Composition and method for caring for keratin materials

Abstract

A composition, preferably for caring for keratin materials, comprising: a) at least one C-glycoside, b) at least one extract of Punica granatum, and c) at least one extract of Gentiana lutea. A non-therapeutic method for caring for the keratin materials, comprising applying a composition to the keratin materials.

Description

COMPOSITION AND METHOD FOR CARING FOR KERATIN MATERIALSTECHNICAL FIELD

[0001] The present invention relates to a cosmetic composition. In particular, the present invention relates to a composition for caring for keratin materials. The present invention also relates to a non-therapeutic method for caring for keratin materials.BACKGROUND ART

[0002] The skin is the protective barrier for the human body. It protects the interior of the body from physical injury (such as trauma) and biological injury (such as bacteria, viruses or fungi) . The skin is made up of two compartments, namely a superficial compartment, the epidermis and a deep compartment, the dermis.

[0003] The epidermis is primarily made up of three cell types which are the keratinocytes (major portion) , the melanocytes and Langerhans cells, which have an essential function in the immunity response and in particular in antigen presentation.

[0004] The dermis provides the epidermis with a solid support. It also supplies nourishment for it. It is composed mainly of fibroblasts and an extracellular matrix.

[0005] Skin damages due to extra aggression and skin ageing, skin need to repair themselves biologically from DNA to protein.

[0006] It is known that skin lipids (such as glycerolipids) are beneficial to skin repairing and skin barrier function.

[0007] The development of formulations dedicated to caring for the skin, such as, for anti-ageing, is permanent.

[0008] A wide variety of cosmetic compositions have been used to care for the skin, for example, to deliver a repairing and anti-aging effect to the skin. However, for most of them, the effect on caring for the skin, especially in terms of delivering a repairing and anti-aging effect to the skin, is not satisfying.

[0009] Thus, there is still a need to formulate a composition for caring for keratin materials, which can deliver a repairing and / or anti-aging effect.SUMMARY OF THE INVENTION

[0010] An object of the present invention is thus to develop a composition for caring for keratin materials, which can deliver a repairing and / or anti-aging effect.

[0011] Another object of the present invention is to provide a cosmetic process for caring for keratin materials.

[0012] Accordingly, in a first aspect, the present invention provides a composition, preferably for caring for keratin materials, comprising:

[0013] a) at least one C-glycoside,

[0014] b) at least one extract of Punica granatum, and

[0015] c) at least one extract of Gentiana lutea.

[0016] In a second aspect, the present invention provides a non-therapeutic method for caring for keratin materials, comprising applying the composition according to the first aspect of the present invention to the keratin materials.

[0017] The composition of the present invention can deliver a repairing and / or anti-aging effect to the keratin materials.

[0018] Other subjects and characteristics, aspects and advantages of the present invention will be set forth in the description that follows, and in part, will be obvious from the description, or may be learned by practice of the present invention.DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0019] Unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by those skilled in the art the present invention belongs to. When the definition of a term in the present description conflicts with the meaning as commonly understood by those skilled in the art the present invention belongs to, the definition described herein shall apply.

[0020] In that which follows and unless otherwise indicated, the limits of a range of values are included within this range, in particular in the expressions "between...and..." and "from...to..." .

[0021] Moreover, the expression "at least one" used in the present description is equivalent to the expression "one or more" .

[0022] Throughout the instant application, the term “comprising” is to be interpreted as encompassing all specifically mentioned features as well as optional, additional, unspecified ones. As used herein, the use of the term “comprising” also discloses the embodiment wherein no features other than the specifically mentioned features are present (i.e. “consisting of” ) .

[0023] Unless otherwise specified, all numerical values expressing amount of ingredients and the like which are used in the description and claims are to be understood as being modified by the term “about” . Accordingly, unless indicated to the contrary, the numerical values and parameters described herein are approximate values which are capable of being changed according to the desired purpose as required.

[0024] For the purposes of the present invention, the term "keratin materials" is intended to cover human skin, including facial skin and the lips. Facial skin is most particularly considered according to the present invention.

[0025] All percentages in the present invention refer to weight percentage, unless otherwise specified.

[0026] According to the first aspect, the composition of the present invention comprises:

[0027] a) at least one C-glycoside,

[0028] b) at least one extract of Punica granatum, and

[0029] c) at least one extract of Gentiana lutea.

[0030] C-glycosides

[0031] According to the first aspect, the composition of the present invention comprises at least one C-glycoside.

[0032] Preferably, the C-glycoside is chosen from compounds of formula (I) :

[0033] in which:

[0034] -R represents a saturated C1 to C10, in particular C1 to C4, alkyl radical which can optionally be substituted by at least one radical chosen from OH, COOH or COOR” 2, with R”2 being a saturated C1-C4 alkyl radical,

[0035] -S represents a monosaccharide or a polysaccharide comprising up to 20 sugar units, in particular up to 6 sugar units, in pyranose and / or furanose form and of the L and / or D series, it being possible for the said monosaccharide or polysaccharide to be substituted by a hydroxyl group which is necessarily free and optionally one or more optionally protected amine functional group (s) , and

[0036] -X represents a radical chosen from the–CO-, -CH (OH) -, -CH (NH2) -, -CH (NHCH2CH2CH2OH) -, -CH (NHPh) -and–CH (CH3) -groups and in particular a–CO-, -CH (OH) -or–CH (NH2) -radical and more particularly a–CH (OH) -radical,

[0037] the S-CH2-X bond represents a bond of C-anomeric nature, which can be α or β, and also their physiologically acceptable salts, their solvates, such as the hydrates, and their optical and geometrical isomers.

[0038] The C-glycoside of use for the implementation of the invention are in particular those for which R denotes a saturated linear C1 to C6, in particular C1 to C4, preferentially C1 to C2, alkyl radical and more preferably a methyl radical.

[0039] Mention may in particular be made, among the alkyl groups suitable for the implementation of the invention, of the methyl, ethyl, isopropyl, n-propyl, n-butyl, t-butyl, isobutyl, sec-butyl, pentyl, n-hexyl, cyclopropyl, cyclopentyl or cyclohexyl groups.

[0040] According to one embodiment of the invention, use may be made of a C-glycoside corresponding to the formula (I) for which S can represent a monosaccharide or a polysaccharide comprising up to 6 sugar units, in pyranose and / or furanose form and of L and / or D series, the said mono-or polysaccharide exhibiting at least one necessarily free hydroxyl functional group and / or optionally one or more necessarily protected amine functional groups, X and R otherwise retaining all of the definitions given above.

[0041] Advantageously, a monosaccharide of the invention can be chosen from D-glucose, D-galactose, D-mannose, D-xylose, D-lyxose or L-fucose, L-arabinose, L-rhamnose, D-glucuronic acid, D-galacturonic acid, D-iduronic acid, N-acetyl-D-glucosamine or N-acetyl-D-galactosamine and advantageously denotes D-glucose, D-xylose, N-acetyl-D-glucosamine or L-fucose and in particular D-xylose.

[0042] More particularly, a polysaccharide of the invention comprising up to 6 sugar units can be chosen from D-maltose, D-lactose, D-cellobiose, D-maltotriose, a disaccharide combining a uronic acid chosen from D-iduronic acid or D-glucuronic acid with a hexosamine chosen from D-galactosamine, D-glucosamine, N-acetyl-D-galactosamine or N-acetyl-D-glucosamine, an oligosaccharide comprising at least one xylose which can advantageously be chosen from xylobiose, methyl-β-xylobioside, xylotriose, xylotetraose, xylopentaose and xylohexaose and in particular xylobiose, which is composed of two xylose molecules linked via a 1-4 bond.

[0043] More particularly, S can represent a monosaccharide chosen from D-glucose, D-xylose, L-fucose, D-galactose or D-maltose and in particular D-xylose.

[0044] Preferably, use is made of a C-glycoside of formula (I) for which:

[0045] -R denotes an unsubstituted linear C1-C4, in particular C1-C2, alkyl radical, especially a methyl radical;

[0046] -S represents a monosaccharide as described above and selected in particular from D-glucose, D-xylose, N-acetyl-D-glucosamine or L-fucose, and in particular D-xylose;

[0047] -X represents a group chosen from-CO-, -CH (OH) -or-CH (NH2) -and preferably a-CH (OH) -group.

[0048] The acceptable salts of the compounds described in the present invention comprise conventional non-toxic salts of the said compounds, such as those formed from organic or inorganic acids. Mention may be made, by way of example, of the salts of inorganic acids, such as sulfuric acid, hydrochloric acid. Mention may also be made of the salts of organic acids, which can comprise one or more carboxylic, sulfonic or phosphonic acid groups. Mention may in particular be made of propionic acid, acetic acid, terephthalic acid, citric acid and tartaric acid.

[0049] When the compound of formula (I) comprises an acid group, neutralization of the acid group (s) can be carried out with an inorganic base, such as LiOH, NaOH, KOH, Ca (OH) 2, NH4OH, Mg (OH) 2 or Zn (OH) 2, or with an organic base, such as a primary, secondary or tertiary alkylamine, for example triethylamine or butylamine. This primary, secondary or tertiary alkylamine can comprise one or more nitrogen and / or oxygen atoms and can thus comprise, for example, one or more alcohol functional groups; mention may in particular be made of 2-amino-2-methylpropanol, triethanolamine, 2-  (dimethylamino) propanol or 2-amino-2- (hydroxymethyl) -1, 3-propanediol. Mention may also be made of lysine or 3- (dimethylamino) propylamine.

[0050] The solvates which are acceptable for the compounds described in the present invention comprise conventional solvates, such as those formed during the final stage of preparation of the said compounds due to the presence of solvents. Mention may be made, by way of example, of the solvates due to the presence of water or of linear or branched alcohols, such as ethanol or isopropanol.

[0051] Of course, according to the invention, a C-glycoside corresponding to the formula (I) can be used alone or as a mixture with other C-glycoside and in any proportion.

[0052] A C-glycoside which is suitable for the invention can in particular be obtained by the synthetic method described in the document WO02 / 051828.

[0053] Mention may in particular be made, by way of non-limiting illustration of the C-glycoside compounds which are particularly suitable for the invention, of the following compounds:

[0054] -C-β-D-xylopyranoside-n-propane-2-one,

[0055] -C-α-D-xylopyranoside-n-propan-2-one,

[0056] -C-β-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane,

[0057] -C-α-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane,

[0058] -1- (C-β-D-fucopyranoside) propan-2-one,

[0059] -1- (C-α-D-fucopyranoside) propan-2-one,

[0060] -1- (C-β-L-fucopyranoside) propan-2-one,

[0061] -1- (C-α-L-fucopyranoside) propan-2-one,

[0062] -1- (C-β-D-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,

[0063] -1- (C-α-D-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,

[0064] -1- (C-β-L-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,

[0065] -1- (C-α-L-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,

[0066] -1- (C-β-D-glucopyranosyl) -2-hydroxypropane,

[0067] -1- (C-α-D-glucopyranosyl) -2-hydroxypropane,

[0068] -1- (C-β-D-galactopyranosyl) -2-hydroxypropane,

[0069] -1- (C-α-D-galactopyranosyl) -2-hydroxypropane,

[0070] -1- (C-β-D-fucofuranosyl) propan-2-one,

[0071] -1- (C-α-D-fucofuranosyl) propan-2-one,

[0072] -1- (C-β-L-fucofuranosyl) propan-2-one,

[0073] -1- (C-α-L-fucofuranosyl) propan-2-one,

[0074] -C-β-D-maltopyranoside-n-propane-2-one,

[0075] -C-α-D-maltopyranoside-n-propan-2-one,

[0076] -C-β-D-maltopyranoside-2-hydroxypropane,

[0077] -C-α-D-maltopyranoside-2-hydroxypropane, their isomers and their mixtures.

[0078] According to one embodiment, C-β-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane or C-α-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane and better still C-β-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane can advantageously be used for the composition according to the invention.

[0079] Most preferably, the composition according to the present invention comprises C-β-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane (or hydroxypropyl tetrahydropyrantriol) .

[0080] Advantageously, the C-glycoside is present in the composition according to the present invention in an amount ranging from 0.01 wt. %to 40%, preferably from 0.1 wt. %to 30 wt. %, more preferably from 1 wt. %to 20 wt. %, even more preferably from 2 wt. %to 15 wt. %, relative to the total weight of the composition.

[0081] Extracts of Punica granatum

[0082] According to the first aspect, the composition of the present invention comprises at least one extract of Punica granatum.

[0083] As used herein, an extract of Punica granatum, also called Punica granatum extract, can be an extract comprising, optionally consisting essentially of material from the fruit-bearing plant species Punica granatum. The extract of Punica granatum is not particularly limited to and may comprise or be any extract or combination of extracts from a Punica granatum suitable for use in the embodiments herein.

[0084] Punica granatum has been reported to contain various bioactive components, including various phytochemicals. Punica granatum may simply be referred to as pomegranate.

[0085] In general, the most abundant phytochemicals in pomegranate juice are polyphenols, including the hydrolyzable tannins called ellagitannins formed when ellagic acid and gallic acid bind with a carbohydrate to form pomegranate ellagitannins, also known as punicalagins. The red color of the juice is attributed to anthocyanins, such as delphinidin, cyanidin, and pelargonidin glycosides. Generally, an increase in juice pigmentation occurs during fruit ripening. Pomegranate peel contains high amount of polyphenols, condensed tannins, catechins, and prodelphinidins. Pomegranate seed oil contains punicic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, and linoleic acid.

[0086] Specific examples of Punica granatum extracts are known in art. As such, the Punica granatum extract may be purchased or otherwise obtained commercially from various sources, prepared (e.g., using any conventional extraction technique (s) known in the art) , or combinations thereof.

[0087] In certain embodiments, the extract of Punica granatum is obtained by water extracting (or aqueous extracting) plant material of Punica granatum.

[0088] In further or other embodiments, the extract of Punica granatum is obtained by alcohol extracting (e.g., ethanol extracting) plant material of Punica granatum.

[0089] As will be understood by those skilled in the art, Punica granatum is primarily cultivated for its fruit. As such, in various embodiments, the extract of Punica granatum is an extract of Punica granatum fruit. Suitable extractions include those noted above, e.g., water and ethanol extractions of fruit. The fruit can be from one or more plants, and can be fresh, dried, or otherwise aged.

[0090] The extract of Punica granatum may comprise material from any part of the plant, or combinations of parts, and is not limited to fruit extracts. For example, the extract of Punica granatum may comprise materials extracted from one or more parts of a Punica granatum plant, including the root, stem, bark, rhizome, leaf, bud, flower, seed, and / or fruit thereof. Moreover, such extracts may be further processed (e.g., defatted, partially defatted, ground, dried, precipitated, washed, filtered, mesh-sorted, extracted, distilled, concentrated, etc. ) to obtain the Punica granatum extract. Likewise, the Punica granatum plant may be extracted in raw form or processed prior to extraction of the Punica granatum extract (e.g., used in raw form, suspended form, dehydrated form, concentrated form, etc. ) .

[0091] By way of example, certain extracts can be obtained where Punica granatum (e.g., fruit) is pulverized to a homogeneous size in a mill. Next, the resulting powder is extracted using a water or ethanol solution. The solution is then filtered, and the filtrate can be concentrated under reduced pressure to yield a syrup. The syrup can then be freeze-dried to dryness to obtain extract.

[0092] The Punica granatum extract may be utilized in any form, such as neat (i.e., absent solvents, carrier vehicles, diluents, etc. ) , or disposed in a carrier vehicle, such as a solvent or dispersant. The carrier vehicle, if present, may comprise an aqueous solvent (e.g. water) , an organic solvent, fluid, or oil, or the like, or combinations thereof. When utilized, the carrier vehicle will be selected based on the particular Punica granatum extract utilized.

[0093] Preferably, the composition according to the present invention comprises a Punica granatum fruit extract, i.e., a Punica granatum extract comprising materials obtained (i.e., extracted) from fruit of Punica granatum.

[0094] More preferably, the Punica granatum extract is a Punica granatum fruit extract.

[0095] As an example of commercial products of Punica granatum fruit extract, mention can be made to the one supplied by the company ALBAN MULLER as AMIPORINE ER.

[0096] Advantageously, the extract of Punica granatum is present in the composition of the present invention in an amount ranging from 0.001 wt. %to 10 wt. %, preferably from 0.002 wt. %to 8 wt. %, more preferably from 0.003 wt. %to 5 wt. %, even more preferably from 0.004 wt. %to 3 wt. %, most preferably from 0.005 wt. %to 1 wt. %, relative to the total weight of the composition.

[0097] Extracts of Gentiana lutea

[0098] According to the first aspect, the composition of the present invention comprises at least one extract of Gentiana lutea.

[0099] Preferably, the extract of Gentiana lutea is obtained from roots, leaves, and / or stalks of Gentiana lutea.

[0100] For the purposes of the present invention, the extract of Gentiana lutea is manufactured by an extraction of parts, in particular roots, leaves, and / or stalks of Gentiana lutea by means of organic solvents, in particular polar solvents, preferably alcohols, in a particularly preferred manner ethanol, in particular mixtures of ethanol with water, preferably 50% (vol. ) ethanol; or by means of super-critical CO2, wherein the extract is obtained within a temperature range from 31℃ to 90℃ and a pressure range from 75 to 500 bar, and separation takes place within a temperature range from 10℃ to 50 ℃ and a pressure range from 1 bar to 74 bar.

[0101] Preferably, the composition of the present invention comprises Gentiana lutea root extract.

[0102] As an example of commercial products of Gentiana lutea root extract, mention can be made to the one supplied by the company GREENTECH as ORGANIC MYRALYS.

[0103] Advantageously, the extract of Gentiana lutea is present in the composition of the present invention in an amount ranging from 0.001 wt. %to 10 wt. %, preferably from 0.002 wt. %to 8 wt. %, more preferably from 0.003 wt. %to 5 wt. %, even more preferably from 0.004 wt. %to 3 wt. %, most preferably from 0.005 wt. %to 1 wt. %, relative to the total weight of the composition.

[0104] The inventors have found that with the combination of at least one C-glycoside, at least one extract of Punica granatum and at least one extract of Gentiana lutea, a synergetic effect on repairing and anti-aging of keratin materials, such as the skin, was obtained.

[0105] Advantageously, the weight ratio of the C-glycoside: the extract of Punica granatum: the extract of Gentiana lutea is 100: 0.001-10: 0.001-10, preferably 100: 0.01-2: 0.01-2, more preferably 100: 0.05-0.5: 0.05-0.5.

[0106] Aqueous phase

[0107] The composition of the present invention may comprise an aqueous phase.

[0108] Preferably, the aqueous phase comprises water.

[0109] Advantageously, water is present in the composition of the present invention in an amount ranging from 40 wt. %to 99 wt. %, preferably from 45 wt. %to 97 wt. %, more preferably from 50 wt. %to 95 wt. %, relative to the total weight of the composition.

[0110] Optionally, the aqueous phase comprises an organic solvent miscible with water (at room temperature 25℃) selected from monoalcohols, glycols and polyols having from 2 to  20 carbon atoms, such as octyldodecanol, glycerin, propylene glycol, butylene glycol, pentylene glycol, hexylene glycol, caprylyl glycol, dipropylene glycol, diethylene glycol; and mixtures thereof.

[0111] Advantageously, the aqueous phase is present in the composition of the present invention in an amount ranging from 50 wt. %to 99 wt. %, preferably from 55 wt. %to 97 wt. %, more preferably from 60 wt. %to 95 wt. %, relative to the total weight of the composition.

[0112] Additional cosmetic active ingredients

[0113] The composition of the present invention may comprise an additional cosmetic active ingredient in addition to the cosmetic active ingredients as defined previously.

[0114] The skilled in the art can adjust the type and their amount of the additional cosmetic active ingredients based on the final use of the composition according to the present invention.

[0115] Additional adjuvants or additives

[0116] The composition of the present invention may comprise may also contain conventional cosmetic adjuvants or additives, for instance fragrances, chelating agents, preserving agents and bactericides, surfactants, thickeners, pH regulators, and mixtures thereof.

[0117] The skilled in the art can select the amount of the additional adjuvants or additive so as not to adversely impact the final use of the composition according to the present invention.

[0118] According to a particularly preferred embodiment, the present invention provides a composition comprising, relative to the total weight of the composition:

[0119] a) from 1 wt. %to 20 wt. %of hydroxypropyl tetrahydropyrantriol;

[0120] b) from 0.004 wt. %to 3 wt. %of Punica granatum fruit extract; and

[0121] c) from 0.004 wt. %to 3 wt. %of Gentiana lutea root extract.

[0122] According to more preferred embodiment, the present invention provides a composition comprising, relative to the total weight of the composition:

[0123] a) from 2 wt. %to 15 wt. %of hydroxypropyl tetrahydropyrantriol;

[0124] b) from 0.005 wt. %to 1 wt. %of Punica granatum fruit extract; and

[0125] c) from 0.005 wt. %to 1 wt. %of Gentiana lutea root extract.

[0126] Galenic form and method

[0127] The composition of the present invention can be in the form of an emulsion (O / W or W / O) , or other liquid formats, for example, toners, serums, lotions, creams, masks, sprays.

[0128] The composition of the present invention can be used for caring for keratin materials, such as the skin. In particular, the composition of the present invention can bring benefits to the skin, for example repair the skin and / or deliver anti-aging effect to the skin.

[0129] According to the second aspect, the present invention provides a non-therapeutic method for caring for keratin materials, comprising applying the composition according to the first aspect of the present invention to the keratin materials.

[0130] EXAMPLES

[0131] The examples that follow are given as non-limiting illustrations of the present invention.

[0132] Main raw materials used, trade names and suppliers thereofare listed in Table 1.

[0133] Table 1

[0134] Invention Example 1 and Comparative Examples 1-2

[0135] Compositions of invention example (IE) 1 and comparative examples (CE) 1-2 were prepared based on the amounts of components given in Table 2. The amounts are given by weight percentage of each component relative to the total weight of the composition, wherein AM stands for active material.

[0136] Table 2

[0137] Composition of invention example 1 represents composition according to the present invention.

[0138] Composition of comparative example 1 does not comprise at least one extract of Gentiana lutea.

[0139] Composition of comparative example 2 does not comprise at least one C-glycoside andat least one extract of Punica granatum.

[0140] Preparation process:

[0141] The compositions listed above were prepared as follows: adding hydroxypropyl tetrahydropyrantriol, Punica granatum fruit extract and Gentiana lutea root extract according to corresponding amounts in Table 2 slowing into water with stirring under room temperature to obtain a homogeneous mixture.

[0142] Evaluation

[0143] The repairing effect delivered by the composition prepared above was evaluated by means of Proteome study as follows.

[0144] 1. Cell inoculation

[0145] Logarithmic growth phase fibroblast cells were collected, the cells were inoculated into a 24 well plate at 3.2 x 104 per well, and incubated overnight in a CO2 incubator (37 ℃, 5%CO2) .

[0146] 2. Medication administration

[0147] Each composition prepared above was diluted 96 times with water. When the cell plating rate in the 24 well plate reaches 40%-60%, administration was carried out in groups. A blank control group was added with 2mL of low sugar DMEM culture medium containing 2%serum per well, and each sample group was added with 2mL of sample working medium per well. After administration, the 24-well plate was placed in a CO2 incubator (37 ℃, 5%CO2) and incubated for 24 hours. After incubation, 1ml of PBS was added to each well for 3 washes, each lasting for 3 minutes. After washing, digestion with 0.25%trypsin digestion solution was carried out in the incubator for 3 minutes, then 1ml of low sugar DMEM culture medium was added to each well. The cell suspension was collected in a 10 ml centrifuge tube, centrifuged, the supernatant was discarded, and protein extraction was carried out.

[0148] 3. Protein extraction

[0149] 1) an appropriate amount of 1XCocktail (protease inhibitor) without SDS protein lysate and with a 0.2 M EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) were added;

[0150] 2) Crushing and lysing were carried out using an ultrasonic instrument, then centrifuging was carried out at 25000g *4 ℃ for 15 minutes, and the supernatant was collected;

[0151] 3) DTT (dithiothreitol) with a final concentration of 10 mM was added into the supernatant under a water bath at 37 ℃ for 30 minutes;

[0152] 4) IAM (iodoacetamide) with a final concentration of 55 mM was added into the supernatant and then placed in a dark room for 45 minutes;

[0153] 5) 5 times volume of pre-cooled acetone was added into the supernatant, refrigerated overnight at -20 ℃, centrifuged at 25000g *4 ℃ for 15 minutes, and the supernatant was discarded;

[0154] 6) Air drying and precipitating were carried out, SDS free protein lysate was added, and an automated grinder was used to promote protein dissolution;

[0155] 7) Centrifuging was carried out at 25000g at 4 ℃ for 15 minutes to obtain the supernatant, which is a protein solution.

[0156] 4. Quality control and proteomics testing

[0157] Quality Control:

[0158] (1) SDS-PAGE

[0159] 10μg of protein solution from each sample was taken out and mixed with a loading buffer, then heated at 95℃ for 5 minutes, centrifuged at 25,000g for 5 minutes, the supernatant was taken out and loaded into the wells of a 12%SDS-polyacrylamide gel. Electrophoresis was performed at a constant voltage of 80V for 30 minutes, followed by 120V for 120 minutes. After electrophoresis, the gel was placed in a rapid staining apparatus for 10 minutes, then taken out and the gel image was scanned.

[0160] (2) Bradford Quantitative Assay

[0161] In a 96-well microplate, standard protein (0.2μg / μL BSA) was added in the following volumes to wells A1 to A10: 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18μL. Then pure water was added in the following volumes to each well: 20, 18, 16, 14, 12, 10, 8, 6, 4, 2μL. Subsequently, 180μL of Coomassie Brilliant Blue G-250 quantitative working solution was added to each well. The OD595 was measured using a microplate reader, and a linear standard curve was prepared based on OD595 and protein concentration. The protein solution to be tested was diluted by several folds, 180μL of the quantitative working solution was added to 20μL of the protein solution, and the OD595 was read. The protein concentration of the sample was calculated based on the standard curve and the sample OD595.

[0162] Proteomics Testing:

[0163] (1) Protein Digestion

[0164] Trypsin was used to digest the protein sample, and then the resulting peptides were desalted using Strata X columns, followed by vacuum drying.

[0165] (2) High pH RP Separation

[0166] Equal amounts of peptides from all samples were mixed and diluted with mobile phase A (5%ACN (Acetonitrile) , pH9.8) , and liquid phase separation was performed on the samples using a Shimadzu LC-20AD liquid chromatography system under the following conditions: gradient elution with 1mL / mol, 5%mobile phase B (95%ACN, pH9.8) for 10 min, 5%-35 mobile phase B for 40 min, 35%-95 mobile phase B for 1 min, mobile phase B for 3 min and 5%mobile phase B for 10 min. The elution peaks at a wavelength of 214 nm were monitored and one fraction was collected per minute.  Fractions were combined based on the chromatographic elution peak map to obtain ten fractions, and then freeze dried.

[0167] (3) DDA Library Construction and DIA Quantitative Detection (Nano-LC-MS / MS)

[0168] After the dried peptide samples were redissolved and centrifuged to take the supernatant, they were separated using a Thermo Scientific Ultimate 3000 UHPLC. The liquid chromatography was connected directly to the mass spectrometer to detect as follows:

[0169] DDA Library Construction and Detection

[0170] Peptides separated by the liquid chromatography were ionized through a nanoESI source and then entered a tandem mass spectrometer Orbitrap Exploris 480 (Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA) for DDA (Data Dependent Acquisition) mode detection.

[0171] DIA Quantitative Detection

[0172] Peptides separated by the liquid chromatography were ionized through a nanoESI source and then entered the tandem mass spectrometer Orbitrap Exploris 480 (Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA) for DIA (Data Independent Acquisition) mode detection.

[0173] Based on the proteome study as described above, the enhancement rates of PLPP1 (abiomarker which regulates lipid metabolism) of the compositions of invention example 1 and comparative examples 1-2 were obtained and listed in Table 3.

[0174] Table 3

[0175] (P-value<0.05: significant)

[0176] It can be concluded from Table 3 that the composition of the present invention can be used for potential repairing of the skin.

Claims

1.A composition, preferably for caring for keratin materials, comprising:a) at least one C-glycoside,b) at least one extract of Punica granatum, andc) at least one extract of Gentiana lutea.2.Composition according to claim 1, wherein the C-glycoside is chosen from compounds of formula (I) : in which:- R represents a saturated C1 to C10, in particular C1 to C4, alkyl radical which can optionally be substituted by at least one radical chosen from OH, COOH or COOR”2, with R”2 being a saturated C1-C4 alkyl radical,- S represents a monosaccharide or a polysaccharide comprising up to 20 sugar units, in particular up to 6 sugar units, in pyranose and / or furanose form and of the L and / or D series, it being possible for the said monosaccharide or polysaccharide to be substituted by a hydroxyl group which is necessarily free and optionally one or more optionally protected amine functional group (s) , and- X represents a radical chosen from the–CO-, -CH (OH) -, -CH (NH2) -, -CH (NHCH2CH2CH2OH) -, -CH (NHPh) -and–CH (CH3) -groups and in particular a–CO-, -CH (OH) -or–CH (NH2) -radical and more particularly a–CH (OH) -radical,the S-CH2-X bond represents a bond of C-anomeric nature, which can be α or β,and also their physiologically acceptable salts, their solvates, such as the hydrates, and their optical and geometrical isomers.3.The composition according to claim 1 or 2, wherein the C-glycoside is chosen from- C-β-D-xylopyranoside-n-propane-2-one,- C-α-D-xylopyranoside-n-propan-2-one,- C-β-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane,- C-α-D-xylopyranoside-2-hydroxypropane,- 1- (C-β-D-fucopyranoside) propan-2-one,- 1- (C-α-D-fucopyranoside) propan-2-one,- 1- (C-β-L-fucopyranoside) propan-2-one,- 1- (C-α-L-fucopyranoside) propan-2-one,- 1- (C-β-D-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,- 1- (C-α-D-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,- 1- (C-β-L-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,- 1- (C-α-L-fucopyranoside) -2-hydroxypropane,- 1- (C-β-D-glucopyranosyl) -2-hydroxypropane,- 1- (C-α-D-glucopyranosyl) -2-hydroxypropane,- 1- (C-β-D-galactopyranosyl) -2-hydroxypropane,- 1- (C-α-D-galactopyranosyl) -2-hydroxypropane,- 1- (C-β-D-fucofuranosyl) propan-2-one,- 1- (C-α-D-fucofuranosyl) propan-2-one,- 1- (C-β-L-fucofuranosyl) propan-2-one,- 1- (C-α-L-fucofuranosyl) propan-2-one,- C-β-D-maltopyranoside-n-propane-2-one,- C-α-D-maltopyranoside-n-propan-2-one,- C-β-D-maltopyranoside-2-hydroxypropane,- C-α-D-maltopyranoside-2-hydroxypropane,their isomers and their mixtures.4.The composition according to any of claims 1 to 3, wherein the C-glycoside is present in an amount ranging from 0.01 wt. %to 40%, preferably from 0.1 wt. %to 30 wt. %, more preferably from 1 wt. %to 20 wt. %, even more preferably from 2 wt. %to 15 wt. %, relative to the total weight of the composition.5.The composition of any of claims 1 to 4, wherein the extract of Punica granatum comprises materials extracted from one or more parts of a Punica granatum plant, including the root, stem, bark, rhizome, leaf, bud, flower, seed, and / or fruit thereof.6.The composition of claim 5, wherein the composition comprises a Punica granatum fruit extract.7.The composition of any of claims 1 to 6, wherein the extract of Punica granatum is present in an amount ranging from 0.001 wt. %to 10 wt. %, preferably from 0.002 wt. %to 8 wt. %, more preferably from 0.003 wt. %to 5 wt. %, even more preferably from 0.004 wt. %to 3 wt. %, most preferably from 0.005 wt. %to 1 wt. %, relative to the total weight of the composition.8.The composition according to any of claims 1 to 7, wherein the extract of Gentiana lutea is obtained from roots, leaves, and / or stalks of Gentiana lutea, preferably the composition comprises Gentiana lutea root extract.9.The composition according to any of claims 1 to 8, wherein the extract of Gentiana lutea is present in an amount ranging from 0.001 wt. %to 10 wt. %, preferably from 0.002 wt. %to 8 wt. %, more preferably from 0.003 wt. %to 5 wt. %, even more preferably from 0.004 wt. %to 3 wt. %, most preferably from 0.005 wt. %to 1 wt. %, relative to the total weight of the composition.10.The composition according to claim 1, comprising, relative to the total weight of the composition:a) from 2 wt. %to 15 wt. %of hydroxypropyl tetrahydropyrantriol;b) from 0.005 wt. %to 1 wt. %of Punica granatum fruit extract; andc) from 0.005 wt. %to 1 wt. %of Gentiana lutea root extract.11.The composition according to any one of claims 1 to 10, further comprising water, preferably in an amount ranging from 40 wt. %to 99 wt. %, preferably from 45 wt. %to 97 wt. %, more preferably from 50 wt. %to 95 wt. %, relative to the total weight of the composition.12.The composition according to any of claims 1 to 11, wherein the weight ratio of the C-glycoside: the extract of Punica granatum: the extract of Gentiana lutea is 100: 0.001-10: 0.001-10, preferably 100: 0.01-2: 0.01-2, more preferably 100: 0.05-0.5: 0.05-0.5.13.A non-therapeutic method for caring for keratin materials, comprising applying the composition according to any of claims 1 to 12 to the keratin materials.

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