Novel compounds as GLP-1r agonists and uses thereof

Abstract

Described herein is GLP-1R agonists and pharmaceutical compositions comprising the said compound. The subject compound and compositions are useful for the treatment of a GLP-1 associated disease or disorder, including Type 2 diabetes or obesity.

Description

NOVEL COMPOUNDS AS GLP-1R AGONISTS AND USES THEREOFCROSS REFERENCE TO RELATED APPLICATIONS

[0001] This patent application claims the benefit of International Application No. PCT / CN2024 / 110158, filed August 06, 2024, International Application No. PCT / CN2024 / 122957, filed September 30, 2024, and International Application No. PCT / CN2024 / 136524, filed December 03, 2024, each of which is incorporated herein by reference in its entirety. FIELD OF THE DISCLOSURE

[0002] The present disclosure relates to novel compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof, which are useful as glucagon-like peptide-1 receptor (GLP-1R) agonists. The present disclosure further relates to pharmaceutical compositions comprising one or more of such compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof as an active ingredient, and use of such compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof in the treatment of diseases or disorders, such as cancer.BACKGROUND

[0003] The glucagon-like peptide-1 receptor (GLP-1R) is a validated target for the treatment of diabetes and obesity. Biologics that target this receptor, such as semaglutide and liraglutide have proven clinically successful in regulating blood glucose levels, but they are not without drawbacks that include daily or weekly injections and reports of ADRs ranging from nausea and diarrhea to pancreatitis. In order to produce an orally available GLP-1R agonist, increased efforts have been directed towards the development of small molecules.

[0004] Therefore, there are still unsatisfied needs for novel compounds as GLP-1R agonists.SUMMARY

[0005] In one aspect, the present disclosure provides Compound A: or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as disclosed herein.

[0006] Also disclosed herein is a pharmaceutical composition comprising Compound A disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof, and a pharmaceutically acceptable excipient.

[0007] Also disclosed herein is a method of activating GLP-1R in a subject, the method comprising administering to the subject the compound A disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof, or the pharmaceutical composition disclosed herein.

[0008] Also disclosed herein is use of the Compound A disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof, or the pharmaceutical composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for activating GLP-1R in a subject.

[0009] Also disclosed herein is use of the Compound A disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof, or the pharmaceutical composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for treating or preventing a disease or disorder in a subject in need thereof. In some embodiments, the disease or disorder is a GLP-1 associated disease or disorder. INCORPORATION BY REFERENCE

[0010] All publications, patents, and patent applications mentioned in this specification are herein incorporated by reference to the same extent as if each individual publication, patent, or patent application was specifically and individually indicated to be incorporated by reference.

[0011] An “effective amount” or “therapeutically effective amount” refers to an amount of a compound administered to a mammalian subject, either as a single dose or as part of a series of doses, which is effective to produce a desired therapeutic effect.

[0012] The terms “treat, ” “treating, ” or “treatment, ” as used herein, include alleviating, abating, or ameliorating at least one symptom of a disease or condition, preventing additional symptoms, inhibiting the disease or condition, e.g., arresting the development of the disease or condition, relieving the disease or condition, causing regression of the disease or condition, relieving a condition caused by the disease or condition, or stopping the symptoms of the disease or condition. Compound

[0013] Described herein is a compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof useful as a GLP-1R agonist and in the treatment of diseases or disorders, such as cancer.

[0014] In one aspect, provided herein is Compound A: or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof.

[0015] In some embodiments, provided herein is Compound A: Further Forms of Compounds Disclosed Herein Isomers / Stereoisomers

[0016] In some embodiments, the compounds described herein exist as geometric isomers. In some embodiments, the compounds described herein possess one or more double bonds. The compounds presented herein include all cis, trans, syn, anti, entgegen (E) , and zusammen (Z) isomers as well as the corresponding mixtures thereof. In some embodiments, the compounds described herein possess one or more chiral centers and each center exists in the R configuration, or S configuration. The compounds described herein include all diastereomeric, enantiomeric, and epimeric forms as well as the corresponding mixtures thereof. In additional embodiments of the compounds and methods provided herein, mixtures of enantiomers and / or diastereoisomers, resulting from a single preparative step, combination, or interconversion are useful for the applications described herein. In some embodiments, the compounds described herein are prepared as their individual stereoisomers by reacting a racemic mixture of the compound with an optically active resolving agent to form a pair of diastereoisomeric compounds, separating the diastereomers and recovering the optically pure enantiomers. In some embodiments, dissociable complexes are preferred. In some embodiments, the diastereomers have distinct physical properties (e.g., melting points, boiling points, solubilities, reactivity, etc. ) and are separated by taking advantage of these dissimilarities. In some embodiments, the diastereomers are separated by chiral chromatography, or preferably, by separation / resolution techniques based upon differences in solubility. In some embodiments, the optically pure enantiomer is then recovered, along with the resolving agent, by any practical means that would not result in racemization. Tautomers

[0017] In some situations, compounds exist as tautomers. The compounds described herein include all possible tautomers within the formulas described herein. Tautomers are compounds that are interconvertible by migration of a hydrogen atom, accompanied by a switch of a single bond and adjacent double bond. In bonding arrangements where tautomerization is possible, a chemical equilibrium of the tautomers will exist. All tautomeric forms of the compounds disclosed herein are contemplated. The exact ratio of the tautomers depends on several factors, including temperature, solvent, and pH.

[0018] For example,  are tautomers, and can be used interchangeably herein. A compound disclosed herein with group include the corresponding compound with group Isotopic form

[0019] Unless otherwise stated, compounds described herein may exhibit their natural isotopic abundance, or one or more of the atoms may be artificially enriched in a particular isotope having the same atomic number, but an atomic mass or mass number different from the atomic mass or mass number predominantly found in nature. All isotopic variations of the compounds of the present disclosure, whether radioactive or not, are encompassed within the scope of the present disclosure. For example, hydrogen has three naturally occurring isotopes, denoted 1H (protium) , 2H (deuterium) , and 3H (tritium) . Protium is the most abundant isotope of hydrogen in nature. Enriching for deuterium may afford some therapeutic advantages, such as increased in vivo half-life and / or exposure, or may provide a compound useful for investigating in vivo routes of drug elimination and metabolism.

[0020] For example, the compounds described herein may be artificially enriched in one or more particular isotopes. In some embodiments, the compounds described herein may be artificially enriched in one or more isotopes that are not predominantly found in nature. In some embodiments, the compounds described herein may be artificially enriched in one or more isotopes selected from deuterium (2H) , tritium (3H) , iodine-125 (125I) or carbon-14 (14C) . In some embodiments, the compounds described herein are artificially enriched in one or more isotopes selected from 2H, 11C, 13C, 14C, 15C, 12N, 13N, 15N, 16N, 16O, 17O, 14F, 15F, 16F, 17F, 18F, 33S, 34S, 35S, 36S, 35Cl, 37Cl, 79Br, 81Br, 131I, and 125I. In some embodiments, the abundance of the enriched isotopes is independently at least 1%, at least 10%, at least 20%, at least 30%, at least 40%, at least 50%, at least 60%, at least 70%, at least 80%, at least 90%, or 100%by molar.

[0021] In some embodiments, the compound is deuterated in at least one position. In some embodiments, the compounds disclosed herein have some or all of the 1H atoms replaced with 2H atoms.

[0022] The methods of synthesis for deuterium-containing compounds are known in the art and include, by way of non-limiting example only, the procedure described in U.S. Patent Nos. 5,846,514 and 6,334,997, and the following synthetic methods. For example, deuterium substituted compounds may be synthesized using various methods such as described in: Dean, Dennis C.; Editor. Recent Advances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compounds for Drug Discovery and Development. [In: Curr., Pharm. Des., 2000; 6 (10) ] 2000, 110 pp; George W.; Varma, Rajender S. The Synthesis of Radiolabeled Compounds via Organometallic Intermediates, Tetrahedron, 1989, 45 (21) , 6601-21; and Evans, E. Anthony. Synthesis of radiolabeled compounds, J. Radioanal. Chem., 1981, 64 (1-2) , 9-32.

[0023] Deuterated starting materials are readily available and are subjected to the synthetic methods described herein to provide for the synthesis of deuterium-containing compounds. Large numbers of deuterium-containing reagents and building blocks are available commercially from chemical vendors, such as Aldrich Chemical Co. Pharmaceutically acceptable salts

[0024] In some embodiments, the compounds described herein exist as their pharmaceutically acceptable salts. In some embodiments, the methods disclosed herein include methods of treating diseases by administering such pharmaceutically acceptable salts. In some embodiments, the methods disclosed herein include methods of treating diseases by administering such pharmaceutically acceptable salts as pharmaceutical compositions.

[0025] In some embodiments, the compounds described herein possess acidic or basic groups and therefore react with any of several inorganic or organic bases, and inorganic and organic acids, to form a pharmaceutically acceptable salt. In some embodiments, these salts are prepared in situ during the final isolation and purification of the compounds disclosed herein, or by separately reacting a purified compound in its free form with a suitable acid or base, and isolating the salt thus formed.

[0026] Examples of pharmaceutically acceptable salts include those salts prepared by reaction of the compounds described herein with a mineral, organic acid or inorganic base, such salts including, acetate, acrylate, adipate, alginate, aspartate, benzoate, benzenesulfonate, bisulfate, bisulfite, bromide, butyrate, butyn-1, 4-dioate, camphorate, camphorsulfonate, caproate, caprylate, chlorobenzoate, chloride, citrate, cyclopentanepropionate, decanoate, digluconate, dihydrogenphosphate, dinitrobenzoate, dodecylsulfate, ethanesulfonate, formate, fumarate, glucoheptanoate, glycerophosphate, glycolate, hemisulfate, heptanoate, hexanoate, hexyne-1, 6-dioate, hydroxybenzoate, γ-hydroxybutyrate, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, 2-hydroxyethanesulfonate, iodide, isobutyrate, lactate, maleate, malonate, methanesulfonate, mandelate, metaphosphate, methanesulfonate, methoxybenzoate, methylbenzoate, monohydrogenphosphate, 1-napthalenesulfonate, 2-napthalenesulfonate, nicotinate, nitrate, palmoate, pectinate, persulfate, 3-phenylpropionate, phosphate, picrate, pivalate, propionate, pyrosulfate, pyrophosphate, propiolate, phthalate, phenylacetate, phenylbutyrate, propanesulfonate, salicylate, succinate, sulfate, sulfite, succinate, suberate, sebacate, sulfonate, tartrate, thiocyanate, tosylate, undecanoate, and xylenesulfonate.

[0027] Further, the compounds described herein can be prepared as pharmaceutically acceptable salts formed by reacting the free base form of the compound with a pharmaceutically acceptable inorganic or organic acid, including, but not limited to, inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid metaphosphoric acid, and the like; and organic acids such as acetic acid, propionic acid, hexanoic acid, cyclopentanepropionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, lactic acid, malonic acid, succinic acid, malic acid, maleic acid, fumaric acid, p-toluenesulfonic acid, tartaric acid, trifluoroacetic acid, citric acid, benzoic acid, 3- (4-hydroxybenzoyl) benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, arylsulfonic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, 1, 2-ethanedisulfonic acid, 2-hydroxyethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, 2-naphthalenesulfonic acid, 4-methylbicyclo- [2.2.2] oct-2-ene-1-carboxylic acid, glucoheptonic acid, 4, 4’ -methylenebis- (3-hydroxy-2-ene-1 -carboxylic acid) , 3-phenylpropionic acid, trimethylacetic acid, tertiary butylacetic acid, lauryl sulfuric acid, gluconic acid, glutamic acid, hydroxynaphthoic acid, salicylic acid, stearic acid and muconic acid. In some embodiments, other acids, such as oxalic, while not in themselves pharmaceutically acceptable, are employed in the preparation of salts useful as intermediates in obtaining the compounds disclosed herein, and their pharmaceutically acceptable acid addition salts.

[0028] In some embodiments, those compounds described herein which comprise a free acid group react with a suitable base, such as the hydroxide, carbonate, bicarbonate, sulfate, of a pharmaceutically acceptable metal cation, with ammonia, or with a pharmaceutically acceptable organic primary, secondary, tertiary, or quaternary amine. Representative salts include the alkali or alkaline earth salts, like lithium, sodium, potassium, calcium, and magnesium, and aluminum salts and the like. Illustrative examples of bases include sodium hydroxide, potassium hydroxide, choline hydroxide, sodium carbonate, N+ (C1-4 alkyl) 4, and the like.

[0029] Representative organic amines useful for the formation of base addition salts include ethylamine, diethylamine, ethylenediamine, ethanolamine, diethanolamine, piperazine and the like. It should be understood that the compounds described herein also include the quaternization of any basic nitrogen-containing groups they contain. In some embodiments, water or oil-soluble or dispersible products are obtained by such quaternization. Method of Treatment

[0030] Disclosed herein are methods of modulating glucagon-like peptide-1 receptor (GLP-1R) in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically affective amount of a compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, disclosed herein.

[0031] Disclosed herein are methods of activating GLP-1R in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically affective amount of a compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, disclosed herein.

[0032] Disclosed herein are methods of treating a disease or disorder in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically affective amount of a compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition disclosed herein. In some embodiments, the disease or disorder is a GLP-1 associated disease or disorder.

[0033] In some embodiments, the GLP-1 associated disease or disorder is non-insulin-dependent diabetes mellitus (Type 2 diabetes) , hyperglycemia, impaired glucose tolerance, insulin dependent diabetes mellitus (Type 1 diabetes) , diabetic complication, obesity, hypertension, hyperlipidemia, arteriosclerosis, coronary heart disease, brain infarction, non-alcoholic steatohepatitis, Parkinson’s disease or dementia. In some embodiments, the GLP-1 associated disease or disorder is non-insulin-dependent diabetes mellitus (Type 2 diabetes) or obesity.

[0034] Also disclosed herein is use of a compound disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for modulating GLP-1R, in a subject in need thereof.

[0035] Also disclosed herein is use of a compound disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for activating GLP-1R, in a subject in need thereof.

[0036] Also disclosed herein is use of a compound disclosed herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a pharmaceutical composition disclosed herein in the manufacture of a medicament for treating a disease or disorder, in a subject in need thereof. In some embodiments, the disease or disorder is a GLP-1 associated disease or disorder.

[0037] In some embodiments, the GLP-1 associated disease or disorder is non-insulin-dependent diabetes mellitus (Type 2 diabetes) , hyperglycemia, impaired glucose tolerance, insulin dependent diabetes mellitus (Type 1 diabetes) , diabetic complication, obesity, hypertension, hyperlipidemia, arteriosclerosis, coronary heart disease, brain infarction, non-alcoholic steatohepatitis, Parkinson’s disease or dementia. In some embodiments, the GLP-1 associated disease or disorder is non-insulin-dependent diabetes mellitus (Type 2 diabetes) or obesity. Dosing

[0038] In some embodiments, the compositions containing the compound (s) described herein are administered for therapeutic treatments. In certain therapeutic applications, the compositions are administered to a patient already suffering from a disease or condition, in an amount sufficient to cure or at least partially arrest at least one of the symptoms of the disease or condition. Amounts effective for this use depend on the severity and course of the disease or condition, previous therapy, the patient’s health status, weight, and response to the drugs, and the judgment of the treating physician. Therapeutically effective amounts are optionally determined by methods including, but not limited to, a dose escalation and / or dose ranging clinical trial.

[0039] In some embodiments wherein the patient’s condition does not improve, upon the doctor’s discretion the administration of the compounds are administered chronically, that is, for an extended period of time, including throughout the duration of the patient’s life in order to ameliorate or otherwise control or limit the symptoms of the patient’s disease or condition. Routes of Administration

[0040] Suitable routes of administration include, but are not limited to, oral, intravenous, rectal, aerosol, parenteral, ophthalmic, pulmonary, transmucosal, transdermal, vaginal, otic, nasal, and topical administration. In addition, by way of example only, parenteral delivery includes intramuscular, subcutaneous, intravenous, intramedullary injections, as well as intrathecal, direct intraventricular, intraperitoneal, intralymphatic, and intranasal injections. Pharmaceutical Compositions / Formulations

[0041] The compounds described herein are administered to a subject in need thereof, either alone or in combination with pharmaceutically acceptable carriers, excipients, or diluents, in a pharmaceutical composition, according to standard pharmaceutical practice. In some embodiments, the compounds described herein are administered to animals.

[0042] In another aspect, provided herein are pharmaceutical compositions comprising a compound described herein, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and at least one pharmaceutically acceptable excipient. Pharmaceutical compositions are formulated in a conventional manner using one or more pharmaceutically acceptable excipients that facilitate processing of the active compounds into preparations that can be used pharmaceutically. Proper formulation is dependent upon the route of administration chosen. A summary of pharmaceutical compositions described herein can be found, for example, in Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995) ; Hoover, John E., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975; Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams &Wilkins1999) , herein incorporated by reference for such disclosure.Examples

[0043] For the purpose of illustration, the following examples are included. The Examples provided herein describe the synthesis of compounds disclosed herein as well as intermediates used to prepare the compounds. However, it is to be understood that these examples do not limit the present disclosure and are only meant to suggest a method of practicing the present disclosure. Persons skilled in the art will recognize that the chemical reactions described may be readily adapted to prepare a number of other compounds of the present disclosure, and alternative methods for preparing the compounds of the present disclosure are deemed to be within the scope of the present disclosure. For example, the synthesis of non-exemplified compounds according to the present disclosure may be successfully performed by modifications apparent to those skilled in the art, e.g., by appropriately protecting interfering groups, by utilizing other suitable reagents and building blocks known in the art other than those described, and / or by making routine modifications of reaction conditions. Besides, persons skilled in the art will also understand that individual steps described herein or in the separate batches of a compound may be combined. Alternatively, other reactions disclosed herein or known in the art will be recognized as having applicability for preparing other compounds of the present disclosure. The following description is, therefore, not intended to limit the scope of the present disclosure, but rather is specified by the claims appended hereto. Example a: Synthesis of int-16

[0044] Step 1: int-16-2

[0045] To a mixture of int-16-1 (7.00 g, 49.9 mmol) in DCM (100 ml) was added methyl 1-formylcyclopropane-1-carboxylate (8.32 g, 64.9 mmol) and the mixture was stirred at 25 ℃ for 0.5 hr, then added NaBH3CN (4.71 g, 74.9 mmol) . The mixture was stirred at for 25 ℃ for 12 hrs, (Boc) 2O (16.3 g, 74.9 mmol) was added and the mixture was stirred at 25 ℃ for another 12 hrs. The reaction was diluted with water (10 mL) and extracted with EtOAc (30 mL × 3) . The organic layers were combined, dried over Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16-2 (3.00 g, 20%yield) . 1HNMR (400 MHz, CDCl3) : δ 4.21 -4.05 (m, 1H) , 3.69 -3.63 (m, 5H) , 3.18 -2.75 (m, 1H) , 2.65 -2.55 (m, 1H) , 1.50 -1.43 (m, 9H) , 1.38 -1.26 (m, 5H) , 1.08 (s, 2H) .

[0046] Step 2: int-16-3

[0047] To a mixture of int-16-2 (5.00 g, 16.8 mmol) in THF was added KOtBu (1.89 g, 16.8 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ f or 12 hrs. The mixture was diluted with H2O (10 mL) and extracted with EtOAc (50 mL × 3) . The organic layers were combined, dried over Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16-3 (4.0 g, 90%yield) . LCMS: 265.2 [M+H] +.

[0048] Step 3: int-16-4

[0049] To a mixture of int-16-3 (2.00 g, 7.57 mmol) in EtOH (30 ml) was added (4-fluoro-3, 5-dimethylphenyl) hydrazine (1.51 g, 9.84 mmol) and H2O (0.954 ml, 53.0 mmol) . The mixture was stirred at 80 ℃ for 12 hrs, diluted with H2O (20 mL) and extracted with EtOAc (100 mL × 3) . The organic layers were combined, dried over Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16-4 (2.00 g, 66%yield) . LC-MS: 401.3 [M+H] +.

[0050] Step 4: int-16-5

[0051] To a mixture of int-16-4 (2.00 g, 4.99 mmol) in THF (20 ml) was added DIEA (2.62 ml, 14.9 mmol) and phenyl chloroformate (1.56 g, 9.99 mmol) . The mixture was stirred at 0 ℃ for 2 hrs. The reaction was concentrated to give int-16-5 (2.60 g, 100 %yield) . LCMS: 543.0 [M+Na] +.

[0052] Step 5: int-16-6

[0053] To a mixture of int-16-5 (2.00 g, 3.84 mmol) in pyridine (5 ml) and THF (20 ml) was added 2, 2-dimethoxyethan-1-amine (0.808 g, 7.68 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 2 hrs. The mixture was diluted with H2O (20 mL) and extracted with EtOAc (100 mL × 3) . The organic layers were combined, dried over Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16-6 (0.8 g, 27%yield) . LCMS: 532.4 [M+H] +.

[0054] Step 6: int-16-7

[0055] To a mixture int-16-6 (1.40 g, 1.84 mmol) in THF (25 ml) was added methane sulfonic acid (1.41 g, 14.7 mmol) , the mixture was stirred at 60 ℃ for 2 hrs. Then (Boc) 2O (1.71 ml, 7.37 mmol) and K3PO4 (3.91 g, 18.43 mmol) were added to the mixture at 25 ℃. The mixture was stirred for 2 hrs at 25 ℃. The mixture was diluted with H2O (10 mL) and extracted with EtOAc (50 mL × 3) . The organic layers were combined, dried over Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16-7 (430 mg, 34%yield) . LCMS: 568.3 [M+H] +.

[0056] Step 7: int-16

[0057] To a mixture of int-16-7 (430 mg, 0.757 mmol) in ACN (5 mL) was added K2CO3 (126 mg, 0.909 mmol) . The mixture was stirred at 25 ℃ for 2 hrs. The reaction was filtered, concentrated and purified by column chromatography to afford int-16 (241 mg, 68%yield) . LCMS: 468.4 [M+H] +. 1HNMR (400 MHz, METHANOL-d4) : δ 7.04 (d, J = 6.4 Hz, 2H) , 6.51 (d, J = 3.2 Hz, 1H) , 6.44 (s, 1H) , 5.33 (s, 1H) , 4.17 -4.03 (m, 1H) , 3.57 (s, 2H) , 2.21 (d, J = 2.4 Hz, 6H) , 1.47 (s, 9H) , 1.29 (d, J = 9.8 Hz, 3H) , 1.05-1.02 (m, 1H) , 0.95 -0.92 (m, 3H) . Example b: Synthesis of int-17

[0058] The synthesis of int-17 followed the same synthetic procedure for intermediates 31k of WO-2018056453. Example 1: Synthesis of Compound A

[0059] Step 1. 1-1

[0060] To a solution of 6-bromo-1-methylindolin-2-one (900.0 mg, 3.98 mmol) in DMSO (20 mL) were added KOH (596.0 mg, 9.55 mmol, 90%purity) and 1, 3-diiodopropane (1414.0 mg, 4.78 mmol) . The resulting mixture was stirred at 20 ℃ for 1 hr. The reaction was poured into 10 mL of water and extracted with EtOAc (20 mL*3) . The combined organic layers were washed with brine (20 mL*2) , dried over Na2SO4, filtered and concentrated to give a residue, which was purified by column chromatography on silica gel eluting with ethyl acetate (from 0%to 20%) in petroleum ether to afford the title compound (720.0 mg, 2.71 mmol, 68.0%yield) . 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 6.92 (s, 1H) , 3.16 (s, 3H) , 2.69 –2.59 (m, 2H) , 2.42 –2.18 (m, 4H) .

[0061] Step 2. 1-2

[0062] To a solution of int-16 (620.0 mg, 1.33 mmol) in NMP (6.0 mL) were added 1-2 (706.0 mg, 2.65 mmol) , copper (I) iodide (253.0 mg, 1.33 mmol) , K2CO3 (550.0 mg, 3.98 mmol) and (1R, 2R) -N1, N2-dimethylcyclohexane-1, 2-diamine (94.0 mg, 0.66 mmol) . The resulting mixture was degassed and purged with N2 for 3 times and stirred at 135 ℃ for 3 hrs under N2. After cooling to room temperature, the reaction mixture was poured into water (300 mL) and extracted with EtOAc (200 mL*3) . The combined organic layers were washed with water (100 mL*2) , followed by brine (100 mL) , dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to give a residue, which was purified by flash silica gel chromatography ( 25 g Silica Flash Column, Eluent of 0-35%Ethyl acetate / Petroleum ether gradient @36 mL / min) to afford the title compound (780.0 mg, 1.20 mmol, 90%yield) . LC-MS (ESI+) : m / z 653.3 [M+H] +

[0063] Step 3. 1-3

[0064] To a solution of 1-2 (780 mg, 1.195 mmol) in DCM (5 mL) was added TFA (1 mL) dropwise, and the resulting mixture was stirred at 25 ℃ for 1 h. After completion, the reaction mixture was diluted with DCM (20 mL) and washed with saturated NaHCO3 solution (100 mL*2) , followed by brine (100 mL) , dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to afford the title compound (600 mg, crude) . LC-MS (ESI+) : m / z 553.3 [M+H] +

[0065] Step 4. Compound A

[0066] To a solution of 1-3 (300.0 mg, 0.54 mmol) and int-17 (223.0 mg, 0.54 mmol) in DMF (3 mL) was added DIEA (0.3 mL, 1.64 mmol) and HATU (413.0 mg, 1.09 mmol) . The resulting mixture was stirred at 35 ℃ for 12 hrs. After completion, the reaction mixture was poured into water (50 mL) and extracted with EtOAc (50 mL*3) . The combined organic layers were washed with water (20 mL*2) , followed by brine (20 mL) , dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to give a residue, which was purified by prep-HPLC (Column: Welch Triart C18, 250*21.2*10 μm; Mobile Phase : [water (0.1%FA) -ACN] ; B%: 75%-98%, 20 min) to afford the title compound (187.0 mg, 0.20 mmol, 36.4%yield) . LC-MS (ESI+) : m / z 946.5 (M+H) +. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.79 (br, 1H) , 7.75 –7.44 (m, 2H) , 7.43 –7.03 (m, 7H) , 6.99 –6.69 (m, 2H) , 5.88 –5.26 (m, 1H) , 4.29 –3.56 (m, 4H) , 3.14 –2.98 (m, 4H) , 2.48 –2.42 (m, 2H) , 2.36 –2.22 (m, 4H) , 2.20 (s, 6H) , 1.81 –1.65 (m, 4H) , 1.64–1.47 (m, 5H) , 1.45 –1.25 (m, 7H) , 1.23 –1.16 (m, 4H) , 1.15 –1.05 (m, 2H) , 0.99 –0.86 (m, 1H) .

[0067] Example 2.1: cAMP assay

[0068] The changes of cAMP in human GLP-1 cells (cAMP HunterTM CHO-K1 GLP1R Gs Cell Line, Supplier: Eurofins, Catalog Number: 95-0062C2) were measured by LANCE Ultra cAMP Kit to evaluate the in vitro activity of compounds on human GLP-1 receptor.

[0069] Experimental Methods:

[0070] 1. Cell Thawing

[0071] 1) Pre-warm complete medium (DMEM / F12+10%FBS+500 μg / mL G418) in a 37 ℃ water bath for 30 minutes.

[0072] 2) Remove the GLP-1 cells from the liquid nitrogen tank, quickly thaw them in a 37 ℃ water bath, transfer the cell suspension to a 15 mL centrifuge tube with a pipette, and add 6 mL of complete culture medium.

[0073] 3) After centrifugation at 1000 rpm for 4 minutes, the supernatant was discarded, cell precipitation was resuspended in 5 mL complete medium, and transferred to a T75 culture flask. 10mL of the assay complete medium was added into a T75 flask and incubated at 37 ℃ and 5%CO2.

[0074] 4) Maintain the cells in culture until they are 80%confluent.

[0075] 2. Cell Propagation

[0076] 1) Remove the T75 flask from the cell culture incubator and place in a sterile tissue culture hood.

[0077] 2) Gently aspirate media from the T75 flask.

[0078] 3) Add 5 mL DPBS into the T75 flask, very gently tip the flask side to side allowing PBS to cover the entire surface of the flask to rinse the cells. Gently aspirate DPBS from flask.

[0079] 4) Add 2 mL of 0.25%Trypsin-EDTA to the T75 flask. Gently rock the flask back and forth to ensure the surface of the flask is completely covered with trypsin.

[0080] 5) Incubate the flask at 37℃ and 5%CO2 for 2 to 3 minutes or until the cells have detached.

[0081] 6) Add 5 mL of complete culture medium to the T75 flask. Using a pipette, gently rinse the cells from the surface of the flask with the added media.

[0082] 7) Fill a new T75 flask with complete culture medium until the total volume equals 12 mL for T75 flasks, and add 1 mL cell suspension to the media in the flask. Transfer flask to a tissue culture incubator and incubate cells for 24 hours at 37℃ and 5%CO2.

[0083] 8) The cells were passed for twice and then used for the cell experiment.

[0084] 3. Compound Treatment

[0085] Compounds were prepared with DMSO to a stock concentration of 10 mM. Reference compound Exendin-4 was prepared with DMSO to a stock concentration of 5 mM.

[0086] The starting concentration of the compounds was 10 μM, 3-fold dilution, 10 concentration points, and duplicate. The 100 nL compounds were transferred to the 384-well plate using Echo.

[0087] 4. Cell Culture

[0088] 1) GLP-1 stable cell lines were removed from the incubator, and the cell status was observed. When the cell density reached 80%～90%, the medium was abandoned and the cells were washed with 5 mL DPBS.

[0089] 2) DPBS was removed, followed by the addition of 2 mL 0.25%Trypsin-EDTA, then the cells was incubated in 37 ℃ for 2-5 min.

[0090] 3) 10 mL complete culture medium was added into plates, and then the cells were collected by centrifugation at 1000 rpm for 4 min, followed by the remove of the supernatant.

[0091] 4) The density of cell suspension was adjusted to 1000 cells / well by Stimulation Buffer. TABLE 1 Stimulation Buffer

[0092] 5. Reaction

[0093] 1) Transfer 10μl of cell solution to 384-well plate.

[0094] 2) Centrifuge at 600 rpm for 3 minutes and incubate 60 minutes at room temperature.

[0095] 3) Add 5μL 4X Eu-cAMP tracer solution and 5μL 4X ULightTM-anti-cAMP solution to 384-well plate. TABLE 2 Detection reagent

[0096]

[0097] 4) Centrifuge at 600rpm for 3 minutes and incubate 60 minutes at room temperature.

[0098] cAMP signal was detected with Envision. GraphPad Prism (version 6.0) was used for the data analysis.

[0099] 6. Detection of agonist activity in vitro:

[0100] Plot the concentration value of the compound as the abscissa and the activity as the ordinate. Fit the data in GraphPad 6.0 to obtain EC50 values.

[0101] Y=Bottom + (Top-Bottom)  /  (1+10^ ( (LogEC50-X) *HillSlope) ) Table 3 Example 3.1: Pharmacokinetic profile evaluation

[0102] Three cynomolgus monkeys were intravenously administrated with given compounds or orally gavage administrated with given compounds. The blood samples were taken at timepoints 0.083 h, 0.25 h, 0.5 h, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, and 24 h after intravenous (iv) administration or at timepoints 0.25 h, 0.5 h, 1 h, 2 h, 4 h, 6h, 8 h, and 24 h after oral gavage administration. Blood samples were placed in tubes containing K2-EDTA and stored on ice until centrifuged. The blood samples were centrifuged within 1 h after collected and stored frozen at approximately -80 ℃. The analytical results were confirmed using quality control samples for intra-assay variation. The accuracy of >66.7%of the quality control samples should be between 80 -120%of the known value (s) . Standard set of parameters including Area Under the Curve (AUC (0-t) ) , maximum plasma concentration (Cmax) , elimination half-life (T1 / 2) will be calculated using noncompartmental analysis modules in FDA certified pharmacokinetic program Phoenix WinNonlin 7.0 (Pharsight, USA) . Formulation: IV: 10%NMP+40%PEG300+50%water, pH could be adjusted to get the clear solution (8- 9) . PO for Cpd A, B, C: 10%DMSO+ 10%Cremophor EL+ 15%PEG400 + 65%100 mM glycine-NaOH buffer (pH 10) . PO for Compound A: Spray dried dispersion form (Compound A: PVP VA64 = 3: 7) , 0.5%MC (400 cps) in 100 mM pH 4.5 citrate buffer

[0103] The data for Example C is shown in Table 4. Table 4. Monkey PK profile

[0104] Compared to reference compound Orforglipron, Cpd. B (Compound 121a of WO2021155841) , Compound A showed better monkey pharmacokinetic profile.

Claims

1.A compound having the structure: or a pharmaceutically acceptable salt, or stereoisomer thereof.2.A compound having the structure: 3.A pharmaceutical composition comprising the compound of claim 1 or 2, further comprising at least one pharmaceutically acceptable excipient.4.A method of treating or preventing a GLP-1 associated disease or disorder in a subject in need thereof, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the compound of claim 1 or 2, or the pharmaceutical composition of claim 3.5.The method of claim 4, wherein the GLP-1 associated disease or disorder is non-insulin-dependent diabetes mellitus (Type 2 diabetes) , hyperglycemia, impaired glucose tolerance, insulin dependent diabetes mellitus (Type 1 diabetes) , diabetic complication, obesity, hypertension, hyperlipidemia, arteriosclerosis, coronary heart disease, brain infarction, non-alcoholic steatohepatitis, Parkinson’s disease or dementia.

Images