells including CD4+ and CD8+ T cells, NK cells, and FOXP3+ regulatory T (Treg) cells. TL1A contacts DR3 on T cells, enhancing their responsiveness to IL-2, enhancing T cell proliferation as well as release of IFNγ and GM-CSF. It has also been demonstrated that TL1A synergizes with suboptimal levels of IL-12 / IL-18 to induce IFNγ production by CD4+ T cells. Downstream signals transduced by TL1A upon binding to the receptor DR3 can be involved in immune regulation, and blockade by TL1A is a unique mechanism with broad potential for application in inflammatory and fibrotic diseases.

[0097] The term "specific binding" as used herein refers to binding that is selective for antigen and distinguishable from unwanted or non-specific binding. The ability of an antigen-binding molecule to bind to a particular antigen can be measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) or other techniques familiar to those skilled in the art (e.g., surface plasmon resonance (SPR) techniques, as well as by conventional binding assays. In one example, for example as measured by SPR, the degree of binding of the antigen-binding molecule to the unrelated protein is less than about 10%of the degree of binding of the antigen-binding molecule to the antigen. In some examples, the dissociation constant (Kd) of the antigen-binding molecule is ≤1 nM, ≤100 nM, ≤10 nM, ≤1 nM, ≤0.1 nM, ≤0.01 nM, or ≤0.001 nM.

[0098] The term "affinity" or "binding affinity" as used herein refers to the strength of non-covalent interactions between a single binding site of a molecule (e.g., an antibody) and its binding ligand (e.g., an antigen) . Binding affinity can usually be expressed in terms of the dissociation constant (Kd) , which is the ratio of the dissociation rate constant to the association rate constants (koff and kon, respectively) . Thus, the equivalent affinity can include different rate constants as long as the ratio of the rate constants remains the same. The affinity can be measured by conventional methods known in the art, such as surface plasmon resonance (SPR) . In some embodiments, when the assay is performed with recombinant human TL1A as the analyte and the antibody as the ligand, the antibody binds at an equilibrium dissociation constant (KD) of about less than 10-6 M, e.g., about less than 10-7 M, 10-8 M, 10-9 M, 10-10 M, or even lower, and the affinity for binding to a predetermined antigen is at least twice the affinity for binding to a non-specific antigen (e.g., BSA, casein) other than that predetermined antigen or a closely related antigens.

[0099] The term "antibody" as used herein encompasses a wide variety of antibody structures including, but not limited to, monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, mono-specific and multi-specific antibodies (e.g., bispecific or tri-specific antibodies) , single-chained molecules, and antibody fragments, as long as they exhibit the desired antigen-binding activity. Within the light and heavy chains of the antibody, the variable and constant regions are connected by a "J" region of about 12 or more amino acids, and the heavy chain also contains a "D" region of about 3 or more amino acids. Each heavy chain consists of a heavy chain variable region (VH) and a heavy chain constant region (CH) . The heavy chain constant region consists of three domains (CH1, CH2 and CH3) . Each light chain consists of a light chain variable region (VL) and a light chain constant region (CL) . The light chain constant region consists of one domain CL. The constant region of the antibody can mediate the binding of immunoglobulins to host tissues or factors, including various cells of the immune system (e.g., effector cells) and the first component of the classical complement system (C1q) .

[0100] Unless otherwise indicated, the terms "antibody active fragment, " "antibody fragment, " "target binding fragment" , and "antigen binding fragment" are interchangeable in the context of the present invention and are intended to refer to an antibody fragment that retains the ability to specifically bind an antigen bound by a full-length antibody, such as a fragment that retains one or more CDR regions. Examples of antigen-binding fragments include, but are not limited to, Fab, Fab', F (ab') 2, and Fv fragments; bis-antibodies; linear antibodies; single-chain antibody molecules, such as single-chain Fv (ScFv) ; nanobodies and multi-specific antibodies formed from antibody fragments.

[0101] The term "variable region" or "variable domain" as used herein refers to a domain of the heavy or light chain of an antibody that is involved in the binding of an antigen-binding molecule to an antigen. The heavy and light chain variable domains (VH and VL, respectively) of natural antibodies typically have similar structures, where each domain contains four conserved framework regions (FR) and three hypervariable regions (HVR) . A single VH or VL domain may be sufficient to confer antigen-binding specificity. The term "variable" in the present invention refers to the fact that certain segments of the variable domain are generally different in sequence between antibodies. The V domain mediates antigen binding and limits the specificity of a given antibody to its particular antigen. However, variability is not uniformly distributed throughout the variable domain. Instead, it is concentrated in three segments called hypervariable regions (HVRs) within the light and heavy chain variable domains. The more highly conserved part of the variable domain is called the frame region (FR) . The variable domains of the natural heavy and light chains each contain four FR regions, most of which adopt a β-sheet configuration, connected by three HVRs, which form a loop connection and, in some cases, form part of the β-sheet structure. The HVRs in each chain are tightly held together by the FR region and, together with the HVRs of the other chains, contribute to the formation of the antigen-binding site of the antibody (see Kabat et al, SEQuences of Immunological Interest, 5th edition, National Institute of Health, Bethesda, MD (1991) ) . Constant domains are not directly involved in antibody-antigen binding and have other effector functions, such as being involved in antibody-dependent cytotoxicity of antibodies.

[0102] As used herein, the term "hypervariable region" or "HVR" refers to a region in the variable domain region of an antibody that is highly variable in sequence and / or forms a structurally defined loop ( "hypervariable loop" ) . Typically, natural four-chain antibodies contain six HVRs: three are present in the VH (H1, H2, H3) and three in the VL (L1, L2, L3) . HVRs typically contain amino acid residues from highly variable loops and / or from "complementary determining regions (CDRs) " , which have the highest sequence variability and / or are involved in antigen recognition. It should be understood by those skilled in the art that, unless otherwise specified, "CDR" and "complementary determining region" for a given antibody or region thereof (e.g., a variable region) are to be understood to encompass "CDR" and "complementary determining region" as defined by any of those known in the art. It is well known in the art that the CDR of an antibody can be defined in the art by a variety of methods, such as the Kabat definition rule based on sequence variability, the Chothia definition rule based on the location of structural loop regions, the Martin definition rule based on sequence and frame regions, the IMGT definition rule based on amino acid sequence comparison of germline V genes, and the CDR Grafting based antibody Reference tools for humanization design, etc. It should be understood by those skilled in the art that, unless otherwise specified, the terms "CDR" and "complementary determining region" of a given antibody or region thereof (e.g., a variable region) are to be understood to encompass CDRs as defined by any of the above known embodiments described in the present invention, and the defined amino acid sequences corresponding to the CDR definition rules should also fall within the scope of the present invention.

[0103] As used herein, "framework" or "FR" refers to variable domain residues other than hypervariable region (HVR) residues. The FRs of variable domains usually consist of the following four FR domains: FR1, FR2, FR3, and FR4. Thus, the HVR and FR sequences typically occur in VH (or VL) in the following sequence: FR1-H1 (L1) -FR2-H2 (L2) -FR3-H3 (L3) -FR4.

[0104] The "humanized antibody" used herein comprises the complete sequence of the humanized antibody obtained by splicing amino acid residues from a non-human hypervariable region (HVR) with the constant regions of the heavy and light chains from a human antibody. In some examples, the humanized antibody comprises at least one, and typically two, variable domains, wherein all or substantially all the HVRs (e.g., CDRs) correspond to the HVRs of the non-human antibody, and all or substantially all of the framework regions (FRs) correspond to the FRs of the human antibody. The humanized antibody may optionally comprise at least a portion of an antibody constant region derived from the human antibody. A "humanized form" of an antibody, such as a non-human antibody, is an antibody that has been humanized.

[0105] As used herein, the "class" of antibodies refers to the type of constant domain or constant region in the heavy chain of the antibody. There are five classes of antibodies: IgA, IgD, IgE, IgG, and IgM, and several of these classes can be further categorized into subclasses (isotypes) such as IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, and IgA2. The heavy chain constant domains corresponding to the different classes of immunoglobulins are referred to as α, δ, ε, γ and μ. In specific embodiments, the antibodies herein may be humanized IgG1 and / or IgG4 antibodies. In specific embodiments, the Fc region of the humanized IgG1 may have an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 132 or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto. In specific embodiments, the Fc region of the humanized IgG4 may have an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 133 or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.

[0106] The present invention also relates to amino acid sequence variants of the present invention. Amino acid sequence variants can be prepared by introducing appropriate modifications into the nucleotide sequence of the encoded molecule or by peptide synthesis. Such modifications include, for example, deletions, insertions and / or substitutions of residues in the amino acid sequence of the antibody. Any combination of deletions, insertions, and substitutions can be performed to obtain a final construct, which has the desired properties, such as antigen-binding activity.

[0107] The terms "polynucleotide" or "nucleic acid" or "nucleotide sequence" as used herein refer to isolated nucleic acid molecules or constructs, such as messenger RNA (mRNA) , virus-derived RNA or plasmid DNA (pDNA) . Polynucleotides may comprise conventional phosphodiester bonds or non-conventional bonds (e.g. an amide bond, such as those found in peptide nucleic acids (PNAs) ) . The term "nucleic acid molecule" refers to any one or more nucleic acid segments present in a polynucleotide, such as a DNA or RNA fragment.

[0108] The term "isolated" nucleic acid molecule or polynucleotide as used herein refers to a nucleic acid molecule, DNA or RNA, that has been isolated from its natural environment. In the present invention, the recombinant polynucleotide encoding the polypeptide comprised in the vector is also isolated. Other examples of isolated polynucleotides include recombinant polynucleotides in heterologous host cells or polynucleotides purified in solution. Isolated polynucleotides include polynucleotide molecules that would normally be present in the cell containing the polynucleotide molecule, but which are present outside the chromosome or at a chromosomal location different from their natural chromosomal location. Isolated RNA molecules include the in vivo or in vitro RNA transcripts of the present invention in positive and negative strand forms, as well as in double stranded form. The isolated polynucleotides or nucleic acids of the present invention further include such molecules that are synthetically generated. Alternatively, a polynucleotide or nucleic acid may be or may include a regulatory element, such as a promoter, a ribosome binding site, or a transcription terminator.

[0109] As used herein, "percentage homology" , "%homology" or "%sequence identity" is used in the context of the present invention to describe the degree of similarity between two nucleotide sequences or two amino acid sequences and, has the same meaning as "percentage identity" . The percentage homology of the two sequences can be calculated as follows, after aligning the two sequences, dividing the number of positions where the residues are identical by the total length of the aligned sequence and multiplying by 100%. Methods and tools for aligning two amino acid sequences or nucleotide sequences are well known in the art, such as the BLAST suite available on the NCBI website (Altschul, S. F. et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410) . As used herein, having "at least 85%sequence identity" to a sequence means having at least 85%, at least 90%, at least 91%, at least 92%, at least 93%, at least 94%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, or at least 99%sequence identity to the sequence.

[0110] The terms "vector" or "expression vector" and "expression construct" used herein can be used interchangeably, referring to DNA molecules that can be operably linked to specific genes and introduced into target cells to direct expression. The vectors include vectors as self-replicating nucleic acid structures and those incorporated into the genome of a host cell into which they have been introduced. The expression vectors of the present invention comprise an expression cassette. Expression vectors can allow transcription of large amounts of stable mRNA. Once the expression vector is in the target cell, a ribonucleic acid molecule or protein encoded by the gene is generated by the cellular transcription and / or translation machinery.

[0111] The terms "host cell" , "host cell line" and "host cell culture" used herein can be used interchangeably, referring to cells into which exogenous nucleic acids have been introduced, and also encompassing the progeny of such cells. Host cells include "transformants" and "transformed cells" , including primary transformed cells and progeny derived from them. The nucleic acids of the progeny may not be identical to those of the parental cells and can contain mutations. Host cells include cultured cells, such as cultured mammalian cells, such as CHO cells, HEK293 cells, Vero cells, BHK cells, NS0 cells, SP2 / 0 cells, YO myeloma cells, P3X63 mouse myeloma cells, PER cells, PER. C6 cells or hybridoma cells, yeast cells, insect cells and plant cells. Host cells of the present disclosure also include cells contained within a transgenic animal, a transgenic plant, or a cultured plant or animal tissue.

[0112] The term "antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity" or "ADCC" used herein refers to a form of cytotoxicity where a secreted immunoglobulin binds to a Fc receptor (FcR) present on certain cytotoxic cells (such as NK cells, neutrophils, and macrophages) , enabling these cytotoxic effector cells to specifically bind to antigen-bearing target cells and subsequently kill them with cytotoxic toxins. The major cells mediating ADCC are NK cells, which express only FcγRIII, whereas monocytes express FcγRI, FcγRII, and FcγRIII. In order to assess the ADCC activity of a molecule of interest, in vitro and in vivo ADCC assays can be performed, and these methods are known to those skilled in the art. An exemplary assay for assessing ADCC activity is provided in Examples herein.

[0113] The terms "treating" a subject's disease or "treating" a subject suffering or suspected of suffering from a disease, as used herein, refer to administering medication to a subject, such as administering one or more agents, which reduces or prevents the worsening of at least one symptom of the disease. Accordingly, in one embodiment, "treating" refers, in particular, to delaying progression, accelerating remission, inducing remission, increasing remission, accelerating recovery, increasing the efficacy of alternative therapies, or decreasing resistance to, alternative therapies, or combinations thereof.

[0114] The term "diagnosis" as used herein refers not only to "judgment" , but also to "determination" , "distinguishing" , "identification" , "examination" , "detection" and "prediction" . In some embodiments, the diagnosis includes distinguishing or assisting in distinguishing a lesion, determining a degree of progression of a disease, or predicting a risk of disease prevalence, a treatment effect, a prognosis, and a risk of recurrence.

[0115] The term "prevention" used herein is well known in the art, when used in relation to conditions such as local recurrence, is well-known in the art. It encompasses reducing the occurrence of medical condition symptoms in a subject or delaying the onset of such symptoms relative to subjects who have not received the composition. Accordingly, cancer prevention includes, for example, reducing the number of detectable tumors in a population of patients receiving prophylactic treatment relative to an untreated control population, and / or delaying the appearance of detectable tumors in a treated population relative to an untreated control population, for example, a statistically and / or clinically significant amount. The compositions of the present invention may be administered as foodstuffs, such as nutritional supplements. Generally, the compositions of the present invention are used for the treatment of humans, although they can be used for the treatment of animals, including monogastric mammals, such as poultry, swine, cats, dogs, horses or rabbits. The compositions of the present invention may be used to enhance the growth and performance of animals. If administered to animals, oral gavage may be used.

[0116] The pharmaceutical compositions provided by the present invention may comprise pharmaceutically acceptable excipients, diluents or carriers. Acceptable carriers or diluents for therapeutic use are well known in the pharmaceutical field. Examples of suitable carriers include lactose, starch, glucose, methylcellulose, magnesium stearate, mannitol, or sorbitol, among others. Examples of suitable diluents include ethanol, glycerol, and water. The choice of pharmaceutical carrier, excipient or diluent can be based on the intended route of administration and standard pharmaceutical practice. The pharmaceutical composition may comprise as a carrier, excipient or diluent, or any suitable binder, lubricant, suspending aid, coating agent or solubilizer, etc., in addition to the carrier, excipient or diluent. Examples of suitable binders include starch, gelatin, natural sugars, and natural or synthetic gums. Wherein the natural sugar is, for example, glucose, anhydrous lactose, free-flowing lactose, beta-lactose, or corn sweetener. Natural or synthetic gums are, for example, gum Arabic, astragalus gum, sodium alginate, carboxymethyl cellulose, or polyethylene glycol. Examples of suitable lubricants include sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, or sodium chloride, among others. Preservatives, stabilizers, dyes and even flavoring agents can be provided in the pharmaceutical compositions. Examples of preservatives include sodium benzoate, sorbic acid or parabens. Antioxidants and suspending agents can also be used. Antioxidants and suspending agents can also be used.

[0117] For example, the antibodies of the present disclosure or antigen-binding fragments thereof may be incorporated into pharmaceutical compositions suitable for parenteral administration (e.g., intravenous, subcutaneous, intraperitoneal, intramuscular) . These pharmaceutical compositions can be prepared in a variety of forms, such as liquid, semi-solid, and solid dosage forms, among others, including but not limited to, liquid solutions (e.g., injection and infusion solutions) , dispersions or suspensions, tablets, pills, powders, liposomes, and suppositories. Typical pharmaceutical compositions are in the form of injection or infusion solutions. The antibodies of the present disclosure or antigen-binding fragments thereof may be administered by intravenous infusion, injection, intramuscular or subcutaneous injection.

[0118] The term "subject" as used herein includes any human or non-human animal. For example, the methods and compositions of the present invention may be used to treat a subject suffering from cancer. The term "non-human animals" includes all vertebrates, e.g. mammals and non-mammals such as non-human primates, sheep, dogs, cows, chickens, amphibians, reptiles, etc.

[0119] Examples and drawings are provided below to facilitate understanding the present disclosure. It should be understood, however, that these Examples and drawings are intended to illustrate the present disclosure only, but do not constitute any limitation. The real scope of protection of the present disclosure is set forth in the claims. It should be understood that any modifications and changes can be made without departing from the spirit of this disclosure.

[0120] EXAMPLE

[0121] Example 1. Preparation of anti-TL1A monoclonal antibody by hybridoma technology

[0122] Balb / c mice were immunized with the expressed human TL1A protein (Genbank No. : NP_005109.2) as an immunogen. Subcutaneous injections were administered at 2-week intervals for a total of 3 times, with a final intraperitoneal booster immunization. Hybridoma monoclonal cells were prepared by taking spleen cells and myeloma cells SP2 / 0 from the immunized mice in an appropriate ratio (2: 1) and electrofusing them. Hybridoma cells were cultured in selective medium HSFM-HAT (SIGMA, Cat#H0262) , and after 7-10 days, the medium was changed to HT culture medium (SIGMA, Cat#H0137) for 3-4 days, and the hybridoma supernatant samples were assayed by ELISA on days 10-14 to screen out 111 antibody-expressing cell lines with strong binding to TL1A. Using a reporter gene method, the biological activity of the hybridoma culture supernatant in blocking TL1A / DR3 was preliminarily assayed, 20 strains of hybridomas with significant blocking activity were selected from them for subcloning, and the secreted antibodies were purified to prepare mouse monoclonal antibodies.

[0123] Example 2. Affinity assay of 20 hybridoma monoclonal antibodies

[0124] Bio-Layer Interferometry (BLI) was used to determine the affinity of 20 hybridomas. All of 20 hybridoma monoclonal antibodies were diluted to 30 nM, and the human TL1A protein was serially diluted from 50 nM to 3.125 nM by doubling dilution. 20 hybridoma monoclonal antibodies were loaded at 400 rpm onto an mFc probe (Gator) , and then the diluted human TL1A proteins of different gradients were allowed to bind to the mFc probes with antibodies attached. The probes with antigen-antibody complexes bound were placed into analyte-free Q buffer (10 nM PBS (pH 7.4) + 0.02%Tween + 0.2%BSA) to dissociate the bound analytes. The probe was immersed in Regeneration buffer (10 nM glycine, pH 1.7) to remove any residual bound analyte, and then the probe was regenerated and stored. The affinity data were obtained by integrating the fitted lines for each concentration using the analysis software provided with Gator system, and the results are shown in Table 1.

[0125] Table 1. Affinity results of 20 hybridoma monoclonal antibodies

[0126] Example 3. Biological Activity Assay of 20 Hybridoma Monoclonal Antibodies

[0127] The plasmid containing the NF-κB Luc2p Hygromycin gene was transferred into TF-1 cells to construct a TF-1-NF-κB luciferase reporter gene cell line. TF-1-NF-κB-luciferase cells were plated at 60,000 cells / 90 μL per well and then cultured overnight under starved conditions. On the following day, 0.65 μg / ml of human TL1A stimulating factor working solution was configured, with which the antibody samples were diluted at a starting antibody concentration of 30 μg / ml, and the antibody was diluted by a 3-fold gradient for 10 different concentrations, added to the positive wells in which the cells had been plated, and incubated for 3 hours in a 37℃ incubator. Finally, 100 μL of One-Lite reagent (Vazyme) was added to each well and incubated at room temperature for 5 minutes before reading the chemiluminescence values with a TECAN multifunctional microplate reader. The data were also plotted using Prism 5 (GraphPad) software to calculate the IC50 value for the half-maximal inhibitory concentration, and the results are shown in Table 2.

[0128] Table 2. Biological activity results of 20 hybridomas Monoclonal Antibodies

[0129] Example 4. Cross-reactivity assay of 20 hybridoma monoclonal antibodies with different species of TL1A

[0130] ELISA was used to detect the cross-binding ability of 20 anti-TL1A hybridoma antibodies to expressed and purified human TL1A, monkey TL1A, rat TL1A and mouse TL1A (prepared with reference to CN105814081A) , respectively. TL1A of different species was all diluted to 1 μg / ml, and at 100 μL / well, coated onto the wells at 4℃ overnight. On the following day, the plates were washed and blocked with 5%skimmed milk for 2h. Then the plate was washed and 3μg / ml antibody sample was added and incubated at 37℃ for 1h. The plates were washed, 100 μL of HRP-labeled goat anti-mouse secondary antibody (Solarbio, K0031G-HRP) was added to each plate, and the plates were incubated at 37℃ for 30 min. TMB substrate solution was then added for color development at 37℃for 5 minutes, followed by the termination of the reaction with the addition of 50 μL of H2SO4, and the OD450 values were subsequently read using a TECAN multifunctional microplate reader, and the results are shown in Table 3.

[0131] Table 3. Binding data of 20 hybridomas monoclonal antibodies with different species of TL1A

[0132] Note: "-" in the table means no binding.

[0133] Example 5. Sequencing of Hybridoma Antibodies

[0134] RNA from 20 anti-TL1A hybridoma cell lines was extracted and variable region DNA sequences from the expressed antibodies were obtained by RT-PCR cloning. Generally, homogenates of hybridoma cells with 1 million to 5 million subclones were used for total RNA isolation. First-strand cDNA was subsequently generated using Superscript II or Superscript III reverse transcriptase (Invitrogen) . Subsequently, double-stranded cDNA for the variable region of anti-TL1A IgG was generated and amplified by PCR using primers specific for the constant region and 5’ Cap (e.g. SMART IIa oligo) . The resulting RT-PCR product was cloned into the vector and sequenced by conventional methods.

[0135] Table 4 below illustrates the CDR sequences of the 20 antibodies screened.

[0136] Table 4. CDR sequences of the antibodies

[0137] Example 6. Humanization of Hybridoma Antibody Sequences

[0138] The murine monoclonal antibodies 2G11-1, 41E10-1, 11F5-4 were humanized in this example. Three IgG4 humanized molecules with different rates of humanization were designed respectively for each molecule. The three 2G11-1 humanized antibody molecules were named 2G11-1-1, 2G11-1-2, and 2G11-1-3. The three 41E10-1 humanized antibody molecules were named 41E10-1-1, 41E10-1-2, and 41E10-1-3; The three 11F5-4 humanized antibody molecules were named 11F5-4-1, 11F5-4-2, and 11F5-4-3. The heavy and light chain sequences of the humanized antibody molecules are shown in Table 5 below.

[0139] Table 5. Heavy and light chain sequences of humanized antibody molecules

[0140] Example 7. Transient expression, purification and identification of IgG4 humanized antibody

[0141] ExpiCHO-STM cells with a density of 2×106 cells / ml were configured with culture medium, placed in erlenmeyer flasks, and cultured at 100 rpm, 37℃ and 5%CO2 for 20-25 h, and only when the cell density reached about 5×106 cells / ml, and the cells were in the logarithmic growth phase with a viability of more than 95%, they could be used for transfection experiments. The recombinant plasmid expressing the humanized antibody was added to Trans Buffer A (Medium Bank) and gently mixed and added with PEI to mix gently. The diluted PEI solution was added to the corresponding diluted plasmid, mixed gently and incubated at room temperature for 5 min. The mixture was added into an erlenmeyer flask containing ExpiCHO-STM cells and cultured in a shaker at 100 rpm, 37℃, and 5%CO2. After 24 h post-transfection, the transfected cells were cultured in a shaker at 100 rpm, 32℃, and 5%CO2. After 10-14 d post-transfection, the cell cultures were collected by centrifugation at 3000 rpm for 15 min. The supernatant obtained was subjected to affinity chromatography using a HiTrap MabSelect SuRe prepacked column. The column was rinsed with pure water and equilibrated with PB buffer, then the supernatant was loaded onto the chromatography column for binding. After loading, the column was rinsed with PB buffer to the baseline, and the protein was eluted with 0.1 M citrate eluent. After neutralizing with 1 M Tris-HCl, the eluted protein was concentrated appropriately and loaded onto the Superdex200 well equilibrated with PBS for further purification. The collected protein was concentrated to a certain concentration, and subjected to SDS-PAGE electrophoresis for identification, and the results are shown in Figure 1A and Figure 1B, and subjected to SEC-HPLC, and the results are shown in Table 6. The IgG4 humanized antibodies, corresponding parental hybridoma antibodies and anti-TL1A positive control antibodies were simultaneously tested for affinity and biological activity, and the results are shown in Table 6. The biological activity and affinity of 2G11-1 and 41E10-1 humanized antibodies were enhanced, and the biological activity was higher than that of the positive control antibodies.

[0142] Table 6. Assay results of Purity, affinity and biological activity of IgG4 humanized antibodies

[0143] Example 8. Relative binding activity of IgG4 humanized antibodies

[0144] ELISA was used to detect binding ability of 2G11-1-3, 41E10-1-3 and anti-TL1A positive control antibody PC (PRA023) to human TL1A. The human TL1A was diluted to 3 μg / ml, and at 100 μL / well, coated onto the wells at 4℃ overnight. On the following day, the plates were washed and blocked with 5%skimmed milk for 2h. Then the plate was washed and the antibody samples with different concentration gradients were added and incubated at 37℃ for 1h. The plates were washed, 100 μL of HRP-labeled goat anti-human secondary antibody was added to each plate, and the plates were incubated at 37℃ for 30 min. TMB substrate solution was then added for color development at 37℃ for 5 minutes, followed by the termination of the reaction with the addition of 50 μL of H2SO4, and the OD450 values were subsequently read using a TECAN multifunctional microplate reader, and the data were also plotted using Prism 5 (GraphPad) software and the results are shown in Figure 2A and Figure 2B. 2G11-1-3, 41E10-1-3 humanized antibodies have good binding activity to hTL1A.

[0145] Example 9. Evaluation of the in vitro activity of IgG4 humanized antibody

[0146] Firstly, fresh anticoagulant blood was diluted 1: 1 with PBS, and the diluted blood samples were slowly added to the top of lymphocyte separation medium Ficoll-Paque, centrifuged to collect the PBMCs. The PBMCs were washed twice with sterile PBS, and then resuspended in 1640 medium (Gibco) containing three cytokines, IL12, IL15, and IL18, and cultured in an incubator for 48h. Human TL1A was diluted and the antibody to be tested was diluted in different concentration gradients and added into 96-well plates at the same time with PBMC cells cultured for 48h, and incubated in 37℃, 5%CO2 incubator for 48 hours. The levels were then quantified using the Solarbio Human INF-γ kit and plotted using Prism 5 (GraphPad) software, and the results are shown in Figure 3. The data showed that both 2G11-1-3 and 41E10-1-3 humanized antibodies had good in vitro activity.

[0147] Example 10. Non-specific detection of IgG4 humanized antibodies with TL1A homologs (TNF family factor)

[0148] Non-specificity of 2G11-1-3 and 41E10-1-3 with different TNF family factors (TL1A homologs) was detected by ELISA, respectively. Human TL1A (TNFSF15) , TNFSF10, TNFSF6, TNFSF14, TNFα, and TNFβ (SinoBiological) were all diluted to 3 μg / ml, and at 100 μL / well, coated onto the wells at 4℃ overnight. On the following day, the plates were washed and blocked with 5%skimmed milk for 2h. Then the plate was washed and the antibody samples with different concentration gradients were added and incubated at 37℃ for 1h. The plates were washed, 100 μL of HRP-labeled goat anti-human secondary antibody was added to each plate, and the plates were incubated at 37℃for 30 min. TMB substrate solution was then added for color development at 37℃ for 5 minutes, followed by the termination of the reaction with the addition of 50 μL of H2SO4, and the OD450 values were subsequently read using a TECAN multifunctional microplate reader, and the data were also plotted using Prism 5 (GraphPad) software and the results are shown in Figure 4A and Figure 4B. Although TNFSF6 (FAS ligand) , TNFSF10 (TRAIL) , TNFSF14 (LIGHT) , TNF-β, and TNF-α had 36%, 35%, 31%, 30%, and 29%homology with TL1A, respectively, 2G11-1-3 or 41E10-1-3 IgG4 humanized antibodies did not non-specifically bind to these TL1A homologs, suggesting that the humanized antibodies had better specific binding to TL1A.

[0149] Example 11. Cross-reactivity of IgG4 humanized antibody with other species of TL1A

[0150] The cross-reactivity of IgG4 molecules with other species of TL1A was determined using the BLI technique. The 2G11-1-3 and 41E10-1-3 IgG4 humanized antibodies were first diluted to 15 nM and absorbed onto the ProA probe at 400 rpm  / min. Different species of TL1A were serially diluted from 100nM by doubling dilution to 5 concentration gradients. The program was set up so that the diluted TL1A bound to probes with attached 2G11-1-3 and 41E10-1-3 humanized antibodies, respectively for a fixed period of time. After binding was complete, the probes with bound complex were then transferred to analyte-free Q buffer to dissociate the bound analytes. KD values were obtained by fitting the data using the built-in software of the Gator instrument. The results are shown in Table 7.2G11-1-3 IgG4 humanized antibody did not bind to mouse TL1A and bound strongly to monkey and rat TL1A; 41E10-1-3 bound weakly to mouse TL1A and strongly to monkey and rat TL1A.

[0151] Table 7. Affinity determination of IgG4 molecules with other species of TL1A

[0152] Example 12. Expression, purification and identification of IgG1 humanized antibody

[0153] The heavy chain constant region and Fc region of the IgG4 humanized molecule obtained in Example 6 were replaced with the heavy chain constant region and Fc region of IgG1. The modified 2G11-1-3 and 41E10-1-3 IgG1 humanized antibodies (with the heavy chain amino acid sequences SEQ ID NO: 134 and 135, respectively) were obtained, expressed, purified (see Example 7 for steps) and identified. Purity, isoelectric point, and affinity were assayed, respectively, and the results are shown in Table 8. The relative binding activity is shown in Figure 5, and the biological activity is shown in Figures 6A to 6C. The data showed that the biological activity and affinity of the IgG1 humanized antibody did not change significantly.

[0154] Table 8. Identification of IgG1 humanized antibodies

[0155] Example 13. Thermal Stability Analysis of IgG1 Humanized Antibody

[0156] The thermal stability of IgG1 humanized antibodies was analyzed by the Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, by means of a MicrolCalTM VP-DSC system (Malvern, UK) , based on the principle of differential scanning calorimetry (DSC) . The samples and buffers were degassed by a vacuum pump for 5 min and then assayed. The instrument parameters were set as follows: heating rate: 60℃ / h; temperature range: 25-95℃; feedback mode: none. Sample spectra were corrected by subtracting buffer spectrum, and data analysis was performed by the MicrolCal Origin 7.0 (Origin-Lab Corp., MA) software provided with the system. The results are shown in Table 9 and Figure 7. Tm1 is the melting temperature at which the interface of the two CH2 domains melts, and Tm2 is the melting temperature at which the interface of the heavy and light chains melts. The data show that the Tm1 > 65℃ for 2G11-1-3 IgG1 and 41E10-1-3 IgG1 humanized antibodies, and Tm2 corresponding to the Fab domain > 80℃, and the antibodies are relatively stable.

[0157] Table 9. Thermal stability results of IgG1 humanized antibody

[0158] Example 14. Fc Function Assay of IgG1 Humanized Antibodies

[0159] Bio-Layer Interferometry (BLI) was used to determine Fc Function of IgG1 Humanized Antibodies.

[0160] (1) Affinity assay of IgG1 humanized antibodies with FcγR. The hFcγRI (NP_000557.1) , hFcγRIIa (131H) (P12318-1) , hFcγRIIa (131R) (P12318-1) , hFcγRIIb (NP_001002274.1) , hFcγRIIIa (158F) (P08637-1) , hFcγRIIIa (158V) (P08637-1) , hFcγRIIIa (158V) (P08637-1) ) fusion proteins were labeled with a biotin labeling kit. These labeled proteins were then diluted to a concentration of 60 nM and loaded onto the SA probe at 400 rpm / min, and then the diluted IgG1 humanized antibodies with different gradients were conjugated to the SA probe attached with FcγR. The probes bound with antigen-antibody complexes were placed into the analyte-free Q buffer to dissociate the bound analytes, and the affinity values were obtained by fitting with the software provided with the instrument and the results are shown in Table 10. The results showed that the IgG1 humanized antibody only bound weakly to FcγRI and not to other FcγR, indicating that the ADCC function of the humanized antibody was greatly reduced.

[0161] (2) Affinity assay of IgG1 humanized antibody with FcRn (Acrobiosystems) at different pH buffer systems. The hRcRn was labeled with biotin labeling kit, diluted to a concentration of 25 nM, loaded onto the SA probe, and then reacted with IgG1 humanized antibodies of different gradients under pH 6.0 and pH 7.4 buffer systems, respectively, and then dissociated under the buffer of the corresponding pH, and the affinity values were obtained by fitting with the software provided with instrument, and the results are shown in Table 10. The results showed that the humanized antibody bound to FcRn only at pH 6.0 and not at pH 7.4.

[0162] (3) Affinity assay of IgG1 humanized antibody with C1q (Quidel) . The IgG1 humanized antibody and the positive control antibody was labeled simultaneously with a biotin labeling kit, diluted to a concentration of 10 μg / ml, loaded onto the SA probe, and then conjugated to diluted C1q of different gradients. The probes bound with antigen-C1q complexes were placed into the analyte-free Q buffer to dissociate the bound analytes, and the affinity values were obtained by fitting with the software provided with the instrument and the results are shown in Table 10. The results showed that the humanized antibody did not bind to C1q, suggesting that mutations in the corresponding binding site on Fc reduced the antibody CDC function.

[0163] Table 10. Fc function assay results of IgG1 humanized antibody

[0164] Example 15. ADCC Assay of IgG1 Humanized Antibody

[0165] The IgG1 humanized antibody and Rituximab were added to a 96-well plate at 200 μg / ml as the first well concentration, following serial 5-fold dilutions across 8 gradients, respectively. The HEK293 / human TL1A target cells were resuspended with medium and inoculated into 96-well plates at a density of 2×104 cells per well. The plates were gently mixed and incubated for half an hour at room temperature. The PBMC cells were washed with medium and resuspended, then at 2×l05 cells / well plated into the corresponding 96-well plates and incubated in the incubator for a total of 6 hours. The 96-well plate was centrifuged at 250g for 10 minutes, and 100μL of the supernatant was aspirated and transferred into a new 96-well transparent flat-bottom plate. Each well was then filled with 100μL of working solution and incubated in the dark at room temperature for 30 minutes. The absorbance at dual wavelengths of 490nm and 620nm were detected on the multifunctional microplate reader to calculate the cell killing rate, and the data were plotted using Prism 5 (GraphPad) software. The results are shown in Figure 8. Rituximab showed an ADCC effect, and neither of the two IgG1 humanized antibodies, 41E10-1-3 and 2G11-1-3, had the ADCC effect.

[0166] Example 16. CDC Assay of IgG1 Humanized Antibody

[0167] The IgG1 humanized antibody and Rituximab were added to a 96-well plate at 1000 μg / ml as the first-well concentration, following serial 5-fold dilutions across 8 gradients, respectively. The treated HEK293 / human TL1A target cells were resuspended with DPBS and inoculated into 96-well plates at 5×104 cells / well. The cell culture plate was incubated at room temperature for 30 min, and then incubated for 16 h in a 37℃, 5%CO2 incubator after adding 10%guinea pig serum (10 μL) . Then 100 μL of Cell Titer-Glo reagent was added to each well, gently mixed, and the chemiluminescence signals were detected on a multifunctional microplate reader, and the data were plotted using Prism 5 (GraphPad) software, and the results are shown in Figure 9. Rituximab showed a CDC effect, and neither of the two IgG1 humanized antibodies, 41E10-1-3 and 2G11-1-3, had the CDC effect.

[0168] Example 17. Stability Assay of IgG1 Humanized Antibody

[0169] Stability tests were performed on two IgG1 humanized antibodies, 2G11-1-3 and 41E10-1-3, each set at two concentrations of 30 mg / ml and 2 mg / ml. The high concentration samples were subjected to accelerated stability testing for 0 week, 1 week, 2 weeks, and 4 weeks at 40℃. The low concentration samples were divided into two groups; one group was subjected to repeated freeze-thaw cycle treatments of 3, 5, and 10 times, while the other group was subjected to accelerated treatments for 0 week, 1 week, 2 weeks, and 4 weeks at 40℃. The prepared samples were assayed for protein content, purity, isoelectric point, charge heterogeneity, reduced and non-reduced CE-SDS, biological activity and relative binding activity to evaluate the stability of IgG1 humanized antibody. The results are shown in Tables 11, 12 and 13. Taken together all the data, it was shown that both IgG1 humanized antibodies, 2G11-1-3 and 41E10-1-3, are relatively stable under freeze-thaw conditions.

[0170] Table 11. High temperature stability results for 30 mg / ml formulations

[0171] Table 12. High temperature stability results for 2 mg / ml formulations

[0172] Table 13. Freeze-thaw stability results for 2 mg / ml formulation

[0173] Example 18. Preventive and Therapeutic Effects of IgG1 Humanized Antibody on a Rat Model of DSS-Induced Ulcerative Colitis

[0174] (1) Animal selection and grouping, modeling, and administration protocols. Twenty-four male SD rats (6-7 weeks old) were randomly divided into four groups according to body weight: G1 was a healthy control group, G2 was a model control group, G3 was a low-dose group of TL1A antibody (41E10-1-3 IgG1) (5 mg / kg, twice a week, s. c. ) , and G4 was a high-dose group of TL1A antibody (41E10-1-3 IgG1) (50 mg / kg, twice a week, s. c. ) , 6 animals in each group. Animals were acclimatized for 3 days and then randomly grouped according to their body weights. Animals in the modeling groups began drinking water supplemented with dextrose sodium sulfate (DSS) at a concentration of 5% (wt / vol) on day 1 of the test (D1) for 7 days (defining days 1-8 as the DSS period) , to induce the colitis model. The rats were euthanized on D8. The corresponding drugs or D-PBS were injected subcutaneously before and after modeling on D1, D4, and D7 for a total of 3 times.

[0175] (2) Detection indicators

[0176] a. General clinical observations. During the test period, general clinical observations were conducted twice daily on all surviving animals in each of the above groups, monitoring their health status and mortality. Routine examinations encompassed the appearance and physical signs, mental state, behavioral activities, food and water intake, fecal property, weight changes, and any other abnormalities of the test subjects. Special attention was paid to conditions such as weight loss, lethargy, disheveled fur, reduced activity levels, diarrhea, perianal filthy, fecal shape, and fecal occult blood.

[0177] b. Body weight. Body weights were determined for each of the above groups of animals: one weighing before grouping, one daily weighing during the test period, one weighing before euthanasia, and one weighing of any of unexpectedly dead animals.

[0178] c. Fecal property and degree of hematochezia. The fecal property and degree of hematochezia were scored once daily from the day of modeling (D1) for the surviving animals in each of the above groups. The rules are as follows: fecal property: 0 = normal; 1 = Soft but formed feces; 2 = Soft unformed feces; 3 = Loose feces; 4 = watery feces; degree of hematochezia: 0 = normal; 1=positive for occult blood + to ++; 2=positive for occult blood +++ to ++++; 3=blood streaks visible in feces; 4=blood in the feces visible to the naked eye.

[0179] d. Colon length and weight measurement. Before dissection, the rats were required to fast for at least 4 h, euthanized, and the abdominal cavity was rapidly opened to remove colorectal tissues. The tissue was measured for length, weighed, scored for colorectal mucosa, and photographed. During the test, near-death animals and animals found dead were subjected to gross anatomy.

[0180] e. Splenic index analysis. After euthanasia of the animal, the abdominal cavity was quickly dissected, the spleen was removed and weighed for wet weight using an analytical balance after removing the surrounding adherent fat and connective tissue to calculate the organ coefficient.

[0181] Splenic organ coefficient (%) = spleen weight (mg)  / body weight (g) × 100 %.

[0182] (3) Statistical analysis. Measurements data are described using mean and standard deviation (Mean±SD) . Graphs were plotted and statistically analyzed using GraphPad Prism 9 software in the following process: the data were subjected to the Homogeneity of Variance test; the data with homogeneity of variance (P>0.05) were subjected to the One-way ANOVA, and the data that were tested to be different (P≤0.05) were further analyzed using LSD multiple comparison analysis; the data without he Homogeneity of Variance (P≤0.05) were subjected to Kruskal-Wallis nonparametric test, and the data that were tested to be different (P≤0.05) were subjected to pairwise comparisons using Mann-Whitney two-by-two comparative analysis, and P≤0.05 was considered to be significantly different. The intergroup differences in the assays between the healthy control group and the model control group, and between the model control group and each of the administering groups were mainly examined.

[0183] (4) Test results.

[0184] a. Animal survival and diarrhea incidence. By the endpoint of the test on D8, a total of three animals in the G2 model group had died, and no animals in the remaining groups had died. By the endpoint of the test on D8, the diarrhea rates of animals in the healthy control group (G1) , the model control group (G2) , 41E10-1-3 low dose group (G3) , and 41E10-1-3 high dose group (G4) were 0%, 100%, 50%, and 100%, respectively. The rates of diarrhea for animals in each of groups at D7 were 0%, 100%, 33.33%, 33.33%, respectively. The rates of diarrhea in animals in each of groups at D6 were 0%, 83.33%, 33.33%, 50%, respectively. Table 14 shows animal survival and diarrhea. According to the results in Table 14, prophylactic administration of 41E10-1-3 at 5 mg / kg injected twice weekly reduced mortality and diarrhea in rats with DSS-induced colitis.

[0185] Table 14. Record of survival and diarrhea of animals

[0186] b. Body Weight. The changes in body weight and the trend of body weight difference of the animals in the four test groups are detailed in Figures 10 and 11. Figure 10 shows the effect of 41E10-1-3 on body weight in a SD rat model with DSS-induced colitis. As can be seen from Figure 10, there was a fluctuating trend of increasing body weight in healthy control (G1) animals during the test period. The body weight of animals in the modeling groups (G2-G4) increased slowly from the 3rd day of DSS drinking (D4) , and was significantly lower than that of the G1 group at D7 and D8 (P<0.05) , and the difference in body weights was highly significant lower than that of the G1 group (P<0.001) ; among them, the body weights of the 41E10-1-3 high dosage group (G4) declined more slowly, and the degree of body weight loss was lower than that of the model control group (G2) , and the body weight of the 41E10-1-3 low dose group (G4) decreased more slowly at D7 and D8, and the degree of body weight loss was lower than that in the model control group (G2) . According to the results of Figures 10 and 11, 41E10-1-3 can improve the body weight loss in rats with the DSS-induced ulcerative colitis.

[0187] c. Scores of fecal property and degree of hematochezia. The statistical results of the scores of fecal property and degree of hematochezia in the four groups of animals are shown in Figures 12 and 13. Figure 12 shows the effect of 41E10-1-3 on fecal property scores in a SD rat model with DSS-induced colitis. Figure 13 shows the effect of 41E10-1-3 on fecal occult blood scores in a DSS-induced colitis model in SD rats. It can be seen from the results shown in Figures 12 and 13 that, compared to the healthy control group (G1) , the model control group (G2) and the administering groups (G3, G4) exhibited clinical symptoms associated with colitis, such as soft feces and positive fecal occult blood, starting from the second day of drinking DSS water (D3) . The clinical scores continuously increased, and by D4, the fecal property and fecal scores were significantly higher than those of the healthy control group (G1) . The fecal property score of animals in the 41E10-1-3 low-dose group (G3) from D5 to D8 was milder than that of the model control group (G2) , and the fecal occult blood condition of animals in the 41E10-1-3 low-dose group (G3) from D6 to D8 was milder than that of the model control group (G2) . According to the results in Figures 12 and 13, the 41E10-1-3 low-dose group can ameliorate diarrhea and fecal occult blood in rats with the DSS-induced ulcerative colitis.

[0188] d. Colon length and weight. In this test, the colon tissue of each group of animals was assessed at the test endpoint (D8) . The colon length is shown in Figure 14, and the colon weight is shown in Figure 15. Figure 15 shows the effect of 41E10-1-3 on colon weight in a SD rat model with DSS-induced colitis. Figure 14 shows the effect of 41E10-1-3 on colon length in a SD rat model with DSS-induced colitis. As can be seen from Figures 14 and 15, the colon length and weight of the animals in the model control group (G2) were significantly shortened compared to the healthy control group (G1) ; the colon length and weight of the animals in the 41E10-1-3 low-dose group (G3) were somewhat increased compared to the model control group (G2) . According to the results in Figure 14 and Figure 15, 41E10-1-3 low dose can ameliorate colon shortening in rats with DSS-induced ulcerative colitis and had a preventive effect on colon shortening in rats with DSS-induced colitis.

Claims

1.An antibody against TNF-like ligand 1a (TL1A) or antigen-binding fragment thereof, characterized in that, the antibody or antigen-binding fragment thereof comprises at least one light chain variable region and at least one heavy chain variable region;wherein the heavy chain variable region has an HCDR1 as shown in general formula (1) , an HCDR2 as shown in general formula (2) , and an HCDR3 as shown in general formula (3) , and / orthe light chain variable region has an LCDR1 as shown in general formula (4) , an LCDR2 as shown in general formula (5) , and an LCDR3 as shown in general formula (6) ,the general formula (1) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10, wherein, X1 is selected from the group consisting of G and D, or is absent, X2 is selected from the group consisting of H, D, and Y, or is absent, X3 is selected from the group consisting of S and T, or is absent, X4 is selected from the group consisting of F, I, and N, or is absent, X5 is selected from the group consisting of S and T, or is absent, X6 is selected from the group consisting of S, D, H, G, N, and K, X7 is selected from the group consisting of Y, G, S, T, C, and M, X8 is selected from the group consisting of W, Y, V, G, and T, X9 is selected from the group consisting of I, W, M, and V, and X10 is selected from the group consisting of E, N, S, H, and G;the general formula (2) has an amino acid sequence as shown in X1IX2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16, wherein, X1 is selected from the group consisting of E, L, W, R, T, and H, X2 is selected from the group consisting of L, Y, N, D, and S, X3 is selected from the group consisting of P, T, S, W, and Y, X4 is selected from the group consisting of G, Y, F, A, N, and S, X5 is selected from the group consisting of S, T, G, and D, X6 is selected from the group consisting of G, E, D, S, and R, X7 is selected from the group consisting of I, N, G, K, Q, E, Y, and S, X8 is selected from the group consisting of T, S, and P, or is absent, X9 is selected from the group consisting of N, Y, S, T, and K, X10 is selected from the group consisting of Y, H, and S, X11 is selected from the group consisting of N, A, and D, X12 is selected from the group consisting of E, Q, D, and P, X13 is selected from the group consisting of K, E, D, and S, X14 is selected from the group consisting of F, V, and L, X15 is selected from the group consisting of K, Q, and R, and X16 is selected from the group consisting of G and S;the general formula (3) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14, wherein, X1 is selected from the group consisting of S and H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of Y, I, and P, or is absent, X3 is selected from the group consisting of G, A, and R, or is absent, X4 is selected from the group consisting of T, D, I, Y, and L, or is absent, X5 is selected from the group consisting of H and G, or is absent, X6 is selected from the group consisting of R, Y, S, G, and T, or is absent, X7 is selected from the group consisting of R, G, A, Q, E, and D, or is absent, X8 is selected from the group consisting of T, D, N, R, Y, I, G, and A, or is absent, X9 is selected from the group consisting of H, S, Y, V, N, and L, or is absent, X10 is selected from the group consisting of W and Y, X11 is selected from the group consisting of F, A, and G, X12 is selected from the group consisting of F, M, and L, or is absent, X13 is selected from the group consisting of D, or is absent, and X14 is selected from the group consisting of V, C, F, Y, and S;the general formula (4) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13YX14X15, wherein, X1 is selected from the group consisting of G and R, or is absent, X2 is selected from the group consisting of S, or is absent, X3 is selected from the group consisting of S and A, or is absent, X4 is selected from the group consisting of Q and S, or is absent, X5 is selected from the group consisting of S, or is absent, X6 is selected from the group consisting of R, K, I, and S, X7 is selected from the group consisting of A and V, X8 is selected from the group consisting of S, T, H, and R, X9 is selected from the group consisting of E, Q, and S, or is absent, X10 is selected from the group consisting of N and D, or is absent, X11 is selected from the group consisting of I, V, and G, or is absent, X12 is selected from the group consisting of Y, S, K, G, N, and D, or is absent, X13 is selected from the group consisting of S, K, N, and T, or is absent, X14 is selected from the group consisting of L, V, I, and M, and X15 is selected from the group consisting of A, N, S, V, E, and H, or is absent,the general formula (5) has an amino acid sequence as shown in X1X2X3X4X5X6X7, wherein, X1 is selected from the group consisting of F, Y, N, D, I, K, and G, X2 is selected from the group consisting of A, T, and V, X3 is selected from the group consisting of R, T, K, and S, X4 is selected from the group consisting of R, T, I, K, and N, X5 is selected from the group consisting of L and R, X6 is selected from the group consisting of A, T, Q, H, F, and Y, and X7 is selected from the group consisting of D, E, P, S, and T;the general formula (6) has an amino acid sequence as shown in X1QX2X3X4X5X6X7X8T, wherein, X1 is selected from the group consisting of F, L, G, and H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of Q and H, or is absent, X3 is selected from the group consisting of G, H, T, W, V, and Y, X4 is selected from the group consisting of S, G, Y, N, and D, X5 is selected from the group consisting of H, E, R, T, S, Y, and N, X6 is selected from the group consisting of V, S, Y, L, N, D, and T, X7 is selected from the group consisting of P and L, and X8 is selected from the group consisting of L and Y, or is absent.2.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that,the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (1) , wherein X1 is G, X2 is selected from the group consisting of H and Y, X3 is selected from the group consisting of S and T, X4 is F, X5 is selected from the group consisting of S and T, X6 is selected from the group consisting of S, D, H, and G, X7 is selected from the group consisting of Y and S, X8 is selected from the group consisting of W, V, G, and T, X9 is selected from the group consisting of I, W, and M, and X10 is selected from the group consisting of E, N, and S;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (1) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is selected from the group consisting of N and K, X7 is selected from the group consisting of Y and C, X8 is G, X9 is M, and X10 is N;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is E, X2 is L or Y, X3 is P, X4 is G, X5 is S, X6 is G, X7 is selected from the group consisting of I and N, X8 is selected from the group consisting of T and S, X9 is selected from the group consisting of N and Y, X10 is Y, X11 is N, X12 is E, X13 is selected from the group consisting of K and E, X14 is F, X15 is K, and X16 is G;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is W, X2 is N, X3 is T, X4 is selected from the group consisting of F and Y, X5 is selected from the group consisting of T and S, X6 is selected from the group consisting of E and G, X7 is selected from the group consisting of K, Q, and E, X8 is P or T, X9 is T, X10 is selected from the group consisting of Y and H, X11 is A, X12 is D, X13 is D, X14 is F, X15 is K or R, and X16 is G;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is L, X2 is N, X3 is P, X4 is Y, X5 is S, X6 is G, X7 is G, X8 is T, X9 is selected from the group consisting of S and T, X10 is Y, X11 is N, X12 is Q, X13 is K, X14 is F, X15 is K, X16 is G;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is R, X2 is D, X3 is P, X4 is A, X5 is S, X6 is D, X7 is N, X8 is T, X9 is K, X10 is Y, X11 is D, X12 is P, X13 is K, X14 is F, X15 is Q, and X16 is G;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (2) , wherein X1 is H, X2 is selected from the group consisting of L and S, X3 is selected from the group consisting of W and Y, X4 is selected from the group consisting of N and S; X5 is selected from the group consisting of D and G, X6 is selected from the group consisting of S and R, X7 is selected from the group consisting of K and S, X8 is absent, X9 is Y, X10 is selected from the group consisting of Y and S, X11 is N, X12 is P, X13 is selected from the group consisting of D and S, X14 is L, X15 is K, and X16 is S;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (3) , where X1 is H, or is absent, X2 is selected from the group consisting of I and P, or is absent, X3 is selected from the group consisting of A and R, or is absent, X4 is selected from the group consisting of D, I, Y, and L, X5 is H, or is absent, X6 is selected from the group consisting of Y, S, G, and T, X7 is selected from the group consisting of R, G, A, and Q, X8 is selected from the group consisting of D, N, R, Y, and I, X9 is selected from the group consisting of S, Y and V, or is absent, X10 is Y, X11 is A, X12 is M, X13 is D, and X14 is selected from the group consisting of C, F, and Y;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is R, X7 is A, X8 is S, X9 is selected from the group consisting of E and Q, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is I, X12 is selected from the group consisting of Y and S, X13 is selected from the group consisting of S, K, and N, X14 is L, and X15 is selected from the group consisting of A and N;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 to X5 are absent, X6 is K, X7 is A, X8 includes S or T, X9 is selected from the group consisting of E and Q, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is selected from the group consisting of I and V, X12 is selected from the group consisting of K, G, and N, X13 is selected from the group consisting of S, K, and T, X14 is selected from the group consisting of L, I, and V, and X15 is selected from the group consisting of S and V;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , where X1 is selected from the group consisting of G and R, X2 is S, X3 is S, X4 is Q, X5 is S, X6 is I, X7 is V, X8 is H, X9 is S, X10 is selected from the group consisting of N and D, X11 is G, X12 is selected from the group consisting of D and N, X13 is T, X14 is L, and X15 is E;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in the general formula (4) , wherein X1 is absent, X2 is S, X3 is A, X4 is S, X5 is S, X6 is S, X7 is V, X8 is selected from the group consisting of R and S, X9 to X13 are absent, X14 is M, and X15 is H;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is N, X2 is A, X3 is K, X4 is T, X5 is L, X6 is selected from the group consisting of A and T, and X7 is E;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is Y, X2 is selected from the group consisting of A and T, X3 is selected from the group consisting of T and S, X4 is selected from the group consisting of I, T, and R, X5 is L, X6 is selected from the group consisting of Q, H, and A, and X7 is selected from the group consisting of D, P, and S;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in the general formula (5) , wherein X1 is G, X2 is selected from the group consisting of V and A, X3 is S, X4 is N, X5 is R, X6 is Y, and X7 is T;the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (6) , X1 is selected from the group consisting of F and L, X2 is absent, X3 is selected from the group consisting of G and H, X4 is selected from the group consisting of S and G, X5 is selected from the group consisting of H and E, X6 is selected from the group consisting of V and S, X7 is P, and X8 is L; and / orthe antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in the general formula (6) , wherein X1 is absent, X2 is selected from the group consisting of Q and H, X3 is selected from the group consisting of H, W, and V, X4 is selected from the group consisting of Y, N, and S, X5 is selected from the group consisting of T, S, and Y, X6 is selected from the group consisting of L, N, D, and T, X7 is P, and X8 is Y.3.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that, the heavy chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 1 to 13, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 14 to 28, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 29 to 41; and / orthe light chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 42 to 53, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 54 to 65, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 66 to 76.4.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that, the heavy chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has:an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 1, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 14, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 29;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 2, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 15, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 30;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 16, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 4, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 17, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 32;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 5, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 18, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 33;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 6, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 19, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 34;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 7, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 20, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 35;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 8, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 21, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 36;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 9, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 22, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 37;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 11, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 15, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 30;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 12, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 24, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 39;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 12, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 24, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 40;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 10, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 23, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 38;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 6, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 25, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 34;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 13, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 26, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 41;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 27, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31;an HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 3, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 28, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31; oran HCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 8, an HCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 21, and an HCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 36; and / orthe light chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has:an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 42, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 54, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 66;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 67;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 44, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 56, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 68;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 45, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 46, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 47, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 58, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 70;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 48, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 54, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 71;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 49, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 72;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 59, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 60, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 74;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 51, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 61, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 75;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 51, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 62, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 75;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 50, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 59, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 73;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 52, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 63, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 70;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 53, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 64, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 76;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 44, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 65, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 68;an LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 43, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 55, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 67; oran LCDR1 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 49, an LCDR2 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 57, and an LCDR3 having an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 69.5.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that, the heavy chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 92 to 111, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto; and / orthe light chain variable region of the antibody or antigen-binding fragment thereof has an amino acid sequence as shown in any one of SEQ ID NOs: 112 to 131, or an amino acid sequence having at least 85%sequence identity thereto.6.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that, the antibody is a humanized antibody.7.The antibody or antigen-binding fragment thereof according to claim 1, characterized in that, the antibody is IgA, IgD, IgE, IgG, or IgM antibody, preferably, the antibody is IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, or IgA2 antibody.8.A nucleic acid molecule, characterized in that, the nucleic acid molecule comprises a nucleotide sequence encoding an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 7.9.An expression vector, characterized in that, the expression vector comprises a nucleic acid molecule according to claim 8.10.A host cell, characterized in that, the host cell comprises a nucleic acid molecule according to claim 8.11.A pharmaceutical composition, comprising an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 7, and a pharmaceutically acceptable carrier.12.A kit for detecting TNF-like ligand 1a, characterized in that, the kit comprises an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 7.13.Use of an antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 7 in the preparation of a medicament for preventing and / or treating TNF-like ligand 1a-related diseases.14.The use according to claim 13, characterized in that, the TNF-like ligand 1a-related diseases include inflammatory bowel disease, Crohn's disease, ulcerative colitis, asthma, allergies, diabetes mellitus, arthritis, rheumatoid arthritis, juvenile rheumatoid arthritis, osteoarthritis, psoriatic arthritis, ankylosing spondylitis, multiple sclerosis, transplant rejection, graft-versus-host disease, vertebral arthropathy, primary sclerosing cholangitis, primary biliary cirrhosis, atherosclerosis, bladder syndrome / interstitial cystitis, urinary tract dysfunction, sepsis, uveitis, encephalomyelitis, myasthenia gravis, systemic lupus erythematosus, cutaneous lupus erythematosus, autoimmune thyroiditis, atopic dermatitis, eczematous dermatitis, psoriasis, Sjogren's syndrome, scleroderma, and vasculitis.

Images